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Debido al uso frecuente del triclabendazol (TCBZ) por parte de los productores, sumado al reporte reciente de resistencia de Fasciola hepatica al fármaco detectada en rodeos y majadas de Neuquén, se llevó a cabo el presente trabajo con el objetivo de evaluar la eficacia del TCBZ como fasciolicida en caprinos bajo un sistema de producción trashumante del norte de la provincia de Neuquén, Argentina. La eficacia se evaluó mediante un test de reducción de conteo de huevos de F. hepatica en caprinos Criollo Neuquino parasitados naturalmente. Se utilizaron dos grupos de animales: un Grupo Control (n: 10) que no recibió tratamiento y un Grupo Tratado (n: 10) al que se le administró TCBZ al 10% (Biofasiolex T10-Biogénesis Bagó ®) vía oral a dosis de 10 mg/kg PV. Al día 0 y 21 post tratamiento, se tomaron muestras de materia fecal para análisis coproparasitológicos. Se evidenció una reducción del conteo de huevos de F. hepatica del 100%, indicando el mantenimiento de la eficacia del fasciolicida en los caprinos evaluados. Se discuten los alcances del uso del test de reducción de conteo de huevos en zonas con producción trashumante del ganado. Because of the frequent use of triclabendazole TCBZ by farmers and the recent reports of Fasciola hepatica resistance to this drug in herds and flocks from Neuquén, we carried out this study with the aim to evaluate the efficacy of TCBZ as fasciolicide in goats under a transhumance system from northern of Neuquén, Argentina. A fecal egg count reduction test (FECRT) was performed on Creale Neuquino goats naturally parasitized with F. hepatica. Twenty goats were divided into two groups: A control group (n: 10) which was left untreated, and a treatment group (n: 10) that was dosed orally with TCBZ 10% (Biofasiolex T10-Biogénesis Bagó ®). On Day 0 and Day 21 post-treatment, fecal samples were taken and analyzed by coproscopical examination. According to the FECRT, drug efficacy was 100 % and confirms that TCBZ maintains its efficacy against F. hepatica on goats. The usefulness of the FECRT in these zones under transhumance livestock production is discussed. AER Chos-Malal Fil: Centelles, Ivan Jesus. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Agencia de Extensión Rural Chos-Malal; Argentina Fil: Martinez, Agustín. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche; Argentina Fil: Cabrera, Francisco Raul. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche; Argentina Fil: Castillo, Belisario. Provincia de Neuquén. Secretaria de Desarrollo Territorial y Ambiente. Agencia de Producción y Sanidad; Argentina Fil: Larroza, Marcela Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche; Argentina

Perú es un país hiperendémico para la infección por Fasciola hepática. Triclabendazol (TCBZ) es la droga de elección para tremátodos hepáticos; aunque, en los últimos años se ha incrementado los casos de resistencia en humanos y animales, especialmente en Cajamarca. Recientes reportes informan de la presencia de trazas de TCBZ en alimentos cárnicos y lácteos. Se evaluó mediante encuestas las prácticas y costumbres de los ganaderos productores de leche, y proveedores de TCBZ en Cajamarca, que podrían explicar la presencia de los metabolitos de TCBZ en la leche ordeñada, y su transferencia a los humanos. También, se realizó la técnica de sedimentación rápida (TSR) y Kato- Katz, se confirma la presencia de huevos de F. hepatica en las vacas en tratamiento con TCBZ. El TCBZ en dosis únicas y “al ojo” no fueron eficaces para el control y tratamiento en las vacas infectadas con F. hepatica. Además, se determinó que el triclabendazol sulfóxido (TCBZSO) y triclabendazol sulfona (TCBZSO2) a un tiempo de retiro aproximado de 20 días se encuentran en la leche cruda de vacas a nivel cuantificable mínimo de 0.006 ug/mL y 0.015 ug/mL, respectivamente; a este tiempo de retiro no se detectó el TCBZ por Cromatografía Líquida de Alta Performance con Detector de Arreglo de Diodos (HPLC-DAD). Se necesitan nuevos regímenes de control por parte de la autoridad sanitaria competente, ya que en el ámbito nacional no existe un tiempo de retiro y un límite máximo de residuos (LMR) vigente para el TCBZ y sus metabolitos, que garanticen la inocuidad de los lácteos. Peru is a hyperendemic country for Fasciola hepatica infection. Triclabendazole (TCBZ) is the drug of choice for liver flukes, although in the last years the cases of drug-resistant flukes in humans and animal have increased, especially in Cajamarca. Recent reports inform of TCBZ traces in meat and dairy products. Surveys were applied to assess the practices and customs of dairy farmers and TCBZ providers in Cajamarca, which could explain the presence of TCBZ metabolites in fresh milk and how they transfer to humans. In addition, the Rapid Sedimentation Technique (RST), and Kato-Katz technique were employed, confirming the presence of Fasciola hepatica eggs in cows under TCBZ treatment. Single doses of TCBZ measured by guesswork were not efficient for the control and treatment of cows infected with Fasciola hepatica. In addition, it was also determined that Triclabendazole Sulfoxide (TCBZSO) and Triclabendazole Sulfone (TCBZSO2), at an approximate withdrawal time of 20 days, were present in raw cow milk at a minimum quantifiable level of 0.006 ug/mL and 0.015 ug/mL, respectively; TCBZ was not detected at this withdrawal time by High-Performance Liquid Chromatography with Diode-Array Detection (HPLC-DAD). New control systems from the competent health authorities are required since no withdrawal time and maximum residue limit (MRL) of TCBZ and its metabolites have been established at national level to guarantee the safety of dairy products.

