Aim. The system of HPLC-analyzer MiLiChrome® A-02 is widely used in Ukrainian laboratories of forensic toxicology. The purpose is to apply the HPLC-analyzer system for secnidazole quantitative determination in biological liquids and carry out validation of the developed procedures.Methods. Sample preparation of blood and urine was carried out in three ways – 1) liquid-liquid extraction with organic solvents immiscible with water, 2) amphiphylic solvents extraction and salting-out with ammonium sulphate, 3) complex application of liquid-liquid extraction with organic solvents immiscible with water and amphiphylic solvents extraction with salting-out. Chromatographic conditions: column – Æ2´75 mm, ProntoSIL 120-5-C18 AQ, 5 μm; temperature – 40°С; flow rate – 100 μl/min; Eluent A – 0.2 M LiClO4 – 0.005 M HClO4; Eluent B – acetonitrile; elution mode – linear gradient; detection – UV, 277 nm; volume of injection – 2 μl.Results. Validation of all developed procedures has been carried out by such parameters as specificity, recovery, linearity, accuracy and precision in the variant of the method of standard. The results of analysis have shown the absence of peaks with the retention time, which is coincident with the secnidazole retention time, on the chromatograms of blank-samples for all variants of procedures of analyte isolation. All procedures of sample preparation show the high efficiency of secnidazole isolation both for blood and urine (at the level of 90 %). All examined procedures are characterized by the acceptable parameters of linearity, within-run and between-run accuracy and precision.Conclusions. The set of HPLC-procedures of secnidazole quantitative determination in blood and urine has been developed. Validation of the developed procedures has been carried out; isopropanol application in the acid medium is optimal for biological liquids sample preparation, Цель. Система ВЭЖХ-анализатора MiLiChrome® A-02 широко используется в украинских лабораториях судебно-медицинской токсикологии. Цель – применить систему ВЭЖХ-анализатора для количественного определения секнидазола в биологических жидкостях и провести валидацию разработанных методик.Методы. Пробоподготовка крови и мочи осуществлялась тремя способами: 1) жидко-жидкостная экстракция органическими растворителями, не смешивающимися с водой, 2) экстракция амфифильными растворителями и высаливание сульфатом аммония, 3) комплексное применение жидко-жидкостной экстракции органическими растворителями, не смешивающимися с водой, и амфифильными растворителями с последующим высаливанием. Условия хроматографирования: колонка – Æ2´75 мм, ProntoSIL 120-5-C18 AQ, 5 мкм; температура – 40°С; скорость потока – 100 мкл/мин.; элюент А – 0,2 М LiClO4 – 0,005 М HClO4; элюент Б – ацетонитрил; режим элюирования – линейный градиент; детектирование – УФ, 277 нм; объем пробы – 2 мкл.Результаты. Валидация всех разработанных методик проводилась по таким параметрам, как специфичность, степень извлечения, линейность, правильность и прецизионность в варианте метода стандарта. Результаты анализа показали отсутствие пиков с временем удерживания, которое совпадает со временем удерживания секнидазола, на хроматограммах blank-образцов для всех вариантов способов пробоподготовки. Все процедуры пробоподготовки показали высокую эффективность извлечения секнидазола как для крови, так и для мочи (на уровне 90%). Все рассмотренные процедуры характеризуются приемлемыми параметрами линейности, within-run и between-run правильности и прецизионности.Выводы. Разработан комплекс ВЭЖХ-методик количественного определения секнидазола в крови и моче. Проведена валидация разработанных методик; применение изопропанола в кислой среде оптимально для пробоподготовки биологических жидкостей, Мета. Система ВЕРХ-аналізатора MiLiChrome® A-02 широко використовується в українських лабораторіях судово-медичної токсикології. Мета – застосувати систему ВЕРХ-аналізатора для кількісного визначення секнідазолу в біологічних рідинах і провести валідацію розроблених методик.Методи. Пробопідготовка крові і сечі здійснювалася трьома способами: 1) рідко-рідинна екстракція органічними розчинниками, що не змішуються з водою, 2) екстракція амфіфільними розчинниками і висолювання амоній сульфатом, 3) комплексне застосування рідко-рідинної екстракції органічними розчинниками, що не змішуються з водою, і амфіфільними розчинниками з наступним висолюванням. Умови хроматографування: колонка – Æ2´75 мм, ProntoSIL 120-5-C18 AQ, 5 мкм; температура – 40°С; швидкість потоку – 100 мкл/хв.; елюент А – 0,2 М LiClO4 – 0,005 М HClO4; елюент Б – ацетонітрил; режим елюювання – лінійний градієнт; детектування – УФ, 277 нм; об’єм проби – 2 мкл.Результати. Валідація всіх розроблених методик проводилась за такими параметрами, як специфічність, ступінь ізолювання, лінійність, правильність і прецизійність у варіанті методу стандарту. Результати аналізу показали відсутність піків з часом утримування, який співпадає з часом утримування секнідазолу, на хроматограмах blank-зразків для всіх варіантів способів пробопідготовки. Всі процедури пробопідготовки показали високу ефективність ізолювання секнідазолу як для крові, так і для сечі (на рівні 90%). Всі розглянуті процедури характеризуються прийнятними параметрами лінійності, within-run і between-run правильності і прецизійності.Висновки. Розроблено комплекс ВЕРХ-методик кількісного визначення секнідазолу в крові і сечі. Проведено валідацію розроблених методик; застосування ізопропанолу в кислому середовищі оптимальне для пробопідготовки біологічних рідин