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Shiga toxin-producing E. coli (STEC) are isolated from human patients with bloody diarrhea, hemorrhagic colitis (HC), and hemolytic uremic syndrome (HUS). In the last years, the infections with non-O157 serotypes are increasing their frequency of association with human disease. STEC produce Shiga toxin (Stx) and other virulence factors that could contribute to human pathogenesis. Cattle are the main reservoir and the transmission to humans is through the consumption of undercooked meat, non-pasteurized dairy products, and vegetables or water contaminated with feces. We have previously determined that O130:H11 and O178:H19 serotypes were the most prevalent in dairy cows from Argentina. In the present study, 37 and 25 STEC isolates from dairy cows belonging to O130:H11 and O178:H19 serotypes, respectively, were characterized regarding to their cytotoxicity on Vero cells, stx subtypes, presence of sab and typing by multiple-locus variable-number tandem repeat analysis (MLVA). All strains demonstrated a cytotoxic effect, and in O130:H11 isolates, stx2EDL933 was the predominant subtype. In O178:H19 isolates the main stx2 subtype was stx2vha. The sab gene was detected in 65 and 24% of the isolates belonging to O130:H11 and O178:H19, respectively. Only one MLVA profile was identified among the O130:H11 isolates meanwhile 10 MLVA profiles were detected among the O178:H19 isolates which were grouped in two main clusters. In conclusion, our data show that O130:H11 and O178:H19 STEC isolates encode virulence factors associated with severe human disease and both serotypes should be considered for routinely testing. Our subtyping experiments showed that isolates could be distinguished based on the stx2 subtype and the presence/absence of sab gene, and for isolates belonging to O178:H19, also when the MLVA type was considered. However, MLVA subtyping of O130:H11 isolates will require the development of more specific markers. Fil: Fernandez, Daniel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Krüger, Alejandra. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina Fil: Polifroni, Rosana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Bustamante, Ana Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Etcheverría, Analía Inés. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina Fil: Lucchesi, Paula Maria Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Parma, Alberto Ernesto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina Fil: Padola, Nora Lia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina

The infrageneric classification of Hybanthus subgen. Ionidium (Violaceae) is unclear and needs to be redefined. In the present study, it is proposed to be separated into five clearly distinct sections, based on the leaf micromorphology, according to the presence or absence of different trichomes and papillae. Scanning electron microscopy provided evidence supporting changes in the systematics of Hybanthus subgen. Ionidium. Five well-defined leaf micromorphological types were identified for the South American species studied. Additionally, three new sections are established in this study: Hybanthus sect. Ionidium, Hybanthus sect. Parviflorae and Hybanthus sect. Pombaliae. Hybanthus atropurpureus is designated as the lectotype of Hybanthus sect. Micranthae. Fil: Seo, Micaela Noemi. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Ecología, Genética y Evolución. Laboratorio de Citogenética y Evolución; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Fisiológicas y Ecológicas Vinculadas a la Agricultura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía; Argentina Fil: Sanso, Andrea Mariel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Ecología, Genética y Evolución. Laboratorio de Citogenética y Evolución; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Xifreda, Cecilia Carmen. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina

En la región de la pampa deprimida, debido al déficit de leguminosas nativas de los pastizales naturales, Lotus tenuis Waldst & Kit. y L. corniculatus L. son utilizadas como especies forrajeras por sus buenas cualidades nutritivas y preferencia animal. Se trata de especies de gran interés agronómico, estrechamente relacionadas, con gran similitud fenotípica pero con distintas aptitudes forrajeras, ecológicas y valor económico. Las semillas de estas especies de Lotus no manifiestan características macromorfológicas que permitan diferenciarlas. Tampoco pueden ambas especies identificarse tempranamente en forma concluyente, considerando las características morfológicas de las plántulas. Nuestra investigación surge como respuesta a la necesidad de diferenciar estas dos especies en el estado de semilla