Search

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Ciencia y Tecnología de la Salud de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado, Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 14-07-2022. El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia hematológica muy común, caracterizada por la proliferación excesiva de células plasmáticas diferenciadas a partir de linfocitos B en el interior de la médula ósea. Esta enfermedad presenta diferentes etapas en las que evoluciona desde periodos tempranos asintomáticos hasta la manifestación de síntomas clínicos típicos del MM. A pesar de que actualmente existen diversos tratamientos para el MM, es frecuente la aparición de recaídas, siendo la tasa relativa de supervivencia a 5 años es del 50%. Esto implica que, a pesar de los avances científicos de los últimos años, la enfermedad sigue considerándose incurable, por lo que es necesario conocer con mayor profundidad los mecanismos celulares que intervienen tanto en el desarrollo de la enfermedad como en la aparición de resistencias al tratamiento. El objetivo de este trabajo es estudiar el papel de Rnd3 en el MM. Rnd3 es una proteína Rho atípica incluida dentro de la subfamilia Rnd. Las proteínas Rho están clásicamente implicadas en la reorganización del citoesqueleto de actina y han sido ampliamente relacionadas con procesos de transformación celular, destacando su implicación en la proliferación y la migración de las células tumorales. En el caso concreto de Rnd3 también existen evidencias que la relacionan con la progresión tumoral, aunque su función oncogénica u oncosupresora es dependiente del tipo celular y tumoral. Datos previos indican un incremento de la expresión de RND3 en muestras de MM procedentes de modelos murinos que mimetizan la enfermedad humana, así como también en células plasmáticas procedentes de pacientes con MM respecto a células plasmáticas sanas. Para profundizar en el papel de Rnd3 en el MM hemos generado dos líneas celulares de MM (RPMI 8226 y JJN3) deficientes en Rnd3, y hemos analizado su efecto en los procesos de proliferación, adhesión celular y sensibilidad a fármacos. Por otro lado, hemos realizado un estudio transcriptómico para determinar el papel de Rnd3 en la regulación de la expresión de genes implicados en MM. Como resultado destaca la expresión diferencial del gen que codifica para una quimiocina, CXCL10, que se encuentra implicada en la migración de las células del sistema inmuntario y que recientemente se ha relacionado con fenómenos de inmunoterapia e inmunovigilancia en diferentes tumores. Finalmente, hemos validado estos resultados en células deficientes en Rnd3 observando un incremento en la expresión de esta quimiocina, tanto a nivel de mRNA como de expresión proteica. Así pues, estos resultados indican un papel inhibidor de Rnd3 sobre la expresión de CXCL10. Sin embargo, esto no tiene un efecto sobre las propias células tumorales, sugiriendo un papel paracrino de CXCL10 sobre el microambiente tumoral y sobre el sistema inmunitario. En conjunto, este trabajo sugiriere un nuevo papel de Rnd3 en la regulación de la expresión de CXCL10 y su posible papel en la patología del MM.

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Medicina Traslacional de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado, Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 02-09-2021.

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Medicina Traslacional de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado, Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), leída el 31-03-2020.

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Tecnología y Ciencias de la Salud de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 26-06-2020. Autofagia es el proceso por el cual se media el direccionamiento de material citoplasmático (proteínas y orgánulos) hacia los lisosomas para su posterior degradación. Su correcto funcionamiento es clave para mantener la homeostasis celular y controlar los niveles y la calidad de los constituyentes intracelulares, contribuyendo a la obtención de energía y permitiendo la adaptación de la célula a condiciones de estrés. Se ha descrito que un mal funcionamiento en el proceso de autofagia está relacionado con numerosas enfermedades neurodegenerativas (Parkinson, Alzhéimer o esclerosis lateral amiotrófica), siendo una característica común la presencia de agregados proteicos u orgánulos disfuncionales, que, en parte, acaban explicando la aparición de los distintos síntomas clínicos. Las proteínas Rho, implicadas en la regulación de la dinámica del citoesqueleto de actina, juegan un papel clave en el desarrollo y función del sistema nervioso central. Rnd3/RhoE es un miembro de la subfamilia Rnd y se caracteriza por estar constitutivamente activada. Su función en migración, proliferación y supervivencia celular ha sido ampliamente estudiada. Rnd3 es necesario para el correcto desarrollo y funcionamiento del SNC. En nuestro grupo, la utilización de un modelo de ratón genéticamente modificado (Rnd3gt/gt) ha demostrado que la ausencia de esta proteína produce graves alteraciones motoras y de desarrollo neural, destacando la presencia de agregados proteicos y mitocondrias morfológicamente aberrantes en neuronas, un fenotipo compatible con problemas en el proceso de autofagia, tal y como se ha descrito en algunas patologías neurodegenerativas. En este estudio