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Galectins play key roles in the inflammatory cascade. In this study, we aimed to analyze the effect of galectin-1 (Gal-1) in the function of intestinal epithelial cells (IECs) isolated from healthy and inflamed mucosa. IECs isolated from mice or patients with inflammatory bowel diseases (IBD) were incubated with different pro-inflammatory cytokines, and Gal-1 binding, secretion of homeostatic factors and viability were assessed. Experimental models of food allergy and colitis were used to evaluate the in vivo influence of inflammation on Gal-1 binding and modulation of IECs. We found an enhanced binding of Gal-1 to: (a) murine IECs exposed to IL-1β, TNF, and IL-13; (b) IECs from inflamed areas in intestinal tissue from IBD patients; (c) small bowel of allergic mice; and (d) colon from mice with experimental colitis. Our results showed that low concentrations of Gal-1 favored a tolerogenic micro-environment, whereas high concentrations of this lectin modulated viability of IECs through mechanisms involving activation of caspase-9 and modulation of Bcl-2 protein family members. Our results showed that, when added in the presence of diverse pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor (TNF), IL-13 and IL-5, Gal-1 differentially promoted the secretion of growth factors including thymic stromal lymphopoietin (TSLP), epidermal growth factor (EGF), IL-10, IL-25, and transforming growth factor (TGF-β1). In conclusion, we found an augmented binding of Gal-1 to IECs when exposed in vitro or in vivo to inflammatory stimuli, showing different effects depending on Gal-1 concentration. These findings highlight the importance of the inflammatory micro-environment of mucosal tissues in modulating IECs susceptibility to the immunoregulatory lectin Gal-1 and its role in epithelial cell homeostasis. Fil: Muglia, Cecilia Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina Fil: Papa Gobbi, Rodrigo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina Fil: Smaldini, Paola Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina Fil: Orsini Delgado, María Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina Fil: Candia, Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina Fil: Zanuzzi, Carolina Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Sambuelli, Alicia. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Gastroenterología "Dr. Carlos B. Udaondo"; Argentina Fil: Rocca, Andrés. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Gastroenterología "Dr. Carlos B. Udaondo"; Argentina Fil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Docena, Guillermo H.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina

During the past decade, a better understanding of the cellular and molecular mechanisms underlying tumor immunity has provided the appropriate framework for the development of therapeutic strategies for cancer immunotherapy. Under this complex scenario, galectins have emerged as promising molecular targets for cancer therapy responsible of creating immunosuppressive microenvironments at sites of tumor growth and metastasis. Galectins, expressed in tumor, stromal, and endothelial cells, contribute to thwart the development of immune responses by favoring the expansion of T regulatory cells and contributing to their immunosuppressive activity, driving the differentiation of tolerogenic dendritic cells, limiting T cell viability, and maintaining T cell anergy. The emerging data promise a future scenario in which the selective blockade of individual members of the galectin family, either alone or in combination with other therapeutic regimens, will contribute to halt tumor progression by counteracting tumor-immune escape. Here we describe a selection of methods used to investigate the role of galectin-1 in tumor-immune escape. Fil: Cerliani, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: D'alotto Moreno, Tomas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Compagno, Daniel Georges. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina Fil: Dergan Dylon, Leonardo Sebastian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Laderach, Diego Jose. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Gentilini, Lucas Daniel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Croci Russo, Diego Omar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Mendez Huergo, Santiago Patricio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Salatino, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Rabinovich, Gabriel Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina

Kaposi’s sarcoma (KS), a multifocal vascular neoplasm linked to human herpesvirus-8 (HHV-8/KS-associated herpesvirus [KSHV]) infection, is the most common AIDS-associated malignancy. Clinical management of KS has proven to be challenging because of its prevalence in immunosuppressed patients and its unique vascular and inflammatory nature that is sustained by viral and host-derived paracrine-acting factors primarily released under hypoxic conditions. We show that interactions between the regulatory lectin galectin-1 (Gal-1) and specific target N-glycans link tumor hypoxia to neovascularization as part of the pathogenesis of KS. Expression of Gal-1 is found to be a hallmark of human KS but not other vascular pathologies and is directly induced by both KSHV and hypoxia. Interestingly, hypoxia induced Gal-1 through mechanisms that are independent of hypoxia-inducible factor (HIF) 1α and HIF-2α but involved reactive oxygen species–dependent activation of the transcription factor nuclear factor κB. Targeted disruption of Gal-1–N-glycan interactions eliminated hypoxia-driven angiogenesis and suppressed tumorigenesis in vivo. Therapeutic administration of a Gal-1–specific neutralizing mAb attenuated abnormal angiogenesis and promoted tumor regression in mice bearing established KS tumors. Given the active search for HIF-independent mechanisms that serve to couple tumor hypoxia to pathological angiogenesis, our findings provide novel opportunities not only for treating KS patients but also for understanding and managing a variety of solid tumors. Fil: Croci Russo, Diego Omar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina Fil: Salatino, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina Fil: Rubinstein, Natalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina Fil: Cerliani, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Cavallin, Lucas E.. Miami University; Estados Unidos Fil: Leung, Howard J.. Miami University; Estados Unidos Fil: Ouyang, Jing. Dana Farber Cancer Institute; Estados Unidos Fil: Ilarregui, Juan Martin. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina Fil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina Fil: Domaica, Carolina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina Fil: Croci, María C.. Universidad Nacional del Comahue; Argentina Fil: Shipp, Margaret A.. Dana Farber Cancer Institute; Estados Unidos Fil: Mesri, Enrique A.. Miami University; Estados Unidos Fil: Albini, Adriana. Istituto di Ricovero e Cura a Carattere Scientifico MultiMedica; Italia Fil: Rabinovich, Gabriel Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina

Galectins are evolutionarily conserved glycan-binding proteins with pleiotropic roles in innate and adaptive immune responses. Galectin-3 has been implicated in several immunological processes as well as in pathogen recognition through specific binding to glycosylated receptors on the surface of host cells or microorganisms. In spite of considerable evidence supporting a role for galectin-3 in host–pathogen interactions, the relevance of this lectin in the regulation of the host defence mechanisms in vivo is poorly understood. In this study, we analysed the impact of galectin-3 deficiency during infection with three distinct species of rodent malaria parasites, Plasmodium yoelii 17XNL, Plasmodium berghei ANKA and Plasmodium chabaudi AS. We found that galectin-3 deficiency showed a marginal effect on the course of parasitaemia during P. chabaudi infection, but did not alter the course of parasitaemia during P. berghei infection. However, lack of galectin-3 significantly reduced P. yoelii parasitaemia. This reduced parasitaemia in Lgals3−/− mice was consistent with higher titres of anti-P. yoelii MSP119 IgG2b isotype antibodies when compared with their wild-type counterparts. Our results reflect the complexity and singularity of host–pathogen interactions, indicating a species-specific role of endogenous galectin-3 in the control of parasite infections and the modulation of antibody responses. Fil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Tongren, J. E.. London School of Hygiene and Tropical Medicine; Reino Unido Fil: De Souza, J. B.. London School of Hygiene and Tropical Medicine; Reino Unido Fil: Liu, F. T.. University of California at Davis; Estados Unidos Fil: Riley, E. M.. London School of Hygiene and Tropical Medicine; Reino Unido Fil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina

