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The acute toxicity and hypokinetic activity induced by menthofuran on the gastrointestinal tract of rodents were investigated in the present study. An absence of acute toxicity was observed. Menthofuran delayed gastric emptying at oral doses of 25, 50, and 100 mg/kg in the experimental model of phenol red, as well as it reduced the intestinal transit at oral doses of 50 and 100 mg/kg. Interestingly, a scopolamine-similar hypokinetic effect was observed for menthofuran. In the experimental model of castor oil-induced intestinal hypermotility, menthofuran (50 and 100 mg/kg) reduced the number of loose stools as observed for the normal group. Additionally, menthofuran induced a marked concentration-dependent relaxation in rat ileum segments precontracted with KCl (EC50 = 0.059 ± 0.008 μg/mL) or carbachol (EC50 = 0.068 ± 0.007 μg/mL). These results suggest the possible decrease of calcium influx underlying the effects of menthofuran on the gastrointestinal tract, which opens the door for further study regarding this potential application for the treatment of gastrointestinal disorders, noting possible limitations of its use due to adverse effects in children.

Introduction: the biodiversity of global flora provides important molecules for the treatment and prevention of various human diseases, but most often their toxicities are not evaluated. Objective: evaluate the toxicity of monoterpenoid limonene epoxidein mice treated acutely with repeated doses (25, 50 and 75 mg/kg) orally on hematological and biochemical parameters. Methods: forty mice divided infour groups (n = 10/group ) were treated orally andacutely with repeated doses and observed for 14 days. The mice were treatedwith limonene epoxide administered at doses of 25, 50 and 75 mg / kg emulsified with 0.05 % Tween 80 dissolved in 0.9 % saline (groupsEL25, EL50 and EL75, respectively)and withvehicle (0.05 % Tween 80, dissolved in 0.9% saline, control group). Results: the treatment caused no deaths or signs of toxicity in the mice treated. Discussion: thus, based on the results obtained from hematological and biochemical studies in mice, it can be suggested that limonene epoxide does not produce anytoxic effect on most of the parameters analyzed, and can be safely used in pre-clinical-assays However, more studies should be conducted to ensure that this derivative of a natural monoterpenecan be safely used in thefood and pharmaceutical industry. Introdução: a biodiversidade da flora mundial proporciona moléculas importantes no tratamento e na prevenção de várias enfermidades humanas, porém na maioria das vezes não são avaliadas sua toxicidade. Objetivo: avaliar a toxicidade do monoterpenóide epóxilimoneno em camundongos tratados de forma aguda com doses repetidas (25, 50 e 75mg/kg) por via oral em parâmetros bioquímicos e hematológicos. Métodos: quarenta camundongos correspondendo a quatro grupos (n=10/grupo) foram tratados, por via oral de forma aguda com doses repetidas e observados durante 14 dias, com epóxilimoneno nas doses de 25, 50 e 75 mg/kg emulsionado em Tween 80 0,05%dissolvido em solução salina 0,9 % (grupos EL25, EL50 e EL75, respectivamente), e com veículo (Tween 80, 0,05 % dissolvido em solução salina 0,9 %, grupo controle). Resultados: o tratamento não causou nenhuma morte ou sinal de toxicidade nos animais. Discussão: dessa forma, baseado nos resultados obtidos a partir dos estudos hematológicos e bioquímicos em camundongos, pode ser sugerido que a administração do epóxilimoneno não produz efeitos tóxicos sobre a maioria dos parâmetros analisados e que pode ser usado de forma segura em ensaios préclínicos. No entanto, mais estudos devem ser realizados para garantir que esse derivado de um monoterpeno natural seja utilizado de forma segura na indústria alimentícia e farmacêutica. Introducción: la biodiversidad global de la flora proporciona moléculas importantes para el tratamiento y prevención de diversas enfermedades humanas, pero más a menudo no se evalúa su toxicidad. Objetivo: evaluar la toxicidad de lepóxilimoneno monoterpenoide en los ratones tratados de forma aguda con dosis repetidas (25, 50 y 75 mg/kg) por vía oral en los parámetros hematológicos y bioquímicos. Métodos: cuarenta ratones que representan cuatro grupos (n = 10/grupo) fueron tratados con dosis por vía oral de forma aguda repetida y se observaron durante 14 días com elepóxilimonenoa dosis de 25, 50 y 75 mg/kg emulsionados enTween 80 0,05 % disuelto en solución salina 0,9 % (grupos EL25, EL50 y EL75, respectivamente), y vehículo (Tween 80, 0,05 % disuelto en solución salina 0,9 %, grupo de control). Resultados: El tratamientono no causó muertes ni signos de toxicidad en animales. Discusión: de este modo, sobre la base de los resultados obtenidos a partir de los parámetros hematológicos y bioquímicos en ratones, se puede sugerir que la administración de epóxilimoneno no produce efectos tóxicos en la mayoría de los parámetros analizados y se puede utilizar de forma segura en la pre-clínica. Sin embargo, se deben realizar más estudios para asegurar que el derivado de un monoterpeno natural puede ser usado con seguridad en la industria alimentaria y farmacéutica.

This is a copy of an article published in the Journal of Medicinal Food© 2011 - copyright Mary Ann Liebert, Inc.; Journal of Medicinal Food is available online at: http://online.liebertpub.com Citronellal (CT) is a monoterpenoid and the major constituent of the mixture of terpenoids that give the citronella oil its lemon scent. Citronella oil is widely used around the world for various purposes and is mainly obtained from plants of the Cymbopogon genus, which are known as “lemongrass.” Considering these plants have been used worldwide for various medicinal purposes, the interest of researchers to understand the biological activities of monoterpenoids related to the Cymbopogon genus has been increasing. In the present work, we investigated the antinociceptive action and the redox properties of CT. Our results indicate that intraperitoneal injection of CT was effective in reducing nociceptive face-rubbing behavior in both phases of the formalin test, which was also naloxone-sensitive. CT also evoked antinociceptive response in the capsaicin and glutamate tests. The total radical-trapping antioxidant parameter and total antioxidant reactivity assays indicate that CT at doses of 0.1 and 1 mg/mL exerts a significant antioxidant activity, which is probably related to its ability to scavenge superoxide and nitric oxide, but not H2O2 or hydroxyl radicals, as evaluated separately by specific in vitro tests. These results show for the first time the antinociceptive potential of CT and indicate that the antioxidant properties of this compound may rely on its mechanism of biological actions because CT-containing natural products are used to treat various diseases related to oxidative stress and reactive species.

