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Ninety five sheeps from twenty three farms located in thirteen municipalities were analysed concerned to prevalence of Brucella ovis antibodies. External exams by touching scrotal organs and serologicalexams were done. The serum was submitted to the immunodiffusion gel agar test for antibodies of Brucella ovis. All samples reacted negatively to serological test and no clinical symptoms of Brucella ovis from the scrotum were observed. Com objetivo de determinar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis foram examinados 95 carneiros provenientes de 23 cabanhas localizadas em 13 municípios de Santa Catarina. Foram realizados exames clínicos externos do aparelho reprodutor por palpação e coleta de sangue. Os soros desses animais foram submetidos à prova de gel difusão para pesquisa de anticorpos contra a Brucella ovis e reagiram negativamente. No exame clínico, não se observaram alterações nos órgãos reprodutores dos carneiros.

Com objetivo de determinar a prevalência de anticorpos contra Brucella ovis foram examinados 95 carneiros provenientes de 23 cabanhas localizadas em 13 municípios de Santa Catarina. Foram realizados exames clínicos externos do aparelho reprodutor por palpação e coleta de sangue. Os soros desses animais foram submetidos à prova de gel difusão para pesquisa de anticorpos contra a Brucella ovis e reagiram negativamente. No exame clínico, não se observaram alterações nos órgãos reprodutores dos carneiros.

Até hoje não foi encontrado um teste sorológico definitivo para diagnosticar a doença de Chagas, recomendando-se a avaliação da mesma amostra de soro através de duas ou três metodologias. Empregada desde o início do século, a reação de fixação do complemento apresenta-se como um método barato e sensível. Porém, sua difícil e demorada execussão, a instabilidade dos reagentes utilizados e o desenvolvimento de técnicas mais sensíveis e simples como a IFI e a HAI, a estão levando a um gradativo abandono. GARCIA e cols (1995), avaliaram uma nova microtécnica de fixação de complemento (NFC) rápida (2hs) e sensível utilizando reagente estáveis e facilmente preparados (complemento e hemolisina obtidos de Guinea pig e eritrócitos humanos), a qual apresentou elevadas sensibilidade e especificidade para diagnosticar a moléstia de Chagas crônica em soro não diluído, utilizando um antígeno etanólico obtido a partir de formas epimastigotas do T. cruzi. No presente trabalho, avaliou-se a NFC, comparativamente a IFI, para o diagnóstico da doença de Chagas crônica utilizando quatro preparações antigênicas de T. cruzi.-. um extrato aquoso (GA) e um extrato etanólico (EP) de epimastigotas obtidos de cultura em meio LIT e extratos etanólicos de íripomastigotas (TR) e amastigotas (AM) obtidas de cultura celular Empregaram-se 236 amostras testadas por IFI: 109 positivas- entre elas 20 com diagnóstico parasitológico- e 127 amostras negativas- entre elas 96 de doadores de sangue, 6 de portadores de lues, 5 de portadores de toxoplasmose, 10 de portadores de leishmaniose tegumentar americana, 8 de portadores de malária e duas de portadores de doença reumática. Nossos resultados mostram que realizando a titulação do sistema hemolítico em duas etapas rápidas, é possível obter reação positiva em amostras diluídas até 1:16. Comparando a NFC com a IFI os melhores limiares dereatividade encontrados foram a diluição 1:4 para o antígeno AM e 1:2 para os demais antígenos. O antígeno EP mostrou-se ser o mais adequado entre as preparações testadas, pois apresentou eo-positividade (CP) com a IFI de 0,92207 e co-negatividade de 0,90000. Os valores de CP para os demais antígenos foram de 0,68807 para o antígeno GA; 0,81118 para TR e 0,84000 para AM, enquanto os valores de CN foram 0,85454 para GA; 0,87719 para TR e 0,90000 para AM. A NFC mostrou-se ser uma microtécnica semi-quantitativa rápida, sensível, barata e de fácil execussão, aplicável ao diagnóstico da doença de Chagas. A definite serologic test to diagnosis Chagas’disease has not been found yet. It has been recommended the evaluation of serum sample through two or three different methodologies. Since the beginning of this century, the complement fixation reaction (CFR) has always been a sensible and unexpensive method. Otherwise its difficult and time-eonsuming execution, the instability of reagents involved and the development of much more sensible and easier technics like indirect immunofluoreseence (IIF) and indirect hemagglutination (IHA), rnake the CFR obsolete. Garcia et al (1995) evaluated a new microtechnique of complement fixation (NCF) which has been demonstrated rapid (2hs) and sensible using stable reagents easily prepared (eomplement and hemolysin obtained of Guineapig and humans red blood eells). This technique has presented high sensibility and speeificity to diagnosis of chronic Chagas "disease in non-diluted serum, when used an ethanolic antigen obtained from epimastigotes forms of T. cruzi. From this present data we evaluated the NCF comparing it with IIF to diagnosis chronic Chagas’disease using four (4) different antigens of T. cruzi- one water soluble extract (G.A.), the second being an ethanol-soluble extract (EP) from epimastigotes obtained from culture in LIT médium and two more ethanolic extracts from tripomastigotes (TR) and amastigotes (AM) obtained from cellular culture. We also used 236 serum samples tested by IIF as follow: 109 positive ones with 20 of them with parasitologic diagnosis; 127 negative samples being: 96 of them normal blood donors, 6 of lues positives, 5 of toxoplasmosis positive, 10 of american tegumentar leishmaniosis, 8 of malaria and two ofrheumatic disease. Our results show that the two-step titration of the hemolytic system achieve positive results in diluted samples up to 1.16. Comparing NCF with IIF we reach the best results of reactivity in 1:4 for the AM antigen and 1:2 for the other antigens. The EP antigen was the most adequate since it presented co-positivity (CP) with IIF of 0,92207 and co-negativity (CN) of 0,90000. The values of CP for the other antigens were of 0,68807 to the GA antigen; 0,81118 to the TR antigen and 0,84000 to AM. The CN values were 0,85454 to GA; 0,87719 to TR and 0,90600 to AM. The NCF showed to be a fast (2hs), sensible, unexpensive and easy semi-quantitative microtechnique, applicable to Chagas’disease diagnosis. Dissertação (Mestrado)

The 'maize common mosaic', caused by potyvirus, is among the major virus diseases of this crop in Brazil. Although there were evidences indicating Sugarcane mosaic virus (SCMV) as the most common potyvirus species in maize (Zea mays L.) in Brazil, information about those species that infect sorghum plants [Sorghum bicolor(L.) Moench] are few. Leaves showing characteristic mosaic symptoms were collected from maize and sorghum and used in serological and sequencing analysis of the coat protein (CP) gene for potyvirus species identification. Amino acid (aa) analysis of the CP N-terminal sequence of our samples showed a different repeated sequence, a higher content of the dipeptide GT, and a 15 aa longer than the majority of the SCMV sequences used for comparisons. The Brazilian maize and sorghum potyviruses formed a monophyletic group, suggesting that they can be classified within a new SCMV strain. Studies using potyvirus CP gene sequencing from Brazilian sorghum potyvirus have been reported for the first time.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-08T13:34:35Z No. of bitstreams: 1 Sergio Alves do Nascimento.pdf: 1211419 bytes, checksum: 3bc943600caeb78440095073154d36ca (MD5) Made available in DSpace on 2018-03-08T13:34:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sergio Alves do Nascimento.pdf: 1211419 bytes, checksum: 3bc943600caeb78440095073154d36ca (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq The objective of this work is to develop serological tests (AGID and ELISA -ELISAi) using antigens of the virus Arthritis Encephalitis Goat (CAEV) obtained from a goat corneal cell line (CorFC cells) grown with 0.1% FBS. For AGID antigens were obtained from cells cultured in MEM, DMEM / F12 and RPMI 1640. Of the 163 tested sera samples (28 positive and 135 negative), 28 (17.17%) were positive for MEM and Ag Ag DMEM / 12 and 29 (17.79%) to Ag is RPMI 1640. Comparing the results obtained with three Ag was observed almost perfect agreement kappa adjusted (0.98 to 1.00). The Ag RPMI 1640 