Las galectinas, una familia de lectinas que reconocen glico-conjugados específicos en la superficie celular y la matriz, participan en diversos procesos biológicos como reguladores de la ho-meostasis de la respuesta inmune y de la progresión tumoral. Considerando el papel inmunomodulador de Galectina-1 (Gal-1) en modelos de inflamación crónica y su contribución a la creación de microambientes tolerogénicos, durante los últimos años exploramos el impacto de esta proteína sobre el balance de células T y la funcionalidad de células dendríticas (CDs). Mientras las células Th1 y Th17 poseen el repertorio de glicanos necesarios para la unión de Gal-1, los linfocitos Th2 son resistentes a la unión de esta proteína, lo cual explicaría el incremento en la susceptibilidad de los linfocitos Th1 y Th17 a la apoptosis inducida por Gal-1 y la consecuente desviación en el balance de la respuesta inmune hacia un perfil Th2. Además, identificamos un circuito tolerogénico en el que Gal‐1 induce la diferenciación de CDs tolerogénicas productoras de IL‐27, la consecuente expansión de células T regulatorias productoras de IL‐10 y la supresión de la inflamación mediada por células Th1 y Th17. Postulamos un nuevo mecanismo de regulación homeostática de la respuesta inmune basado en la interacción entre Gal‐1 y sus gli-canos específicos, el cual permite anticipar nuevos horizontes terapéuticos, en los que la modulación de la expresión de Gal‐1 o sus glicanos nos permitiría regular la respuesta inmune. Galectins, a family of endogenous glycan-binding proteins able to recognize specific glycoconjugates on cell surface and extracellular matrix, control critical immunological processes involved in immune homeostasis and tumor progression. Given the immunosuppressive role of Galectin-1 (Gal-1) in different models of chronic inflammation and its contribution to the creation of tolerogenic microenvironments in cancer and pregnancy models, the impact of this protein on T helper cell balance and dendritic cells (DCs) functionality was explored. A novel mechanism, based on the differential glycosylation of T helper cell subsets, by which Gal-1 preferentially eliminates antigen-specific Th1 and Th17 cells, leading to a shift toward a Th2 profile was identified. While Th1- and Th-17-differentiated cells expressed the repertoire of cell surface glycans that are critical for Gal-1-induced cell death, Th2 cells are protected from Gal-1 through differential sialylation of cell surface glycoproteins. More recently, the ability of Gal-1 to trigger the differentiation of tolerogenic dendritic cells (DCs), which promote resolution of autoimmune inflammation, was demonstrated. A tolerogenic circuit linking Gal-1 signaling, IL-27-producing DCs and IL-10-secreting T cells was identified. It can be postulated that molecular interactions between endogenous galectins and specific glycans constitute a novel mechanism of homeostatic regulation of immune responses. Understanding the role of protein-glycan interactions in the establishment of tolerogenic or inflammatory programs will enable the design of more rational immunotherapeutic strategies with broad biomedical implications. As galectinas, uma família de lectinas que reconhecem gli-coconjugados específicos na superfície celular e a matriz, participam em diversos processos biológicos como reguladores da homeostase da resposta imune e da progressão tu-moral. Considerando o papel imunomodulador de Galec-tina-1 (Gal-1) em modelos de inflamação crônica e sua contribuição à criação de microambientes tolerogênicos, durante os últimos anos exploramos o impacto desta proteína sobre o balanço de células T e a funcionalidade de células dendríticas (CDs). Enquanto as células Th1 e Th17 possuem o repertório de glicanos necessários para a união de Gal-1, os linfócitos Th2 são resistentes à união desta proteína, o qual explicaria o incremento na suscetibilidade dos linfóci-tos Th1 e Th17 à apoptose induzida por Gal-1 e o conse-guinte desvio no balanço da resposta imune para um perfil Th2. Além disso, identificamos um circuito tolerogênico no qual Gal‐1 induz a diferenciação de CDs tolerogênicas pro-dutoras de IL‐27, a conseguinte expansão de células T re-gulatórias produtoras de IL‐10 e a supressão da inflamação mediada por células Th1 e Th17. Postulamos um novo mecanismo de regulação homeostática da resposta imune ba-seado na interação entre Gal‐1 e seus glicanos específicos, que permite antecipar novos horizontes terapêuticos, nos quais a modulação da expressão de Gal‐1 ou seus glicanos nos permitiria regular a resposta imune. Fil: Sundblad, Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Cerliani, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Compagno, Daniel Georges. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Croci Russo, Diego Omar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: D'alotto Moreno, Tomas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Dergan Dylon, Leonardo Sebastian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Di Lella, Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Gatto, Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular; Argentina Fil: Gentilini, Lucas Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Giribaldi, María Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Cs.exactas y Naturales. Departamento de Quimica Biologica. Laboratorio de Analisis Biologicos E Inmunoquimica; Argentina Fil: Guardia, Carlos Manuel Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Ilarregui, Juan Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Laderach, Diego Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Martínez Allo, Verónica Candela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Mascanfroni, Ivan Darío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Mendez Huergo, Santiago Patricio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Salatino, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Stupirski, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina Fil: Rabinovich, Gabriel Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); Argentina; Argentina

Las interacciones entre proteínas y glicanos juegan un papel fundamental en numerosos eventos de la regulación de la fisiología del sistema inmune, como maduración tímica, activación, migración y apoptosis de células T. Los carbohidratos son capaces de modular la fisiología linfocitaria a través de la interacción específica con lectinas endógenas como selectinas y galectinas. Estas lectinas endógenas son capaces de reconocer estructuras sacarídicas localizadas en glicoproteínas de la superficie celular y regular procesos tan diversos como proliferación, diferenciación y ciclo celular. Existen diversos niveles de control de la interacción entre lectinas y azúcares; en primer lugar podemos mencionar la expresión regulada de estas lectinas durante el desarrollo de una respuesta inmune, y en segundo lugar la regulación espacio-temporal de la actividad de glicosiltranferasas y glicosidasas cuya función es crear y modificar los azúcares específicos para estas lectinas. Existen evidencias de que la expresión y actividad de estas enzimas se regulan en forma positiva o negativa durante diferentes eventos del desarrollo, ejecución y finalización de la respuesta inmune. En este artículo se analizarán los mecanismos a través de los cuales las interacciones entre lectinas con sus carbohidratos específicos modulan en forma específica diversos procesos fisiológicos, como maduración de timocitos, migración linfocitaria, activación y diferenciación de células T y apoptosis. Recent evidence indicates that protein-glycan interactions play a critical role in different events associated with the physiology of T-cell responses including thymocyte maturation, T-cell activation, lymphocyte migration and T-cell apoptosis. Glycans decorating T-cell surface glycoproteins can modulate T-cell physiology by specifically interacting with endogenous lectins including selectins and galectins. These endogenous lectins are capable of recognizing sugar structures localized on T-cell surface glycoproteins and trigger different signal transduction pathways leading to differentiation, proliferation, cell cycle regulation or apoptosis. Protein-carbohydrate interactions may be controlled at different levels, including regulated expression of lectins during T-cell maturation and differentiation and the spatio-temporal regulation of glycosyltransferases and glycosidases, which create and modify sugar structures present in T-cell surface glycoproteins. This article briefly reviews the mechanisms by which protein-carbohydrate interactions modulate immunological processes such as T-cell activation, migration and apoptosis. Fil: Toscano, Marta Alicia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Ilarregui, Juan Martin. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Bianco, German Ariel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Rubinstein, Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina Fil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina

Apoptosis of cytotoxic T lymphocytes by herpes simplex virus type-1 (HSV-1) has been reported to be a relevant mechanism of viral immune evasion. Galectin-1 (Gal-1), an endogenous lectin involved in T-cell apoptosis, has recently gained considerable attention as a novel mechanism of tumor-immune evasion. Here we investigated whether infection of cells with HSV-1 can modulate the expression of Gal-1. Results show that pro-apoptotic Gal-1, but not Gal-3, is remarkably up-regulated in cell cultures infected with HSV-1. In addition, this protein is secreted to the extracellular milieu, where it contributes to apoptosis of activated T cells in a carbohydrate-dependent manner. Since many viruses have evolved mechanisms to counteract the antiviral response raised by the infected host, our results suggest that HSV-1 may use galectin-1 as a weapon to kill activated T cells and evade specific immune responses. Fil: Gonzalez, Maria Ines. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina Fil: Rubinstein, Natalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Ilarregui, Juan Martin. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Toscano, Marta Alicia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Sanjuan, Norberto Aníbal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina Fil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina

Despite the existence of tumor-specific immune cells, most tumors have devised strategies to avoid immune attack. We demonstrate here that galectin-1 (Gal-1), a negative regulator of T cell activation and survival, plays a pivotal role in promoting escape from T cell-dependent immunity, thus conferring immune privilege to tumor cells. Blockade of immunosuppressive Gal-1 in vivo promotes tumor rejection and stimulates the generation of a tumor-specific T cell-mediated response in syngeneic mice, which are then able to resist subsequent challenge with wild-type Gal-1-sufficient tumors. Our data indicate that Gal-1 signaling in activated T cells constitutes an important mechanism of tumor-immune escape and that blockade of this inhibitory signal can allow for and potentiate effective immune responses against tumor cells, with profound implications for cancer immunotherapy Fil: Rubinstein, Natalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Alvarez, Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina Fil: Zwirner, Norberto Walter. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Toscano, Marta Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina Fil: Ilarregui, Juan Martin. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina Fil: Bravo, Alicia. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital Interzonal de Agudos "Eva Perón"; Argentina Fil: Jose Mordoh. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Leonardo Fainboim. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina Fil: Podhajcer, Osvaldo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina Fil: Rabinovich, Gabriel Adrián. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2022 La proteína específica de leucocitos 1, LSP1, es una fosfoproteína intracitoplasmática de 52 kDa que se une a F-actina y es expresada en todos los leucocitos humanos y murinos, como así también en células endoteliales. Múltiples estudios indican que polimorfismos o disminuciones en los niveles de expresión de LSP1 constituyen factores de riesgo para el desarrollo de distintos tipos de cáncer, como cáncer de mama y hepatocarcinoma. A pesar de su bajo número tanto en tumores como en órganos linfoides, las células dendríticas son esenciales para la inducción de la respuesta inmune antitumoral. Las células dendríticas capturan antígenos asociados a tumor, los procesan transformándolos en péptidos inmunogénicos que son cargados en las moléculas del MHC, y los presentan a los linfocitos T proveyendo además coestimulación y citoquinas, permitiendo de esta manera la generación de linfocitos T citotóxicos, células fundamentales en la inmunidad antitumoral. Estudios previos llevados a cabo por nuestro grupo de investigación revelaron que la ausencia de LSP1 en células dendríticas, afecta la inducción de una respuesta citotóxica in vivo en animales WT y la activación de linfocitos T CD8+ vírgenes in vitro. Además, las células dendríticas LSP1 KO exponen menor proporción de péptidos antigénicos asociados a MHC-I en su superficie debido a un defecto en la traslocación del antígeno desde los endosomas al citosol, proceso fundamental para una eficiente presentación cruzada de antígenos. Para determinar el rol de LSP1 en la generación de una respuesta inmune antitumoral utilizamos la línea de melanoma murino B16-OVA. Observamos que luego de implantar de manera subcutánea 1.105 células, ratones carentes de LSP1 desarrollan tumores de manera más temprana, los mismos crecen a una velocidad superior y alcanzan tamaños mayores que los respectivos tumores implantados en animales WT. Dichos tumores presentan una menor área de necrosis, fenómeno que se ve acompañado de un menor infiltrado por parte de las células del sistema inmune. Sin embargo, la composición del infiltrado inflamatorio es similar en ambos grupos de animales, siendo las células dendríticas CD103+ la población minoritaria en tumores extraídos tanto de ratones WT como de ratones LSP1 KO. La ausencia de LSP1 a nivel leucocitario condiciona su capacidad para acceder al microambiente tumoral, lo que podría explicar, al menos en parte, la menor frecuencia leucocitaria hallada en tumores extraídos de ratones carentes de LSP1. Por otro lado, el análisis del microambiente tumoral