Search

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2022-06-07T19:11:35Z No. of bitstreams: 1 Tese_Elis.pdf: 2240814 bytes, checksum: 776138ef1160fb461676eabec6b2f96d (MD5) Made available in DSpace on 2022-06-07T19:11:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Elis.pdf: 2240814 bytes, checksum: 776138ef1160fb461676eabec6b2f96d (MD5) Previous issue date: 2021-04-16 CAPES FAPEMA Cancer appears in Brazil as the second leading cause of death in recent years. Neoplastic cachexia is a syndrome that contributes to higher rates of morbidity and mortality, in addition to reduced quality of life. Previous studies describe that mice with solid Ehrlich tumor showed muscle loss, evolving to a cachectic condition after 14 days of inoculation, and this in vivo study model is applicable in the study of drugs with antitumor potential. Resveratrol (RSV) is a polyphenol found in foods, such as grapes and peanuts, and has been studied in the treatment of several neoplasms. However, despite promising data on antitumor activity, there are no studies with this compound in neoplastic cachexia. The objective was to evaluate the effects of RSV on cachexia in a solid Ehrlich tumor model under treatment associated or not with chemotherapy. For an assessment of cachexia in the in vivo model, male Swiss mice aged 50 to 60 days were divided into two groups (n = 10): Normal (without treatment and without tumor) and the negative control group (inoculated with 2x107 tumor cells / mL without foot pad, without treatment). The results impaired that even maintaining body weight, the increase in the tumor accompanied a lower consumption of feed, loss of muscle mass and adipose tissue compared to the control group, suggesting the condition of neoplastic cachexia. To assess the effect of the treatment, part of the animals were inoculated with a tumor, as previously described, and divided into: Negative control (without treatment); Positive control (treated with 25 mg / kg cyclophosphamide, intraperitoneal for 14 days); RSV Group (10mg / kg, per gavage for 14 days); and RSV and Cyclophosphamide Group (10mg / Kg and 25mg / kg, by gavage and intraperitoneal, respectively), and a group of animals without tumor and treated with Resveratrol in the same dosage. The results impaired that RSV reduces tumor growth in the same way as cyclophosphamide. However, chemotherapy reduces the cellularity of lymphoid organs and increases serum levels of TNF-α and IL-6 and reduces MCP1, leading to greater muscle loss, while RSV reduced TNF-α and increases muscle mass without causing cytokinesis. and hepatotoxicity. Treatment with RSV and cyclophosphamide improves muscle weight compared to cyclophosphamide, but does not alter the immunosuppressive effects. The presence of sFasL appears to be a mechanism associated with tumor-mediated inflammation. The RSV, without tumor inoculation, increases the number of muscle fibers and does not alter immunological and hepatic parameters, suggesting low toxicity. The results suggest that in addition to the anti-tumor effect, RSV has anti-inflammatory activity capable of preserving muscle in neoplastic cachexia, however without effect on the mechanisms of muscle loss induced by chemotherapy, therefore, the present study ratifies the anti-tumor effect of RSV and shows its potential in the treatment of neoplastic cachexia. O câncer apresenta-se no Brasil como a segunda maior causa de morte nos últimos anos. A caquexia neoplásica é uma síndrome que contribui para maiores índices de morbidade e mortalidade, além de redução da qualidade de vida. Trabalhos anteriores descreveram que camundongos portadores de tumor sólido de Ehrlich apresentavam perda muscular, evoluindo para um quadro caquético após 14 dias de inoculação, sendo este modelo de estudo in vivo aplicável no estudo de drogas com potencial antitumoral. O Resveratrol (RSV) é um polifenol encontrado em alimentos, como a uva e amendoim, sido estudado no tratamento de várias de neoplasias. Contudo, apesar de dados promissores na atividade antitumoral, não existem estudos com esse composto na caquexia neoplásica. O objetivo foi avaliar os efeitos do RSV na caquexia em modelo de tumor sólido de Ehrlich em tratamento associado ou não com quimioterápico. Para a avaliação da caquexia no modelo in vivo, camundongos Swiss machos com idade entre 50 a 60 dias foram divididos em dois grupos (n=10): Normal (sem tratamento e sem tumor) e o Grupo controle negativo (inoculado com 2x107 células tumorais/mL no coxim plantar, sem tratamento). Os resultados mostraram que mesmo mantendo o peso corporal, o aumento do tumor acompanha um menor consumo de ração, perda de massa muscular e tecido adiposo comparado ao grupo controle, sugerindo o quadro de caquexia neoplásica. Para avaliar o efeito do tratamento, parte dos animais foram inoculados com tumor, como descrito anteriormente, e divididos em: Controle negativo (sem tratamento); Controle positivo (tratado com ciclofosfamida de 25mg/kg, intraperitoneal durante 14 dias); Grupo RSV (10mg/kg, por gavagem durante 14 dias); e Grupo RSV e Ciclofosfamida (10mg/Kg e 25mg/kg, por gavagem e intraperitoneal, respectivamente), e um grupo de animais sem tumor e tratados com Resveratrol na mesma posologia. Os resultados mostraram que a o RSV reduz o crescimento do tumor da mesma forma que a ciclofosfamida. Entretanto, o quimioterápico reduz a celularidade dos órgãos linfoides e eleva os níveis séricos de TNF-α e IL-6 e reduz MCP1, levando uma maior perda muscular, enquanto que o RSV reduziu o TNF-α e aumenta a massa muscular sem causar cito e hepatotoxidade. O tratamento com RSV e ciclofosfamida apresentou melhora do peso muscular comparado a Ciclofosfamida, mas não alterou os efeitos imunossupressores. A presença de sFasL parece ser um mecanismo associado a inflamação mediada pelo tumor. O RSV, sem a inoculação do tumor, aumenta o número de fibra muscular e não altera parâmetros imunológicos e hepáticos, sugerindo baixa toxicidade. Os resultados sugerem que além do efeito antitumoral, o RSV tem atividade anti-inflamatória capaz de preservar o músculo na caquexia neoplásica, entretanto sem efeito nos mecanismos de perda muscular induzido pelo quimioterápico, desta forma, o presente trabalho ratifica o efeito antitumoral do RSV e evidencia seu potencial no tratamento da caquexia neoplásica.

Background: Healing is an innate biological phenomenon, and carcinogenesis acquired, but with common humoral and cellular elements. Carcinogenesis interferes negatively in healing. Aim: To evaluate the histological changes in laparotomy scars of healthy Balb/c mice and with an Ehrlich tumor in its various forms of presentation. Methods: Fifty-four mice were divided into three groups of 18 animals. First group was the control; the second had Ehrlich tumor with ascites; and the third had the subcutaneous form of this tumor. Seven days after tumor inoculation, all 54 mice were submitted to laparotomy. All of the animals in the experiment were operated on again on 7th day after surgery, with resection of the scar and subsequent euthanasia of the animal. The scars were sent for histological assessment using immunohistochemical techniques to evaluate Cox-2 (cyclooxygenase 2), VEGF (vascular endothelial growth factor) and FGF (fibroblast growth factor). Semi-quantitatively analysis was done in the laparotomy scars and in the abdominal walls far away from the site of the operation. Results: Assessing the weight of the animals, the correct inoculation of the tumor and weight gain in the group with tumoral ascites was observed. The histological studies showed that groups with the tumor showed a statistically significant higher presence of Cox-2 compared to the control. In the Cox-2 analysis of the abdominal wall, the ascites group showed the most significant difference. VEGF did not present any significant differences between the three groups, regardless of the site. The FGF showed a significant increase in animals with the tumor. Conclusion: Histological findings in both laparotomy scar and the abdominal wall showed that with Ehrlich's neoplasia there was an exacerbated inflammatory response, translated by more intense expression of Cox-2 and greater fibroblast proliferation, translated by more intense expression of FGF, that is, it stimulated both the immediate inflammatory reactions, observed with Cox-2 reactions, and late scarring by fibroblasts and FGF. RESUMO Racional: A cicatrização é fenômeno biológico inato, e a carcinogênese adquirido, mas com elementos humorais e celulares comuns. A carcinogênese interfere de forma negativa na cicatrização. Objetivo: Avaliar as modificações histológicas nas cicatrizes laparotômicas de camundongos Balb/c sadios como controles, e com a neoplasia de Ehrlich, em suas diferentes formas de apresentação. Métodos: Foram utilizados 54 camundongos, divididos em três grupos de 18 animais cada um. O primeiro era controle; o segundo com a neoplasia de Ehrlich em sua forma ascítica; e o terceiro na forma subcutânea. Sete dias após a inoculação do tumor, todos os 54 camundongos foram submetidos à laparotomia e reoperados no sétimo dia de pós-operatório, com ressecção da cicatriz e posterior eutanásia. As cicatrizes foram encaminhadas para estudo histológico com técnicas imunoistoquímicas para avaliar Cox-2 (ciclo-oxigenase 2), VEGF (fator de crescimento do endotélio vascular) e FGF (fator de crescimento dos fibroblastos) e analisadas de forma semiquantitativana tanto na cicatriz laparotômica como na parede abdominal mais distante do local operado. Resultados: Avaliando o peso, observou-se a correta inoculação do tumor e o aumento de peso no grupo com a neoplasia na modalidade ascítica. Os estudos histológicos mostraram que os grupos com a neoplasia apresentaram maior presença da Cox-2 em relação ao controle, estatisticamente significante. No estudo da Cox-2 da parede abdominal foi o local em que o grupo ascítico apresentou a diferença mais expressiva. O VEGF não apresentou diferenças significantes entre os três grupos, independentemente do local estudado. O FGF teve aumento significante nos animais com neoplasia. Conclusão: Os achados histológicos encontrados tanto na cicatriz das laparotomias quanto na parede abdominal mostraram que com a neoplasia de Ehrlich houve resposta inflamatória exacerbada, traduzida por expressão mais intensa da Cox-2 e maior proliferação fibroblástica, traduzida por expressão mais intensa do FGF, ou seja, estimulou tanto as reações inflamatórias imediatas, observadas nas reações da Cox-2, como nas cicatriciais tardias com os fibroblastos e o FGF.

