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Objetivo: Este estudo analisou a presença de polimorfismos na região promotora -163A/G, -245T/G e -950T/C do gene da osteoprotegerina (OPG), bem como sua distribuição e associação em pacientes diabéticos e com periodontite, comparados ao grupo controle saudável. Métodos: participaram da pesquisa 67 indivíduos distribuídos em um grupo teste (n=32), constituído por pacientes diabéticos e com periodontite, e outro controle (n=35) com pacientes não diabéticos e sem periodontite. Para o diagnóstico da periodontite, avaliou-se clinicamente profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível de inserção clínica, sendo sondados seis sítios em cada dente presente e diagnosticada a periodontite na presença de dois ou mais sítios com profundidade de sondagem e nível de inserção clínica ≥4mm. O DNA para a investigação dos polimorfismos foi obtido a partir de amostras sanguíneas dos participantes, o polimorfismo foi avaliado através do método Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP). Resultados: Não foi observada associação entre polimorfismos da região promotora da OPG no grupo teste (P>0,005). O alelo mais freqüente neste grupo foi o A163(81,2%), seguido pelo T245(75,0%) e pelo T950(54,7%). O alelo T950, possível marcador da osteoclastogênese, não foi associado à condição periodontal dos pacientes diabéticos (P>0,005). Conclusão: Não foi encontrada associação entre polimorfismos genéticos da OPG em pacientes diabéticos e com periodontite

Objetivo: Avaliar a associação entre o polimorfismo no exon-1 do gene MBL2 e a doença periodontal em pacientes diabéticos tipo 2. Método: A amostra foi composta por 100 pacientes que foram submetidos a um exame clínico periodontal que avaliou seis sítios por dente a profundidade de sondagem (PS), sangramento à sondagem (SS), perda de inserção clínica (PIC), índice de placa (IP) e o número de dentes presente. A doença periodontal foi definida como pelo menos quatro sítios com perda de inserção de ≥5mm, com um ou mais destes sítios tendo uma bolsa de ≥4mm. Foram coletadas células de descamação da mucosa oral e a detecção do polimorfismo foi feita através da PCR em tempo real e análise da temperatura de melting. Resultados: Em uma população de diabéticos tipo 2, não houve diferenças estatisticamente significantes nos genótipos do polimorfismo da MBL2 ou freqüência alélica observadas entre os indivíduos com doença periodontal. Conclusão: Este estudo indicou que o polimorfimos no exon-1 do gene da MBL2 não foi relacionado à doença periodontal em uma população de diabéticos tipo 2

Objective: The aim of this study was to investigate polymorphisms in the promoter region (-163A/G, -245T/G and -950T/C) of the gene osteoprotegerin (OPG) as well as the distribution and influence of these polymorphisms in patients with type 2 diabetes and periodontitis in comparison to a health control group. Methods: The study involved the participation of 67 subjects: 32 in the test group (diabetic patients with periodontitis) and 35 in the control group (non-diabetic subjects without periodontitis). Pocket depth, bleeding on probing and attachment loss were assessed for the diagnosis of periodontitis. Six sites on each tooth were probed. Periodontitis was diagnosed when two or more sites had a pocket depth and attachment loss ≥ 4 mm. DNA was obtained from the blood of the subjects for the investigation of OPG polymorphisms using the Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) method. Results: No association was found between periodontitis and polymorphisms in the promoter region of the OPG gene in test group (P>0.005). The most frequent allele in this group was A163 (81.2%), followed by T245 (75.0%) and T950 (54.7%). The T950 allele, which is a possible marker of osteoclastogenesis, was not associated with periodontal status in patients with diabetes (P>0.005). Conclusion: No association was found between periodontiitis and genetic polymorphisms in the OPG gene in patients with diabetes. Objetivo: Este estudo analisou a presença de polimorfismos na região promotora -163A/G, -245T/G e -950T/C do gene da osteoprotegerina (OPG), bem como sua distribuição e associação em pacientes diabéticos e com periodontite, comparados ao grupo controle saudável. Métodos: participaram da pesquisa 67 indivíduos distribuídos em um grupo teste (n=32), constituído por pacientes diabéticos e com periodontite, e outro controle (n=35) com pacientes não diabéticos e sem periodontite. Para o diagnóstico da periodontite, avaliou-se clinicamente profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível de inserção clínica, sendo sondados seis sítios em cada dente presente e diagnosticada a periodontite na presença de dois ou mais sítios com profundidade de sondagem e nível de inserção clínica ≥4mm. O DNA para a investigação dos polimorfismos foi obtido a partir de amostras sanguíneas dos participantes, o polimorfismo foi avaliado através do método Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP). Resultados: Não foi observada associação entre polimorfismos da região promotora da OPG no grupo teste (P>0,005). O alelo mais freqüente neste grupo foi o A163(81,2%), seguido pelo T245(75,0%) e pelo T950(54,7%). O alelo T950, possível marcador da osteoclastogênese, não foi associado à condição periodontal dos pacientes diabéticos (P>0,005). Conclusão: Não foi encontrada associação entre polimorfismos genéticos da OPG em pacientes diabéticos e com periodontite.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2022-11-25T21:50:44Z No. of bitstreams: 1 Andreia Michelle Alves Cunha de Alcantara.pdf: 1637702 bytes, checksum: 8d2485dabe13c44ce817311426867171 (MD5) Made available in DSpace on 2022-11-25T21:50:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andreia Michelle Alves Cunha de Alcantara.pdf: 1637702 bytes, checksum: 8d2485dabe13c44ce817311426867171 (MD5) Previous issue date: 2021-03-03 Coronavirus disease-2019 (COVID-19), a zoonosis resulting from infection by Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus-2 (SARS-CoV-2), continues to end lives. Despite the numerous studies carried out around the world, the information regarding the virus and the disease are inconclusive. There is no curative medication or vaccine available universally, so far. Under these circumstances, the aim of this research was to develop a literature review, covering the historical and epidemiological aspects of the disease, the viral cycle and pathogenesis of SARS-CoV-2, the development of vaccines, the protective measures adopted and the impact of COVID-19 in the world economy. The review was based on scientific publications and government platforms National Center for Biotechnology, National Institutes of Health, Centers for Disease Control and Prevention, World and Health Organization and Brazil, between 2003 and 2021. The research revealed that Coronaviruses represent a serious threat to global health, as previously evidenced by the Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus (SARS-CoV), the Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus (MERS-CoV) and, currently, SARS-CoV-2. COVID-19 emerged in December 2019, in China, and since then there has been a significant increase in the number of cases worldwide, causing the World Health Organization to declare it a pandemic, the effects of which have been collapsing the system and triggering a negative impact on the world economy. The transmission of COVID-19 occurs mainly through the airways, followed by binding of the SARS-CoV-2 spike protein to the human Angiotensin-Converting Enzyme (host receptor), with consequent viral fusion and establishment of infection. As the symptoms of COVID-19 are nonspecific, ranging from oligo-symptomatic to Acute Respiratory Discomfort Syndrome and / or Systemic Syndrome, the definitive diagnosis is obtained by molecular tests (detecting viral genetic material) and immunological tests (detecting host antibodies). Once the infection is confirmed, the treatment is symptomatic, aiming at easing the patient's suffering and, in critical cases, maintaining the functions of his vital organs. Due to absence of curative medication, the development and availability of vaccines can be decisive for to deal with the pandemic. Currently, more than 150 vaccines have been developed using traditional platforms (weakened or killed virus vaccines) and new generation (Deoxyribonucleic Acid vaccines; Ribonucleic Acid; viral protein; viral vector - human adenovirus or chimpanzee adenovirus) in an unprecedented short time. Among the platforms, it is worth highlighting the chimpanzee adenovirus platform, known for having a high degree of safety and immunogenicity in combating several infections, including infection by MERS-CoV, as demonstrated by the ChAdOx1-MERS vaccine. Immediately after the release of the SARS-CoV-2 genome, the ChAdOx1-MERS platform was adapted for the development of the ChAdOx1-nCoV-19 vaccine (against SARS-CoV-2), a safe and effective immunizer. Therefore, it is possible to conclude that knowledge about other Coronaviruses has been contributing to the development of vaccines against COVID-19, and that the capacity of the health system, the cooperation of the population and government intervention, are essential to face the pandemic, until there is more knowledge about the virus and availability of vaccines worldwide. A doença do Coronavírus-2019 (COVID-19), zoonose decorrente da infecção pelo Coronavírus da Síndrome Respiratória Aguda Severa-2 (SARS-CoV-2), continua cessando vidas. Apesar dos inúmeros estudos realizados em todo o mundo, as informações referentes ao vírus e à doença são inconclusivas, não havendo, até o momento, medicação curativa nem vacina disponibilizada universalmente. Diante do exposto, o objetivo da presente pesquisa foi desenvolver uma revisão de literatura, contemplando os aspectos históricos e epidemiológicos da doença, o ciclo viral e patogenia do SARS-CoV-2, o desenvolvimento de vacinas, as medidas protetivas adotadas e o impacto da COVID-19 na economia mundial. A revisão fundamentou-se em publicações científicas e nas plataformas governamentais National Center for Biotechnology, National Institutes of Health, Centers for Disease Control and Prevention, World and Health Organization e Brasil, entre 2003 e 2021. A pesquisa revelou que os Coronavírus representam uma séria ameaça à saúde global, conforme evidenciado anteriormente pelo Coronavírus da Síndrome Respiratória Aguda Severa (SARS-CoV), pelo Coronavírus da Síndrome Respiratória do Oriente Médio (MERS-CoV) e, atualmente, pelo SARS-CoV-2. A COVID-19 emergiu em dezembro de 2019, na China e, desde então, vem ocorrendo um aumento expressivo do número de casos em todo o mundo, fazendo com que a Organização Mundial de Saúde a declarasse uma pandemia, cujos efeitos vêm colapsando o sistema de saúde e desencadeando um impacto negativo na economia mundial. A transmissão do SARS-CoV-2 ocorre, principalmente, através das vias respiratórias, sendo seguida da ligação da proteína de espícula do vírus à Enzima Conversora de Angiotensina humana (receptor hospedeiro), com consequente fusão viral e estabelecimento da infecção. Como os sintomas da COVID-19 são inespecíficos, variando de oligo-sintomáticos à Síndrome do Respiratória Aguda Grave e/ou Síndrome Sistêmica, o diagnóstico definitivo é obtido por testes moleculares (detectam material genético viral) e imunológicos (detectam anticorpos hospedeiros). Confirmada a infecção, o tratamento é sintomático, visando amenizar o sofrimento do paciente e, nos casos críticos, manter as funções de seus órgãos vitais. Ante a ausência de medicação curativa, o desenvolvimento e disponibilização de vacinas podem ser determinantes para o enfrentamento à pandemia. Atualmente, mais de 150 vacinas vêm sendo desenvolvidas através de plataformas tradicionais (vacinas de vírus enfraquecido ou morto) e de nova geração (vacinas de Ácido Desoxirribonucleico; Ácido Ribonucleico; proteína viral; vetor viral - adenovírus humano ou adenovírus de chimpanzé) em uma celeridade sem precedentes. Dentre as plataformas, torna-se válido destacar a plataforma de adenovírus de chimpanzé, conhecida por apresentar alto grau de segurança e imunogenicidade no combate a diversas infecções, inclusive infecção pelo MERS-CoV, conforme demonstrado pela vacina ChAdOx1-MERS. Imediatamente após a divulgação do genoma do SARS-CoV-2, a plataforma ChAdOx1-MERS foi adaptada para o desenvolvimento da vacina ChAdOx1-nCoV-19 (contra o SARS-CoV-2), imunizante seguro e eficaz. Portanto, é possível concluir que os conhecimentos sobre outros Coronavírus vêm contribuindo para o desenvolvimento de vacinas contra a COVID-19, e que a capacidade do sistema de saúde, a cooperação da população e a intervenção governamental, são essenciais para o enfrentamento à pandemia, até que haja maior conhecimento sobre o vírus e disponibilização de vacinas mundialmente.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2023-02-03T22:37:18Z No. of bitstreams: 1 Samantha Amorim Candido.pdf: 1264611 bytes, checksum: 4f9ab7280706c83746eae48d232b5ff9 (MD5) Made available in DSpace on 2023-02-03T22:37:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Samantha Amorim Candido.pdf: 1264611 bytes, checksum: 4f9ab7280706c83746eae48d232b5ff9 (MD5) Previous issue date: 2020-08-24 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disorder among an elderly population, it has no cure and gold therapy for motor symptoms of the disease is levodopa (L-DOPA). In the long term, L-DOPA can lead to adverse symptoms, such as motor fluctuation, dyskinesia and visual hallucinations. And studies show a possible association between oxidative stress (OE) and L-DOPA therapy. The base excision repair (BER) pathway is responsible for controlling the damage caused by OE, the APE1 and XRCC1 proteins being fundamental in this process. Variations in the genes that encode these proteins can affect the efficiency of the repair, making the brain susceptible to damage caused by OE. Thus, the present study aimed to evaluate the relationship between the presence of polymorphisms in the Asp148Glu and Arg399Gln genes of the APE1 and XRCC1 genes, respectively, with the appearance of motor fluctuation, dyskinesia and visual hallucinations with response of the pharmacological response to L-DOPA, in PD patients. 110 patients were obtained from L-DOPA therapy over a period of 5 years. Patients were stratified into two groups according to the daily dosage of L-DOPA, group I taking ≤ 600mg / day and group II taking> 600mg / day. The Asp148Glu and Arg399Gln polymorphisms of the APE1 and XRCC1 genes were performed using the qPCR and PCR-RFLP technique, respectively. The analysis of logistic regression association with longer duration of therapy with L-DOPA (PR 1.1; CI -1.1-1.19; p = 0.001), appearance of motor fluctuation (PR 1.7; CI 1.3-2 , 2; p = 0.001) and the presence of the polymorphic genotype AA of the XRCC1 gene (PR 1.54; CI 1.04-2.27; p = 0.028). In addition to the presence of the GA genotype for the XRCC1 gene providing protection in patients treated with high doses of L-DOPA (PR 0.7; CI 0.5-0.9; p = 0.022). Our data occurred that this variation in the XRCC1 gene can influence the pharmacological response of L-DOPA in patients with PD, whereas the variation in the APE1 gene does not seem to influence the treatment. doença de Parkinson (DP) é a segunda desordem neurodegenerativa mais comum entre a população idosa, não possui cura e a terapia ouro para os sintomas motores da doença é a levodopa (L-DOPA). A longo prazo a L-DOPA pode levar ao surgimento de sintomas adversos, como flutuação motora, discinesia e alucinações visuais. E estudos demonstram uma possível associação entre o estresse oxidativo (OE) e a terapia com L-DOPA. A via de reparo por excisão de bases (BER) é responsável por controlar os danos causados pelo OE, sendo as proteínas APE1 e XRCC1 fundamentais neste processo. Variações nos genes que codificam estas proteínas podem influenciar na eficiência do reparo, tornando o cérebro suscetível aos danos causados pelo OE. Desta forma, o presente estudo objetivou avaliar a relação entre a presença dos polimorfismos nos genes Asp148Glu e Arg399Gln dos genes APE1 e XRCC1, respectivamente, com o surgimento de flutuação motora, discinesia e alucinações visuais decorrentes da resposta farmacológica a L-DOPA, em pacientes com a DP. Foram avaliados 110 pacientes submetidos à terapia com L-DOPA por um período de 5 anos. Os pacientes foram estratificados em dois grupos de acordo com a dosagem diária de L-DOPA, grupo I tomando ≤ 600mg/dia e o grupo II tomando >600mg/dia. Os polimorfismos Asp148Glu e Arg399Gln dos genes APE1 e XRCC1, foram analisados através da técnica de qPCR e PCR-RFLP, respectivamente. A análise de regressão logística demonstrou associação com maior duração da terapia com L-DOPA (PR 1,1; IC -1,1-1,19; p = 0,001), surgimento de flutuação motora (PR 1.7; IC 1,3- 2,2; p = 0,001) e a presença do genótipo polimórfico AA do gene XRCC1 (PR 1,54; IC 1,04-2,27; p = 0,028). Além da presença do genótipo GA para o gene XRCC1 conferindo proteção em pacientes tratados com altas doses de L-DOPA (PR 0,7; IC 0,5-0,9; p =0,022). Nossos dados sugerem que esta variação no gene XRCC1 pode influenciar na resposta farmacológica da L-DOPA em pacientes com a DP, enquanto que a variação no gene APE1 não parece influenciar no tratamento.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-09-18T14:53:16Z No. of bitstreams: 1 Amanda Cristina da Costa Guimaraes.pdf: 1753289 bytes, checksum: 03863e8849881c49be3fd6da191315b3 (MD5) Made available in DSpace on 2019-09-18T14:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amanda Cristina da Costa Guimaraes.pdf: 1753289 bytes, checksum: 03863e8849881c49be3fd6da191315b3 (MD5) Previous issue date: 2019-08-13 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Klebsiella pneumoniae is one of the most commonly identified pathogens causing nosocomial infection in hospitalized patients, as it has intrinsic resistance and several virulence factors. Infections caused by these bacteria can result in septicemia and septic shock, which is triggered by lipopolysaccharides (LPS) present in the bacterial wall, stimulating neutrophils, macrophages, endothelial cells and muscles to an exacerbated production of proinflammatory cytokines such as TNFα, IL1, IL6 and IL8. However, modulation of this exacerbated response can be achieved by IL10. The objective of this work was to identify the polymorphisms in immunity genes related to the susceptibility of patients to develop bacterial infections and which virulence factors are present in these pathogens. We analyzed 100 patients for TNFα-308 G / A, IL1β-511 C / T, IL6 -174 G / C and IL10 -1082G/A polymorphisms, all by PCR. The 41 strains of K. pneumoniae from blood cultures were investigated for the presence of virulence genes by specific PCR, and determinations of Type Sequences were performed by MLST. Capsule production was quantified by determination of uronic acid concentration. Statistical analysis was performed by Williams G test, 95% OddsRatio (OR), Trend test (Cochran-Armitage) and Tukey test. Quantitative and qualitative variables were analyzed by the t-student test. Our results reveal that homozygotes for allele A in IL10 -1082G/A have a fourfold higher risk of developing bacterial infection compared with heterozygous patients for this polymorphism. In addition, we emphasize that 99.6% of K. pneumoniae are hypervirulent because they have at least five virulence genes. In conclusion, our findings revealed that IL10 -1082G/A polymorphism and clinical features can be used as markers for the development of bacterial infection. A Klebsiella pneumoniae é um dos patógenos identificados mais frequentemente causando infecção hospitalar em pacientes hospitalizados, uma vez que possui resistência intrínseca e diversos fatores de virulência. Infecções causadas por essas bactérias podem resultar em septicemia e choque séptico, que é desencadeado porlipopolissacarídeos (LPS) presentes na parede bacteriana, estimulando neutrófilos, macrófagos, células endoteliais e músculos a uma produção exacerbada de citocinas pró-inflamatórias como TNFα, IL1, IL6 e IL8. No entanto, a modulação dessa resposta exacerbada pode ser alcançada pela IL10. O objetivo deste trabalho foi identificar os polimorfismos em genes de imunidade relacionados à susceptibilidade de pacientes desenvolverem infecções bacterianas e quais fatores de virulência estão presentes nesses patógenos. Foram analisados 100 pacientes para os polimorfismos TNFα -308 G/A, IL1β-511 C/T, IL6 -174 G/C e IL10 -1082G/A, todos pelo método de PCR. As 41 cepas de K. pneumoniae de culturas de sangue foram investigadas quanto à presença de genes de virulência por PCR específico, e as determinações das Sequências Tipo foram realizadas por MLST. A produção de cápsula foi quantificada pela determinação da concentração de ácido urônico. A análise estatística foi realizada pelo teste G de Williams, OddsRatio (OR) com 95%, Trend test (Cochran-Armitage) e Teste de Tukey. Variáveis quantitativas e qualitativas foram analisadas pelo teste t-student. Nossos resultados revelam que homozigotos para o alelo A em IL10 -1082G/A têm um risco quatro vezes maior de desenvolver infecção bacteriana em comparação com pacientes heterozigotos para esse polimorfismo. Além disso, enfatizamos que 99,6% das K. pneumoniae são hipervirulentas, pois apresentam pelo menos cinco genes de virulência. Em conclusão, nossos achados revelaram que o polimorfismo IL10 -1082G/A e características clínicas podem ser usados como marcadores para o desenvolvimento de infecção bacteriana.