o durante la germinación utilizando metodologías que resulten suficientemente rápidas, confiables, económicas y reproducibles. Para ello, se llevaron a cabo estudios cromosómicos. Se lograron estandarizar las técnicas citogenéticas para estudiar cromosómicamente a L. tenuis (2n = 12) y a L. corniculatus (2n = 24). Los cultivares estudiados resultaron ser homogéneos en relación al número cromosómico aunque se encontraron algunos individuos con números diferentes. El análisis de muestras provistas por laboratorios privados reveló que se distribuye bajo distintas denominaciones la misma especie. Suele comercializarse L. corniculatus bajo la denominación de L. tenuis. El análisis cromosómico, brinda resultados rápidos, confiables y reproducibles para la diferenciación específica entre ambas especies. Las técnicas citogenéticas utilizadas podrían implementarse en laboratorios con un limitado equipamiento y un relativo bajo costo. Fil: Celotto, Adriana Inés. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Laboratorio Horizonte; Argentina Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina

En base al análisis de ejemplares de herbario y sobre la bibliografía disponible se revisaron críticamente todas las especies de Alstroemeriaceae existentes en Argentina, Chile, Paraguay, Uruguay y sur de Brasil. Para cada taxón se aportan datos como su nombre válido, autor, referencias bibliográficas, hábito, status, elevación, presencia en cada país y si se trata de una especie nativa, introducida o exótica para la región citada. Se citan asimismo especímenes representativos (voucher) y, en algunos casos, se añaden notas para aclarar la nomenclatura o dar otra información necesaria. Se enumeran además sinómimos, taxones excluídos, citas dudosas y taxones dudosos. La familia Alstromeriaceae está representada en este área por 3 géneros, 52 especies, 39 de ellas endémicas. El número de especies por género es el siguiente: Alstroemeria L.: 44, Bomarea Mirb.: 7 y Leontochir Phil.: 1. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica Darwinion. Academia Nacional de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Botánica Darwinion; Argentina

Meiotic or mitotic chromosomes of eleven species of angiosperms native in Argentina, belonging to seven families, were studied in order to be used in cytotaxonomic studies and gain some insights on the evolutive relationships of the different groups. Most of our data were the first cytological information for the species. The genus Alvaradoa Liebm. was investigated cytologically for the first time. The novel karyologically studied species, all diploid, were: Bomarea macrocephala Pax and Bomarea stans Kränz. 2n = 18, Loasa bergii Hieron. 2n = 26, Alvaradoa subovata Cronquist 2n = 16, Schizanthus grahamii Gillies 2n = 20, Viola montagnei Gay and Viola roigii Rossow 2n = 14. The same numbers to the ones previously reported in the literature were found from different populations of Cajophora chuquitensis (Meyen) Urb. & Gilg. 2n = 18, Ramorinoa girolae Speg. 2n = 20, and Schizanthus grahamii Gillies 2n = 20. The presence of supernumerary chromosomes, 0 to 6, in Ligaria cuneifolia (Ruiz & Pav.) Tiegh., 2n = 20, was recorded. Data are compared with previously published results and chromosome figures of all studied species are provided. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Ecología, Genética y Evolución; Argentina Fil: Seo, Micaela Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica Darwinion. Academia Nacional de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Botánica Darwinion; Argentina

Materials from Argentina of adventitious species of Viola were examined and four species were confirmed: V. arvensis, V. metajaponica, V. odorata and V. tricolor. V. metajaponica is lectotypified, and the identity of V. japonica is discussed. A key to identify the species, their descriptions, illustrations, ecology and geographic distribution are given., Se revisan materiales de entidades adventicias de Viola en Argentina y se comprueba la presencia de 4 especies diferentes: V. arvensis, V. metajaponica, V. odorata y V. tricolor. V. metajaponica es lectotipificada y se discute la identidad de V. japonica. Las especies son descriptas e ilustradas, y se provee una clave diacrítica, además de datos de ecología y distribución geográfica., Facultad de Ciencias Naturales y Museo

Viola micranthella and V. pygmaea, both entities belonging to section Andinium, are reported for the first time for Argentina. The first one occurs in Salta and Jujuy provinces and the second one in Salta. Both species are described and illustrated and distribution maps are provided., Se citan por primera vez para Argentina Viola micranthella y V. pygmaea, ambas pertenecientes a la Sección Andinium. La primera se halla en las provincias de Salta y Jujuy mientras que V. pygmaea crece en Salta. Los taxones se describen e ilustran y se proveen los mapas de distribución geográfica en Sudamérica y, con mayor detalle, en Argentina., Facultad de Ciencias Naturales y Museo, Laboratorio de Etnobotánica y Botánica Aplicada