The 2H-1-benzopyran-2-one, 7-preniloxi (UMB-07) is a coumarin derivative from a prenylation reaction in commercial umbelliferone. Published data reported that coumarin derivatives have a range of pharmacological activities such as antibacterial, antiinflammatory and antitumor activity. Specifically for the UMB- 07, the literature reports antifungal, antibacterial and antitumor activities. However, despite being a cytotoxic compound for tumor cells, there is no studies of mechanisms of action associated with this effect. This study aimed to evaluate the toxicity and antitumor activity of UMB-07. The hemolytic effect UMB-07 was evaluated by cytotoxicity assay in peripheral blood erythrocytes of mice. UMB-07 induced a small percentage of hemolysis (0.8%) at the concentration tested (2000 mg/mL), indicating a low toxicity. In vivo, the assay was performed Preclinical acute toxicity UMB-07 to evaluate behavioral effects and estimated 50% lethal dose (LD50). UMB-07 (300 or 2000 mg/kg, intraperitoneal injection - i.p.) induced depressive effects in the central and autonomic nervous systems. The LD50 was estimated at about 1000 mg / kg. Genotoxicity UMB-07 was assessed by the micronucleus test in the peripheral blood of mice. UMB-07 (300 mg/kg - i.p.) did not induce an increase in the number of micronucleated erythrocytes, suggesting low genotoxicity. The ascitic Ehrlich carcinoma model was used to evaluate the antitumor activity UMB-07 (12.5, 25 or 50 mg/kg, i.p.) after nine days of treatment. UMB-07 (50 mg/kg) showed antitumor activity by reducing the volume parameters, mass, and the total amount of tumor cells (p

Novos agentes antitumorais baseados em metais têm sido desenvolvidos com o propósito de reduzir os efeitos tóxicos, melhorar o perfil farmacológico e a eficácia terapêutica. Dentre os agentes antineoplásicos, os mais promissores são os complexos de rutênio por demonstrarem propriedades antimetastática, baixa toxicidade para células normais e alta seletividade para células tumorais. O presente estudo objetivou determinar o potencial citotóxico, genotóxico e elucidar a via de sinalização de morte celular dos complexos de rutênio(II)/bipiridínicos, in vitro, em linhagem celular de carcinoma de mama murino, Tumor de Ehrlich. Para avaliar a citotoxicidade dos complexos foi realizado o teste de MTT. Os valores de IC50 foram: de 14,93μM e 8,52μM para o complexo1 e 2, respectivamente. Para as células normais, a IC50 do complexo 1 foi de 2.34 ± 0,18μM e de 53.73 ± 5,71μM para o complexo 2. O complexo 2 obteve melhor atividade citotóxica e potencial seletivo de 6,31, sendo selecionado para a continuidade dos estudos. Para avaliar a genotoxicidade do complexo 2, foi realizado o teste de cometa. Após 24h, o complexo 2, nas concentrações de 4, 8 e 16 μM induziu dano no DNA de 44, 53 e 44%, respectivamente. Após 48h, induziu dano de 48, 45 e 42,5% comparado com o controle negativo de 16,5%. Para avaliar o efeito do complexo 2 sobre a cinética do ciclo celular, foi realizado o teste de ciclo celular por citometria de fluxo. Após 24h de tratamento, foi observado um aumento na porcentagem de células na fase G0/G1 e uma redução das células na fase S e G2/M, considerando uma parada do ciclo. Para avaliar o tipo de morte induzido pelo complexo 2 , foi realizado o teste de detecção de apoptose/necrose por microscopia de fluorescência. Após 24h de tratamento nas concentrações de 4, 8 e 16μM foram observados 33%, 42% e 30%, respectivamente de células em apoptose inicial em relação ao controle negativo 11%. Após 48h nas concentrações 4, 8 e 16μM foram observados 50%, 64% e 60% de células em apoptose inicial respectivamente, comparado com o controle negativo. Foi realizada o ensaio de coloração anexina V-FITC para analisar o tipo de morte induzido pelo complexo 2. Tanto em 24 quanto em 48h, foi observado um decréscimo no número de células viáveis e consequentemente um aumento no número de células em apoptose. No entanto o número de células em apoptose inicial foi mais significativo para o tempo de 48h. Quando avaliado a expressão dos genes Tp53, Bax e Caspase 9 por qPCR, observou-se um aumento significativo na taxa de expressão dos genes Tp53 e Bax durante 6h de tratamento. A análise da expressão das proteínas envolvidas no processo de ciclo celular, reparo de DNA e morte celular foi avaliada por western blot. Observou-se um aumento nos níveis de Bax e Caspase 7. O novo complexo de rutênio (II) testado é promissor, pois apresenta baixa IC50, seletividade para células tumorais, além de induzir dano ao DNA, parada do ciclo celular e morte celular por apoptose mediante ativação de caspases. New antitumor agents based on metals have been developed in order to reduce toxicity, to improve the pharmacological profile and therapeutic efficacy. Among the anticancer agents, the most promising are the ruthenium complexes for demonstrating antimetastatic properties, low toxicity to normal cells and high selectivity for tumor cells. This study aimed to determine the potential cytotoxic, genotoxic and elucidate the pathway of cell death signaling of ruthenium (II) complexes / bipyridine, in vitro, in cell line murine breast carcinoma, Ehrlich tumor. To assess the cytotoxicity of the complexes was performed MTT assay. IC50 values were: 14,93μM and 8,52μM for complexo1 and 2, respectively. In normal cells, the IC50 of complexes 1 was 0,18μM and 2:34 ± 53.73 ± 5,71μM for 2 complex. The complex 2 had a better cytotoxic activity and relative potential of 6.31, being selected for further study. For evaluating the genotoxicity of complex 2 was performed comet assay. After 24h, the compound 2 at concentrations of 4, 8 and 16μM induced DNA damage of 44, 53 and 44%, respectively. After 48 hours, induced damage of 48, 45 and 42.5% compared to the negative control 16.5%. To evaluate the effect of compound 2 on the cell cycle kinetics was performed testing the cell cycle by flow cytometry. After 24 hours of treatment, an increase in the percentage of cells in G0 / G1 phase and reduced of cells in S phase and G2 / M was observed, considering a cycle arrest. To evaluate the type of death induced by 2 complex, the test for detection of apoptosis / necrosis by fluorescent microscopy was conducted. After 24 hours of treatment at concentrations of 4, 8 and 16μM were observed 33%, 42% and 30% respectively of cells in early apoptosis compared to negative control 11%. After 48h at concentrations of 4, 8 and 16μM were observed 50%, 64% and 60% of cells in early apoptosis respectively compared to the negative control. Annexin V-FITC staining assay was performed to analyze the type of death induced by compound 2. Both 24 as for 48h, a decrease in the number of viable cells and consequently an increase in the number of apoptotic cells was observed. However, the number of cells in early apoptosis was more significant for the time of 48h. When assessed the expression of the Tp53 genes Bax et Caspase 9 by qPCR, we observed a significant increase in the rate of expression of the Tp53 genes Bax and treatment for 6h. Analysis of expression of proteins involved in cell cycle process, DNA repair and cell death was assessed by western blot. We observed an increase in the levels of Bax and caspase 7. The new complex of ruthenium (II), tested is promising because it has low IC50, selectivity for tumor cells, and induce DNA damage, cell cycle arrest and cell death by apoptosis through caspase activation. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A proteína Kint3-4 (PKint3-4), codificadora da angiostatina, é reconhecida por sua potencialidade antiangiogênica. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da proteína Kint3-4 no crescimento do tumor sólido de Ehrlich. Para isso, foram analisados a curva de desenvolvimento tumoral, o índice apoptótico e a dosagem de hemoglobina, a fim de se avaliar a angiogênese, em 20 camundongos Swiss fêmeas, inoculadas com o tumor sólido de Ehrlich em seus coxins plantares. Os resultados demonstraram a participação de PKint3-4 na indução à apoptose de células neoplásicas, na diminuição da concentração de hemoglobina e, principalmente, na diminuição do desenvolvimento tumoral. Sugere-se que a ação antitumoral, determinada pela sequência proteica utilizada, possa estar associada ao papel antiangiogênico da angiostatina, que indiretamente aumentaria o índice apoptótico das células neoplásicas, e/ou a uma ação direta da proteína Kint3-4 sobre essas células, estimulando-as a sofrerem apoptose.