reveló que los tumores que se desarrollan en ratones LSP1 KO presentan una mayor concentración de múltiples citoquinas inflamatorias, incluyendo IL-23, TNF-α, IL-12p70, IL-1β, IL-10, IL-27, IL-17A, IFN-β, y GM-CSF, que presentes en altas concentraciones de manera crónica pueden favorecer el desarrollo del tumor. La caracterización de las poblaciones leucocitarias en ganglio linfático indicó que no existen diferencias a nivel basal entre los animales WT y LSP1 KO. Sin embargo, el análisis de los ganglios drenantes de tumor muestra varias diferencias al comparar los grupos experimentales. En ratones LSP1 KO, los ganglios drenantes de tumor presentan una menor frecuencia de neutrófilos y linfocitos B, sumado a una mayor proporción de monocitos y linfocitos T. Además, existe una mayor frecuencia de células dendríticas totales, pero de mayor relevancia para el desarrollo de una respuesta inmune antitumoral es la remodelación que existe en este compartimento celular, ya que hay una menor frecuencia de células dendríticas CD103+ y CD8α+ capaces de efectuar la presentación cruzada de antígenos. La funcionalidad de las células dendríticas también se ve comprometida por la ausencia de LSP1. Las mismas, capturan antígenos tumorales de manera deficiente y consecuentemente, las células dendríticas CD103+, principales responsables de transportar antígenos al ganglio drenante de tumor, lo hacen en una menor proporción, lo cual no se encuentra condicionado por los niveles de expresión de CCR7. Además, las células dendríticas LSP1 KO presentes en ganglio drenante a tumor inducen una menor activación y proliferación de linfocitos T CD8+, afectando la generación de la respuesta inmune antitumoral. Dichas células dendríticas, expresan mayores niveles de la molécula inhibitoria PD-L1, sin embargo, esta vía de señalización no es la principal responsable del deficiente control tumoral observado en los ratones LSP1 KO ya que el bloqueo de la interacción PD-L1/PD-1 mediante la utilización de un anticuerpo monoclonal dirigido contra PD-1 no modifica el tamaño tumoral en estos animales. La evaluación de linfocitos T específicos en sangre periférica indica que los niveles son comparables entre ratones WT y LSP1 KO. Lamentablemente, dichas células no pudieron ser halladas a nivel tumoral ni el ganglio drenante, posiblemente por su bajo número y por problemas de sensibilidad y especificidad de la técnica. Sin embargo, la producción de moléculas efectoras como perforinas y granzima B, como así también la producción simultánea de IFN-γ y el marcador de degranulación Lamp1, es significativamente menor en linfocitos T CD8+ intratumorales en ratones LSP1 KO, lo que indica que dichos linfocitos poseen alteraciones a nivel funcional. Al evaluar la capacidad citotóxica in vivo en ratones con tumor no se detectó lisis específica en ninguno de los dos grupos de animales estudiados. Por ello, con el objetivo de potenciar la respuesta inmune, los animales fueron inmunizados con OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16, lo cual evidenció un menor porcentaje de lisis en los ratones LSP1 KO, reflejando su menor capacidad citotóxica a pesar del fuerte estímulo brindado para desarrollar este tipo de respuesta. Finalmente, los resultados indican que una única inmunización con OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16 protege parcialmente a los ratones tanto WT como LSP1 KO frente al desarrollo tumoral e incrementa su sobrevida. Sin embargo, la respuesta generada en los animales LSP1 KO continúa siendo inferior a la que se desencadena en los animales WT, lo que indica que la menor citotoxicidad desarrollada en los animales LSP1 KO condiciona su respuesta frente a tumores e impide un adecuado control de los mismos. A partir de los resultados obtenidos podemos concluir que la ausencia de LSP1 afecta la generación de la respuesta inmune antitumoral en varios niveles. Los leucocitos presentan limitaciones en su capacidad migratoria o de extravasación lo que dificulta su acceso al microambiente tumoral y genera la menor proporción de infiltrado observado en los animales LSP1 KO, limitando de esta manera la eliminación de las células transformadas. Además, se afecta tanto la captura de antígenos tumorales por parte de las células dendríticas como su transporte al ganglio drenante a tumor, sitio donde se inicia la respuesta inmune específica. Así, sumado a los defectos en la traslocación antigénica previamente observados en nuestro grupo, las DCs presentan dificultades para activar e inducir la proliferación de linfocitos T CD8+ vírgenes, células fundamentales en la eliminación de tumores. Adicionalmente los linfocitos T CD8+ generados poseen una alteración en su funcionalidad, lo cual reduce su capacidad