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Die durchschnittliche Lebenserwartung der Menschen hat sich in den letzten 200 Jahren dank besserer Lebens- und Hygienebedingungen sowie einer verbesserten Gesundheitsfürsorge deutlich erhöht. Mit dem Anstieg der Lebenserwartung steigt jedoch auch die Wahrscheinlichkeit, an altersbedingten Krankheiten zu erkranken. Frühere Forschungen haben gezeigt, dass verschiedene externe Stressfaktoren zum Alterungsprozess und zur Entwicklung altersbedingter Krankheiten beitragen. Daher könnte eine Resistenz gegen diese Stressoren entscheidend sein, um das Auftreten altersbedingter Krankheiten zu verlangsamen. Ich habe daher Zelllinien untersucht, die drei seltene genetische Varianten enthalten, die nur bei langlebigen Personen in Genen identifiziert wurden, die am Insulin/insulinähnlichen Wachstumsfaktor 1-Signalweg beteiligt sind, einem Signalweg, der nachweislich die Alterung beeinflusst, um festzustellen, ob sie die Stressresistenz der Zellen fördern. Um dieser Frage nachzugehen, testete ich zunächst die Reaktion dieser Zelllinien auf verschiedene Stressoren, indem ich verschiedene Assays durchführte, um die Lebensfähigkeit der Zellen nach der Exposition gegenüber verschiedenen Konzentrationen eines Stressors zu bestimmen. Zweitens bewertete ich die Expression und Phosphorylierung von Stressproteinen, nachdem die Zellen einem Stressor ausgesetzt waren, mit Hilfe von Western Blotting.Ich stellte fest, dass diese drei genetischen Varianten die Zellen widerstandsfähiger gegen Hunger und endoplasmatischen Stress machten. Allerdings zeigten die genetischen Varianten beinhalteten Zelllinien im Vergleich zum Wildtyp keine verbesserte Resistenz gegenüber H2O2, einer Ursache für zellulären oxidativen Stress. Darüber hinaus konnte ich bestätigen, dass kurzzeitiger Hitzestress die Phospho-Erk- und Hitzeschock-Proteinspiegel in Wildtyp-Zellen erhöht, während Wildtyp-Zellen und Zellen mit diesen drei genetischen Varianten, die mit 0,1 µM des Schwermetalls Cadmium behandelt wurden, keinen Anstieg der Phosphorylierung sowie der Expression von stressbedingten Proteinen zeigten. Meine Daten deuten darauf hin, dass diese seltenen genetischen Varianten die Resistenz der Zellen gegen verschiedene Umweltbelastungen unterstützen. Diese Ergebnisse können unser Verständnis der Rolle verbessern, die die zelluläre Stressresistenz bei der Vorbeugung von Alterung und altersbedingten Krankheiten spielen könnte The average human life expectancy has increased substantially in the last 200 years, owing to bettered living and sanitary conditions as well as improvements in health care. Yet, an increase in one’s lifespan also raises the likelihood of developing age-related diseases. Previous research has shown that various external stressors are linked to the ageing process and the onset of age-related diseases. Therefore, resistance against these stressors could be vital for slowing the onset of age-associated diseases. I thus examined cell lines containing three rare genetic variants uniquely identified in long-lived individuals in genes involved in the insulin/insulin-like growth factor 1 signalling pathway, a pathway that is established to affect ageing, to determine if they facilitate the resistance of the cells to stress. To address this question, I primarily tested the response of these cell lines against various stressors by performing different assays to determine cell viability after exposure to different dosages of a stressor. Secondly, I assessed the expression and phosphorylation levels of stress-related proteins after the exposure of the cell to a stressor using western blotting. I determined that these three genetic variants rendered the cells more resistant to starvation and endoplasmic stress. However, the variant cell lines showed no improved resistance to H2O2, a cause of cellular oxidative stress compared to the wild type. Furthermore, I could confirm that short-term heat stress elevates phospho-Erk and heat-shock protein levels in wild-type cells whereas wild-type cells and cells harbouring these three genetic variations treated with 0.1 µM of the heavy metal cadmium did not show an increase in phosphorylation as well as expression of stress-related proteins. My data indicate that these rare genetic variants aid cells in their resistance to several environmental stresses. These findings can improve our understanding of the role cellular stress resistance might play in preventing ageing and age-associated diseases.

