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p. 1-11 Submitted by Santiago Fabio (fabio.ssantiago@hotmail.com) on 2013-11-26T20:07:11Z No. of bitstreams: 1 333333.pdf: 1604899 bytes, checksum: a78c2e529c64a3400dcb92cae6906a2a (MD5) Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2013-12-16T14:10:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 333333.pdf: 1604899 bytes, checksum: a78c2e529c64a3400dcb92cae6906a2a (MD5) Made available in DSpace on 2013-12-16T14:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333333.pdf: 1604899 bytes, checksum: a78c2e529c64a3400dcb92cae6906a2a (MD5) Previous issue date: 2013 Background: Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease caused by Leishmania infantum, transmitted by the bite of Lutzomyia longipalpis sand flies. Dogs are the main domestic reservoir of the parasite. The establishment of an experimental model that partially reproduces natural infection in dogs is very important to test vaccine candidates, mainly regarding those that use salivary proteins from the vector and new therapeutical approaches. Methodology/Principal Findings: In this report, we describe an experimental infection in dogs, using intradermal injection of Leishmania infantum plus salivary gland homogenate (SGH) of Lutzomyia longipalpis. Thirty-five dogs were infected with 16107 parasites combined with five pairs of Lutzomyia longipalpis salivary glands and followed for 450 days after infection and clinical, immunological and parasitological parameters were evaluated. Two hundred and ten days after infection we observed that 31,4% of dogs did not display detectable levels of anti-Leishmania antibodies but all presented different numbers of parasites in the lymph nodes. Animals with a positive xenodiagnosis had at least 3,356105 parasites in their lymph nodes. An increase of IFN-c and IL-10 levels was detected during infection. Twenty two percent of dogs developed symptoms of CVL during infection. Conclusion: The infection model described here shows some degree of similarity when compared with naturally infected dogs opening new perspectives for the study of CVL using an experimental model that employs the combination of parasites and sand fly saliva both present during natural transmission. Salvador

p. 1-11 Submitted by Santiago Fabio (fabio.ssantiago@hotmail.com) on 2013-11-26T20:07:11Z No. of bitstreams: 1 333333.pdf: 1604899 bytes, checksum: a78c2e529c64a3400dcb92cae6906a2a (MD5) Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2013-12-16T14:10:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 333333.pdf: 1604899 bytes, checksum: a78c2e529c64a3400dcb92cae6906a2a (MD5) Made available in DSpace on 2013-12-16T14:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333333.pdf: 1604899 bytes, checksum: a78c2e529c64a3400dcb92cae6906a2a (MD5) Previous issue date: 2013 Background: Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease caused by Leishmania infantum, transmitted by the bite of Lutzomyia longipalpis sand flies. Dogs are the main domestic reservoir of the parasite. The establishment of an experimental model that partially reproduces natural infection in dogs is very important to test vaccine candidates, mainly regarding those that use salivary proteins from the vector and new therapeutical approaches. Methodology/Principal Findings: In this report, we describe an experimental infection in dogs, using intradermal injection of Leishmania infantum plus salivary gland homogenate (SGH) of Lutzomyia longipalpis. Thirty-five dogs were infected with 16107 parasites combined with five pairs of Lutzomyia longipalpis salivary glands and followed for 450 days after infection and clinical, immunological and parasitological parameters were evaluated. Two hundred and ten days after infection we observed that 31,4% of dogs did not display detectable levels of anti-Leishmania antibodies but all presented different numbers of parasites in the lymph nodes. Animals with a positive xenodiagnosis had at least 3,356105 parasites in their lymph nodes. An increase of IFN-c and IL-10 levels was detected during infection. Twenty two percent of dogs developed symptoms of CVL during infection. Conclusion: The infection model described here shows some degree of similarity when compared with naturally infected dogs opening new perspectives for the study of CVL using an experimental model that employs the combination of parasites and sand fly saliva both present during natural transmission. Salvador

Submitted by Daniella Santos (daniella.santos@ufma.br) on 2022-12-19T21:18:12Z No. of bitstreams: 1 JeffersonBrito.pdf: 269898 bytes, checksum: 4d30a195473c5d8d743ac72f92b600a5 (MD5) Made available in DSpace on 2022-12-19T21:18:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JeffersonBrito.pdf: 269898 bytes, checksum: 4d30a195473c5d8d743ac72f92b600a5 (MD5) Previous issue date: 2022-03-17 FAPEMA CAPES Leishmaniasis are neglected diseases transmitted to animals and humans by the bite of an infected female sand fly. Leishmania parasites (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) are the causative agents of leishmaniasis inoculated with sandfly salivainto the host skin. Saliva contains pharmacologically active compounds with antihemostatic, anti- inflammatory and immunomodulatory properties. In mammals, the chemotactic response elicits an intense inflammatory cell infiltrate containing mainly neutrophils, eosinophils, and macrophages. Macrophages are leukocytic cells specialized in tissue remodeling and in the immune response to pathogens, like Leishmania parasites. These cells may respond to infection in a resistant manner, destroying the internalized parasites or providing an ideal microenvironment for pathogen proliferation, relying on the macrophage phenotypes. Some mechanisms of the immunological response of macrophages may be prevented by the insect vector saliva, such as the inhibition of NO production by the decrease of iNOS expression and the antigen presentation by macrophages to T CD4+ lymphocytes since it inhibits the antigen-presenting capacity of macrophages through class II MHC pathway. Based on the premise that vector saliva modulates the macrophage immune response, the goal of this study was to evaluate the macrophage immune response, polarized or not, stimulated with Nyssomyia whitmani saliva during Leishmania amazonensis infection. It was observed that vector saliva induces intense proliferation of promastigotes during the first 24 hours after contact, which can lead to a rapid expansion of the parasite. The earlier contact between macrophage and saliva increases the parasite burden differently from what occurs in the following exposure to infection, and the cytokine production, which leads to macrophage modulation, and metabolite production, e.g., hydrogen peroxide and NO, both known as leishmanicidal agents. As for the polarized macrophages, saliva inhibits NO production in M1 macrophages and affects the expression of some surface receptors and intracellular enzymes, showing a modulation to an anti-inflammatory phenotype, even in preactivated macrophages. Saliva also induces an increase in stimulated macrophage viability, even in the presence of Leishmania. The increase in cell survival can enable leishmaniasis development and the extension of the internalized parasite expansion. From the presents results, it can be seen the great relevance of vectors in the establishment of Leishmania in macrophages. As leishmanioses são um grupo de doenças negligenciadas, que são transmitidas aos animais e ao homem durante o repasto sanguíneo realizado por uma fêmea de flebotomíneo infectada. O gênero Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) constitui o agente etiológico das leishmanioses que é inoculado juntamente com a saliva do inseto na derme do hospedeiro. A saliva contém moléculas farmacologicamente ativas que possuem propriedades anti-hemostática, anti-inflamatória e imunomoduladora. A resposta quimiotática no mamífero, causa um infiltrado inflamatório intenso composto principalmente por neutrófilos, eosinófilos e macrófagos. O macrófago é uma célula leucocitária especializada na remodelação tecidual e na resposta imune a patógenos, como o protozoário Leishmania. Podem ser modulados para o perfil M1 e destruir o parasito internalizado ou para o perfil M2 fornecer um microambiente favorável para a proliferação do patógeno. Baseado na premissa de que a saliva dos vetores das leishmanioses modula o macrófago, foi avaliado o papel da saliva de Nyssomyia whitmani na modulação de macrófagos infectados por Leishmania amazonensis. Primeiramente, foi realizado uma revisão narrativa sobre a atividade imunomoduladora da saliva das diferentes espécies dos vetores das leishmanioses em macrófagos sem infecção ou infectados por Leishmania spp. No segundo capítulo, foi avaliado a influência da saliva de N. whitmani na modulação de macrófagos estimulados em diferentes momentos na infecção por L. amazonensis. E como terceiro capítulo, foi investigado influência da saliva de N. whitmani em macrófagos polarizados para M1 e M2 na infecção por L. amazonensis. Os resultados obtidos demonstraram que alguns mecanismos da resposta imunológica dos macrófagos podem ser bloqueados pela saliva dos vetores em geral, como a inibição da produção de Óxido Nítrico (NO) através da diminuição da expressão da enzima Óxido Nítrico Sintase induzível (iNOS) e a apresentação de antígenos pelos macrófagos aos linfócitos T auxiliares (CD4+ ), visto que inibe a apresentação de antígenos pelo Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC) de classe II, quando estimulados concomintamente a infecção. Foi observado que a saliva de N. whitmani induz a proliferação exacerbada da promastigota de L. amazonensis nas primeiras 24 horas de contato, o que pode acarretar em uma rápida expansão do parasito. Os momentos de estímulo antes, durante e pós à infecção por L. amazonensis podem influenciar na resposta imune dos macrófagos, como a produção de citocinas inflamatórias, o que acarreta na modulação dos macrófagos e na produção de NO. Quanto aos macrófagos polarizados, a saliva é capaz de inibir a produção de NO em macrófagos com o perfil M1 e altera alguns receptores de superfície e enzimas intracelulares, o que evidencia a modulação de macrófagos previamente ativados. A saliva também induz o aumento da viabilidade dos macrófagos, mesmo na presença do parasito, o aumento da sobrevida da célula pode possibilitar o desenvolvimento da leishmaniose e prolongar a expansão do parasito internalizado. Logo, é evidente a grande relevância da saliva do vetor no estabelecimento do parasito Leishmania em macrófagos.