O Ageratum conyzoides, vegetal conhecido popularmente no Brasil é constituído por várias substâncias químicas, dentre elas os flavonóides, aos quais já foi atribuída a atividade antitumoral. Neste estudo foi avaliado o efeito das frações clorofórmica e metanólica do extrato AcOEt das folhas sobre o crescimento do tumor de Ehrlich. Foi constatado que o tratamento com as frações metanólicas, nas doses de 50 mg/kg de peso foi eficaz, inibindo o crescimento tumoral. A porcentagem de inibição para a fração metanólica estabilizada foi de 69,84% e de 68,25% para a fração metanólica não estabilizada. Estudos posteriores se fazem necessários para esclarecer quais os mecanismos envolvidos nesta inibição do crescimento tumoral. Ageratum conyzoides, a popular vegetal in Brazil, is composed by many chemical compounds, including flavonoids, and antitumoral activity has been attributed to it. In this assay the effect of chloroform and methanol fractions from EtOAc extract of the leaves on the growth of the Ehrlich tumor was evaluated. Under our experimental conditions we have observed that the treatment with methanol fractions, under the dosage of 50 mg/kg was efficient on inhibiting the tumoral growth. There was an inhibition percentage of 69.84% to the stabilized methanol fraction and 68.25% to the non-stabilized fraction. Further studies are necessary to clarify which mechanisms are involved in the inhibition of the tumoral growth.

Submitted by LEVY MALMONGE (l.malmonge@hotmail.com) on 2016-05-11T13:53:42Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Levy Malmonge.pdf: 1689039 bytes, checksum: 8283104d3ab314c8cf56c74d68981798 (MD5) Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-13T14:41:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 martinneto_lm_me_bot.pdf: 1689039 bytes, checksum: 8283104d3ab314c8cf56c74d68981798 (MD5) Made available in DSpace on 2016-05-13T14:41:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 martinneto_lm_me_bot.pdf: 1689039 bytes, checksum: 8283104d3ab314c8cf56c74d68981798 (MD5) Previous issue date: 2016-02-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A insulina é o hormônio produzido pelas células beta das ilhotas pancreáticas, responsável pela captação da glicose pelos tecidos periféricos. A glicose é o principal estimulante para a secreção deste hormônio e é também o substrato energético mais utilizado pelas células para produção de energia ou armazenamento na forma de glicogênio. A insulina atinge os tecidos-alvo e se liga a um receptor de superfície da membrana plasmática, ativando uma cascata de fosforilação envolvendo as proteínas IRS1, PI-3 cinase, AKT e GLUT4. Qualquer defeito nesta sequência resulta em uma menor captação da glicose e uma maior secreção de insulina, estabelecendo um quadro chamado resistência periférica à insulina, frequente em pacientes portadores de malignidades que apresentam também uma síndrome conhecida como caquexia, caracterizada pela perda de peso, de tecido adiposo, atrofia muscular e anorexia. Esse conjunto de fatores é resultado da tentativa do organismo de produzir energia em grande escala para suprir o hospedeiro e seu tumor. Trabalhos anteriores em nosso laboratório já haviam descrito que a secreção de insulina por ilhotas de camundongos portadores de tumor solido de Ehrlich, apóes 14 dias de inoculação, apresentava-se diminuída, enquanto a sensibilidade periférica tanto à insulina quanto à glicose se mostraram aumentadas, portanto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a via de sinalização de insulina em tecido muscular, hepático e adiposo de camundongos caquéticos portadores do tumor sólido de Ehrlich 14 dias após inoculação. Foram analisadas as expressões gênicas por RT-qPCR e expressão protéica por Western Blotting das proteínas da via de sinalização da insulina, como IR, IRS1, PI3-K e AKT. Em uma análise geral do quadro sistêmico dos camundongos, estes apresentaram alterações metabólicas condizentes com o quadro de caquexia já estabelecido, como perda de peso, esplenomegalia, diminuição de colesterol, de glicogênios hepático e muscular e aumento de triglicerídeos plasmáticos. No tecido hepático, proteínas-chave na regulação da via - IR e AKT – apresentaram niveis proteicos aumentadas, enquanto no tecido muscular a proteína IRS1 em sua forma inativa, juntamente com AKT, estavam diminuídas. O tecido adiposo apresentou aumento na expressão gênica de algumas proteínas, mas não apresentou alteração na expressão proteica das mesmas. Portanto, o mesmo organismo apresenta orgãos com maior sensibilidade à insulina, como o tecido hepático e outros com resistencia à insulina, como o tecido muscular, mostrando uma resposta tecido-especifica à ação da insulina. Insulin is the hormone produced by the β cells of the pancreatic islets, responsible for the absorption of glucose by peripheral tissues. Glucose is the major stimulant for the secretion of this hormone and is also the main substrate used by the cells for energy production or storage as glycogen. After the stimulus, insulin arrives at the target tissues and binds to its receptor at the surface of the cell membrane, activating a cascade of proteins phosphorylation such as IRS1, PI-3 kinase, AKT and GLUT4. Any defect in this sequence results in a lower glucose uptake and increased insulin secretion, resulting in a situation called insulin resistance, often seen in patients with malignancies and intimately linked with a syndrome called cachexia characterized by loss of weight and fat mass, muscle wasting and anorexia. These factors are the result of an attempt of the body to produce energy on a large scale to supply the host and his tumor because tumor cells absorb nutrients faster than normal cells. This study aimed to investigate the insulin signaling pathway in muscle, liver and fat tissue of solid Ehrlich carcinoma-bearing mice after 14 days of inoculation. At this time, previous studies of our laboratory had already described that the secretion of insulin showed significant decrease, while the peripheral sensitivity, for both insulin and glucose was increased. From this, we analyzed the gene expression by RT-PCR and protein expression by Western Blotting of the insulin signaling pathway proteins such as IR, IRS1, PI3-K and AKT. In a general analysis, the animals showed metabolic abnormalities consistent with cachexia already established, such as weight loss, splenomegaly, decreased cholesterol, liver and muscle glycogen and increased plasma triglycerides. In liver, IR and AKT, key proteins in the pathway regulation, were increased, while in muscle IRS1 protein in its inactive form, along with AKT were decreased. The fat tissue showed no alterations in protein expression, but showed a increased expression of genes for some proteins of the pathway. These data allow us to conclude that the sensitivity shown in ipITT it is a tissue-specific response, that is, while there is greater sensitivity to insulin in the liver, muscle appears to be resistant to the hormone.