All living organisms leverage mechanisms and response systems to optimize reproduction, defense, survival, and competitiveness within their natural habitat. Evolutionary theories such as the universal adaptive strategy theory (UAST) developed by John Philip Grime (1979) attempt to describe how these systems are limited by the trade-off between growth, maintenance and regeneration; known as the universal three-way trade-off. Grime introduced three adaptive strategies that enable organisms to coop with either high or low intensities of stress (e.g., nutrient deficiency) and environmental disturbance (e.g., seasons). The competitor is able to outcompete other organisms by efficiently tapping available resources in environments of low intensity stress and disturbance (e.g., rapid growers). A ruderal specism is able to rapidly complete the life cycle especially during high intensity disturbance and low intensity stress (e.g., annual colonizers). The stress tolerator is able to respond to high intensity stress with physiological variability but is limited to low intensity disturbance environments. Carnivorous plants like D. muscipula and tardigrades like M. tardigradum are two extreme examples for such stress tolerators. D. muscipula traps insects in its native habitat (green swamps in North and South Carolina) with specialized leaves and thereby is able to tolerate nutrient deficient soils. M. tardigradum on the other side, is able to escape desiccation of its terrestrial habitat like mosses and lichens which are usually covered by a water film but regularly fall completely dry. The stress tolerance of the two species is the central study object of this thesis. In both cases, high througput sequencing data and methods were used to test for transcriptomic (D. muscipula) or genomic adaptations (M. tardigradum) which underly the stress tolerance. A new hardware resource including computing cluster and high availability storage system was implemented in the first months of the thesis work to effectively analyze the vast amounts of data generated for both projects. Side-by-side, the data management resource TBro [14] was established together with students to intuitively approach complex biological questions and enhance collaboration between researchers of several different disciplines. Thereafter, the unique trapping abilities of D. muscipula were studied using a whole transcriptome approach. Prey-dependent changes of the transcriptional landscape as well as individual tissue-specific aspects of the whole plant were studied. The analysis revealed that non-stimulated traps of D. muscipula exhibit the expected hallmarks of any typical leaf but operates evolutionary conserved stress-related pathways including defense-associated responses when digesting prey. An integrative approach, combining proteome and transcriptome data further enabled the detailed description of the digestive cocktail and the potential nutrient uptake machinery of the plant. The published work [25] as well as a accompanying video material (https://www.eurekalert.org/pub_releases/ 2016-05/cshl-fgr042816.php; Video credit: Sönke Scherzer) gained global press coverage and successfully underlined the advantages of D. muscipula as experimental system to understand the carnivorous syndrome. The analysis of the peculiar stress tolerance of M. tardigradum during cryptobiosis was carried out using a genomic approach. First, the genome size of M. tardigradum was estimated, the genome sequenced, assembled and annotated. The first draft of M. tardigradum and the workflow used to established its genome draft helped scrutinizing the first ever released tardigrade genome (Hypsibius dujardini) and demonstrated how (bacterial) contamination can influence