Search

Impatiens walleriana is a plant of the Balsaminaceae family with high ornamental value. It presents very attractive flowers, which can be found in different shapes and colors, due to which, it is part of many gardens worldwide. Genetic improvement in this specie has usually been carried out by conventional methods, however, the advancement of technology has made possible the use of a large number of biotechnological and molecular tools. The objective of this review is to consolidate the bases for a genetic improvement program of I. walleriana. This review covers different aspects that are basic to incur in the genetic improvement of this species; these factors are floral morphology, pollination, karyotyping and studies of genetic variability. In addition, what is known to date about studies focused on genes involved in drought stress processes, tolerance to Plasmopara obducens and floral longevity is presented.

El previo desarrollo de un evento transgénico de caña de azúcar resistente al glifosato aceptada para su liberación comercial fue llevado a cabo a partir de la transformación genética de la variedad RA 87-3. Durante el tiempo transcurrido para desarrollar esta tecnología, nuevas variedades comerciales liberadas por el programa de mejoramiento local están siendo adoptadas por los agricultores. La complejidad genómica de las variedades modernas de caña de azúcar, caracterizadas por ser híbridos interespecíficos, con un alto grado de poliploidía y frecuente aneuploidía, hace prácticamente imposible la introgresión del transgén por retrocruzamientos en otras variedades. La transformación directa de nuevas variedades comerciales o clones promisorios que se encuentren en etapas finales de un esquema de mejoramiento, podrían mejorar enormemente el desarrollo y la adopción de la caña de azúcar transgénica tanto por los agricultores como por los industriales. El objetivo de este estudio fue obtener eventos transgénicos resistentes al glifosato de las variedades TUC 95-10 y TUC 03-12 a partir del bombardeo de microproyectiles recubiertos por plásmidos que contengan los genes epsps y nptII. Se realizaron experimentos independientes con un total de 23 y 8 bombardeos de las variedades TUC 95-10 y TUC 03-12, respectivamente. La transformación e integración estable de los genes epsps y nptII se determinaron mediante el uso de la técnica de PCR con cebadores específicos. Los eventos transgénicos fueron evaluados en condiciones ex vitro para determinar la tolerancia al glifosato, mientras que también se analizó su similitud genética con la variedad que les dio origen mediante marcadores moleculares TRAP. Aunque se obtuvieron plántulas de ambas variedades, la variedad TUC 95-10 mostró una menor respuesta al cultivo de tejido, ya que solo se obtuvieron dos eventos, mientras que para la variedad TUC 03-12 se regeneraron un total de 22 plántulas. Un evento regenerado a partir de TUC 95-10 y tres eventos derivados de TUC 03-12 fueron PCR positivos para ambos genes, observándose diferentes niveles de tolerancia al herbicida. El análisis genético de 213 loci TRAP en las 3 líneas transgénicas derivadas de TUC 03-12 indican que dos eventos comparten un 99,30% de similitud con el control no transformado, mientras que el evento restante presenta un 98,7%. Estos resultados son alentadores, ya que basados en conocimientos previos, los marcadores moleculares indicarían que los eventos obtenidos son prácticamente idénticos a su variedad donante, con lo cual serían adecuados para conducir ensayos comparativos adicionales a campo.

Although genetic transformation in Glycine max has been intensively investigated, the process remains ineffective. In the present work, for the first time, the in vitro selection of transgenic lines of soybean variety Incasoy-27 is addressed. From somatic embryos transformed with Agrobacterium tumefaciens strain EHA105, the regeneration of three lines of supposedly transformed plants that showed resistance to phosphinothricin 6.0 mg l-1 was achieved. GUS histochemical analysis demonstrated stable expression of the uidA gene in leaves of two plant lines. Subsequently, the presence of the bar and uidA genes in two regenerated lines was confirmed with the polymerase chain reaction; while in the third line the band referring to the uidA gene was found but it was not possible to demonstrate the presence of the bar gene. In conclusion, is possible to in vitro select transgenic lines of soybean variety Incasoy-27, with expression of the uidA and bar genes in the genome of the transformed plants and 0.30% efficiency. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Se han evaluado algunos indicadores de calidad del fruto en líneas transgénicas de fresa con los genes de poligalacturonasa FaPG1 (líneas PG) o pectato liasa FaplC (líneas APEL) silenciados. Se analizaron dos líneas independientes por genotipo transgénico. No se observaron diferencias en el contenido de sólidos solubles entre las líneas transgénicas y el control. De igual forma, la acidez total y el pH fueron similares en las líneas PG29, APEL21 y el control; sin embargo, la acidez de los frutos de las líneas PG62 y APEL39 fue superior al control. Los parámetros de color L*, a* y b* fueron similares en todos los genotipos; sin embargo, el contenido en antocianos fue menor en la línea APEL21. Los valores más altos de firmeza de fruto, estimada mediante un ensayo de extrusión, se observaron en las dos líneas transgénicas PG y en la línea APEL39. En cuanto a las pérdidas por goteo (drip loss), la línea APEL39 presentó un valor mayor que el control, pero la línea APEL21 registró valores menores. El contenido de compuestos fenólicos se analizó en la línea PG29, no encontrándose diferencias estadísticas con respecto al control. Finalmente, la capacidad del fruto para captar radicales libres fue ligeramente menor en la línea PG29 que en el control. Los resultados indican que el silenciamiento de los genes de pectinasas incrementa significativamente la firmeza de la fresa sin modificar sustancialmente parámetros de calidad del fruto maduro como color, acidez, sólidos solubles o contenido en antocianos.