El presente trabajo de investigación se realizó con el objetivo de determinar la presencia de niveles de residuos en leche de los antihelmínticos benzimidazoles Triclabendazol (TCBZ) y Albendazol (ABZ), usados frecuentemente en el control de Fasciola hepatica, parásito trematode que afecta a rumiantes domésticos, principalmente bovinos y ovinos, se evaluó además sus potenciales efectos inmunotóxicos por exposición crónica en ovinos. Se determinó la presencia de niveles de los metabolitos residuales del TCBZ (TCBZ SO y TCBZ SO2 y ABZ (ABZSO y ABZSO2) en 30 muestras de leche cruda bovina comercializada en el distrito de Cajamarca mediante la técnica de Cromatografía Líquida Acoplada a Espectrometría de Masas en Tándem (LC-MS/MS). El método fue validado de acuerdo con las directrices 2002/657/EC. La selectividad fue demostrada, los analitos presentaron valores de recuperación entre 80% y 100%. Se demostró la presencia de residuos de TCBZ en el 23% de las muestras analizadas. Las concentraciones de residuos excedieron en el 26.65% (44-305 µg/kg), el LMR permitido. El metabolito TCBZ SO2 se encontró en el 70% de las muestras positivas, TCBZ SO (20%) y TCBZ (10%) respectivamente. No se encontraron residuos de metabolitos de ABZ. Los resultados obtenidos fueron comparados con los estándares establecidos por el Codex Alimentarius y EMEA. Los resultados indican que en Cajamarca se comercializa leche con residuos de TCBZ. Se evaluó el efecto del TCBZ sobre las respuestas celulares en sangre de: eritrocitos, hematocrito, leucocitos, subpoblaciones linfocitarias CD4 y CD8 y la expresión de citoquinas IL4 e IFNγ en linfocitos T de sangre periférica de ovinos infectados con F. hepatica. El estudio se llevó a cabo en 14 ovinos, los animales del grupo en tratamiento (n=8) fueron experimentalmente infectados con metacercarias de F. hepatica y a 7 tratamientos continuados con TCBZ. El grupo control (n=6) se mantuvo libre a la infección con F. hepatica y al tratamiento con antihelmínticos. Los efectos del tratamiento con TCBZ en animales infectados experimentalmente con F. hepatica, sobre los valores hematológicos mostraron una disminución significativa de eritrocitos, hematocrito y leucocitos (p

Introducción: Perú es un país hiperendémico para infección por Fasciola hepatica. Triclabendazol (TCBZ) es la droga de elección para tremátodos hepáticos; aunque, en los últimos años, se ha incrementado los casos de resistencia en pacientes humanos y animales. Recientes reportes informan de la presencia de trazas de TCBZ en alimentos cárnicos y lácteos, atribuible a deficiencias en el control de la calidad de la droga suministrada y/o en el manejo zootécnico de las cabezas de ganado de producción. El presente estudio evaluó las prácticas y costumbres de los ganaderos productores de leche, y proveedores de TCBZ en Cajamarca, que podrían explicar la presencia de sus metabolitos en la leche ordeñada y, así, su transferencia a los humanos. Metodología: Se realizó 2 encuestas, dirigidas a ganaderos productores de leche de vacuno, y a los expendedores de productos agro-veterinarios, localizados en tres caseríos y una ciudad del departamento de Cajamarca. Resultados: Todos los ganaderos encuestados (n=15) tenían un total de 90 vacas. De ellos, 12 (80,0%) suelen consultar a un veterinario para el uso de medicamentos. Con respecto al TCBZ, el tiempo de espera para ordeñar es de 1-2 días (36,36%) y 2-8 días (63,64%). El 72,7% de ganaderos adquieren el TCBZ de veterinarias y 3 de otros establecimientos (27,3%). Los responsables que expenden productos agro-veterinarios encuestados (n=15) tienen nivel educativo técnico (46,67%), secundario (33,33%) o universitario (20,0%). El antiparasitario más vendido es el TCBZ (41,667%), ivermectina (29,167%), albendazol (25,0 %) y otros (4,167%). La mayoría (86,67%) adquiere los medicamentos con marca registrada de algún laboratorio. Conclusiones: Para fasciolosis, TCBZ se vende más en zonas altas (caseríos); y albendazol en zonas bajas (ciudad). Los ganaderos venden la leche pese a que las vacas están con tratamiento de TCBZ; ello evidencia deficiencias de capacitación y control por la autoridad sanitaria competente. 2019-09-05