whole genome analysis efforts [27]. Finally, the M. tardigradum genome was compared to two other tardigrades and all species present in the current release of the Ensembl Metazoa database. The analysis revealed that tardigrade genomes are not that different from those of other Ecdysozoa. The availability of the three genomes allowed the delineation of their phylogenetic position within the Ecdysozoa and placed them as sister taxa to the nematodes. Thereby, the comparative analysis helped to identify evolutionary trends within this metazoan lineage. Surprisingly, the analysis did not reveal general mechanisms (shared by all available tardigrade genomes) behind the arguably most peculiar feature of tardigrades; their enormous stress tolerance. The lack of molecular evidence for individual tardigrade species (e.g., gene expression data for M. tardigradum) and the non-existence of a universal experimental framework which enables hypothesis testing withing the whole phylum Tardigrada, made it nearly impossible to link footprints of genomic adaptations to the unusual physiological capabilities. Nevertheless, the (comparative) genomic framework established during this project will help to understand how evolution tinkered, rewired and modified existing molecular systems to shape the remarkable phenotypic features of tardigrades., Alle lebenden Organismen verwenden Mechanismen und Rückkopplungssysteme um Reproduktion, Überlebenswahrscheinlichkeit, Abwehreffizienz und Konkurrenzfähigkeit in ihrem natürlichen Habitat zu optimieren. Evolutionäre Theorien, wie die von John Philip Grime (1979) entwickelte „universal adaptive strategy theory“ (UAST), versuchen zu beschreiben wie diese Systeme durch eine Balance zwischen Wachstum, Erhaltung und Regeneration, auch gemeinhin bekannt als universeller Dreiwege-Ausgleich, des jeweiligen Organismus limitiert sind. Grime führte dazu drei adaptive Strategien ein, die es Organismen ermöglicht sich an hohe oder niedrige Stress-Intensitäten (z.B. Nahrungsknappheit) oder umweltbedingte Beeinträchtigung (z.B. Jahreszeiten) anzupassen. Der Wettkämpfer ist in der Lage seine Konkurrenz durch eine effiziente Ressourcengewinnung zu überflügeln und ist vor allem bei niedrigem Stresslevel und minimalen umweltbedingten Beeinträchtigungen effizient (z. B. schnelles Wachstum). Ruderale Organismen hingegen durchlaufen den Leben- szyklus in kurzer Zeit und sind damit perfekt an starke umweltbedingte Beeinträchtigungen, wie zum Beispiel Jahreszeiten, angepasst. Allerdings können auch sie nur bei niedrigen Stresslevel effizient wachsen. Die letzte Gruppe von Organismen, die Stresstoleranten sind in der Lage sich an hohen Stressintensitäten mithilfe extremer physiologischer Variabilität anzupassen, können das allerdings nur in Umgebungen mit niedrigen umweltbedingten Beeinträchtigungen. Fleischfressende Pflanzen wie die Venusfliegenfalle (D. muscipula) oder Bärtierchen (M. tardigradum) sind zwei herausragende Beispiele für stresstolerante Organismen. Die Venusfliegenfalle ist in der Lage Insekten mit spezialisierten Blätter, welche eine einzigartige Falle bilden, zu fangen. Die Pflanze kompensiert so die stark verminderte Mengen an wichtigen Makronährstoffen (z.B. Stickstoff) in den Sümpfen von Nord- und Süd-Carolina. Bärtierchen dagegen sind in der Lage in schnell austrocknenden Habitaten wie Moosen oder Flechten, die normalerweise mit einem Wasserfilm überzogen sind, durch eine gesteuerte Entwässerung ihres Körpers zu überleben. Die Stresstoleranz beider Spezies ist zentraler Forschungsschwerpunkt dieser Dissertation. In beiden Fällen wer- den Hochdurchsatz-Methoden zur Sequenzierung verwendet um genomische (Bärtierchen) sowie transkriptomische (Venusfliegenfalle) Anpassungen zu identifizieren, die