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The coffee culture in Brazil has much economic importance and relevance in the social sector. One of the possible reductions of its productivity is due to the injury caused by the insect Coccus viridis (cochineal-green). The plants when being injured are able to increase the synthesis of protease inhibitors (PIs) throughout their extension. Studies have shown that insects fed with plants previously sprayed with synthetic inhibitors have their development affected. Thus, the present work aimed to evaluate the effects of synthetic protease inhibitors, benzamidine and berenil, on the intestinal proteolytic activity of C. viridis. Coffea arabica plants were infested with C. viridis nymphs and sprayed with benzamidine and berenil in four different concentrations: 0; 0.25%; 0.5% e 0.75% (p/v). The insect’s biochemical response was evaluated after 24 h of spraying, and the insects were collected. The activity of the serine proteases, trypsin-like (amidásica and esterásica) and chymotrypsin-like esterase, was reduced due to the presence of the inhibitors. The same was obtained in relation to the activity of cysteine proteases. A cultura do café no Brasil tem muita importância econômica e relevância no setor social. É possível que as injurias causadas pelo inseto Coccus viridis (cochonilha-verde) seja um dos motivos da redução de sua produtividade. As plantas, ao serem injuriadas, são capazes de aumentar a síntese de inibidores de proteases (IPs) por toda sua extensão. Estudos demonstraram que insetos alimentados com plantas previamente pulverizadas com inibidores sintéticos têm seu desenvolvimento afetado. Assim, este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos dos inibidores de proteases sintéticos, benzamidina e berenil, sobre a atividade proteolítica intestinal de C. viridis. Plantas de Coffea arabica foram infestadas com ninfas de C. viridis e pulverizadas com benzamidina e berenil, em quatro diferentes concentrações: 0; 0,25%; 0,5% e 0,75% (p/v). A resposta bioquímica do inseto foi avaliada após 24 horas da pulverização, coletando-se os insetos. A atividade das serino-proteases tripsina-like (amidásica e esterásica) e quimotripsina-like esterásica foi reduzida pela presença dos inibidores. O mesmo se obteve em relação à atividade das cisteíno-proteases.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Soy molasses is a byproduct of soybean processing and concentrated source of fermentable and non fermentable sugars, as oligosaccharides raffinose and stachyose. The raffinose oligosaccharides (RO) are considered antinutritional factors, interfering in the absorption of diet’s nutrients in humans and monogastric animals, since they lack the enzyme α-galactosidase able to hydrolyze these sugars. The objective this work were to establish technological conditions for obtaining a free soy molasses oligosaccharides raffinose from enzymatic treatment with Debaryomyces hansenii UFV-1 α-galactosidase, and to establish an efficient process to improve the ethanol production from soy molasses fermentation. Concentrations of 10-100% soy molasses were inoculated with 1, 2 and 5% inoculum containing cells of the yeast, at 30 ºC, 200 rpm. The use of 10% soy molasses and 2% inoculum showed best conditions for the grown of the yeast. The α-galactosidase activity increased with the incubation time and the total reduction of RO was observed after 24 h. The rats were fed with diets prepared with no treated soy molasses and treated. The parameters true digestibility, weight gain, PER and NPR were evaluated in the periods 0-14 and 14-28 days. It was observed a significant improve in the true digestibility from diet containing soy molasses treated in compared to diet no treated. In the first 14 days experiment, the diets containing soy molasses treated and no treated presented values weight gain, PER and NPR significantly lower in compared to control diet. However, in the period of 14-28 days the experimental diets no different of control diet. In the experiment from ethanol production, soy molasses treatment with α-galactosidase at 60 ºC, 100 rpm, for 12 h, promoted an increase in sucrose and reducing sugars concentrations of 22 and 82 %, respectively. Soy molasses at 5 ºBrix was fermented by Saccharomyces cerevisiae LBM-51 at 30 ºC, 100 rpm. The maximum ethanol production for treated and no treated soy molasses was of 15.0 and 11.4 g/L, respectively, after 8 h fermentation. The increase of 24 % in ethanol productivity was obtained from treated soy molasses fermentation compared to no treated soy molasses. O melaço de soja é um subproduto do beneficiamento da soja e fonte concentrada de açúcares fermentáveis e não fermentáveis, dentre eles os oligossacarídeos rafinose e estaquiose. Os oligossacarídeos de rafinose (RO) são considerados fatores antinutricionais, pois interferem na absorção de nutrientes da dieta em humanos e animais monogástricos uma vez que estes não possuem a enzima α-galactosidase capaz de hidrolisar esses açúcares. O presente trabalho teve como objetivos estabelecer condições tecnológicas para a obtenção de um melaço de soja livre de oligossacarídeos de rafinose, através do tratamento enzimático com α-galactosidases de Debaryomyces hansenii UFV-1; e estabelecer um processo eficiente para melhorar a produção de etanol através da fermentação do melaço de soja. Foi avaliado o crescimento D. hansenii e produção de α-galactosidases nas concentrações de 10-100% de melaço de soja incubados com 1, 2 e 5% de inóculo contendo células viáveis da levedura, a 30 ºC, 200 rpm. O uso do melaço de soja 10% e do inóculo 2% promoveu as melhores condições para crescimento da levedura. A atividade de α-galactosidase aumentou com o tempo de incubação e a redução total dos RO foi verificada após 24 h. Os ratos foram alimentados com dietas preparadas com melaço de soja tratado, sem RO, e não tratado, com RO. Os parâmetros digestibilidade verdadeira, ganho de peso, coeficiente de eficácia protéica (PER) e razão protéica líquida (NPR) foram avaliados durante os períodos de 0 a 14 e 14 a 28 dias de experimento. Foi observada uma melhora significativa na digestibilidade verdadeira para a dieta contendo o melaço soja tratado em relação à dieta com melaço não tratado, nos dois períodos experimentais. Nos primeiros 14 dias de experimento, as dietas contendo o melaço de soja com e sem RO apresentaram valores de ganho de peso, PER e NPR significativamente menores em relação à dieta controle. Já no período de 14 a 28 dias, as dietas experimentais não diferiram estatisticamente da dieta controle em relação aos parâmetros ganho de peso, PER e NPR. No experimento de verificação da produção de etanol, o tratamento do melaço de soja com α-galactosidase a 60 ºC, 100 rpm, por 12 h, promoveu um aumento na concentração de sacarose e de açúcares redutores de 22 e 82 %, respectivamente. O melaço de soja a 5 ºBrix foi fermentado por Saccharomyces cerevisiae LBM-51 a 30 ºC, 100 rpm. A máxima produção de etanol para o melaço de soja tratado e não tratado foi de 15,0 e 11,4 g/L, respectivamente, após 8 h de fermentação. Um aumento de 24 % na produtividade de etanol foi obtido para a fermentação do melaço de soja tratado em comparação ao melaço de soja não tratado.