Se describen y proveen datos nomenclaturales, de sinonimias, distribuciones geográficas, y habitats de las especies argentinas de Alstroemeriaceae: 10 taxa de Alstroemeria y 4 de Bomarea. Asimismo se presenta una lista de toda la bibliografía existente acerca de esta familia taxonómica. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica Darwinion. Academia Nacional de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Botánica Darwinion; Argentina Fil: Xifreda, Cecilia Carmen. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Laboratorio de Etnobotánica y Botánica Aplicada; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina

Morphological observations on pollen grains of Alvaradoa subovata Cronquist (Simaroubaceae) and Roupala brasiliensis Klotzch (Proteaceae) obtained from TEM complement previous studies of Xifreda & Sanso (1998). With the aim of giving details of the morphology and accuracy to the descriptive terminology, exine stratification is described and new observations on pollen grains obtained from SEM are added., Se dan a conocer observaciones con microscopio electrónico de transmisión (MET), que complementan los estudios previos realizados con microscopio electrónico de barrido (MEB) sobre la morfología polínica de Alvaradoa subovata Cronquist (Simaroubaceae) y Roupala brasiliensis Klotzch (Proteaceae) (Xifreda & Sanso, 1998). Se describe la estratificación de la exina y se comunican nuevas observaciones con MEB sobre el polen de estas dos especies arbóreas, con la finalidad de aclarar su morfología y dar precisión a la terminología descriptiva utilizada en Xifreda & Sanso (1998)., Facultad de Ciencias Naturales y Museo

I. Rehabilitation of Alvaradoa subovata Cronquist (Simaroubaceae), the correct scientific name for (the "pichi blanco". H. Roupala cataractarum Sleurner is a synonym of Roupala brasiliensis Klotzch (Proteaceae). A brief account regarding the validated nomenclature, Roupala brasiliensis and Alvaradoa subovata, for both taxa is given. Pollen observations obtained from SEM, in order to complement the identifications, are also given., Laboratorio de Etnobotánica y Botánica Aplicada

Se presentan los resultados de estudios interdisciplinarios tendientes a aclarar las relaciones entre los géneros Bomarea y Alstroemeria. Se realiza el tratamiento taxonómico de las especies argentinas de la familia Alstroemeriaceae. Se presenta una breve historia nomenclatura de los géneros Alstroemeria y Bomarea y de las relaciones supragenéricas e infragenéricas. El tratamiento taxonómico incluye la posición sistemática de la familia, descripción de los géneros y clave para diferenciarlos, descripción y clave para reconocer las especies argentinas, sinonimias, ilustraciones, mapas de distribución y observaciones ecológicas de cada taxón. Para delimitar la posición sistemática de Bomarea y Alstroemeria, se realizaron observaciones morfológicas sobre: órganos subterráneos, fruto, semilla, polen, hoja, tallo, inflorescencia y morfología floral. Los estudios cariológicos incluyeron el análisis cariotípico de dos especies de Alstroemeria: A. psittacina y A. isabellana y dos especies de Bomarea: B. edulis y B. boliviensis. Se estudió el comportamiento meiótico de representantes de ambos géneros. Además, se dan a conocer por primera vez, valores de contenido de ADN de especies de Bomarea: B. boliviensis y B. macrocephala y de Alstroemeria: A. psittacina y A. isabellana, obtenidos mediante microdensitometría de Feulgen. Se evaluaron las semejanzas morfológicas entre las especies y entre 123 individuos de esos taxones. Para establecer esas relaciones fenéticas, se aplicaron técnicas numéricas: análisis de agrupamiento (fenogramas) y análisis de ordenación (componentes principales). This work presents a delimitation between Alstroemeria and Bomarea on the basis of morphological, anatomical, karyological, ecological and distribution data. The Argentine species of Alstroemeriaceae are studied after a brief nomenclatural history of the genera and the supragenerical and infragenerical relationships. The taxonomic treatment includes keys to genera and species, descriptions, synonyms, illustrations, ecological observations and distribution maps. The following species are treated: Alstroemeria andina Phil. ssp venustula Ehr. Bayer, A. pseudospathulata Ehr. Bayer, A. pygmaea Herb., A.patagonica Phil., A. bakeri Pax, A. apertiflora Baker, A. isabellana Herb., A. aurea Graham, A. psittacina