der enorem Stresstoleranz zugrunde liegen. Um den erhöhten technischen Anforderungen der Datenanal- ysen beider Projekte Rechnung zu tragen wurde in den ersten Monaten der Dissertation eine neue zentrale Rechenumgebung und ein dazugehöriges Speichersystem etabliert. Parallel wurde die Datenmanagementplattform TBro [14] zusammen mit Studenten aufgesetzt, um komplexe biologische Fragestellung mit einem fachübergreifendem Kollegium zu bearbeiten. Danach wurden die einzigartigen Fangfähigkeiten der Venusfliegenfalle mittels einem tran- skriptomischen Ansatz untersucht. Vor allem wurden transkriptionelle Änderungen infolge eines Beutefangs sowie gewebespezifische Aspekte der ruhenden Pflanzen untersucht. Die Analyse zeigte deutlich, dass die Fallen der fleischfressenden Pflanze immer noch Merkmale von typischen „grünen“ Blättern aufweisen. Während des Beutefangs und -verdauens jedoch wird eine Vielzahl an evolutionär konservierten Systemen aktiviert, die bisher nur mit Stres- santworten und zellulärer Verteidigung in Verbindung gebracht worden sind. Die Integration von proteomischen und transkriptomischen Hochdurchsatzdaten ermöglichte es zudem den Verdauungssaft der Venusfliegenfalle genaustens zu beschreiben und wichtige Komponenten der Aufnahmemaschinerie zu identifizieren. Die wissenschaftliche Arbeit [25] und das beglei- tende Videomaterial (https://www.eurekalert.org/pub_releases/2016-05/cshl-fgr042816.php; Video credit: Sönke Scherzer) erfreute sich einer breiten Berichterstattung in den Medien und unterstreicht die Vorteile der Venusfliegenfalle als experimentelles System um fleis- chfressende Pflanzen besser zu verstehen. Die genomische Analyse des Bärtierchen (M. tardigradum) zielte auf die außerordentliche Stresstoleranz, vor allem auf die Kryptobiose, einen Zustand in dem Stoffwechselvorgänge extrem reduziert sind, ab. Dazu wurden das komplette genetische Erbgut (Genom) entschlüsselt. Die Größe des Genomes wurde bes- timmt und das Erbgut mittels Sequenzierung entschlüsselt. Die gewonnenen Daten wurden zu einer kontinuierlichen Sequenz zusammengesetzt und Gene identifiziert. Der dabei etablierte Arbeitsablauf wurde verwendet um ein weiteres Bärtierchengenom genau zu überprüfen. Im Rahmen dieser Analyse stellte sich heraus, dass eine große Anzahl an Kontaminationen im Genom von H. dujardini vorhanden sind [27]. Das neu etablierte Genom von M. tardigradum wurde im folgenden verwendet um einen speziesübergreifenden Vergleich dreier Bärtierchen und aller Spezies aus der Metazoadatenbank von Ensembl durchzuführen. Die Analyse zeigte, dass Bärtierchengenome sehr viel Ähnlichkeit zu den bereits veröffentlichten Genomen aus dem Überstamm der Urmünder (Protostomia) aufweisen. Die erstmalige Verfügbarkeit aller Bärtierchengenome ermöglichte es zudem, das Phylum der Bärtierchen als Schwester der Nematoden mittels einer phylogenomische Analyse zu platzieren. Die vergleichende Anal- yse identifizierte außerdem zentrale evolutionäre Trends, vor allem einen enormen Verlust an Genen in dieser Linie der Metazoa. Die Analyse ermöglichte es aber nicht, generelle Mechanismen, die zur enormen Stresstoleranz in Bärtierchen führen, artübergreifend zu identifizieren. Vor allem das Fehlen von weiteren molekularen Daten für einzelne Bärtierchen- spezies (z.B. transkriptionelle Daten für M. tardigradum) machten es unmöglich die wenigen genomische Adaptionen mit den physiologischen Besonderheiten der Bärtierchen in Deckung zu bringen. Nichtsdestotrotz konnten die vergleichenden Analysen zeigen, dass Evolution auch innerhalb der Bärtierchen verschiedenste Systeme neu zusammensetzt, neue Funktionen erschafft oder bestehenden Systeme modifiziert und damit die außerordentliche phänotypis- che Variabilität ermöglicht.

