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Antifungal properties of extracts from eight Brazilian plants traditionally used in popular Brazilian medicine were tested against five clinically relevant Candida species, Cryptococcus neoformans, and Sporothrix schenckii. Results demonstrate that almost all extracts exhibited antifungal activity, at least against one of the microorganisms tested. The ethanolic extract from the leaves of Schinus terebinthifolius exhibited potential antifungal activity against C. glabrata and S. schenckii. Preliminary phytochemical analysis of extract from S. terebinthifolius showed the presence of biologically active compounds, namely saponins, flavonoids, triterpenes, steroids and tannins.A propriedade antifúngica de extratos de oito plantas utilizadas na medicina tradicional brasileira foi testada contra cinco espécies de Candida, com relevância clínica, Cryptococcus neoformans e Sporothrix schenckii. Os resultados mostraram que todos os extratos exibiram atividade antifúngica contra pelo menos um dos microrganismos testados. O extrato etanólico das folhas de Schinus terebinthifolius apresentou potencial atividade antifúngica contra C. glabrata e S. schenckii. Na análise fitoquímica preliminar dos extratos de S. terebinthifolius observou-se a presença de compostos biologicamente ativos como, flavonóides, triterpenos, esteróides e taninos.

Rhodococcus equi é o agente etiológico da rodococose equina, importante doença respiratória de potros. Especialmente na última década, a emergência de cepas resistentes aos antimicrobianos empregados no tratamento da rodococose tem sido relatada. Nesse sentido, há a necessidade de estudos envolvendo terapias alternativas e novas tecnologias, incluindo o uso de plantas medicinais e nanotecnologia. Neste trabalho utilizou-se Melaleuca alternifolianas seguintes formulações: óleo livre, nanocápsula, nanoemulsão e a combinação de óleo livre com nanocápsula e com nanoemulsão, além do seu composto majoritário, terpinen-4-ol, a fim de verificar a atividade antimicrobiana frente a isolados de R. equide diferentes origens. Utilizou-se o método de microdiluição em caldo na determinação das concentrações inibitória mínima (CIM) e bactericida mínima (CBM) das diferentes formulações frente aos isolados (n=24). Verificou-se baixo potencial para atividade antibacteriana de M. alternifoliana formulação de óleo livre. Todavia, essa atividade foi potencializada quando se incorporou o óleo essencial às nanoformulações. O composto terpinen-4-ol demonstrou potencial atividade antibacteriana quando incorporado ao óleo essencial e quando utilizado isoladamente. Verificou-se que tanto M. alternifolia quanto terpinen-4-ol testados possuem atividade antimicrobiana contra isolados de R. equi, sugerindo seu emprego em estudos avaliando seu potencial para o tratamento da rodococose. Rhodococcus equi causes rodococose in horses, characterized by bronchopneumonia in foals. Due to reports of antimicrobial resistance, it is important to develop studies involving alternative therapies and new technologies, including the use of medicinal plants and nanotechnology. In this work, the plant Melaleuca alternifolia in oil free formulations, nanocapsule, nanoemulsion and the combination of free and nanocapsule oil nanoemulsion, besides its major compound, terpinen-4-ol, were used in order to verify antimicrobial activity against isolates of R. equi. The broth microdilution method was employed to determine the minimum inhibitory (MIC) and minimum bactericidal (MBC) concentrations of different formulations against 24 isolates. There was low antibacterial activity of M. alternifolia in oil free formulation; however, it was observed that the activity was enhanced when incorporated as essential oil the nanoformulations. The major compound, terpinen-4-ol, showed bactericidal and bacteriostatic activity when used alone. It is suggested that M. alternifolia, in association with nanocarriers systems, as well as terpinen -4-ol, presents potential for future studies concerning the equine rodococosis therapy.

Candidíase vulvovaginal (CVV) é a segunda causa de infecção vaginal e apresenta alta incidência da forma recorrente, o que resulta em tratamentos prolongados. O gênero Candida, principalmente a espécie C. albicans, é o agente mais comum. Entretanto, outras espécies mais difíceis de serem erradicadas podem também estar envolvidas. A proposta deste estudo foi determinar a freqüência de colonização vaginal por leveduras e avaliar a susceptibilidade a três drogas indicadas para tratamento de CVV. Foram coletadas amostras de secreção vaginal de quatrocentas e doze mulheres, não triadas. A taxa total de colonização por leveduras foi de 20,15%. Candida albicans foi a mais freqüente (84%), seguida por C. glabrata (7%), C. tropicalis (4%), Torulopsis sp (2%), C. parapsilosis (2%) e S. cerevisiae (1%). Testes de susceptibilidade in vitro revelaram que 96,4% dos isolados foram considerados susceptíveis ao fluconazol, 71% à nistatina e 98,8% à anfotericina B.Vulvovaginal candidiasis (VVC) is the second most frequent cause of vaginal infection, having high incidence and recurrence, which requires longer treatments. The genus Candida, specially the species C. albicans, is the most common agent. However, other species, more difficult to eradicate, may also be involved. The aim of this study was to determine the frequency of vaginal colonization by yeasts and to evaluate susceptibility to three drugs, which are indicated for the VVC treatment. Vaginal secretion was collected from four hundred and twelve unselected women. The overall rate of yeast colonization was 20.15%. Candida albicans was the most frequent (84%), followed by C. glabrata (7%), C. tropicalis (4%), Torulopsis sp (2%), C. parapsilosis (2%) and S. cerevisiae (1%). In vitro susceptibility tests revealed that 96,4% of the isolated yeasts were susceptible to fluconazole, 71% to nistatin and 98,8% to amphotericin B.