Human papillomavirus (HPV) infections are strongly associated with the development of cervical intraepithelial neoplasias and invasive cervical cancer. Polymorphisms in cytokine-encoding genes and behavioural cofactors could play an important role in protecting an individual against viral infections and cancer. Here, we investigated whether IL-6 -174 G>C, IL-8 +396 G>T, and TGF-β1 +869 G>C and +915 G>C polymorphisms were associated with susceptibility to HPV infection in women from north-east (Pernambuco) Brazil. We analysed 108 healthy uninfected women (HC) and 108 HPV-positive women with cervical lesions. Genetic polymorphisms were assessed using Sanger sequencing and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. Comparison of the distribution of the genotypic and allelic frequencies of the IL-18 +396 T>G polymorphism between HPV infected woman an uninfected controls showed that the GG genotype and G allele were both more frequent in the HC group, and were associated with protection from HPV infection (p = 0.0015; OR = 0.29 CI95% = 0.13-0.61; p = 0.0005; OR = 0.45 CI95% 0.29-0.7, respectively). Individuals from the control group could have previously had HPV infection that was spontaneously eliminated; however, it was undetectable at the time of sample collection. Based on our findings, we hypothesize that the IL-8 +396 G>T polymorphism could interfere with susceptibility to HPV infection, by modulating the ability of immune system to fight the virus.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-09-30T14:52:45Z No. of bitstreams: 1 Juliana Nunes Carvalho.pdf: 1319676 bytes, checksum: 4d177aa4b0b6766b26635a33aed3e260 (MD5) Made available in DSpace on 2019-09-30T14:52:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Nunes Carvalho.pdf: 1319676 bytes, checksum: 4d177aa4b0b6766b26635a33aed3e260 (MD5) Previous issue date: 2019-02-27 The cooling of the milk in the producing property is an important method of preserving the raw material, but may favor the development of psychotrophic deteriorating and opportunistic pathogenic bacteria, such as Listeria monocytogenes. The objective of this study was to evaluate the milk produced in agreste region of Pernambuco regarding the concentration of psychrotrophic bacteria and their enzymatic characteristics, identifying those with deteriorating potential, as well as to verify the occurrence of Listeria spp. potentially pathogenic, qualifying them for antimicrobial resistance profile. The mean concentration of psychrotrophic bacteria was 2.1 x 105 CFU/mL of refrigerated raw milk. However, in 58.3% of the farms psychrotrophic counts were below 10 CFU/mL. Lipolytic and/or proteolytic activity was demonstrated by 38% of the psychrotrophic isolates, which were identified in 13 species. Aeromonas, Exiguobacterium and Staphylococcus were dominant genera, covering 77% of the isolates and, to a lesser extent, Macrococcus, Bacillus, Paenibacillus, Enterobacter, Hafnia, Enterococcus and Lactococcus. Regarding ocourrence of Listeria spp., 140 presumptive isolates were obtained, of which 32.85% were confirmed for the genus Listeria. Of these, 8.69% presented the three virulence genes investigated - hlyA, inlA and actA, indicating that these isolates possess properties of a virulent strain. The antimicrobial resistance profile of Listeria spp. demonstrated that vancomycin, gentamicin and tetracycline are the most effective drugs against these bacteria. Ampicillin was the antimicrobial with the highest resistance index, presented by 60.87% of the isolates. The results of this work allow us to infer possible failures in the production and storage of raw milk and to adjust hygienic-sanitary and control procedures in order to avoid high concentration of psychrotrophic bacteria and consequent production of deteriorating enzymes. It is also inferred that milk produced and stored cold in the agreste of Pernambuco constitutes a risk to public health and to the milk production chain of the State for the presence of Listeria spp. potentially pathogenic and multi-resistant to antimicrobials. A refrigeração do leite na propriedade produtora constitui importante método de conservação da matéria-prima, porém, pode favorecer o desenvolvimento de bactérias psicrotróficas deteriorantes e patógenas oportunistas, como Listeria monocytogenes. Objetivou-se avaliar o leite produzido no agreste de Pernambucano quanto à concentração de bactérias psicrotróficas e suas características enzimáticas, identificando aquelas com potencial deteriorante, bem como verificar a ocorrência de Listeria spp. potencialmente patogênicas qualificando-as quanto ao perfil de resistência a antimicrobianos. A concentração média de bactérias psicrotróficas foi de 2,1 x 105 UFC/mL de leite cru refrigerado. Apesar disso, em 58,3% das fazendas, as contagens foram abaixo de 10 UFC/mL. A atividade lipolítica e/ou proteolítica foi demonstrada por 38% dos isolados psicrotróficos, que foram identificados em 13 espécies. Aeromonas, Exiguobacterium e Staphylococcus foram gêneros dominantes, cobrindo 77% dos isolados e, em menor frequência, Macrococcus, Bacillus, Paenibacillus, Enterobacter, Hafnia, Enterococcus e Lactococcus. Quanto à pesquisa de Listeria spp., foram obtidos 140 isolados presuntivos, dos quais 32,85% foram confirmados para o gênero Listeria. Desses, 8,69% apresentaram os três genes de virulência pesquisados – hlyA, inlA e actA, indicando que esses isolados possuem propriedades de uma cepa virulenta. O perfil de resistência a antimicrobianos das Listeria spp. testadas demonstrou que vancomicina, gentamicina e tetraciclina são as drogas mais eficientes contra essas bactérias. A ampicilina foi o antimicrobiano com maior índice de resistência, apresentada por 60,87% dos isolados. Os resultados deste trabalho permitem inferir possíveis falhas na produção e armazenamento de leite cru e adequar os procedimentos higiênico-sanitários e de controle, a fim de evitar alta concentração de bactérias psicrotróficas e consequente produção de enzimas deteriorantes. Infere-se ainda que o leite produzido e estocado a frio no agreste de Pernambuco constitui um risco à saúde pública e à cadeia produtiva leiteira do Estado pela presença de Listeria spp. potencialmente patogênicas e multirresistentes a antimicrobianos.