Halophytes, salt-tolerant plants, are a source of valuable secondary metabolites with potential as functional foods or nutraceuticals. We are interested in finding the optimal cultivation conditions for increasing the contents of these valuable compounds. Growth conditions away from the optimum can induce stress resulting in changes in secondary metabolites. We analyzed metabolites with antioxidant capacity in seedlings and plants from different families and habitats grown under different salt concentrations. We show that it is possible to manipulate the antioxidant capacity of plants and seedlings by altering the saline growing environment, the length of time under saline cultivation and the developmental stage., Halophytes, salt-tolerant plants, are a source of valuable secondary metabolites with potential economic value. The steady-state pools of many stress-related metabolites are already enhanced in halophytes when compared with glycophytes, but growth under conditions away from the optimum can induce stress and consequently result in changes to secondary metabolites such as antioxidants. However, direct evidence for increasing the concentration of valuable secondary metabolites as a consequence of altering the salinity of the growing environment still remains equivocal. To address this, we analysed a range of metabolites with antioxidant capacity (including total phenols, flavonoids, ascorbate, reduced/oxidized glutathione and reactive oxygen species scavenging enzymes) in seedlings and plants from different families (Amaranthaceae, Brassicaceae, Plantaginaceae and Rhizophoraceae) and habitats grown under different salt concentrations. We show that it is possible to manipulate the antioxidant capacity of plants and seedlings by altering the saline growing environment, the length of time under saline cultivation and the developmental stage. Among the species studied, the halophytes Tripolium pannonicum, Plantago coronopus, Lepidium latifolium and Salicornia europaea demonstrated the most potential as functional foods or nutraceuticals.