nos planteamos analizar el posible papel de Rnd3 en autofagia, con el objetivo de poder entender alguno de los fenotipos que aparecen en el modelo murino deficiente en esta proteína. Nuestros resultados demuestran que la ausencia de Rnd3 aumenta la tasa de degradación proteica y provoca un aumento en autofagia en condiciones basales, sugiriendo que Rnd3 es un regulador negativo de este proceso, actuando a nivel de la maduración del autofagosoma. Además, hemos demostrado un nuevo papel de Rnd3 en la homeostasis mitocondrial. La presencia de mitocondrias no funcionales en células deficientes para Rnd3 provoca una alteración del metabolismo oxidativo y una activación de la glucólisis como mecanismo alternativo para la obtención de energía. Todos estos resultados muestran un nuevo papel de Rnd3 en la regulación de autofagia, así como en la homeostasis mitocondrial, lo que podría explicar algunos de los fenotipos observados en el modelo de ratón deficiente para Rnd3. / Autophagy is the cellular process by which lysosomes contribute to the degradation of intracellular components, including proteins and organelles. The correct function of this catabolic process is necessary for cell homeostasis and controls the levels and quality of intracellular constituents, not only contributing to obtaining energy but also allowing cells to adapt to stress conditions. It has been described that an alteration in the autophagy process is related to numerous neurodegenerative diseases (Parkinson's, Alzheimer's or amyotrophic lateral sclerosis). Moreover, autophagy malfunction leads to protein aggregates and dysfunctional organelles accumulation that can explain some of the clinical symptoms. Rho proteins are involved in the regulation of the actin cytoskeleton dynamics and also have been postulated to play a key role in the development and function of the Central Nervous System. Rnd3/RhoE is a member of the Rnd subfamily, being constitutively activated. Its role in cell migration, proliferation and survival has been extensively studied. Rnd3 is necessary for the correct development and function of the CNS. In our group, the use of a genetically modified mouse model (Rnd3gt/gt) revealed that the lack of this protein produces serious motor and neural development alterations. Moreover, Rnd3 deficient neurons show protein aggregates and aberrant mitochondria, a phenotype compatible with problems in autophagy, as also described in some neurodegenerative pathologies. In this study we sought to analyze the possible role of Rnd3 in autophagy, in order to understand some of the phenotypes that appear in the Rnd3 deficient murine model. Our results demonstrate that the absence of Rnd3 promotes higher protein degradation rates and increased levels of autophagy even in basal conditions, suggesting that Rnd3 negatively regulates this process, at the level of the autophagosome maturation. In addition, we have demonstrated a new role of Rnd3 in mitochondrial homeostasis. The presence of nonfunctional mitochondria in Rnd3-deficient cells causes an alteration in the oxidative metabolism and an activation of glycolysis as an alternative mechanism to obtain energy. Altogether, these results highlight a new role of Rnd3 in the regulation of autophagy and mitochondrial homeostasis, which could explain some of the phenotypes observed in the Rnd3gt/gt mouse model.

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Tecnología y Ciencias de la Salud de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 21-07-2020. Degenerative diseases and among them those that affect the visual system, represent a huge problem for the society. This problem becomes even more important with the aging of the population. The proposed project aims to improve the quality of life of the patients by knowing the pathophysiological basis of two diseases that affect the vision: retinitis pigmentosa and myopia. The visual loss is an indisputable decrease in the quality of life and the consequences are not only restricted on a personal level, but also on a social and economic level. For all these reasons, new treatments in this diseases are urgently and precisely needed and the knowledge of the mechanisms underlying. Retinitis pigmentosa (RP) is a frequent form of retinal degeneration that is the main genetic cause of blindness in developed countries. Genetic mutations are responsible for the death of the rods. However, the death of the cones seems to occur due to the metabolic changes caused by the degeneration of the rods such as hyperoxia (oxidative stress), the secretion of various factors (cytokines, chemokines) by sticks, and so on. The death of the cones causes the loss of the central vision in RP. For this, firstly, the antioxidant response was analyzed and also the presence of oxidative stress markers in the retina of the mice with RP that could be involved in the progression or in the delay of the disease. Secondly, the expression of the glia and various growth factors were analyzed by immunohistochemistry and western blot. Finally, thioredoxin (TRX), a potent antioxidant with anti-inflammatory power, was intraperitoneally administered. We evaluated the effect of TRX on the progression of retinal degeneration in the RP model, the rd1 mouse. The results obtained in this study show that the mice with RP have a deficient antioxidant response in the retina. The mice with the treatment showed better