FACEPE A doença de Parkinson (DP) é a segunda enfermidade neurodegenerativa mais frequente no mundo e acomete cerca de 1 a 3% das pessoas acima de 65 anos. A DP não tem cura e o seu tratamento consiste no uso de medicamentos que propiciam estímulo dopaminérgico, principalmente a Levodopa, possibilitando o controle dos sintomas motores. Entretanto, em aproximadamente cinco anos, 40% a 60% dos pacientes desenvolvem complicações (motoras ou não-motoras) induzidas pelo uso crônico destas medicações. O presente trabalho teve por objetivo investigar fatores genéticos associados com a via de degradação (MAO-B e COMT), transporte (DAT1) e recepção (DRD2/ANKK1) da dopamina e o aparecimento de efeitos adversos (flutuação motora, discinesia e alucinações visuais) induzidas pela terapia dopaminérgica. A população de estudo foi composta por 230 pacientes com DP, diagnosticados e atendidos no serviço PRO-PARKINSON do ambulatório de neurologia do Hospital das Cínicas (HC) da UFPE. Todas as genotipagens foram realizadas por meio da técnica de PCR-RFLP. Nossos resultados mostraram que homens hemizigóticos para o gene MAOB, portadores do alelo A e mulheres dizigóticas com genótipo AA (rs1799836), assim como, indivíduos portadores do genótipo COMT LL (rs4680) apresentaram mais frequentemente discinesia induzida por Levodopa (OR= 2,5; p= 0,01; OR= 5,5; p= 0,0001, respectivamente). Por outro lado, foi observado que indivíduos homozigotos para 9 repetições do gene DAT1 (rs28363170) tiveram um efeito protetor para o desenvolvimento da discinesia (OR= 0,52; p= 0.50). Além disso, encontramos uma chance de risco 2,84 vezes maior para indivíduos do sexo masculino, hemizigóticos para o alelo G do gene MAO-B a serem tratados com doses maiores de Levodopa (p = 0,04). Baseado nesses resultados é possível concluir que, antes de iniciar-se a o tratamento farmacológico da DP, é importante levar em consideração tanto o sexo dos pacientes, como a presença de polimorfismos nos genes MAO-B, COMT e DAT1. Possibilitando desta forma, um tratamento personalizado e mais efetivo para os pacientes acometidos por esta doença. Parkinson's disease (PD) is the second most frequent neurodegenerative disease and affects about 1 to 3% of people over 65 years. With the expectation of population aging, it is expected a proportional increase in the prevalence of this disease, which justifies the concern with the management of these patients. PD has no cure and its treatment consists in the use of drugs that provide dopaminergic stimulation, mainly Levodopa, which allows a control of the motor symptoms in the first years of use. However, in approximately five years, half of the patients will present complications (motor or non-motor) induced by the chronic use of these medications, which causes worse quality of life. The present work aimed to investigate genetic factors that are associated with the degradation pathway (MAO-B and COMT), transport (DAT1) and reception (DRD2 / ANKK1) of dopamine with the appearance of complications induced by dopaminergic therapy (motor fluctuation and dyskinesia) and dopaminergic demand (Levodopa dose). This study was performed with 230 patients with PD, diagnosed and attended at PRO-PARKINSON service of the Neurology clinic of the HC / UFPE. The genotyping was performed using the PCR-RFLP technique. Our results showed that male hemizygous carrying MAOB A and woman carrying MAOB AA genotype (rs1799836) and LL (rs4680) COMT genotypes were more frequently affected by Levodopa-induced dyskinesia (OR: = 2.5; p= 0.01; OR= 5.5; p= 0.0001). On the other hand, it was observed that the carriers of genotype 9/9 (rs28363170) of the DAT gene had a protective effect for the development of dyskinesia (OR= 0.52; p= 0.50.) In addition, we found a 2.84-fold higher risk for male individuals, who had the MAO-B G allele treated with higher doses of Levodopa (p = 0.04). Based on these results, it is possible to conclude that, prior to the initiation of the pharmacological treatment of PD, it is important to take into account both the sex of the patients as well as the presence of polymorphism into MAO-B, COMT and DAT1 genes. This way, it is possible to set up a personalized and more effective treatment for the patients affected by PD

FALCÃO, Ana Carolina de Souza Leitão Arruda, também é conhecida em citações bibliográficas por: LEITÃO, Ana Carolina de Souza. CAPES Avalia a condição periodontal de crianças e adolescentes com Diabetes mellitus tipo 1(DM1) e de pacientes saudáveis e pesquisar polimorfismos em lócus gênicos das interleucinas IL1ß (+3954), IL6(-174), IL10(-1082) e TNFα (-308). Foi realizado um estudo caso-controle, com uma amostra de conveniência com 60 casos e 100 controles, com indivíduos entre 6 e 13 anos de idade. Todos os pacientes foram submetidos ao exame clínico periodontal, onde foram avaliados o Nível de Inserção Clínica (NIC), a Profundidade de Sondagem (PS), o Sangramento à Sondagem (SS) e o Índice de Placa Visível (IPV). Para a análise genética, foram coletadas amostras de saliva e após extração do DNA genômico, foram realizadas Reações em Cadeia da Polimerase, com primers específicos para cada lócus de interesse e realizadas as genotipagens em géis de agarose. O controle glicêmico foi avaliado, a partir da coleta dos valores atualizados da hemoglobina glicada (HbA1c) dos pacientes com DM1. Nas análises estatísticas, foram empregados o teste Qui-quadrado de Pearson e o de razão de Verossimilhança e o teste de Mann Whitney. A distribuição genotípica entre os grupos, para os lócus gênicos da IL1, IL6 e IL10 não apresentaram significância estatística. Para o lócus do TNFα, o genótipo GG foi mais presente entre os pacientes sem DM1. Não foi diagnosticada a doença periodontal (DP) e assim, não foi possível associar os genótipos a essa doença. Os pacientes do grupo controle apresentaram maior média de IPV (72,52 %) e PS (30,90% dos sítios), (p

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-11-09T14:09:38Z No. of bitstreams: 1 Karin Florencio Lins de Paiva Fontes.pdf: 1877999 bytes, checksum: f485fd2cb08ae45cb8ccefa3349ece7f (MD5) Made available in DSpace on 2017-11-09T14:09:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karin Florencio Lins de Paiva Fontes.pdf: 1877999 bytes, checksum: f485fd2cb08ae45cb8ccefa3349ece7f (MD5) Previous issue date: 2017-08-30 Equine Infectious Anemia (EIA) is caused by a lentivirus of the family Retroviridae and is considered one of the most important viruses in horses in the world. It is a chronic infection, untreated, prevalent in hot and humid climate regions favorable to transmission by hematophagous insects. The official diagnosis of the disease is made through the detection of circulating antibodies in the IDGA and ELISA tests. In order to increase protein yield and improve the performance of serological tests, the p26 gene sequence was optimized for preferred codons for use in E. coli and fused to maltose binding protein. The resulting recombinant fusion protein (p26rec) was detected by SDS-PAGE and Western blot with anti- HIS monoclonal antibody and used as an antigen in the development and evaluation to evaluate an IDGA and an ELISA (IDGArec and ELISArec) for the diagnosis of EIA. After analysis of 569 equine sera, diagnostic sensitivity (SeD) and diagnostic specificity (SpD) were determined. The cutoff point for ELISArec (> 29.51%) was determined by the ROC curve analysis. For IDGArec both SeD and SpD were 100% and for ELISArec were 100% and 99.6% respectively. The p26rec has been maintained with stable working dilutions for more than three years stored at 4 ° C. The results demonstrated the high degree of confidence obtained with p26rec in the IDGArec and ELISArec tests and could therefore be recommended in the serological diagnosis of the AIE. A Anemia Infecciosa Equina (AIE) é causada por um lentivírus da família Retroviridae e é considerada uma das viroses mais importantes em equinos no mundo. É uma infecção crônica, sem tratamento, prevalente em regiões de clima quente e úmido favorável à transmissão por insetos hematófagos. O diagnóstico oficial da doença é realizado através da detecção de anticorpos circulantes nos testes IDGA e ELISA. Visando aumentar a produção proteica e melhorar o desempenho dos testes sorológicos, a sequência do gene p26 foi otimizada com relação aos códons preferenciais para uso em E. coli e fusionada à proteína ligante de maltose com rendimento 2mg/ml de cultura celular. A proteína de fusão recombinante resultante (p26rec) foi detectada por SDS- PAGE e Western blot com anticorpo monoclonal anti-HIS. A p26rec do VAIE foi utilizada como antígeno no desenvolvimento e avaliação por IDGA e ELISA (IDGArec e ELISArec). Após a análise de 569 soros de equinos, foi determinada a sensibilidade diagnóstica (SeD) e a especificidade diagnóstica (SpD). O ponto de corte para o ELISArec (>29.51%) foi determinado pela análise da curva ROC. Para o IDGArec ambos a SeD e a SpD foram de 100% e para o ELISArec foram de 100% e 99,6% respectivamente. A p26rec vem se mantendo com título estável há mais de três anos armazenada a 4°C. Os resultados encontrados mostram o alto grau de confiança obtido com a p26rec nos testes IDGArec e ELISArec, podendo assim ser recomendados no diagnóstico sorológico da AIE.