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2022-08-19T13:16:41Z No. of bitstreams: 1 Josivan Regisvec.pdf: 982083 bytes, checksum: b6c842d75c1e3b4e3f12bf3cb7b83678 (MD5) Made available in DSpace on 2022-08-19T13:16:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Josivan Regisvec.pdf: 982083 bytes, checksum: b6c842d75c1e3b4e3f12bf3cb7b83678 (MD5) Previous issue date: 2022-03-03 FAPEMA Yeasts of the genus Candida are among the fungal species of greatest interest in human health, because in addition to being commensal microorganisms, they are also the microorganisms most frequently isolated in different sites of fungal infection, being classified as opportunistic. The various challenges in therapy motivate the search for new biomolecules with anti-Candida activity. Thus, given the alternatives used by the population, natural products are highlighted, especially those from medicinal plants, with Ximenia americana as a species of interest in the treatment of different diseases. The present study investigated the presence of chemical constituents and the anti-C'andida albicans, C. krusei and C. parapsilosis effect of the stem bark extract of American X. (EEXA), focusing on the action on some virulence factors. The study also aimed to evaluate the acute toxicity of the extract and its action on lethal infection by C. albicans in Tenebrio molitor larvae. Chemical analysis was performed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC-DAD) and Liquid Chromatography Coupled with Mass Spectrometry (LC-ESI-IT/MS). The anti-Candida activity was evaluated by agar diffusion, determination of minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (CFM) and inhibition of virulence factors, such as adhesion, biofilm and production of phospholipase and proteinase exoenzymes. The toxicity of the extract was evaluated in vivo on T. molitor larvae. Larvae were also used to evaluate the effects of EEXA on survival after lethal C. albicans infection. In the EEXA, flavonoids, phenolic compounds, were identified, and catechin derivatives were found more frequently. Regarding the anti-Candida activity, EEXA showed variable inhibition zones according to the standard and clinical strains of C. albicans (3.0+3.0 and 15.7+0.57 mm), C. krusei (5 .0+1.7 and 11.3+0.6 mm) and C. parapsilosis (4.7+1.5 and 11.7+0.6 mm). EEXA inhibited the growth of all fungal species tested with variable MIC/CFM values, indicating fungicidal action for the extract. Treatment with EEXA inhibited the adhesion of C. albicans and C. parapsilosis and the biofilm of all tested species. However, it was only effective in inhibiting the production of phospholipase and proteinase exoenzymes in some samples when used in the highest concentrations, most of the time. In in vivo assays, EEXA showed low toxicity to T. molitor larvae with an LD50 of 50 mg/Kg. The extract treatment increased the survival of animals lethally infected with C. albicans. We conclude that EEXA has a fungicidal action against C. albicans, C. krusei and C. parapsilosis, due to its direct action on fungi and the inhibition of virulence factors, which may also explain its action in increasing the survival of lethally infected larvae. with C. albicans. We infer that the anti-Candida spp. observed is related to the presence of catechins and their derivatives, considering the biological properties of these compounds. As leveduras do gênero Candida estão entre as espécies fúngicas de maior interesse na saúde humana, pois além de serem microrganismos comensais são também os microrganismos mais frequentemente isolados em diferentes sítios de infecção por fungos, sendo classificados como oportunistas. Os diversos desafios na terapêutica motivam a busca de novas biomoléculas com atividade anti-Candida. Assim, diante das alternativas utilizadas pela população, os produtos naturais ganham destaque, principalmente os provenientes de plantas medicinais, tendo Ximenia americana como uma espécie de interesse no tratamento de diferentes enfermidades. O presente estudo investigou a presença de constituintes químicos e o efeito anti-C'andida albicans, C. krusei e C. parapsilosis do extrato das cascas do caule de X. americana (EEXA), com enfoque na ação sobre alguns fatores de virulência. Também foi objetivo do estudo avaliar a toxicidade aguda do extrato e sua ação na infecção letal por C. albicans em larvas de Tenebrio molitor. A análise química foi realizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE-DAD) e Cromatografia Líquida Acoplada à Espectrometria de Massas (LC-ESI-IT/MS). A atividade anti-Candida foi avaliada por difusão em ágar, determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM) e inibição dos fatores de virulência, tais como: adesão, biofilme e produção das exoenzimas fosfolipase e proteinase. A toxicidade do extrato foi avaliada in vivo em larvas de T. molitor. As larvas foram também utilizadas para avaliar os efeitos do EEXA na sobrevida após a infecção letal por C. albicans. No EEXA foram identificados flavonóides, compostos fenólicos, sendo que os derivados de catequina foram encontrados com maior frequência. Em relação à atividade anti-Candida o EEXA apresentou zonas de inibição variáveis de acordo com as linhagens padrão e clínicas de C. albicans (3,0+3,0 e 15,7+0,57 mm), C. krusei (5,0+1,7 e 11,3+0,6 mm) e C. parapsilosis (4,7+1,5 e 11,7+0,6 mm). O EEXA inibiu o crescimento de todas as espécies fúngicas testatados com valores CIM/CFM variáveis, indicando ação fungicida para o extrato. O tratamento com EEXA inibiu a adesão de C. albicans e C. parapsilosis e o biofilme de todas as espécies testadas. Entretanto, só foi efetivo em inibir a produção das exoenzimas fosfolipase e proteinase de algumas amostras quando utilizado nas maiores concentrações, na maioria das vezes. Nos ensaios in vivo, o EEXA apresentou baixa toxicidade para as larvas de T. molitor com DL50 de 50 mg/Kg. O tratamento com extrato aumentou a sobrevida dos animais infectados letalmente com C. albicans. Concluímos que o EEXA apresenta ação fungicida para C. albicans, C. krusei e C. parapsilosis, devido sua ação direta sobre os fungos e pela inibição de fatores de virulência, o que também pode explicar sua ação no aumento da sobrevida de larvas infectadas letalmente com C. albicans. Inferimos que a atividade anti-Candida spp. observada está relacionada à presença de catequinas e seus derivados, considerando as propriedades biológicas desses compostos.