antioxidant response, with high levels of GSH, suggesting a role of oxidative stress in the progression of the disease. Otherwise, no modification of the expression of VEGF and a tendency to increase in HGF levels was observed in the retina, with and without treatment. In the retina of these mice, a reduction in some parameters of glial activation is observed. In rd1 mice, treatment with thioredoxin, antioxidant, antiinflammatory and antiapoptotic, reduces the reactive gliosis to postnatal day 11 and 17. In short, these results confirm the hypothesis that alterations of the antioxidant system and inflammatory processes in RP are involved in the pathogenesis of the disease. Treatments of endogenous antioxidants such as TRX can be useful for the search of therapeutic targets that prevent or delay the death of photoreceptors. Our results suggest that in RP, oxidative stress, active gliosis and apoptosis, among others, play an important role in the death of retinal cells. The design of strategies that promote their blockade can be promising therapies in PR. Otherwise, myopia is an optical problem of defocusing which is due to a mismatch between the axial length of the eyeball and the lenses that comprise it. Myopia is also a medical problem that predisposes people who bear it, to suffer more frequently other ocular pathologies: retinal detachments, glaucoma, cataracts among others. There are basically two types of myopia with a very different prognosis, although the limits between both are not clearly defined. The parameter that most correlates with them is the axial length, being recognized as more appropriate to fix in 26mm the limit between both. Above these values we speak of high myopia (AM). This type of myopia is characterized by a progressive elongation of the eyeball uninterrupted during life. It is accompanied by progressive atrophy of ocular tissues and leads to blindness over the years in a large percentage of the affected population. The genetic has linked several growth factors with AM. For it, some growth factors, VEGF and HGF, were determined in patient eye samples. Thus, these factors can be related to their clinic and structural changes in the retina of these patients. The knowledge of the biochemical and molecular aspects that accompany these clinical stages will allow us to understand in depth the process and be able to find points of therapeutic approach. The results obtained in this study show that patients with AM have a poor antioxidant response in the aqueous humor. Patients with high myopia had higher levels of HGF as the degree of retinal degeneration increased, quite the opposite of what happened with VEGF, a growth factor that significantly decreases in patients with high myopia. / Las enfermedades degenerativas, y entre ellas las que afectan al sistema visual, representan un enorme problema para la sociedad, problema que será aún más importante con el envejecimiento de la población. El proyecto propuesto pretende mejorar la calidad de vida de los pacientes conociendo las bases fisiopatológicas de dos enfermedades que afectan a la visión: la Retinosis Pigmentaria (RP) y la miopía. La pérdida visual constituye una indiscutible disminución de la calidad de vida y las consecuencias no están sólo restringidas a nivel personal sino también a nivel social y económico. Por todo ello, son necesarios nuevos tratamientos en este tipo de enfermedades de forma urgente y precisa, y el conocimiento de los mecanismos subyacentes a estas enfermedades nos ayudará a encontrar estos tratamientos. La RP es una forma frecuente de degeneración retiniana que constituye la principal causa genética de ceguera en los países desarrollados. Las mutaciones genéticas son las responsables de la muerte de los bastones, los fotorreceptores situados mayoritariamente en la zona de la periferia. Sin embargo, la muerte de los conos parece que se produce debida a los cambios metabólicos que provoca la degeneración de los bastones como la hiperoxia (estrés oxidativo), la secreción de diversos factores (citoquinas, quimioquinas) por parte de los bastones, etc. La muerte de los conos provoca la pérdida de la visión central en RP. Para ello, en primer lugar, se analizó la respuesta antioxidante, la presencia de marcadores de estrés oxidativo en retina de ratones con RP que pudiesen estar implicados en la progresión o en el retraso de la enfermedad. En segundo lugar, se analizó la expresión de la glía y de diversos factores de crecimiento mediante inmunohistoquímica y western blot. Por último, se administró intraperitonealmente tiorredoxina (TRX), un potente antioxidante con poder antiinflamatorio. Se evaluó́ el efecto de la TRX sobre la progresión de la degeneración retiniana en un modelo de RP, el ratón rd1. Los resultados obtenidos en este estudio muestran que los ratones con RP presentan una deficiente respuesta antioxidante en la retina. Los ratones con el tratamiento mostraban mejor respuesta antioxidante, con niveles elevados de GSH, sugiriendo un papel del estrés oxidativo en la progresión de la enfermedad. Por otro lado, no se observó ninguna modificación de la expresión de VEGF y se observó una tendencia al aumento en los niveles de HGF en la retina de los ratones rd1, con y sin tratamiento. Con el tratamiento de TRX, en la retina de estos ratones se observa una reducción en algunos parámetros de la activación glial. En el ratón rd1, el tratamiento