citotóxica y limita aún más el control del tumor. La falta de control del desarrollo tumoral podría ser responsable de la generación de un microambiente inflamatorio que se sostiene de manera crónica a nivel intratumoral, lo que favorecería a un mayor desbalance en la respuesta inmune, dificultando aún más el control del desarrollo tumoral. Por lo tanto, podemos concluir que el mayor tamaño tumoral observado en animales LSP1 KO es el resultado de múltiples factores que condicionan el desarrollo de la respuesta inmune antitumoral, con las células dendríticas como un claro factor central. LSP1 is an intracellular phosphoprotein expressed in leukocytes and endothelial cells from humans and mice. LSP1 polymorphisms or reduced expression are risk factors for some cancer types. We demonstrated that B16-OVA tumors implanted in LSP1 KO mice reach bigger sizes and grow faster than tumors inoculated in WT mice. Our results indicate that LSP1 lack modifies antitumor immune response. Leukocytes have a reduced extravasation ability, resulting in a diminished access to the tumor microenvironment and in a lower frequency of total leukocytes in tumors harvested from LSP1 KO mice. Dendritic cells antigen capture and draining lymph node migration is also influenced by LSP1 absence. In addition, LSP1 KO dendritic cells cannot activate and induce CD8+ T cells proliferation in an appropriate way. CD8+ T cells functionality is affected too. CD8+ lymphocytes have a reduced cytotoxic activity demonstrated by perforin, granzyme B and IFN-γ lower production, contributing to the deficient control of tumor growth. The uncontrolled tumor development observed in LSP1 KO mice contributes to a chronic proinflammatory microenvironment generation, favoring the unbalanced immune response and hindering the tumor growth control. Therefore, we conclude that the bigger tumor size observed in LSP1 KO mice is the result of multiple factors that influence the development of antitumor immune response, having dendritic cells a key role. 2024-09-30 Fil: Pascual, María Mercedes. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 Resumen: La evidencia acumulada a lo largo de las últimas décadas demuestra una estrecha interrelación entre los sistemas neuroendócrino e inmune. Con el fin de mantener la homeostasis del organismo y dirigir respuestas coordinadas frente a los distintos desequilibrios y patologías, ambos sistemas se encuentran en constante comunicación a través de una variedad de citoquinas, hormonas, neurotransmisores y sus receptores. En los últimos años el estudio de la relación entre las hormonas tiroideas (HTs) y el sistema inmune ha tomado relevancia. Sin embargo, la comprensión de la conexión entre las HTs y el sistema inmune es todavía incompleta debido a la complejidad de cada sistema y más aún a su interacción. Actualmente las HTs son reconocidas por desempeñar un rol esencial en las células de la inmunidad innata y adaptativa, y sus respuestas asociadas. El papel de las HTs en el inicio de la respuesta inmune y su efecto en el direccionamiento de la respuesta inmune adaptativa fue abordado hace poco más de una década. En este sentido el laboratorio donde se desarrolló esta tesis doctoral reportó los primeros hallazgos del efecto de triiodotironina (T3) sobre las características y funcionalidad de las Células Dendríticas (DCs), consideradas las principales células presentadoras de antígenos. En este contexto, se evidenció por primera vez la expresión de receptores de HTs (TR) en DCs murinas, principalmente la isoforma β1. Además, se demostró que niveles fisiológicos de la HT activa, T3, inducen la maduración de DCs y su capacidad de secreción de IL-12. A su vez, las DCs estimuladas con T3 incrementaron la capacidad aloestimulatoria de linfocitos T, direccionando la respuesta inmune hacia los perfiles proinflamatorios T helper 1 (Th1), Th17 y citotóxicos con aumentada producción de la citoquina efectora IFN-. Asimismo, el tratamiento de las DCs con T3 aumentó significativamente la producción de las citoquinas TNF-α, IL-6 e IL-23, involucradas en la producción de IL-17 y disminuyó la población de células T regulatorias. Por otro lado, T3 fue capaz de reducir la apoptosis de DCs y aumentar su migración hacia los ganglios linfáticos. Considerando estos resultados se desarrolló una vacunación antitumoral basada en DCs estimuladas con T3 en un modelo tumoral de melanoma. Este tratamiento fue capaz de aumentar el porcentaje de animales libres de tumor, retrasar la aparición y disminuir el volumen del tumor en los ratones afectados, aumentando la sobrevida de los mismos. Sobre la base de los antecedentes presentados, esta tesis doctoral implica la profundización del efecto de las HTs sobre la inducción de respuestas inmunes adaptativas a través de las DCs como objetivo general. En lo particular, este trabajo abordó 2 objetivos específicos: 1) Desarrollo de una estrategia de vacunación para el tratamiento antitumoral basada en la manipulación de DCs estimuladas con T3 expuestas a antígenos asociados al tumor (AATs) y 2) Estudio de los efectos de T3 sobre las características y funcionalidad de las DCs humanas. 