antigen, which showed better quality of precipitation lines in AGID and best performance was evaluated in comparison to a commercial Ag (Kit for the diagnosis of CAE - AGID; Unika biotech, Recife). The test of 797 sera with commercial Ag showed 216 positive and 581 negative; RPMI 1640 with Ag were observed 225 positive and 572 negative, corresponding to sensitivity (Se) and specificity (Es) for 100% and 98.45%, respectively. Globally, there has been adjusted (kappa = 0.97) between the almost perfect results with both Ag. For ELISAi empregandos native viral antigens were obtained by a simple process (clarification, dialysis and the treatment with triton X-100) to from cells cultured in RPMI 1640. After standardization were made the ELISAi performance evaluations. To assess the repeatability of the observed ELISAi RPMI CV entreplacas 4.4 and 17.3 and between 18.4 and 5.1 days for negative and positive sera. The results of 722 sera tested with the kits to diagnose LVPR AGID / commercial ELISAi (Unika biotech, Recife) showed 166 positive and 556 negative; with RPMI were observed ELISAi 171 positive and 551 negative, and if Sp corresponding to about 97.59% and 98.38%, respectively, with agreement adjusted kappa 0.95, considered almost perfect. These results demonstrate that one can establish an AGID an ELISA for highly sensitive and specific diagnosis of LVPR using a simplified model for obtaining of antigens, employing CorFC cells with low levels of FBS. Depending on the cell type and medium used can be produced LVPR antigens with low FCS content, which agrees with the animal welfare, represents a reduction of input costs and protein purification processes. Objetivou-se com este trabalho desenvolver testes sorológicos (IDGA e ELISA indireto -ELISAi) utilizando antígenos do vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) obtidos a partir de uma linhagem de células de córnea caprina (células CorFC) cultivada com 0,1% de SFB. Para a IDGA foram obtidos antígenos a partir de células cultivadas em MEM, DMEM/F12 e RPMI 1640. Das 163 amostras de soros testados (28 positivas e 135 negativas), 28 (17,17%) apresentaram resultados positivos para o Ag MEM e Ag DMEM/12 e 29 (17,79%) para o Ag RPMI 1640. Comparando-se os resultados obtidos com os três Ag foi observada concordância ajustada de kappa quase perfeita (0,98 a 1,00). O antígeno Ag RPMI 1640, que apresentou melhor qualidade das linhas de precipitação na IDGA e melhor rendimento foi avaliado comparativamente com um Ag comercial (Kit para diagnóstico de CAE – IDGA; Unika biotech, Recife). O teste dos 797 soros com o Ag comercial apresentou 216 positivos e 581 negativos; com o Ag RPMI 1640 foram observados 225 resultados positivos e 572 negativos, correspondendo a sensibilidade (Se) e especificidade (Es) relativas de 100% e 98,45%, respectivamente. De forma global, houve uma concordância ajustada (kappa = 0,97) quase perfeita entre os resultados com ambos Ag. Para o ELISAi foram empregandos antígenos virais nativos obtidos por um processo simples (clarificação, diálise e tratamento com triton X-100) a partir de células cultivadas em meio RPMI 1640. Após a padronização foram feitas as avaliações de desempenho do ELISAi. Ao avaliar a repetibilidade do ELISAi RPMI observou-se o CV entreplacas de 4,4 e 17,3 e entre dias de 5,1 e 18,4, para soros negativo e positivo, respectivamente. Os resultados dos 722 soros testados com os Kits para diagnóstico de LVPR IDGA/ELISAi comerciais (Unika biotech, Recife) apresentou 166 positivos e 556 negativos; com o ELISAi RPMI foram observados 171 resultados positivos e 551 negativos, correspondendo a Se e Sp relativas de 97,59% e 98,38%, respectivamente, com concordância ajustada kappa de 0,95, considerada quase perfeita. Esses resultados demonstram que pode-se estabelecer uma IDGA e um ELISA para diagnostico de LVPR altamente sensíveis e específicos utilizando-se um modelo simplificado para obtenção de antígenos, empregando células CorFC cultivadas com baixo teor de SFB. Dependendo do tipo de célula e meio utilizado pode-se produzir antígenos de LVPR com baixo teor de SFB, que corrobora com o bem estar animal, representa redução de custos com insumos e nos processos de purificação de proteínas.