con TRX, reduce la gliosis reactiva a día postnatal 11 y 17. En definitiva, estos resultados confirman la hipótesis de que alteraciones del sistema antioxidante y los procesos inflamatorios en la RP están implicados en la patogénesis de la enfermedad. Tratamientos de antioxidantes endógenos como la TRX pueden ser útiles para la búsqueda de nuevas dianas terapéuticas que retrasen la muerte de los fotorreceptores. Nuestros resultados sugieren que en la RP el estrés oxidativo, la gliosis activa y la muerte celular entre otros, desempeñan un papel importante en la muerte de los fotorreceptores. Por otra parte, la miopía es un problema óptico de desenfoque que se debe a un desajuste entre la Longitud Axial (LA) del globo ocular y las lentes que lo componen. También es un problema médico que predispone a las personas que la padecen a sufrir con mayor frecuencia otras patologías oculares, tales como desprendimientos de retina, glaucoma y cataratas entre otras. Existen fundamentalmente dos tipos de miopía con pronóstico bien distinto, aunque los límites entre ambas no están netamente definidos. El parámetro que más se correlaciona con ellos es la LA, reconociéndose como más adecuado fijar en 26mm el límite entre ambas. Por encima de estos valores hablamos de Alta Miopía (AM). Este tipo de miopía se caracteriza por un alargamiento progresivo del globo ocular ininterrumpido durante la vida. Se acompaña de atrofia progresiva de los tejidos oculares y lleva a la ceguera con los años en un gran porcentaje de la población afectada. La genética ha relacionado varios factores de crecimiento con la AM. Por eso, se determinaron algunos factores de crecimiento, el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y el factor de crecimiento de hepatocitos (HGF), en muestras de humor acuoso de los pacientes. Así, se pueden relacionar estos factores con su clínica y los cambios estructurales que suceden en la retina de estos pacientes. El conocimiento de los aspectos bioquímicos y moleculares que acompañan estos estadios clínicos nos permitirá entender en profundidad el proceso de la enfermedad y poder encontrar puntos de abordaje terapéutico. Los resultados obtenidos en este estudio muestran que los pacientes con AM presentan una deficiente respuesta antioxidante en el humor acuoso. Los pacientes con alta miopía presentaban unos niveles mayores de HGF a medida que aumentaba el grado de degeneración de la retina, todo lo contrario que sucedía con el VEGF, factor de crecimiento que disminuye significativamente en los pacientes con alta miopía.

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Medicina Traslacional de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 24-05-2019.

Esta tesis doctoral pertenece al Programa en Ciencia y Tecnología de la Salud de CEINDO - CEU Escuela Internacional de Doctorado. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 18-01-2019.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 15-06-2017.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 22-05-2017.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 26-06-2017.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 07-07-2017. Las verrugas son lesiones dérmicas que presentan diferentes manifestaciones clínicas en dependencia de: la localización afecta, la morfología, la incidencia y el genotipo del virus del VPH. Este trabajo tiene como núcleo principal, conocer la evolución de los tratamientos utilizados para las verrugas plantares en la Clínica Podológica Universitaria de la Universitat de València, además de conocer el perfil de los pacientes afectados. Para el tratamiento de las verrugas plantares existe un gran abanico terapéutico que contrarresta con la falta de evidencia científica de la aplicación y efectividad de estos frente a la lesión. El presente trabajo se ha llevado a cabo en dos fases. La primera fase es un estudio piloto, en donde se ha realizado un estudio retrospectivo de 1 año de duración que nos ha permitido determinar la muestra necesaria para realizar la segunda fase y de este modo obtener resultados significativos. La segunda fase es un estudio retrospectivo de casos control con una muestra de 72 lesiones que han sido tratadas mediante tratamiento conservador o mediante exéresis quirúrgica. El estudio aporta datos significativos a la comunidad científica ya que los resultados nos permiten extraer conclusiones certeras al tener una potencia de estudio superior al 85%.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 09-06-2017. Los tumores de mama representan uno de los tumores más frecuentes en perros y gatos, no existiendo un tratamiento médico de elección en su presentación macroscópica o como terapia adyuvante tras la intervención quirúrgica. Por otro lado, y debido a las similitudes tanto clínicas como genéticas de estos tumores con los tumores mamarios en humanos, los hacen un modelo único de oncología comparada, permitiendo el desarrollo de nuevas estrategias antitumorales que permitan mejorar su tratamiento. En este trabajo se han realizado dos estudios prospectivos con fosfato de toceranib (Palladia®) como monoterapia en gatas con tumores mamarios o en combinación con carprofeno, en perras con carcinoma inflamatorio (CIC). Los objetivos planteados incluyeron evaluar la eficacia antitumoral y tolerabilidad de los tratamientos en ambas especies. En el caso de las perras con CIC, también se incluyó como objetivo la evaluación