Fasciola hepatica es el agente causal de la fasciolosis, enfermedad parasitaria zoonótica. Desde un punto de vista productivo, la enfermedad cobra relevancia en la cría de ovinos y bovinos en diferentes partes del mundo, incluidas amplias regiones de la Argentina. De las diferentes medidas de control disponibles, el tratamiento químico es el más utilizado. Si bien se conocen distintos grupos químicos, el triclabendazole (TCBZ) ha sido el compuesto de elección en ovinos y bovinos debido a que el mismo presenta una elevada eficacia sobre estadios inmaduros y maduros de F. hepatica. El uso indiscriminado de estos compuestos químicos en diferentes regiones del mundo ha generado una importante presión de selección, reportándose el desarrollo de cepas de F. hepatica resistentes a la mayoría de los fasciolicidas, especialmente a TCBZ. En este contexto, la vacunación aparece como una herramienta interesante para el control de este parásito. Las enzimas Glutatión S-Transferasas (GSTs) son el principal sistema de detoxificación de fase II en parásitos helmintos. Se ha demostrado que F. hepatica presenta niveles elevados de GST con funciones fisiológicas importantes. En el presente proyecto de Tesis se evaluó la expresión y actividad de enzimas de las diferentes vías metabólicas de detoxificación involucradas en el proceso de metabolización de TCBZ de Fase I: Carboxil estearasa (CE) y de Fase II: Glutation S-Transferasa, Glutatión Peroxidasa y Glutatión Reductasa (GSR) por parte de diferentes cepas de F. hepatica susceptible y resistentes a TCBZ. Se detectó una respuesta multienzimática que involucra a toda la familia de enzimas dependientes de glutatión (GSH). La enzima CE no expresó diferencias significativas entre las cepas evaluadas. Dicha enzima no estaría involucrada en el fenómeno de resistencia. Se demostró que la actividad citosólica es aproximadamente 50% más efectiva en las GSTs correspondientes a cepas resistentes a TCBZ. Cuando se analizaron las diferentes isoenzimas se determinó que la isoenzima Mu no solo está implicada en los fenómenos de detoxificación sino que además participaría en el fenómeno de resistencia antihelmíntica. Al evaluar el grado de implicancia de dicha isoenzima Mu, hemos identificado y caracterizado genéticamente el gen GST Mu aislado de las cepas de F. hepatica susceptible (TCBZ-S) y resistente (TCBZ-R) a TCBZ. Se detectó una mutación en el gen la cual modifca el aminoácido 143 de la isoenzima GST Mu en la cepa TCBZ-R pudiendo ser la misma parte responsable de la sobreexpresión del sistema enzimático metabólico en estudio. Teniendo en cuenta la relevancia de GST Mu, se detectó por PCR el gen correspondiente a esta isoenzima y se envió a sintetizar la proteína recombinante (rFhGSTMu). Se confirmó su pureza por SDS-PAGE y se evaluó su actividad enzimática. Para cumplir con el otro objetivo de la Tesis, se estableció el número de metacercarias de F. hepatica para evaluar la actividad protectora de rFhGSTMu formulada en tres adyuvantes distintos contra F. hepatica en ratones Balb/c. Los animales fueron inmunizados en tres oportunidades cada 15 días por la via subcutánea con las siguientes formulaciones: rFhGSTMu+ Adyuvante de Freund Incompleto, rFhGSTMu+ Hidróxido de Aluminio (Al(OH)3), rFhGSTMu+ Quil A y Grupo Control (sin inmunizar). Se detectaron niveles de anticuerpos IgG y subisotipos (IgG1 e IgG2a), IL-4 e IFN-γ. Todas las formulaciones vacunales indujeron anticuerpos IgG específicos con una respuesta mixta IgG1/IgG2a (Th2//Th1), sin embargo, la formulación rFhGSTMu + Al (OH)3 estimuló principalmente un perfil Th2 coincidente con una mayor producción de IL-4 en comparación con IFN-γ. La formulación rFhGSTMu+ Al(OH)3 redujo entre 75-90% el número de parásitos y la diferencia en la curva de supervivencia de este grupo fue altamente significativa. En el resto de los grupos experimentales, el recuento de parásitos fue similar al grupo control no inmunizado con una reducción en el número de parásitos no mayor al 12,5%. El daño hepático se estimó indirectamente mediante la determinación de los valores séricos de las enzimas aspartato aminotransferasa (AST), alanina aminotransferasa (ALT), fosfatasa alcalina (FA) y por análisis histopatológico de las lesiones. Los valores de las enzimas hepáticas en el grupo inmmunizado con rFhGSTMu+ Al(OH)3 fueron significativamente más bajos (p

RESUMEN: La paragonimiasis es una zoonosis parasitaria, de transmisión alimentaria, causada por especies de tremátodos del género Paragonimus, presente en áreas tropicales y subtropicales de Asia, África y América. El ser humano se infecta mediante la ingestión de crustáceos de agua dulce crudos o mal cocidos. La infección afecta principalmente los pulmones, con desarrollo de múltiples manifestaciones clínicas y radiológicas, dependiendo del momento del ciclo vital del parásito. El diagnóstico diferencial más importante de esta enfermedad es la tuberculosis pulmonar. En este artículo se describe esta enfermedad en dos niñas con diferentes manifestaciones pulmonares. La paragonimiasis se debe sospechar en pacientes con tos crónica, esputo herrumbroso, dolor torácico, con o sin compromiso cerebral, que viven o han residido en una zona endémica y que presentan una eosinofília elevada, con cambios radiológicos sugestivos del síndrome de Loeffler. ABSTRACT: Paragonimiasis is a parasitic, food-borne zoonosis, caused by species of trematodes of the genus Paragonimus, found in tropical and subtropical areas of Asia, Africa and America. Human beings become infected by ingestion of raw or undercooked freshwater shellfish. The infection primarily affects the lungs, with the development of multiple clinical and radiological manifestations, depending on the moment in the life cycle of the parasite. The most important differential diagnosis of this disease is pulmonary tuberculosis. We report two cases of lung paragonimiasis in aboriginal Colombian girls with different pulmonary manifestations. Paragonimiasis should be suspected in patients with chronic cough, rusty sputum, chest pain, with or without brain involvement, who live or have lived in en-demic areas and have a highlevel eosinophilia with radiographic changes suggestive of Loeffler’s syndrome.

La eficacia de triclabendazol ha disminuido en los últimos años, debido a su uso frecuente e inadecuado, dificultando el control de Fasciola hepatica en los animales domésticos. Se conoce que la ivermectina administrada conjuntamente con triclabendazol y con la intervención de la proteína transportadora glicoproteína P, incrementa la biodisponibilidad de triclabendazol aumentando su eficacia. El presente trabajo evaluó este efecto administrando ivermectina vía oral y parenteral. El estudio se realizó entre los meses de mayo y julio del año 2013, en el predio San Francisco del distrito Tumbadén de la provincia de San Pablo, Cajamarca. Se utilizaron 60 bovinos hembras de la raza Holstein Friesian naturalmente infectados, en cuatro tratamientos de 15 bovinos cada uno. Se realizó el test de reducción de conteo de huevos (T.R.C.H) mediante el método de sedimentación natural cuantificada, tomando la muestra a los 28 días pos tratamiento. Se obtuvo para triclabendazol una eficacia de 51,75±8.19%, para triclabendazol más ivermectina oral una eficacia de 56,64±8,12%, no habiendo diferencia estadística entre ambos resultados; en tanto que para triclabendazol más ivermectina subcutánea se obtuvo una eficacia de 69,93±7,52%, la cual si es significativamente diferente a los resultados mencionados anteriormente (nivel de confianza 95%). La eficacia de triclabendazol se incrementa solamente en 9,43% cuando se administra con ivermectina oral. La eficacia de triclabendazol más ivermectina sub cutánea, se incrementa en 23,46% con respecto a la eficacia de triclabendazol más ivermectina oral y 35,10% sobre la eficacia de triclabendazol.