Canine atopic dermatitis (CAD) is a common dermatosis, defined as a genetic-related disease which predisposes to skin inflammation and pruritus, associated to a IgE-specific response in most of cases. Clinical diagnosis may be later complemented by skin allergy and/or serological tests. The aim of these tests is to identify possible allergens in order to enable the clinicians to select candidate antigens for allergen specific immunotherapy. In the present study 58 CAD positive animals were tested. All were submitted to the intradermal test (IDT) and screened for the presence of antibodies against different antigens using ELISA. The obtained results show a high prevalence of sensitization among the tested dogs to house dust mites and to pollen ofC. dactylon. With this work it was possible to identify the main allergens involved in immunological response of dogs with CAD living in central area of Rio Grande do Sul. RESUMO A dermatite atópica canina (DAC) é uma dermatose comum, definida como doença de cunho genético que predispõe à inflamação e ao prurido cutâneo, associados à resposta IgE específica na maior parte dos casos. O diagnóstico da DAC é clínico e pode ser posteriormente complementado por testes alérgicos cutâneos e/ou sorológicos. O objetivo desses testes é identificar possíveis alérgenos e, com isso, possibilitar ao clínico a seleção de antígenos candidatos para a imunoterapia alérgeno-específica. No presente estudo, foram testados 58 animais diagnosticados para DAC. Todos os animais foram submetidos ao teste cutâneo intradérmico (TID), e amostras de sangue foram coletadas para a realização de testes sorológicos. Os resultados obtidos demonstraram elevada prevalência de sensibilização aos ácaros domiciliares e ao pólen da gramínea C. dactylon nos cães testados. Com este trabalho, foi possível identificar os principais alérgenos envolvidos na resposta imunológica de cães atópicos residentes na região central do Rio Grande do Sul.

Canine atopic dermatitis (CAD) is a common dermatosis, defined as a genetic-based disease, which predisposes to cutaneous inflammation and pruritus, mediated by class IgE immunoglobulins directed against specific antigens in most cases. Clinical diagnosis may be later complemented by skin allergic and/or serological tests (ELISA). The aim of these tests is to identify possible allergens in order to enable the clinicians to select candidate antigens for allergen specific immunotherapy. This work aimed to identify the sensitization profile of 58 dogs with atopic dermatitis diagnosis. All animals were submitted to intradermic test (IDT) and screened for the presence of antibodies against different allergens using a serologic test. House dust mites are described as the most frequent allergens in all continents. However, the positivity to C. dactylon is not commonly described and may be characteristic for the region. With this work it was possible to identify the main allergens involved in the immunologic response of atopic dogs residing in Rio Grande do Sul, pointing to the importance to include C. dactylon in screening tests for allergy. A dermatite atópica canina (DAC) é uma dermatose comum, definida como uma doença de cunho genético que predispõe à inflamação e ao prurido cutâneo, mediada por imunoglobulinas da classe IgE dirigidas contra antígenos específicos na maior parte dos casos. O diagnóstico da DAC é clínico e pode ser posteriormente complementado por testes alérgicos cutâneos e/ou sorológicos. O objetivo desses testes é identificar possíveis alérgenos e, com isso, possibilitar ao clínico a seleção de antígenos candidatos para a imunoterapia alérgeno-específica. No presente trabalho buscou-se identificar o perfil de sensibilização de 58 cães diagnosticados com dermatite atópica. Todos os animais foram submetidos ao teste intradérmico (TID) e à detecção de anticorpos específicos para diferentes alérgenos através de teste sorológico (ELISA). Os ácaros domiciliares são descritos como os alérgenos mais frequentes em todos os continentes. Entretanto, a positividade ao C. dactylon não é usualmente descrita e pode ser característica da região. Com esse trabalho foi possível identificar os principais alérgenos envolvidos na resposta imunológica de cães atópicos residentes no Rio Grande do Sul, ressaltando-se a importância da inclusão do extrato de C. dactylon em testes alérgicos.