Common bean is a crop recalcitrant to in vitro regeneration and therefore it lacks an efficient transformation protocol that can be reproduced using A. tumefaciens. The main goal of this study was to establish a protocol for A. tumefaciens mediated transformation of Phaseolus vulgaris var. Brunca by marker genes (gusA and nptII) together with the gene for trehalose-6-phosphate synthase from Saccharomyces cerevisiae (TPS1) used in other species to increase tolerance to abiotic stress. The ß-glucuronidase activity was detected in 45 % of the LBA4404 ElectroMAX® pCAMBIA1301 infected explants. Transformed explants regenerated new shoots after four to five months period in a kanamycin rich media. Surviving plants were evaluated by PCR and presented an 0.5 % efficiency of transformation. The established protocol for genetic transformation of common bean has two additional advantages with respect to previous reports: (1) it allows for obtaining transformed regenerants and (2) the genetic transformation was stable for the selective gene. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Las plantas del género Phyllanthus son actualmente investigadas por su habilidad para producir compuestos fenólicos con alta capacidad antioxidante. Además, diversos estudios han revelado que estas plantas poseen metabolitos (filantósidos y lignanos) que pueden inducir la apoptosis celular, lo que les proporciona un gran potencial para posibles tratamientos de prevención contra el cáncer. En este trabajo, se llevó a cabo la introducción in vitro de semillas de P. acumminatus; se logró el cultivo in vitro del material vegetal, y las vitro-plantas fueron utilizadas en ensayos de inducción de raíces pilosas, mediante transformación genética con Agrobacterium rhizogenes cepa Ar15834. El tratamiento más favorable para la inducción de estos cultivos organogénicos consistió en el uso de estacas de aproximadamente 1-2 cm, a las cuales se les hicieron cortes transversales con un bisturí, para luego ser inoculadas en el cultivo bacteriano (OD600: 0.6-1). Las estacas fueron colocadas en medio M & S semisólido al 50% de sales y vitaminas, sin reguladores de crecimiento, por un período de 48 h. Transcurrido este tiempo, las estacas fueron micropropagadas en medio M & S al 100% de sales y vitaminas, complementado con 500 µg/l del antibiótico Ceftriaxona® para erradicar la bacteria. Se logró el cultivo de las raíces pilosas en medio M & S al 100% de sales y vitaminas, sin reguladores de crecimiento. Por medio del uso de microscopía de luz, se logró la caracterización morfológica de las raíces establecidas, las cuales coinciden plenamente con las típicas raíces pilosas o hairy roots obtenidas por medio del sistema de agro-infección, según la literatura consultada.

An important tool in plant genetic engineering is the vectors or genic constructs that contain reporter genes, utilized to facilitate the standardization of genetic transformation protocols. The objective of this study was evaluate genetic transformation protocols for generate in a quick and confinable manner, a base collection of genic constructs in Escherichia coli strain DH5α and Agrobacterium tumefaciens strains LBA 4404, EHA 105 y C58, using 25 binary vectors (pSK1019, pMP2482 y 23 de la serie pCAMBIA) that contain the reporter genes gfp and gus, by using the heat shock and electroporation techniques. The transformants confirmation was made by PCR amplification and by restriction enzymes assay with Eco RI and Xho I. These approaches allowed verifying the presence Successful of the 25 vectors inside the used bacteria. The results indicate that it is necessary to standardize the transformation protocols in the bacterial strains to be used because they do not all transform with the same conditions and this work can be a reference for the standardization in other laboratories of genetic transformation when working in a massive way. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Male sterility is a very important characteristic for environmental safety in genetically modified (GM ) plants, particularly in the release of transgenic plants in the centers of origin or high biodiversity areas. In order to contribute to the development of environmentally safe agricultural technologies that allow the proper use of transgenic potato crops in Colombia, this project developed transgenic potato cry1Ac of Bacillus thuringiensis (Bt), lines that are potentially resistant to T. solanivora, from the male-sterile variety Pastusa Suprema (PS) (Solanum tuberosum ssp. andigena). Modifications were made to the Agrobacterium tumefaciens mediated-transformation protocol which allowed the genetic transformation of leaves of in vitro plants, with transformation efficiencies of 22 and 37%. Cry1Ac protein levels in transgenic leaves ranged from 88 to 639 ng mg-1 of fresh leaf tissue, suggesting a better potential plant resistance. This is the first report on transgenic lines with potential resistance to T. solanivora from a male-sterile variety of S. tuberosum ssp. andigena