La fascioliasis humana y animal causa pérdidas económicas millonarias en el mundo, esto se agrava con la resistencia del parásito al triclabendazol (TCBZ). A nivel molecular, diferentes proteínas de Fasciola hepatica se estudian en relación con la resistencia al TCBZ y en relación a su empleo como vacunas para una respuesta protectora en el hospedero definitivo. Entre estas proteínas están las saposinas (FhSAP1 y FhSAP2), cuyas diferencias moleculares tendrían relación con la resistencia al TCBZ o por el contrario, la falta de variabilidad favorecería su uso en diferentes áreas geográficas. El presente estudio tuvo por finalidad determinar la constitución nucleotídica de algunos segmentos de las secuencias de FhSAP1 y FhSAP2 en cepas de F. hepatica de distinta sensibilidad al TCBZ y procedentes de dos áreas geográficas diferentes. Para ello, se obtuvo ADN complementario mediante la técnica RT-PCR a partir del ARN mensajero extraído de 24 fasciolas adultas: seis especímenes resistentes al TCBZ y tres susceptibles, procedentes de la Universidad La Trobe (Australia), y 15 parásitos resistentes al TCBZ procedentes de Cajamarca; luego, mediante PCR convencional y el uso de cebadores específicos se amplificaron fragmentos codificantes para saposinas en todas las cepas. Los resultados del análisis de electroforesis con el GelAnalyzer muestran bandas de 100 y 141 pares de bases que pertenecen a FhSAP1 y FhSAP2, respectivamente. Los cromatogramas, con el programa FinchTV y el análisis de secuencias con BLAST y Clustal-MFFT, revelaron alta homología entre las secuencias de nucleótidos de las cepas estudiadas y que no hubo diferencias significativas en la conformación de los aminoácidos al ser comparadas con las cepas reportadas en el Gen Bank. Se concluye que, entre las distintas cepas estudiadas, no hay diferencias moleculares significativas en las secuencias de las saposinas FhSAP1 y FhSAP2. Tesis

La presente investigación tuvo como objetivo evaluar la eficacia del Triclabendazol (TCBZ) en dosis de 12 mg/kg de p.v. por vía oral en alpacas provenientes de la Granja Porcón de Cajamarca, las mismas que fueron artificialmente infectadas con Fasciola hepatica. Se trabajó con 10 alpacas positivas a F. hepatica, a las que se realizó un análisis coproparasitológico previo, mediante el método de sedimentación, para determinar el número de huevos por gramos de heces (hpg). Luego los animales fueron ordenados en dos grupos homogéneos de 5 animales cada uno. En el grupo de los animales tratados con TCBZ, en el pre tratamiento, tuvo un promedio 3,8 hpg; y a los 7 y 14 días post tratamiento, tuvo un promedio de 6,4 hpg y 7,2 hpg, respectivamente; sobre la base de estos resultados se realizó la prueba de reducción del número de huevos en heces (FECRT), obteniéndose valores negativos a los 7 y 14 días respectivamente, lo que equivale a una nula eficacia, no existiendo diferencia significativa (P>0,05) en la reducción de número huevos pre y post-tratamiento. Además, el día 14 post-tratamiento se realizó el sacrificio de las alpacas del grupo control sin tratamiento y del grupo tratado con TCBZ, se contó el número de fasciolas adultas en sus hígados mediante la prueba de eficacia absoluta; el número de fasciolas en el grupo control sin tratamiento fue en promedio geométrico 1,74 y en el grupo tratado de 4,69 respectivamente, obteniéndose un valor negativo, lo que equivale a una nula eficacia absoluta, no existiendo diferencia significativa (P>0,05). Se concluye que el TCBZ en dosis de 12 mg/kg de p.v. no es eficaz para el control y tratamiento de las alpacas artificialmente infectadas con F. hepatica en Cajamarca; lo cual podría ser una evidencia de resistencia a este fármaco. Tesis

Schistomiasis is one of the major public health problems, and for more than two decades Praziquntel (PZQ) has remained the drug of choice for its treatment. However, studies proved that reliance on one drug raised the concern of development of tolerance or even resistance. The present work aimed at studying the effect of different schedules of the flukicidal drug triclabendazole (TCBZ), in a dose of 120mg/kg body weight, on Schistoma mansoni worm load, female fecundity and egg deposition in liver and intestine of infected mice, and at studying its biochemical toxic effects on some liver enzymes activities.The present findings indicated that the administration of TCBZ to mice infected with Egyptian S.mansoni strain was not effective except when the drug was given after the start of egg shedding in the stools. However, the antischitosomal effect was moderate as the results showed 50% reduction in worm burden and around 40% reduction in liver and intestinal egg loads. On the other hand, the impact on oogram pattern was not clear except regarding the percentage of dead ova which was much higher than the corresponding control. As regards the biochemical parameters studied, no change in the activity of all tested enzymes was observed. However, animals which received two doses of the drug after the start of egg shedding exhibited 24% reduction in alanine transaminase (ALT) activity. In conclusion, our results indicated that, still, there is no alternative to prazquantel and there is an urgent need for discovery of new antischistosomal drugs. In addition studying different combinations and schedules of the already available drugs as artemether and TCBZ is recommended.