Hortaliças são atacadas por doenças de origem viral como vira-cabeça do tomateiro, causada por TSWV. Conhecer os procedimentos de campo e laboratoriais realizados para se diagnosticar corretamente estas viroses é uma ferramenta poderosa para que se adotem as medidas adequadas de manejo.

We report the results of a serological and molecular research in individuals with no clinical manifestations of American cutaneous leishmaniasis (ACL) who lived in endemic area and we report the results of association between HLA class I genes (HLA-A, -B, and -C) and ACL in an endemic region of southern Brazil. A retrospective study was carried out on the epidemiological records of patients from the 13th and 15th Health Sections of the state of Paraná diagnosed with ACL. Patients with clinical manifestations of the disease and with positive parasite detection and/or Montenegro skin test were contacted for the collection of biological material and composition cases of group. The control group consisted of individuals with no clinical manifestations of ACL who lived in endemic region. Antibodies were detected in the healthy individuals by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the positive samples were analyzed by indirect immunofluorescence (IIF) for Leishmania braziliensis and Trypanosoma cruzi. Polymerase chain reaction (PCR), employing the MP3H/MP1L primers, amplified a fragment of Leishmania (Viannia) k-DNA. All cases and controls group samples were subjected to HLA class I (HLA-A, -B, -C) typing were carried out through PCR-SSO using Luminex technology. The results reveal the presence of subclinical Leishmania infections and demonstrate the involvement of HLA-C*04 in the ACL susceptibility in individuals from an ACL-endemic region of southern Brazil. Neste estudo são relatados os resultados de uma investigação sorológica e molecular em indivíduos sem manifestações clínicas da leishmaniose tegumentar americana (LTA) e demonstrados os resultados da associação com marcadores genéticos HLA de Classe I (-A, -B, -C) e LTA em moradores de uma região endêmica do sul do Brasil. Foi realizado um estudo retrospectivo das fichas epidemiológicas de pacientes atendidos no Laboratório de Leishmanioses da Universidade Estadual de Maringá, para o diagnóstico de LTA, pertencentes a 13ª e 15ª Regional de Saúde do Estado do Paraná. Os pacientes que apresentaram positividade na pesquisa do parasito e/ou intradermorreação de Montenegro foram contatados para a coleta de material biológico e composição do grupo de casos. O grupo controle foi composto por indivíduos saudáveis com ausência de manifestações clínicas da doença e moradores de locais endêmicos para LTA. A detecção de anticorpos do grupo sem manifestação clínica da LTA foi realizada por Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), e as amostras positivas, foram analisadas pela imunofluorescência indireta (IFI) para Leishmania braziliensis e Trypanosoma cruzi. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi realizada com os iniciadores MP3H/MP1L que amplificam fragmento do k-DNA de Leishmania (Viannia). Todas as amostras do grupo de casos e controles foram submetidas à tipificação HLA-A, -B, -C pela metodologia PCR-SSO (tecnologia Luminex). Os resultados demonstraram a presença de infecção subclínica por Leishmania e o envolvimento do HLA-C*04 na susceptibilidade a LTA em moradores de uma região endêmica para LTA no sul do Brasil. 46 f