A Osteoporose (OP) é uma doença osteometabólica e multifatorial relacionada à fatores genéticos em mais da metade dos casos diagnosticados. Recentes estudos de associação genômica ampla tem confirmado a estreita relação entre homeostase óssea e sistema imune, confirmando a influência de diversas citocinas e suas vias relacionadas à fenótipos característicos da doença. Com objetivo de validar funcionalmente essas descobertas e esclarecer a participação desses genes no desenvolvimento da OP pós-menopausa, o presente trabalho estudou a relação entre polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) nos genes IL17A, IL23R, IL12B e IFN-γ e a susceptibilidade à OP e resposta terapêutica, além de validar os genes RPLP0 e B2M como referência para análises funcionais na doença. Adicionalmente, foram realizados ensaios in vitro em células de osteocarcoma (SaOs-2) para estudo do perfil de expressão de citocinas e processos de calcificação. Nossos resultados mostraram os SNPs IL23R +2284 (A>C) (rs10889677), IL17A +672 (G>A) (rs7747909), IL12B +1188 (T>G) (rs3212227) e IFN-γ -1616 (G>A) (rs2069705) associados à alterações em marcadores de turnover ósseo em pacientes em terapia com bisfosfonatos, o IFN-γ rs2069705 associado à susceptibilidade à OP e a citocina IFN-γ aumentando o processo de calcificação em SaOs-2. Após essas análises, podemos demonstrar a importância dos SNPs estudados na susceptibilidade e tomadas de decisões terapêuticas em OP, além de ajudar a esclarecer o papel do IFN-γ no processo de calcificação em células ósseas. Osteoporosis (OP) is an osteometabolic and multifactorial disease related to genetic factors in more than half of the diagnosed cases. Recent genome-wide association study have confirmed the close relationship between bone homeostasis and the immune system, confirming the influence of several cytokines and their pathways associated with phenotypes OP-related. The aim of this study was to investigate the relationship between single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the IL17A, IL23R, IL12 and IFN-γ genes, to validate these findings and to clarify the role of these genes in postmenopausal OP susceptibility and therapeutic response to OP, besides we validate the RPLP0 and B2M genes as reference to OP functional studies. In addition, in vitro assays were performed in osteocarcoma cells (SaOs-2) to study the cytokine expression profile and calcification processes. Our results showed the SNPs IL23R + 2284 (A> C) (rs10889677), IL17A + 672 (G> A) (rs7747909), IL12B +1188 (T> G) (rs3212227) and IFN-γ (Rs2069705) were associated with bone turnover markers in patients treated with bisphosphonate, IFN-γ rs2069705 was associated with susceptibility to OP and the cytokine IFN-γ with increase in the viability and calcification process of SaOs-2. After these analyzes, we can demonstrate the importance of SNPs studied in the susceptibility and therapeutic decision in OP besides showing the role of IFN-γ in the process of calcification in bone cells.

CAPES O objetivo da presente pesquisa foi determinar as manifestações orais em pacientes com a Doença do Refluxo Gastroesofágico (DRGE), incluindo a condição dentária, os sintomas e os parâmetros salivares através de um estudo do tipo caso-controle. Para isso, foram estudados 70 indivíduos, sendo 30 diagnosticados com a DRGE, 20 compuseram o grupo controle com cárie e 20 o grupo controle livre de cárie. A confirmação do diagnóstico da doença do refluxo foi realizada através dos critérios de Montreal, além disso, foram realizados exames endoscópicos. História médica/dietética e a análise de sintomas bucais (sensibilidade dentária, xerostomia e sensação de queimação/acidez) foram realizadas para todos os grupos por meio de aplicação de questionários. Através de exame bucal analisou-se a presença de eritema na mucosa, erosão dentária, a condição dentária, bem como foi avaliado o pH e fluxo salivar estimulado e não estimulado. Em relação aos sintomas extraesofágicos, um percentual de 40% dos pacientes relatou queimação epigástrica de 4 a 7 dias e 36,7% referiram tosse um dia semanalmente. A presença de eritema na mucosa, os fluxos salivares (estimulado e não estimulado) e o pH da saliva não estimulada não apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (p>0,05). Os sintomas bucais demonstraram valores significativamente maiores no grupo caso quando comparado aos grupos controles (p0.05). The oral symptoms demonstrated significantly higher values in the case group when compared to the control groups (p

A artrite reumatoide (AR) é uma doença inflamatória, crônica e autoimune com manifestações articulares e sistêmicas, e atinge cerca de 1% da população mundial. Fatores genéticos, ambientais e imunológicos estão envolvidos na sua patogênese. Assim, investigamos a possível associação entre polimorfismos de base única (SNP): IL-6 (rs180079518), IL-12B (rs3212227) IL-17A (rs2275913), IL-17F (rs763780), IL-18 (rs549908), IL23R (rs10889677), TNF-α (rs1800629), IFN-γ (rs2430561), com características clínicas e susceptibilidade à AR. Para tal, realizamos um estudo de caso-controle com 90 pacientes e 189 controles saudáveis. A genotipagem foi realizada através da reação de polimerização em cadeia - polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (PCR-RFLP). Nossos resultados mostraram que a média de início da doença foi de 45 anos com predominância feminina (9:1). A atividade da doença estava aumentada em 50% dos pacientes, enquanto 71% e 65% foram positivos para o fator reumatoide (FR) e para o anticorpo contra peptídeos citrulinados cíclicos (anti-CCP), respectivamente. Observamos associação entre o risco para AR com polimorfismos nos genes IL-18 (OR=3.77, p

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-07T14:44:31Z No. of bitstreams: 1 Carolina Notaro de Barros.pdf: 1851976 bytes, checksum: ea4c03805ac579e8724b14c8dce99a18 (MD5) Made available in DSpace on 2018-03-07T14:44:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carolina Notaro de Barros.pdf: 1851976 bytes, checksum: ea4c03805ac579e8724b14c8dce99a18 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 Bacterial diseases restrict the expansion of intensive sea cage cobia (Rachycentron canadum) farming. They are usually treated with antibiotics, which in excess may lead to bacterial drug-resistance. Antibiotic residue can also reach the wild fish or other animals, fish farmers and fish consumers. In this study it was aimed to identify, by biochemical and molecular tests, potentially pathogenic Gram-negative bacteria multi-resistant to antibiotics and potentially probiotic Gram-positive bacteria isolated from farmed cobia intestine in different periods of the year. Ten fingerlings and 30 juveniles were collected, of which 82.5% showed evidence of bacterial infection and 47.5% of nephrocalcinosis. Biochemical and molecular identification results agreed in 86.11% of the 72 Gram-negative strains isolated. There were identified 18 species, 12 genera and five families, Aeromonaceae, Neisseriaceae, Pseudomonadaceae, Vibrionaceae and Enterobacteriaceae, the last one being more significant (63.88 %). The most frequent species were Enterobacter cloacae (27.78%) and Photobacterium damselae subsp. damselae (25%), greater pathogen to cobia. Antibiogram showed that 95.83% of the strains were penicillin resistant (6,25 μg), 62.50% ampicillin resistant (10 ug) and 15.28% enrofloxacin resistant (5 ug). Antibiotic multi-resistance was detected in 69.44% of the strains tested and E. cloacae achieved the highest MAR rate (0.8571). Regarding Gram-positive bacteria, 53 strains were obtained and classified in 13 species of the families Enterococcaceae, Paenibacillaceae, Staphylococcaceae, Streptococcaceae e Bacillaceae. Bacillus cereus was the most frequent species (39.62%) and Bacillaceae the most representative family. Antibacterial activity was observed in 16.98% of the strains, which produced inhibition zones ranged from 9.33 ± 0.58 to 28.77 ± 0.25 mm against Vibrio vulnificus, V. parahaemolyticus and V. alginolyticus. Species presenting antibacterial activity were Staphylococcus piscifermentans, S. lugdunensis, Bacillus spp., Enterococcus spp., E. faecium and Lactococcus lactis subsp. lactis. Of these, E. faecium was the most significant species (33.33%) producing the largest inhibition zones especially against V. vulnificus. Period of year was not significant (P ≥ 0.05) for cobia’s intestinal bacterial diversity, multidrug resistance of Gram-negative, or to the quantity of Gram-positive with antimicrobial properties. Intestine from R. canadum contains Gram-negative bacteria multi-drug resistant and potentially pathogenic to aquatic animals and humans, and Gram-positive bacteria with antimicrobial activity against vibrios, which must be considered as a prophylactic and/or therapeutic alternative against vibriosis in cobia farming. A ocorrência de doenças bacterianas representa restrição à expansão do cultivo intensivo de beijupirá (Rachycentron candum) em tanques-rede e são tratadas normalmente com administração de antibióticos, que usados inadequadamente podem provocar o desenvolvimento de bactérias resistentes, chegar aos peixes selvagens, outros animais e afetar piscicultores e consumidores do produto. Objetivou-se identificar a diversidade bacteriana Gram-negativa, potencialmente patogênica multirresistentes a antibióticos e Gram-positiva, potencialmente probiótica frente a Vibrio spp., isoladas do intestino de beijupirá cultivado offshore sob influência de distintos períodos do ano. Foram coletados dez alevinos e 30 juvenis, dos quais 82,5% exibiram indícios de infecção bacteriana e 47,5% de nefrocalcinose. Das 72 linhagens Gram-negativas identificadas por bioquímicos, 86,11% apresentaram concordância com a classificação molecular. Foram descritas 18 espécies, 12 gêneros e cinco famílias, Aeromonaceae, Neisseriaceae, Pseudomonadaceae, Vibrionaceae e Enterobacteriaceae, sendo a útima mais representativa (63,88%). As espécies mais frequentes foram Enterobacter cloacae (27,78%) e Photobacterium damselae subsp. damselae (25%), maior patógeno do beijupirá. 95,83% dos isolados foram resistentes à penicilina (6,25 μg), 62,50% a ampicilina (10μg) e 15,28% a enrofloxacina (5 μg). 69,44% foram multirresistentes aos antibióticos e a linhagem com maior índice de resistência múltipla a antimicrobianos (MAR) foi da espécie E. cloacae (0,8571). Com relação às bactérias Gram-positivas, foram isoladas 53 linhagens classificadas em 13 espécies, pertencentes às famílias Enterococcaceae, Paenibacillaceae, Staphylococcaceae, Streptococcaceae e Bacillaceae, sendo a última mais representativa na qual inclui Bacillus cereus, a espécie mais frequente (39,62%). 16,98% dos isolados apresentaram atividade antibacteriana, produzindo halos de inibição que variaram de 9,33 ± 0,58 a 28,77 ± 0,25 mm, frente ao Vibrio vulnificus, V. parahaemolyticus e V. alginolyticus. As espécies com atividade antibacteriana foram Staphylococcus piscifermentans, S. lugdunensis, Bacillus spp., Enterococcus spp., E. faecium e Lactococcus lactis subsp. lactis. E. faecium (33,33%) foi a espécie mais representativa, incluída no gênero Enterococcus spp. responsável pelos maiores halos de inibição especialmente frente ao V. vulnificus. O período do ano não influenciou significativamente (P ≥ 0,05) na diversidade bacteriana intestinal do beijupirá, na multirresistência das Gram-negativas, nem no número de Gram-positivas com propriedades antimicrobianas. O intestino do R. canadum inclui bactérias Gram-negativas potencialmente patogênicas para animais aquáticos e humanos, com elevadas taxas de multirresistência aos antimicrobianos testados, Gram-positivas patogênicas oportunistas para humanos e linhagens com atividade antimicrobiana frente à víbrios. As espécies Gram-positivas identificadas são consideradas probióticas para outras espécies de peixes e após os resultados encontrados nesse estudo, potenciais probióticas para beijupirá como alternativa profilática e/ou terapêutica frente às vibrioses.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-17T13:30:57Z No. of bitstreams: 1 Erinaldo Ubirajara Damasceno dos Santos.pdf: 5711027 bytes, checksum: 05684bbb6abc042b66317984510ed3df (MD5) Made available in DSpace on 2016-06-17T13:30:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erinaldo Ubirajara Damasceno dos Santos.pdf: 5711027 bytes, checksum: 05684bbb6abc042b66317984510ed3df (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 Cervical cancer (CC) affects about half a million women each year worldwide. The main etiological agent that can lead to the development of the CC is the human papillomavirus (HPV). However, not all women infected with HPV will have a progression to cancer, since the neoplastic development involves immune, genetic and environmental factors. Chemokine receptors play an important role in immune response, and progression of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) for CC. Genetic variations related to the genes of these receptors may lead to the formation of cervical neoplasia. This study aimed to associate polymorphisms in genes of CCR2-64I chemokine receptor (rs1799864) and CCR5-Δ32 (rs333) with susceptibility to the development of cervical lesions (CIN or CC) in women from the State of Pernambuco, Brazil. The study population consisted of 139 women with cervical lesions (patients) and 151 healthy women (controls). The CCR2-64I and CCR5-Δ32 polymorphisms were analyzed by the technique of PCR-RFLP. The HPV detection was performed using the standard PCR technique. A protective effect for individuals carriers of a mutant genotypes (GA or AA) for individuals with cervical injury to the polymorphism in CCR2-64I gene (OR = 0.37, p = 0.0008). The same was observed for the A allele (OR = 0.39, P = 0.0002). In contrast, no association to the polymorphism in the CCR5-Δ32 gene was observed (p> 0.05). The prevalence of HPV types showed that 38.8% of patients were infected with HPV16; 22.3% HPV 18; HPV31 2.9%; 3.6% HPV 33; and 14.4% for other types of HPV. For multiple infection 18% of patients were co-infected with types 16 and 18. When we analyzed the association of HPV type with CCR2-64I polymorphism in the gene between individuals of the group of patients there is an effect protector of infection for HPV 16 (OR = 0.35, p = 0.0184). Moreover, when patients were stratified according to the severity of cervical lesions, 28.78% (40/139) had CIN I (low grade lesion), 62.58% (87/139) had CIN II or III (high-grade lesions) and 8.63% (12/139) had CC. In summary, our study showed CCR2-64I polymorphism protective effect of both susceptibility to infection with HPV 16 and for the development of cervical lesions (CIN and CC). O câncer cervical (CC) afeta cerca de meio milhão de mulheres a cada ano em todo o mundo. O principal agente etiológico que pode levar ao desenvolvimento do CC é a infecção por Papillomavírus humano (HPV). Porém, nem todas as mulheres infectadas pelo HPV terão uma progressão para o câncer, visto que, o desenvolvimento neoplásico envolve fatores imunológicos, genéticos e ambientais. Os receptores de quimiocinas desempenham um importante papel na resposta imunológica e progressão de neoplasia intraepitelial cervical (NIC) para o CC. Variações genéticas relacionados com os genes destes receptores podem levar a formação de neoplasia cervical. O presente estudo teve como objetivo associar polimorfismos nos genes receptores das quimiocinas CCR2-64I (rs1799864) and CCR5-Δ32 (rs333) com a susceptibilidade para o desenvolvimento de lesão cervical (NIC ou CC) em mulheres residentes no Estado Pernambuco-Brasil. A população de estudo consistiu de 139 mulheres com lesões cervicais (pacientes) e 151 mulheres saudáveis (controles). Os polimorfismos CCR2-64I e CCR5-Δ32 foram analisados pela técnica da PCR-RFLP. A detecção do HPV foi realizada através da técnica de PCR convencional. Um efeito protetor foi observado para indivíduos carreadores de um dos genótipos mutantes (GA ou AA) em relação aos indivíduos com lesão cervical para o polimorfismo no gene CCR2-64I (OR = 0,37, p= 0,0008). O mesmo foi observado para o alelo A (OR = 0,39, P = 0,0002). Contrariamente, nenhuma associação para o polimorfismo no gene CCR5-Δ32 foi observada (p> 0,05). A prevalência dos tipos de HPV mostrou que 38,8% dos pacientes estavam infectados pelo HPV16; 22,3% HPV 18; 2,9% HPV31; 3,6% HPV 33; e 14,4% por outros tipos de HPV. Em relação a infecção múltipla, 18% dos pacientes foram co-infectados pelos tipos 16 e 18. Quando analisada a associação do tipo de HPV com o polimorfismo no gene CCR2-64I, entre os indivíduos do grupo de pacientes, observou-se um efeito protetor da infecção para o HPV 16 (OR = 0,35, p = 0,0184). Além disso, quando os pacientes foram estratificados de acordo com a gravidade das lesões cervicais, 28,78% (40/139) apresentaram NIC I (lesão de baixo grau), 62,58% (87/139) tinham NIC II ou III (lesão de alto grau) e 8,63% (12/139) tiveram CC. Em resumo, nosso estudo mostrou um efeito protetor do polimorfismo CCR2-64I tanto para susceptibilidade para a infecção pelo HPV 16 como para o desenvolvimento de lesões cervicais (CIN e CC).