Lehm., A. presliana Herb., Bomarea edulis (Tuss.) Herb., B. macrocephala Pax, B. boliviensis Baker and B. stans Kranzl. With the aim of clarifying the systematic position of Bomarea and Alstroemeria, detailed morphological observations were made. The karyological studies include karyotype analysis of two Alstroemeria species: A. psittacina and A. isabellana and two Bomarea species: B. edulis and B. boliviensis. The meiotic behaviour of representives of both genera have been studied also. Nuclear DNA content of species of Bomarea y Alstroemeria have been estimated by Feulgen microdensitometry, and the differences between both genera were found to be significant. The phenetic relationships have been stablished using cluster and principal components analyses. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) representa un grupo muy importante de patógenos emergentes, causante de diarrea y severas enfermedades en seres humanos, tales como colitis hemorrágica o síndrome urémico hemolítico (SUH). El SUH afecta mayormente a niños menores de 5 años, es la principal causa de insuficiencia renal aguda, una de las más importantes de insuficiencia renal crónica y puede causar la muerte. El bovino es el principal reservorio y los alimentos contaminados, la principal vía de contagio al hombre. Argentina posee la mayor incidencia a nivel mundial de SUH y una alta prevalencia de VTEC en bovinos y alimentos derivados. El serotipo O157:H7 es el mayormente involucrado en los casos de enfermedad en el mundo, y en Argentina, también el más frecuentemente asociado al SUH. Sin embargo, no todos los aislamientos de O157:H7 tienen la misma capacidad de infectar y de causar enfermedad en el hombre. Estudios filogenéticos determinaron que las cepas O157:H7 integran subpoblaciones de dispersión mundial, las cuales diferirían en relación a su asociación con enfermedad. A partir del análisis comparativo de genomas, se han descripto varios métodos de subtipificación molecular, los cuales analizan distintas regiones y tipos de variación en el genoma. La combinación de los datos obtenidos por esta variedad de metodologías puede ofrecer una visión más amplia y robusta sobre la estructura poblacional y la virulencia de este serotipo. En este contexto se plantearon como objetivos conocer la diversidad genética de VTEC O157:H7 de Argentina, en particular de aquellas cepas que están circulando en la región pampeana, e identificar subtipos asociados a patogenicidad y virulencia. Para ello, se usaron distintos métodos de subtipificación molecular, tales como polimorfismos específicos de linaje (LSPA6), polimorfismos de nucleótido simple (SNP) (rhsA 3468 C>G y tir 255 T>A), análisis de múltiples loci VNTR (MLVA), y determinación de filogrupos. Por otro lado se analizó la presencia de genes relacionados con virulencia, tales como genes que codifican factores putativos de virulencia (FPV), genes codificados en plásmidos, de genes que codifican efectores no codificados en LEE (nle), presentes en islas de patogenicidad y genes que codifican factores de adherencia. Como complemento, se evaluó también, la actividad citotóxica de los aislamientos. El 98 % de ellos pertenecieron al linaje I/II (2 % al linaje II). El 100 % presentó el alelo del SNP (8_rhsA) correspondiente al clado 8. Un alto porcentaje de aislamientos presentó en alelo tir 255 T>A T, asociado a hipervirulencia, y fue asignado al filogrupo E. Según el MLVA se encontró una amplia diversidad genética. Todos los aislamientos mostraron el perfil plasmídico ehxA-espP-katP-stcE y poseyeron los genes ehaA, elfA, iha y lpfA variantes lpfA1-3, lpfA2-2 y ECSP_0242. Las frecuencias de los genes ECSP fueron 95 % ECSP_2687, 88 % ECSP_3286, 86 % ECSP_3620, 53 % ECSP_2870/2872 y 44 % ECSP_1733. Los aislamientos se agruparon en once perfiles nle, el 46 % fueron positivos para todos los genes nle, mientras que los aislamientos restantes, excepto dos, carecieron de nleF mostrando la OI-71 incompleta. Todas las cepas O157:H7, excepto el aislamiento identificado como linaje II, fueron citotóxicas en células Vero. Los resultados indican que las cepas de la región pampeana de Argentina son un grupo filogenéticamente homogéneo que presenta diversidad genética en relación a sus perfiles MLVA y de genes nle. La pertenencia de los aislamientos al clado hipervirulento 8 y al linaje I/II, la alta prevalencia del alelo tir 255 T>A T y de genes de factores putativos de virulencia, permite asignar a la mayoría de las cepas O157:H7 de esta región un alto riesgo para la salud pública. Fil: González, Juliana. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Bustamante, Ana Victoria. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Verotoxin-producing E. coli (VTEC) O157:H7 is the dominant serotype isolated from patients with HUS and, Argentine has the highest rate of HUS in the world. However, not all O157:H7 isolates have the same ability to infect and cause disease in humans. Molecular typing had allowed to identify subpopulations related to the origin and virulence of O157:H7 strains. Our aim was to perform a genetic characterization of 43 O157:H7 strains isolated in Argentine mostly from cattle and humans in order to establish the potential public health risk. For this purpose, a combination of molecular subtyping methods were used, lineage-specific polymorphisms (LSPA6), simple nucleotide polymorphisms (SNP) (rhsA 3468 C>G y tir 255 T>A), multiple loci VNTR analysis (MLVA) and phylotyping determination; on the other hand, analysis of genes related to virulence, such as genes encoding putative virulence determinants (FPV), factors codified in plasmids, effectors not codified in LEE (nle) and genes encoding adherence determinants. Also, the cytotoxicity activity of the isolates was evaluated. The 98 % of them belonged to lineage I/II (2 % lineage II). All isolates carried the clade 8 SNP variant (8_rhsA). A high percentage of isolates presented tir allele 255 T>A T, associated with hypervirulence, and was assigned to phylogroup E. According to MLVA, a wide genetic diversity was found. All isolates showed the plasmid profile ehxA-espP-katP-stcE and harbored ehaA, elfA, iha and lpfA variants lpfA1-3 and lpfA2-2 and, ECSP_0242. The frequencies of the remaining ECSP genes were 95 % ECSP_2687, 88 % ECSP_3286, 86 % ECSP_3620, 53 % ECSP_2870/2872 and 44 % ECSP_1733. Isolates were grouped into eleven nle profiles, 46 % were positive for all nle genes, while the remaining isolates, except two, showed incomplete OI-71, particularly lacked nleF. All O157:H7 strains, except the isolate identified as lineage II, were cytotoxic on Vero cells. Results point out that argentinean pampa region strains are a phylogenetically homogenous group, which shows genetic diversity in MLVA and nle profiles. The belonging of the isolates to hypervirulent clade 8 and lineage I/II, the high prevalence of the allele tir 255 T>A T and nle and putative virulence factors genes, would allow assigning most O157:H7 strains of this region a high risk to public health.

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) es un patógeno asociado a enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) que causa infecciosas severas en los humanos como diarrea, colitis hemorrágica (CH) y síndrome urémico hemolítico (SUH). El SUH afecta mayormente a niños menores de 5 años, es la principal causa de insuficiencia renal aguda, una de las más importantes de insuficiencia renal crónica, y puede causar la muerte. Argentina posee la mayor incidencia a nivel mundial de SUH y una alta prevalencia de VTEC en bovinos y alimentos derivados. El ganado bovino y los alimentos cárnicos son el principal reservorio y fuente de infección de VTEC, respectivamente. Las verotoxinas son el principal carácter de virulencia pero existen otros factores asociados a la patogénesis por VTEC, algunos de ellos codificados en islas de patogenicidad (PAI). La evaluación de los genes de virulencia contenidos en las PAI es una nueva herramienta para determinar el potencial riesgo de estas cepas en la salud pública, ya que éstas desempeñan un papel importante en la patogenicidad de la VTEC. Una evaluación de riesgo molecular (MRA) basada en la evaluación del contenido de genes nle se ha utilizado para predecir qué cepas representan un riesgo para los seres humanos. La clasificación de VTEC utilizando métodos filogenéticos ha mostrado que algunos serotipos se agrupan de acuerdo a su impacto en salud pública. Uno de estos métodos es la tipificación de secuencias de múltiples loci o MLST, el cual puede contribuir a establecer el riesgo que algunos aislamientos pueden presentar para la salud pública. Por otro lado, la identificación de los clones/linajes es importante ya que varias características, entre ellas la propensión a causar enfermedades, varía con el origen filogenético de VTEC. En relación a la diversidad filogenética y a la similitud con clones existentes en otras partes del mundo, asociados a enfermedad en seres humanos, no hay estudios previos realizados en cepas VTEC nativas, por lo cual, se desconocen qué clones de VTEC, especialmente no-O157:H7, están circulando en Argentina. El objetivo de esta tesis fue caracterizar la diversidad genética de las cepas VTEC no-O157:H7 nativas aisladas de diversas fuentes, principalmente ganado bovino y alimentos, identificar qué clones están circulando en el país para determinar las relaciones filogenéticos entre las cepas y compararlas con cepas de diferentes orígenes geográficos, especialmente con aquellas de casos clínicos