Cancer is a major public health problem worldwide and is considered a group of diseases characterized by uncontrolled growth and multiplication of abnormal cells that can invade various tissues. Treatment has been benefited from research that seek to reduce toxicity and increase the effectiveness of different anticancer drugs. Acridine derivatives have a number of proven biological activities, and amsacrine, an antineoplastic used for the treatment of leukemias and lymphomas, is the main representative of the group. This study aimed to evaluate the toxicity and antitumor activity of acridine- derived N’-(2-chloro-6-methoxy-acridin-9-yl)-2-cyano-3-(4-dimethylaminophenyl)-acrilohydrazide (ACS-AZ10). In the assessment of cytotoxicity in mouse erythrocytes it was observed that ACS-AZ10 did not cause hemolysis at the concentrations tested (up to 1250 μg / ml), suggesting low toxicity in erythrocytes. After acute administration of ACS-AZ10 (2000 mg / kg) in mice intraperitoneally (ip), characteristic effects of changes in the central nervous system among them, writhing and abduction of the legs of the rear train, were observed. The estimated LD50 (dose that produces death in 50% of experimental animals) was around 2500 mg / kg. The ACS-AZ10 (15 or 30 mg / kg), after a nine days treatment (ip) showed significant antitumor activity in vivo in Ehrlich ascites carcinoma model (EAC), considering the volume parameters, mass, viability and total cell count. Treatment at the dose 7.5 mg/kg induced an increase in sub-G1 peak, with a consequent reduction in the percentage of cells in G0/G1 and S phases of cell cycle, suggesting death by apoptosis. However, treatment with 15 mg/kg induced cell cycle arrest in G2/M phase and a reduction of the fraction G0/G1 and S, suggesting a pre-mitotic blockade. The treatment with different doses of ACS-AZ10 significantly reduced the angiogenic capacity of the EAC, thus it can be inferred that the ACS-AZ10´s antitumor mechanism of action involves, at least in part, an anti-angiogenic effect. The toxicological analysis indicated that after nine days of treatment with ACS-AZ10, low haematological and biochemical toxicity were observed. Histopathological analysis indicated liver damage following treatment with ACS-AZ10, however, the damage was considered mild and reversible. ACS-AZ10 induced no increase in the quantity of micronucleated erythrocyte in micronucleus test, indicating the absence of genotoxic under the conditions evaluated. Therefore, it is possible to infer that the ACS-AZ10 has potent antitumor activity in vivo with low toxicity. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O câncer é um importante problema de saúde pública em nível mundial, sendo considerado um grupo de doenças caracterizadas pelo crescimento descontrolado e multiplicação de células modificadas que podem invadir diversos tecidos. Seu tratamento tem se beneficiado das pesquisas que buscam reduzir a toxicidade e aumentar a eficácia de diferentes fármacos antineoplásicos. Os derivados da acridina possuem diversas atividades biológicas comprovadas, sendo a amsacrina, um antineoplásico usado para o tratamento de leucemias e linfomas, o principal representante do grupo. Esse trabalho teve como objetivo avaliar a toxicidade e atividade antitumoral do derivado acridínico N’-(2-cloro-6-metoxi-acridin-9-yl)-2-ciano-3-(4-dimetilaminofenil)-acrilohidrazida (ACS-AZ10). Na avaliação da citotoxicidade em eritrócitos de camundongos foi possível observar que o ACS-AZ10 em concentração de até 1250 g/mL não causou dano direto a membrana de eritrócitos de camundongos, sugerindo atividade intracelular em hemácias. Após administração aguda do ACS-AZ10 (2000 mg/kg) em camundongos por via intraperitoneal (i.p.), foram observados efeitos característicos de alterações no Sistema Nervoso Central dentre estes, contorções abdominais e abdução das patas do trem posterior. O valor estimado da DL50 (dose que produz morte de 50% dos animais experimentais) foi em torno de 2500 mg/kg. O ACS-AZ10 (15 ou 30 mg/kg), após nove dias de tratamento (i.p.), mostrou significante atividade antitumoral in vivo em modelo de Carcinoma Ascítico de Ehrlich (CAE), considerando os parâmetros volume, massa, viabilidade e total celular. O tratamento na dose 7,5 mg/kg induziu um aumento do pico sub-G1, com consequente redução da percentagem de células nas fases G0/G1 e S do ciclo celular, o que sugere morte por apoptose. No entanto, o tratamento com a dose de 15 mg/kg induziu parada do ciclo celular na fase G2/M e diminuição da fração G0/G1 e S, o que sugere um bloqueio pré-mitótico. O tratamento com as diferentes doses de ACS-AZ10 diminuiu significativamente a capacidade angiogênica do CAE, desta forma, pode-se inferir que o mecanismo de ação antitumoral do ACS-AZ10 envolve, pelo menos parcialmente, um efeito antiangiogênico. As análises toxicológicas indicaram que, após nove dias de tratamento com ACS-AZ10 foi observada baixa toxicidade hematológica e bioquímica. A análise histopatológica indicou danos hepáticos após o tratamento com ACS-AZ10, entretanto, os danos foram considerados leves e reversíveis. O ACS-AZ10 não induziu aumento na quantidade de eritrócitos micronucleados no ensaio do micronúcleo, o que indica ausência de genotoxicidade, nas condições avaliadas. Portanto, é possível inferir que o ACS-AZ10 apresenta potente atividade antitumoral in vivo com baixa toxicidade.

Cancer is characterized by uncontrolled proliferation of abnormal cells. The high mortality rate associated with the disease, coupled to severe side effects caused by conventional treatments and the increasing development of resistance, has conducted to the demand for effective therapies with less toxicity. In this context, it is of great relevance the synthesis of synthetic products with structures based on natural products, which continue to be the main source of new medicines. In order to increase the effect and minimize the toxicity of piperine, an amide alkaloid with antitumor activity, it was obtained novel synthetic analogues, among them the 2-oxo-2-(4-ethylamine)-piperinoato acetate (HE-03). This study aimed to investigate the antitumor activity and toxicity of HE-03. The data demonstrate that HE-03 induced a small percentage of hemolysis to the highest concentration tested (1250 mg/mL), which suggests low toxicity to erythrocytes. In the preclinical acute toxicity study, the treatment with doses of 300 mg/kg and 2000 mg/kg of HE-03 in mice caused no deaths, and the changes observed in the CNS and ASN level were transient (30 min.). The LD50 value was estimated to be about 5000 mg/kg. HE-03 (6.25, 12.5 and 25 mg/kg) showed significant antitumor activity in vivo in ascites Ehrlich carcinoma model, especially considering the viability parameters and total cell. Its effect in doses of 12.5 and 25 mg/kg was similar to the one observed for the anticancer drug 5-fluorouracil (25 mg/kg). Cell cycle profile analysis showed that treatment with HE-03 (12.5 mg/kg) induced the appearance of sub-G1 peak, which was accompanied by a reduction in the number of cells in G0/G1 and S phases, suggesting induction of cell death by apoptosis. The treatment with HE-03 (12.5 mg/kg) significantly reduced peritumoral microvessels, which suggests anti-angiogenic activity. The toxicological analyzes indicate that the nine days of treatment with HE-03 at all doses, induced a significant increase in serum aspartate aminotransferase (AST) and urea. However, histopathology of the liver and kidneys showed that HE-03 does not induce changes of clinical importance. Leukopenia, accompanied by neutropenia, observed in animals treated with 25 mg/kg of HE-03 is one of the major side effects associated with cancer therapy. Futhermore, HE-03 did not induce an increase in the number of micronucleated erythrocytes in the micronucleus assay in peripheral blood, which indicates lack of genotoxicity in the evaluated conditions. Therefore, it is possible to infer that the synthetic analogue of studied piperine has potent antitumor activity in vivo, with mechanism that possibly involves the induction of apoptosis and antiangiogenic effects, as well as low toxicity. O câncer caracteriza-se pela proliferação descontrolada de células. A elevada taxa de mortalidade associada à doença, aliada aos graves efeitos indesejáveis causados pelos tratamentos convencionais e ao crescente desenvolvimento de resistência, tem impulsionado a procura por terapias mais eficazes com menor toxicidade. Nesse contexto, é de grande relevância a síntese de produtos sintéticos com estruturas baseadas em produtos naturais, que continuam a ser a principal fonte de novos medicamentos. Com o intuito de potencializar o efeito e minimizar a toxicidade da piperina, um alcaloide amida com atividade antitumoral, foram obtidos análogos sintéticos inéditos, dentre estes o 2-oxo-2-(4-etilamina)-piperinoato de etila (HE-03). Esse trabalho objetivou investigar a atividade antitumoral, bem como a toxicidade do HE-03. Os dados demonstram que HE-03 induziu pequeno percentual de hemólise até a maior concentração testada (1250 μg/mL), o que sugere baixa toxicidade nos eritrócitos. No ensaio de toxicidade pré-clínica aguda, o tratamento com as doses de 300 mg/kg e 2000 mg/kg do HE-03 não provocou mortes nos camundongos, e as alterações observadas em nível de SNC e SNA foram e de curta duração (30 min.) e sem significância no tempo observado. O valor da DL50 foi estimado em torno de 5000 mg/kg. HE-03 (6,25; 12,5 e 25 mg/kg) mostrou significante atividade antitumoral in vivo em modelo de carcinoma ascítico de Ehrlich, considerando especialmente os parâmetros viabilidade e total celular. Seu efeito nas doses de 12,5 e 25 mg/kg foi semelhante ao observado para o antineoplásico 5-fluorouracil (25 mg/kg). Na análise do perfil do ciclo celular, foi observado que o tratamento com HE-03 (12,5 mg/kg) induziu o aparecimento do pico sub-G1, que foi acompanhado por uma redução na quantidade de células nas fases G0/G1 e S, o que sugere indução de morte celular por apoptose. O tratamento com HE-03 (12,5 mg/kg) reduziu significativamente a microdensidade vascular peritumoral, o que sugere atividade antiangiogênica. As análises toxicológicas indicam que o tratamento de nove dias com HE-03, em todas as doses, induziu aumento significativo de aspartato aminotransferase (AST) e de ureia. Todavia, a histopatologia do fígado e dos rins mostrou que HE-03 não induz alterações de importância clínica. A leucopenia, acompanhada de neutropenia, observadas nos animais tratados com 25 mg/kg de HE-03 é um dos principais efeitos indesejáveis associados a terapia do câncer. Ainda, HE-03 não induziu aumento no número de eritrócitos micronucleados, no ensaio do micronúcleo em sangue periférico, o que indica ausência de genotoxicidade, nas condições avaliadas. Portanto, é possível inferir que o análogo sintético da piperina estudado apresenta potente atividade antitumoral in vivo, com mecanismo que envolve possivelmente a indução de apoptose e efeitos antiangiogênicos, bem como, baixa toxicidade.

