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Cladosporium cladosporioides No.9の無細胞抽出液より硫安沈殿,ブチルートヨパール, DEAE-トヨパールおよびトヨパールHW55のクロマトグラフィーにより酢酸エステルを特異的に分解する酢酸エステル分解酵素(Est I, Est II)を単離精製した. 各精製酵素の分子量はゲルクロマトグラフィーによりEst Iは約6.3万, Est II は約6.6万と推定された. また,各酢酸エステル分解酵素の至適反応温度はEst Iは35°C, Est IIは30°Cであった.熱安定性はともに50°C, 30分処理で完全に失活した.至適pHはEst IはpH 9.1, Est IIはpH 9.3であった. pH安定範囲は,前者がpH 7～9,後者がpH 5～6であった.両酵素ともにDFP, PMSFに阻害され,エゼリンで阻害されないことによりセリン残基を有するカルボキシエステラーゼと推定された.SH基阻害剤であるPCMB, DTNBおよび金属イオンキレート剤であるEDTAでは阻害されなかった.また, Ag2+および2価の重金属イオンのCu2+, Hg2+で強く反応を阻害された. エチルエステルに対する基質特異性は,酢酸エステルに比較して最大でも約10～20%の相対活性しかなかった.トリグリセリド,モノグリセリドの長鎖脂肪酸を持つものにはまったく作用せず,短鎖脂肪酸を持つものにわずかに活性を示した.酢酸エステルに対してはEst Iは酢酸イソアミルに対してEst IIは酢酸イソブチルに対して最大の活性を示し,酢酸β-フェネチルに対しても高い分解活性を示した.本酵素はアルコールの酢酸エステルを特異的に分解するカルボキシエステラーゼであった.

dl -p- Fluorophenylalanine (p- FPA ) , an analogue of l -phenylalanine, was used for the isolation of mutants impaired in the regulation of phenylalanine biosynthesis. Mutants producing a large quantity of β-phenethyl alcohol and β-phenethyl acetate were isolated from a p-FPA resistant sake-yeast (Saccharomyces cerevisiae). Some mutants produced twelve times the amount of β-phenethyl alcohol and three times the amount of β-phenethyl acetate as the wild type.

Brewing tests were carried on using white corn starch as a part of raw materials.There was no big difference between fermentation process of the tested moromi mashes and that of blank.Brewed sake in this method showed that density (Sake-meter) was heavy, while acidity and folmol-N were less compare with blank.There was a litlle difference in color, flavour and the result of sensory test among those sake samples.Most of iron in the starch transfered to the sake cake.

We have analyzed 8 types of starches sold on the market to study moisture, protein, iron, copper and zinc contained there-in and made a sensory test of color and taste of saccharized liguid for application of sake brewery.The result proved that a corn-starch white was suitable for sake brewing.The corn-starch white was saccharized well when 0. 5% to 1% of liquidfyng/saccharizing enzyme and 200% of the water was added.When the saccharized liquid of the corn-starch white was added to sake moromi mash, it worked well to increase extract.