The trematode Fasciola hepatica is the causative agent of a parasitic zoonosis known as fasciolosis, disease that affects humans and most species of domestic animals. Triclabendazole (TCBZ) is the most widely used fasciolicide,however, its indiscriminate use has led to the expression of anthelmintic resistance in the liver fluke.In the present work we evaluated ?in vitro? the microsomes activity of different xenobiotic metabolizing enzymes of Phase I Carboxylesterases (CE) and Phase II the cytosolic activity of Glutathione S-Transferase (GST),Glutathione peroxidase (GPx) and Glutathione Reductase (GSR) in adults of F. hepatica susceptible (Cullompton strain) and resistant (Sligo and Oberon strains) to triclabendazole. In this work is detected a multienzyme response involving at all the family of enzymes glutathione dependent. Carboxylesterases activity did not differ between the different strains tested not being involved in the resistance phenomenon. These results contribute to the understanding of the mechanisms referred to the phenomenon of resistance to TCBZ. Fil: Fernandez, Vanesa. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Cadenazzi, Gabriela. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Fisiopatología. Laboratorio de Farmacología; Argentina Fil: Miranda Miranda, E.. Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Parasitología; México Fil: Larsen, Karen Elizabeth. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Solana, Hugo Daniel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina

Se realizó un experimento para estudiar la biodisponibilidad relativa de cinco formulaciones orales de Triclabendazol (TCBZ), comercialmente disponible para bovinos en el Perú. Se utilizaron treinta bovinos hembras de raza Holstein de un propietario del valle de Cajamarca con un peso promedio de 249,899 Kg. Los animales fueron seleccionados al azar en cinco grupos (n= 6). El Grupo I sirvió como grupo de referencia (RF), y fueron tratados con Fasinex® (Novartis). Los animales de los grupos II, III, IV y V fueron tratados con diferentes formulaciones de TCBZ. Todos los animales fueron tratados por vía oral a dosis de 12mg/Kg de peso corporal con TCBZ. Se recolectaron muestras de sangre de los animales en diferentes horas de 1h hasta 168 horas post tratamiento. Se obtuvieron muestras de plasma, las cuales se mantuvieron congeladas a -20 °C hasta su uso. Las concentraciones de metabolitos de TCBZ en plasma sanguíneo de todos los grupos de animales fueron medidos a través del análisis de Cromatografía Liquida de Alto Poder (HPLC). Los metabolitos detectados de TCBZ fueron TCBZ-sulfóxido (TCBZ.SO) y TCBZ- sulfona (TCBZ.SO2). Se observaron diferencias significativas en las concentraciones plasmáticas máximas (Cmax) alcanzadas por TCBZ.SO entre las diferentes formulaciones con respecto a la RF, rango de 8,3-14,3μg/ml. La formulación del GIII mostró un área bajo la curva (ABC), concentración vs tiempo significativamente menor (268,9¬-78, 1μg.h/ml) en comparación con el de RF, (418,1- 60,2 μg.h/ml). El valor de ABC para este metabolito fue mayor (P

El Triclabendazol (TCBZ) es un fasciolicida halogenado de uso extensivo en medicina Veterinaria para el tratamiento de fasciolosis que es altamente prevalente en Cajamarca, Perú, afecta a humanos y animales. La excreción de residuos de TCBZ y el riesgo de la presencia de esta droga y sus metabolitos Sulfoxido de Triclabendazol (TCBZSO) y Triclabendazol Sulfona (TCBZSO2) en leche fresca y derivados lácteos hacen que su determinación sea necesaria debido a que su uso está prohibido en vacas en lactación. En el presente trabajo se determinaron residuos de TCBZ y TCBZSO en leche y queso mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPCL). La fase móvil estuvo compuesta por una mezcla de acetonitrilo-acetato de amonio, columna de Octadecilsilan (C18) (5 µm; 4,6 mm x 150 mm) y determinada por UV a 300 nm. La linealidad, precisión y exactitud dio porcentajes cercanos a 100%, los coeficientes de variación inferiores a 5% y la desviación estándar inferior a 2%. Los límites de detección y cuantificación en leche y queso para TCBZSO fueron de entre 0,3865-0,240 y 1,28837-0,799 µg./ml., respectivamente; mientras que para TCBZ, los límites de detección y cuantificación fueron 0,305-0,438 y 1,017-1,459. Una vez validado el método, se procedió a hacer las determinaciones en 29 muestras de queso y 25 muestras de leche; ninguna presentó residuos de TCBZ y TCBZSO, por lo que se consideraron libres del antiparasitario. Tesis

Se determinó la resistencia de Fasciola hepatica frente a albendazol y triclabendazol en ovinos de dos rebaños en La Paz, Bolivia: uno cercano a Tambillo (rebaño 1) y otro cercano a Batallas (rebaño 2). Se eligió al azar 30 corderos de 8 a 9 meses de edad por rebaño, y se trataron con 10 mg/kg de albendazol ó 10 mg/kg de triclabendazol, quedando un grupo como control no tratado. Se midió la enzima gama glutamil transpeptidasa (GGT) y el número de huevos por gramo de heces (hpg) para la prueba de reducción de la oviposición. Los corderos se sacrificaron 8 semanas después del tratamiento y se contó el número de fasciolas. Se presentó una baja reducción de los niveles de GGT y de hpg en los grupos tratados con albendazol. En el grupo tratado con triclabendazol en el rebaño 1 se observó una de reducción de los niveles de GGT y hpg durante todo el estudio, no así en el rebaño 2. El porcentaje de reducción en los hígados fue de 13.6 y 2.3% para albendazol en los rebaños 1 y 2, respectivamente, y de 98.0 y 36.3% para triclabendazol. Se concluye que existe resistencia de F. hepatica frente a albendazol en los dos rebaños y que la resistencia está en proceso de establecimiento para triclabendazol en el rebaño 2. Fasciola hepatica resistance in sheep against albendazole and triclabendazole was evaluated in two farms in La Paz, Bolivia: one located near Tambillo (farm 1) and the other near Batallas (farm 2). Thirty male lambs of 7 to 8 months of age were selected in each farm. They were treated with 10 mg/kg of albendazole or 10 mg/kg of triclabendazole, and one group remained as non-treated. The gama glutamyl transpeptidase enzyme (GGT) profile and faecal eggs count reduction test (FECRT) were conducted. Lambs were slaughtered 8 weeks after treatment and the number of flukes in liver was counted. Minor reduction of GGT levels and faecal eggs count were observed in animals treated with albendazole. In the group treated with triclabendazole in farm 1 was observed a reduction of the GGT levels and faecal eggs count throughout the study, but not in farm 2. The reduction of flukes in liver lambs was 13.6 and 2.3% for albendazol in farms 1 and 2 respectively, and 98.0 and 36.3% for triclabendazol. It was concluded that anthelminthic resistance of F. hepatica to albendazol occurred in both farms, while in farm 2 resistance was gradually appearing to triclabendazole.