en humanos, y evaluar las características relacionadas con virulencia de los mismos, con el fin de identificar el potencial riesgo que estas cepas pudieran tener para la salud pública. Para llevar a cabo este objetivo, se determinó el secuenciotipo (ST) de 59 aislamientos VTEC pertenecientes a 42 serotipos mediante MLST. Por otro otro lado, se determinó la distribución de genes ubicados en las PAI OI-36 (nleB2, nleC, nleD, nleH1-1), OI-57 (nleG2-3, nleG5-2, nleG6-2), OI-71 (nleA, nleF, nleG, nleG2-1, nleG9, nleH1-2), y OI-122 (nleB, nleE, ent/espL2, Z4321, Z4326, Z4332, Z4333) en 204 aislamientos de bovinos, alimentos y seres humanos pertenecientes a 52 serotipos no-O157:H7 y, en las cepas que resultaron positivas para el gen nleB, se determinaron sus niveles de expresión mediante reacciones de cuantificación relativa por PCR en tiempo real. En cuanto a la caracterización de los genes codificados en PAI, se encontraron diferencias en la frecuencia de los marcadores genéticos y una gran diversidad de perfiles de virulencia. En la mayoría de las cepas eae-negativas, solo estuvo presente el módulo 1 (Z4321) de OI-122. Sin embargo, se detectaron algunas cepas eae-negativas inusuales, que presentaron además de Z4321 otros genes de las PAI estudiadas. El análisis de agrupamiento, sin tener en cuenta los aislamientos que resultaron negativos para todos los genes, definió dos grupos principales: i) aislamientos eae-negativos (caracterizado por incluir seropatotipos -SPT- D, E o sin determinación, y aislamientos de origen bovino o alimentos); ii) eae-positivos (principalmente caracterizado por incluir aislamientos pertenecientes a SPT B, C, o no determinado). El análisis de MLST utilizando la base de datos EcMLST identificó 38 ST, de los cuales 17 (45%) fueron nuevos (algunos de ellos con alelos aún no registrados), en 18 serotipos. Quince de los 38 ST identificados se agruparon en 11 grupos clonales (CG) y 23 no fueron agrupados en ninguno de los CG definidos. En algunos serotipos, se determinaron diferentes ST. Los resultados mostraron un alto grado de heterogeneidad filogenética entre las cepas estudiadas, que varios de los aislamientos de bovino y alimentos pertenecieron a los mismos ST que comúnmente se asocian con casos clínicos en humanos en diversas áreas geográficas y la presencia de numerosos linajes emergentes en la región. De acuerdo a los análisis de expresión basal relativa del gen nleB se encontraron niveles de expresión heterogéneos entre las cepas estudiadas. No se encontraron diferencias significativas en los niveles de expresión asociadas al origen de los aislamientos (bovino y humano) ni al serotipo pero si entre el grupo proveniente de SUH y el no-SUH. Por otro lado, aislamientos no-O157:H7 pertenecientes a los serotipos O145:NM (bovino y humano) y O146:H21 (bovino) presentaron niveles de expresión de nleB superiores al control, una cepa O157:H7 aislada de un niño con SUH. En base al esquema de MRA analizado, los aislamientos eae-positivos con mayor potencial de virulencia fueron aquellos pertenecientes a los serotipos O5:NM, O26:H11, O38:H39, O111:H2, O118:H2/H16, O121:H19, O145:NM, O146:H21 y O165:NM. En relación a los aislamientos eae-negativos, se plantea la necesidad de utilizar marcadores adicionales que permitan predecir el potencial riesgo de causar enfermedad en seres humanos. VTEC representa un grave problema para la salud pública. Argentina tiene la mayor incidencia de SUH en el mundo y este estudio proporciona los primeros datos sobre los clones VTEC no-O157:H7 que están circulando en nuestra región. Los resultados mostraron que algunos de ellos pueden representar un alto riesgo zoonótico y esta información es importante para desarrollar iniciativas en salud pública. Fil: Cadona, Jimena Soledad. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Sanso, Andrea Mariel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Fil: Bustamante, Ana Victoria. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Verotoxigenic Escherichia coli (VTEC) is a pathogen associated with foodborne diseases that causes severe infectious diseases in humans such as diarrhea, hemorrhagic colitis (HC) and haemolytic uraemic syndrome (HUS). HUS mainly affects children under 5 years old, it is the main cause of acute renal failure, one of the most important causes of chronic renal failure and it can cause death. Argentina has the highest incidence worldwide with high frequency and prevalence of VTEC in bovines and derived foods. Cattle and meat foods are the main reservoir and source of VTEC infection, respectively. Verotoxins are the main virulence character but there are other factors associated with VTEC pathogenesis, some of them encoded in pathogenicity islands (PAIs). The evaluation of virulence genes