Con el propósito de hacer más eficiente la transferencia de ADN hacia células vegetales, se han desarrollado diferentes métodos de transformación genética en plantas. Los métodos indirectos son basados en la utilización de vectores biológicos y los métodos indirectos son basados en elementos físicos y químicos. Esta es una revisión actualizada de los métodos de transformación genética de plantas, dirigida a los interesados en el mejoramiento genético de cultivos. Para ello, se revisaron las bases de datos "Science Direct", "Hinari" y "Medline", disponibles en el portal del sistema nacional de bibliotecas (SINAB), de la Universidad Nacional de Colombia. Se usaron las palabras claves en inglés "plant transformation", "genetic engineering", "transgenic plants", "genetically modified crops", para la búsqueda de documentos generales. Posteriormente, se refinó la búsqueda con el uso de palabras claves específicas, como "particle bombardment", "biolistic", "Agrobacterium ", "sonication" y otras. También, se realizaron algunas pesquisas de complementación en idioma español, usando el buscador "google", para las palabras claves "cultivos genéticamente modificados" y "cultivos transgénicos". Se examinaron artículos científicos y revisiones publicadas, entre 1997 y 2010. Existe una larga lista de procesos usados en la transferencia de genes foráneos a los genomas de especies vegetales, que incluye: vectores virales, liposomas, electroporación, sonicación, transferencia mediada por compuestos químicos, fibras de carburo de silicona, microinyección y microlaser; sin embargo, los cultivos transgénicos que se han liberado comercialmente, se han producido mediante el uso de dos tecnologías: biobalística y transformación, mediada por Agrobacterium tumefaciens .In order to streamline the transfer of DNA into plant cells have developed different methods for genetic transformation in plants. These methods can be divided into two classes: indirect methods based on biological vectors known as, and direct methods based on physical and chemical elements. This work presents an updated review of the methods used for genetic transformation of plants, aimed at those interested in crops breeding. To do this we reviewed databases "Science Direct", "Hinari" and "Medline" available on the website of the national library system (SINAB) of the Universidad Nacional de Colombia. Keywords used in English were: "plant transformation", "genetic engineering", "transgenic plants", "genetically modified crops", to search for general documents. Search was further refined by using more specific keywords, like "particle bombardment", "biolistic", "Agrobacterium ", "sonication", etc. Also conducted some research complementation in Spanish, using the search "google" for the key words "cultivos genéticamente modificados" and " cultivos transgénicos". Were reviewed scientific articles and reviews between 1997 and 2010. There is a long list of processes used in the transfer of foreign genes into the genomes of plant species, including: viral vectors, liposomes, electroporation, sonication, chemical-mediated transfer, silicon carbide fibers, microinjection and microlaser. However, GM crops are released commercially, have been produced through the use of two technologies: biolistic and Agrobacterium tumefaciens -mediated transformation.

Título en inglés: New method for rapid selection of banana (Musa spp. AAA cv. Grande naine) plants with bar gene in the field using ammonium gluphosinate Resumen Los genes marcadores de la selección son ampliamente utilizados para la transformación eficiente de diferentes cultivos, sin embargo, existen muy pocas referencias sobre el desarrollo de métodos de selección temprana en campo de plantas supuestamente transformadas con marcador de selección tipo herbicidas. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto del glufosinato de amonio a partir del herbicida Finale en los fragmentos de hojas de plantas de campo cultivados in vitro, para la selección de líneas transformadas de banano cv. Grande naine (Musa spp. AAA), con una construcción que porta como marcador de selección el gen bar. A partir del método desarrollado con el empleo de fragmentos de hojas de plantas procedentes de campo, cultivados in vitro en el medio de cultivo agar al 1% más agua y 30,0 g/l-1 de glufosinato de amonio se logró diferenciar las dos líneas transformadas del control no transformado, a partir de la expresión del gen bar. Ambas líneas fueron positivas en el análisis molecular de PCR. Estos resultados permiten disponer de una herramienta útil y simple como parte de un protocolo de transformación genética para el cultivo del banano, siendo el primer informe de este resultado a nivel internacional. Palabras clave: Musa; transformación genética; gen bar; glufosinato de amonio. Abstract Selector marker genes are widely used for the efficient transformation of different crops; however, there are very few references on the development of early selection methods in the fields of potentially transformed plants for herbicides. The objective of this research was to evaluate the effect of ammonium gluphosinate from the herbicide Finale in leaf fragments from in vitro plants grown in the fields for the selection of putative transformed lines of banana cv. Grande naine (Musa spp. AAA), with a construction that has the bar gene as the selector marker gene. Since the method developed with the use of leaf fragments from field plants culture in vitro in the agar at 1% more water and 30.0 gl-1 ammonium gluphosinate did differentiate the two transformed lines untransformed control, from the bar gene expression. Both lines were positive in the PCR molecular analysis. These results were a useful tool and form a part of a protocol of genetic transformation for banana, being the first reported result. Key words: Musa; genetic transformation; bar gene; ammonium gluphosinate.