Natural products have been the focus of large pharmacological studies in recent decades. Phenylpropanoids, abundant in aromatic plants, have gained prominence for their various pharmacological activities, with emphasis on derivatives of cinnamic acid. 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid (TMCA), a cinnamic derivative with well-defined pharmacological properties in the literature, such as sedatives, anticonvulsants and immunomodulators. Methyl 3,4,5-trimethoxycinnamate (M-TMCA) and butyl 3,4,5-trimethoxycinnamate (B-TMCA) are two TMCA analogues. Given the scarcity of research on the pharmacological activity of these two analogues, interest in researching the antinociceptive activity that encouraged this work arose. Therefore, the aim of the present was to evaluate the central effects resulting from the intraperitoneal administration of M-TMCA and B-TMCA in nociception models using male mice (Mus musculus – Swiss), as well as to propose the mechanism by which they act as antinociceptive drugs using in vivo and in silico studies. The experiments started with the determination of the LD50, in which it was estimated at 500 mg/kg. Then, pharmacological screening was performed, in which a depressive profile was observed for both drugs tested, due to decreased ambulation, analgesia, decreased righting reflex and decreased response to touch presented by the treated animals. Pre-treatment with M-TMCA and B-TMCA, at doses of 50, 75 and 100 mg/kg, did not change motor coordination in the rota-rod test, excluding a myorelaxant effect. Then, methodology was used to determine the antinociceptive activity of M-TMCA and B-TMCA. In the test of abdominal writhing induced by acetic acid, M-TMCA and B-TMCA reduced the number of writhes when compared to the control group, however when the doses were compared to each other, the B-TMCA at a dose of 75 mg/kg was more effective. The formalin test was performed, using the same doses, and it was observed that only B-TMCA was able to reduce the licking time in the neurogenic phase (0-5 min) of the test, however, both substances were effective in the inflammatory phase (15-30 min). Thus, B-TMCA, at a dose of 75 mg/kg was chosen to continue the studies. In an attempt to propose the possible mechanisms of action by which B-TMCA exerts its antinociceptive activity, in silico analyzes were carried out through consensus docking and molecular dynamics simulations, which demonstrated that B-TMCA acts through interactions with the enzyme COX-2 and A1 and NMDA receptors. In an attempt to prove whether B-TMCA acts on the adenosinergic receptor, caffeine (non-selective antagonist) was administered at a dose of 10 mg/kg i.p., 15 minutes before administration of B-TMCA, and the formalin test. Caffeine was able to reverse the antinociceptive effect of B-TMCA, indicating a possible involvement in the modulation of nociceptive transmission through the adenosinergic system. The glutamatergic system was also studied through the administration of MK-801 (0.15 mg/kg i.p.), a non-competitive antagonist of NMDA receptors, following the protocol of the glutamate test, in which after the administration of 20 μL of a solution of glutamate (30 μmol/paw) via intraplantar time was counted for 15 minutes. B-TMCA was able to reduce paw licking time as well as MK-801, thus suggesting a possible interaction with the glutamatergic system in reducing nociception. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Os produtos naturais tem sido foco de grandes estudos farmacológicos nas últimas décadas. Os fenilpropanoides, abundantes nas plantas aromáticas vem ganhado destaque por suas diversas atividades farmacológicas, com destaque para os derivados do ácido cinâmico. O ácido 3,4,5-trimetóxi-cinâmico (TMCA), um derivado cinâmico com propriedades farmacológicas bem definidas na literatura, como sedativas, anticonvulsivantes e imunomoduladoras. 3,4,5-trimetoxicinamato de metila (M-TMCA) e 3,4,5-trimetoxicinamato de butila (B-TMCA) são dois análogos do TMCA. Diante da escassez de pesquisas sobre a atividade farmacológica desses dois análogos, surgiu o interesse em pesquisar a atividade antinociceptiva que incentivou à realização deste trabalho. Sendo assim, o objetivo do presente foi avaliar os efeitos centrais decorrentes da administração intraperitoneal de M-TMCA e B-TMCA em modelos de nocicepção utilizando camundongo machos (Mus musculus – Swiss), bem como propor o mecanismo pelo qual eles atuam como drogas antinociceptivas utilizando estudos in vivo e in sílico. Os experimentos iniciaram, a partir da determinação da DL50, na qual esta foi estimada em 500 mg/kg. Em seguida, a triagem farmacológica foi realizada, na qual foi observado um perfil depressor para ambas as drogas testadas, devido a ambulação diminuída, analgesia, reflexo do endireitamento e resposta ao toque diminuídos apresentados pelos animais tratados. O pré-tratamento com M-TMCA e B-TMCA, nas doses de 50, 75 e 100 mg/kg, não alterou a coordenação motora no teste de rota-rod, excluindo um efeito miorrelaxantes. Em seguida foram utilizadas metodologia para determinar a atividade antinociceptiva do M-TMCA e B-TMCA. No teste das contorções abdominais induzidas pelo ácido acético, M-TMCA e B-TMCA reduziram o número de contorções, quando comparados ao grupo controle, contudo quando as doses foram comparadas entre si, o B-TMCA na dose de 75 mg/kg foi mais efetivo. O teste da formalina foi realizado, utilizando as mesmas doses, e foi observado que apenas o B-TMCA conseguiu reduzir o tempo de lambida na fase neurogênica (0-5 min) do teste, contudo, ambas as substâncias foram efetivas na fase inflamatória (15-30 min). Sendo assim, o B-TMCA, na dose de 75 mg/kg foi escolhido para dar prosseguimento aos estudos. Na tentativa de propor os possíveis mecanismos de ação pelo qual o B-TMCA exerce sua atividade antinociceptiva foram realizadas análises in sílico, feitas através do docking consenso e simulações de dinâmica molecular, que demonstraram que o B-TMCA atua através de interações com a enzima COX-2 e receptores A1 e NMDA. Na tentativa de comprovar se o B-TMCA atua sobre o receptor adenosinérgico, administrou-se a cafeína (antagonista não seletivo) na dose de 10 mg/kg i.p., 15 minutos antes da administração de B-TMCA, e deu-se prosseguimento ao teste da formalina. A cafeína foi capaz de reverter o efeito antinociceptivo do B-TMCA, indicando um possível envolvimento na modulação da transmissão nocicepiva através do sistema adenosinérgico. O sistema glutamatérgico também foi estudado através da administração de MK-801 (0,15 mg/kg i.p.), antagonista não-competitivo dos receptores NMDA, seguindo o protocolo do teste do glutamato, no qual após a administração de 20 μL de uma solução de glutamato (30 μmol/pata) via intraplantar o tempo foi contabilizado por 15 minutos. O B-TMCA foi capaz de reduzir o tempo de lambida da pata bem como o MK-801, sugerindo assim uma possível interação com o sistema glutamatérgico na redução da nocicepção.