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A grande extensão de área com cultura de soja intensificoua ocorrência de diversas pragas, dentre elas, o percevejo-marrom, Euschistus heros (Fabricius, 1798) (Pentatomidae). Os danos desta praga vêm se tornando cada vez mais expressivos, devido ao seu aumento populacional, manejo inadequado e resistência a inseticidas, o que resulta em perda de produtividade. As plantas apresentam mecanismos de defesa contra os insetos e, por sua vez, estes tentam burlar estas defesas. Estudos sobre a interação inseto/planta têm sido realizados analisando a via de defesa da planta e/ou enzimas digestivas das pragas. Entretanto, não há relatos sobre enzimas digestivas presentes no intestino e nas glândulas salivares do percevejo- marrom após interação com a soja, ao longo do tempo. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o perfil das enzimas presentes no intestino médio e nas glândulas salivares após serem alimentados com as cultivares IAC 24 (resistente) e IAC Foscarin 31 (susceptível). Sendo este o início dos estudos em relação ao controle desta praga com base em aspectos bioquímicos. Plantas, no estágio R5, foram infestadas com machos do percevejo. As avaliações foram realizadas em diferentes tempos de alimentação (0, 24, 48, 72 e 96 horas). Após cada tempo, retirou-se os intestinos e as glândulas salivares. As atividades das enzimas proteolíticas, amilase e lipase, foram realizadas de acordo com protocolos específicos. Tanto no intestino como nas glândulas salivares não foi detectada atividade de cisteíno proteases. No intestino médio, a atividade de proteases totais apresentou diferença para tempo, cultivar e interação cultivar x tempo. A amilase foi diferente somente para o tempo e lipase diferiu no tempo e na interação. Nas glândulas salivares, a atividade de proteases totais apenas diferiu em relação às cultivares analisadas. A amilase mostrou significância tanto para o tempo quanto para a interação e lipase foi significativa para as três fontes de variações avaliadas. Assim, observou- se o comportamento das enzimas responsivo a alimentação com os distintos cultivares. Estudos mais aprofundados são necessários para entender o porquê das oscilações registradas nas condições analisadas. Great extension of soybean crop intensified the occurrence of several pests, including the brown stink bug Euschistus heros, which is considered one of the main soybean pests. Pest damage has become increasingly significant due to its population increase, inadequate management and resistance to insecticides, resulting in soybean productivity losses. Plants have defense mechanisms against insects, and these latter in turn try to cheat these defenses. Plant-insect interaction studies have been performed by analyzing plants defense-signaling pathways and/or pest’s digestive enzymes. However, digestive enzymes present in the gut and salivary glands of the stink bugafter his interaction with soybeans over the time has not been reported. Thus, the aim of this study was to assess the enzymatic profile present in the midgut and salivary glands of the stink bug after feeding with IAC 24 (resistant) and IAC Foscarin 31 (susceptible) soybean crop. This being the beginning of the studies in relation to the control of this pest based on biochemical aspects. Plants at the R5 stage were infected with male stink bug. Assessments were performed at different feeding times (0, 24, 48, 72 and 96 hours). After each time, midgut and salivary glands were removed. The proteolytic enzyme assays, amylase and lipase were performed according to specific protocols. Cysteine proteases activities were not detected in the midgut and salivary glands. In the midgut, total proteases activity presented difference for time, cultivar and cultivar x time interaction. Amylase activity was different only in time, meanwhile lipase differed in time and interaction. In the salivary glands, total proteases activity differed only in relation to the cultivars analyzed. Amylase activity showed significance for time and in interaction, while lipase was significant for the three sources of variations assessed. Thus, the behavior of the enzymes responsive to feeding with the different cultivars was observed. Further studies are needed to understand why the oscillations recorded under the conditions analyzed.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Spodoptera cosmioides e Spodoptera eridania (Lepidoptera: Noctuidae) são insetos causadores de prejuízos econômicos em importantes culturas, além disso, são capazes de modificar a atividade de suas enzimas proteolíticas de acordo com as dietas consumidas. Por isso, o conhecimento das enzimas digestivas e da adaptação destas à diferentes dietas tem se mostrado fundamental na criação de estratégias de controle de insetos-pragas baseadas no uso de inibidores de proteases. Neste trabalho determinamos as atividades específicas de tripsina, quimotripsina, cisteíno protease e proteases totais de S. cosmioides e S. eridania nas seguintes dietas: folhas de soja, de algodão e dieta artificial. Verificamos que as atividades enzimáticas destas lagartas tem perfis diferentes frente às dietas oferecidas. Spodoptera cosmioides quando alimentada com algodão apresentou maior atividade de tripsina, e a S. eridania apresentou atividades maiores que S. cosmioides quando alimentada com soja. Os maiores valores de atividades encontrados foram em tripsina e proteases totais, sugerindo que estas enzimas são as principais destes insetos e podem ser importantes alvos de inibição para o controle dos mesmos. Spodoptera cosmioides and Spodoptera eridania (Lepidoptera: Noctuidae) are insects that cause economic losses in important crops, and are able to modify an activity of their proteolytic enzymes according to diets consumed. Therefore, the knowledge of digestive enzymes and adaptation to different diets has been fundamental in the creation of insect-pest control strategies based on the use of protease inhibitors. In this work we determined as specific activities of trypsin, chymotrypsin, cysteine protease and total proteases of S. cosmoides and S. eridania in the following diets: soybean and cotton leaves and artificial diet. We verified that the enzymatic activities of these caterpillars have different profiles in front of the diets offered. Spodoptera cosmioides when fed with cotton showed higher trypsin activity, and S. eridania showed higher activities than S. cosmioides when fed with soybean. The highest values of activities found in researches and total proteases, suggesting that they are enzymes are the main of these insects and may be important for the definition to control them.