Se evaluó y seleccionó una metodología para la transformación genética de la variedad de tomate UNAPAL-Arreboles con el gen cry1Ab para la incorporación de resistencia al cogollero (Tuta absoluta), utilizando el sistema de Agrobacterium. Se regeneraron 59 plantas transgénicas a partir de 3.200 explantes (1.84%). La integración estable, expresión y herencia de los genes nptII y gus-intrón, se demostraron mediante análisis histoquímico y molecular en los clones To28, To33 y To47 y en la correspondiente generación T1. Sin embargo, los análisis molecular e inmunológico indicaron ausencia del gen cry1Ab sugiriendo que la secuencia de este gen se puede haber modificado.

Se evaluó y seleccionó una metodología para la transformación genética de la variedad de tomate UNAPAL-Arreboles con el gen cry1Ab para la incorporación de resistencia al cogollero (Tuta absoluta), utilizando el sistema de Agrobacterium. Se regeneraron 59 plantas transgénicas a partir de 3.200 explantes (1.84%). La integración estable, expresión y herencia de los genes nptII y gus-intrón, se demostraron mediante análisis histoquímico y molecular en los clones To28, To33 y To47 y en la correspondiente generación T1. Sin embargo, los análisis molecular e inmunológico indicaron ausencia del gen cry1Ab sugiriendo que la secuencia de este gen se puede haber modificado.A plant transformation methodology was selected and evaluated to incorporate the cry1Ab gene by Agrobacterium-mediate genetic transformation into tomato variety UNAPAL-Arreboles for resistance to budworm (Tuta absoluta). A total of 59 transgenic plants were regenerated from 3.200 explants (1.84%). Histochemical gus assay and molecular analysis of three independent events To28, To33 and To47 and corresponding T1 derived generations, demonstrate the stable integration, expression and inheritance of the nptII and gus-intron genes. However, the molecular and immunological analysis of these same clones, indicate that the cry1Ab gene is not present in the transformed plants, suggesting that the sequence of this gene may be modified as result of possible recombinant events.

En el estudio se desarrolló una metodología de transformación genética mediante Agrobacterium tumefaciens en cultivares colombianos de caña de azúcar. La transformación se evaluó mediante la expresión del gen GUS. Callos embriogénicos y explantes meristemáticos de los genotipos CC85-92, CC84-75 y CC87-505 se transformaron usando tres cepas (AGL-1, LBA4404 y EHA105) con el plásmido pCambia 1305.2 y dos (EHA105 y LBA4404) con pCambia 2301. Se usó el medio de infiltración (IM) con acetosiringona y se evaluó el tiempo de cocultivo y la densidad óptica de la bacteria al momento de la inducción. Los genotipos mostraron respuesta diferencial con las combinaciones cepa-plásmido: obtuvieron mayor expresión del gen GUS cuando el genotipo CC85-92 se transformó con la cepa AGL-1-pCambia 1305.2. CC84-75 y CC87-505 mostraron mayor expresión cuando se transformaron con la cepa EHA105-pCambia 1305.2. Mayor eficiencia en la expresión se obtuvo cuando la bacteria se indujo en IM después de siete días de cocultivo y cuando la densidad óptica de la bacteria fue de 0.2(600nm) al momento de la inducción. Se demostró superioridad de los explantes en la eficiencia de transformación.The aim of the present study was to develop a transformation method mediated by Agrobacterium in Colombian cultivars of sugarcane. Transformation was evaluated in each step through transient GUS expression. Embryogenic calli and meristematic explants of CC85-92, CC84-75 y CC87-505 cultivars, were transformed using Agrobacterium tumefaciens AGL-1, LBA 4404 and EHA 105 strains, harboring pCambia 1305.2 plasmid. Furthermore, strains LBA 4404 and EHA 105 harboring pCambia 2301 were also tested. Bacterian activator medium, named infiltration media (IM) with acetosyringone was used. Co-cultivation time and bacteria optical density before induction were tested. Sugarcane cultivars evaluated showed differential response to different strain-plasmid combinations, obtaining higher GUS expression when CC85-92 was transformed using AGL-1 strain harboring the vector pCambia 1305.2. CC84-75 and CC87-505 cultivars showed higher GUS expression using EHA 105 strain harboring pCambia 1305.2 vector. The most efficient expression was evident after 7 days of co-cultivation and when bacteria optical density was 0.2(600nm) before induction in IM medium. This study demonstrated that meristematic explant is more suitable than embryogenic callus as a target to be transformed by Agrobacterium tumefaciens.