Fungal infections affect a significant part of the population. It is estimated that around 1 billion people around the world have been affected by some type of fungus. The Candida genus is responsible for several infectious diseases, especially in individuals with compromised immunity. In addition, the emergence of strains resistant to available drugs is worrying, which results in greater difficulties for treatment and association with cases of death. Therefore, the search for new pharmacotherapeutic alternatives is urgent. Nitrobenzene derivatives have several antimicrobial properties, including antifungal action. Thus, in the present study, the antifungal potential of fourteen 3- nitrobenzamide derivatives against Candida species (C. albicans, C. krusei and C. glabrata) was investigated and a structure-activity relationship of the substances evaluated was established. The 3-nitrobenzamide derivatives were prepared using the Schotten-Baumann reaction and were structurally characterized by the techniques of Infrared Spectroscopy and Nuclear Magnetic Resonance of 1H and 13C. The products obtained had yields of 25.2-72.7% and three derivatives from the collection are unprecedented (6, 8 and 10). In antifungal tests, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) was determined using the microdilution technique in 96-well plates and the Minimum Fungicidal Concentration (MFC) in solid culture medium. The possible mode of action was also investigated using the sorbitol and ergosterol assays. Nine compounds showed antifungal activity with MIC values ranging from 39.06 to 1250 µg/mL. Considering the analysis of the CFM/CIM ratio, which presented values in a range of 1 to 3, it can be seen that the derivatives have fungicidal action. Imide 14 showed the best fungicidal effect in the collection against strains of C. albicans, C. krusei and C. glabrata, with MIC and CFM values of 39.06 µg/mL. The data suggest that this compound does not act directly on the fungal cell membrane or through mechanisms that involve cell wall functions. Regarding the structure and antifungal activity relationship, the presence of the dicarbonyl system linked to nitrogen or methylenedioxide potentiates the inhibitory action against fungal species. The molecular docking study shows that seven out of ten targets that share higher docking scores belonging to the ergosterol biosynthetic pathway, with predicted binding to targets: GTP RHO1 binding protein, diphosphomevalonate decarboxylase, squalene monooxygenase, 24-C-sterol methyltransferase and squalene synthase; the small size of the molecule and the carbonyl groups, mainly, were ideal for stabilizing the molecule in the receptors. The analysis, formula made for C. albicans, was also done for C. krusei and C. glabrata species targets, in which there is a small mutation in C. krusei target residues, but which does not alter the compound binding in this target. Given these results, it is concluded that 3-nitrobenzamides are promising compounds for the development of new antifungal drugs against Candida spp. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES As infecções fúngicas acometem uma significativa parte da população. Estima-se que cerca de 1 bilhão de pessoas em todo o mundo já foram afetadas por algum tipo de fungo. O gênero Candida é responsável por diversas doenças infecciosas, especialmente em indivíduos com imunidade comprometida. Além disso, é preocupante o surgimento de cepas resistentes aos fármacos disponíveis, o que resulta em maiores dificuldades para o tratamento e associação a casos de óbito. Portanto, é urgente a busca por novas alternativas farmacoterapêuticas. Derivados nitrobenzenos apresentam diversas propriedades antimicrobianas, incluindo ação antifúngica. Desse modo, no presente estudo investigou-se o potencial antifúngico de catorze derivados 3-nitrobenzamidas frente às espécies do gênero Candida (C. albicans, C. krusei e C. glabrata) e estabeleceu-se uma relação estrutura-atividade das substâncias avaliadas. Os derivados 3-nitrobenzamidas foram preparados utilizando a reação de Schotten-Baumann e foram estruturalmente caracterizados pelas técnicas de Espectroscopia de Infravermelho e Ressonância Magnética Nuclear de 1H e 13C. Os produtos obtidos tiveram rendimentos de 25,2-72,7% e três derivados da coleção são inéditos (6, 8 e 10). Nos testes antifúngicos determinou-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) com a técnica de microdiluição em placas de 96 poços e a Concentração Fungicida Mínima (CFM) em meio de cultura sólido. Também se investigou o possível modo de ação utilizando os ensaios do sorbitol e ergosterol. Nove compostos apresentaram atividade antifúngica com valores de CIM que variaram de 39,06 a 1250 µg/mL. Considerando a análise da razão de CFM/CIM, que apresentou valores em um intervalo de 1 a 3, pode-se verificar que os derivados apresentam ação fungicida. A imida 14 demonstrou o melhor efeito fungicida da coleção frente às cepas de C. albicans, C. krusei e C. glabrata, com valores de CIM e CFM de 39,06 µg/mL. Os dados sugerem que este composto não atua de forma direta sobre membrana celular fúngica ou por mecanismos que envolvam funções da parede celular. A respeito da relação estrutura e atividade antifúngica, a presença do sistema dicarbonílico ligado ao nitrogênio ou metilenodióxido potencializam a ação inibitória frente às espécies de fungos. O estudo de docking molecular mostra que sete dos dez alvos que compartilham scores de docking mais altos pertencem à via biossintética do ergosterol, com predição de ligação aos alvos: proteína de ligação a GTP RHO1, difosfomevalonato descarboxilase, esqualeno monooxigenase, esterol 24-C-metiltransferase e esqualeno sintase; o pequeno tamanho da molécula e os grupos carbonilas, principalmente, foram ideais para estabilização da molécula nos receptores. A análise, inicialmente feita para C. albicans, também foi feita para os alvos das espécies C. krusei e C. glabrata, em que há uma pequena mutação em resíduos do alvo de C. krusei, mas que não altera a ligação do composto neste alvo. Diante desses resultados, conclui-se que os derivados 3-nitrobenzamidas apresentam-se como compostos promissores para o desenvolvimento de novos fármacos antifúngicos contra Candida spp.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq A inflamação é composta de uma reação vascular e outra celular, conferindo diferentes reações de tecidos e células, tanto do ambiente intravascular, como o do ambiente extravascular. À medida que o processo inflamatório ocorre, proteases da coagulação, em especial a trombina (FIIa), são capazes de desencadear diversas respostas celulares na biologia vascular e por isso, frequentemente é observada a ativação de outros sistemas biológicos, levando a complicações, como a trombose. Assim, moléculas que interferem positivamente nesses eventos são modelos interessantes para o desenvolvimento de novas drogas anti-inflamatórias. Neste contexto, destacam-se os metabólitos secundários de plantas medicinais, os quais interagem com diversas proteínas envolvidas em processos biológicos importantes, incluindo inflamação e coagulação. Por essa razão, o presente trabalho teve por objetivo caracterizar química e toxicologicamente os extratos vegetais de duas espécies do Bioma caatinga (Turnera subulata e Licania rigida Benth), bem como, avaliar os potenciais anti-inflamatórios e anticoagulantes desses extratos. Os extratos foram obtidos a partir da coleta e secagem do material vegetal com posterior extração aquosa e alcoólica, sendo em seguida rotaevaporados e liofilizados. Os extratos de Turnera subulata e Licania rigida Benth apresentaram compostos fenólicos como principais fitocomponentes (flavonóis-3-O-glicosilados), bem como, vitexina, ácido ferúlico, ácido octadecatrienóico, alguns aminoácidos e outros. Em relação a toxicidade, todos os extratos estudados apresentaram baixos efeitos toxicológicos, assim como efeitos anticoagulantes capazes de inibir a trombina de forma direta (~80-90%) e de forma indireta através do cofator II da heparina (~70%). Sobre a inflamação, os extratos apresentaram significativo efeito inibitório com redução de citocinas pró-inflamatórias TNF-α e IL-1β (~70-75%) e efeitos no aumento da secreção da IL-10 (~15-20%), além de serem capazes de inibir prostaglandina E2 (~80%) e óxido nítrico (~65%). Assim, os resultados exibidos pelos extratos, apontam esses como alvos farmacológicos com perspectivas para o desenvolvimento de novas drogas anti-inflamatórias. Inflammation is composed of a vascular and a cellular reaction, conferring different tissue and cell responses, both in the intravascular and extravascular environments. As the inflammatory process occurs, the coagulation protease thrombin (FIIa), can trigger several cellular responses in vascular biology and, therefore, activation of other biological systems is often observed, leading to complications such as thrombosis. Thus, molecules that can modulate these events are interesting models for the development of new antiinflammatory drugs. In this context, secondary metabolites of medicinal plants stand out, since they can interact with several proteins involved in important biological processes, including inflammation and coagulation. For this reason, this study aimed to chemically and toxicologically characterize the plant extracts of two species of the Caatinga Biome (Turnera subulata and Licania rigida Benth), as well as to evaluate the anti-inflammatory and anticoagulant potentials of the extracts. The extracts were obtained after the collection and drying of plant material with subsequent aqueous and alcoholic extraction, followed by rotaevaporation and lyophilization. Turnera subulata and Licania rigida Benth extracts presented phenolic compounds as the main phytocomponents (flavonols-3-Oglycosylated), as well as vitexin, ferulic acid, octadecatrienoic acid, amino acids and others. Regarding toxicity, all extracts showed low toxicological effects, as well as anticoagulant potential through direct thrombin inhibition (~80-90%) and indirect, mediated by the heparin cofactor II (~70%). On inflammation, the extracts showed a significant reduction of proinflammatory cytokines TNF-α and IL-1β (~70-75%) and increase effects on IL-10 secretion (~15-20%), in addition to be able to inhibit prostaglandin E2 (~80%) and nitric oxide (~65%). Thus, the results exhibited by the extracts point to these as a pharmacological target with perspectives for the development of new anti-inflammatory drugs.

In the last decades there has been an increase in the incidence of fungal diseases, showing itself as an important cause of morbidity and mortality in humans, affecting more than one billion individuals worldwide. Yeasts of the genus Candida spp. they are opportunistic pathogenic fungi, which stand out as the most isolated in clinical samples (prevalence of 40-70%). The development of fungal resistance associated with the high toxicity, cost and effectiveness of antifungals on the market, has been driving the search for new therapeutic alternatives. Cinnamic acids are a group of aromatic carboxylic acids widely found in vegetables, which have structural diversity, low toxicity and various biological activities described, with emphasis on anti-Candida activity. Thus, the present study aimed to prepare a collection of thirteen amides(1- 13), structurally related, and to evaluate the antifungal activity of these compounds against three species of Candida spp.: C. albicans, C. krusei and C. tropicalis, as well as to establish the structure-activity relationship of the evaluated substances. The amides were prepared using the acid chloride reaction methodology and the compounds were characterized by infrared and, 1H and 13C Nuclear Magnetic Resonance spectroscopic techniques and showed yields ranging from 36-85.6%. Among the thirteen substances obtained, two are unprecedented in the literature (4 and 13). In the antifungal test, the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), the determination of the minimum fungicidal concentration (CFM) and the test to determine the mechanism of action (sorbitol and ergosterol) were performed. Through the results of bioactivity, it can be observed that amides 1 and 4 demonstrated a fungicidal effect against strains of Candida spp. Compound 4 showed better antifungal activity with MIC values=CFM=0.67 mM, 0.33 mM, 1.34 mM against C. albicans, C. krusei and C. tropicalis, respectively. It was found through reason (CFM/CIM < 4), that the molecules had a fungicidal effect. The molecular docking study suggested that the possible mechanism of action of bioactive compounds occurs via multi-targets with the inhibition of HOS1 as the main biological target. Therefore, it can be concluded that it was possible to establish chemical characteristics that can serve as a reference for advancing development of new antifungal prototypes with better biological action against Candida species. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Nas últimas décadas houve um aumento na incidência das doenças fúngicas, mostrando-se como importante causa de morbidade e mortalidade em seres humanos, afetando mais de um bilhão de indivíduos em todo o mundo. As leveduras do gênero Candida spp. São fungos patógenos oportunistas, que destacam-se como os mais isolados em amostras clínicas (prevalência de 40-70%). O desenvolvimento de resistência fúngica associado à elevada toxicidade, custo e eficácia dos antifúngicos existentes no mercado, vêm impulsionando à busca por novas alternativas terapêuticas. Os ácidos cinâmicos constituem um grupo de ácidos carboxílicos aromáticos amplamente encontrados em vegetais, que apresentam diversidade estrutural, baixa toxicidade e várias atividades biológicas descritas, com destaque para atividade anti-Candida. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo preparar uma coleção de treze amidas cinâmicas (1-13), estruturalmente relacionadas, e avaliar a atividade antifúngica desses compostos frente a três espécies de Candida spp.:C. albicans, C. kruseie C. tropicalis e estabelecer a relação estrutura-atividade das substâncias avaliadas. As amidas foram preparadas utilizando a metodologia de reação de cloreto ácido e os compostos foram caracterizados pelas técnicas espectroscópicas de Infravermelho, Ressonância Magnética Nuclear de 1H e de 13C e apresentaram rendimentos que variaram de 36 – 85,6%. Dentre as treze substâncias obtidas, duas são inéditas na literatura (4 e 13). No teste antifúngico foi realizada a determinação da concentração inibitória mínima (CIM), a determinação da concentração fungicida mínima (CFM) e o ensaio de determinação do mecanismo de ação (sorbitol e ergosterol). Por meio dos resultados de bioatividade pode-se observar que as amidas 1 e 4 demonstraram efeito fungicida frente às cepas de Candida spp. O composto 4apresentou melhor atividade antifúngica com valores de CIM=CFM=0,67 mM, 0,33 mM,1,34 mM frente à C. albicans, C. krusei e C. tropicalis, respectivamente. Constatou-se por meio da razão (CFM/CIM