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A intensificação da produção aquícola ocasionou maior demanda por produtos oriundos de coprodutos dos peixes, como a farinha e óleo. A preocupação socioambiental e o declínio dos estoques pesqueiros, principalmente os de origem marinha, têm restringido a produção destes coprodutos. Vários estudos estão direcionados para a utilização de fontes alternativas a estes coprodutos na confecção de dietas para os peixes, destacando as de origem vegetal. O lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) apresenta ampla distribuição geográfica, habito alimentar onívoro, maturidade sexual precoce, alto rendimento de carcaça e nos últimos anos, vem sendo proposto como modelo experimental. Portanto, com este estudo objetivou-se avaliar o efeito de fontes de óleos com diferentes composições de ácidos graxos e do desafio pelo frio em lambari-do-rabo- amarelo (Astyanax altiparanae) em fase de crescimento . O experimento foi realizado em duas fases consecutivas, ambas em delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos (óleos de peixe, soja, linhaça, palma e coco) e oito repetições, na primeira fase e três na segunda. Na primeira fase, peixes em crescimento (1,44±0,20 g e 3,23±0,20 cm) foram distribuídos em 40 aquários (20 peixes/aquário), em sistema de recirculação de água (vazão de 1 litro/min), dotados de filtro mecânico, biológico e aeração contínua. A temperatura da água foi mantida em 27,17 ± 0,92°C, o pH permaneceu em 7,6 ± 0,357, a amônia em 0,2 ± 0,11 mg/Le o oxigênio dissolvido entre 6,5 a 7,5mg/L. Os peixes foram alimentados com as dietas experimentais por 106 dias. Após este período peixes (2,69±0,87g) de três repetições por tratamento foram transferidos para o Laboratório de Bioclimatologia para a realização da segunda fase experimental (desafio pelo frio). Os peixes foram distribuídos em 15 aquários (13 peixes/aquário) e alimentados com as mesmas dietas experimentais por mais sete dias. A temperatura da água dos aquários foi mantida a 21,12 o C± 0,79°C, o pH, a amônia e o oxigênio dissolvido permaneceram em 6,85, 0,50mg/Le 7,00mg/L, respectivamente. Ao final da primeira fase experimental peixes de cinco tratamentos foram anestesiados, medidos e pesados para a realização dos seguintes parâmetros zootécnicos: ganho em peso, conversão alimentar, taxas de xv crescimento especifico, ganho em comprimento e taxa de sobrevivência. Após a biometria dos peixes, os mesmos foram eutanasiados para avaliação do rendimento de carcaça eviscerada, dos índices gonadossomático e hepatossomático e determinação do perfil de ácidos graxos. Foi coletado sangue dos peixes para a análise de glicose e lactato sanguíneo e cortisol plasmático. Fragmentos de brânquias foram coletados para análises de estresse oxidativo. Ao final da segunda fase experimental (desafio pelo frio) todos os peixes dos diferentes tratamentos também foram eutanasiados para coleta da carcaça para o perfil de ácidos graxos, sangue para as análises de glicose e lactato sanguíneos e cortisol plasmático e fragmentos de brânquias para avaliação do estresse oxidativo. A avaliação do efeito das fontes de óleo na dieta sobre as variáveis de desempenho produtivo, foi realizada por meio de análise de variância (ANOVA OneWay) e em caso de teste F significativo foi aplicado o teste de Tukeyao nível de 5% de probabilidade. Para verificar o pressuposto de normalidade dos erros foi aplicado o teste de Lilliefors. Para verificar a homogeneidade das variâncias dos erros entre os tratamentos foi aplicado o teste de Bartlett. A avaliação do efeito das fontes de óleo na dieta e do desafio pelo frio sobre os as concentrações de cortisol, glicose e lactato plasmáticos, perfil de ácidos graxos das carcaças e Parâmetros bioquímicos do estresse oxidativo foi realizada por meio de análise de variância (ANOVA Two Way). Em caso de teste F significativo foi aplicado o teste Tukey ao nível de 5% de probabilidade Houve efeito significativo das fontes de óleo apenas para a taxa de sobrevivência dos peixes (p< 0,05). Os peixes alimentados com os óleos de palma e coco apresentaram as menores taxas de sobrevivência quando comparadas com as dos peixes alimentados com as demais fontes de óleo, as quais não diferiram entre si. Não houve efeito das fontes de óleos para a taxa de sobrevivência dos peixes submetidos ao desafio pelo frio (segunda fase experimental). Houve efeito significativo das fontes de óleo para os lipídios totais (p< 0,05), onde os peixes alimentados com o óleo de coco apresentaram maior valor de lipídios totais quando comparados com aqueles alimentados com óleo de peixe, o qual não diferiu dos demais. Para os ácidos graxos saturados da carcaça dos peixes houve interação entre as fontes de óleo e o desafio pelo frio, para os ácidos graxos 12:0, 13:0, 14:0, 15:0, 16:0, 20:0 e 22:0. Para os ácidos graxos 17:0 e 18:0 houve efeito apenas da fonte de óleo. Para os ácidos graxos monoinsaturados da carcaça dos peixes houve interação entre as fontes de óleos e o desafio pelo frio para os ácidos graxos 14:1, 15:1, 16:1, 17:1, 20:1n-9 e 22:1n-9. Para o ácido graxo 18:1 houve efeito das fontes de óleos e do desafio pelo frio. Para os ácidos graxos polinsaturados houve interação entre as fontes xvi de óleo e o desafio pelo frio para os ácidos graxos 18:2n-6 e 20:3n-3. Houve efeito do desafio pelo frio para glicose e lactato sanguíneos dos peixes, com os maiores valores observados antes do desafio. Houve efeito das fontes de óleo para a atividade da enzima GST, onde os peixes alimentados com óleo de palma apresentaram maior atividade da enzima da GST do que dos peixes alimentados com os óleos de peixe, soja e linhaça. Houve efeito do desafio pelo frio para a atividade da enzima GST, com maior atividade da enzima observada antes do desafio. Com os dados obtidos conclui-se que os óleos de soja e linhaça promovem crescimento, saúde e qualidade de carcaça, equivalentes aos do óleo de peixe. Os óleos de palma e coco pioram a saúde e a qualidade da carcaça de Astyanax altiparanae em fase de crescimento. O desafio pelo frio causou redução do metabolismo e das defesas antioxidantes de Astyanax altiparanae. The intensification of aquaculture production led to increased demand for products from fish co-products, such as flour and oil. The environmental concern and the decline of fish stocks, mainly of marine origin, have restricted the production of these co-products. Several studies are directed to the use of alternatives to these co-products in the production of diets for fish, highlighting of plant origin. The lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) presents a wide geographical distribution, omnivorous feeding habit, early sexual maturity, high carcass yield and in recent years, the minnows has been proposed as an experimental model. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of sources of oils with different compositions of fatty acids and challenge the cold in lambari-do-rabo- amarelo (Astyanax altiparanae) in the growth phase. The experiment was carried out in two consecutive phases, both in a completely randomized design with five treatments (fish oils, soy, linseed, palm and coconut) and eight repetitions in the first round and three in the second. In the first phase, growth in fish (1.44 ± 0.20 g and 3.23 ± 0.20 cm) were distributed in 40 tanks (20 fish / aquarium), water recirculation system (flow rate of 1 liter / min ), equipped with mechanical filter, biological, and continuous aeration. The water temperature was maintained at 27.17 ± 0.92 ° C, the pH remained at 7.6 ± 0.357, ammonia 0.2 ± 0.11 mg / l dissolved oxygen between 6.5 to 7, 5mg / L. The fish were fed the experimental diets for 106 days. Thereafter fish (2.69 ± 0.87g) of three replicates per treatment were transferred to the Bioclimatology Laboratory for the realization of the second experimental phase. The water temperature was kept at aquariums 21,12oC ± 0.79 ° C for fish challenge to cold. Fish were distributed in 15 tanks (13 fish / aquarium) and fed with the same experimental diets for seven days. The pH, ammonia and dissolved oxygen in the water remained at 6.85, 0.50mg / Le 7,00mg / L, respectively. At the end of the first experimental phase fish five treatments were anesthetized, measured and weighed to achieve the following performance parameters: weight gain, feed conversion, specific growth rates, gains in length and survival rate. After the fish biometrics, we were euthanized for assessment of the eviscerated carcass yield, the gonadosomatic and xviii hepatosomatic indices and determination of fatty acid profile. Fish blood was collected for glucose analysis and blood lactate and plasma cortisol. Fragmenstos gills were collected for analysis of oxidative stress. At the end of the second experimental phase all the fishes of the different treatments were also euthanized for housing the collection to the fatty acid profile, blood glucose tests and blood lactate and cortisol palsmatico and gills fragments for evaluation of oxidative stress. The evaluation of the effect of oil sources in the diet on the growth performance variables was performed through analysis of variance (ANOVA OneWay) and significant F test case was applied Tukeyao test 5% level of probability. To check the errors of assumption of normality Lilliefors the test was applied. The homogeneity of error variances between treatments was applied Bartlett test. The evaluation of the effect of oil sources in the diet and challenge the cold on the concentrations of cortisol, glucose and serum lactate, fatty acid profile of carcasses and biochemical parameters of oxidative stress was performed by analysis of variance (ANOVA Two Way). In case of significant F test was applied the Tukey test at 5% probability There was a significant effect of oil supplies only for fish survival rate (p

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The spider mite Tetranychus evansi interferes in the lipoxygenases pathway of plant defenses respond where are produced jasmonic acid that activates expressing genes of proteinase inhibitors which affect the capability of digest proteins in herbivores. The not PI induction ability of T. evansi promotes his performance and reproduction but other species too like the spider mite T. urticae. Until now, there has not been study how digestive enzyme activity of these and other herbivores could be affected by T. evansi interference in tomato defense respond neither which digestive enzymes are present in this particular plant- herbivore relation what became in our research objective. Tomato plants were infested with T. evansi, T. urticae or moth larvae Tuta absoluta, while some plants were infested with a combination of T.evansi with each one of the other species simultaneously. When T. evansi was in the same plant with T. urticae the defense respond by lipoxygenases pathway were induced and the proteinase inhibitors were equal that plants attacked by only T.urticae, and plants attacked by T. evansi and T. absoluta simultaneously. T. evansi oviposition rate were only affected in plants previously attacked by T. urticae. In plants previously attacked by the combination of herbivores or just T. absoluta the oviposition rate doesn t differs of rates in clean plants, despite of high PI concentration. This suggests that T. evansi performance is affected by PI but for T. urticae plant injuries and traces and T. evansi has to overcome more factors involved in food competition. Digestive enzymes profile suggest a higher serine than cysteine proteinase activity been mainly tripsyn-like proteinases. In spider mites, tripsyn-like proteinases increase when PI were higher, possible to overcome PI toxic effects plus a higher aminoacids demand in T. evansi when competes with T. urticae for food resources. The quimotripsyn-like proteinases seems to be sensible to PI and decrease with high tripsyn-like ativity. O ácaro Tetranychus evansi interfere na resposta de defesa pela via das lipoxigenases do tomateiro, na qual ocorre a produção de ácido jasmônico que ativa os genes que expressam inibidores de proteases os quais afetam a capacidade dos herbívoros para digerir proteínas. Ao não induzir inibidores de proteases, T. evansi favorece o seu desenvolvimento e reprodução, mas também de outros herbívoros como T. urticae. Ate agora não tem sido demostrado quais enzimas digestivas e como a suas atividades em este e outros herbívoros podem ser afetados por essa interferência na reposta de defensa do tomateiro, o que consistiu em nosso objetivo de trabalho. Plantas de tomate foram infestadas com ácaros das espécies T. evansi, T. urticae e com a lagarta Tuta absoluta, outras foram infestadas com uma combinação de T. evansi com as outras duas espécies. Quando T. evansi esteve na mesma planta com T. urticae a reposta de defesa pela via das lipoxigenases foi induzida e a concentração de inibidores de proteases igual que a indução gerada por T. urticae, o mesmo quando T. evansi esteve junto com T. absoluta na planta. A oviposição de T. evansi foi afetada em plantas que foram infestadas unicamente com T. urticae, mas em plantas atacadas pela combinação de herbívoros ou unicamente por T. absoluta a oviposição não diferiu com aquela em plantas limpas, apesar das altas concentrações de IP. Isto sugere que a oviposição de T. evansi não é afetada só pelos IP, mas possivelmente pelos danos e rastros deixados por T. urticae nas folhas. O perfil das enzimas digestivas indica uma maior atividade de serino proteases que de cisteíno proteases, sendo as Tripsinas-like as de maior atividade. Nos ácaros as tripsinas incrementam com a concentração de IP, possivelmente pela necessidade de superar o efeito deletério destes e no caso de T. evansi de digerir mais aminoácidos quando compete com T. urticae. As quimotripsinas-like parecem ser mais sensíveis aos IP e diminuir com o incremento da atividade das tripsinas.