En el estudio se desarrolló una metodología de transformación genética mediante Agrobacterium tumefaciens en cultivares colombianos de caña de azúcar. La transformación se evaluó mediante la expresión del gen GUS. Callos embriogénicos y explantes meristemáticos de los genotipos CC85-92, CC84-75 y CC87-505 se transformaron usando tres cepas (AGL-1, LBA4404 y EHA105) con el plásmido pCambia 1305.2 y dos (EHA105 y LBA4404) con pCambia 2301. Se usó el medio de infiltración (IM) con acetosiringona y se evaluó el tiempo de cocultivo y la densidad óptica de la bacteria al momento de la inducción. Los genotipos mostraron respuesta diferencial con las combinaciones cepa-plásmido: obtuvieron mayor expresión del gen GUS cuando el genotipo CC85-92 se transformó con la cepa AGL-1-pCambia 1305.2. CC84-75 y CC87-505 mostraron mayor expresión cuando se transformaron con la cepa EHA105-pCambia 1305.2. Mayor eficiencia en la expresión se obtuvo cuando la bacteria se indujo en IM después de siete días de cocultivo y cuando la densidad óptica de la bacteria fue de 0.2600nm al momento de la inducción. Se demostró superioridad de los explantes en la eficiencia de transformación.

Bouvardia ternifolia (Cav.) Schldtl. (Rubiaceae), is a plant commonly known as Trompetilla or Donita, and is used in Mexican traditional medicine as sedative, analgesic and antivenom. Through a process of genetic transformation in axenic plants, the generation of transformed roots by infection with Agrobacterium rhizogenes in plant nodes, was observed from 8 to 12 days after infection. From the 9 seedlings infected by treatment, 8 generated hairy roots with the strain ATCC15834/Ptdt-RNAi with a transformation frequency (FT) of 88.9%, while with the strains A4-His-Lac and K599, 7 seedlings showed hairy root formation, having a FT of 77.8% with each strain. The hairy roots obtained were individualized 30 days after infection, 298 hairy roots with the strain ATCC15834/Ptdt-RNAi, 225 with the strain K599 and 357 with the strain A4+His+Lac, which were incubated in petri dishes containing MS/B5 medium and the antibiotics ceftriaxone and amoxicillin at a concentration of 400 mg/L to eliminate the bacteria for 5 months, reducing the antibiotic concentration every 30 days, to finally establish the lines with the best growth characteristics. Pharmacological activities will be evaluated. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Secciones de tallos de vitroplántulas de Echinacea purpurea y E. angustifolia fueron inoculadas con Agrobacterium rhizogenes cepa SV3101, con la finalidad de obtener plántulas transformadas. Se evaluó el efecto de la acetosiringona en combinación con floroglucinol sobre la transformación. El proceso de transformación aumentó proporcional y significativamente conforme se incrementó las concentraciones de ambos productos; llegándose a obtener un 100% de trasformación cuando se usó 200 μM de acetosiringona en combinación con 50 mg l 1 de floroglucinol. La eliminación de la bacteria se logró con 6 ml l-1 del Plant Preservative Mixture (PPM). También, se logró el cultivo in vitro de sólo raíces trasformadas, las cuales incrementaron su peso seco 11 veces en un periodo de 24 días de cultivo, momento en el cual se hace necesario iniciar un nuevo cultivo.

Agrobacterium tumefaciens tiene la capacidad de transferir ADN entre reinos diferentes. El impacto de este hallazgo ha tenido grandes aplicaciones en diversos campos de la biología vegetal, agricultura y biotecnología. En este artículo se describen los procesos por los cuales Agrobacterium realiza la transferencia de ADN a la planta, puntualizando en 7 eventos fundamentales para la interacción A. tumefaciens-planta y esta dirigido a profesionales de las áreas biológicas que estén interesados en actualizarse en el tema. El conocimiento básico sobre el mecanismo de transferencia del ADN ha permitido el desarrollo de vectores para la introducción de genes foráneos, dentro de los cuales se describen los 2 tipos de vectores utilizados en la actualidad: co-integrados y binarios. Así mismo se detallan algunos factores importantes que median la transformación y algunas de las principales aplicaciones de la transformación de plantas y hongos mediada por Agrobacterium.Agrobacterium tumefaciens has the ability to transfer DNA between different kingdoms. This finding has had a great impact in several fields of plant biology, agriculture and biotechnology. This review describe the mechanisms by which Agrobacterium transfer DNA to the plant, emphasizing 7 fundamental steps in the A. tumefaciens-plant interaction, to provide an opportunity for professionals in the biological sciences to familiarize themselves with the topic. Basic knowledge about the DNA transfer mechanism has allowed the development of various vectors for the introduction of foreign genes, among which two classes that are currently used are described: co-integrative and binary vectors. Furthermore, detail some important factors that mediate transformation and some of the principal applications of the transformation of plants and fungi by means of Agrobacterium.