CAPES Objetivo: o objetivo deste estudo foi investigar a ação de um dentifrício à base do extrato de Rosmarinus officinalis Linn. (Alecrim), através de um ensaio clínico randomizado, controlado, aberto e duplo cego. Material e Métodos: cento e dez voluntários, que preencheram os critérios de inclusão, foram randomizados em dois grupos, A e B, de acordo com os dentifrícios utilizados e avaliados antes e após 30 dias do estudo, onde foram registrados os Índices de Sangramento Gengival (IG) e de Placa (IP). A análise dos dados foi realizada calculando-se o efeito dos dois dentifrícios na redução do sangramento gengival e de placa, através de medidas como Excesso Relativo de Risco (ERR), Redução Relativa do Risco (RRR), Redução Absoluta do Risco (RAR) e o Número Necessário de Tratamento (NNT). Resultados: houve equivalência entre os dois dentifrícios em relação à redução do risco de sangramento gengival em termos relativos e absolutos (A reduziu em 38% ERR= 0,38; B reduziu em 29,3% ERR=0,293; A e B reduziram em 18% RAR= 0,18), em relação à eficácia da redução da placa bacteriana (A reduziu em 22,7% RRR=0,227; B reduziu 28% RRR= 0,28) e em relação ao número necessário de pacientes para tratamento do sangramento e da redução de placa (A e B NNT=5; A e B NNT=7, respectivamente). Conclusão O dentifrício de Alecrim se mostrou efetivo quanto ao sangramento gengival e redução de placa bacteriana em comparação ao dentifrício convencional. Relevância Clínica: o dentifrício de Alecrim é um produto viável clinicamente em comparação ao dentifrício convencional. Objective: The aim of the present study was to investigate the action of a toothpaste made from the extract of Rosmarinus officinalis Linn. (rosemary) in a clinical randomized, controlled, open and double-blind trial. Material and Methods: One hundred and ten volunteers fulfilled the inclusion criteria and were randomly separated into two groups according to the toothpastes used: Group A (experimental) and Group B (control). They were assessed at baseline and 30 days after the study using the gingival bleeding index (GBI) and the plaque index (PI). Data analysis was conducted to calculate the effects of the two toothpastes on gingival bleeding and plaque, using measurements such as the excess relative risk (ERR), the Relative Risk Reduction (RRR), the Absolute Risk Reduction (ARR) and the Number Needed for Treatment (NNT). Results: The two toothpastes provided similar results in terms of the reduction in the risk of gingival bleeding (relative and absolute): a reduction of 38% in Group A, ERR= 0.38; a reduction of 29.3% in Group B, ERR=0.293; A and B reduced by 18% ARR= 0.18). The reductions in bacterial plaque were also similar (22.7% reduction in Group A, RRR=0.227; 28% reduction in Group B, RRR= 0.28). The number needed for treatment values for bleeding and plaque were A and B NNT=5 and A and B NNT=7, respectively. Conclusion: The rosemary-based toothpaste effectively treated gingival bleeding and reduced bacterial plaque, when compared with conventional toothpaste. Clinical Relevance: The rosemary-based toothpaste is a clinically viable product, when compared with conventional toothpaste.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-13T12:38:16Z No. of bitstreams: 1 Juliana Ribeiro de Albuquerque.pdf: 1578907 bytes, checksum: ec8f261d099fa3465b9219c1ef3dbb95 (MD5) Made available in DSpace on 2016-06-13T12:38:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliana Ribeiro de Albuquerque.pdf: 1578907 bytes, checksum: ec8f261d099fa3465b9219c1ef3dbb95 (MD5) Previous issue date: 2015-06-15 Currently, there have been search for molecular markers in animal selection programs which could help in the classic selection, anticipating the evaluations of the animals and optimizing the genetic selection system focused on production. The hormone leptin and its receptors are mainly expressed in adipocytes and related to the control of food intake, energy use and indicator of nutritional conditions of the body that influence the actions of other physiological systems, such as milk production. Thus the present study aims to investigate the existence of LEP 1620 polymorphism (A / C) in the gene encoding the hormone leptin in buffaloes and their possible association with milk production in the Northeast region of Brazil. DNA was extracted from blood samples collected from the tails of animals. Blood samples were collected from 139 buffaloes from two farms in the Pernambuco and Alagoas. After DNA extraction, the samples were genotyped by PCR-RFLP technique. The AA, AG, GG were found. Since the AG genotype was associated with a higher milk production for the farm A when compared to farm Pernambuco. However, the genotypes presented in this study were not associated with variables for days in milk and average daily production. However, other leptin gene polymorphisms can be studied with a view to search for a marker, since there are few studies associated with this type buffalo. Atualmente, tem havido busca por marcadores moleculares a serem utilizados em programas de seleção para que atuem de forma complementar a seleção clássica, o que permite uma antecipação das avaliações nos animais, otimizando o sistema de seleção genética voltada à produção animal. O hormônio leptina e seus receptores são expressos principalmente nos adipócitos e estão relacionados com o controle da ingestão de alimentos, uso da energia e indicador da condição nutricional do organismo que influenciam em ações de outros sistemas fisiológicos, como produção de leite. Diante disso foi objetivado investigar a existência do polimorfismo LEP-1620 (A/G) no gene que codifica o hormônio da leptina em búfalas e suas possíveis associações com a produção leiteira em dois estados do Nordeste do Brasil, Pernambuco e Alagoas. O DNA foi extraído a partir de amostras de sangue coletado por venopunção da veia coccigea dos 139 búfalas das duas fazendas da região Nordeste. Após a extração de DNA, essas amostras foram genotipadas pela técnica PCR-RFLP. Foram encontrados os genótipos AA(21%), AG(50%), GG(29%). Sendo que o genótipo AG associado com uma maior produção de leite para a fazenda Alagoas quando comparada com a fazenda Pernambuco (p= 0,001). Porém, os genótipos apresentados neste estudo, não foram associados às variáveis analisadas para dias de lactação e produção média diária.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-09T13:34:24Z No. of bitstreams: 1 Alex Paulino da Silva.pdf: 1396065 bytes, checksum: da02f6043581303f3bb054d24fced4ae (MD5) Made available in DSpace on 2016-06-09T13:34:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alex Paulino da Silva.pdf: 1396065 bytes, checksum: da02f6043581303f3bb054d24fced4ae (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 Cervical cancer (CC) is a disease that affects approximately 1.5 million women in the world and has as a causing agent the human papillomavirus (HPV). Proteins associated with the immune response are essential for viral elimination. However, variations in their genes, such as IL-10 [(A-1082G) (rs1800896)] and TNF-α [(G-308A) (rs1800629)] may predispose individuals to various diseases such as lupus, rheumatoid arthritis, AIDS, as well as some forms of cancer. In the present study, we aimed to investigate the possible association of the single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the regions rs1800896 and rs1800629 with the predisposition to develop cervical squamous intraepithelial lesions and cervical adenocarcinoma. In addition, we wanted to match them with sociodemographic profiles and different habits of the patients. We used DNA samples from 240 women with HPV infection (168 vaginal secretion samples and 72 paraffin-embedded samples) and 169 healthy control DNA samples (HPV negative). Analysis of each polymorphism was performed by ARMS-PCR. Our results showed a positive association of the polymorphism rs1800896 of the IL-10 gene with susceptibility to develop cervical disease (p < 0.05). However, there was no association in relation to the polymorphism rs1800629 on the TNF-α gene (p > 0.05). On the other hand, for the latter SNP, a positive correlation was found for the following characteristics: age > 35 years, early age of first sexual intercourse, use of oral contraceptive, smoking, African ancestry and co-infection by Chlamydia trachomatis (p < 0.05). Our study showed that the IL-10 and TNF-α genes are strong candidates to be used as molecular biomarkers in the preventive screening of patients susceptible to cervical disease in the study population. O câncer cervical (CC) é uma doença que acomete aproximadamente 1,5 milhões de mulheres no mundo e possui como agente etiológico o Papilomavirus humano (HPV). Proteínas ligadas à resposta imune são essenciais para a eliminação viral. Entretanto, as variações em seus genes, tais como IL-10 [(A-1082G) (rs1800896)] e TNF-α [(G-308A) (rs1800629)] podem predispor os indivíduos ao surgimento de várias doenças como lúpus, artrite reumatoide, AIDS, assim como algum tipo de câncer. No presente estudo, objetivamos investigar a possível associação dos polimorfismos de base única (SNP) nas regiões rs1800896 e rs1800629 com a susceptibilidade ao desenvolvimento de lesões escamosas cervicais e adenocarcinoma uterino. Além disso, associá-los com dados clínicos das pacientes. Foram utilizadas 240 amostras de DNA de mulheres infectadas por HPV (168 de secreção vaginal, oriundas de lesão cervical escamosa, e 72 de material parafinado, proveniente de adenocarcinoma uterino) e 169 amostras de DNA de controle saudável (HPV e lesões negativas). A análise do polimorfismo foi realizada pela técnica ARMS-PCR. Nossos resultados mostraram associação do polimorfismo rs1800896 do gene IL-10 com a susceptibilidade às doenças cervicais (p0,05). Por outro lado, em relação a este último, encontramos associação dos genótipos GA/GG somados com as características: idade >35anos, idade precoce da coitarca, uso de contraceptivos orais, fumo, derivação africana e co-infecção por Chlamydia trachomatis (p