de la calidad de vida. El protocolo de fosfato de toceranib en gatas o en combinación con carprofeno en perras con carcinoma inflamatorio fue muy bien tolerado y los efectos adversos fueron generalmente leves resolviéndose con tratamiento de soporte. La administración de fosfato de toceranib en tumores mamarios felinos demostró eficacia biológica, con una tasa de respuesta del 35.2% siguiendo criterios RECIST y un beneficio clínico en el 64% de los casos. Los resultados del tratamiento en el caso de los tumores mamarios felinos son comparables con los descritos tras la utilización de quimioterapia tradicional y sugieren que este fármaco podría ser eficaz en enfermedad residual mínima después de un tratamiento quirúrgico, algo que se debería evaluar en estudios prospectivos. El tratamiento con fosfato de toceranib y carprofeno en perras con CIC no mostró eficacia biológica siguiendo criterios RECIST. No obstante, un 64% de los pacientes presentaron beneficio clínico a los dos meses de iniciar el protocolo entendiéndose como una mejoría en la calidad de vida y la no progresión de la enfermedad. La alta tasa de enfermedades estables comparado con otros estudios y la mejoría de la calidad de vida de las perras, convierte esta combinación en otra posibilidad terapéutica a considerar. Finalmente, en este estudio se evaluó de manera subjetiva y a través de un cuestionario dirigido a los propietarios los cambios en la calidad de vida del paciente a lo largo del tratamiento con fosfato de toceranib. Algunas de las categorías del cuestionario de calidad de vida donde los dueños en al menos una de las preguntas percibieron mejoría y que fueron estadísticamente significativas incluyeron: felicidad, estado mental, apetito y movilidad general. Este trabajo en su conjunto describe por primera vez el uso de fosfato de toceranib como nueva estrategia terapéutica para el tratamiento de tumores mamarios felinos y carcinomas inflamatorios caninos. / Mammary tumors represent one of the most frequent tumors in dogs and cats, lacking of a standardized medical treatment in its macroscopic presentation or in the adjuvant setting after surgery. The clinical and genetic similarities of these tumors with breast cancer in women make them a unique model of comparative oncology, allowing the development of new antitumor strategies, which could improve their treatment. This project includes two prospective studies with toceranib phosphate (Palladia®) as monotherapy in cats with mammary tumors, or in combination with carprofen in bitches with inflammatory mammary carcinoma (IMC). The objectives were to evaluate the antitumor efficacy and tolerability of the treatments in both species. In the case of bitches with IMC, quality of life assessment was also included as an objective. The toceranib phosphate protocol in cats or in combination with carprofen in bitches with inflammatory carcinoma was very well tolerated and adverse effects were generally mild and resolved with standard supportive care. The administration of toceranib phosphate in feline mammary tumors demonstrated biological efficacy, with a response rate of 35.2% following RECIST criteria and clinical benefit in 64% of the cases. These results are comparable with traditional chemotherapy response rates and also suggest that this drug may be effective in the microscopic disease setting after surgical treatment, which should be assessed in prospective studies. The combination of toceranib phosphate and carprofen in bitches with IMC did not show biological efficacy following RECIST criteria. However, 64% of the patients presented clinical benefit at two months after initiating the protocol, defined as an improvement in the quality of life and no progression of the disease. The high rate of stable diseases compared to other studies and the improvement of the quality of life of the bitches, makes this combination another option to consider in their treatment. Finally, in this study, subjective changes in quality of life were evaluated through a questionnaire filled by the owners in each visit. Some of the categories of the quality of life questionnaire where the owners perceived statistically significant improvement included: happiness, mental state, appetite and general mobility. This work as a whole describes for the first time the use of toceranib phosphate as a new therapeutic strategy for the treatment of feline mammary tumors and canine inflammatory carcinomas.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 13-05-2016.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 19-01-2017.

[ES] Staphyloccus aureus es una bacteria gram positiva que forma parte de la flora normal de los seres vivos. Sin embargo, en determinadas circunstancias, es capaz de producir toxiinfecciones alimentarias y alteraciones en los alimentos, siendo uno de los principales causantes de pérdidas en las industrias lácteas. Staphylococcus aureus adquiere su patogenia tras la adquisición de elementos genéticos móviles (EGM) como por ejemplo, fagos o SaPIs (islas de patogenicidad de S. aureus). En este trabajo se ha caracterizado la interacción que se produce entre la proteína Stl, que bloquea la replicación autónoma de SaPIbov1, y la proteína inductora del fago de S. aureus que elimina esa represión, la dUTPasa. Estos estudios han permitido determinar que la dUTPasa posee dos conformaciones funcionales: una conformación inductora