Se desarrolló un sistema de transformación genética para dos variedades costarricenses de maíz: CR-7 y Diamantes 8843, que permita la transferencia ulterior de genes de origen viral a su genoma, y conferirles resistencia a la enfermedad ocasionada por el virus del rayado fino del maíz (MRFV). El método se basa en el bombardeo de microproyectiles en callos organogénicos derivados de ápices de jóvenes vitrogerminaciones. Por otro lado, se elaboró la construcción molecular pRFcp-bar que contiene el gen de la cubierta proteica del MRFV y el gen marcador bar. Para la selección visual del material transformado, se utilizo también el plásmido pDM803 que contiene el gen reportero uidA (GUS). Los resultados indican que los dos aceleradores de partículas evaluados: el PIG ("Particle Inflow Gun") y el Bio-Rad™ son igualmente eficientes para transferir genes foráneos al genoma del maíz.A method for genetic transformation of maize for resistance to viral diseases. A system for the genetic transformation of maize was developed for two Costa Rican varieties: CR-7 and Diamantes 8843, that can allow the subsequent transfer of viral-derived genes in order to confer resistance to the disease caused by maize rayado fino virus (MRFV). The method is based on particle bombardment of organogenic calli derived from shoot tips. On the other hand, the molecular construction pRFcp-bar, containing the coat protein gene of MRFV and the marker gene bar, was elaborated. For the visual selection of the transformed material was used also the plasmid pDM803 that contains the reporter gene uidA (GUS).The results indicate that devices evaluated: the PIG (" Particle Inflow Gun ") and the Bio-Rad ™ are both enough efficient to transfer foreign genes to the genome of the maize. Rev. Biol. Trop. 52(3): 787-793. Epub 2004 Dic 15.

Para optimizar la eficiencia en la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes, secciones de zanahoria fueron inoculadas con la cepa de Agrobacterium A4TC y co-cultivadas con acetosiringona, floroglucinol y una combinación de ambos. La acetosiringona es uno de los compuestos fenólicos que liberan los tejidos vegetales como respuesta a heridas, el cual induce la transferencia del T-ADN de la agrobacteria a la planta. El floroglucinol es también un compuesto fenólico; sin embargo, ejerce un efecto sinergístico con las auxinas, inhibiendo parcialmente la actividad de las citocininas. La mayor eficiencia en la transformación (75%) se obtuvo con el uso de acetosiringona (100 mM) en combinación con floroglucinol (25 mg l-1). En general, 6 días de co-cultivo, independientemente de los tratamientos, fue el tiempo que indujo el mayor porcentaje de transformación. La inclusión de 100 mg l-1 de kanamicina resultó un mecanismo eficiente para discriminar entre raíces transformadas y no transformadas. En adición, este trabajo presenta un novedoso sistema con el cual, una vez realizada la transformación, la bacteria puede ser eliminada completamente en 48 h con Cefotaxime en dosis de 500 mg l-1.

EI síndrome de la hoja amarilla es una enfermedad de la calla de azúcar que fue detectada en Colombia por primera vez en 1998. Cenicaña está tratando de lograr un control eficiente de la enfermedad utilizando diferentes herramientas pertenecientes a diversas áreas como entomología, patología, biología molecular y biotecnología. Dentro de estas dos últimas áreas, está contemplado el producir plantas transgénicas resistentes a la enfermedad. Con este fin se han bombardeado callos de la variedad CC 84-75 con parte del gen que codifica para la capside del virus causante de la enfermedad, el cual confiere resistencia contra el virus como se ha demostrado previamente. Un número total de 69 plantas han sido obtenidas después de bombardeo y selección con 50 mg/L de geneticina. Hasta ahora 12 plantas de un total de 19 plantas evaluadas han resultado positivas mediante la técnica de "Southern" después de hibridización, mostrando un fragmento de 0,45 Kb después de digestión del ADN total con Pst I. Las plantas que den positivas usando "Southern" serán posteriormente evaluadas mediante "Northern", y su resistencia contra el virus será evaluada en invernadero de bioseguridad.

The establishment of a genetic transformation program requires a selection in vitro system of transformed tissues. In the Glycine genus exists few references that employ the Glufosinate-ammoniun that selective agent in transformed somatic embryos. For this reason this work had as objective to determine the minimum lethalconcentration of the herbicide Glufosinate-ammoniun in somatic embryos of Cuban soybean cultivar INCASoy-27, to use as selective agent in genetic transformation programs. The soybean somatic embryos were placed on multiplication medium that contained 2,4-dichlorophenoxyacetic acid 20 mg L-1 with different concentrations of Glufosinate-ammonium (1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0 mg L-1). All concentrations of selective agent caused necrosis in not transformed soybean somatic embryos. The increments of selective agent concentration and culture time increased the necrosis of somatic embryos. Finally was determined the minimum lethal concentration of 6,0 mg L-1 Glufosinate-ammoniun in semisolid medium, that selective agent in the genetic transformation of somatic embryos of soybean cultivar INCASoy-27. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Genetic breeding in Phaseolus by genetic transformation requires an efficient selection system. The present investigation was aimed to determine the minimum lethal concentration of glufosinate-ammonium (Finale ®) in beans plants cv. 'CIAP 7247F' grown in greenhouse. Different concentrations of the herbicide were applied to the foliage of plants in acclimatization phase (20, 30 y 40 mg l-1) and the control. Results showed that the minimum lethal concentration in plants in acclimatization phase was 30 mg l-1. Results also demonstrated that is possible the use of the herbicide as a selective agent of beans transformants cv. 'CIAP 7247F' carrying the bar gene. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Los avances biotecnológicos alcanzados en cultivos agrícolas y plantas modelo están siendo actualmente extendidos a prácticamente todas las gramíneas, sean éstas cereales, zacates forrajeros, pastos de césped, plantas ornamentales o especies con importancia en el sector industrial o farmacéutico. Se vislumbra una revolución sin precedente en las posibilidades para la manipulación de las gramíneas mediante las tecnologías actuales o emergentes, que impactarán todas las áreas y niveles del conocimiento y uso de estas especies. En esta contribución se establece la importancia, biología, perspectivas de estudio y los avances alcanzados en los zacates forrajeros dentro de la biotecnología global de las Poaceae. La posibilidad de analizar y alterar el genoma de las plantas a través del creciente número de técnicas de escrutinio y transferencia de ADN recibe especial atención, en vista de las contribuciones potenciales que pueden tener a la explicación de muchos de los enigmas hasta hoy no esclarecidos en la ecología y fisiología de estas plantas, así como al incremento de la productividad y manipulación de sus características agronómicas. En un último apartado, se describen algunos de los avances biotecnológicos logrados hasta el momento en una de las gramíneas forrajeras más importantes de México, navajita azul (Bouteloua gracilis). Se espera que los estudios biotecnológicos mejoren nuestro conocimiento sobre las bases de la variabilidad genética de las poblaciones nativas de navajita azul, y permitan el diseño de estrategias enfocadas a la transferencia de algunos de los genes que confieren a B. gracilis su elevada tolerancia al estrés hídrico, a especies pertenecientes al grupo de los cereales.