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2022-06-28T17:36:18Z No. of bitstreams: 1 KarinaCristina.pdf: 2475915 bytes, checksum: 456a5794d87e6e5c429e9332fff29b10 (MD5) Made available in DSpace on 2022-06-28T17:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KarinaCristina.pdf: 2475915 bytes, checksum: 456a5794d87e6e5c429e9332fff29b10 (MD5) Previous issue date: 2021-12-16 FAPEMA In Brazil, the main drugs adopted for the treatment of visceral leishmaniasis are pentavalent antimony (Glucantime®) and the antifungal Amphotericin B (AmB), both with high toxicity and occurrences of therapeutic failures reported worldwide, which is a complex and multifactorial phenomenon, related with the host-parasite interaction, as well as the response of the parasite to drugs, measured by their sensitivity to drugs. Considering the scarcity of drugs and even phenomena such as drug resistance, identifying new natural compounds with antileishmanial action has been the focus of much research. In this sense, cyanobacteria are photosynthetic organisms, responsible for the production of bioactive compounds with antiparasitic activity. Thus, the present study aimed to test the antileishmanial activity of the cyanobacteria extract Nostoc sp. and to evaluate drug sensitivity in clinical isolates of Leishmania (L.) infantum obtained from patients with VL in the state of Maranhão. To verify the sensitivity of the promastigote forms, the isolates were submitted to cell viability test, using MTT, against trivalent Antimony and Amphotericin B, verifying an EC50 variation from 66.2 ± 9.8 to 155 ± 3.6 μM and 118.9 ± 14.7 nM to 243.5 ± 21.3 nM, respectively. In the intracellular amastigote forms in peritoneal macrophages, evaluated by direct counting, the EC50 values for pentavalent antimony and amphotericin B ranged from 16.1 to 39.3 μM and 0.09 to 0.18 μM, respectively. Furthermore, both in the intracellular promastigote and amastigote forms, a greater tolerance of clinical isolates to antimony was observed, in the tri- or pentavalent forms. In parallel, when evaluating the antileishmanial activity of promastigotes of the reference strain of L. (L.) infantum against the crude extract of cyanobacteria of the genus Nostoc sp. GBBB01, by direct counting, there was a statistically significant difference in concentrations from 500 to 31.25ug/mL in relation to the untreated control, however when the analysis was performed by flow cytometry, these differences were not found. In the intracellular amastigote forms, the crude extract of cyanobacteria of the genus Nostoc sp showed antileishmanial activity, being possible to calculate the IC50, only for one of the clinical isolates (MHOM/BR/2018/ASFF- MA) evaluated. Furthermore, the crude cyanobacteria extract also did not induce cytotoxic effect on peritoneal macrophages under the conditions tested. Thus, it can be stated that there is an intraspecific variability in the sensitivity to traditional drugs (Antimonium and Amphotericin B) in clinical isolates from this highly endemic area for VL, and that the crude extract of cyanobacteria of the genus Nostoc sp. GBBB01 presented antileishmanial activity, which needs to be better explored due to the divergence of results between analysis techniques, the need for new tests, considering that even for the cyanobacteria extract there is variation in this activity depending on the strain of L. infantum evaluated. No Brasil, os principais fármacos adotados para o tratamento de leishmaniose visceral são o Antimônio pentavalente (Glucantime®) e ao antifúngico Anfotericina B (AmB), ambos com elevada toxicidade e ocorrências de falhas terapêuticas relatadas mundialmente, que é fenômeno complexo e multifatorial, relacionado com a interação hospedeiro-parasito, bem como a resposta do parasito às drogas, medida pela sensibilidade dos mesmos aos fármacos. Considerando a escassez de fármacos e ainda fenômenos como a resistência medicamentosa, identificar novos compostos naturais com ação antileishmanial tem sido foco de muitas pesquisas. Nesse sentido, as cianobactérias são organismos fotossintetizantes, responsáveis pela produção de compostos bioativos com atividade antiparasitária. Desse modo, o presente estudo, teve como objetivo testar a atividade antileishmanial do extrato de cianobactéria Nostoc sp. e avaliar a sensibilidade à fármacos em isolados clínicos de Leishmania (L.) infantum obtidos de pacientes com LV do estado Maranhão. Para verificar a sensibilidade das formas promastigotas, os isolados foram submetidos a teste de viabilidade celular, utilizando MTT, frente ao Antimônio trivalente e Anfotericina B, verificando uma variação de EC50 de 66.2 ± 9.8 a 155 ± 3.6 μM e 118.9 ± 14.7 nM a 243.5 ± 21.3 nM, respectivamente. Nas formas amastigotas intracelulares em macrófagos peritoneais, avaliadas por contagem direta, os valores de o EC50 para antimônio pentavalente e anfotericina B variaram de 16,1 a 39,3 μM e 0,09 a 0,18 μM, respectivamente. Ademais, tanto nas formas promastigotas quanto amastigotas intracelulares observou-se maior tolerância dos isolados clínicos ao antimônio, nas formas tri ou pentavalentes. Em paralelo, ao avaliar-se a atividade antileishmanial de promastigotas da cepa referência de L. (L.) infantum frente ao extrato bruto de cianobactéria do gênero Nostoc sp. GBBB01, por contagem direta, houve diferença estatisticamente significativa nas concentrações de 500 a 31,25ug/mL em relação ao controle sem tratamento, entretanto quando a análise foi realizada pela citometria de fluxo, essas diferenças não foram encontradas. Já nas formas amastigotas intracelulares, o extrato bruto de cianobactéria do gênero Nostoc sp apesentou atividade antileishmanial, sendo possível calcular a IC50, somente para um dos isolados clínicos (MHOM/BR/2018/ASFF-MA) avaliado. Ademais, o extrato bruto de cianobactéria também não induziu efeito citotóxico em macrófagos peritoneais, nas condições testadas. Dessa forma, pode-se afirmar que existe uma variabilidade intraespecífica na sensibilidade aos fármacos tradicionais (Antimônio e Anfotericina B) nos isolados clínicos dessa área de alta endemia para LV, e que o extrato bruto de cianobactéria do gênero Nostoc sp. GBBB01 apresentou atividade antileishmanial, que precisa ser melhor explorada devido a divergência de resultados entre técnicas de análise, a necessidade de novos testes, considerando que mesmo para o extrato de cianobactéria ocorre variação nesse atividade a depender da cepa de L. infantum avaliada.

Submitted by Daniella Santos (daniella.santos@ufma.br) on 2022-10-25T12:57:35Z No. of bitstreams: 1 LuanaPinheiro.pdf: 7000858 bytes, checksum: 87699a3ad7866120e9aff76e71b4c6fd (MD5) Made available in DSpace on 2022-10-25T12:57:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LuanaPinheiro.pdf: 7000858 bytes, checksum: 87699a3ad7866120e9aff76e71b4c6fd (MD5) Previous issue date: 2021-08-04 FAPEMA Leishmaniasis is endemic in several regions of the world, being considered a major public health problem. In this context, mixed infection by different Leishmania species in the same individual, especially in areas of overlapping LTA and LV species, may be more prevalent than previously reported, affecting the clinical course, diagnosis and treatment of the disease. In this research, a review was carried out on the panorama of mixed infection, presented as chapter 1, which aimed to identify the work already carried out on this topic. Many case reports and a scarcity of experimental works were identified. But the results of the studies revealed that in a shared environment, different species can show different behaviors and compromise the course of the infection. In chapter 2, the work carried out, which aimed to evaluate the immune response and behavior of parasites in mixed infection by Leishmania amazonensis and Leishmania chagasi. For this, the macrophages were infected by L. amazonensis and L. chagasi, at times of 24 and 48 hours, then the infection rate, production of nitric oxide, hydrogen peroxide, production of inflammatory cytokines, in addition to the morphometric analysis were evaluated. of the parasitophorous vacuoles. The initial results related to the infection rate showed an overlap of L. chagasi in the mixed infection, suggesting the occurrence of an uneven proliferation and competition. Regarding the production of hydrogen peroxide, the mixed infection group showed a production similar to that seen in the single infection by L. chagasi, and this species may be influencing the production of this reactive in the mixed infection. The production of cytokine TNF mixed infection was similar to that observed in the single infection by L. amazonensis, so it is believed that the presence of this species may be relevant for the production of this cytokine in the shared environment. The MCP-1 chemokine was a parameter that showed no difference between the groups, even though it is an important chemokine linked to the recruitment of monocytes and the increase in the number of macrophages during the single and mixed infection. After evaluating the amount of parasitophorous vacuoles, a smaller amount of these structures in the mixed infection group was observed within 48 hours, a result that may be related to the strategy of sharing vacuoles by the parasites, which has already been analyzed in other studies with other species. Regarding the area of the vacuole, an increase in extension was noted only in the group with single infection by L. chagasi, within 48 hours. In view of the results, it was possible to observe that in a shared environment, the influence of species occurs differently, with changes in the behavior of vacuoles and the action of the cytokine TNF- e protozoan in the host and compromise the clinical course of infection As leishmanioses são endêmicas em várias regiões do mundo, sendo consideradas um grande problema de saúde pública. Nesse contexto, a infecção mista por diferentes espécies de Leishmania em um mesmo indivíduo, especialmente em áreas de sobreposição de espécies de Leishmaniose Tegumentar Americana e Leishmaniose Visceral, pode ser mais prevalente do que previamente relatado, podendo afetar o curso clínico, o diagnóstico e o tratamento da doença. Nesta pesquisa, foi realizada uma revisão de literatura sobre o panorama da infecção mista, apresentada como capítulo 1, que teve como objetivo identificar os trabalhos já realizados com essa temática. Foram identificados muitos relatos de casos e escassez de trabalhos experimentais. Mas os resultados dos estudos revelaram, que em um meio compartilhado, as espécies distintas podem apresentar comportamentos diferenciados e comprometer o curso da infecção. No capítulo 2, o trabalho realizado, que teve como objetivo, avaliar a resposta imune e o comportamento dos parasitos na infecção mista por Leishmania amazonensis e Leishmania chagasi. Para isso, os macrófagos (RAW 264.7) foram infectados por L. amazonensis e L. chagasi, por 24 e 48 horas, seguido da avaliação da taxa de infecção, produção de oxido nítrico, peróxido de hidrogênio, produção de citocinas inflamatórias, além da análise morfométrica dos vacúolos parasitóforos. Os resultados iniciais relacionados a taxa de infecção mostraram uma sobreposição da L. chagasi na infecção mista, sugerindo a ocorrência de uma proliferação desigual e uma competição. Em relação a produção de peróxido de hidrogênio, o grupo de infecção mista demonstrou uma produção semelhante a observada na infecção única por L. chagasi, podendo esta espécie estar influenciando a produção desse reativo na infecção mista. Já a produção de citocina TNF na infecção mista foi semelhante à observada na infecção única por L. amazonensis, por isso acredita-se que a presença dessa espécie pode ser relevante para a produção dessa citocina, no meio compartilhado. A quimiocina MCP-1, foi um parâmetro que não apresentou diferença entre os grupos, mesmo estando ligada ao recrutamento de monócitos e ao aumento do número de macrófagos no decorrer da infecção única e mista. Avaliada a quantidade de vacúolo parasitóforo, foi observada no tempo de 48h uma quantidade menor dessas estruturas no grupo de infecção mista, resultado que pode estar relacionado a estratégia de compartilhamento de vacúolos pelos parasitos, já analisada em outros estudos com outras espécies. Em relação a área do vacúolo, foi notado um aumento da extensão apenas no grupo de infecção única por L. chagasi, no tempo de 48h. Tendo em vista os resultados, foi possível observar que em um ambiente compartilhado, a influência das espécies acontece de forma diferenciada, havendo alteração no comportamento dos vacúolos e atuação da citocina TNF podendo favorecer o estabelecimento do protozoário no hospedeiro e comprometer o curso clínico da infecção.