en la que se encuentra unida al dUTP y otra conformación inactiva en la que la proteína no se encuentra unida al nucleótido., [EN] Staphylococcus aureus is a gram-positive bacterium that is part of the normal flora of living beings. However, in certain circumstances, it is capable of producing food poisoning and alterations in food, being a major cause of loss in dairy industries. Staphylococcus aureus acquires its pathogenesis following the acquisition of mobile genetic elements (EGM) such as phages or SAPIS (pathogenicity islands of S. aureus). In this work we have characterized the interaction that occurs between the protein Stl, which blocks the autonomous replication of SaPIbov1, and the phage¿s inducing protein that eliminates this repression, the dUTPase. Our study has established that the dUTPase has two functional conformations; an inducing conformation in which it is attached to the dUTP, and an inactive conformation in which the protein is not attached to the nucleotide., [CA] Staphyloccus aureus és un bacteri gram positiu que forma part de la flora normal dels sers vius. No obstant això, en determinades circumstàncies, és capaç de produir toxiinfecciones alimentàries i alteracions en els aliments, sent un dels principals causant de pèrdues en les indústries làcties. S. aureus adquirix la seua patogènia després de l'adquisició d'elements genètics mòbils (EGM) com per exemple, fagos o SaPIs (illes de patogenicidad de S. aureus). En este treball s'ha caracteritzat la interacció que es produïx entre la proteïna Stl, que bloqueja la replicació autònoma de la SaPI, i la proteïna inductora del fago de S. aureus que elimina eixa repressió, la dUTPasa. Estos estudis han permés determinar que la dUTPasa posseïx dos conformacions funcionals; una conformació inductora en què es troba unida al dUTP i una altra conformació inactiva en què la proteïna no es troba unida al nucleòtid.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 20-01-2017. Antecedentes: La evidencia científica ha puesto en entredicho el valor diagnóstico y pronóstico de la prueba de mesa basculante (PMB) en el manejo del síncope. Actualmente la indicación de la PMB ha quedado limitada a la evaluación del síncope de perfil neuromediado (SNM) y al síncope de origen desconocido (SOD) sin evidencia de cardiopatía. Una nueva interpretación de esta prueba plantearía su utilización para predecir la respuesta clínica a una futura implantación de marcapasos en este tipo de patología. Objetivos: El objetivo principal de este estudio es evaluar el valor pronóstico de la PMB para predecir la recurrencia del síncope en pacientes remitidos para el estudio de síncope de perfil neuromediado o de origen desconocido en el seguimiento a largo plazo. Los objetivos secundarios son describir la experiencia en el manejo actual del SNM y/o SOD y evaluar la capacidad de la PMB para predecir la recurrencia de síncope tras una futura implantación de marcapasos. Metodología: Se trata de un estudio prospectivo observacional de centro único en el que se incluyeron de forma consecutiva pacientes con síncope derivados para la realización de una PMB desde el 1 de enero de 2008 al 31 de diciembre de 2014. La visita basal incluyó una recogida de datos clínicos referentes al síncope, de pruebas complementarias y del resultado de la PMB (protocolo con fase de provocación con nitroglicerina sublingual y respuesta obtenida siguiendo la clasificación VASIS). El manejo clínico y el tratamiento se dejó a criterio de los médicos especialistas remitentes y se realizó el seguimiento de todos los pacientes hasta el año 2015. Se realizó un análisis descriptivo e inferencial utilizando los test estadísticos en función de la naturaleza de las variables, con un nivel de significación p

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencas Biomédicas, leída el 12-02-2016.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencas Biomédicas, leída el 18-07-2016.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 14-03-2016.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 29-04-2015.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera, Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 30-06-2015.

Esta tesis recoge en sus anexos tres artículos científicos publicados por su autora. Estos son: Neuroprotection of lipoic acid treatment promotes angiogenesis and reduces the glial scar formation after brain injury. Neuroscience (2012), n. 224, p. 102-15. Lipoic acid treatment after brain injury : study of the glial reaction. Clinical and Developmental Immunology (2013). 8 p. Lipoic acid and bone marrow derived cells therapy induce angiogenesis and cell proliferation after local brain injury. Brain Injury (2014). 16 p. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 27-07-2015.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 15-06-2015.