Hasta el momento, la obtención de novedades vegetales mejoradas se ha logrado por los métodos clásicos de mejoramiento, basados fundamentalmente en la habilidad del investigador para seleccionar indivíduos o poblaciones que presenten, en forma sobresaliente, la o las características deinterés y en su habilidad para diseñar programas de cruces definidos, con miras a combinar ciertos genotipos parentales con caracterlsticas favorables. Con estos métodos, se han logrado mejoras considerables a través de los años, pero con ingente inversión de tiempo y dinero. En el caso de lospaíses en vía de desarrollo, la situación es más grave, ya que los países desarrollados han tomado especies nativas, por ejemplo, las alstroemerias, de origen andino, y, después de someterlas a mejoramiento, nos las venden, teniendo que pagarles regalías.

Los hongos endófitos son organismos inherentes a las plantas que establecen una asociación específica con su hospedero para mutuo beneficio. Existen sinnúmero de especies vegetales de importancia económica que interactúan con especies de hongos endófitos. La planta provee al hongo alimento, hospedaje y protección; por su parte, aunque no hay certeza sobre los mecanismos de acción, los endófitos confieren gran potencial adaptativo a las especies vegetales hospederas frente a condiciones adversas que generen estrés, ya sean de tipo abiótico (salinidad, acidez) o biótico (ataque de plagas). Esta simbiosis otorga mayor habilidad competitiva a las plantas y permite una plena expresión de su potencial genético traducido en altas tasas de germinación, mejor densidad, más biomasa en los tejidos y mayor producción de semilla. Se reporta la detección, aislamiento y transformación del hongo filamentoso endófito Acremonium implicatum aislado de la accesión Ciat 6780 del pasto Brachiaria brizantha en el laboratorio del Programa de Patología de Forrajes del Ciat. El trabajo abre amplias posibilidades para el estudio de la interacción planta-endófito y permite explorar su potencial como un sistema alternativo de expresión de genes que confieran resistencia a plagas y enfermedades sin recurrir al uso de plantas transgénicas. En los hospederos, los endófitos transgénicos pueden ser usados como vehículo para la producción y entrega de productos generados a partir de genes de interés agronómico, cumpliendo funciones protectoras y proporcionando otras ventajas que se vean reflejadas en una mayor productividad de la planta.

The plants of the genus Digitalis are characterized by the production of cardenolides, drugs widely used worldwide in the treatment of heart failure. In previous research a transformation protocol was developed from leaf disc of Digitalis purpurea L., using geneticin as selection marker. However some escapes in the selection process were obtained. So it is necessary to develop a more efficient selection scheme using another selective agent. Therefore, the aim of the present research was to select the minimum lethal concentration of hygromycin B during callus induction and shoots multiplication of D. purpurea. For callus induction we studied five concentrations of hygromycine B (3, 6, 9, 12, 15 mg l-1) during 28 days. Besides, the effect in shoot multiplication of four concentrations of hygromycine B (25, 50, 75, 100 mg l-1) was studied during 30 days. The minimal lethal concentration for callus formation was 12 mg l-1. In the case of shoot multiplication, 100% mortality was showed at 75 mg l-1 strictly after 30 days. The proposed selection scheme is recommended for future work at genetic transformation in this species. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Sugarcane (Saccharum spp. hybrid) emerges as an ideal crop for the cost-effective transgenic production of fructans due to its high efficiency for fixing carbon and storing the substrate sucrose. As other gramineous species, sugarcane is recalcitrant to genetic transformation. In this work, we optimized conditions for the transformation of sugarcane cv. C1051 -73 via microprojectile bombardment of embryogenic calli. The genes encoding the enhanced green-fluorescent protein (eGFP) and the neomycin phosphotransferase (nptII), both under the control of the maize ubiquitin 1 (Ubi-1) promoter, were used for the early detection of transient transformation events and for the selection of stable transfor-mants, respectively. DNA was efficiently delivered into the cell without causing drastic damages in calli bombarded at the distance of 11 cm and the argon pressure of 90 PSI. Non-mosaic transgenic plantlets were recovered by increasing the geneticin concentration from 20 mg/L during callus growth to 25 mg/L for the shooting and rooting steps. Moreover, using the optimized transformation procedure, we recovered twenty transgenic sugarcane lines carrying the Gluconacetobacter diazotrophicus levansucrase gene (lsdA) modified for vacuolar targeting of the enzyme, as a strategy for fructan production. Southern blot and PCRanalysis revealed the stable presence of the chimaeric lsdA in the primary stalk and sprouts of plants grown under field conditions. None of the transgenic lines accumulated levan in mature stems or leaves, although one of them showed evident levansucrase activity in leaf extracts. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of Revista Científica Guillermo de Ockham is the property of Revista Cientifica Guillermo de Ockham, Universidad de San Buenaventura and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