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2022-06-14T19:02:31Z No. of bitstreams: 1 TESE - ELEMENTOS PRETEXTUAIS_DAYANE .pdf: 3556599 bytes, checksum: 37619b296f7b642bb38e33dd5d752ca8 (MD5) Made available in DSpace on 2022-06-14T19:02:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE - ELEMENTOS PRETEXTUAIS_DAYANE .pdf: 3556599 bytes, checksum: 37619b296f7b642bb38e33dd5d752ca8 (MD5) Previous issue date: 2021-02-03 CAPES FAPEMA Leishmaniasis is a complex of diseases with epidemiological diversity and varied clinical spectrum. The main clinical forms are visceral leishmaniasis (VT) and cutaneous leishmaniasis (LT). There are limitations in relation to treatment, since the systemic leishmanicidal agents used, cause various adverse effects and the increase in resistance, driving the emergence of new treatment perspectives such as alternative protocols and growing interest in new substances obtained from natural products. Açaí, the fruit of Euterpe oleracea MARTIUS is a plant species, whose studies already describe its antioxidant, anti-inflammatory and leishmanicidal potential, prompting more comprehensive research on the same. Thus, the objective of this research was to carry out a bioprospecting study with an emphasis on investigating the chemical composition, leishmanicidal, immunomodulatory activity, healing of Euterpe oleracea seed extracts and / or pulp, as well as its bioproduct. For this purpose, the preparation of the hydroethanolic extract of the pulp and ethanol of the seed of E. oleracea was carried out, with subsequent chemical characterization of the extracts by mass spectrometry, antioxidant and leishmanicidal activity of promastigost forms of L. amazonensis by MTT and antioxidant activity by the methods DPPH and ABTS. Thus, the extract with the best leishmanicidal and antioxidant activity was selected for the development of the cream type formulation (CLA 15%) and an analysis of its stability, physical-chemical and microbiological, was carried out. For biological assays, 65 Balb/c mice were used, divided into four groups of 15 animals that were infected with L. amazonensis in the right ear, and a healthy group of 5 animals, which were named: Base Group treated with 0, 1mL of the excipient of the base cream for 21 days topically, CLA Group 15% treated with 0.1mL of E. oleracea cream for 21 days topically, Group Sb + 5 treated with the pentavalent antimonial (Sb + 5) ( 28 mg / kg / day) for 15 days intraperitoneally and the Group that received an association of the compounds (CLA 15% + Sb + 5) was treated simultaneously with E. oleracea cream for 21 days topically and pentavalent antimonial (Sb + 5) (28 mg / kg / day) intraperitoneally for 15 days. The lesion was monitored weekly by measuring the lesions using digital planimetry, considering the vertical and horizontal measures. The parasitic load was quantified by the Limiting Dilution assay, in samples of the cervical lymph node from all groups that received treatment. In addition, immunophenotyping of the lymph node, spleen and lesion cells was performed, and the cytokine dosage (CBA technique) in the peritoneal cell culture supernatant. Histopathological analysis of the infected ears was also performed. The results showed that E.oleracea seed and pulp extracts are mainly composed of flavonoids, the seed extract being made up of catechins and procyanidins. The seed extract was selected for the formulation because it showed better leishmanicidal activity, in the forms of L. amazonensis with IC 50 of 0.44 mg / mL, in addition to having antioxidant activity. The 15% CLA formulation showed no organoleptic changes, with a slightly acid pH of 4.5, as well as no growth of colonies of bacteria and fungi, being considered suitable for use in in vivo tests. There was a reduction in the lesion area after the second week of treatment in the Sb + 5, CLA15% and Sb + 5 + CLA15% groups, as well as a reduction in the weight of the ears. There was no effect on the parasite load in the treatment groups, demonstrating that the cream formulation CLA15% has no direct effect on the parasite, at least under these conditions of concentration and treatment time, but the association of the treatment (Sb + 5 + CLA15%) demonstrated to modulate the immune system with increased expression of lymphocytes and macrophages, as well as treatment with CLA15%, increased the expression of MCP-1, the main chemokine that regulates migration and infiltration of monocytes / macrophages. These data indicate that the formulation with E. oleracea extract is a promising combination therapy for meglumine antimoniate. As leishmanioses são um complexo de doenças com diversidade epidemiológica e espectro clínico variado. As formas clínicas principais são leishmaniose visceral (LV) e leishmaniose tegumentar (LT). Há limitações em relação ao tratamento, pois os agentes leishmanicidas sistêmicos utilizados, causam variados efeitos adversos e o aumento da resistência, impulsionando surgimento de novas perspectivas de tratamento como protocolos alternativos e interesse crescente em novas substâncias obtidas a partir de produtos naturais. O açaí, fruto de Euterpe oleracea MARTIUS é uma espécie vegetal, cujos estudos já descrevem seu potencial antioxidante, anti inflamatório e leishmanicida, instigando pesquisas mais abrangentes sobre o mesmo. Desta forma, o objetivo desta pesquisa foi realizar estudo de bioprospecção com ênfase na investigação da composição química, atividade leishmanicida, imunomoduladora, cicatrizante de extratos de semente e/ou polpa de Euterpe oleracea, bem como do seu bioproduto. Para tal, foi realizada a preparação do extrato hidroetanólico da polpa e etanólico da semente de E. oleracea, com subsequente caracterização química dos extratos por espectrometria de massas, atividade antioxidante e leishmanicida de formas promastigostas de L. amazonensis por MTT e atividade antioxidante pelos métodos DPPH e ABTS. Assim, o extrato com melhor atividade leishmanicida e antioxidante foi selecionado para desenvolvimento da formulação do tipo creme (CLA a 15%) e realizada análise da sua estabilidade, físico química e microbiológica. Para os ensaios biológicos, foram utilizados 65 camundongos da linhagem Balb/c e divididos em quatro grupos de 15 animais que foram infectados com L. amazonensis na orelha direita, e um grupo sadio de 5 animais, que foram denominados: Grupo Base tratado com 0,1mL do excipiente da creme base por 21 dias por via tópica, Grupo CLA 15% tratado com 0,1mL de creme de E. oleracea durante 21 dias por via tópica, Grupo Sb+5 tratado com o antimonial pentavalente (Sb+5) (28 mg/kg/dia) por 15 dias via intraperitoneal e o Grupo que recebeu associação dos compostos (CLA 15% + Sb+5) foi tratado simultaneamente com creme de E. oleracea durante 21 dias por via tópica e antimonial pentavalente (Sb+5 ) (28 mg/kg/dia) via intraperitoneal durante 15 dias. Foi realizado acompanhamento da lesão semanalmente através da mensuração das lesões por planimetria digital, considerando-se as medidas vertical e horizontal. Foi quantificada a carga parasitária pelo ensaio de Diluição Limitante, em amostras do linfonodo cervical de todos os grupos que receberam tratamento. Além disso, foi feita a Imunofenotipagem das células do linfonodo, baço e lesão, e a dosagem de citocinas (técnica de CBA) no sobrenadante de cultura de células peritoneais. E também foi realizada a análise histopatológica das orelhas infectadas. Os resultados mostraram que os extratos da semente e da polpa de E.oleracea são compostos principalmente por flavonoides, sendo o extrato da semente composto por catequinas e procianidinas. O extrato da semente foi selecionado para realização da formulação pois apresentou melhor atividade leishmanicida, sob as formas promastigotas de L. amazonensis com CI 50 de 0,44 mg/mL, além de apresentar atividade antioxidante. A formulação CLA a 15% não apresentou alterações organolépticas, com pH levemente ácido de 4,5, assim como não apresentou crescimento de colônias de bactérias e fungos, sendo considerado apto para o uso nos testes in vivo. Houve redução da área da lesão a partir da 2º semana de tratamento dos grupos Sb+5, CLA15% e Sb+5 + CLA15%, assim como observou-se redução do peso das orelhas. Não se observou efeito sob a carga parasitária nos grupos de tratamento, demonstrando que a formulação creme CLA15% não possui efeito direto sobre o parasita, ao menos sob estas condições de concentração e tempo de tratamento, porém a associação do tratamento (Sb+5 + CLA15%) demonstrou modular o sistema imune com aumento da expressão de população linfócitos e macrófagos, assim como o tratamento com CLA15%, aumentou a expressão de MCP-1, principal quimiocina reguladora da migração e infiltração de monócitos /macrófagos. Estes dados indicam que a formulação com extrato de E. oleracea é uma promissora terapia combinada antimoniato de meglumina.