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-13T13:01:53Z No. of bitstreams: 1 Carliane Rebeca Coelho da Silva.pdf: 1369576 bytes, checksum: bb63bac1307bc50b7f204a30dfb71ef2 (MD5) Made available in DSpace on 2016-06-13T13:01:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carliane Rebeca Coelho da Silva.pdf: 1369576 bytes, checksum: bb63bac1307bc50b7f204a30dfb71ef2 (MD5) Previous issue date: 2014-03-17 Various educational institutions and research throughout the world have devoted efforts in the discovery of new insecticidal proteins and their genes for the control of agricultural pests. Studies have shown the potential of some molecules in insect control as the Bacillus thuringiensis Bt toxins, protease inhibitors and alpha-amylase and lectins. Genes coding for these proteins have been stably integrated into the genome of transgenic plants giving them resistance to pests, such as cultures of tobacco, tomato, potato, corn and cotton with Bt resistance to lepidopteran which are widely marketed in various countries. Several studies have confirmed the economy and the ecological benefit of these cultivars in international agribusiness. In cotton field lepidopteran and coleoptera orders are the worldwide major economic problems. Embrapa develops research for the control of cotton pests in order to reduce production costs, of these, 20-30% are for pest control. Despite the important results obtained so far chemical control has still been the best answer although more costly in financial and more aggressive aspect in environmental aspect. The cry1Ia gene derived from Bacillus thuringiensis strain S1451 may be responsible for this type of control. Insecticidal activity of this gene was tested aiming at the analysis of the recombinant protein for the boll weevil (Anthonomus grandis) and Spodoptera frugiperda caterpillar. Indicating that this gene is very promising for use in molecular area aimed at obtaining cultivate transgenic cotton resistant to these two important pests. In previous work this gene was inserted into three commercial cotton cultivars by microinjection technique via ovary drip. At that moment the cultivars received two different buildings, composed of a minimum linear cassette mlc (≈ 3 Kb) and a circular complete construction ccc (≈ 15 Kb), both containing the gene cry1Ia. The integration of the gene and protein expression was analyzed by PCR of genomic DNA, semi-quantitative RT-PCR, Southern blot and ELISA. Over 1,800 transgenes were tested and the full integration of (1 copy) gene was detected by Southern blot assay and found in only a single event called T0 34 which was derived from the cultivar BRS 293 in mlc treatment, suggesting a genotype-dependent trend. The expression of Cry1Ia protein in T0 34, estimated by ELISA was similar to the commercial event Bollgard (Monsanto, USA). The transmission of the transgene to T1 progeny was demonstrated by PCR analysis and no pleiotropic effects were observed in these plants were phenotypically normal, fertile flowers and with abundant production of seeds. In entomological aspect of military caterpillar larvae were used in feeding bioassays with leaves of T0 events resulting from BRS 293. These same plants were also analyzed for expression of Cry1Ia protein via ELISA. A total of 48 plants were only T0 34 selected in both tests, the mortality rate of 89% and a high concentration of the toxic protein in the leaves. Dried flower buds of this plant were provided to larvae of the boll weevil to study immunodetection via optical microscopy, using midgut tissues of the insect. It was found that this protein in flower buds specifically bound to the antibody used to demonstrate that this event is very promising for further studies of improvement of resistance to two important pest of the cotton crop. Várias instituições de ensino e pesquisa, em todo o mundo têm devotado esforços na descoberta de novas proteínas inseticidas e dos respectivos genes para o controle de pragas agrícolas. Trabalhos têm evidenciado o potencial de algumas moléculas no controle de insetos como as toxinas Bt do Bacillus thuringiensis, inibidores de proteases e de alfa-amilases e lectinas. Genes codificantes para essas proteínas têm sido estavelmente integrados ao genoma de plantas transgênicas conferindo-lhes resistência a pragas, como é o caso das culturas de tabaco, tomate, batata, milho e algodão Bt com resistência a lepidópteros que já são amplamente comercializadas em vários países. Vários estudos comprovam a economia e o benefício ecológico dessas cultivares no agronegócio internacional. Na lavoura algodoeira as pragas das ordens lepidóptera e coleóptera são os principais problemas econômicos em nível mundial. A Embrapa desenvolve pesquisas voltadas para o controle de pragas do algodoeiro com o intuito de reduzir os custos de produção, destes, 20 a 30% são para controle das pragas. Apesar dos importantes resultados obtidos até o momento o controle químico ainda tem sido o de melhor resposta embora mais oneroso no aspecto financeiro e mais agressivo no aspecto ambiental. O gene cry1Ia derivado da estirpe de Bacillus thuringiensis S1451 pode ser responsável por este tipo de controle. A atividade inseticida deste gene foi testada visando a análise da proteína recombinante para o bicudo do algodoeiro (Anthonomus grandis) e para a lagarta Spodoptera frugiperda. Indicando que este gene é bastante promissor para uso na área molecular visando obtenção de cultivar transgênica de algodão resistente a estas duas importantes pragas. Em um trabalho anterior esse gene foi inserido em três cultivares comerciais de algodão pela técnica de microinjeção via ovary drip. Nesse momento as cultivares receberam duas diferentes construções, compostas por um cassete linear mínimo mlc (≈ 3 Kb) e uma construção circular completa ccc (≈ 15 Kb), ambas contendo o gene cry1Ia. A integração do gene e expressão de proteína foram analisadas por PCR de DNA genômico, RT-PCR semi-quantitativo, Southern blot e ELISA. Mais de 1.800 transgenes foram testados e a integração do gene completo (1 cópia) foi detectada pelo ensaio de Southern blot e encontrada em apenas um único evento denominado T0 34 que foi derivado da cultivar BRS 293 no tratamento mlc, sugerindo uma tendência genótipo-dependente. A expressão da proteína Cry1Ia no evento T0 34, estimada por ELISA, foi semelhante a Bollgard comercial (Monsanto, EUA). A transmissão do transgene para progênies T1 foi demonstrada por análise de PCR e nenhum efeito pleiotrópico foi verificado nessas plantas que foram fenotipicamente normais, com flores férteis e produção de sementes abundantes. No aspecto entomológico larvas da lagarta militar foram utilizadas em bioensaios de alimentação com folhas dos eventos T0 resultantes da BRS 293. Essas mesmas plantas também foram analisadas quanto a expressão da proteína Cry1Ia, via ELISA. De um total de 48 plantas, apenas a T0 34 foi selecionada em ambos os ensaios, com taxa de mortalidade de 89% e elevada concentração da proteína toxica nas folhas. Botões florais desidratados dessa planta foram fornecidos a larvas do bicudo do algodoeiro para estudo de imunodetecção via microscopia ótica, utilizando-se tecidos do intestino médio do inseto. Verificou-se que a proteína presente nos botões florais se ligaram especificamente ao anticorpo utilizado demonstrando que esse evento é muito promissor para posteriores estudos de melhoramento visando resistência a duas importantes pragas da lavoura algodoeira.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-13T14:10:30Z No. of bitstreams: 1 Ellen Cordeiro Bento da Silva.pdf: 1569026 bytes, checksum: 6366a64f83b2fc475c8cead9d8dc65aa (MD5) Made available in DSpace on 2016-06-13T14:10:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ellen Cordeiro Bento da Silva.pdf: 1569026 bytes, checksum: 6366a64f83b2fc475c8cead9d8dc65aa (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES It was aim to evaluate the effect of different concentrations of phenolic antioxidants on freezability of goats sperm, as well as their action during centrifugation in continuous Percoll density gradients and after selected semen freezing. Six goat semen pools were used for each of the three experiments. In the first two experiments, each semen pool was processed and diluted in the skimmed milk based extender (7 % glycerol), with or without antioxidants, according to experiment and experimental group [1 Experiment: 0, 15, 25, 50, 75 or 100 μM catechin or epigallocatechin gallate (EGCG); Experiment 2: 0, 15, 25, 50, 75 or 100 μM resveratrol or quercetin]. In Experiment 3, each semen pool was centrifugated in continuous Percoll density gradients and frozen (with or without antioxidants) according to experimental groups (NS=non selected; S= selected; SC75= selected with 75 μM catechin; SE100= selected with 100 μM EGCG; SQ25=selected with 25 μM quercetin; SR25=selected with 25 μM resveratrol; SR75=selected with 75 μM resveratrol). In Experiment 1, immediately after thawing, the straight linear velocity (VSL) and average path velocity (VAP) were greater (P

O Lúpus eritematoso sistêmico (LES) é uma doença autoimune sistêmica e crônica, com uma patogênese envolvendo múltiplos fatores. As citocinas têm um papel crucial no desenvolvimento e progressão do LES. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a associação dos polimorfismos dos genes das interleucinas proinflamatórias IL2, IL12B, IL17A, IL17F, IL23R e TNF com o desenvolvimento do LES, atividade da doença e manifestações clínicas apresentadas. Foram selecionadas 122 mulheres com Lupus atendidas no Hospital das Clínicas-UFPE. Os polimorfismos TNF (-308 G/A), IL17A -197(G/A), IL17F (7488 A/G), IL23R (2199 A/C) e IL12B (3’UTR +1188 A/C) foram identificados por PCR-RFLP e a genotipagem do polimorfismo 3’UTR +1188 (A/C) IL2 foi por ARMS-PCR. Nossos resultados mostram que os polimorfismos dos genes TNF (p=0,0012), IL17F (p=0,0005), IL2 (p=0,0011), IL12 (p=