Chagas disease is considered one of the main neglected tropical diseases and represents a major public health problem due to the high rates of associated morbidity and mortality. Currently, the drugs available for the treatment of the disease are outdated, have limited efficacy and severe adverse and/or side effects that result in nonadherence to treatment and reduced quality of life for patients. Therefore, it is necessary to search for new therapeutic alternatives that promote greater selectivity to the parasite that causes the disease, as well as drugs with new mechanisms of action and that have good efficacy. Piplartine, also known as piperlongumin is a phenylpropanoid, found in plants of the genus Piper, data from the literature report that piplartine has several biological activities, including trypanocidal activity. Thus, the objective of the present work was to prepare a collection of thirteen piplartine analogs esters (01 - 13), structurally related, and evaluate the trypanocidal activity of the compounds against Trypanosoma cruzi, as well as to establish the structureactivity relationship of assessed substances. The esters were prepared using three different methodologies: Fischer esterification, esterifications with alkyl and aryl halides and Steglich reaction. In the structural characterization, the spectroscopic techniques of Infrared, Nuclear Magnetic Resonance of 1H and 13C were used. The products were obtained with yields of 26.7–91.1%. The trypanocidal tests were performed against the evolutionary forms epimastigote and trypomastigote using the microdilution technique in 96-well plates to determine the concentration capable of inhibiting the growth of the parasite by 50% (IC50), in addition, the cytotoxicity of the compounds against Rhesus monkey renal epithelial cells (LLC-MK2) for the calculation of the selectivity index (SI). The compound 10 showed good trypanocidal activity against the trypomastigote form (IC50 = 40.75 ± 12.36 μM). While 11 was bioactive in both evolutionary forms with IC50 = 28.21±5.34 μM and 47.02±8.70 μM (epimastigote and trypomastigote, respectively), besides to presenting a high selectivity index to the parasite (SI > 10). In the investigation of the trypanocidal mechanism of action, it was elucidated that it occurs through the induction of oxidative stress and mitochondrial damage to the parasite cells. Therefore, the present study demonstrates the antiparasitic potential of this chemical class for the search for new drugs with trypanocidal activity. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq A doença de Chagas é considerada uma das principais doenças tropicais negligenciadas e representa um grande problema de saúde pública devido aos altos índices de morbidade e mortalidade associados. Atualmente, os fármacos disponíveis para o tratamento da doença encontram-se desatualizados, possuem eficácia limitada e efeitos adversos e/ou colaterais severos que resultam em falta de adesão ao tratamento e redução da qualidade de vida dos pacientes. Assim, torna-se necessária a busca por novas alternativas terapêuticas que promovam maior seletividade ao parasito causador da doença, bem como por fármacos com novos mecanismos de ação e que apresentem boa eficácia. A piplartina, também conhecida como piperlongumina é um fenilpropanoide encontrado em plantas do gênero Piper. Dados da literatura relatam que a piplartina possui diversas atividades biológicas, incluindo atividade tripanocida. Deste modo, o objetivo do presente trabalho foi preparar uma coleção de treze ésteres análogos à piplartina (01 – 13), estruturalmente relacionados, e avaliar a atividade tripanocida dos compostos frente ao Trypanosoma cruzi, bem como, estabelecer a relação estrutura-atividade das substâncias avaliadas. Os ésteres foram preparados utilizando três diferentes metodologias: esterificação de Fischer, esterificações com haletos de alquila e arila e reação de Steglich. Na caracterização estrutural utilizaram-se as técnicas espectroscópicas de Infravermelho, Ressonância Magnética Nuclear de 1H e 13C. Os produtos foram obtidos com rendimentos de 26,7–91,1%. Os testes tripanocidas foram realizados frente às formas evolutivas epimastigota e tripomastigota utilizando a técnica de microdiluição em placas de 96 poços para a determinação da concentração capaz de inibir o crescimento do parasito em 50% (CI50), além disso, determinou-se a citotoxicidade dos compostos frente às células epiteliais renais de macaco Rhesus (LLC-MK2) para o cálculo do índice de seletividade (IS). O composto 10 apresentou boa atividade tripanocida frente à forma tripomastigota (CI50 = 40,75±12,36 μM). Enquanto 11 foi bioativo em ambas as formas evolutivas com CI50 = 28,21±5,34 μM e 47,02±8,70 μM (forma epimastigota e tripomastigota, respectivamente), além de apresentar alto índice de seletividade ao parasito (IS > 10). Na investigação do mecanismo de ação tripanocida foi elucidado que ocorre através da indução de estresse oxidativo e lesão mitocondrial das células do parasito. Portanto, o presente estudo demonstra o potencial antiparasitário desta classe química para a pesquisa de novos fármacos com atividade tripanocida.

The genus Candida is responsible for the majority of fungal infections in hospital settings. Currently, several researches are directed to search for new bioactive products in the face of species of this genus. Literature data relate molecules with a perillyl or borneol nucleus that have antimicrobial activity. In previous studies, carried out by our research group, it has been demonstrated that the use of chemical and benzoic substances conjugated to monoterpenes is an interesting strategy to obtain new anti-Candida prototypes. Therefore, allow the search for candidates for antifungal drugs, in this case, the investigated dissertation or antifungal potential of eleven molecular hybrids composed of perillyl alcohol and alcohol derivatives as substructures chemical or chemical substances. Use three methods in the esterification analysis: Preparation of acid chloride via SOCl2, Steglich esterification and Schotten-Baumann reaction; the benefits of the products vary between 22.5% and 40.4%. Of the eleven selected hybrids, eight are synthetic derivatives of credits in the literature. No forward antifungal tests such as the species C. albicans, C. krusei and C. tropicalis, determined a MIC (minimal inhibition) with a microdilution technique in the 96-well plate and a minimal fungicide (CFM) in the culture medium. In the evaluation of the antifungal capacity of the hybrids, it was possible to observe all bioactives in front of the tested strains, exhibiting fungicidal activity. The compounds with the greatest antifungal power were bioactive against the strain of C. albicans, which, MF3 shows MIC at a concentration of 186.88 μM and MF5 at 622.50 μM, followed by compound MF10 which shows MIC at a concentration of 1659.27 μM against a strain of C. tropical, all compounds tested against C. krusei showed activity at the highest concentration tested. The data suggested for the presence of bulky lipophilic groups as substituents in the aromatic ring potentiate the antifungal action of molecular hybrids. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O gênero Candida é responsável pela maioria das infecções fúngicas em ambientes hospitalares. Atualmente, diversas pesquisas estão direcionadas na busca de novos fármacos bioativos frente a espécies deste gênero. Dados da literatura relatam moléculas com o núcleo perila ou bornila que possuem atividade antimicrobiana. Em estudos anteriores desenvolvidos pelo nosso grupo de pesquisa foi demonstrado que o uso de derivados cinâmicos e benzoicos conjugados com monoterpenos é uma estratégia interessante para obter novos protótipos anti-Candida. Portanto, dando continuidade à busca por candidatos a fármacos antifúngicos, na presente dissertação investigou-se o potencial antifúngico de onze híbridos moleculares derivados do álcool perílico e borneol contendo as subestruturas cinâmicas ou benzoicas. Utilizou-se três metodologias nas reações de esterificação: Reação de cloreto ácido via SOCl2, Reação de Steglich e Reação de Schotten-Baumann; os rendimentos dos produtos variaram entre 22,5% e 40,4%. Dos onze híbridos obtidos, oito são derivados sintéticos inéditos na literatura. No teste antifúngico frente as espécies C. albicans, C. krusei e C. tropicalis, determinou-se a concentração inibitória mínima (CIM) com a técnica de microdiluição em placa de 96 poços e a concentração fungicida mínima (CFM) em meio de cultura sólido. Na avaliação da capacidade antifúngica dos híbridos, foi possível observar que todos foram bioativos frente as cepas testadas, apresentando atividade fungicida. Os compostos com maior potência antifúngica foram bioativos contra a cepa de C. albicans, na qual, MF3 apresentou CIM na concentração de 186,88 μM e MF5 em 622,50 μM, seguido do composto MF10 que apresentou CIM na concentração de 1659,27 μM contra a cepa de C. tropicalis, todos os compostos testados contra C. krusei apresentaram atividade na maior concentração testada. Os dados sugerem que a presença de grupos lipofílicos volumosos como substituintes no anel aromático potencializa a ação antifúngica dos híbridos moleculares.