Complexos de rutênio representam uma nova alternativa de quimioterápicos para o tratamento do câncer, com atividade em vários tipos de tumores, inclusive os resistentes a cisplatina, baixa toxicidade e seletividade para as células tumorais. Novos complexos de rutênio(II)/aminoácido (RuAA) foram testados contra células do tumor ascítico de Ehrlich (TAE), um carcinoma de mama murino, in vitro e in vivo. A concentração que inibe 50% o crescimento celular (IC 50 ) foi determinada pelo teste de MTT para as células de TAE e L929, fibroblasto murino. Com base nos valores de IC50 foi determinado o potencial seletivo dos complexos de RuAA e selecionados dois complexos de RuAA, denominados RuMet e RuTrp, mais promissores e a DL50 (dose letal mediana) foi estimada in vitro. O perfil tóxico dos complexos RuMet e RuTrp foi determinado pela toxicidade oral aguda pelo método de classe, screening hipocrático e a determinação do potencial genotóxico foi avaliada pelo ensaio cometa. A eficácia antitumoral dos complexos RuMet e RuTrp foi estabelecida pelo percentual de inibição do crescimento tumoral e o aumento da sobrevida in vivo após 24 h de inoculação do TAE. Camundongos Swiss foram tratados nas doses de 2 e 6 mg/Kg/dia, via intraperitoneal por 7 dias. Screening hipocrático, avaliação da viabilidade das células do TAE após tratamento, avaliação dos parâmetros hematológicos e bioquímicos também foram realizados. Os complexos de RuAA foram citotóxicos para as células do TAE in vitro com valor de IC 50 variando de 8,70 a 90,41µM. Os complexos de RuMet e RuTrp apresentaram potencial seletivo para as células do TAE. A estimativa in vitro de DL50 para os complexos RuMet e RuTrp foram superiores a 1000 mg/Kg, e in vivo estes complexos apresentaram baixa toxicidade e genotoxicidade. Os complexos RuMet e RuTrp apresentaram atividade antitumoral moderada a elevada em relação ao grupo veículo, com aumento do tempo médio de sobrevida (de 23,6 a 27,4 dias) e aumento percentua l de sobrevida (de 31 a 52%). Os complexos RuMet e RuTrp aumentaram o percentual de células de TAE mortas por apoptose. Não foram observados sinais de toxicidade ou alteração no comportamento dos animais. Parâmetros hematológicos apresentaram alteração na contagem de plaquetas nas doses de 6 mg/Kg/dia dos complexos de RuMet e RuTrp. A dosagem de lactato desidrogenase apresentou alteração na avaliação bioquímica. Os complexos de RuMet e RuTrp são eficientes, seletivos e potentes para células do tumor ascítico de Ehrlich apresentando citotoxicidade in vitro e atividade antitumoral in vivo, com aumento do tempo de sobrevida, com baixa toxicidade e genotoxicidade. Ruthenium complexes represent a new alternative anticancer chemotherapeutics, with activity against several types of cancer, including those resistant to cisplatin, low toxicity and selectivity for tumor cells. The new amino acids/ruthenium(II) complexes (RuAA) w ere tested against Ehrlich ascitic tumor (TAE) cells, murino mammary carcinoma, in vitro and in vivo . The concentration that inhibits 50% of cell viability (IC 50 ) was determined by MTT assay to TAE and L929 cells. Based on the values of IC50 value was determined selective potential of RuAA and selected two complexes most promising, estimated the LD50 (median lethal dose). The toxicological profile of RuMet and RuTrp was determined by acute oral toxicity following the class method, hippocratic screening, and determination of the genotoxic potential evaluated by the comet assay. The effectiveness of the antitumor potential of RuMet and RuTrp was established by the percentage of inhibition of tumor growth and increased survival in vivo after 24 hours of inoculation of TAE. Swiss mice were treated at doses of 2 and 6 mg/kg/day v.ip for 7 days. Hippocratic screening, assessment the viability of TAE cells after treatment, and hematological and biochemical parameters also were performed. Complexes RuAA are cytotoxic to TAE cells in vitro with IC50 value ranging from 8.70 to 90.41 µM. RuMet and RuTrp complexes showed selective and potent for tumor cells. The estimated in vitro LD50 for RuMet and RuTrp were higher than 1000 mg/kg, and in vivo these complexes have low toxicity and genotoxicity. RuMet and RuTrp complexes showed moderate to high antitumor activity compared to the vehicle group, with increased median survival time (from 23.6 to 27.4 days) and percentage increase in survival (from 31 to 52%). RuMet and RuTrp increased the percentage of cells killed by apoptosis initial. There were no signs of toxicity or changes in the behavior of animals. Hematological parameters showed alterations in platelet count at doses of 6 mg/kg/day complexes of RuMet and RuTrp. The dosage of lactate dehydrogenase showed a change in the assessment of biochemical parameters. Complexes of RuMet and RuTrp are efficient, selective and potent for ascitic tumor cells presenting in vitro cytotoxicity and in vivo antitumor activity, with increased survival time, with low toxicity and genotoxicity. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG

A proteína Kint3-4 (PKint3-4), codificadora da angiostatina, é reconhecida por sua potencialidade antiangiogênica. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da proteína Kint3-4 no crescimento do tumor sólido de Ehrlich. Para isso, foram analisados a curva de desenvolvimento tumoral, o índice apoptótico e a dosagem de hemoglobina, a fim de se avaliar a angiogênese, em 20 camundongos Swiss fêmeas, inoculadas com o tumor sólido de Ehrlich em seus coxins plantares. Os resultados demonstraram a participação de PKint3-4 na indução à apoptose de células neoplásicas, na diminuição da concentração de hemoglobina e, principalmente, na diminuição do desenvolvimento tumoral. Sugere-se que a ação antitumoral, determinada pela sequência proteica utilizada, possa estar associada ao papel antiangiogênico da angiostatina, que indiretamente aumentaria o índice apoptótico das células neoplásicas, e/ou a uma ação direta da proteína Kint3-4 sobre essas células, estimulando-as a sofrerem apoptose.