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico The dung beetle, from the subfamily Scarabaeinae, use feces and carrion as a food source and for their breeding. The ephemeral nature of these resources creates a strong intra and interspecific competition between species that use them. The rolling of dung is a mechanism to relocate food and hence avoid competition. The main interspecific competitors of the roller beetles are flies, including those belonging to the Calliphoridae family. To prevent attack of their food by flies, the dung beetles can cover the ball with a layer of soil. However, this does not seem to be the only mecanism, since when scrolling the ball they may secrete substances that impregnate the ball and possibly act as chemical defense against these competitors. Thus, the present study investigated the effect of rolled food balls and pygidiales secretions produced by the copro-necrophagous beetle Deltochilum furcatum on oviposition of Lucilia cuprina, a fly with high preference to oviposite in carrion. The results showed that, when the food ball is rolled, females and males of D. furcatum impregnate substances to the ball of food that significantly affects L. cuprina oviposition. The male pygidial secretion presented a greater dissuasive effect on L. cuprina compared to the female pygidial secretion. It is possible that the pygidial secretion acts together with other secretions produced by D. furcatum as allomones in the oviposition of L. cuprina and other potential competitors. In situations where there is no possibilities of resource selection for oviposition, the pygidiales secretions of males and females of D. furcatum show no dissuasive effects on L. cuprina. The results are discussed in the context of the biological behavior of dung beetles and the possibility of using glandular secretions during nesting. Os besouros roladores da subfamília Scarabaeinae utilizam fezes e carcaças como fonte de alimento e para a reprodução. A natureza efêmera desses recursos dá origem a uma forte competição intra e interespecífica entre os organismos que os utilizam, de modo que rolar o alimento é um mecanismo e de realocação do recurso para evitar a competição. Os principais concorrentes interespecíficos dos besouros roladores são os dípteros, incluindo os da família Calliphoridae. Para prevenir ataques de seu alimento por moscas, os besouros roladores podem cobrir a esfera com uma camada de terra. No entanto, isso parece não ser o único mecanismo, já que durante a rolagem podem secretar substâncias que impregnam na bola e que, possivelmente, agem como defesa química contra esses concorrentes. Assim, o presente estudo investigou o efeito de bolas de alimento roladas e das secreções pigidiais produzidas pelo besouro rolador copro-necrófago Deltochilum furcatum sobre o a oviposição de Lucilia cuprina, uma mosca com preferência de postura de ovos em carniça. Os resultados mostraram que, durante a rolagem do alimento, machos e fêmeas de D. furcatum impregnam substâncias à esfera de alimento que afeta significativamente a oviposição de L. cuprina. A secreção pigidial do macho apresentou um efeito dissuasório, afetando a oviposição de L. cuprina em comparação com a secreção pigidiA secreção pigidial do macho apresentou um efeito dissuasório, afetando a oviposição de L. cuprina em comparação com a secreção pigidial da f mea. E c ̃ c ̃ e ıvel a secre ̧ao pigidial aja em conjunto com outrasal da fêmea. É possível que a secreção pigidial aja em conjunto com outras secreções produzidas por furcatum atuando como alomônios na oviposição de L. cuprina e de outros possíveis competidores. Em situações onde não há escolha dos recursos para a oviposição, L. cuprina não demonstra um efeito dissuasivo às secreções pigidiais de machos e fêmeas de D. furcatum. Os resultados são discutidos no contexto do comportamento biológico dos besouros roladores e da possível utilização de secreções glandulares durante a nidificação.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico The caterpillar, Anticarsia gemmatalis, is considered a major pest of soybean. The damage caused by this pest associated with the economic importance of soybean cultivation in Brazil and the world to promote the search for alternatives to control this insect. Strategies to control insect pests based on the use of protease inhibitors have been studied and knowledge of digestive enzymes has proved crucial. In this context, this study aimed to identify genes for serine proteases of A. gemmatalis and evaluate your expression face of inhibitors of serine proteases as well as purify and characterize serine proteases produced by the intestinal microbiota of the soybean caterpillar. Genes were isolated three distinct serine proteases of the genome of soybean caterpillar called Agem 1, Agem 2 and Agem 3, indicating that the genes of serine proteases of A. gemmatalis are organized into multigene family. The three genes showed high identity with trypsins from other insects of the order Lepidoptera. It was found that gene expression Agem 2 excelled compared to the genes Agem 1 and Agem 3. The sequences described herein have shown to be sensitive genes trypsins and/or insensitive to the serine protease inhibitor benzamidine. The synthetic inhibitor berenil was potentially effective in the suppression of genes trypsins isolated in this study. The genes of isolates showed trypsin to be sensitive to inhibitors of soybean protein SKTI and SBBI decreasing its expression throughout the treatment. These studies show that the significance of differential expression of digestive proteases before protease inhibitors can never be underestimated. The purification process of enzymes produced by Bacillus cereus, Staphylococcus xylosus, Enterococcus gallinarum, and Enterococcus mundtii isolated from the intestinal tract of A. gemmatalis was performed on affinity chromatography (p-aminobenzamidine). The molecular weights of the enzymes were estimated to approximately 25 kDa (SDS-PAGE). The enzymes were more active in temperature to 40 ° C and pH 7.5 for B. cereus, pH 10.0 for E.munditti and pH 8.5 for S.xylosus and E.galinarum. The calcium ions did not affect the enzyme activity at the concentrations tested. The values of KM serine protease of E. gallinarum, B. cereus, S. xylosus and E. mundtii were 0.35 mM, 0.18 mM, 0.21 mM and 0.22 mM, respectively. The enzymes were sensitive to inhibition by inhibitors of serine proteases typical and trypsin, as Aprotinin, Berenil and SKTI. His activities were not altered by inhibitors chymotrypsin of TPCK, Pepstatin A of aspartyl proteases, E-64 of cysteine proteases and EDTA of metalo-proteases. These results together demonstrate that the bacteria synthesize and secrete the intestinal lumen A. gemmatalis trypsin-like enzymes with similar characteristics to those produced by the insect. Through the knowledge gained in this work are new prospects for conducting additional research that will contribute to the development of pest control strategies based on the inhibition of digestive proteases, both produced by the insect as for their intestinal microbiota. A lagarta da soja, Anticarsia gemmatalis, é considerada uma das principais pragas da cultura da soja. Os danos causados pelo ataque deste inseto associado à relevância econômica do cultivo da soja para o Brasil e para o mundo fomentam a busca por alternativas no controle deste inseto. Estratégias de controle de insetos-pragas baseadas no uso de inibidores de proteases têm sido estudadas e o conhecimento das enzimas digestivas tem se mostrado fundamental. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo identificar genes de serino-proteases de A. gemmatalis e avaliar sua expressão diante de inibidores de serino-proteases bem como purificar e caracterizar serino-proteases produzidas pela microbiota intestinal da lagarta da soja. Foram isolados três genes distintos de serino proteases do genoma da lagarta da soja chamados de Agem 1, Agem 2 e Agem 3, indicando que os genes de serino-proteases de A. gemmatalis estão organizados em família multigênica. Os três genes mostraram alta identidade com tripsinas de outros insetos da ordem Lepidoptera. Foi verificado que a expressão do gene Agem 2 se sobressaiu em relação ao gene Agem 1 e Agem 3. As sequências descritas neste trabalho evidenciaram ser genes de tripsinas sensíveis e/ou insensíveis ao inibidor de serino-protease Benzamidina. O inibidor sintético Berenil foi potencialmente eficiente na supressão dos genes de tripsinas isolados neste estudo. Os genes de tripsinas isolados mostraram serem sensíveis aos inibidores proteicos da soja SKTI e SBBI, diminuindo sua expressão durante o tratamento. Esses estudos mostram que o significado da expressão diferencial de proteases digestivas diante de inibidores de proteases nunca pode ser subestimado. O processo de purificação das enzimas produzidas por Bacillus cereus, Staphylococcus xylosus, Enterococcus mundtii e Enterococcus gallinarum isoladas do trato intestinal de A. gemmatalis, foi realizado em cromatografia de afinidade (p-aminobenzamidina). As massas moleculares estimadas das enzimas foram de aproximadamente 25 kDa (SDS-PAGE). As enzimas apresentaram maior atividade em temperatura a 40ºC e em pH 7,5 para B. cereus, pH 10,0 para E.munditti, e pH 8,5 para S.xylosus e E.galinarum. Os íons cálcio não afetaram a atividade enzimática nas concentrações testadas. Os valores de KM da serino protease de E. gallinarum, B. cereus, S. xylosus e E. mundtii foram de 0,35mM, 0,18 mM, 0,21 mM e 0,22 mM, respectivamente. As enzimas foram sensíveis à inibição por inibidores típicos de serino- proteases e tripsina, como Aprotinina, Berenil e SKTI. Suas atividades não foram alteradas pelos inibidores TPCK de quimiotripsina, Pepistatina A de aspartil-proteases, E-64 de cisteíno-proteases e EDTA de metalo-proteases. Esses resultados em conjunto demonstram que as bactérias sintetizam e excretam no lúmen intestinal de A. gemmatalis enzimas tripsinas-like com características semelhantes às produzidas pelo próprio inseto. Através do conhecimento obtido neste trabalho surgem novas perspectivas para a realização de pesquisas complementares que poderão contribuir para o desenvolvimento de estratégias de controle de pragas baseadas na inibição de proteases digestivas, tanto produzidas pelo inseto quanto pela sua microbiota intestinal.

Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais Hormesis is a widely used in toxicology to describe the biphasic dose-response curve, where exposure to chemical or physical stress induces a stimulatory or inhibitory response dose-dependent. This phenomenon is typically described by a nonlinear dose-response where exposure to low levels of stress induces a stimulatory effect while high levels of exposure cause inhibition or toxicity. Two reparameterized logistic-logarithmic models were used to describe deltamethrin dose-response in Sitophilus zeamais, two insecticide-resistant strains and one insecticide-susceptible strain. Moreover, the profile of protein expression was examined in three populations. The biphasic dose-response was observed in three tested strains. It was observed several changes in protein profiling expression. In insecticide-resistant strains prevailed up-regulation protein expression (increase in spot volume) while in the insecticide-susceptible strain was observed down-regulation expression in most spots. This reduction may be due to a more extend refractory period and consequently greater delay in restoring the homeostatic state in the insecticide-susceptible strain. Few spots were identified as the expression of new proteins in the three strains. The Jacarezinho strain showed the largest number of protein spots, were six spots in the Jacarezinho strain, one spot in the Juiz de For a strain and no spot in the Sete Lagoas susceptible strain. This wide variation reflects the difficulty of relating the molecular events with the responses obtained in the dose-response curves. Although the biological responses can be observed with relative difficulty, the myriad of molecular events in response to changes in the environment make it extremely difficult to identify the mechanistic events involved in the stress response. The change in the profile of protein expression between populations reflects the difficulty in understanding the mechanisms involved in the hormesis. The exposure to even moderate doses of stress induces many changes in the profiling protein expression. In a next step the identification of differentially expressed proteins would be of great importance to check whether groups of common proteins among populations are affected. Besides the greater magnitude in population growth, moderate doses of deltamethrin resistant populations have a higher profile changes in protein expression and this behavior seems to be dependent on life history parameters. Hormese é um termo amplamente utilizado na toxicologia para descrever o comportamento bifásico da curva dose-resposta, onde a exposição ao estresse físico ou químico induz uma resposta estimulatória ou inibitória dose-dependente. O fenômeno é caracteristicamente descrito por um modelo dose-resposta não-linear onde a exposição a baixos níveis de estresse induz um efeito estimulatório enquanto altos níveis de exposição provocam inibição ou toxicidade. Dois modelos logarítmico-logísticos reparameterizados foram utilizados para avaliar bioensaios dose-resposta em Sitophilus zeamais, duas populações resistentes e uma susceptível a inseticidas. Além disso, o perfil de expressão de proteínas foi analisado nas três populações. A curva dose-resposta foi bifásica para as três populações. Foi observado várias alterações no perfil de expressão de proteínas. Nas populações resistentes prevaleceu o aumento de expressão (aumento no volume do spot) enquanto na população susceptível foi observado redução de expressão na maioria dos spots diferencialmente expressos. Essa redução pode ser