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2022-08-11T12:09:17Z No. of bitstreams: 1 Roniery Carlos Goncalves Galindo.pdf: 992930 bytes, checksum: f1665bf675316095825e76d61ccd4619 (MD5) Made available in DSpace on 2022-08-11T12:09:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roniery Carlos Goncalves Galindo.pdf: 992930 bytes, checksum: f1665bf675316095825e76d61ccd4619 (MD5) Previous issue date: 2014-01-30 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The enzootic bovine leukosis has economic importance, because it is the cause of death or predisposition to secondary infections, production losses, carcass condemnation, marketing restrictions on the animals or their products and reproductive performance failure. These aspects are the reason studies looking for identify cattle infected bovine leukosis virus (BLV) and the elucidation of the pathogenic action of the immune system to intensify, through the use of new diagnostic techniques. Thus, the aim of this work is to compare the AGID and PCR techniques in the diagnosis of cattle naturally infected with BLV and evaluate the usefulness of serum concentration of β2-microglobulin (β2-M) as a diagnostic feature of the evolution of BLV infection. The results of the 301 samples analyzed by AGID and PCR, 234 (77.7%) were similar and the kappa was considered as acceptable. PCR showed a sensibility of 89.5%, specificity 76.0%, positive predictive value 35.1% and negative predictive value 98.0%. The concentration of β2 -M in the 60 analyzed samples was higher in the group of calves than in seronegative individuals seropositive for the BLV, however, significant difference was not recorded. The correlation result from 60 samples of total leukocytes and β2-M in the seropositive individuals was 0.078 (p = 0.681) and 0.042 (p = 0.826) in the negative group. The values to the amount of lymphocyte/mm3 with β2 -M was 0.200 (p = 0.289) in seropositive and 0.172 (p = 0.363) in the seronegative group. Therefore, the correlations were low and not significant. From the results obtained from the correlation between β2-M, total leukocytes and lymphocytes in cattle infected with BLV can be inferred in this study that the correlation was not efficient to be used as a resource for early diagnosis of BLV infection. It was also conclude that PCR using primers from the long terminal region of the virus was effective in detecting cattle infected with BLV, suggesting that it is using as a confirmatory test, because the negative predictive value was high. A Leucose Enzoótica dos bovinos tem importância econômica, por levar ao óbito ou predispor a infecções secundárias, além de prejuízos na produção, condenação de carcaças, restrição na comercialização dos animais ou de seus produtos e queda do desempenho reprodutivo. Tudo isso faz com que na buiatria, os estudos voltados à identificação de bovinos infectados pelo Vírus da Leucose Bovina (VLB) e a elucidação da sua ação patogênica no sistema imune se intensifique, mediante utilização de novas técnicas de diagnóstico. Assim, objetivou-se com esse trabalho comparar as técnicas PCR e IDGA no diagnóstico de bovinos naturalmente infectados pelo VLB e avaliar a utilidade da concentração sérica da β2- Microglobulina (β2-M), como recurso diagnóstico da evolução da infecção pelo VLB. Das 301 amostras analisadas pela IDGA e PCR, 234 (77,7%) apresentaram resultados concordantes e o índice kappa definido como aceitável. A PCR apresentou índice de sensibilidade de 89,5%, especificidade 76,0%, valor preditivo positivo 35,1% e valor preditivo negativo 98,0%. A concentração da β2-M nas 60 amostras analisadas foi mais elevada no grupo de bovinos soropositivos do que nos soronegativos para o VLB, no entanto, a diferença significativa não foi registrada. O resultado da correlação das 60 amostras entre os leucócitos totais e β2-M no grupo soropositivo foi 0,078 (p=0,681) e 0,042 (p=0,826) no grupo negativo. Os valores relativos à quantidade de linfócito/mm3 com β2-M foi 0,200 (p=0,289) no grupo soropositivo e 0,172 (p=0,363) no grupo soronegativo. Portanto, as correlações foram baixas e não significativas. Mediante os resultados obtidos da correlação entre a β2-M, os leucócitos totais e linfócitos em bovinos infectados pelo VLB; pode-se inferir nesse estudo que a correlação não se mostrou eficiente para ser utilizada como recurso de diagnóstico precoce da infecção pelo VLB. Concluí-se também, que a PCR utilizando-se os primers da longa região terminal do vírus foi eficaz na detecção de bovinos infectados pelo VLB, sugerindo que seja utilizando como teste confirmatório, visto que o valor preditivo negativo foi alto.