Sabe-se que complexos metálicos têm sido usados como agentes terapêuticos desde a antiguidade. No entanto, o reaparecimento de drogas inorgânicas iniciou-se em 1960 com o desenvolvimento e o sucesso da cisplatina como agente antitumoral. Apesar do sucesso dos compostos de platina, sérios problemas são enfrentados durante a administração dessas drogas, como nefro e neurotoxicidade e resistência. Em vista dos problemas relacionados com o tratamento a base de platina, outros quimioterápicos que sejam menos tóxicos ao organismo e mais eficientes tornam-se necessários. O estudo da atividade antitumoral se destaca com os complexos de rutênio, os quais têm demonstrado alta seletividade para células tumorais e baixa toxicidade sistêmica, quando comparados aos compostos de platina (II). O presente estudo teve como objetivo avaliar dois novos compostos de Rutênio (II), associados a aminoácidos, Alanina e Triptofano, com potencial antitumoral. No ensaio de citotoxicidade, os dois complexos de Rutênio foram avaliados frente a duas linhagens tumorais (B16-F10, Tumor de Ehrlich) e uma linhagem basal (L-929) através do teste de MTT, em diferentes concentrações dos compostos (0,2 – 200 μM) por 48 horas de tratamento. Foram realizados também análises de ciclo celular, ensaio cometa e teste Anexina V para avaliação do mecanismo de morte. Análise estatística para comparação entre os grupos tratados e controle foi utilizado Anova segundo um único critério e pós-teste Dunnet’s (software GraphPad Prism V4). Os valores de IC50 estimados foram 16,17μM (RuAla) e 7,75μM (RuTrp). O composto RuAla mostrou-se específico para a linhagem B16-F10 e apresentou capacidade de alterar o ciclo celular das células, parando a ciclagem em fase G0/G1, e também demonstrou induzir morte celular por apoptose em 48 horas de tratamento. O composto RuTrp apresentou alto potencial citotóxico frente ao Tumor de Ehrlich, interferiu na cinética do ciclo celular, parando o ciclo celular em fase G0/G1. O RuTrp também induziu morte celular por apoptose, entretanto somente apresentou dano ao material genético em altas concentrações. Todavia, teste mais específicos são necessários para a elucidação do mecanismo de ação desses dois novos composto a base de Rutênio (II) com promissores resultados anti-câncer. It is well known that metal complexes have been used as therapeutic agents since ancient times. However, with the success of cisplatin development as an antitumor agent in 1960inorganic drugs come to mainstream again. Despite the success of platinum compounds, serious problems are encountered when administering these drugs, such as nephrotoxicity, neurotoxicity and acquired resistance. In face of these problems other chemotherapeutic agents, less toxic to the organism and more efficient, become necessary. Several studies have been shown that ruthenium compounds present high selectivity for tumor cells and low systemic toxicity when compared to platinum (II) compounds. The present study evaluate antimor activity of two new ruthenium(II) compounds associated with amino acids, alanine and tryptophan. Ruthenium(II) compound were tested against B16-F10 and Ehrlich tumor cell lines and L-929 basal line using MTT assay, at different concentrations (0.2 - 200 mM) for 48 hours of treatment. Cell cycle analysis and apoptosis induction analyses by flow citometry and comet assay for DNA damage were also performed The IC50 values were estimated as 16.17 mM (RuAla) and 7.75 mM (RuTrp). The compound RuAla proved to be specific for the B16-F10 tumor cell line and showed a significant ability to change cell cycling profiles, arresting cells inG0/G1 phase, and also inducing cell death by apoptosis within 48 hours of treatment. The compound RuTrp showed high cytotoxic potential against Ehrlich tumor, interfering cell cycle kinetics,causing cell cycle arrest in G0/G1 phase and inducing cell death by apoptosis. Comet assay presented damage to genetic material only when cells were trated with high concentrations of RuTrp. , RuAla and RuTrp presented relevant cytotoxic activities towards tumor lineages tested in vitro. Thus, more specific tests are needed to elucidate the mechanism of action of these promising The ruthenium(II) compounds. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2011. O aumento crescente da incidência de câncer e a necessidade de se desenvolver terapias mais eficazes com o mínimo de efeitos adversos têm suscitado a busca de tratamentos alternativos. Entre estes, duas terapias promissoras são a magnetohipertermia (MHT) e a terapia fotodinâmica (TFD), as quais podem proporcionar ainda maior eficácia se realizadas com materiais nanoestruturados. O presente trabalho teve o objetivo de, utilizando modelos de tumor sólido de Ehrlich, verificar a atividade antitumoral de duas amostras à base de nanoesferas de albumina: (1) amostra contendo nanopartículas magnéticas à base de maghemita (PAM) usadas na concentração de 1,2 × 1015 partículas magnéticas/mL foi testada para MHT de tumores localizados na cabeça após administração de 5,5 × 104 células tumorais e (2) amostra contendo 0,5 mM zinco-ftalocianina tetrassulfonada (PAF) para TFD na orelha após administração de 2,75 x 104 células tumorais. PAM e PAF foram usadas, respectivamente, em diferentes protocolos de MHT e TFD. MHT foi feita com equipamento operando a 1 MHz e 40 Oe de amplitude de campo e foram realizadas análises histológicas do tumor para verificar o grau de necrose. As análises mostraram que dois dos animais submetidos à MHT duas vezes ao dia, durante três dias consecutivos, apresentaram 100% de necrose e ausência de proliferação celular. Para a realização da TFD foi usado luz laser com comprimento de onda de 670 nm e animais distribuídos em três grupos experimentais. A avaliação dos procedimentos foi feita por observações clínicas (peso do animal, peso e volume do tumor), testes hematológicos e bioquímicos, análise morfológica, tanto do fígado, quanto dos rins para avaliar possíveis alterações teciduais, e análises morfométricas do tumor para avaliar o grau de necrose obtido. Para validar os experimentos de TFD, grupos tratados com o quimioterápico doxorrubicina (Dox) foram investigados. Os resultados mostraram que a TFD, quando realizada de três em três dias durante nove dias experimentais induziu necrose equiparável ao do tratamento com Dox, com menos efeitos adversos, sobretudo no fígado; Já os tratamentos combinados com TFD e Dox não apresentaram efeitos sinérgico ou antagônico. Em geral, os melhores protocolos de MHT e TFD levaram a pelo menos 60% de necrose. Conclui-se que as nanoesferas de albumina, além de altamente biocompatíveis, representam material nanoestruturado eficaz na realização da MHT e TFD que, embora nem sempre tenham causado a remissão total do tumor, revelaram significativa atividade antiproliferativa, apresentando alto potencial para tratamento do câncer. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT The increasing incidence of cancer and the need to develop more effective therapies with minimal collateral effects have prompted the search for alternative treatments. Among these, two promising therapies are magnetohyperthermia (MHT) and photodynamic therapy (PDT), which can be even more efficient if performed with nanostructured materials. The present work was aimed to investigate the antitumor activity of two samples based on albumin nanospheres: one containing magnetic nanoparticles (PAM) and another containing zinc-phthalocyanine tetrasulfonated (PAF) while using the model of Ehrlich solid tumor (head for MHT and ear for PDT). PAM and PAF were used in different protocols of MHT and PDT, respectively. MHT was performed with the equipment operating at 1 MHz and 40 Oe, while PDT have used light source at 670nm. The evaluation of both procedures was made by clinical observations (weight of animal, weight, volume, and size of tumor), cytometry, haematological, and biochemical tests, and morphological analysis of the liver and kidney tissue to evaluate possible changes, and also morphology of tumor to assess the degree of necrosis induced. Two animals submitted to MHT showed 100% necrosis. In general, the best protocols of MHT and PDT led to at least 60% necrosis. To validate the PDT experiments, groups treated with the chemotherapeutic agent doxorubicin (Dox) were investigated. PDT and Dox induced comparable necrosis. PDT showed fewer side effects than Dox. PDT and Dox showed no synergistic or antagonistic effect. We conclude that the highly biocompatible albumin nanospheres represent nanostructured material efficient in performing the MHT and PDT procedures. Though they not caused total remission of the tumor, they showed significant antiproliferative activity evidencing a high potential for cancer treatment.