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 08-05-2015. La leucemia aguda linfoblástica (LAL) es una enfermedad linfoproliferativa caracterizada por la presencia de alteraciones cromosómicas y mutaciones que hacen de esta enfermedad una de las principales causas de mortalidad dentro de las neoplasias hematológicas. El Imatinib (IM) forma parte integral de la terapia de primera línea en leucemias Ph+ al ser un inhibidor específico de Bcr-Abl. Sin embargo, en LAL-B Ph+ resulta muy poco efectivo al expresarse la oncoproteína Bcr-Abl p190. Por otra parte, resultados previos de nuestro grupo demuestran que Bcr-Abl induce la degradación proteasomal del inhibidor del ciclo celular p27kip1, y la no degradación de esta proteína es suficiente para detener la progresión del ciclo celular. Además, las células que expresan Bcr-Abl son más sensibles a la inducción de apoptosis por la inhibición del proteasoma con Bortezomib (Btz) que células que no expresan dicha oncoproteína. Asimismo, el Btz es capaz de detener el crecimiento celular e inducir la apoptosis en células de LAL-T al inhibir la expresión de genes diana de Notch1. Por todo ello, en este trabajo hemos explorado el uso del inhibidor del proteasoma Btz en células de leucemia aguda linfoblástica, tanto de células B con cromosoma Philadelphia (LAL-B Ph+) como de células T (LAL-T), demostrando que este inhibidor causa parada de ciclo celular e induce apoptosis por activación de la ruta de las caspasas. Además el Btz induce una menor expresión del gen antiapoptótico Bcl-2, así como una expresión diferencial de los genes pro-supervivencia y pro-apoptoticos entre las líneas celulares estudiadas que se correlaciona directamente con la diferente sensibilidad al Btz. También, hemos visto que la resistencia al Btz tiene una relación directa con una mayor expresión del proteasoma constitutivo. Finalmente, analizamos el efecto combinado de IM y Btz en células de LAL-B Ph+ y descubrimos que el IM aumenta la sensibilidad al Btz, de tal forma que la administración secuencial del IM seguido del Btz produce un efecto sinérgico mayor que si se administran de manera conjunta los dos fármacos. Con nuestros resultados proponemos el uso del Btz para inducir apoptosis en células de LAL, especialmente cuando hay mayor expresión del inmunoproteasoma, y la administración consecutiva de IM seguido de Btz para mejorar el tratamiento de leucemias Bcr-Abl positivas. Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) is a lymphoproliferative disease characterized by the presence of chromosomal abnormalities and mutations that make this disease one of the leading causes of death in hematological malignancies. Imatinib (IM) has become an integral part of front-line therapy for Ph+ leukemias being a specific inhibitor of Bcr-Abl. However, it has proven to be far less efficacious in the treatment of ALL-B Ph+ expressing the p190 form of Bcr-Abl. Previous results of our group suggest that Bcr-Abl regulates proteasomal degradation of the cell-cycle inhibitor p27kip1, and the no degradation of this protein is sufficient to induce a cell-cycle arrest. In addition, Bcr-Abl-expressing cells are more sensitive to apoptosis induction by the proteasome inhibitor Bortezomib (Btz) than cells no expressing Bcr-Abl. Thus, Btz induces a cell-cycle arrest and also apoptosis in Bcr-Abl-expressing cells and not in control cells. In this study we focused on the use of the proteasome inhibitor Btz in B-cell Philadelphia chromosome positive and T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL-B Ph+ and ALL-T) cell lines. Our results showed that Btz induced cell-cycle arrest and caspase-dependent apoptosis. Furthermore, Btz significantly induced the down-regulation of the anti-apoptotic protein BCL-2 and a differential expression of pro- and anti-apoptotic proteins between the cell lines tested, which correlated with sensitivity to Btz treatment. In line with that, we also found an increased expression of the constitutive proteasome in the Btz less sensitive cell lines. Finally, we explored the possible synergistic effects between Btz and IM in ALL-B Ph+ cell lines. We observed that IM increases the sensitivity to Btz and that the administration of IM followed by Btz produces a synergistic effect greater than when the two drugs were administrated at the same time. Based on our results we propose that Btz induces apoptosis in ALL cell lines, especially in those with an increased expression of the immunoproteasome. We also propose a sequential administration of IM followed by Btz to improve the treatment in patients with Bcr-Abl-positive leukemias.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 30-03-2015.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 18-12-2014.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 19-05-2015.

Esta tesis recoge en su anexo un artículo científico publicados por su autora: Protection by DHA of early hippocampal changes in diabetes : possible role of CREB and NF-kB. Neurochemical Research (2012), n. 37, p. 105-15. ISSN 0364-3190. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 25-07-2013.

Esta tesis recoge en sus anexos dos artículos científicos publicados por su autora. Estos son: Neuroprotection of lipoic acid treatment promotes angiogenesis and reduces the glial scar formation after brain injury. Neuroscience (2012), n. 224, p. 102-15. Lipoic acid treatment after brain injury : study of the glial reaction. 20 p. No se específica ningún dato de la revista. Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 06-06-2013.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Castellón de la Plana), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 12-12-2013.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 02-12-2013.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 24-09-2013.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 27-09-2013.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencas Biomédicas, leída el 09-12-2013.