A leishmaniose visceral é uma enfermidade cujo agente etiológico no Brasil é o protozoário Leishmania infantum chagasi. Os cães são considerados reservatórios urbanos da doença, sendo indicadores da ocorrência de casos humanos. O presente trabalho teve como objetivo diagnosticar a infecção por L. infantum chagasi em cães domiciliados e errantes do município de Belém, estado do Pará, através da reação em cadeia da polimerase (PCR) e da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), empregando dois antígenos distintos. Amostras de sangue venoso de cães adultos, sem distinção de sexo ou raça, de diferentes bairros e épocas do ano da cidade de Belém-PA, foram colhidas em tubos sem e com anticoagulante para obtenção do soro e do DNA, respectivamente. Esses animais foram divididos em dois grupos: cães errantes capturados pelo Centro de Controle de Zoonoses (Grupo A) e cães domiciliados (Grupo B). Os soros foram analisados através do teste de RIFI para pesquisa de IgG utilizando-se dois antígenos distintos: 1) antígeno do kit Bio-Manguinhos/FIOCRUZ (Ag-PRO) contendo formas promastigotas de Leishmania sp. (complexo major-like); 2) Antígeno do Instituto Evandro Chagas (Ag-AMA) constituído por formas amastigotas de L. infantum chagasi. A avaliação dos dois antígenos foi realizada com as amostras reagentes a partir da titulação 1:80. Já a PCR foi realizada a partir do DNA extraído do sangue total dos animais e amplificado utilizando-se os iniciadores RV1e RV2. Das 335 amostras analisadas, 10,4% (35/335) foram reagentes na RIFI (Ag-PRO) e 0,9% (3/335) reagiram com o Ag-AMA. A distribuição das amostras positivas se deu da seguinte forma: Grupo A 14,8% (25/169) com Ag-PRO e 1,2% (2/169) com Ag-AMA; Grupo B 6% (10/166) com Ag-PRO e 0,6% (1/166) com Ag-AMA; sendo que todas as amostras positivas pelo teste de RIFI com o Ag-AMA também reagiram com o Ag-PRO e em nenhuma das amostras foi detectado o DNA de L. infantum chagasi. Os achados do presente estudo indicam que Belém ainda pode ser considerada área não endêmica para leishmaniose visceral canina e que a natureza do antígeno influencia no resultado da RIFI para a pesquisa de anticorpos anti-L. infantum chagasi em cães, sendo que a RIFI que utiliza formas promastigotas de Leishmania major-like como antígeno deve ser utilizada com cautela como método diagnóstico confirmatório em estudos epidemiológicos em áreas não endêmicas para LVC. Visceral leishmaniasis is a disease whose etiological agent in Brazil is Leishmania infantum chagasi. Dogs are considered urban reservoirs of the disease, being an indicator of the human cases occurrence. The present study aimed to diagnose L. infantum chagasi infection in stray and owned dogs in Belém, Pará State, by polymerase chain reaction (PCR) and indirect immunofluorescence assay (IFA) using two different antigens. Venous blood samples from adult dogs, regardless of gender or breed, of different neighborhoods in Belém-PA, were collected in tubes with and without anticoagulant to obtain DNA and serum, respectively. These animals were divided into two groups: stray dogs captured by the Center for Zoonosis Control (Group A) and owned dogs (Group B). Sera were analyzed by IFA testing for IgG using two different antigens: 1) Bio-Manguinhos/Fiocruz antigen kit (Ag-PRO) containing promastigotes of Leishmania sp. (Complex Major-Like), 2) Instituto Evandro Chagas Antigen (Ag-AMA) consisting of amastigotes of L. infantum chagasi. The evaluation of the two antigens was performed considering positive the reactions above the 1:80 dilution. Already PCR was performed with DNA isolated from whole blood of animals and amplified with the primers RV1 and RV2. Of the 335 samples analyzed, 10.4% (35/335) were positive by IFA (Ag-PRO) and 0.9% (3/335) with the Ag-AMA. The distribution of positive samples is given as follows: Group A 14.8% (25/169) with Ag-PRO and 1.2% (2/169) with Ag-AMA; Group B 6% (10/166) with Ag-PRO and 0.6% (1/166) with Ag-AMA, being that all samples positive by IFA with Ag-AMA also reacted with Ag-PRO, and none of the samples detected DNA of L. infantum chagasi. The findings of this study indicate that Belém can still be considered non-endemic area for canine visceral leishmaniasis and the nature of the antigen influences the result of the IFA for the detection of anti-L. infantum chagasi antibodies in dogs, and the IFA using promastigotes of Leishmania major-like antigen should be used with caution as a confirmatory diagnostic on epidemiological studies in non-endemic areas.