Fasciola hepatica resistance in sheep against albendazole and triclabendazole was evaluated in two farms in La Paz, Bolivia: one located near Tambillo (farm 1) and the other near Batallas (farm 2). Thirty male lambs of 7 to 8 months of age were selected in each farm. They were treated with 10 mg/kg of albendazole or 10 mg/kg of triclabendazole, and one group remained as non-treated. The gama glutamyl transpeptidase enzyme (GGT) profile and faecal eggs count reduction test (FECRT) were conducted. Lambs were slaughtered 8 weeks after treatment and the number of flukes in liver was counted. Minor reduction of GGT levels and faecal eggs count were observed in animals treated with albendazole. In the group treated with triclabendazole in farm 1 was observed a reduction of the GGT levels and faecal eggs count throughout the study, but not in farm 2. The reduction of flukes in liver lambs was 13.6 and 2.3% for albendazol in farms 1 and 2 respectively, and 98.0 and 36.3% for triclabendazol. It was concluded that anthelminthic resistance of F. hepatica to albendazol occurred in both farms, while in farm 2 resistance was gradually appearing to triclabendazole., Se determinó la resistencia de Fasciola hepatica frente a albendazol y triclabendazol en ovinos de dos rebaños en La Paz, Bolivia: uno cercano a Tambillo (rebaño 1) y otro cercano a Batallas (rebaño 2). Se eligió al azar 30 corderos de 8 a 9 meses de edad por rebaño, y se trataron con 10 mg/kg de albendazol ó 10 mg/kg de triclabendazol, quedando un grupo como control no tratado. Se midió la enzima gama glutamil transpeptidasa (GGT) y el número de huevos por gramo de heces (hpg) para la prueba de reducción de la oviposición. Los corderos se sacrificaron 8 semanas después del tratamiento y se contó el número de fasciolas. Se presentó una baja reducción de los niveles de GGT y de hpg en los grupos tratados con albendazol. En el grupo tratado con triclabendazol en el rebaño 1 se observó una de reducción de los niveles de GGT y hpg durante todo el estudio, no así en el rebaño 2. El porcentaje de reducción en los hígados fue de 13.6 y 2.3% para albendazol en los rebaños 1 y 2, respectivamente, y de 98.0 y 36.3% para triclabendazol. Se concluye que existe resistencia de F. hepatica frente a albendazol en los dos rebaños y que la resistencia está en proceso de establecimiento para triclabendazol en el rebaño 2.

Abamectin (ABM) and Triclabendazole (TCBZ) are two potent antiparasitic drugs that differ in their chemical structure and spectrum of action. In this study, a sensitive HPLC-method was developed and validated to determine ABM and TCBZ residues in bovine edible tissues, and the pattern of tissue depletion of an oral formulation containing the association abamectin (ABM) - triclabendazole (TCBZ) was characterized. Sixteen parasitefree heifers (232 ± 37.5 kg body weight) were treated with the oral formulation at a dose rate of 0.2 mg of ABM/kg and 10mg of TCBZ/kg of live weight. Treated animals were slaughtered weekly in randomly selected groups of three to four animals from day 7 until day 42 post-treatment. Concentration profiles of the drugs were determined in liver, kidney, muscle and fat tissues. Two nontreated animals were slaughtered in order to obtain blank tissue samples to validate the analytical methodology. Drug concentration profiles were determined by a validated HPLC analytical methodology using fluorescence detection for ABM and UV- detection for TCBZ. The highest concentration of ABM was observed in liver samples (4.02 ng/g) and was maintained for 14 days. In the case of TCBZSO2the highest concentration was observed in the kidney (0.79µg/g) and persisted for a period of 14 days. &nbsp, Se realizó un estudio para determinar los niveles de residuos de ABM y TCBZ en tejidos comestibles de bovinos tratados con la formulación comercial que contiene la asociación de ambos fármacos para administración vía oral en bovinos. Se desarrolló y validó un método analítico mediante cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) usando detector de fluorescencia para ABM y ultravioleta para TCBZ y sus metabolitos. Se utilizaron 16 bovinos con un peso promedio de 232 ± 37,5 kg, los cuales fueron tratados con la asociación ABM-TCBZ a una dosis de 0,2 mg de ABM/kg de peso y 10 mg de TCBZ/kg de peso. Los animales fueron sacrificados en grupos de 3 a 4 animales por semana desde el día 7 hasta el día 42 posterior al tratamiento. Para validar la metodología analítica y elaborar las curvas de calibración, se utilizaron muestras de tejido blanco libre de fármacos. La técnica analítica para la detección de ABM en los tejidos analizados presentó valores de recuperación que fluctuaron entre 78 y 84%, con un límite de cuantificación que fue de 0,14 ng/g para músculo; 0,52 ng/g para hígado; 0,55 ng/g para riñón, y 1,4 ng/g para las muestras de tejido graso. La metodología analítica utilizada en la detección del metabolito de TCBZ presentó porcentajes de recuperación que van desde 70 a 85% para TCBZSO2, con un límite de cuantificación del método para este analito de 0,076µg/g para tejido graso; 0,143µg/g en músculo; 0,169µg/g en hígado y 0,223µg/g en riñón. Las mayores concentraciones residuales de ABM fueron observadas en las muestras de hígado (4,02 ng/g) y se mantuvieron por 14 días. En tanto que para TCBZSO2las mayores concentraciones residuales se presentaron en el riñón (0,79µg/g), las que persistieron por un período de 14 días. &nbsp