In the last decade a considerable increase in the prevalence of resistance to antimicrobial agents was observed, which motivated the study of the present work, whose purpose was the preparation of a collection of amides derived from vanillic acid through coupling reactions using PyBOP (benzotriazol-1-yloxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate) and DCC (dicyclohexylcarbodiimide) as coupling agents, as well as to evaluate the antimicrobial activity of amides prepared against species of the genus Candida, Staphylococcus and Pseudomonas. In this context, there are the phenolic compounds, which can be extracted from natural sources or obtained by means of synthesis, for example, vanillic acid that has several biological activities, such as antimicrobial. In the characterization of the amides were used Infrared Spectroscopic Methods, 1H and 13C Nuclear Magnetic Resonance and High Resolution Mass Spectrometry. All the amides were submitted to antimicrobial tests by the broth microdilution method, with antimicrobial control as nystatin and caspofugin. The ten amides were obtained with yields varying between 28,81 - 86,44%, and three are unpublished. All the amides presented antifungal activity in at least one strain tested. In the antibacterial evaluation, all the amides presented bioactivity in the highest concentration tested against Staphylococcus aureus strain ATCC 25925. The amide with the best antifungal profile was AN05 which had a minimum inhibitory MIC concentration of 0,46 μmol / mL , suggesting that the presence of a methyl group bound to the aromatic ring potentiates the activity of the molecule. The presence of hydroxyl groups in the ortho and para positions, and the presence of methoxyl in the meta position are also important for antimicrobial activity. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Na última década observou-se um aumento considerável na prevalência da resistência aos agentes antimicrobianos, o que motivou o estudo do presente trabalho, que teve como finalidade a preparação de uma coleção de amidas derivadas do ácido vanílico através de reações de acoplamento utilizando o PyBOP (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi- tripirrolidinofosfônio) e DCC (dicicloexilcarbodiimida) como agentes acopladores, como também avaliar a atividade antimicrobiana das amidas preparadas frente a espécies dos gêneros Candida, Staphylococcus e Pseudomonas. Nesse contexto, existem os compostos fenólicos, que podem ser extraídos de fontes naturais ou obtidos por meio de síntese, como exemplo, o ácido vanílico que possui diversas atividades biológicas, tais como a antimicrobiana. Na caracterização das amidas foram utilizados métodos espectroscópicos de Infravermelho, Ressonância Magnética Nuclear de 1H e de 13C e Espectrometria de Massas de Alta Resolução. Todas as amidas foram submetidas a testes antimicrobianos pelo método de microdiluição em caldo, tendo como controle antimicrobiano a nistatina e a caspofungina. As dez amidas foram obtidas com rendimentos variando entre 28,81-86,44%, e três são inéditas. Todas as amidas apresentaram atividade antifúngica em pelo menos uma cepa testada. Na avaliação antibacteriana todas as amidas foram bioativas na maior concentração testada frente à cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25925. A amida com melhor perfil antifúngico foi a AN05 que apresentou uma Concentração inibitória minima de CIM (Concentração Inibitória Mínima) igual a 0,46 μmol/mL, sugerindo que a presença de grupo metila ligado ao anel aromático potencializa a atividade da molécula. A presença de grupos hidroxilas nas posições orto e para, e a metoxila na posição meta também são importantes para atividade antimicrobiana.

The 3-methyl-4-nitrobenzoic acid is a compound obtained through synthetic processes, low cost and used in several studies as a precursor in the production of bioactive molecules. The present dissertation involved the preparation, purification and structural characterization of eleven esters derived from 3-methyl-4-nitrobenzoic acid in order to evaluate them for their antifungal capacity against yeast species of the genus Candida: C. albicans, C. glabrata, C. krusei and C. guilliermondii, opportunistic pathogens of clinical importance that, with the increase of the use of the antifungal agents, have been developing mechanisms of resistance to the currently available drugs; which represents an extreme difficulty for the treatment of infections caused by these microorganisms. Four different methodologies were used for the esterifications: Fischer esterification, esterification with alkyl and aryl halides, Mitsunobu reaction and Steglich reaction; the yields of the esters obtained ranged from 12% to 83%. In the antifungal tests, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined with the 96-well plate microdilution technique and subsequent determination of the minimum fungicidal concentration (CFM) in solid culture medium. With the evaluation of the antifungal capacity of the prepared esters, it was possible to observe that all were bioactive against at least one of the tested strains and presented fungicidal activity. The best results were related to the strain of C. guilliermondi 207, in which, AR1 presented inhibitory activity at the concentration of 0.039 μmol/mL and AR6 at 0.031 μmol/mL. Regarding the structural characteristics of the esters that influence the antifungal bioactivity, the importance of the side alkyl chains was found. It was also observed that the insertion of a terpenic substructure or aromatic groups, in most cases, were not relevant for the optimization of the bioactivity or contributed to the ester inactivity. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq O ácido 3-metil-4-nitrobenzoico é um produto químico obtido através de processos sintéticos, de baixo custo e utilizado em diversos estudos como precursor na obtenção de moléculas bioativas. A presente dissertação envolveu o preparo, purificação e caracterização estrutural de onze ésteres derivados do ácido 3-metil-4nitrobenzoico com o objetivo de avaliá-los quanto a sua capacidade antifúngica, frente a espécies de leveduras do gênero Candida: C. albicans, C. glabrata, C. krusei e C. guilliermondii, patógenos oportunistas de importância clínica que, com o aumento do uso dos agentes antifúngicos, vêm desenvolvendo mecanismos de resistência aos fármacos atualmente disponíveis; o que representa uma extrema dificuldade para o tratamento de infecções causadas por esses microrganismos. Foram utilizadas quatro diferentes metodologias para as esterificações: Esterificação de Fischer, esterificações com haletos de alquila e arila, reação de Mitsunobu e reação de Steglich; os rendimentos dos ésteres obtidos variaram de 12% a 83%. Nos testes antifúngicos foi realizada a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) com a técnica de microdiluição em placa de 96 poços e posterior determinação da concentração fungicida mínima (CFM) em meio de cultura sólido. Com a avaliação da capacidade antifúngica dos ésteres preparados, foi possível observar que todos foram bioativos frente a pelo menos uma das cepas testadas e apresentaram atividade fungicida. Os melhores resultados encontrados foram referentes à cepa de C. guilliermondi 207, na qual, AR1 apresentou atividade inibitória na concentração de 0,039 µmol/mL e AR6 em 0,031 µmol/mL. No tocante as características estruturais dos ésteres que influenciam a bioatividade antifúngica, constatou-se principalmente, a importância das cadeias alquílicas laterais. Também foi observado que a inserção de uma subestrutura terpênica ou de grupos aromáticos, na maioria dos casos, não foram relevantes para a otimização da bioatividade ou contribuiram para a inatividade do éster.

Currently the microbial resistance of fungi and bacteria is considered a major public health problem. The term candidiasis is used for superficial or systemic opportunistic infections caused by different species of the genus Candida. Individuals with HIV, chronic diseases such as cancer, diabetes and transplanted patients, because they are immunocompromised patients, as well as the elderly and newborns are the groups with the greatest predisposition to these infections. Some of the species of this genus have shown resistance to a wide range of antifungal drugs, increasing the severity of these infections and the complexity of their treatment. Esters derived from cinnamic acid have a broad spectrum of pharmacological activities, including antimicrobial activity. It is reported that chlorinated cinnamic esters are potentially bioactive against microorganisms. Thus, the objective of this work was to prepare a collection of structurally related 4-chlorocinnamic acid esters, to evaluate the antimicrobial activity of the same, and to establish a relationship between the structure and biological activity of these compounds. For ester preparation, Fischer esterification reactions, esterification using alkyl and aryl halides, Mitsunobu reaction and Steglich reaction were used. Spectroscopic infrared (IR) and 1H and 13C nuclear magnetic resonance methods, including high resolution mass spectrometry for the unpublished ester, were used in the characterization of the products. All the esters were submitted to antimicrobial tests against strains of Candida albicans, Candida glabrata, Candida krusei, Candida guilliermondii, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus, using the microdilution method in broth, having as antimicrobial control chloramphenicol and nystatin. There were obtained twelve esters derived from 4-chlorocinnamic acid, whose yields ranged from 26.3% - 97.6%, three of which were unpublished. An ester presented antibacterial activity in the highest concentration tested, however, in the antifungal activity all the compounds were bioactive. In the antifungal activity esters that stood out RH-06 and RH-11 presented MIC 0.13 and 0.024 μmol/mL, respectively. These results show that the substituents of short alkyl chains, with presence of heteroatom like oxygen or with terpenic substructure of the perilic type, present better antifungal profile. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Atualmente a resistência microbiana dos fungos e bactérias é considerada um grande problema de saúde pública. O termo candidíase é utilizado para infecções oportunistas superficiais ou sistêmicas causadas por diferentes espécies do gênero Candida. Indivíduos com HIV, doenças crônicas como câncer, diabetes e transplantados, por serem pacientes imunocomprometidos, como também idosos e recém-nascidos são os grupos com maior predisposição a estas infecções. Algumas das espécies deste gênero apresentaram resistência a uma ampla quantidade de fármacos antifúngicos, aumentando a gravidade destas infecções e a complexidade do seu tratamento. Os ésteres derivados do ácido cinâmico possuem um amplo espectro de atividades farmacológicas, dentre elas, a atividade antimicrobiana. É relatado que ésteres cinâmicos clorados são potencialmente bioativos frente a microrganismos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi preparar uma coleção de ésteres derivados do ácido 4-clorocinâmico estruturalmente relacionados, avaliar a atividade antimicrobiana dos mesmos e estabelecer uma relação entre a estrutura e atividade biológica destes compostos. Para a preparação dos ésteres foram utilizadas as reações de esterificação de Fischer, esterificação utilizando haletos de alquila e arila, reação de Mitsunobu e reação de Steglich. Na caracterização dos produtos utilizaram-se métodos espectroscópicos de infravermelho (IV) e ressonância magnética nuclear de 1H e 13C, incluindo a espectrometria de massas de alta resolução para os ésteres inéditos. Todos os ésteres foram submetidos a testes antimicrobianos frente cepas das espécies Candida albicans, Candida glabrata, Candida krusei, Candida guilliermondii, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus, realizados pelo método de microdiluição em caldo, tendo como controle antimicrobiano o cloranfenicol e a nistatina. Obteve-se doze ésteres derivados do ácido 4-clorocinâmico, com rendimentos que variaram de 26,3% - 97,6%, sendo três inéditos. Um éster apresentou atividade antibacteriana na maior concentração testada, no entanto, na atividade antifúngica todos os compostos foram bioativos. Na atividade antifúngica os ésteres que se destacaram RH-06 e RH11 apresentaram CIM 0,13 e 0,024 μmol/mL, respectivamente. Estes resultados mostram que os substituintes de cadeias alquílicas curtas, com presença de heteroátomo como o oxigênio ou com subestrutura terpênica do tipo perílica apresentam melhor perfil antifúngico.