devido a um período refratário mais prologando nessa população e consequentemente maior retardo no restabelecimento do estado homeostático. Poucos spots foram identificados como expressão de novas proteínas nas três populações. A população de Jacarezinho foi a que apresentou o maior número de spots com expressão de novas proteínas, foram seis spots para população de jacarezinho, um spot para população de Juiz de Fora e nenhum spot na população susceptível de Sete Lagoas. Essa grande variação reflete a dificuldade de relacionar os eventos moleculares com as respostas obtidas nas curvas dose-resposta. Embora as respostas biológicas possam ser observadas com relativa dificuldade, a miríade de eventos moleculares em resposta as variações do ambiente tornam extremamente difícil identificar os eventos mecanisticos envolvidos com a resposta ao estresse. A variação no perfil de expressão de proteínas entre populações reflete a dificuldade para compreensão dos mecanismos envolvidos com o efeito hormético. A exposição mesmo a doses moderadas de estressse induziu muitas alterações no perfil de expressão de proteínas. Em uma próxima etapa a identificação das proteínas diferencialmente expressas seria de grande importância para verificarmos se grupos de proteínas comuns entre as populações são afetados. Além de apresentar maior magnitude no incremento populacional, em doses moderadas de deltametrina, as populações resistentes apresentam maior alteração no perfil de expressão de proteínas e esse comportamento parece ser dependente dos parâmetros de história de vida.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The protease inhibitors have protective effect of plants against damage from various types of agricultural pests, inhibiting significantly the activity of proteolytic enzymes in the gut of insects. Ingestion of protease inhibitors leads insects to use free amino acids in the synthesis of more digestive proteases, in order to compensate forms of these enzymes unavailable to catalysis, precisely because they are in the form of enzyme-inhibitor complex (EI). Consequently, instead of using bioavailable amino acids for synthesis of proteins necessary for growth, development, maintenance and breeding, insects using the amino acid reservation for biosynthesis of new proteases to perform the hydrolysis of the diet protein. The biochemical and kinetic characterization of hydrolytic enzymes in the gut of insects has been made to understand the complex system of proteases of insects from the view of the structure/function. Thus, the active centers of these enzymes can be mapped through enzyme kinetics and protein chemistry, with the goal of producing protease inhibitors specific for each. In this work we selected protease inhibitors SBBI, SKTI and E-64 in order to evaluate its effects on larval development of Anticarsia gemmatalis and on the activity of some digestive enzymes such as total proteases, trypsin-like serine proteases and cysteine proteases. These inhibitors were added individually on artificial diet at a concentration of 0.1% (w/v) and first instar larvae were fed to complete their larval cycle. The three inhibitors used caused injury in the development of larvae of A. gemmatalis, increasing the larval cycle and affecting the weight gain of the larvae to the pupal stage. The concentration of PI used was insufficient to cause the inhibitory effect of proteases present in the gut of A. gemmatalis. But the profile of proteases coincided with the profile of specific proteases trypsin-like and cysteine proteases, and the activity serine-proteases were higher than cysteine proteases. It was also done partial purification of midgut cysteine proteases of Anticarsia gemmatalis using differential precipitation with 30 - 60% (NH4)2SO4 and affinity chromatography with aprotinin-agarose column. The proteins not bound to the column, ie all the proteins present in the crude extract with the exception of serine proteases associated with aprotinin-agarose, which showed proteolytic activity were pooled enzyme and characterized using the synthetic substrate L-BApNA in the presence the serine protease inhibitor benzamidine. Observed peak activity at pH values 4.0, 5.5 and 8.0, being the best activity in pH 8.0. Regarding the influence of temperature, we observed two more discrete peaks activity at 20°C and between 35 - 45ºC, and a pronounced peak of activity 55 - 60ºC. The KM app obtained was 0.74 mM and Vmax app was 0.8 μM.min-1. Analysis of the calcium ions effect showed that partially purified cysteine proteases are calcium-dependent and showed a better activity in 30 mM CaCl2. The presence of the serine protease inhibitor benzamidine and the reducing agent DTT in the reaction medium together with the two inhibitors of serine proteases TLCK and aprotinin proved the activity of cysteine proteases tested in this study. Os inibidores de proteases têm efeito protetor de plantas contra danos causados por vários tipos de pragas agrícolas, inibindo, significativamente, a atividade proteolítica de enzimas presentes no intestino dos insetos. A ingestão de inibidores de proteases leva os insetos a utilizarem aminoácidos livres na síntese de mais proteases digestivas, com a finalidade de compensar as formas dessas enzimas indisponíveis à catálise, justamente por estas estarem na forma do complexo enzima-inibidor (EI). Consequentemente, ao invés de utilizarem os aminoácidos biodisponíveis para a síntese de proteínas necessárias ao seu crescimento, desenvolvimento, manutenção e reprodução os insetos usam sua reserva aminoacídica para a biossíntese de novas proteases para realizar a hidrólise de sua dieta proteica. A caracterização bioquímica e cinética de enzimas hidrolíticas presentes no intestino de insetos tem sido realizada para se entender o complexo sistema de proteases dos insetos sob o ponto de vista da relação estrutura/função. Dessa forma, os centros ativos de tais enzimas poderão ser mapeados através de cinética enzimática e química de proteínas, com o objetivo de produzir inibidores específicos para cada protease. Neste trabalho foram selecionados os inibidores de proteases SBBI, SKTI e E-64, a fim de avaliar seus efeitos sobre o desenvolvimento larval de Anticarsia gemmatalis e sobre a atividade de algumas enzimas digestivas, tais como proteases totais, serino-proteases tripsinas-like e cisteíno-proteases. Esses inibidores foram adicionados individualmente na dieta artificial na concentração de 0,1% (p/v) e lagartas de 1º ínstar foram alimentadas até completarem seu ciclo larval. Os três inibidores utilizados causaram prejuízo no desenvolvimento de larvas de A. gemmatalis, aumentando o ciclo larval e afetando o ganho de peso dessas larvas até a fase pupal. A concentração de IP s utilizada foi insuficiente para causar efeito inibitório das proteases presentes no intestino de A. gemmatalis. Porém o perfil de proteases coincidiu com o perfil das proteases específicas tripsina-like e cisteíno-proteases, sendo