Neste trabalho foi investigado o efeito do extrato hidroalcoólico de própolis (EHP) de Scaptotrigona aff. postica sobre o desenvolvimento do tumor de Ehrlich na forma sólida, sobre a celularidade dos órgãos linfóides dos animais portadores de tumor, bem como, sobre a produção de óxido nítrico (NO) pelos macrófagos destes animais. Camundongos Swiss foram divididos em quatro grupos: controle, EHP 0,5; EHP 5 e EHP 50, os quais foram tratados por via intraperitoneal com dose única de solução salina (NaCl 0,9%); 0,5; 5 ou 50 mg de EHP/kg de animal, respectivamente. Depois de 48 h do tratamento, os animais foram inoculados com 10(5) células do tumor de Ehrlich nas patas. Os resultados mostraram que o tratamento com EHP nas doses de 5 e 50 mg/kg inibiu de forma significativa o desenvolvimento do tumor a partir do 6º dia pós-inóculo quando comparado ao controle e ao EHP 0,5. Além disso, houve aumento significativo da celularidade do baço e da medula óssea nos grupos EHP 0,5 e EHP 5 em relação ao controle. A produção de NO estimulada com concanavalina A (ConA) apresentou uma significante diminuição nos grupos tratados com EHP em relação ao controle. Pode-se concluir que o tratamento com EHP apresentou efeito antitumoral quando administrado nas doses de 5 e 50 mg/kg, o que pode estar relacionado com a sua composição química e com a inibição da produção de NO. It was investigated the effect of hydroalcoholic extract (HEP) of propolis from Scaptotrigona aff. postica on the solid Ehrlich tumor, on the tumor-bearing mice lymphoid organs and on the nitric oxide (NO) production. Swiss mice were divided in 4 groups: control, HEP 0.5; HEP 5 and HEP 50 that was treated by intraperitoneal route with a single dose of saline solution (NaCl 0.9%) or 0.5 or 5 or 50 mg of HEP/kg body weight, respectively. After 48 h of treatment, the animals were inoculated with 10(5) tumor cells in their footpad. The results showed that the treatment with HEP in the doses of 5 and 50 mg/kg inhibited the development of the tumor from the 6th day post inoculums when compared to the control and to the HEP 0.5 groups. Besides, there was an increase of spleen and bone marrow cell number in HEP 0.5 and HEP 5 as compared to the control. Concanavalin A (ConA)-stimulated NO production was decreased in all HEP-treated groups when compared to the control. In conclusion, the treatment with HEP had an anti-tumor effect what may be related to its chemical composition and to the inhibition of NO production.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-05Bitstream added on 2014-06-13T19:13:53Z : No. of bitstreams: 1 rocha_mc_me_arafcf.pdf: 757379 bytes, checksum: f386cabb4d38b8f9552bfba42f8b50aa (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Universidade Estadual Paulista (UNESP) O câncer destaca-se pela alta incidência e mortalidade. O tratamento do câncer compreende cada vez mais a quimioterapia combinada, ou seja, substâncias antitumorais agindo conjuntamente com as células do sistema imune, potencializando-as ou apenas mantendo-as viáveis para exercerem sua função. Dentre os tipos celulares que constituem o sistema imunológico, os macrófagos são apontados como os principais elementos do organismo de combate aos tumores. Os macrófagos ativados agem liberando produtos tais como radicais de oxigênio (H2O2) e nitrogênio (NO), interleucina-1ß (IL-1ß) e fator de necrose tumoral (TNF-a), que são prejudiciais às células tumorais dependendo da concentração, além de sua ação indireta através da secreção de interferon-gama (IFN-.). Complexos de paládio(II) são investigados há décadas, destacando-se por sua potencialidade como agente antitumoral. Neste trabalho avaliou-se a ação dos compostos [Pd(dmba)(X)(dppp)] (X= SCN, NCO, N3 ou Cl) sobre as células tumorais de Ehrlich e macrófagos in vitro, utilizando como padrão a cis-platina (cis-Pt). Para tanto, foram realizados ensaios para determinação do índice de citotoxicidade mediano, o IC50, para cada composto pelos períodos de 24 e 48h e com base em tais concentrações investigadas para os macrófagos verificou-se a produção e/ou inibição de NO e H2O2, além das citocinas TNF-a, IFN-. e IL-1 bem como a atividade citotóxica/citolítica. Os compostos demonstraram ser agentes promissores por seus efeitos sobre as células tumorais e imunes, muitas vezes de forma igual ou superior à cis-Pt, droga de uso corrente na quimioterapia do câncer. The cancer is a disease with high incidence and mortality. The cancer treatment involves the combinated chemotherapy wich one involves antitumour substances acting along with the immune cells, stimulating or only keeping them able to act in the immune response. Between the cell types that belong to the immunological system, the macrophages are considered the main elements of the body that can act against tumours. The activated macrophages act releasing substances like oxygen (H2O2) and nitrogen (NO) radicals, interleukin-1 (IL-1) and tumour necrosis factor alpha (TNF-á), wich are not beneficial to the tumour cells in some concentrations, besides its indirect action towards interferon-gama (IFN-ã) release. Palladium(II) complexes are employed in many studies to verify its antitumour properties. For example we can describe the four following compounds: [Pd(dmba)(X)(dppp)], X= SCN, NCO, N3 or Cl. This work had as goal the evaluation of the action of such compounds towards Ehrlich tumour cells, macrophages and lymphocytes in vitro, employing cis-platin (cis-Pt) as standard. The following parameters were evaluated: the cytotoxic index (IC50) of each compound after 24 and 48h incubation for Ehrlich tumour cells, macrophages and lymphocytes; the immunological behaviour of the compounds in the concentrations previously determined such as NO and H2O2 production or inhibition, besides the cytokines TNF-á, IFN-ã and IL-1 as well as the cytotoxic/cytolitic activity. The compounds presented a good behaviour, based on their efects towads tumour and immune cells, many times like or even better than cis-Pt, standard drug in cancer chemotherapy.

Estudou-se a influência do tratamento diário com filtrado aquoso de Agaricus blazei Murrill (ABM) (25mg/ml), via oral, por 17 e 57 dias, em camundongos inoculados com tumor sólido de Ehrlich (TSE) por meio da curva de crescimento tumoral, do peso relativo do tumor, da contagem de regiões organizadoras de nucléolos (AgNORs) e dos padrões histológicos das massas tumorais e linfonodos poplíteos. Os animais que ingeriram o extrato aquoso do ABM por 57 dias apresentaram menor (P0,05) entre os animais tratados e não tratados. The influence of daily administration of Agaricus blazei Murrill (ABM) aqueous solution (25mg/ml) during 17 and 57 days in mice bearing solid Ehrlich tumor was studied. Tumoral growth, tumoral and spleenic relative weights, nucleoly organization regions AgNORs values and tumor and popliteal lymph nodes histopathology were daily evaluated. The animals that received ABM during 57 days showed lower values (P0.05) between treated and non-treated animals. No difference in microscopic evaluation of the tumors in treated and non-treated animals was seen and metastasis in popliteal nodes of the tumor occurred in all the animals.

The main purpose of this study was to investigate the effect of thyroxine and PTU in ascitic Ehrlich tumor cells. Tumor was implanted in 30 female mice distributed in three groups: treated with PTU, treated with thyroxine and control. Each group received an intraperitoneal injection of neoplastic cells, pre-incubated with sterile solutions of PTU, thyroxine and distilled water, respectively. On the fifth and seventh days after inoculation, animals received an intraperitoneal injection of the respective solutions. On the tenth day after inoculation, animals were sacrificed. Volume of ascitic liquid, number of neoplastic cells/ml and percentage of viable cells were determined. Ascitic liquid smears were carried out for tumor cytological evaluation. There was no difference among groups regarding ascitic liquid and as for the number and viability of tumor cells. However, cells under the effect of thyroxine presented significantly larger mean of nuclear diameter, size and number of nucleolus organizer regions. In this group, there was a predominance of clear, round cells with abundant eosinophilic and very vacuolated cytoplasm with little defined edges. Under the PTU effect, tumor cells were small with hyperchromatic nucleus and the same number of NORs as the control group. It was concluded that PTU and thyroxine have not changed the number and viability of cells after 10 days of tumor inoculation but they changed significantly cell characteristics. Whilst thyroxine increases cell size and the number of NORs of ascitic Ehrlich tumor cells, PTU causes an opposite effect El propósito principal de este estudio ha sido investigar el efecto de la tiroxina y del propiltiouracilo (PTU) en las células del tumor de Ehrlich. El tumor fue implantado en 30 ratones hembras distribuidas en tres grupos: tratado con PTU, tratado con tiroxina y control. Cada grupo recibió una inyección intraperitoneal de células neoplásicas, pre-incubadas con las soluciones estériles de PTU, tiroxina y agua, respectivamente. En el quinto y séptimo días después de la inoculación, los animales recibieron una inyección intraperitoneal de las soluciones respectivas. En el décimo día después de la inoculación, se sacrificaron los animales. Fueron determinados el volumen de líquido ascítico, el número de células/ml y el porcentaje de células viables. Además se realizaron frotis del líquido ascítico para la evaluación de la citología del tumor. No hubo ninguna diferencia entre los grupos con respecto al volumen del líquido ascítico y el número y viabilidad de las células del tumor. Sin embargo, las células bajo el efecto de la tiroxina presentaron una media significativamente superior del diámetro nuclear, tamaño y número de regiones organizadoras de nucleélos. En este grupo, había un predominio de células claras, redondas con citoplasma abundante, eosinofílico y vacuolado con poca definición de los bordes. Bajo el efecto del PTU, las células del tumor eran pequeñas con el núcleo hipercromático y el mismo número de NORs como el grupo control. Se concluye que el PTU y tiroxina no afectaron el número y viabilidad de las células después de 10 días de inoculación del tumor, pero sí cambiaron las características celulares. Aunque la tiroxina aumenta el tamaño celular y el número de NORs de las celulas del tumor de Ehrlich, PTU causa efectos opuestos