Cancer is one of the leading causes of death worldwide. Currently, 8.2 million people die each year from cancer worldwide (INCA, 2015). Amides derived from ferulic acid have a broad spectrum of pharmacological activities, including antitumor activity. The objective of this work was to evaluate the cytotoxic activity of ten amides derived from ferulic acid in four cell types, HepG2 (human hepatocellular carcinoma), HCT116 (human colon carcinoma), HL-60 (human promyelocytic leukemia) and MRC5 (Human fibroblast of the lung). These amides were prepared by coupling reactions using two types of coupling agents: benzotriazol-1-yloxy-tris- (dimethylamino) -phosphonium hexafluorophosphate (BOP) and dicyclohexylcarbodiimide (DCC) with 4-dimethylaminopyridine (DMAP). In the characterization of the products were used Infrared Spectroscopic Methods, 1H and 13C Nuclear Magnetic Resonance, as well as High Resolution Mass Spectrometry for the unpublished derivatives. All amides were submitted to cytotoxic tests using the blue alamar method, with doxorubicin as a positive control. The ten amides were obtained with yields varying between 43- 91 %, two of which were not published in the literature. Eight amides showed cytotoxic activity; however, two presented cytotoxicity to human fibroblast cells. The amines MA3, MA4, MA6, MA8, MA9 and MA10 were selective for the HL60 cell type (promyelocytic leukocyte cells). MA9 showed the lowest IC50. The results show that compounds with substituents containing two methoxy groups at the meta and para positions of the benzyl ring have an increase in cytotoxic activity, of the benzyl ring have an increase in cytotoxic activity, and selectivity for the HL60 tumor cell type. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq O câncer é uma das principais causas de morte em todo o mundo. Atualmente, 8,2 milhões de pessoas morrem a cada ano por câncer no mundo (INCA, 2015). As amidas derivadas do ácido ferúlico possuem um amplo espectro de atividades farmacológicas, incluindo a atividade antitumoral. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade citotóxica de dez amidas derivadas de ácido ferúlico em quatro tipos de células, HepG2 (carcinoma hepatocelular humano), HCT116 (carcinoma do cólon humano), HL-60 (leucemia promielocítica humana) e MRC5 (Human fibroblasto do pulmão). Estas amidas foram preparadas através de reações de acoplamento utilizando dois tipos de agentes de acoplamento: o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris-(dimetilamino)-fosfónio (BOP) e diciclo-hexilcarbodiimida (DCC) com 4-dimetilaminopiridina (DMAP). Na caracterização dos produtos foram utilizados métodos Espectroscópicos de Infravermelho, Ressonância Magnética Nuclear 1H e 13C, bem como Espectrometria de Massa de Alta Resolução para os derivados inéditos. Todas as amidas foram submetidas a testes citotóxicos pelo método azul alamar, com a doxorrubicina como controle positivo. As dez amidas foram obtidas com rendimentos variando entre 43-91 %, duas das quais não publicadas na literatura. Oito amidas mostraram atividade citotóxica, no entanto, duas apresentaram citotoxicidade para células de fibroblastos humanos. As aminas MA3, MA4, MA6, MA8, MA9 e MA10 foram seletivas para o tipo de células HL60 (células leucocitárias promielocíticas). MA9 mostrou o CI50 mais baixo. Os resultados mostram que compostos com substituintes contendo dois grupos metoxílicos na posições meta e para do anel benzílico têm um aumento na atividade citotóxica, e seletividade para o tipo de célula tumoral HL60.

The present work aimed to prepare a series of esters derived from trans-2-nitrocinnamic acid, through Fischer esterification, nucleophilic substitution with halides and Mitsunobu reaction. All the derivatives were submitted to antimicrobial tests by the microdilution method in broth, and the antimicrobials chloramphenicol and nystatin as positive controls. This study resulted in the obtaining of 14 esters of trans-2-nitrocinnamic acid in yields ranging from 25 to 98%, nine of which were unpublished in the literature, and characterized by infrared spec-troscopic methods, 1H and 13C magnetic resonance, as well as High resolution mass spectrometry. The results of the antimicrobial evaluation showed that ten esters presented antifungal activity against Candida species. While two derivatives were bioactive in the an-tibacterial test. Of these, the EL4, EL6 and EL14 esters were the derivatives that obtained the most promising antifungal minimum inhibitory concentrations with MIC ranging from 128 to 256 μg / mL and considered to be strong activities. Regarding the bacterial activity, EL12 and EL13 derivatives showed activity on the Pseudomonas aeruginosa species with MIC 512 μg / mL. These results demonstrate that the increase of the alkyl chain in the substituent up to a certain size and the presence of hydroxyl, methoxy, or chlorine at the para position of the aromatic ring influence the antifungal activity of the 2-nitrocinnamic esters. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq O presente trabalho teve como objetivo preparar uma série de ésteres derivados do ácido trans-2-nitrocinâmico, através da esterificação de Fischer, substituição nucleofílica com haletos e reação de Mitsunobu. Todos os derivados foram submetidos a testes antimicrobianos pelo método de microdiluição em caldo, tendo como controles positivos os antimicrobianos cloranfenicol e nistatina. O referido estudo resultou na obtenção de 14 ésteres do ácido trans-2-nitrocinâmico com rendimentos variando entre 25 e 98%, sendo nove derivados inéditos na literatura,caracterizados por métodosespectroscópicos de infravermelho, ressonância magnética de 1H e 13C, bem como porespectrometria de massas de alta resolução. O resultado da avaliação antimicrobiana demonstrou que dez ésteres apresentaram atividade antifúngica frente a espécies do gêneroCandida. Enquanto, dois derivados foram bioativos no teste antibacteriano. Destes, os ésteres EL4, EL6 e EL14 foram os derivados que obtiveram concentrações inibitórias mínimas antifúngicas mais promissoras com CIM que variaram entre 128 e 256 μg/mL, sendo consideradas atividades fortes. Com relação à atividade bacteriana, os derivados EL12 e EL13 demostraram atividade sobre a espécie de Pseudomonas aeruginosacom CIM 512μg/mL. Esses resultados demonstram que o aumento da cadeia alquílica no substituinte, até determinado tamanho, e a presença de hidroxila, metoxila ou cloro na posição para do anel aromático influenciam a atividade antifúngica dos ésteres 2-nitrocinâmicos.

