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Garlic cultivars are sexually sterile under standard growth conditions, with direct implications for commercial production costs as well as breeding programs. Garlic is propagated commercially via bulblets, which facilitates disease transmission and virus load accumulation over vegetative generations. Tissue culture produces virus-free clones that are more productive, while keeping the desired traits of the cultivar. Consequently, this technique allows studies of garlic genetics as well as guarantees genetic conservation of varieties. We aimed at analyzing the in vitro regeneration of eight marketable cultivars of garlic using root segments as explants. For each genotype, bulblet-derived explants were isolated and introduced into MS medium supplemented with 2,4-D and 2-iP. Calli were transferred to MS medium supplemented with 8.8 mM BAP and 0.1 mM NAA (regeneration medium A), or with 4.6 mM kinetin alone (regeneration medium B). The calli were then evaluated for regeneration frequency after sixty days of in vitro cultivation. The noble cultivar 'Jonas' presented the highest rates of plant regeneration among the cultivars tested. The medium A, which contained auxin and cytokinin, induced the highest regeneration rates of all cultivars. The process described herein is simple, reproducible and can potentially be used as a tool in molecular breeding strategies for other marketable cultivars and genotypes of garlic. Cultivares de alho são sexualmente estéreis sob condições padrão de cultivo, com implicações diretas nos custos de produção comercial, bem como em programas de melhoramento. O alho é comercialmente propagado por meio de bulbilhos, o que facilita a transmissão de doenças e leva ao acúmulo de cargas virais ao longo das gerações. A cultura de tecidos produz clones livres de vírus que são mais produtivos, mantendo as características desejadas da cultivar. Consequentemente, esta técnica permite estudar a genética do alho, bem como garantir a conservação genética das variedades. Nosso objetivo foi analisar a regeneração in vitro de oito cultivares comerciais de alho usando segmentos de raiz como explante. Para cada genótipo, explantes derivados de bulbilho foram isolados e introduzidos em meio MS suplementado com 2,4-D e 2-iP. Calos foram transferidos para meio MS suplementado com 8,8 mM BAP e 0,1 mM NAA (meio de regeneração A), ou com 4,6 mM cinetina somente (meio de regeneração B). Os calos foram avaliados quanto à frequência de regeneração após sessenta dias de cultivo in vitro. A cultivar nobre 'Jonas' apresentou as maiores taxas de regeneração entre as cultivares testadas. O meio de cultura A, o qual continha auxina e citocinina, induziu as maiores taxas de regeneração em todas as cultivares. O processo aqui descrito é simples, reprodutível e pode ser usado potencialmente como uma ferramenta em estratégias de melhoramento para outras cultivares comerciais e genótipos de alho.