En los vertebrados, los estrógenos, además de ejercer un papel principal en la diferenciación y maduración sexual, son también responsables de otras muchas funciones metabólicas y fisiológicas. Su rango de acción es muy amplio, afectando a la expresión génica en diversos tejidos, incluido el sistema nervioso central (SNC). Las acciones fisiológicas de los estrógenos están mediadas por receptores específicos (ERs), los cuales, actúan tanto a nivel nuclear (acción genómica), como fuera del núcleo (acción no genómica). En los vertebrados, se han identificado dos subtipos, el subtipo alfa (Esr1) y el subtipo beta (Esr2). De manera adicional, los peces teleósteos presentan un tercer subtipo de ER denominado beta dos (Esr2a) en contraposición al primer subtipo descubierto beta uno (Esr2b). Estudios diversos, tanto en mamíferos como en peces, sugieren que los ERs, pueden ejercer funciones diferenciales, pero también redundantes. En el trabajo presente, se establece el patrón de distribución de los tres subtipos de ERs caracterizados en peces teleósteos, en el cerebro de la lubina, como una primera aproximación a la funcionalidad que estos pueden ejercer en el SNC. Asimismo, se demuestra su implicación en la función reproductora y el comportamiento alimenticio de la especie anterior, a partir de la presencia de los mismos en las principales áreas de control gonadotrópico y de regulación de la ingesta. También se demuestra la presencia de estos receptores en las células productoras de las hormonas folículo estimulante (FSH) y luteinizante (LH), sugiriendo una acción directa de los estrógenos sobre la producción de gonadotropinas. Finalmente, el desarrollo de estudios in vitro aporta información sobre el control transcripcional por estrógenos de la FSH en la lubina. CONCLUSIONES PRIMERA. Los experimentos de hibridación in situ demuestran que los tres subtipos de ERs caracterizados en peces teleósteos, se expresan en el cerebro de la lubina. SEGUNDA. La amplia variedad de núcleos y áreas cerebrales en la que los ERs aparecen expresados, así como, su localización conjunta en algunas de las anteriores sugiere que éstos desarrollan tanto funciones diferenciales como redundantes. TERCERA. La presencia de los tres subtipos de ERs en las áreas principales de control hipofisiotrópico sugiere que los tres están implicados en la regulación, a través de los sistemas de retroalimentación largos, de la síntesis y secreción de las gonadotropinas. Asimismo, la expresión diferencial de los tres subtipos en núcleos neuronales de las áreas anteriores sugiere una funcionalidad no redundante de los mismos en dicha regulación. CUARTA. Los estudios de localización conjunta de los ERs con los gonadotropos de FSH y LH, suministran una base neuroanatómica para una regulación, a través de los sistemas de retroalimentación cortos, de la síntesis y secreción de las gonadotropinas. QUINTA. La inhibición producida por 17ß-estradiol sobre la expresión del gen ßFSH en cultivos primarios de células de pituitaria de lubina demuestra que la acción de este esteroide sobre la expresión de la subunidad ßFSH, in vivo, podría ejercerse de manera directa sobre la pituiaria misma. SEXTA. Los experimentos de transfección con un vector de expresión portador del Esr1 de lubina demuestran que éste se expresa y es funcional en las líneas celulares de riñón humano embrionario (HEK 293) y de gonadotropos de ratón (LßT2)., SEPTIMA. La caracterización farmacológica del Esr1 de la lubina señala que éste es activado por 17ß-estradiol, tanto a dosis fisiológicas como farmacológicas, demostrando que puede mediar en el control por estrógenos de la expresión génica de la especie anterior, in vivo. Dosis elevadas de testosterona son capaces de inducir efectos celulares similares a los causados por los estrógenos sin mediación de la aromatización. Conclusiones 174 OCTAVA. La detección significativa de actividad luciferasa observada a partir de experimentos de transfección con construcciones plasmídicas de la región promotora del gen ßFSH de la lubina en LßT2, así como la ausencia de la misma en HEK 293, demuestra que este gen requiere factores celulares específicos para su expresión. NOVENA. La caracterización de la actividad basal de la región promotora del gen ßFSH pone de manifiesto que las primeras 3.5 Kb de promotor contienen, al menos, una región silenciadora y una potenciadora de la actividad transcripcional. DÉCIMA. Los experimentos realizados para determinar el control transcripcional por estrógenos de la subunidad ßFSH de la lubina sugieren que los ERs no reconocen elementos de respuesta dentro de las 3.5 Kb de región promotora analizada, o bien, que necesitan de la interacción con factores celulares específicos de gonadotropos de peces. DÉCIMOPRIMERA. La presencia de los ERs en las áreas principales de control del comportamiento alimenticio en peces, como son el núcleo lateral tuberal y lóbulo inferior hipotalámico, dan soporte al efecto anorexigénico que los estrógenos ejercen en la lubina. DÉCIMOSEGUNDA. La obtención de una línea celular expresando de manera estable el Esr1 de lubina y el gen luciferasa, bajo el control de un promotor portador de elementos de respuesta a los estrógenos, ha permitido desarrollar un sistema sensible para la detección y cuantificación de sustancias estrogénicas. El sistema revela la presencia de componentes estrogénicos en los piensos comerciales utilizados para el crecimiento de lubinas y doradas. La presencia de componentes estrogénicos en dietas para peces de cultivo podría causar disrupciones en su función reproductora y comportamiento alimenticio a través de la activación de los ERs., Esta tesis doctoral ha sido financiada por el Proyecto AGL 2005-00796 del Ministerio de Educación y Ciencia, por el Proyecto PUBERTIMING QLTR-2001-01801 de la UE y por el Proyecto PROBASS QLTR-2001-01801 por la UE.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencas Biomédicas, leída el 21-11-2012.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 27-07-2012.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencas Biomédicas, leída el 29-06-2012.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Ciencias Biomédicas, leída el 17-12-2012.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias de la Salud, Departamento de Fisiología, Farmacología y Toxicología, leída el 28-11-2011.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias Experimentales y de la Salud, Departamento de Química, Bioquímica y Biología Molecular, leída el 03-06-2005.

Tesis - Universidad CEU Cardenal Herrera (Valencia), Facultad de Ciencias Experimentales y de la Salud, Departamento de Fisiología, Toxicología y Farmacología, leída el 12-11-2004.