The in vitro activity of antifungal and antiseptic agents were evaluated against dermatophytes isolated from patients with tinea pedis. The antifungals studied were: ciclopirox olamine, cetoconazole, tolciclate and terbinafine, and the antiseptics were: povidine iodine (PVPI), propolis, Fungol®, Andriodermol®, and boric acid. The minimum inhibitory concentration (MIC) or the minimal dilution concentration (MDC) was determined by an agar dilution method using modified yeast nitrogen agar base, and the minimum fungicidal concentration (MFC) or minimum fungicidal dilution (MFD) was determined with subcultures on Sabouraud dextrose agar. All drugs studied were active against the dermatophytes at lower concentrations than those used in products and/or pharmaceutical preparations for topical use. Some antifungal agents, mainly terbinafine and tolciclate, presented higher efficacy than the other drugs, with lower MICs and MFCs values. It was concluded that the use of these antiseptic drugs represent an excellent alternative for the topical treatment of tinea pedis. For the treatment of severe cases these are the antifungal agents of choice. A atividade in vitro de antifúngicos e anti-sépticos foram avaliadas frente a dermatófitos isolados de pacientes com tinea pedis. Os antifúngicos estudados foram: ciclopirox olamine, cetoconazol, tolciclato e terbinafina, e os anti-sépticos foram: iodo povidine (PVPI), própolis, Fungol®, Andriodermol®e ácido bórico. A concentração inibitória mínima (CIM) ou a diluição inibitória mínima (DIM) foi determinada pelo método de diluição em ágar utilizando "yeast nitrogen" base modificado, e a concentração fungicida mínima (CFM) ou diluição fungicida mínima (DFM) foi determinada por subcultura em Saboraud dextrose ágar. Todas as drogas estudadas foram ativas frente aos dermatófitos em concentrações menores do que as utilizadas em produtos e/ou preparações farmacêuticas para uso tópico. Alguns antifúngicos, principalmente a terbinafina e o tolciclato, foram mais eficazes do que outras drogas estudadas, apresentando CIMs e CFMs mais baixos. Concluíu-se que os anti-sépticos representam uma ótima alternativa para tratamento tópico de vários casos de tinea pedis sendo, entretanto, os antifúngicos reservados para formas severas de tinea.

The in vitro activity of antifungal and antiseptic agents were evaluated against dermatophytes isolated from patients with tinea pedis. The antifungals studied were: ciclopirox olamine, cetoconazole, tolciclate and terbinafine, and the antiseptics were: povidine iodine (PVPI), propolis, Fungol®, Andriodermol®, and boric acid. The minimum inhibitory concentration (MIC) or the minimal dilution concentration (MDC) was determined by an agar dilution method using modified yeast nitrogen agar base, and the minimum fungicidal concentration (MFC) or minimum fungicidal dilution (MFD) was determined with subcultures on Sabouraud dextrose agar. All drugs studied were active against the dermatophytes at lower concentrations than those used in products and/or pharmaceutical preparations for topical use. Some antifungal agents, mainly terbinafine and tolciclate, presented higher efficacy than the other drugs, with lower MICs and MFCs values. It was concluded that the use of these antiseptic drugs represent an excellent alternative for the topical treatment of tinea pedis. For the treatment of severe cases these are the antifungal agents of choice.A atividade in vitro de antifúngicos e anti-sépticos foram avaliadas frente a dermatófitos isolados de pacientes com tinea pedis. Os antifúngicos estudados foram: ciclopirox olamine, cetoconazol, tolciclato e terbinafina, e os anti-sépticos foram: iodo povidine (PVPI), própolis, Fungol®, Andriodermol®e ácido bórico. A concentração inibitória mínima (CIM) ou a diluição inibitória mínima (DIM) foi determinada pelo método de diluição em ágar utilizando "yeast nitrogen" base modificado, e a concentração fungicida mínima (CFM) ou diluição fungicida mínima (DFM) foi determinada por subcultura em Saboraud dextrose ágar. Todas as drogas estudadas foram ativas frente aos dermatófitos em concentrações menores do que as utilizadas em produtos e/ou preparações farmacêuticas para uso tópico. Alguns antifúngicos, principalmente a terbinafina e o tolciclato, foram mais eficazes do que outras drogas estudadas, apresentando CIMs e CFMs mais baixos. Concluíu-se que os anti-sépticos representam uma ótima alternativa para tratamento tópico de vários casos de tinea pedis sendo, entretanto, os antifúngicos reservados para formas severas de tinea.

