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La Tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa que constituye uno de los mayores problemas sanitarios a nivel mundial. Millones de personas contraen la enfermedad, tanto que a partir de 2015 se localizó dentro de las diez causas de muerte más probables en el mundo y la primera causa de muerte por un agente infeccioso, incluso superando el HIV. El agente causal es el bacilo Mycobacterium tuberculosis que se dispersa por vía área. El ritmo desenfrenado de crecimiento de las resistencias a los antibióticos que se emplean en el tratamiento de la enfermedad acentúa la necesidad de nuevas drogas con mecanismos de acción diferentes a los ya existentes y para esto es necesario aumentar los esfuerzos en el área de descubrimiento. Uno de los objetivos fundamentales de esta tesis fue desarrollar una metodología de evaluación de actividad de drogas in vitro novedosa, rápida y sensible que pueda aportar nuevas alternativas para el tratamiento de la TB multirresistente. Los fluoromicobacteriófagos, micobacteriófagos que acarrean genes reporteros fluorescentes en su genoma, se han vuelto una herramienta fundamental para revelar el estado metabólico de las micobacterias y, en consecuencia, su respuesta a antibióticos. Como parte de este trabajo, se han optimizado las condiciones de detección y evaluación de la actividad extracelular de drogas contra M. tuberculosis en un formato automatizado de 96 pocillos utilizando fluorimetría para la lectura de la señal luego de la infección con el fago mCherrybombɸ. Se observó un descenso en la señal fluorescente en el tiempo a medida que aumentaba la concentración de las drogas con diferentes mecanismos de acción en M.tuberculosis y pudieron determinarse exitosamente concentraciones mínimas inhibitorias (CIM) en un tiempo corto (15-32 horas).Para validar la metodología como ensayo de screening de célula entera y alto rendimiento, se evaluó la miniaturización a un formato de 384 pocillos y la respuesta ante un set de compuestos antimicobacteriales de la compañía GlaxoSmithKline (n=204), comparando los resultados obtenidos en M.tuberculosis H37Rv y M. bovis BCG. A pesar que los resultados preliminares fueron prometedores, el ensayo final en este formato presentó alta variabilidad y una relación señal fluorescente:background (S:B) desfavorable, otorgando parámetros de robustez bajos (Z?