The present dissertation show the results obtained from the study of a collection of structurally related caffeic acid derived and their antimicrobial evaluation. Increased microbial resistance to drugs, causing thousands of deaths per year, mainly in immunocompromised individuals, motivated the development of the present study. Esters derived from caffeic acid have a large spectrum of pharmacological activities, including antimicrobial activity. Therefore, the objective of this work was to evaluate the antimicrobial activity of sixteen esters derived from coffeic acid on different species of Staphylococcus, Eschericia and Candida. Alkyl and aryl esters derived from caffeic acid were prepared by Fischer esterification, reaction with alkyl and aryl halides, and Mitsunobu reaction. In the characterization of the products were used infrared spectroscopic methods, 1H and 13C nuclear magnetic resonance, as well as high resolution mass spectrometry for the inedited derivatives. All the esters were submitted to antimicrobial tests by broth microdilution, with chloramphenyl and nystatin as antimicrobial control. 16 esters of caffeic acid were obtained in yields varying from 11.82-93.06%, 6 were inedited in the literature. Six esters presented antifungal activity, while all compounds were bioactive in the test of antibacterial activity. Thus, esters ME7 and ME13 demonstrated the best antifungal activities (128 and 256 μg / mL, respectively). While in the antibacterial tests, the results were more sensitive to the Gram negative strain (50 to 400 μg / mL), with better results for the alkyl esters ME3, ME6 and ME7, and for the aryl ME10, ME13, ME14 and ME16. These results show that middle chain alkyl substituents and certain aryl groups potentiate antimicrobial activity. A presente dissertação apresenta os resultados obtidos do estudo de uma coleção de derivados do ácido caféico estruturalmente relacionados e sua avaliação antimicrobiana. O aumento da resistência microbiana aos fármacos, causando milhares de mortes por ano, principalmente em indivíduos imunocomprometidos, motivou o desenvolvimento do presente estudo. Os ésteres derivados do ácido caféico possuem um amplo espectro de atividades farmacológicas, dentre elas, a atividade antimicrobiana. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de dezesseis ésteres derivados do ácido caféico sobre diferentes espécies de Staphylococus, Eschericia e Candida. Os ésteres alquílicos e arílicos derivados do ácido caféico foram preparados através da esterificação de Fischer, reação com haletos de alquila e arila, e reação de Mitsunobu. Na caracterização dos produtos utilizou-se métodos espectroscópicos de infravermelho, ressonância magnética nuclear de 1H e 13C, bem como espectrometria de massas de alta resolução para os derivados inéditos. Todos os ésteres foram submetidos a testes antimicrobianos pelo método microdiluição em caldo, tendo como controle antimicrobiano o cloranfenil e a nistatina. Obteve-se 16 ésteres do ácido caféico, com rendimentos variando entre 11,82-93,06%, sendo 6 derivados inéditos na literatura. Seis ésteres apresentaram atividade antifúngica, enquanto todos os compostos foram bioativos no teste da atividade antibacteriana. Assim, os ésteres ME7 e ME13 demonstraram as melhores atividades antifúngicas (128 e 256 μg/mL, respectivamente). Enquanto nos testes antibacterianos, os resultados foram mais sensíveis frente à cepa Gram negativa (50 a 400 μg/mL), com melhores resultados para os ésteres alquílicos ME3, ME6 e ME7, e para os arílicos ME10, ME13, ME14 e ME16. Esses resultados mostram que substituintes alquílicos de cadeia mediana e determinados grupos arílicos potencializam a atividade antimicrobiana.

This study aimed to prepare a collection of benzylamides to-halogenated derivatives of structurally related benzoic and cinnamic acids by coupling reactions with 4- (chlorine, bromine and fluro) benzylamines using the Benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate (BOP) as coupling agent. All compounds prepared were subjected to antimicrobial testing the method broth microdilution, with the antimicrobial control gentamicin, amikacin, norfloxacin, penicillin and nystatin. Also, a study was conducted of quantitative structure-activity relationship (QSAR) using computational software like KNIME v. 3.1.0 and Volsurf v. 1.0.7. The study achieved the preparation of amides 22 and 10 derived ethers and esters of vanillic acid amide, with yields ranging from 29-89%, including 30 novel compounds in the literature and identified by spectroscopic methods such as Infrared and 1H and 13C Magnetic Resonance (NMR) as well as by high resolution mass spectrometry. The antimicrobial evaluation showed that eleven amides showed antifungal activity, an amide presented an antibacterial activity and no amide derivative of vanillic acid showed antimicrobial activity. The QSAR study showed that molecular descriptors related to hydrophobicity, hydrophilicity, pH change, energy interaction and energy difference as DRDRDR, DRDRAC, L4LgS, IW4 and DD2, respectively, influence the antifungal activity of haloamides. It follows that the NR14 amides (Gallic amide) and NR15 (vanillic amide) had considerable Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) in antifungal essays, and NR4 (4-methoxycinnamic amide) in the antibacterial test, considered the most active antimicrobial. This result shows that spacer groups as double bond of cinnamic derivatives and addition of hydroxyls in the position para and methoxyl in the meta position on the aromatic ring of the amide enhance the antifungal activity. O presente trabalho teve como finalidade preparar uma coleção de benzilamidas para-halogenadas derivadas de ácidos cinâmicos e benzoicos estruturalmente relacionadas através de reações de acoplamento com 4-(cloro, fluro e bromo) benzilaminas, utilizando o benzotriazol-1-iloxi-tris-(dimetilamino)-fosfônio (BOP) como agente de acoplamento. Além disso, foram preparados derivados éteres e ésteres da amida do ácido vanílico. Todos os compostos preparados foram submetidos a testes antimicrobianos pelo método microdiluição em caldo, tendo como controle antimicrobiano a gentamicina, a amicacina, o norfloxacino, a penicilina e a nistatina. Também, foi realizado um estudo de relação estrutura-atividade quantitativo (QSAR) utilizando softwares computacionais como o KNIME v. 3.1.0 e Volsurf v. 1.0.7. O estudo realizado resultou na obtenção de 22 amidas e 10 derivados éteres e ésteres da amida do ácido vanílico, com os rendimentos variando entre 29-89%, sendo 30 compostos inéditos na literatura e identificados por métodos espectroscópicos de infravermelho e ressonância magnética de 1H e 13C bem como por espectrometria de massas de alta resolução. A avaliação antimicrobiana demonstrou que onze amidas apresentaram atividade antifúngica, apenas uma apresentou atividade antibacteriana e nenhum derivado da amida do ácido vanílico apresentou atividade antimicrobiana. O estudo QSAR demonstrou que descritores moleculares relacionados à hidrofobicidade, hidrofilia, variação de pH, momentos de interação de energia e diferença de energia como DRDRDR, DRDRAC, L4LgS, IW4 e DD2, respectivamente, influenciam na atividade antifúngica das haloamidas. Conclui-se que as amidas NR14 (amida gálica) e NR15 (amida vanílica) apresentam concentrações inibitórias mínimas antifúngicas consideráveis (CIM), assim como NR4 (amida 4-metoxicinâmica) no ensaio antibacteriano. Esse resultado demonstra que grupos espaçadores como a dupla ligação dos derivados cinâmicos e adição de hidroxilas na posição para e metoxila na posição meta no anel aromático da amida potencializam a atividade antifúngica.