Estudou-se atividade antineoplásica de um produto natural isolado de Alomia myriadenia (miriadenolídeo) no modelo do tumor de Ehrlich em camundongos. Dezoito fêmeas de camundongo Swiss foram inoculadas com 2x10(7) células viáveis de tumor de Ehrlich via intraperitoneal (0,3ml) e posteriormente distribuídas aleatoriamente em três grupos que receberam: grupo I (controle) - 0,3ml de solução de Hanks; grupo II - 31µg/kg de miriadenolídeo; e grupo III - 139µg/kg de miriadenolídeo. No oitavo dia de experimento, foram realizados exames hematológicos e perfil protéico sérico eletroforético. Coletou-se todo o líquido ascítico para avaliação do volume, aparência, pH, contagem de células viáveis e inviáveis, realização de esfregaços para contagem de células claras e escuras, leucócitos e avaliação das regiões organizadoras de nucléolos argentafins (AgNORs). Foram realizados exames macro e microscópicos do baço, fígado e rins e aspirado o conteúdo da medula óssea dos fêmures direito e esquerdo de cada animal para avaliação da relação mielóide:eritróide. Não houve diferença significativa no volume, pH, contagem de células viáveis e inviáveis entre os três grupos estudados, observando-se valores de 17,6 x 10(4) células tumorais viáveis no grupo III, 27,7 x 10(4) no grupo II e 21,1 x 10(4) no grupo I. As AgNORs apresentaram-se pequenas, com distribuição difusa e incontáveis no grupo I, e em menor quantidade no grupo III. Os animais do grupo III apresentaram a menor concentração protéica total sérica (4,7g/dl) (P

Antitumoral activity of a natural product of Alomia myriadenia (myriadenolide) in Ehrlich tumor in mice was studied. Eighteen Swiss female mice were intra-peritoneal inoculated 2x107 viable cells of Ehrlich Tumor (0.3ml) and randomly distributed in three groups receiving via intra-peritoneal on the 3rd and 5th day post-inoculation the following treatments: group I (control) - 0.3ml Hanks solution; group II: 31µg/kg myriadenolide; and group III: 139µg/kg myriadenolide. On the eighth day of the experiment blood profile and protein serum electrophoresis were performed. All ascitic liquid was collected to evaluate the volume and pH; to observe the aspect; to count viable and no viable cells, dark and clear cells, leukocytes and nucleolar organizer regions (NORs). Macro and microscopic exams were performed and bone marrow was aspirated from right and left femurs of each animal to evaluate myeloid:erythroid ratio. It was not observed difference in volume, pH, counts viable and no viable cells in the groups, although group III showed smaller number of viable tumoral cells (17.6 x 104) when compared to the group II (27.7 x 104) and group I (21.1 x 104). The investigation of NORs to evaluate the proliferative capacity of tumoral cells after myriadenolide treatment showed that cells were smaller, uncountable and with diffuse distribution in group I. They were in lower quantity in group III. These results suggest that myriadenolide in dose 139µg/kg (group III) delay the tumoral growing and, probably, cell proliferation. The animals of group III showed lower value of total protein (4.7g/dl) (P

Twenty BALB/c mice were inoculated with cell suspension of Ehrlich tumor. Ten mice were inoculated in the cushion plant (solid form) and the other 10 in the peritoneum (ascitic form). Animals were euthanized on different times (7 and 14 days). Cytological and histological slides, immunohistochemical (PCNA) analysis and NORs silver impregnation technique were performed. The results showed more proliferation on the 7th day in the ascitic form and on 14th day in the solid form, using both analyses (PCNA and AgNORs). The alterations observed in the Ehrlich tumor’s proliferation activity suggested that the growth curve is different between ascitic and solid forms. In the first one, the proliferation peak occurs on the seventh day and in the solid tumor the growth curve was more delayed, showing increased proliferative potential after seven days.

Submitted by Alessandra Estrela-Lima (aestrela@ufba.br) on 2012-02-08T21:54:31Z No. of bitstreams: 1 a30v58n4.pdf: 196624 bytes, checksum: 2f722eb278c32a53ba1323c1971abf13 (MD5) Made available in DSpace on 2012-02-08T21:54:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 a30v58n4.pdf: 196624 bytes, checksum: 2f722eb278c32a53ba1323c1971abf13 (MD5) Previous issue date: 2006-08 Twenty BALB/c mice were inoculated with cell suspension of Ehrlich tumor. Ten mice were inoculated in the cushion plant (solid form) and the other 10 in the peritoneum (ascitic form). Animals were euthanized on different times (7 and 14 days). Cytological and histological slides, immunohistochemical (PCNA) analysis and NORs silver impregnation technique were performed. The results showed more proliferation on the 7th day in the ascitic form and on 14th day in the solid form, using both analyses (PCNA and AgNORs). The alterations observed in the Ehrlich tumor s proliferation activity suggested that the growth curve is different between ascitic and solid forms. In the first one, the proliferation peak occurs on the seventh day and in the solid tumor the growth curve was more delayed, showing increased proliferative potential after seven days.

Foi estudado o efeito do hipotireoidismo, induzido pelo propiltiouracil (PTU), no tumor de Ehrlich sólido, implantado em camundongos fêmeas adultas castradas ou não. Foram utilizados 40 animais distribuídos em quatro grupos: hipotireóideo castrado, hipotireóideo não castrado, eutireóideo castrado e eutireóideo não castrado. Os animais receberam uma injeção de células neoplásicas no coxim plantar esquerdo. A curva de crescimento tumoral foi determinada por mensurações da pata inoculada durante 12 dias quando os animais foram necropsiados. A hipofunção tireoidiana reduziu o tamanho do tumor de Ehrlich nos animais castrados. Embora o crescimento neoplásico tenha sido menor, o diâmetro nuclear médio e o número de regiões organizadoras de nucléolos (NORs) e de mitoses/campo foram maiores. Conclui-se que o hipotireoidismo retarda o crescimento do tumor de Ehrlich sólido, sem alterar as características celulares de malignidade, que o efeito isolado da castração causa alterações discretas e que a associação hipotireoidismo-castração potencializa o retardo do crescimento do tumor de Ehrlich sólido. The effect of hypothyroidism on the solid form of the Ehrlich tumor in intact or castrated adult female mice was studied. Hypothyroidism was induced by treatment with propylthiouracil (PTU). Forty mice were divided into four groups: castrated hypothyroid, intact hypothyroid, castrated euthyroid, and intact euthyroid. The mice were inoculated with suspension cells into the left footpad. The tumor growth curve was determined by measuring the inoculated footpad during 12 days. At the end of the experimental period the mice were sacrificed. Hypothyroidism was associated with a reduction in size of the tumor only in the castrated animals. Although the neoplastic growth was lower, mean nuclear diameter, number of nucleolar organizer regions (NORs), and area of mitosis were higher. In conclusion, hypothyroidism resulted in a delayed growth of the tumor, but it did not affect the malignant features of the neoplastic cells. In addition, the isolated effect of castration caused only mild alterations, whereas hypothyroidism associated with castration resulted in a more prominent delay in the growth rate of the Ehrlich tumor.

The effect of hypothyroidism on the solid form of the Ehrlich tumor in intact or castrated adult female mice was studied. Hypothyroidism was induced by treatment with propylthiouracil (PTU). Forty mice were divided into four groups: castrated hypothyroid, intact hypothyroid, castrated euthyroid, and intact euthyroid. The mice were inoculated with suspension cells into the left footpad. The tumor growth curve was determined by measuring the inoculated footpad during 12 days. At the end of the experimental period the mice were sacrificed. Hypothyroidism was associated with a reduction in size of the tumor only in the castrated animals. Although the neoplastic growth was lower, mean nuclear diameter, number of nucleolar organizer regions (NORs), and area of mitosis were higher. In conclusion, hypothyroidism resulted in a delayed growth of the tumor, but it did not affect the malignant features of the neoplastic cells. In addition, the isolated effect of castration caused only mild alterations, whereas hypothyroidism associated with castration resulted in a more prominent delay in the growth rate of the Ehrlich tumor.