submitted by Barbara Eva Koffler Zsfassung in dt. und engl. Sprache Graz, Univ., Diss., 2014 OeBB

eingereicht von Kristina Zakharova Zsfassung in dt. Sprache Wien, Univ. für Bodenkultur, Diss., 2014 OeBB

Verf.: Franziska Fuchs Zsfassung in engl. Sprache Wien, Univ. für Bodenkultur, Masterarb., 2012

Ill., graph. Darst.

Tannine sind pflanzliche, polyphenolische Sekundärmetabolite mit Protein-präzipitierenden und –bindenden Kapazitäten, welche offenbar für die antinutritiven und gesundheitsschädlichen Wirkungen der Tannine verantwortlich sind. Jedoch dominieren in der Literatur die gesundheitsfördernden Beschreibungen, für die meist die antioxidative Kapazität verantwortlich gemacht wurde. Der etablierte Modelorganismus Caenorhabditis elegans wurde zur Analyse dieses Kontrastes ausgewählt. Zunächst wurden Lebensdauer und Stressresistenz der mit Tanninsäure und den Tanninbausteinen Gallussäure, Ellagsäure und Catechin behandelten Nematoden ermittelt. Das vermutete Vorliegen eines „Calorie Restriction“ (CR)-Effektes als auch einer hormetischen Dosis-Wirkungs-Beziehung wurde überprüft. Weiterhin wurden antimikrobielle und antioxidative Eigenschaften als potentielle Ursachen der Langlebigkeit untersucht und die Auswirkungen auf die Fitness und Genexpression analysiert. Die Einbeziehung verschiedener Alterungs-Theorien rundete die Analyse der Tanninwirkung ab. Alle Tannin-Substanzen konnten eine Lebensverlängerung erwirken, doch erstaunlicherweise erwiesen sich Langlebigkeit und Stressresistenz als individuelle, nicht zwangsläufig gekoppelte Parameter. Hormesis, CR-nachahmende Eigenschaften, antimikrobielle Kapazitäten als auch verschiedene stressrelevante Gene sind teilweise für die Lebensverlängerung verantwortlich. Die antioxidative Kapazität scheint jedoch irrelevant zu sein. Die differentielle Expression mehrerer hundert Gene durch Tanninsäure unterstreicht zudem die Komplexität der Wirkweise. Hinweise zur Bestätigung der „Disposable Soma Theory“, der „Mitohormesis“-Theorie und der „Green Theory of Ageing“ konnten zum Teil gefunden werden. Diese Arbeit zeigt die individuelle und kontrastreiche Wirksamkeit der Tannine auf. Sie unterstreicht, dass Tannine molekulare Regulatoren sind, welche nicht nur auf ihre antioxidative und antinutritive Kapazität reduziert werden sollten. The polyphenolic tannins are plant-produced secondary metabolites with protein precipitating and binding capacities. This characteristic is seemingly responsible for antinutritional and harmful effects. However, health benefits have also been extensively described in the literature. Indeed, antioxidant properties are believed to be the reason for these beneficial effects. The established model organism Caenorhabditis elegans was chosen to examine this apparent contradiction. The nematodes were exposed to tannic acid and to the tannin building blocks gallic acid, ellagic acid, and catechin and the lifespan and stress resistance were determined. The presence of a calorie restriction (CR) effect and a hormetic dose-response-relationship was verified. Furthermore, antimicrobial and antioxidative capacities were assessed as possible causes of longevity and the impact on fitness parameters and gene expressions was analysed. The consideration of different ageing theories completed the analysis of the tannin action. All tannin-substances were able to prolong the lifespan but against all expectations, longevity and stress resistance were shown to be independent entities, which are not necessarily linked. Hormesis, CR-mimetic properties, antimicrobial capacities as well as several stress relevant genes are partly responsible for the life-extension. The antioxidant capacities, however, appeared to be irrelevant. The regulation of several hundred gene expressions by tannic acid underlined the complexity of the mode of action. Furthermore, the results partly confirm the “Disposable Soma Theory”, the “Mitohormesis Theory” and the “Green Theory of Ageing”. This work dissects the contrasting efficiency of the tannin family and underlines in particular, that tannins are molecular regulators, which should not be reduced to their antioxidative and antinutritional capacities