1) Los resultados obtenidos en la primera parte de este trabajo de tesis doctoral indicaron, por un lado, que el tratamiento con T3 no modifica la capacidad de captación antigénica de las DCs frente a antígenos propios del tumor, sin embargo, esta hormona es capaz de incrementar la expresión del marcador de maduración CD86. Además, se evidenció un marcado aumento por parte de las DCs en la producción de citoquinas proinflamatorias, como IL-12, IL-6 y TGF- luego de ser tratadas con T3. En el modelo murino de carcinoma de colon, T3 potenció los efectos antitumorales de la vacunación a base de DCs cargadas con antígenos tumorales, evidenciados por una reducción en el tamaño tumoral. En efecto, la respuesta inmune generada por la inmunoterapia basada en DCs estimuladas con T3 consistió en un marcado incremento en las poblaciones Th1 (CD4+ IFN-+), Th17 (CD4+ IL-17+), como así también en las células T citotóxicas CD8+ IFN-+, y citotóxicas 17 (Tc17), acompañada por un incremento en la secreción de IFN- e IL-17. Teniendo en cuenta estos resultados y los antecedentes del grupo que relacionan estrechamente la estimulación de las DCs con T3 con una mayor producción de IL-17, sumado a las controversias bibliográficas relacionadas al papel de esta citoquina en cáncer, decidimos analizar la importancia de IL-17 como mediador de los efectos inmunoterapéuticos en nuestro tratamiento antitumoral. Para ello evaluamos el crecimiento tumoral en ratones IL-17 A/F-doble Knockout (IL-17KO), aplicando el mismo esquema de vacunación y comparando dicho crecimiento en ratones Wild Type (WT) como control. De este modo, pudimos evidenciar que la ausencia de IL-17 en los ratones IL-17KO conduce a un mayor crecimiento tumoral, dado que observamos un significativo aumento del volumen del tumor, al comparar los ratones transgénicos que fueron vacunados con DCs cargadas con AATs y tratadas con T3, con aquellos animales WT que recibieron el mismo tratamiento. A su vez, observamos que IL-17 presentaría un rol en la angiogénesis tumoral, lo que favorecería la reducción del tumor por la inmunoterapia basada en DCs estimuladas con T3 en el modelo de carcinoma de colon MC38. En conclusión, los resultados aquí presentados refuerzan los conocimientos de las propiedades adyuvantes de T3 para su utilización en la vacunación antitumoral basada en DCs, y profundizan en los mecanismos involucrados en el desarrollo de una respuesta inmune eficiente luego de la vacunación. 2) Los resultados obtenidos en la segunda parte de este trabajo de tesis doctoral demuestran que concentraciones fisiológicas de T3 tienen efectos inmunomoduladores sobre las DCs diferenciadas a partir de monocitos de sangre periférica (huDCs). Esto fue evidenciado por una mayor expresión de la molécula CD86 en la superficie celular y una tendencia a incrementar en el porcentaje de células CD11c+ HLA-DR+ luego del tratamiento con la hormona. Por otro lado, se demostró que la presencia de T3 es capaz de inducir una mayor producción de la citoquina proinflamatoria IL-12 por parte de las huDCs. Estos resultados iniciales aportan en el conocimiento del efecto de T3 sobre la maduración y la activación de DCs humanas, induciendo la liberación de IL-12 por parte de estas células, y probablemente favoreciendo la polarización de la respuesta inmune hacia un perfil proinflamatorio. Estos hallazgos son prometedores y alientan la profundización del estudio del efecto de T3 sobre DCs humanas, aspecto muy poco explorado y de trascendencia considerando la potencial transferencia de los resultados obtenidos en modelos murinos a la oncología humana. 2023-09-30 Fil: Soler, María Florencia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Montesinos, María Del Mar. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Montesinos, María del Mar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Porporatto, Carina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto de Investigación; Argentina. Fil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Fil: Pellizas, Claudia Gabriela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Pellizas, Claudia Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Toscano, Marta Alicia. Salta. Gobierno de la Provincia de Salta. Ministerio de Salud Pública. Hospital Doctor Arturo Oñativia. Laboratorio de Biología Molecular y Citogenética; Argentina.