A rapid conglutination test (RCT) with performance comparable to the indirect fluorescent antibody technique (IFAT) was developed to detect antibodies against Babesia bigemina (B. bigemina-RCT). The B. bigemina-RCT is a sensitive, specific, economical, and rapidly performed serological test suitable for field application or minimally equipped laboratories. This test had a sensitivity of 90.9%, and specificity of 97.6%, compared to IFAT, which showed for the same parameters respectively, 98.3% and 99.7%. The early detection of anti- B. bigemina immunoglobulins by RCT in experimental infections was nearly parallel to that of IFAT. Cross reactions were observed with sera from calves experimentally infected with Babesia bovis (1.8%) and with Anaplasma marginale (1.2%). RCT antigen prepared with non parasitized erythrocytes (negative antigen) showed 1.5%, 3.5% and 2.2% of positive reactions with sera from animals experimentally infected with B. bigemina, B. bovis and A. marginale. However, none of the sera from animals of endemic areas for babesia infection resulted in positive reactions with the negative antigen. Considering these results and shelf life over six months, the B. bigemina-RCT could be used for epidemiological surveys and evaluation of control measures against this species of Babesia.Um teste rápido de conglutinação (TCR) com desempenho comparável a imunofluorencência indireta (IFI) foi desenvolvido para detectar anticorpos contra Babesia bigemina. O TCR-B.bigemina é um teste sorológico sensível, econômico e executável rapidamente; apropriado para condições de campo ou laboratórios com estrutura mínima. Este teste tem uma sensibilidade de 90,9% e especificidade de 97,6%, enquanto que a IFI apresentou para os mesmos parâmetros, respectivamente, 98,3% e 99,7%. Nas infecções experimentais a detecção de imunoglobulinas anti-B. bigemina pelo TCR foi aproximadamente a mesma da IFI. As reações cruzadas verificadas nos soros de bezerros experimentalmente infectados com Babesia bovis e Anaplasma marginale foram 1,8% e 1,2%, respectivamente. O antígeno preparado com eritrócitos não parasitados (antígeno negativo) apresentou 1,5%, 3,5% e 2,2% de reações positivas com os soros de animais infectados com B. bigemina, B. bovis e A. marginale. Entretanto, nenhum dos soros dos animais de áreas endêmicas para infecção de babésia resultaram em reações positivas com o antígeno negativo. Considerando estes resultados e o período de viabilidade do antígeno de TCR, acima de seis meses, possibilita o TCR-B. bigemina ser utilizado em levantamentos epidemiológicos e na avaliação das medidas de controle contra esta espécie de Babesia.