Se realizó un estudio para determinar los niveles de residuos de ABM y TCBZ en tejidos comestibles de bovinos tratados con la formulación comercial que contiene la asociación de ambos fármacos para administración vía oral en bovinos. Se desarrolló y validó un método analítico mediante cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) usando detector de fluorescencia para ABM y ultravioleta para TCBZ y sus metabolitos. Se utilizaron 16 bovinos con un peso promedio de 232 ± 37,5 kg, los cuales fueron tratados con la asociación ABM-TCBZ a una dosis de 0,2 mg de ABM/kg de peso y 10 mg de TCBZ/kg de peso. Los animales fueron sacrificados en grupos de 3 a 4 animales por semana desde el día 7 hasta el día 42 posterior al tratamiento. Para validar la metodología analítica y elaborar las curvas de calibración, se utilizaron muestras de tejido blanco libre de fármacos. La técnica analítica para la detección de ABM en los tejidos analizados presentó valores de recuperación que fluctuaron entre 78 y 84%, con un límite de cuantificación que fue de 0,14 ng/g para músculo; 0,52 ng/g para hígado; 0,55 ng/g para riñón, y 1,4 ng/g para las muestras de tejido graso. La metodología analítica utilizada en la detección del metabolito de TCBZ presentó porcentajes de recuperación que van desde 70 a 85% para TCBZSO2, con un límite de cuantificación del método para este analito de 0,076 µg/g para tejido graso; 0,143 µg/g en músculo; 0,169 µg/g en hígado y 0,223 µg/g en riñón. Las mayores concentraciones residuales de ABM fueron observadas en las muestras de hígado (4,02 ng/g) y se mantuvieron por 14 días. En tanto que para TCBZSO2 las mayores concentraciones residuales se presentaron en el riñón (0,79 µg/g), las que persistieron por un período de 14 días.

A fasciolíase hepática (FH) é uma doença infecciosa causada pelo tremátodo Fascíola hepática, que parasita fundamentalmente os animais herbívoros. O ser humano é infectado apenas ocasional e acidentalmente pela ingestão de plantas aquáticas com metacercárias enquistadas. Revêem-se seis casos clínicos de FH, internados no Serviço de Medicina III dos HUC, nos últimos 15 anos: quatro doentes do sexo masculino, dois do sexo feminino, com idade média de 57 anos. O sintoma de apresentação mais frequente foi a dor abdominal e o sinal, a icterícia; as queixas duravam, em média, há 1,6 meses. Em quatro doentes, foi possível confirmar a ingestão recente de agriões. Todos apresentavam eosinofilia e alteração das provas hepáticas. A ecografia e a TAC abdominais sugeriam doença neoplásica em três doentes, o que dificultou o diagnóstico. Este baseou-se na positividade do exame parasitológico de fezes e ou da serologia. Concluiu-se pela cronicidade da doença em cinco doentes. Dos seis doentes, cinco foram tratados com praziquantel; quatro não responderam e foram posteriormente medicados, dois com bithionol e dois com diidroemetina. O doente mais recentemente diagnosticado foi tratado com uma dose única de triclabendazol. Fascioliasis is an infectious disease, caused by the fluke Fasciola hepatica, that mainly parasitises herbivorous animals. Man is an accidental host. Infection results from eating raw aquatic vegetables with encysted metacercariae. The authors report 6 cases of human hepatic fascioliasis, admitted in the University of Coimbra hospital, Medicine III Service, in the last 15 years. Of the six cases, 4 were males and 2 females, with a mean age of 57 years. The most frequent symptom was abdominal pain and the most frequent sign was jaundice. Complaints lasted, on average, 1.6 months. Four patients confirmed recent ingestion of raw watercress. All had eosinophilia and altered liver function tests. Abdominal ultrasound and computed tomography scan suggested neoplasia in 3 patients, which made the diagnosis more difficult. The diagnosis was made on a positive parasitological examination of stool specimens. All patients had chronic fascioliasis. Five were treated with praziquantel; in 4 it was ineffective and they had to be re-treated, 2 with bithionol and 2 with dihydroemetine. The most recently diagnosed patient was treated with a single dose of triclabendazole.

Two cases of hepatic fascioliasis which simulated hepatic tumors are presented: Patient 1. (42-year-old woman), presented pain in the epigastric and right hypochondrium. US, CAT and MNR suggested a cholangiocarcinoma. She was operated on by practicing hepatic segmentectomy, cholecystectomy and closign of a cholecystogastric fistula. The extirpated hepatic segment presented a tumoral aspect, but its histopathological study revealed numerous granulomas, some of them with F. hepatica eggs and others with Charcot - Leyden crystals. ELISA and complement fixation reaction for fascioliasis resulted positive. Search of F. hepatica eggs in stools was negative. The patient was treated with triclabendazole. Patient 2. (58-year-old woman) also presented pains in the upper hemiabdomen. Hypereosinophilia (32%). Abdominal CAT showed multiple hipondense irregular zones suggesting infiltrative processes in the liver right lobe. The hepatic biopsy, under CAT, eventhough lead to think in a hamartoma, a diagnosis of chronic cholangitis compatible with a parasitic etiology raised. ELISA and complement fixation reaction for fascioliasis were positive. Coproparasitological exams for F. Hapatica resulted negative. She was successfully treated with triclabendazole. Hapatic fascioliasis simulates numerous diseases, among them hepatic tumors.