que as serino-proteases apresentaram maior atividade do que as cisteíno-proteases. Foi realizada também a purificação parcial de cisteíno-proteases do intestino médio de Anticarsia gemmatalis utilizando-se precipitação diferencial com 30 60% de (NH4)2SO4 e cromatografia de afinidade com coluna de aprotinina-agarose. As proteínas não ligadas à coluna, ou seja, todas as proteínas presentes no extrato bruto com exceção das serinoproteases ligadas à aprotinina-agarose, que apresentaram atividade proteolítica, foram reunidas num pool enzimático e caracterizadas utilizando o substrato sintético L-BApNA na presença do inibidor de serino-proteases benzamidina. Observaram-se picos de atividade nos valores de pH 4,0, 5,5 e 8,0, sendo o pH 8,0 o de melhor atividade. Com relação à influência da temperatura, observaram-se dois picos mais discretos de atividade a 20ºC e entre 35 45ºC, e um pico de atividade pronunciada na faixa entre 55 60ºC. O KM app obtido foi de 0,74 mM e a Vmax app foi 0,8 M.min-1. A análise do efeito de íons cálcio mostrou que as cisteíno-proteases parcialmente purificadas são cálcio-dependentes e apresentaram melhor atividade em 30 mM de CaCl2. A presença do inibidor de serino-proteases benzamidina e do agente redutor DTT no meio reacional, juntamente com os dois inibidores de serino-proteases aprotinina e TLCK comprovam a atividade de cisteíno-proteases testadas no presente trabalho.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Physical and chemical characteristics of host plants can modulate the life history and the abundance of herbivorous insects, because the qualitative and quantitative defenses and the nutritional content vary with the plant development. Although plants and newer leaves showing higher concentrations of defensive chemical compounds, specialist insects showing feed preference by these vegetal tissues, rich in nitrogen compounds, water and nutrients. Plutella xylostella, also known as diamondback moth, is a cosmopolitan insect, specialist in plants of the Brassicaceae family, which characterized itself by show glucosinolates as secondary metabolite of defense. By the way, the subjects of this work were to evaluate: (i) if the leaf ageing affects the performance, the food and oviposition preference of P. xylostella; (ii) what chemical characteristics of the plant varying with your ageing and affects the insect development. For this purpose, P. xylostella were fed with leaves of three age categories (young, mature and senescent) of four Brassica species: collard (Brassica oleracea var. acephala), cauliflower (B. oleracea var. botrytis), mustard (B. juncea) and radish (Raphanus sativus). All the parameters evaluated of insect life history were affected by the leaf ageing of host plants. Were verified a decrease in percentage of survival of first instar larval and the mature phase, increase in the duration of larval phase, decrease of reproductive success and the potential population growth. The values founded for fecundity were statistically different for mustard and radish, and decreasing with the leaf ageing. There were no significantly difference for collard and cauliflower. In multiple choice tests, larvae of second instar preferred fed in young leaves. However, adult moths didn t show the same pattern for oviposition. In collard and cauliflower, moths oviposited in leaves of worse quality and, in mustard and radish, the response were opposite with the females laying eggs in leaves of better quality. In regard to chemical characteristics of plants, was observed that the crude and unavailable protein decreasing with the leaf ageing. The content of neutral detergent fiber, hemicellulose, mineral matter and total carbohydrates were positively correlated to the leaf age. The leaf ageing affected negatively the performance of P. xylostella can be correlated to choice of first instar larvae and the plant quality. However, there was no general correlation between leaf ageing and oviposition preference that will be explained by additional factors, as microclimate or places without attack of natural enemies. Características físicas e químicas das plantas hospedeiras podem modular a história de vida e a abundância de insetos herbívoros, pois as defesas qualitativas, quantitativas e o conteúdo nutricional variam com o desenvolvimento da planta. Embora plantas e folhas mais jovens apresentem maiores concentrações de compostos químicos de defesa, insetos especialistas apresentam preferência alimentar por esses tecidos vegetais, pois estes são mais ricos em compostos nitrogenados, água e nutrientes. Plutella xylostella, também chamada de traça das crucíferas, é um inseto cosmopolita, especialista em plantas da família Brassicaceae que se caracterizam por apresentar os glicosinolatos como metabólito secundário de defesa. Nesse sentido, os objetivos desse trabalho foram avaliar: (i) se o envelhecimento foliar afeta a performance e a preferência alimentar e de oviposição de P. xylostella; (ii) quais as características químicas da planta variam com seu envelhecimento e afetam o desenvolvimento do inseto. Para esse fim, P. xylostella, foi alimentada com folhas de três classes etárias (novas, maduras e senescentes) de quatro espécies de brássicas: couve (Brassica oleracea var. acephala), couve-flor (B. oleracea var. botrytis), mostarda (B. juncea) e rabanete (Raphanus sativus). Todos os parâmetros avaliados da história de vida do inseto foram afetados pelo envelhecimento foliar das plantas hospedeiras. Foi verificada redução no percentual de sobrevivência das larvas de primeiro instar e da fase imatura, aumento da duração da fase larval, redução no sucesso reprodutivo e no potencial de crescimento populacional. Os valores encontrados para fecundidade diferiram estatisticamente para mostarda e rabanete, e decresceram com o envelhecimento foliar. Não houve diferença significativa para couve e couve-flor. Em testes de múltipla escolha, larvas de segundo instar preferiram se alimentar em folhas novas. Por outro lado, mariposas adultas não apresentaram o mesmo padrão para oviposição. Em couve e couve-flor, as mariposas depositaram seus ovos nas folhas de pior qualidade e, em mostarda e rabanete, estas apresentaram resposta oposta, ovipositando em folhas de melhor qualidade. Quanto às características químicas das plantas, observou-se que as concentrações de proteína total e de proteína indisponível diminuíram com o envelhecimento foliar. O conteúdo de fibra em detergente neutro, hemicelulose, matéria mineral e carboidratos totais foram diretamente proporcionais à idade das folhas. O envelhecimento foliar afetou negativamente a performance de P. xylostella podendo estar correlacionado à escolha das lagartas de primeiro instar e à qualidade das plantas. Contudo, não há uma correlação geral entre envelhecimento foliar e preferência de oviposição, o que poderia ser explicado por fatores adicionais, como microclima ou locais livres do ataque de inimigos naturais.