Made available in DSpace on 2017-12-21T23:21:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 meneses2012.pdf: 919764 bytes, checksum: bb796c4396d618ee6b03e7d6f5552fe9 (MD5) Previous issue date: 2013-01-29 Dissertação (Mestrado em Ciência Animal. Área de concentração: Saúde Animal) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul. Orientador: Prof. Dr. Flábio Ribeiro de Araújo, CNPGC.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O objetivo do trabalho foi a detecção de anticorpos anti - Brucella abortus e anti – Leptospira interrogans em soros de eqüídeos e seus tratadores nos bairros das cidades de Belém e Ananindeua, abrangendo os meses de abril a agosto de 2005, utilizando para este fim, 195 soros sanguíneos de eqüídeos e 70 soros sanguíneos de homens que manipulavam os animais direta ou indiretamente. Para a pesquisa de animais sororeagentes à B. abortus, foram usadas as provas do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) como teste de triagem e a Soro Aglutinação Lenta em Tubos (SAL) e o teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME), como teste confirmatórios. Para a Leptospirose, foi utilizada a prova de Soroaglutinação Microscópica (SAM), sendo realizada a triagem dos soros frente à 25 sorovares de L. interrogans, considerando-se positivos aquelas amostras com titulação igual ou maior que 100. De 195 amostras de soros sanguíneos de eqüídeos, 184 (94,87%) foram positivas para todos os sorovares analisados, sendo que os mais frequentemente encontrados foram: Patoc, Automnalis, Ictehaemohragiae, Pyrogenes e Bratislava. Para as amostras sanguíneas de homens, a positividade foi de 49 (70%) de soros reagentes, com os sorovares Patoc, Ictehaemohragiae, Bratislava, Butembo, Copenhageni e Automnalis os mais detectados. Das amostras positivas de animais e seus respectivos tratadores, 47/70 (67,14%) foram semelhantes para os mesmos sorovares de Leptospira spp., sendo que 2/70 (2,86%) amostras foram negativas em ambos os grupos pesquisados, 2/70 (2,86%) foram somente positivas em homens e 19/70 (27,14%) foram exclusivamente positivas nas amostras de soros de eqüídeos. Os bairros do Coqueiro, Guamá, 40 horas, Barreiro e Bengui apresentaram a maior percentagem de casos soropositivos. Não houve diferença significativa em relação às outras variantes estudadas, como: idade (animal e homem), tempo de serviço (animal e homem), espécie do animal, escore corporal do animal e grau de instrução do homem. Tanto nos animais quanto nos homens não foram detectadas reações positivas para B. abortus. The objective of the work was the detention of antibodies anti - Brucella abortus and anti - Leptospira interrogans in serum of equines and equine workers of the quarters of the cities of Belém and Ananindeua, enclosing the months from April to August of 2005, using for this end, 195 sanguineous serum of eqquines and 70 sanguineous serum of men that manipulated the animals direct or indirectly. For the research of reagents serum of animals to B. abortus, the tests used had been Antigen Acidified Test (AAT), as a selection test, and slow seroagglutination (SAL) and and the 2-mercaptoetanol (2-ME) as confirmatory tests. To Leptospirosis, the test used was of microscopical seroagglutination being carried through the selection of the serum front to the 25 serovars of L. interrogans, considering positive those samples with titulation equal or bigger that 100. Of 195 samples of equine sanguineous serum, 184 (94.87%) had been positive for all serovars analyzed, being that more frequent found: Patoc, Automnalis, Ictehaemohragiae, Pyrogenes and Bratislava. For the sanguineous samples of men, the positivity was of 49 (70%) of reacting serum, with the most detected serovars: Patoc, Ictehaemohragiae, Bratislava, Butembo, Copenhageni and Automnalis. Of the positive samples of equine and its respective workers, 47/70 (67.14%) were similar for same serovars of Leptospira spp., being that 2/70 (2.86%) samples had been negative in both the searched groups, 2/70 (2.86%) were only positive in humans and 19/70 (27.14%) were exclusively positive in the samples of equine serum. The quarters of Coqueiro, Guamá, 40 horas, Barreiro and Bengui had presented the biggest percentage of positive cases serum. It did not have significant difference in relation to the other studied variants, as: climate, age (animal and man), time of service (animal and man), species of the animal, props up corporal of the animal and degree of instruction of the man. As much in the animals how much in the men positive reactions for B. abortus had not been detected.