Copyright of Revista Colombiana de Biotecnología is the property of Universidad Nacional de Colombia and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

Papaya production acquires major economic importance all over the world every day. It is consumed as fresh fruit or processed to obtain other products in the pharmaceutical, cooking, and medical industries and in the brewing industry to obtain nonalcoholic drinks. Currently, Agricultural Science faces serious problems such as plant virus control, which form an important group of pathogenic organisms. To obtain resistance to the Papaya ringspot virus is an increasing interest area because main commercial varieties of papaya are susceptible to this disease. Genetic engineering has achieved important results aimed to solve this problem introducing new elements at the global strategic control. Our work summarizes the main strategies used to obtain resistance to Papaya ringspot virus during the last two decades. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of Revista de Investigación is the property of Universidad Pedagogica Experimental Libertador and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

Genetic breeding of bananas by genetic transformation requires an efficient selection system. One of the selection markers most widely used is the bar gene from Streptomyces hygroscopicus, which encodes phosphinothricin acetyltransferase and confers resistance to phosphinothricin and glufosinate-ammonium, the active ingredients in several commercial herbicides such as BASTA®, Finale® and Liberty®. The present investigation was aimed to determine the minimum lethal concentration of glufosinate-ammonium (Finale®) on embryogenic cell aggregates, in vitro cultured shoots and plants grown in greenhouse of banana cv. 'Grande naine' (Musa AAA). Different concentrations of this herbicide were used in the culture embryogenic cell clusters (5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0 mg l-1), in vitro cultured shoots (0, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0, 4.0 mg l-1). This was also applied to the foliage of plants in greenhouse (0, 5.0, 10.0, 20.0, 30.0, 40.0 g l-1). Results showed that the minimum lethal concentration in embryogenic cell clusters was 20.0 mg l-1 glufosinate ammonium,in in vitro shoots 3.0 mg l-1 and in plants in greenhouse 30.0 g l-1. Results also demonstrated that the use of glufosinate ammonium as a selective agent of transformants carrying the bar gene is possible. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation is difficult in beans. Efficiency can be improved preparing explants for the infection. The aim of this research was to determine the effect of treatment with carborundum to cotyledon nodes and organogenic callus of Phaseolus vulgaris var. CIAP 7247 in the regeneration and transient expression of â-glucuronidase. A stem segment of 5-6 mm length, containing the cotyledon node, was taken three days after mature seed germination. Fragments of 4-5 mm diameter on the seventh day after the third subculture were used in the case of organogenic callus. Five treatments at different times for the application of carborundum were studied (0, 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0 minutes). Results showed that the application of a carborundum solution (0.5g/30ml of sterile water) in agitation, caused damage on both types of explants used. These results concluded that the application of carborundum for 1.5 minutes achieved at least regeneration of multiple buds and an average 9.68 of blue spots. However, there was an increase GUS positive spot in organogenic callus with a treatment for 1.0 minute, without affecting subsequent plant regeneration of transformed tissues in this variety of beans. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Digitalis purpurea L. produces cardiatonic glycosides such as digoxin and digitoxin, which are widely used for congestive heart failure. Genomic studies of this species are limited because there is no efficient genetic transformation system. One of the first steps to launch a transgene technology is to obtain the method and agent to select transformed out of non-transformed cells. In the current study, the Geneticin G-418 minimal inhibitory concentration was determined for leaf explants on callus formation. Besides, the effect of concentrations of this antibiotic between 10 and 50 mg·l-1 on leaf fragments was evaluated. An evaluation scale, taking into account the percentage of the explants which did not form callus, was proposed. No explant developed callus when leaf fragments were cultured at 50 mg·l-1. This concentration was considered as the minimal inhibitory and was selected for future works on genetic transformation. [ABSTRACT FROM AUTHOR]