Two cases of hepatic fascioliasis which simulated hepatic tumors are presented: Patient 1. (42-year-old woman), presented pain in the epigastric and right hypochondrium. US, CAT and MNR suggested a cholangiocarcinoma. She was operated on by practicing hepatic segmentectomy, cholecystectomy and closign of a cholecystogastric fistula. The extirpated hepatic segment presented a tumoral aspect, but its histopathological study revealed numerous granulomas, some of them with F. hepatica eggs and others with Charcot - Leyden crystals. ELISA and complement fixation reaction for fascioliasis resulted positive. Search of F. hepatica eggs in stools was negative. The patient was treated with triclabendazole. Patient 2. (58-year-old woman) also presented pains in the upper hemiabdomen. Hypereosinophilia (32%). Abdominal CAT showed multiple hipondense irregular zones suggesting infiltrative processes in the liver right lobe. The hepatic biopsy, under CAT, eventhough lead to think in a hamartoma, a diagnosis of chronic cholangitis compatible with a parasitic etiology raised. ELISA and complement fixation reaction for fascioliasis were positive. Coproparasitological exams for F. Hapatica resulted negative. She was successfully treated with triclabendazole. Hapatic fascioliasis simulates numerous diseases, among them hepatic tumors.

Con el objetivo de evaluar dos modelos de control quimioterapéutico contra Fasciola hepatica , en ganado bovino infectado de manera natural y localizado en una finca en el municipio de Nautla, Veracruz, México, se aplicó el triclabendazol (tbz) en una o dos ocasiones, en diferentes meses, para reducir al máximo la eliminación de huevos. Además, se determinaron los valores de anticuerpos anti-F hepatica y los niveles séricos de gamma-glutamil transpeptidasa (ggt) y aspartato aminotransferasa (ast). Se trataron dos grupos (G) de 23 animales cada uno, con dosis de 12 mg/kg de tbz, el G-1, testigo, en enero y el G-2 en enero y mayo. Cada 45 días, durante 10 ocasiones, se recolectaron muestras de heces de todos los animales, para realizar el recuento de huevos en 5 g (hpg). Al mismo tiempo, se tomaron muestras de sangre de 15 vacas de cada grupo, con el fin de detectar en el suero, mediante ELISA, los anticuerpos anti-F hepatica, así como valorar los niveles de ggt y ast por espectrometría. El porcentaje de reducción de tasa de la media de hpg fue 27.6 más alto en el G-2 que en el G-1, lo que concuerda con los valores más bajos de ggt detectados en el G-2. Los valores medios de la ast no rebasaron el límite normal. Los niveles de anticuerpos fueron positivos y no parecen verse afectados por el tratamiento con tbz en ninguno de los grupos., Proyecto financiado parcialmente por la Dirección General de Apoyo al Personal Académico de la UNAM. PAPIIT IN-218996. Los autores agradecen a Novartis Salud Animal, S.A. de C.V., México, por la donación de Fasinex, así como a Orlando Irizón, propietario de la finca “Las Gaviotas” por las facilidades dadas para la realización del trabajo de campo.

El objetivo fue determinar la prevalencia, la intensidad en la excreción de huevos y los títulos de anticuerpos anti-Fasciola hepática expresados en densidades ópticas, en ganado vacuno tratado con triclabendazol cada 56 y 112 días durante 7 meses. Se utilizaron 42 bovinos divididos en tres grupos de 14 animales cada uno. El grupo A fue tratado con triclabendazol cada 56 días, el B cada 112, el C fue el testigo. Se emplearon las técnicas de sedimentación y ELISA. En el grupo A el número de animales positivos se redujo del 100% (día 0) a 0% (día 168). La media de huevos se redujo de 86.57 ± 10.5 (día 0), a 0 (día 168). En el grupo B el número de animales positivos se redujo de 100% (día 0) a 14.28% (día 168), y la media de huevos de 82.85 ± 14 (día 0) a 0.85 ± 0.5 (día 168). En el grupo C la prevalencia siempre fue de 100% y la media de huevos excretados fluctuó de 68.14 a 78.85 durante el estudio. Entre el grupo A y el B se observaron diferencias estadísticas (P 0.05) en los días 84 y 112, 140 y 168 y siemp re hubo diferencias con el grupo C (P 0.01) después del tratamiento. Las densidades ópticas se encontraron por debajo de 0.679 nm. No se encontraron diferencias estadísticas (P 0.05) en el mismo grupo ni entre los tres grupos. La correlación entre títulos de anticuerpos y la excreción de huevos fue baja (0.26, 0.0022 y 0.011) para los grupos A, B, y C, respectivamente. Se concluye que el tratamiento con triclabendazol en ganado vacuno, aplicado cada 56 días, reduce significativamente (P= 0.05) la excreción de huevos de F. hepática en comparación con el aplicado cada 112 días, y la correlación entre la cantidad de huevos y los títulos de anticuerpos expresados en densidades ópticas fueron bajas.

Introducción: la suspensión de triclazol 22 se emplea con fines veterinarios como antiparasitario pues contiene triclabendazol y albendazol. Objetivo: validar el método analítico para la determinación simultánea del triclabendazol y albendazol en la suspensión de triclazol 22 aplicable al control de la calidad. Métodos: para cuantificar el principio activo en el producto terminado, la separación se realizó a través de una columna cromatográfica Lichrosorb RP-18 (5 µm) (250 x 4 mm), con detección ultravioleta a 298 nm, empleando una fase móvil compuesta por acetonitrilo: solución amortiguadora de acetato de amonio pH 6,6 (70:30) y la cuantificación de este frente a una muestra de referencia con el método del estándar externo. Resultados: los resultados de los parámetros evaluados en la validación realizada del método se encontraron dentro de los límites establecidos. Conclusiones: el método analítico validado resultó lineal, preciso, exacto y específico en el rango de concentraciones estudiadas.