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Le virus de l’herpès simplex de type 1 (HSV-1), un virus neurotrope, affecte environ 80 % de la population. Il peut causer des feux sauvages, des kératites virales ou dans des rares cas des encéphalites virales. Chez des patients immunosupprimés et chez les nouveau-nés, l’infection peut être très sévère.Le gène codant pour la protéine virale UL24 est conservé parmi tous les Herpesviridae. Un virus déficient en UL24 est affecté, entre autres, dans son efficacité de réplication et de réactivation à partir de l’état de latence. En contexte de transfection, l’expression d’UL24 corrèle avec une réduction de l’expression de la protéine virale R1, une enzyme impliquée dans la synthèse de l’ADN viral, ainsi que celle d’autres gènes viraux (ICP27, R2, TK et gC) et sa propre expression. Ces gènes viraux ne possèdent pas de similitude de séquence mais ils ont un contenu en guanidine et cytosine (GC) élevé. L’impact d’UL24 s’est manifesté par un effet sur l’accumulation des transcrits, quoique la stabilité des transcrits de R1 n’était pas affectée. L’effet observé était spécifique aux gènes viraux puisqu’aucune réduction d’expression n’a été observée pour les gènes GST ou mCherry, malgré le taux élevé en GC de ce dernier. Aussi, des versions mutées d’UL24 dans des résidus hautement conservé inhibe la réduction de l’expression de gènes viraux. L’orthologue d’UL24 chez l’herpès simien « B-virus » était également capable de réduire l’expression de R1. Ces résultats suggèrent que la fonction régulatrice de l’expression de gènes viraux d’UL24 n’est pas uniquement spécifique au HSV-1 mais aux Alphaherpesvirinae. Afin d’identifier l’élément dans la séquence de R1 qui confie la susceptibilité à la régulation par UL24, une librairie de quatre plasmides codant pour des fragments de R1 fusionnés à GST a été créée. UL24 a réduit l’expression des quatre fragments de R1 suggérant que la reconnaissance des gènes viraux par UL24 peut être due à la présence d’un ou plusieurs motifs dans leurs s

Le virus de l’herpès simplex de type 1 (HSV-1) est un virus neurotrope qui affecte environ 80 % de la population mondiale. Il peut causer des feux sauvages, des kératites et parfois des encéphalites virales. Chez des patients immunosuprimés et les nouveau-nés, la maladie est souvent très sévère. Le gène codant pour la protéine virale UL24 est conservé parmi tous les Herpesviridae. Cette protéine possède des domaines d’homologie hautement conservés dans sa partie N-terminale. En culture cellulaire, un virus déficient en UL24 (UL24X) démontre une diminution des titres viraux dans les cellules Vero et HeLa, entre autres. In vivo, il y a une diminution drastique des titres viraux dans les ganglions trigéminaux (TG) ainsi qu’une réduction sévère de l’efficacité de réactivation virale à partir de la latence. UL24 est donc un déterminant de la pathogenèse virale. Des études sur l’orthologue d´UL24, UL76 du cytomégalovirus humain, ont montré une fonction de régulation génique de cette protéine mais les mécanismes impliqués sont méconnus. Des résultats préliminaires du laboratoire ont suggéré que dans un contexte de transfection, l’expression d’UL24 corrélait avec une réduction de l’expression de la grande sous-unité de la Ribonucléotide Réductase virale (R1). Cette protéine est impliquée dans la synthèse d’ADN viral en réduisant les ribonucléotides en deoxyribonucléotides (dNTP). Notre hypothèse était qu’UL24 régule les niveaux de la protéine R1 en intervenant à divers stades de l’expression génique. Nous avons démontré en contexte de co-transfection que l’expression de la protéine virale UL24 inhibe l´expression de la protéine R1. L’effet d’UL24 sur la protéine GST-R1 semble dépendre seulement de la partie R1 ; l’inhibition a été observée dans les cellules humaines (293T) et des cellules de singe (COS-7). Par ailleurs, à l’aide d’immunobuvardage de type Western nous avons montré que ce phénomène était dépendant de la dose de plasmide exprimant UL24. Des expériences de tran