Submitted by Sheila MONTEIRO (sheila.monteiro@ufma.br) on 2021-02-12T14:45:57Z No. of bitstreams: 1 SELMA-MALUF.pdf: 6785310 bytes, checksum: b425e9f8d9faa0a5a88fcae13f6e075d (MD5) Made available in DSpace on 2021-02-12T14:45:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SELMA-MALUF.pdf: 6785310 bytes, checksum: b425e9f8d9faa0a5a88fcae13f6e075d (MD5) Previous issue date: 2021-01-20 Helicobacter pylori is one of the most prevalent pathogens of the human species. Helicobacter pylori-induced chronic gastritis is an important risk factor for the development of gastric and duodenal ulcers and gastric adenocarcinoma. The immune response of the gastric mucosa caused by the bacteria is characterized by the presence of macrophages. These cells are considered important regulators of the immune response. According to the activation pathway, macrophages can shift their response to two opposite poles, known as M1 and M2, which can lead to varied clinical outcomes in many diseases. However, the functional profile of macrophages in Helicobacter pylori infection is not well defined. Thus, the objective of this study was to investigate whether the presence of H. pylori per si could induce the polarization of macrophages and whether this polarization would be associated with a greater bacterial load and a greater severity of the gastric mucosal inflammatory response. First, we performed a brief bibliographic review addressing the theme of assessing the polarization of macrophages in Helicobacter pylori infection, in which we observed few studies on human infection. One of them demonstrated M1 profile in infected patients with atrophic gastritis, indicating that excessive response or prolonged maintenance of the M1 polarization profile can lead to tissue damage and contribute to the pathogenesis of the infection. In addition, we address the pathogen's escape mechanisms to host immune responses. Then, we investigated macrophages polarization in H. pylori infected patients by immunohistochemistry of gastric mucosa. A cross-sectional study was conducted with 73 dyspeptic patients undergoing upper gastrointestinal endoscopy and diagnostic tests for H. pylori (urease and histopathological test) on biopsies of the gastric mucosa. The endoscopic diagnosis evaluated the presence of mild pangastritis or erosive pangastritis / peptic ulcer. The gastric mucosa was histologically evaluated to determine the presence of atrophy, metaplasia (pre-neoplastic lesions) and density of H. pylori. Of all the patients examined, 36 were H. pylori negative and 37 H. pylori positive. The patients were separated into three groups: a negative H. pylori group (n = 36), a group infected with H. pylori without pre-neoplastic lesions (n = 16) and another group infected with pre-neoplastic lesions (n = 21). Through the immunohistochemistry technique in the gastric mucosa, the expression of F4/80 (macrophage marker) and markers for the polarization profiles M1 (iNOS, TNF, HLA-DR) and M2 (Arginase, IL-10, CD163). In addition, Arginase activity was measured in patients' plasma. After analyzing the results, analyzes of the association between variables were performed. We observed that patients that H. pylori infected had a higher concentration of macrophages marked with Arginase and CD163, but did not show changes in the polarization markers iNOS, TNF-α, HLA-DR or IL-10, suggesting an M2 polarization profile. Macrophages marked with Arginase and CD163 were in greater numbers in patients with high bacterial load and chronic gastritis without pre-neoplastic lesions, compared to controls. IL-10 expression was lower in patients with higher bacterial density. Arginase expression was greater in the gastric mucosa of patients infected with erosive gastritis / peptic ulcer than controls with the same diagnosis. There was no correlation between Arginase expression in the mucosa and activity in the plasma. We conclude that one of the strategies of H. pylori to escape the pro-inflammatory response (M1) of the mucosa is to induce M2 macrophages. Thus, a low-grade inflammatory environment in the gastric mucosa, in response to infection, may be favorable for the persistence of the bacteria. However, bacterial load can be an imbalance factor in this tolerogenic profile. Furthermore, the lack of correlation between the expression of systemic and mucosal Arginase suggests that the bacterium promotes the modulation of the immune and inflammatory response at the site of infection. A greater understanding of the role of macrophage polarization in chronic gastritis associated with H. pylori infection can help to understand the immunopathology of infection with H. pylori and support future therapeutic and diagnostic approaches. Helicobacter pylori é um dos patógenos mais prevalentes da espécie humana. A gastrite crônica induzida por Helicobacter pylori é um importante fator de risco para o desenvolvimento de úlceras gástricas e duodenais e adenocarcinoma gástrico. A resposta imunológica da mucosa gástrica provocada pela bactéria é caracterizada pela presença de macrófagos. Estas células são consideradas importantes reguladores da resposta imune. De acordo com a via de ativação, os macrófagos podem desviar sua resposta para dois polos opostos, conhecidos como M1 e M2, que podem levar a desfechos clínicos variados em muitas doenças. No entanto, o perfil funcional dos macrófagos na infecção por Helicobacter pylori não é bem definido. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar se a presença de H. pylori por si só poderia induzir a polarização dos macrófagos e se esta polarização estaria associada à maior carga bacteriana e a maior gravidade da resposta inflamatória da mucosa gástrica. Primeiramente, realizamos uma breve revisão bibliográfica abordando o tema avaliação da polarização dos macrófagos em infecção por Helicobacter pylori, na qual observamos poucos estudos sobre a infecção em humanos. Entre eles, um demonstrou perfil M1 em pacientes infectados com gastrite atrófica, indicando que a resposta excessiva ou a manutenção prolongada do perfil de polarização M1 pode levar a danos teciduais e contribuir para a patogênese da infecção. Além disto, abordamos os mecanismos de escape do patógeno às respostas imunes do hospedeiro. A seguir, investigamos a polarização de macrófagos em pacientes infectados por H. pylori, por meio de imunohistoquimica da mucosa gástrica. Um estudo transversal foi conduzido com 73 pacientes dispépticos submetidos à endoscopia digestiva alta e aos testes diagnósticos de H. pylori (teste da urease e histopatológico) em biópsias da mucosa gástrica. O diagnóstico endoscópico avaliou a presença de pangastrite leve ou pangastrite erosiva/úlcera péptica. A mucosa gástrica foi avaliada histologicamente para determinar a presença de atrofia, metaplasia (lesões pré-neoplásicas) e densidade de H. pylori. De todos os pacientes examinados, 36 foram H. pylori negativo e 37 H. pylori positivo. Os pacientes foram então separados em três grupos: um grupo H. pylori negativo (n=36), um grupo infectado por H. pylori sem lesões pré-neoplásicas (n=16) e outro grupo infectado com lesões pré-neoplásicas (n=21). Por meio da técnica de imunohistoquimica na mucosa gástrica, foi determinada a expressão de F4/80 (marcador de macrófagos) e de marcadores para os perfis de polarização M1 (iNOS, TNF, HLA-DR) e M2 (Arginase, IL-10, CD163). Além disto, foi feita dosagem da atividade de Arginase no plasma dos pacientes. Após a análise dos resultados foram realizadas análises de associação entre as variáveis. Observamos que os pacientes infectados por H. pylori apresentaram concentração maior de macrófagos marcados com Arginase e CD163, mas não apresentaram alterações dos marcadores de polarização iNOS, TNF-α, HLA-DR ou IL-10, sugerindo um perfil M2 de polarização. Macrófagos marcados com Arginase e CD163 estavam em maior número nos pacientes com alta carga bacteriana e com gastrite crônica sem lesões pré-neoplásicas, em relação aos controles. A expressão de IL-10 foi menor nos pacientes com maior densidade bacteriana. Expressão de Arginase foi maior na mucosa gástrica de pacientes infectados com gastrite erosiva/úlcera péptica que os controles com o mesmo diagnóstico. Não houve correlação entre expressão de Arginase na mucosa e a atividade no plasma. Concluímos que uma das estratégias do H. pylori para escapar da resposta pró-inflamatória (M1) da mucosa é induzindo macrófagos M2. Desta forma, um ambiente inflamatório de baixo grau na mucosa gástrica, em resposta à infecção, pode ser favorável a persistência da bactéria. No entanto, a carga bacteriana pode ser um fator de desequilíbrio deste perfil tolerogênico. Além do mais, a ausência de correlação entre a expressão de Arginase sistêmica e na mucosa sugere que a bactéria promove a modulação da resposta imune e inflamatória no local da infecção. Uma maior compreensão do papel da polarização de macrófagos na gastrite crônica associada à infecção por H. pylori pode ajudar a entender a imunopatologia da infecção com H. pylori e apoiar futuras abordagens terapêuticas e diagnósticas.