Cancer is a disease of high incidence, high mortality and difficult to treat, and there is therefore a constant social interest in the search for more effective therapies. In this sense, essential oils and their constituents are promising source of natural products as antitumor substances. Thus, the aim of this study was to evaluate the cytotoxic activity of 19 p-menthane derivatives structurally correlated with perillyl alcohol against three strains of human tumor cells: ovarian adenocarcinoma (OVCAR-8), colon carcinoma (HCT-116) and glioblastoma (SF-295) using the colorimetric MTT assay. The tests were performed in triplicate in a single concentration of 25 μg/ml. The results demonstrated that all substances tested were less cytotoxic than the perillyl alcohol, with the exception of 1,2-perillaldehyde epoxide (EP-1) and 8,9-periallaldehyde epoxide (EP-2) (IG = 95.66 to 99.89%) and IC50 ranging from 2.68 to 3.92 and 1.03 to 1.75 mg/ml, respectively. The perillyl benzoate was the least cytotoxic substance, with a value (GI = 2.86 to 5.02%). The monoterpenes (+)-limonene epoxide, (-)-hydroxy-carvone (-HC) and perillaldehyde had intermediate cytotoxic activity, with (IG = 58.40 to 94.01%). Given these results, the structural characteristics that can contribute to understand the cytotoxicity of perillyl alcohol and its analogs were identified. In general, substitution of C-C double bonds per epoxide groups added to the aldehyde group increased cytotoxicity. The presence and location of ketone and epoxide groups in p-menthane skeleton influence the cytotoxic activity. The addition of hydroxyl groups in the chemical structure resulted in less cytotoxic compounds, as was the case of the cis-carveol and sobrerol. As well, acetylation of such groups led to an overall decrease in cytotoxicity, indicating that lipophilicity plays a major role in the decrease of cytotoxic activity. In addition, the enantioselectivity to perform an important role in the cytotoxicity of natural compounds, as observed for (-)- and (+)-hydroxy-carvone. These results demonstrate that different functional groups and their positions in p-menthane skeleton influence the cytotoxic activity. Next was evaluated the in vivo antitumor activity of the compounds EP-1, EP-2 and (-HC) in Sarcoma 180-bearing mice (S180). In this test, the administration of EP-1 and EP-2 (100 or 200 mg/kg/day) inhibited the development in S180-inoculated mice. The inhibition was 33.4 and 56.4% for EP-1 and 38.4 and 58.7% for EP-2 at both doses, respectively. Already (-HC) (50 or 100 mg/kg/day) showed no antitumor activity in vivo. There were no changes in biochemical parameters in animals treated with EP-1 and EP-2. In relation to hematological analysis, these compounds showed a reduction in the number of total leukocytes and alterations in the differential count, a result expected as due to S180 tumor. The mechanism of action of EP-1 and EP-2 were then studied. None of the compounds tested induced hemolysis. The viability of HL-60 cells was affected by both monoterpenes after an exposure period of 24h, when analyzed by trypan blue exclusion. Both EP-1 and EP-2 reduced the number of viable cells associated with an increase in the number of non-viable cells, which contributes to the increased number of dead cells in the morphological analysis. The incorporation of ethidium bromide/acridine orange, the treated cells, cytotoxicity suggests apoptosis and necrosis pathway. Therefore, front of results, can conclude that EP-2 was more potent in vitro compared to EP-1, however, both substances showed cytotoxic activity through apoptotic and necrotic processes. These data suggest that EP-1 and EP-2 present a potential and promising anticancer potential and moreover, appropriate structural modifications are possible to develop novel anticancer agents. O câncer é uma doença de grande incidência, alta mortalidade e de difícil tratamento, havendo, portanto, um constante interesse social na procura por terapias mais eficientes. Nesse sentido, os óleos essenciais e seus constituintes químicos têm se mostrado como potenciais agentes bioativos antitumorais. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade citotóxica de 19 derivados p-mentânicos estruturalmente relacionadas ao álcool perílico frente a 3 linhagens de células tumorais humanas: adenocarcinoma ovariano (OVCAR-8), carcinoma de cólon (HCT-116) e glioblastoma (SF-295) através do ensaio colorimétrico de MTT. Essas substâncias foram avaliadas de acordo com o grau de inibição da proliferação celular (GI%), visando identificar as substâncias mais citotóxicas e as características moleculares que contribuem para a atividade in vitro. Os testes foram realizados em triplicata com concentração única de 25 μg/mL. Os resultados demostraram que todas as substâncias testadas foram menos citotóxicas do que o álcool perílico, com exceção do 1,2-epóxi-perialdeído (EP-1) e 8,9-epóxi-perialdeído (EP-2) (GI = 95,66 a 99,89%), com CI50 variando entre 2,68 a 3,92 e 1,03 a 1,75 μg/mL, respectivamente. O benzoato de perila foi a substância menos citotóxica, com um valor de (GI = 2,86 a 5,02%). As substâncias (+)-1,2-epóxi-limoneno, (-)-hidróxi-carvona (-HC) e perialdeído apresentaram atividade citotóxica intermediária, com (GI = 58,40 a 94,01%). Diante desses resultados, as características estruturais que podem contribuir para compreender a atividade citotóxica do álcool perílico e seus análogos foram identificadas. Em geral, a substituição de duplas ligações C-C por grupos epóxido somado ao grupo aldeído aumentou a citotoxicidade. A presença e a posição dos grupos cetona e epóxido no esqueleto p-mentano influenciaram na atividade citotóxica. A adição de grupos hidroxila na estrutura química resultou em substâncias menos citotóxicas, como foi o caso do cis-carveol e sobrerol. Como também, a acetilação de tais grupos conduziu a uma diminuição global da citotoxicidade, indicando que a lipofilicidade desempenha um papel importante na diminuição da atividade citotóxica. Além disso, a enantiosseletividade pode desempenhar um papel importante na citotoxicidade de substâncias naturais, como observado para a (-)- e (+)-hidróxi-carvona. Esses resultados demonstram que os diferentes grupos funcionais e as suas posições no esqueleto p-mentano influenciam na atividade citotóxica. Em seguida, foi avaliada a atividade antitumoral in vivo das substâncias com maior citotoxicidade e sem estudos prévios descritos na literatura, EP-1, EP-2 e (-HC) utilizando camundongos transplantados com Sarcoma 180 (S180). Neste ensaio, a administração de EP-1 ou EP-2 (100 ou 200 mg/kg/dia) inibiu o desenvolvimento de tumor sólido em camundongos transplantados com S180. A inibição foi de 33,4 e 56,4% para EP-1 e 38,4 e 58,7% para EP-2 em ambas as doses, respectivamente. Já a (-HC) não apresentou atividade antitumoral in vivo em nenhuma das doses testadas. Não houve alterações nos parâmetros bioquímicos em animais tratados com EP-1 e EP-2. Em relação às análises hematológicas, essas substâncias demonstraram redução no número de leucócitos totais e alterações na contagem diferencial. O mecanismo de ação de EP-1 e EP-2 foram, então, estudados. Nenhuma das substâncias testadas induziu hemólise. A viabilidade de células HL-60 foi afetada por ambas as substâncias após um período de exposição de 24h, quando analisada por exclusão por azul de tripan. Tanto EP-1 quanto EP-2 reduziram o número de células viáveis associado com um aumento no número de células não viáveis, o que colabora com o aumento do número de células mortas na análise morfológica. A incorporação do brometo de etídio/laranja de acridina, nas células tratadas, sugere citotoxicidade via apoptose e necrose. Logo, diante dos resultados, podemos concluir que EP-2 foi mais potente in vitro comparado a EP-1, entretanto, ambas as substâncias apresentaram atividade citotóxica através dos processos apoptótico e necrótico. Esses dados sugerem que EP-1 e EP-2 apresentam um potencial anticâncer promissor e além disso, modificações estruturais adequadas são possíveis para o desenvolvimento de novos agentes antitumorais São Cristóvão, SE

Erythrina plant species, botanical family Fabaceae, are the main source for the tetracyclic erythrina-type alkaloids, and other chemical classes such as flavonoids. The Erythrina velutina Willd specie is popularly known as "Mulungu" and used by the population of the northeastern region of Brazil for its sudorific, soothing, emollient, pectoral, and local anesthetic properties. The objective of this study was to isolate and identify the constituents present in the leaves methanol extract of Erythrina velutina, and to investigate the antimicrobial activity of the crude extract and organic phases as well as contribute to the chemotaxonomy of the genus Erythrina. The leaves were collected in the city of Simão Dias, Sergipe, Brazil. The phytochemical screening performed with the crude methanol extract showed the presence of the following secondary metabolites: alkaloids, tannins, and flavonoids. The crude methanol extract was obtained by maceration and fractionated into hexane, ethyl acetate and n-butanol phase. From the crude methanol extract was extracted alkaloids that resulted on basic chloroform and nbutanol phase. Nicotinic acid was isolated from basic n-butanol phase. The structure identification involved analysis of spectral data of NMR of 1H and 13C and comparison with literature data. The behavior pharmacological screening showed that administration of the organic phases and crude extract promoted discrete behavioral changes at the level of central nervous system, suggesting that the extract of Erythrina velutina contains psychoactive compounds. In addition, antimicrobial screening showed that the crude methanol extract and hexane fraction present a weak inhibition or in part without inhibition zone defined for the fungus Trichophyton rubrum T544. O gênero Erythrina, família Fabaceae, é muito conhecido pela presença de alcalóides tetracíclicos tipo eritrina e outras classes químicas como flavonóides. A espécie Erythrina velutina Willd, conhecida popularmente como Mulungu , é utilizada pela população do nordeste brasileiro por suas propriedades sudoríficas, calmante, emoliente, peitoral e anestésica local. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar os constituintes químicos presentes no extrato metanólico das folhas de Erythrina velutina, bem como investigar a atividade farmacológica e antimicrobiana do extrato bruto e das fases orgânicas, além de contribuir com a quimiotaxonomia do gênero Erythrina. As folhas foram coletadas no município de Simão Dias, Sergipe, Brasil. O extrato metanólico bruto, obtido por maceração, foi submetido a prospecção fitoquímica que indicou a presença dos seguintes metabólitos secundários: alcalóides, taninos e flavonóides. O particionamento deste extrato foi realizado com hexano, acetato de etila e n-butanol. A partir do extrato metanólico bruto foi feita uma marcha para alcalóide obtendo as fases clorofórmica e n-butanólica básica. Da fase n-butanólica básica isolou-se o ácido nicotínico. A identificação estrutural do composto foi realizada a partir dos dados espectrais de RMN de 1H e 13C e em comparação com dados da literatura. Na realização da triagem farmacológica comportamental, foi observado que administrações das fases orgânicas e do extrato bruto promoveram discretas alterações comportamentais ao nível de sistema nervoso central, sugerindo que o extrato de Erythrina velutina contém substâncias psicoativas. O extrato metanólico bruto e a fração hexânica promoveram uma inibição de crescimento fraco ou parcial, sem halo de inibição definido, para o fungo Trichophyton rubrum T544.