Póster presentado en la Reunión celebrada en Plasencia (España) los días 21 y 22 de septiembre de 2011., A doença da murchidão do pinheiro é uma doença grave que afecta florestas de coníferas com uma elevada taxa de mortalidade. É causada pelo nemátode Bursaphelenchus xylophilus, conhecido como nemátode da madeira do pinheiro (NMP). Este organismo é originário da América do Norte, onde não está associado a uma elevada prevalência da doença. O NMP foi introduzido no Japão no início do século XX, propagando-se depois para a China, Ilha Formosa e Coreia, e demonstrou ser devastador para as espécies de coníferas autóctones do Extremo Oriente. Em 1999 o NMP foi detectado na Europa, em Portugal, mas apesar dos esforços para conter a doença, esta disseminou-se por todo o território de Portugal continental e, em 2008, registou-se um caso da doença em Espanha. Dado a introdução recente desta peste na Europa, é da mais alta importância identificar quais as espécies florestais autóctones de maior susceptibilidade e quais as tolerantes/resistentes. Tal informação é importante para o planeamento/gestão das florestas, e também para o estudo da doença, sugerindo mecanismos de susceptibilidade/resistência. Neste trabalho optimizou-se um teste de susceptibilidade para utilização num grande número de amostras. O teste baseia-se na capacidade de nemátodes virulentos atravessarem secções de 5 cm de ramos jovens, com cerca de 2 cm de diâmetro. O processo de optimização passou pela forja de recipientes de dimensões adequadas, criação de um modo de sustentar os ramos em posição vertical, optimização do volume de água onde a base do ramo fica mergulhada e criação de um modo de evitar a desidratação do topo do ramo após inoculação. O crescimento dos nemátodes em laboratório também passou por um scale-up para obtenção de nemátodes em grande quantidade, passando do crescimento em tubos de ensaio para sacos. O teste foi optimizado usando ramos de Pinus pinaster, mas pode ser adaptado a outras espécies.

INTRODUÇÃO: As taxas de resistência aos fármacos constituem um dos pilares da avaliação dos programas de controle da tuberculose. A demora na obtenção dos resultados, conseqüência da metodologia convencional utilizada, faz com que haja a necessidade de avaliação de novos testes, mais rápidos e menos onerosos. OBJETIVO: Comparar técnicas fenotípicas rápidas para determinação do perfil de susceptibilidade de M. tuberculosis, utilizando indicadores de viabilidade celular, com o teste das proporções em Löwenstein-Jensen, padrão-ouro. MÉTODO: Foram utilizadas 166 cepas de M. tuberculosis com o perfil de susceptibilidade conhecido. A concentração mínima inibitória de cada fármaco foi determinada, em microplaca, utilizando-se meio líquido e os indicadores de oxi-redução, Alamar Blue® e brometo de tetrazolium. O ponto de corte entre a cepa sensível e a resistente foi estabelecido como concentração mínima inibitória maior ou igual a 0,2 mg /mL para isoniazida e 1,0 mg /mL para rifampicina. RESULTADOS: Houve concordância total entre os dois métodos de determinação da concentração mínima inibitória. Comparando os resultados dos testes com o padrão-ouro, obteve-se uma concordância de 95%, para isoniazida e rifampicina. O tempo para obtenção dos resultados foi de 7 dias, contrastando com os 28 dias pelo método convencional. CONCLUSÃO: Os testes para determinação da concentração mínima inibitória, em meio líquido, utilizando indicadores de oxi-redução, são rápidos e podem se utilizados como alternativa rápida na determinação de susceptibilidade de cepas de M. tuberculosis. BACKGROUND: Knowledge of the rates of drug resistance is one of the pillars of tuberculosis control program evaluation. Data from low-resource countries are scarce and results are delayed due to the techniques employed. There is therefore an urgent need for evaluation of faster and less onerous testing methods. OBJECTIVE: To compare the performance of rapid colorimetric assays for phenotyping that employ oxidation-reduction indicators to determine the susceptibility profile of Mycobacterium tuberculosis with the gold-standard proportion method on Lowenstein-Jensen Medium. METHOD: We analyzed 166 M. tuberculosis strains of known susceptibility. Minimal inhibition concentrations for isoniazid and rifampicin were determined in microplates, using a liquid medium and Alamar Blue and tetrazolium bromide indicators. To measure agreement the Kappa value was used. Cutoff values between sensitive and resistant strains were defined as 0.2mg/mL and 1.0mg/mL for isoniazid and rifampicin, respectively. RESULTS: There was 100% concordance between Alamar Blue and tetrazolium bromide methods in the determination of minimal inhibition concentrations. Agreement between the colorimetric method and the Lowenstein-Jensen was 95% for isoniazid and rifampicin. Using the colorimetric method, results were obtained within 7 days, in contrast to the 28 days required for the conventional method. CONCLUSIONS: Assays to determine minimal inhibition concentrations in liquid medium and employing oxidation-reduction indicators proved to be rapid and inexpensive. This method has the potential to become a faster, alternative method for determining susceptibility of M. tuberculosis strains in developing countries.