submitted by: Barbara Teizer Zsfassung in dt. Sprache Wien, Univ. für Bodenkultur, Masterarb., 2010

by Ali Moghaddam Zsfassung in dt. Sprache Wien, Univ. für Bodenkultur, Diss., 2010 OeBB

In der vorliegenden Arbeit wird einStressreduktionsprogramm der Feldenkrais-Methode qualitativ mit Hilfe des "persönlichen Gesprächs" nach einem 4 Tages-Workshop evaluiert. Es konnte eine Stress- und Angst reduzierende Wirkung nachgewiesen werden. Die Teilnehmer erfuhren einen neuen Umgang mit sich selbst, bewerteten bisherige Stressituationen neu und entdeckten neue entlastende Verhaltensmöglichkeiten im Alltag.

Plants are able to emit flavours over their flowers, leaves and fruits. These flavours serve them as attractants, repellents or signal molecules. Many plants show a constitutive emission of a series of different mono- and sesquiterpenes. Futhermore plants have also inducible emissions. The influence of stressors like e.g. predators, bacteria, fungi or ozone yield to novel synthesis and emission of repellents and signal molecules. They originate mainly form octadecanoid and sikimate pathway. The octadecanoid pathway yields in the formation of alcohols and aldehyds (predominatly C6-compounds). Starting form free fatty acids they were generated and emitted via an enzyme cascade (lipase, lipoxygenase, hydroperoxidelyase). The Shikimat pathway is important for the formation of the important plant hormone salicylic acid (SA). After methylation SA can be emitted as the volatile methylsalicylate MeSA) into the atmosphere. The main task of the work was to approve if it is possible to draw conclusions from stress induced emissions to certain plant internal enzyme activities or substrate concentration in the model plant tomato (cv. Moneymaker). The would allow a non invasive measurement of such endogenous parameters. On the one hand it should be proved if the emission of green leave aldehyds and alcohols (GLAs) can be suitable for the prediction of the enzyme activities lipase, lipoxygenase and hydroperoxidelyase or the substrate concentrations in the octadecanoid pathway. The GLAs were measured by online GC/MS, the intermediates (free fatty acids, hydroperoxy fatty acids)by HPLC and the enzyme activities by UV/VIS spectroscopy. A good correlation between a certain enzyme activity/substrate concentration should then be a hint to the rate-determining step in the cascade. On the other hand it should be proved if emission of MeSA can be suitable for the prediction of endogenous free SA concentration. Also in this case I looked for a correlation between the MeSA emission and the plant internal SA concentration. The measurement of MeSA were measured by online GC/MS as well and the endogenous SA concentrations by HPLC. Ozone exposure and infection by fungi (Botrytis cinerea) were used as abiotic/biotic stressors respectively. The stress response on ozone exposure of the tomato plants started with varying lag times between 1 and 3 hours. The plants reacted with the emission of methanol, GLAs and MeSA as well as increasing of the emissions of mono- and sesquiterpenes. The plants were removed from the chamber, snap frozen and homogenised with pistil and mortar and stored at -80°C until the extraction and measurement of the enzyme activities/SA concentrations respectively. Whereas the GLA emissions showed no good correlations with lipase and hydroperoxidelyase activities (0.19 and 0.41) the correlation with the lipoxygenase activity was quite good (0.82). This points to the lipoxygenase to be the rate-determining step for the GLA emission. Free fatty acids were found in similar concentrations both in control plants and stressed plants. Substrate limitation by low availability of free fatty acids hence seems not to be ratedetermining. The concentration of hydroperoxy fatty acids were always beyond the detection limit, therefore the lack of substrate for the hydroperoxidelyase may be the "bottle neck" for the GLA emission strength. Also this substrate limitation should lead to a good correlation between GLA emission and lipoxygenase activity. Due to this good correlation it is in cases of Botrytis infection and ozone fluxes between 3•10-8 and 8•10-8 mol m-2 s-1 possible to predict internal enzyme activities by measurement of the GLA emissions. However the GLA emission are not in all cases sufficient to predict the lipoxygenase activity without restrictions. In particular high ozone fluxes into the plant yielded in very high GLA emissions and strong variances form the linear correlation between emission and lipoxygenase activity occurred. Also the emission of MeSA and the internal concentration of free SA showed a good correlation (0.91). Though it should possible to estimate the endogenous free SA concentration by measuring the MeSA emission. All in all this work shows that it is possible to conclude different plant internal enzyme activities and amounts of substances using the measurement of volatile compounds. Though these emissions allow the not invasive determination of these parameters in a good demand interval.

Ill., graph. Darst.

Ill., graph. Darst.

A new collection of Arabidopsis mutants deregulated in the response to abiotic stresses has been isolated using an EMS-mutagenised population carrying the luciferase cDNA under the control of the RCI2A promoter. RCI2A gene is expressed after exposure to low temperatures, dehydration, high salinity, and the ectopic application of the phyto-hormone abscisic acid. Two characterised recessive mutants (lor19 and lor42) exhibiting a lower expression of RCI2A after the stress treatments, in comparison to the wild type, have been proven to be also affected in their tolerance to some of these adverse conditions. Moreover, two dominant mutants (hor29 and hor106) presenting an enhanced expression of the RCI2A gene have also been shown to be altered in the sensitivity to the different stress factors. The results presented, also confirmed the interactive relationships between different signalling pathways triggered by the stress factors tested, indicating new features on the control of the expression of RCI2A. First, a novel cold-signalling pathway different to the CBF/DREB1-dependent pathway, was proposed to induce the expression of the RCI2A. Second, a differential regulation of the transgene in shoot and root organs, has been observed in one of the studied mutants, after salt and ABA treatments. And third, an enhanced expression of the RCI2A::luc transgene in root tissues after ethylene treatment, indicates the involvement of the phytohormone in the induction of RCI2A in this organ. The four mutations (lor19, lor42, hor29, and hor106) characterised have been linked to different chromosomal regions, and the positions obtained indicate that the isolated mutants do not correspond to already described mutations affecting the regulation of the different stress signalling pathways. Further mapping of the mutations will lead to the positional cloning of the affected genes, identifying new elements involved in the Arabidopsis abiotic stress signalling cascades.