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2022-10-28T16:17:28Z No. of bitstreams: 1 Marcela Belo PreTextuais.pdf: 3327514 bytes, checksum: dd24560860c6b964af2793282027feed (MD5) Made available in DSpace on 2022-10-28T16:17:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcela Belo PreTextuais.pdf: 3327514 bytes, checksum: dd24560860c6b964af2793282027feed (MD5) Previous issue date: 2020-12-11 FAPEMA In addition to nutrients, breast milk provides protection against respiratory infections, diarrhea, allergies and deficiency diseases. Despite all the knowledge on the subject, little is known about its immunological and biochemical composition specifically in diabetic mothers. The aim of the study was to evaluate the composition of colostrum and blood of diabetic mothers, and, due to the pandemic caused by the SARS-Cov-2 virus, we carried out a systematic review to study the immunological aspects of the colostrum of puerperal women during the COVID-19 pandemic. For the first objective, we evaluated in the colostrum and blood of 36 mothers with gestational diabetes and 36 non-diabetic mothers, hospitalized in the Joint Accommodation of the University Hospital of the Federal University of Maranhão - UFMA, Maternal and Child Unit, the following parameters: concentration of total IgA antibodies and anti-insulin IgA, by immunoenzymatic assay (ELISA); concentration of cytokines IL-10, TNF-α, INF-γ, TGF-β by the microsphere technique (Cytometric Bead Array - CBA) and the concentration of calcium, glucose, total cholesterol, triglycerides, total proteins by colorimetric assay. Student t test was used to compare average concentrations between the two groups. Pearson's correlation coefficient was used to explore the correlations between the concentrations of antibodies and cytokines and independent variables. For all tests, a level of statistical significance of p p < 0,05 was adopted. Statistical analysis was performed using the GraphPad Prism 7.0 program. We found that the concentration of IgA anti-insulin antibody was always higher in the blood and colostrum of diabetic mothers, when compared to non-diabetic mothers (p

Submitted by Sheila MONTEIRO (sheila.monteiro@ufma.br) on 2021-06-23T20:16:56Z No. of bitstreams: 1 NIDIA-SOARES.pdf: 86284 bytes, checksum: c919507494e68334c3cf13353628b2a7 (MD5) Made available in DSpace on 2021-06-23T20:16:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 NIDIA-SOARES.pdf: 86284 bytes, checksum: c919507494e68334c3cf13353628b2a7 (MD5) Previous issue date: 2020-02-28 Bloodstream infection (ICS) is a major cause of morbidity and mortality in cancer patients. ICSs can be identified through blood culture, an exam that isolates and identifies pathogenic microorganisms in the blood, blood culture collections are routine in ICUs. This study aimed to assess the prevalence and susceptibility profile to antimicrobials of patients admitted to an Intensive Care Unit (ICU), of an oncology hospital located in the city of São Luís - MA. Tracing the susceptibility profile to the most used antimicrobials in the treatment of ICS, correlating the diagnosis with the clinical outcome. This is a retrospective, observational study, carried out with the aid of medical records data. In the period from 2016 to 2018, evolutions of the Hospital Infection Control Service (SCIH) of the unit and the microbiological reports of the laboratory were analyzed. Microorganisms were identified by Mass Spectrometry (MALDI-TOF). 240 of the 619 blood culture samples were positive. The results of the analyzes show that there is an association between the variables age and infection, and that the average age of infected patients is above 60 years. In the analysis of the prevalence of microorganisms isolated in the samples, we evidenced the predominance of Gram positive bacteria (46.7%), especially Staphylococcus epidermidis (10.4%) and Staphylococcus haemolyticus (9.6%). In the group of Gram negative bacteria, Klebisiella pneumoniae (11.7%) and Acinetobacter baumannii (10%) stood out. Most fungal infections were caused by Candida albicans (3.8%). Considering the susceptibility to antimicrobials, it was observed that the Gram positive bacteria Staphylococcus haemolyticus and Enterococcus faecalis, showed sensitivity to vancomycin, while the Gram negative bacteria showed a great diversity regarding resistance. K. pneumoniae (96.4%) to ampicillin, highlighting the resistance of (15%) to carbapenems and A. baumannii showed resistance to all drugs tested. Correlating infection, diagnosis and outcome (death), there was a prevalence in neoplasms of the Respiratory system (82%), CNS (78%) and hematological (77%). The results of the present study highlight the prevalence of multidrug-resistant microorganisms in (ICS), increasing mortality. Knowing the resistance profile serves to develop measures to reduce infection in patients admitted to the ICU. A infecção da corrente sanguínea (ICS) é uma das principais causas de morbidade e mortalidade em pacientes com câncer. As ICSs podem ser identificadas através da hemocultura, exame que isola e identifica microrganismos patogênicos no sangue, as coletas de hemocultura são rotina nas UTIs. Este trabalho teve como objetivo, avaliar a prevalência e o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos de pacientes internados em uma Unidade de Terapia Intensiva (UTI), de um hospital oncológico situado no município de São Luís – MA. Traçando o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos mais utilizados na terapêutica de ICS, correlacionando o diagnostico com o desfecho clínico. Trata-se de um estudo retrospectivo, observacional, realizado com auxílio de dados de prontuários. No período de 2016 a 2018, foram analisadas evoluções do Serviço de Controle de Infecção Hospitalar (SCIH) da unidade e os relatórios microbiológicos do laboratório. Os microrganismos foram identificados por Espectrometria de Massa (MALDI-TOF). 240 das 619 amostras de hemoculturas foram positivas. Os resultados das análises comprovam que há associação das variáveis idade e infecção, e que a idade média dos pacientes infectados está acima de 60 anos. Na análise da prevalência dos microrganismos isolados nas amostras, evidenciamos a predominância das bactérias Gram positivas (46.7%) destacando-se Staphylococcus epidermidis (10.4%) e Staphylococcus haemolyticus (9.6%). No grupo das bactérias Gram negativas destacou-se Klebisiella pneumoniae (11.7%) e Acinetobacter baumannii (10%). A maioria das infecções fúngicas foram causadas por Candida albicans (3.8%). Considerando a susceptibilidade aos antimicrobianos, observou-se que as bactérias Gram positivas Staphylococcus haemolyticus e Enterococcus faecalis, apresentaram sensibilidade à vancomicina, enquanto as Gram negativas apresentaram uma grande diversidade quanto à resistência. K. pneumoniae (96,4%) a ampicilina, ressaltando a resistência de (15%) aos carbapenêmicos e A. baumannii apresentou resistências a todos os fármacos testados. Correlacionando infecção, diagnóstico e desfecho (óbito), observou-se prevalência nas neoplasias do sistema Respiratório (82%), SNC (78%) e hematológico (77%). Os resultados do presente estudo ressaltam a prevalência de microrganismos multirresistentes nas (ICS), aumentando a mortalidade. Conhecer o perfil de resistência serve para elaboração de medidas para a diminuição de infecção nos pacientes internados na (UTI).