in PAIs is a new tool to determine the risk potential of these strains in public health since they are played an important role in the pathogenicity of VTEC. A molecular risk assessment (MRA) based on the evaluation of gene content has been used to predict which strains pose a risk to humans. The classification of VTEC using phylogenetic methods has shown that some serotypes are grouped according to their impact on public health. One of these methods is the multilocus sequence typing or MLST, which can contribute to establishing the risk that some isolates can present for public health. On the other hand, the identification of clones/lineages is important since several characteristics, among them, the propensity to cause diseases, is related to the phylogenetic origin of VTEC. In this case, there are no previous studies carried out on native VTEC strains, so it is unknown which clones of VTEC, especially non-O157:H7, are circulating in Argentina. The objective of this thesis was to characterize the genetic diversity of native VTEC nonO157:H7 strains from diverse sources, mainly cattle and food, identify which clones are circulating in the country to determine the phylogenetic relationships between strains, compare them with strains of different geographical origins, especially with clinical cases strains, and evaluate the characteristics related to the virulence of them, in order to identify the potential risk that these strains have for public health. To carry out our objective, the sequence types (STs) in a total of 59 VTEC isolates belonging to 42 serotypes were determined using MLST. On the other hand, the distribution of genes in PAIs OI-36 (nleB2, nleC, nleD, nleH1-1), OI-57 (nleG2-3, nleG5-2, nleG6-2), OI-71 (nleA, nleF, nleG, nleG2-1, nleG9, nleH1-2), and OI-122 (nleB, nleE, ent/spL2, Z4321, Z4326, Z4332, Z4333) were analyzed in 204 isolates of bovines, humans and food belonging to 52 nonO157:H7 serotypes and, in the strains that were positive for the nleB gene, their expression levels were determined by means of relative quantification reactions by real-time PCR. Regarding the characterization of the genes encoded in PAIs, differences in the frequency of genetic markers and a great diversity of virulence profiles were found. In most of the eaenegative strains, only module 1 (Z4321) of OI-122 was present. However, some unusual eaenegative strains were detected, which presented in addition to Z4321 other genes of the PAIs studied. The cluster analysis, without taking into account the isolates that were negative for all the genes, defined two main groups: i) eae-negative isolates (characterized by including seropathotypes -SPTs- D, E or without determination, and bovine or food isolates); ii) eaepositive (mainly characterized by including isolates belonging to SPTs B, C, or not determined). The MLST analysis using the EcMLST database identified 38 STs, of which 17 (45%) were new STs (some of them with alleles not yet registered), in 18 serotypes. Fifteen of the 38 STs identified were grouped into 11 clonal groups (CGs) and 23 were not grouped in any of the CGs defined by the database. In some serotypes, different STs were determined. The results showed a high degree of phylogenetic heterogeneity among the strains studied, that several cattle and food isolates belonged to the same STs that are commonly associated with clinical cases in humans in different geographical areas and demonstrated the presence of numerous emerging lineages in the region. According to the relative basal expression analyzes of the nleB gene, heterogeneous expression levels were found among the strains studied. No significant differences were found in the levels of expression associated with the origin of the isolates (bovine and human) or serotype but did between the group from HUS and non-HUS. On the other hand, isolates non-O157 belonging to the serotypes O145:NM (cattle and human) and O146:H21 (cattle) presented higher nle expression levels than the control sample, a strain O157:H7 isolated from a child with HUS. Based on the MRA scheme analyzed, eae-positive isolates with increased virulence potential were those belonging to serotypes O5:NM, O26:H11, O38:H39, O111:H2, O118:H2/H16, O121:H19, O145:NM, O146:H21 y O165:NM. Regarding to eae-negative isolates, the need to use additional markers to predict the potential risk of causing disease in humans is proposed. VTEC represents a serious problem for public health. Argentina has the highest incidence of HUS in the world and this study provides the first data about the non-O157: H7 VTEC clones that are circulating in our region. The results showed that some of them could represent a high zoonotic risk and this information is important to develop public health initiatives.