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2020-01-09T14:17:34Z No. of bitstreams: 1 Breno Facundes.pdf: 2499222 bytes, checksum: e404aefd0f0d3fbf9f399bf73399aba1 (MD5) Made available in DSpace on 2020-01-09T14:17:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Breno Facundes.pdf: 2499222 bytes, checksum: e404aefd0f0d3fbf9f399bf73399aba1 (MD5) Previous issue date: 2019-09-18 FAPEMA CAPES CNPq Osteoarthritis is a worldwide degenerative chronic disease. Approximately 250 million people perform worldwide. Thus, the new forms of treatment are the disease of fundamental importance. The objective of this study was to evaluate the hydroethanolic extraction of leaves of Persea americana Mill in an experimental model of osteoarthritis in rat knees. Chemical characterization of the extract using phytochemical screening and high efficiency HLPC-UV array ethnography at 254 nm, identification by Mass Spectrometry Coupled Liquid Chromatography (LC-MS) and fluid flow analysis (FIAMS). Use and control of Wistar male males divided into two groups: EHPA (500mg / kg), saline (0.1mL) / kg), meloxicam (0.1mg / kg) and control subgroup that had no intervention.) For evaluation for motor activity the forced ambulation test was used. This was to quantify the frequency the Von-Frey test was used. A response to mechanical hyperalgesia was evaluated by the Randall Selitto test. Biochemical markers such as fasting glucose, total cholesterol, triglycerides, creatinine, urea, gamma GT, oxalacetic transaminase (AST) and pyruvic transaminase (ALT) were performed. They were also histological retrospectives of the knee joint using the OARSI criteria and radiographic analysis following the Kellgren and Lawrence osteoarthritis grade parameters. Qualitative phytochemical screening shows the presence of phenolic compounds, alkaloids, triterpenoid steroids, tannins and saponins. A chemical characterization by LC-MS and FIA-MSH. A presence of condensed tannins as major components, as well as phenolic acids, aglycone, glycosylated and triterpene flavonoids. Oral administration of the extract at a dose of 500mg / kg improved the dose of 500mg / kg orally and improved antinociceptive activity in the mechanical hyperalgesia test in both experiments. The extract did not alter liver, renal and hematopoietic functions. The histological and radiological analyzes that were extracted were a protector of cartilage in the combat process. Concluding the hydroethanolic extract of Persea americana Mill. reduced sensitivity to blood damage to adverse effects of meloxicam, a drug commonly used in medical practice. Osteoartrite é uma doença crônica degenerativa de grande impacto mundial. Aproximadamente 250 milhões de pessoas apresentam osteoartrite de joelho em todo o mundo. Dessa forma, encontrar novas formas de tratamento dessa doença é de fundamental importância. O estudo teve por objetivo avaliar os efeitos do extrato hidroetanólico das folhas de Persea americana Mill. em modelo experimental de osteoartrite em joelhos de ratos. Para caracterização química do extrato utilizou-se screening fitoquímico e perfil cromatográfico obtido por HLPC-UV de alta eficiência a 254 nm, identificação por Cromatografia Líquida Acoplada à Espectrometria de Massas (LC-MS) e análise da injeção de fluxo (FIA-MS). Utilizou-se quarenta e oito ratos machos da linhagem Wistar divididos em dois grupos (tratamento imediato e tardio), onde cada um desses dois grupos foram divididos em quatro subgrupos com seis animais: EHPA (500mg/kg), solução salina (0,1mL/kg), meloxicam (0,1mg/kg) e subgrupo sadio que não possuiu intervenção cirúrgica e tratamento. Para avaliação de atividade motora foi utilizado o teste de deambulação forçada, para quantificar a dor espontânea foi utilizado o teste de Von-Frey, e a resposta frente a hiperalgesia mecânica foi avaliada pelo teste de Randall Selitto. Realizou-se dosagens de marcadores bioquímicos, tais como glicemia em jejum, colesterol total, triglicerideos, Creatinina, Ureia, Gama GT, Transaminase Oxalacetica (AST) e Transaminase Piruvica (ALT), além do hemograma completo. Também foram realizadas análises histológicas da articulação do joelho utilizando os critérios da OARSI e análise radiográfica seguindo os parâmetros de grau osteoartrose de Kellgren e Lawrence. O screening fitoquímico qualitativo mostrou a presença de compostos fenólicos, alcaloides, esteroides triterpenóides, taninos e saponinas. A caracterização química por LC-MS e FIA-MS revelou a presença de taninos condensados como componentes majoritários, além de acidos fenólicos, flavonoides agliconas, glicosilados e triterpenos. A administração do extrato na dose de 500mg/kg, via oral, melhorou a deambulação forçada, reduziu a sensibilidade tátil e mostrou atividade antinociceptiva no teste de hiperalgesia mecânica em ambos protocolos experimentais. O extrato não alterou as funções hepáticas, renais e hematopoiéticas. As análises histológicas e radiológicas mostraram que o extrato atuou como um protetor da cartilagem no processo inflamatório. Conclui-se que o extrato hidroetanólico de Persea americana Mill. reduziu a sensibilidade a dor devido aos efeitos antinociceptivos semelhantes ao meloxicam, droga comumente utilizada na clínica médica.

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2019-12-13T15:04:10Z No. of bitstreams: 1 Mariana Amaral Oliveira.pdf: 2422512 bytes, checksum: 4b684956a921a0d99a42fd53de07f6ae (MD5) Made available in DSpace on 2019-12-13T15:04:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Amaral Oliveira.pdf: 2422512 bytes, checksum: 4b684956a921a0d99a42fd53de07f6ae (MD5) Previous issue date: 2019-04-29 Neuropathic pain represents a heterogeneous group of diseases with different etiologies that differ in relation to the location, representing one of the main chronic pain conditions, with high world prevalence, requiring pharmacological treatment with a multidisciplinary approach, constituting a serious public health problem; which has led to the search for new alternatives and / or therapeutic supplements, mainly from natural products. In the real perspective of obtaining new therapeutic agents of plant origin, validation studies of plant species should be stimulated to define parameters of efficacy, safety and quality. In this sense, the objective of this study is to contribute with the validation of Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb. (Iridaceae) (vernacular names: coquinho,), native species of Tropical America, of great occurrence in the state of Maranhão, Brazil and wide therapeutic use in the local population; aiming to evaluate pharmacobotanical, chemical and biological parameters in neuropathic pain model; contributing to quality control of authenticity and standardization of the extracts of the species. Leaves of Eleutherine bulbosa were collected in natural habitat, submitted to drying and milling, obtaining hydroalcohol extracts by maceration (EbMac) and Soxhlet apparatus (EbSox), in the hydromodule ratios of 1:18 and 1:14, respectively; (chemical screening, determination of total polyphenol content, determination of flavonoid content and chromatographic profile by high performance chromatography / mass spectrometer coupled to mass spectrometer / MS) and investigation of the analgesic potential in a model of neuropathic pain in rats (behavioral analysis: forced deambulation, mechanical allodynia and thermal hyperalgesia; biochemical analysis: determination of the activity of catalase and superoxide dismutase enzymes) and in vitro assay (determination of cyclooxygenase 1 and cyclooxygenase 2). Sample of fresh plant material was submitted to the pharmacochemical analysis (morphology and anatomy) that allow the definition of parameters for the evaluation of authenticity of the plant species, using conventional pharmacognostic research. The chemical analyzes showed that EbMac and EbSox present important classes of secondary metabolites, with expressive contents of total phenomena and flavonoids; showing in the chromatograms various compounds, especially anthraquinones, naphthoquinones and flavonoids; especially in EbSox. The extracts presented antinociceptive activity in neuropathic pain induced by sciatic nerve compression (sciatica model) in rats when administered orally for 15 days of treatment, with more expressive results in EbSox. The animals treated with EbMac and EbSox reduced the concentrations of catalase and superoxide dismutase, demonstrating antioxidant effect in neuropathic pain; (COX-1) and cyclooxygenase-2 (COX-2), with greater COX-2 potential, signaling the inhibitory action of extracts by synthesis of inflammatory mediators; results best evidenced in EbSox. Extraction of the leaves of Eleutherine bulbosa in Soxhlet apparatus demonstrated more expressive results in chemical and biological analyzes in neuropathic pain model; thus, to infer better extraction capacity to the procedure performed in Soxhlet apparatus, effectively contributing to the study of standardization of this species. A dor neuropática representa grupo heterogêneo de doenças com etiologias diferentes, que diferem em relação à localização, representando uma das principais condições dolorosas crônicas, com alta prevalência mundial, exigindo tratamento farmacológico com abordagem multidisciplinar, constituindo sério problema a saúde pública; o que tem ocasionado a busca de novas alternativas e/ou complementos terapêuticos, principalmente a partir de produtos naturais. Na perspectiva real de obtenção de novos agentes terapêuticos de origem vegetal, os estudos de validação das espécies vegetais devem ser estimulados para definição dos parâmetros de eficácia, segurança e qualidade. Nesse sentido, o objetivo deste estudo é contribuir com a validação de Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb. (Iridaceae) (nome vernacular: coquinho), espécie nativa da América Tropical, de grande ocorrência no estado do Maranhão, Brasil e amplo uso terapêutico na população local; visando avaliar parâmetros farmacobotânicos, químicos e biológicos em modelo de dor neuropática; contribuindo para controle de qualidade de autenticidade e na padronização dos extratos da espécie. Folhas de Eleutherine bulbosa foram coletadas em habitat natural, submetidas à secagem e moagem, com obtenção dos extratos hidroalcoólicos por maceração (EbMac) e em aparelho Soxhlet (EbSox), nas relações de hidromódulo de 1:18 e 1:14, respectivamente; submetidos a caracterização química (screening químico, determinação do teor de polifenóis totais, determinação do teor de flavonoides e perfil cromatográfico por cromatografia de alta eficiência/CLAE acoplado a espectrômetro de massa/MS) e investigação do potencial analgésico em modelo de dor neuropática em ratos (análises comportamentais: deambulação forçada, alodínia mecânica e hiperalgesia térmica; análises bioquímicas: determinação da atividade das enzimas catalase e superóxido dismutase) e ensaio in vitro (determinação da ciclooxigenase 1 e ciclooxigenase 2). Amostra do material vegetal fresco foi submetida à análise farmacobotânica (morfologia e anatomia) que possibilitam definição de parâmetros para avaliação de autenticidade da espécie vegetal, com emprego de investigação farmacognóstica convencional. As análises químicas demonstraram que EbMac e EbSox apresentam importantes classes de metabólitos secundários, com expressivos teores de fenois totais e flavonoides; evidenciando nos cromatogramas vários compostos, especialmente de antraquinonas, naftoquinonas e flavonoides; principalmente no EbSox. Os extratos apresentaram atividade antinociceptiva na dor neuropática induzida pela compressão do nervo ciático (modelo de ciatalgia), em ratos, quando administrado por via oral, durante 15 dias de tratamento, com resultados mais expressivos em EbSox. Os animais tratados com EbMac e EbSox reduziram as concentrações de catalase e superóxido dismutase, demonstrando efeito antioxidante na dor neuropática; bem como ocasionaram inibição da atividade de ciclooxigenase 1 (COX-1) e ciclooxigenase 2 (COX-2), com maior potencial sobre COX-2, sinalizando que ação inibitória dos extratos por síntese de mediadores inflamatórios; resultados melhor evidenciados em EbSox. A extração das folhas de Eleutherine bulbosa em aparelho de Soxhlet demonstrou resultados mais expressivos nas análises químicas e biológicas em modelo de dor neuropática; podendo, assim, inferir melhor capacidade extrativa ao procedimento realizado em aparelho de Soxhlet, contribuindo efetivamente no estudo de padronização dessa espécie.

Submitted by Daniella Santos (daniella.santos@ufma.br) on 2019-02-11T17:19:04Z No. of bitstreams: 1 CINARAMONTEIRO.pdf: 14778385 bytes, checksum: 27ac2343241b664f31f5225666f5b3ae (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-11T17:19:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CINARAMONTEIRO.pdf: 14778385 bytes, checksum: 27ac2343241b664f31f5225666f5b3ae (MD5) Previous issue date: 2018-12-27 Clostridium species, mainly C. butyricum, C. difficile, and C. perfringens, are agents of infectious disease resulting from intestinal dysbiosis. In many cases, recurrence can occur after antibiotics, indicating the need for novel therapeutic options that act on the pathogens and also restore the microbiota. Herein, the in vitro antimicrobial activity and probiotic potential of clinical and reference strains of Bifidobacterium and Lactobacillus were investigated against pathogenic species of Clostridium. The antimicrobial activity was evaluated by the agar spot test and inhibition of gas production. Then, the probiotic potential of selected strains was assessed by analyzing their coaggregation ability, adhesive properties to host cells and mucin, tolerance to acidic pH and bile salts, and antimicrobial susceptibility profiles. Lactobacillus plantarum ATCC 8014 was the most promising strain based on its inhibitory activity against Clostridium spp. In addition, this strain met criteria to be considered a probiotic based on its coaggregation ability, adhesive properties, and tolerance to harsh conditions of pH and bile acid salts. Overall, the results indicate that among the studied strains, L. plantarum ATCC 8014 presents probiotic potential for controlling infections by the Clostridium species studied and should be further evaluated in in vivo animal studies. Espécies de Clostridium, principalmente C. butyricum, C. difficile e C. perfringens, são agentes de doenças infecciosas resultantes de disbiose intestinal. Em muitos casos, a recorrência pode ocorrer após antibioticoterapia, indicando a necessidade de novas opções terapêuticas que atuem sobre os patógenos e também restaurem a microbiota. Neste trabalho, investigou-se a atividade antimicrobiana in vitro e o potencial probiótico de cepas clínicas e de referência de Bifidobacterium e Lactobacillus contra espécies patogênicas de Clostridium. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo ensaio de difusão em sobrecamadas e pela inibição da produção de gás. Em seguida, o potencial probiótico das cepas selecionadas foi avaliado pela análise da capacidade de coagregação, propriedades de adesão às células eucarióticas e mucina, tolerância ao pH ácido e sais biliares, e pela determinação do perfil de susceptibilidade aos antibióticos. Lactobacillus plantarum ATCC 8014 foi a cepa mais promissora baseada em sua atividade inibitória contra Clostridium spp. Além disso, esta cepa preencheu os critérios para ser considerada um probiótico com base na sua capacidade de coagregação, propriedades de adesão e tolerância a condições adversas de pH e sais de ácidos biliares. No geral, os resultados indicam que, entre as linhagens estudadas, L. plantarum ATCC 8014 apresenta potencial probiótico para o controle de infecções pelas espécies de Clostridium estudadas e deve ser melhor avaliado em estudos animais

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2018-02-26T17:36:58Z No. of bitstreams: 1 KellyPortela.pdf: 3821103 bytes, checksum: eab4919572cc12f16bf3e63453c6d850 (MD5) Made available in DSpace on 2018-02-26T17:36:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KellyPortela.pdf: 3821103 bytes, checksum: eab4919572cc12f16bf3e63453c6d850 (MD5) Previous issue date: 2017-05-11 CAPES FAPEMA Macrophage activation by natural products has been studied in development or resolution of several pathological conditions, as an immunomodulatory therapeutic possibility. Since Tityus serrulatus scorpion venom (vTs) showed potential to activate and modulate these phagocytes response, this study aimed to evaluate murine macrophages polarization after treatment with vTs. For this, RAW 264.7 lineage cells were stimulated with vTs (0.1; 1; 10 μg / mL) and / or LPS (10 μg / mL) for 24 and 48 hours. After these treatments, we evaluated Zymosan particles (10: 1) and Escherichia coli-GFP (10: 1) phagocytosis, nitric oxide (NO), hydrogen peroxide (H2O2) and Cytokines (IL-6, TNF-α, MCP-1 and IL-12) production, and immunophenotypic characterization (CD80, CD86 and iNOS). Treatment with vTs was increased RAW cells phagocytic potential to Zymosan and E. coli. Although RAW cells increased microbicidal activity, vTs, alone, treatment did not induce NO production. However, groups stimulated with vTs plus LPS showed increased NO. Different from NO generation, all groups treated with vTs showed a stimulation of H2O2 production. The venom induced proinflammatory cytokines production, showing higher release of TNF-α and MCP-1. RAW cells stimulated with venom, or venom and LPS, showed an increase in CD86 and iNOS expression. Significantly, vTs treatment presented a response pattern similar or superior to that showed by M1 macrophages, in all evaluated parameters. Thus, our data allow us to affirm that T. serrulatus scorpion venom can activate RAW 264.7 macrophages. Furthermore, we suggest that treatment with T. serrulatus venom induces polarization for a M1 response profile. A ativação de macrófagos por produtos naturais vem sendo estudada no desenvolvimento ou resolução de diferentes condições patológicas, como uma possibilidade terapêutica imunomoduladora. Uma vez que o veneno do escorpião Tityus serrulatus (vTs) apresenta potencial ativador e modulador das repostas desses fagócitos, o objetivo deste estudo foi avaliar a polarização de macrófagos murinos tratados com vTs. Para tanto, células de linhagem RAW 264.7 foram estimuladas com vTs (0,1; 1; 10 µg/mL) e/ou LPS (10 µg/mL) por 24 e 48 horas. Após esses tratamentos, foi avaliada: a capacidade fagocítica dessas células frente a partículas de Zymosan (10:1) e Escherichia coli-GFP (10:1); a produção de óxido nítrico (NO), peróxido de hidrogênio (H2O2), e citocinas (IL-6, TNF-α, MCP-1 e IL12); e a caracterização imunofenotípica (CD80, CD86 e iNOS). O tratamento com o vTs aumentou o potencial fagocítico das células RAW em relação ao Zymosan e E. coli. Apesar de ter induzido maior atividade microbicida das células RAW, o tratamento com vTs não induziu, por si só, a produção de NO. No entanto, os grupos estimulados com vTs e LPS, mostraram aumento de NO. Diferente da geração de NO, a produção de H2O2 aumentou em todos os grupos de tratamento com o vTs. O veneno induziu a produção de citocinas pró-inflamatórias, mostrando maiores índices para TNF-α e MCP-1. As células estimuladas com veneno, ou veneno e LPS, exibiram um aumento na expressão de CD86 e iNOS. E, de forma significativa, os tratamentos com o vTs apresentaram padrão de resposta semelhante ou superior ao mostrado pelos macrófagos M1, em todos os parâmetros avaliados. Desse modo, nossos dados nos permitem afirmar que o veneno de T. serrulatus apresenta ação ativadora sobre os macrófagos RAW 264.7. Ainda, sugerimos que o tratamento com o veneno de T. serrulatus mostra potencial indutor de polarização para o perfil M1 de resposta.