Orientadores: Hernandes Faustino de Carvalho, Paulo Roberto Eleutério de Souza Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A próstata é alvo de afecções severas que comprometem a função urinária, a qualidade de vida e que consistem em risco de vida aos indivíduos do sexo masculino, particularmente com o avançar da idade. Interações dinâmicas entre o epitélio prostático e o estroma, regulam vários aspectos do desenvolvimento, da função e das patologias prostáticas. O gene WFDC1 é expresso pelas células musculares lisas do estroma prostático normal e tem função na regulação do comportamento do epitélio, na organização da matriz extracelular e na regulação da angiogênese. Dois transcritos principais são oriundos de splicing alternativo do transcrito primário: um com todos os éxons (WFDC1) e outro sem o éxon 3 (Delta 3). Neste trabalho, investigamos as relações quantitativas entre estas duas variantes, com emprego de qRT-PCR (Taqman) e sondas para as junções dos éxons 2-3 e 2-4, em amostras de hiperplasia prostática benigna (BPH) e de câncer de próstata (PCA) provenientes de bancos de tecidos. A expressão do gene marcador MYH11 foi utilizada como estimativa do conteúdo de células musculares lisas nas amostras. Os resultados demonstraram que as amostras puderam ser dividas em dois grupos com expressão diferencial da MYH11(um com baixa expressão e outro com alta miosina, sendo o primeiro correspondente ao quartil inferior da distribuição dos valores de expressão). Foi demonstrada correlação entre a expressão de WFDC1 e MYH11 em BPH, mas não em PCA, enquanto não houve correlação entre Delta 3 e WFDC1 e nem com MYH11. O conteúdo de Delta 3 variou em cinco ordens de magnitude em comparação ao de WFDC1. A razão entre as duas variantes apresentou variação exponencial, distribuições discretas e intercaladas das amostras de BPH e de PCA, que se distribuíram em populações que preservaram as relações 10:1; 1:1 e 1:3. Poucas amostras estiveram livres de cada uma destas variantes. Em conclusão, a expressão do gene WFDC1 e de sua variante WFDC1 correlaciona-se com a diferenciação das células musculares lisas, mas não está condicionada a ela, enquanto a expressão de Delta 3 é completamente independente deste parâmetro e tem correlação positiva com o progressão do PCA, quando o sistema de classificação de Gleason (Gleason 1 + Gleason 2) foi considerado. Adicionalmente, fatores independentes da idade, incidência de BPH ou PCA, são mais influentes na determinação da quantidade total e da proporção entre as duas variantes Abstract: The prostate gland is intimately related with reproductive and urinary functions, commonly disturbed by a series of diseases. Besides reducing the quality of life, they consist in serious life risk particularly to the aging men. Dynamic interactions between the epithelium and stroma in the gland regulate various aspects of development, function and pathologies. The WFDC1 gene is expressed by smooth muscle cells in the prostate stroma and its product ps20 was shown to control epithelial cell behavior, extracellular matrix organization and angiogenesis. It is supposed to function as a serine protease inhibitor, as other members of its family do. Two transcripts are produced as a result of alternative splicing. The first (WFDC1) retains all exons and the second (Delta 3) lacks the exon 3. In this work, we investigated the quantitative relationship among these two splicing variants, using qRT-PCR (Taqman) probing the junctions between exons 2-3 and 2-4, in benign prostatic hyperplasia (BPH) and prostate cancer (PCA) samples from tissue banks. The expression of the MYH11 gene was used to estimate the content of smooth muscle cells in the samples. The results demonstrate that the samples could be divided in two groups with low or high expression of MYH11, the first corresponding to the lower quartile of expression values). WFDC1 and MYH11 expression were correlated in the BPH samples. Delta 3 expression was independent of both WFDC1 and from WFDC1. The ratio between the variants WFDC1 and Delta 3 varied exponentially in five orders of magnitude. The the ratio between the two variants also varied exponentially, with BPH and PCA samples arranged in discrete and intercalated subgroups. The distribution of populations with different expression levels preserved the ratios 10:1, 1:1 and 1:3. Either variant was absent in only a few samples. In conclusion, the expression of WFDC1 and it WFDC1 variant correlates with but is not conditioned to the differentiation of smooth muscle cells, while Delta 3 is completely independent and is positively correlated with PCA grade (as assessed by the summed Gleason score). Unknown factors independent of age, BPH or PCA incidence are likely influencing Delta 3 expression Doutorado Biologia Celular Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T12:50:17Z No. of bitstreams: 1 Maria Taciana Ralph.pdf: 2037861 bytes, checksum: 741dc14a84d30b0c1c5f968794b721c9 (MD5) Made available in DSpace on 2016-06-09T12:50:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Taciana Ralph.pdf: 2037861 bytes, checksum: 741dc14a84d30b0c1c5f968794b721c9 (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Carica candamarcensis é uma planta pertencente à família Caricaceae, cujo látex possui proteínas com importantes atividades biológicas descritas. A fração proteica P1G10, obtida por cromatografia de gel-filtração a partir do conjunto de proteínas desse látex, já foi relatada por suas atividades mitogênica, angiogênica e gastroprotetora. No presente estudo, um modelo de infecção sistêmica experimental, causada por Salmonella enterica Sor. Typhimurium, em camundongos, foi utilizado para avaliar o potencial de P1G10 no controle da infecção e inflamação decorrente. Os animais receberam P1G10 (1, 5 ou 10 mg/ Kg), ou solução salina tamponada (PBS), via intraperitoneal, 24 horas antes da infecção por Salmonella Typhimurium (0,2 mL; 107 UFC/ mL). A taxa de sobrevivência dos animais pré-tratados com 10 mg/ Kg de P1G10 atingiu 60% após 7 dias da infecção, ao passo que o grupo controle sucumbiu por inteiro até o terceiro dia após o desafio infeccioso. As análises histológicas dos fígados e baços dos animais experimentais, após 72 horas de infecção, mostraram células mais preservadas em relação ao grupo controle. Apesar do menor número de bactérias no fígado, P1G10 não estimulou o clareamento bacteriano no baço, fluido peritoneal e sangue dos animais após a infecção e não demonstrou atividade antibacteriana in vitro contra S. Typhimurium na dosagem máxima de 1 mg/ ml. Após 72h de infecção, houve maior migração de leucócitos para a cavidade peritoneal dos animais experimentais, porém não houve diferença significativa na quantidade de leucócitos no sangue ou na produção de óxido nítrico entre os animais controle e experimentais. A avaliação da expressão gênica de citocinas, por RT-PCR Tempo Real, demonstrou que ocorreu diminuição relativa na produção de transcritos de TNF-α e IL-1β no fígado dos animais experimentais em relação ao grupo controle e que IL-10 não foi expresso por nenhum dos grupos. Para melhor compreensão do efeito das proteínas presentes em P1G10 sobre a resposta inflamatória foi utilizado um modelo de peritonite, em camundongos, induzia pelo agente flogístico carragenina . Foi observado que quando administrada por via intraperitoneal a fração proteica P1G10 potencializa o efeito pró-inflamatório desenvolvido pelo agente flogístico, por outro lado, um efeito anti-inflamatório é desencadeado quando P1G10 foi administrado via endovenosa. Tal efeito parece estar relacionado à inibição da cascata do sistema complemento, uma vez que a exposição de P1G10 ao soro humano e ovino, inibiu a lise de Escherichia coli in vitro, nas concentrações de 5 e 10 mg/ mL, o mesmo não foi observado quando as proteínas presentes em P1G10 foram desnaturadas pelo calor, sugerindo que a ação anti-complemento seja devido a intensa atividade proteolítica presente nesta fração proteica. Conclui-se que, P1G10 possui potencial anti-inflamatório, além de estimular a migração de leucócitos para o foco infeccioso e diminuir relativamente a expressão das citocinas inflamatórias TNF-α e IL-1β evitando assim o choque séptico nos animais pré-tratados, desta forma, P1G10 capaz de aumentar a sobrevida de animais infectados por S. Typhimurium. Carica candamarcensis é uma planta pertencente à família Caricaceae, cujo látex possui proteínas com importantes atividades biológicas descritas. A fração proteica P1G10, obtida por cromatografia de gel-filtração a partir do conjunto de proteínas desse látex, já foi relatada por suas atividades mitogênica, angiogênica e gastroprotetora. No presente estudo, um modelo de infecção sistêmica experimental, causada por Salmonella enterica Sor. Typhimurium, em camundongos, foi utilizado para avaliar o potencial de P1G10 no controle da infecção e inflamação decorrente. Os animais receberam P1G10 (1, 5 ou 10 mg/ Kg), ou solução salina tamponada (PBS), via intraperitoneal, 24 horas antes da infecção por Salmonella Typhimurium (0,2 mL; 107 UFC/ mL). A taxa de sobrevivência dos animais pré-tratados com 10 mg/ Kg de P1G10 atingiu 60% após 7 dias da infecção, ao passo que o grupo controle sucumbiu por inteiro até o terceiro dia após o desafio infeccioso. As análises histológicas dos fígados e baços dos animais experimentais, após 72 horas de infecção, mostraram células mais preservadas em relação ao grupo controle. Apesar do menor número de bactérias no fígado, P1G10 não estimulou o clareamento bacteriano no baço, fluido peritoneal e sangue dos animais após a infecção e não demonstrou atividade antibacteriana in vitro contra S. Typhimurium na dosagem máxima de 1 mg/ ml. Após 72h de infecção, houve maior migração de leucócitos para a cavidade peritoneal dos animais experimentais, porém não houve diferença significativa na quantidade de leucócitos no sangue ou na produção de óxido nítrico entre os animais controle e experimentais. A avaliação da expressão gênica de citocinas, por RT-PCR Tempo Real, demonstrou que ocorreu diminuição relativa na produção de transcritos de TNF-α e IL-1β no fígado dos animais experimentais em relação ao grupo controle e que IL-10 não foi expresso por nenhum dos grupos. Para melhor compreensão do efeito das proteínas presentes em P1G10 sobre a resposta inflamatória foi utilizado um modelo de peritonite, em camundongos, induzia pelo agente flogístico carragenina . Foi observado que quando administrada por via intraperitoneal a fração proteica P1G10 potencializa o efeito pró-inflamatório desenvolvido pelo agente flogístico, por outro lado, um efeito anti-inflamatório é desencadeado quando P1G10 foi administrado via endovenosa. Tal efeito parece estar relacionado à inibição da cascata do sistema complemento, uma vez que a exposição de P1G10 ao soro humano e ovino, inibiu a lise de Escherichia coli in vitro, nas concentrações de 5 e 10 mg/ mL, o mesmo não foi observado quando as proteínas presentes em P1G10 foram desnaturadas pelo calor, sugerindo que a ação anti-complemento seja devido a intensa atividade proteolítica presente nesta fração proteica. Conclui-se que, P1G10 possui potencial anti-inflamatório, além de estimular a migração de leucócitos para o foco infeccioso e diminuir relativamente a expressão das citocinas inflamatórias TNF-α e IL-1β evitando assim o choque séptico nos animais pré-tratados, desta forma, P1G10 capaz de aumentar a sobrevida de animais infectados por S. Typhimurium.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-14T14:08:17Z No. of bitstreams: 1 Karin Florencio Lins de Paiva Fontes.pdf: 1183202 bytes, checksum: cd071de0a1543bbb031923846a82c239 (MD5) Made available in DSpace on 2016-10-14T14:08:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karin Florencio Lins de Paiva Fontes.pdf: 1183202 bytes, checksum: cd071de0a1543bbb031923846a82c239 (MD5) Previous issue date: 2013-01-19 Equine Infectious Anemia (EIA), considered one of the most important viruses in horses in the world, is caused by a lentivirus of the Retroviridae family. It is a chronic infection without treatment, mainly prevalent in regions with hot and humid climate, favorable for transmission by blood-sucking insects. According to the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA), the restriction of transit and slaughter of infected animals are the strategies for the control of EIA in Brazil, which causes losses in equine breeding. The official diagnosis of the disease is carried out by detection of circulating antibodies by Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and ELISA. The p26 protein from EIAV is highly conserved and used in most diagnostic tests, since it induces a strong humoral response. The aim of this work was the production of a p26 recombinant protein in Escherichia coli for use in serologic tests. The p26 gene sequence was optimized with respect to E. coli codon usage, in order to maximize protein production, and was added with a marker sequence of six histidine residues (6xHis-tag) for later protein detection and purification. The sequence was synthesized and cloned downstream of the gene of a maltose binding protein (MBP2*) on the pMAL-c4X expression vector. The E. coli gene induction was performed by Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside and the resulting protein (MBP2*.p26mod) was detected by SDS-PAGE gel and Western blot with monoclonal anti-HIS. The MBP2*.p26mod was visualized as a 68.5 kDa band, the recombinant fusion protein was cleaved with factor Xa resulting in two bands of 42.5 and 26 KDa, corresponding to MBP2* and p26mod respectively. The MBP2*.p26mod purification was performed with affinity chromatography by nickel resin and yielded 78.12 mg/L of bacterial culture. The MBP2*.p26mod protein was intensely immunoreactive at AGID test where precipitation lines were observed only among the positive sera, including reference OIE serum, and the protein MBP2*.p26mod, showing high analytical sensitivity and specificity of the recombinant protein. A Anemia Infecciosa Equina (AIE), considerada uma das viroses mais importantes em equinos no mundo, é causada por um lentivírus da família Retroviridae. É uma infecção crônica, sem tratamento, prevalente principalmente em regiões de clima quente e úmido, favorável à transmissão por insetos hematófagos. Segundo o Ministério da Agricultura e Pecuária e Abastecimento (MAPA), a restrição do trânsito e abate de animais infectados são as estratégias para o controle da AIE no Brasil, o que ocasiona perdas na equinocultura. O diagnóstico oficial da doença é realizado pela detecção de anticorpos circulantes através da imunodifusão em gel de Agar (IDGA) e de ELISA. A proteína p26 do vírus da AIE é altamente conservada e utilizada na maioria dos testes de diagnóstico, uma vez que induz uma forte resposta humoral. O objetivo com este trabalho foi a produção de uma proteína p26 recombinante em Escherichia coli para uso em testes diagnóstico sorológico. A sequência do gene p26 foi otimizada com relação aos códons preferenciais e ao conteúdo GC para uso em E. coli, a fim de maximizar a produção de proteínas, e foi adicionado à sequencia um marcador de seis resíduos de histidina (6xHis-tag) para posterior detecção e purificação protéica. A sequencia foi sintetizada e clonada a jusante do gene de uma proteína ligante de maltose (MBP2*) no vetor de expressão pMAL-c4X. A indução gênica da E. coli transformada foi realizada com isopropil β-D-tiogalactopiranosídeo e a proteína resultante (MBP2*.p26mod) foi detectada por SDS-PAGE em gel e Western blot com anticorpo monoclonal anti-HIS. A MBP2*.p26mod foi visualizada como uma banda de 68,5 kDa, a qual foi clivada com fator Xa resultando em duas bandas de 42,5 e 26 KDa, correspondentes à MBP2* e à p26mod respectivamente. A purificação MBP2*.p26mod foi realizada por cromatografia de afinidade com resina de níquel e foi obtido um rendimento de 78,12 mg/L de cultura bacteriana. A proteína MBP2*.p26mod foi intensamente imunoreativa no teste de IDGA, onde foram observadas linhas de precipitação únicas entre os soros positivos, inclusive o soro de referência OIE, e a proteína MBP2*.p26mod, demonstrando altas especificidade e sensibilidade analíticas da proteína recombinante.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-15T13:46:56Z No. of bitstreams: 1 Karine Kelly Cavalcanti Oliveira.pdf: 775211 bytes, checksum: a252b067bc8c7be94d94fe9b48509a38 (MD5) Made available in DSpace on 2017-02-15T13:46:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karine Kelly Cavalcanti Oliveira.pdf: 775211 bytes, checksum: a252b067bc8c7be94d94fe9b48509a38 (MD5) Previous issue date: 2012-08-28 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The piau-verdadeiro (Leporinus elongatus) is a freshwater fish that inhabits rivers of Paraná-Paraguai and São Francisco basins. Along these regions were built huge dams for power generation, which is hindering the reproductive migration of many species. Populations of L. elongatus have decreased, with greater decline in the region of sub-middlle São Francisco. Many electric companies and government are restocking perform without worrying about ecological principles, so little genetic. These management actions, in the long run, may lead to a decrease in the genetic diversity of these stocks, which can aggravate the adaptation of these populations. In this study, microsatellite markers of L. elongatus were constructed through a genomic library enriched for tetranucleotide motifs (GACA)4 and (GATA)7. Of a total of 14 markers that consistently amplified, seven were monomorphic and seven polymorphic. All markers successfully amplified for L. elongatus, however, for species of the same genus, L. reinhardt and L. taeniatus, only the marker Lelo 12 amplified to L. reinhardt. The seven polymorphic markers were assessed in a wild population of 44 individuals caught in the Upper São Francisco (MG). The number of alleles varied between five (Lelo 20) to 29 (Lelo 13), the observed and expected heterozygoties ranged from 0.568 to 0.977 and from 0.533 to 0.964, respectively. All the markers studied are in Hardy-Weinberg equilibrium and null alleles were not detected, however, two markers, Lelo 4 and Lelo 14 are connected on the same chromosome. These are the first microsatellite markers developed for this species and its characteristics allow it to be used in studies of population genetics, conservation and monitoring of restocking programs of the São Francisco River. O piau-verdadeiro (Leporinus elongatus) é um peixe de água doce que habita rios das bacias do Paraná-Paraguai e do São Francisco. Ao longo destas regiões foram construídos imensos barramentos para geração de energia, o que vem prejudicando a migraçao reprodutiva de muitas espécies. As populações de L. elongatus têm diminuído, com maior declínio na região do submédio São Francisco. Muitas empresas hidrelétricas e governamentais realizam repovoamento sem a preocupação com princípios ecológicos, tão pouco genéticos. Estas ações de manejo, em longo prazo, podem provocar uma diminuição na diversidade genética destes estoques, o que pode agravar a adaptação destas populações. Neste trabalho, marcadores de microssatélites de L. elongatus, foram construídos através de uma biblioteca genômica enriquecida para motivos tetranucleotídeos (GACA)4 e (GATA)7. De um total de 14 marcadores que amplificaram consistentemente, sete foram monomórficos e sete, polimóficos. Todos os marcadores amplificaram com sucesso para o L. elongatus, no entanto, para espécies do mesmo gênero, L. reinhardt e L. taeniatus, apenas o marcador Lelo 12 amplificou para o L. reinhardt. Os sete marcadores polimórficos foram avaliados em uma população selvagem de 44 indivíduos capturados no Alto São Francisco (MG). O número de alelos variou de cinco a 29, as heterosigozidades observadas e esperadas variaram de 0,568 a 0,977 e de 0,533 a 0,964, respectivamente. Todos os marcadores estudados estão em equilíbrio de Hardy-Weinberg e não apresentaram alelos nulos, entretanto, dois marcadores, Lelo 4 e Lelo 14 estão ligados em um mesmo cromossomo. Esses são os primeiros marcadores de microssatélite desenvolvidos para esta espécie e suas características permitem que sejam usados em estudos de genética populacional, conservação e monitoramento de programas de repovoamento do rio São Francisco.

O papilomavírus humano (HPV) é o principal agente etiológico de lesões malignas, a exemplo do câncer cervical e de suas lesões precursoras, as Neoplasias Intraepiteliais Cervicais (NICs). Investigamos se os polimorfismos de base única (SNPs) no gene da Beta-Defensina Humana 1 (DEFB1) poderiam estar associados à susceptibilidade à infecção e à progressão da lesão cervical provocadas por HPV de alto risco. Polimorfismos neste gene têm sido alvo de diversos estudos e revelaram ser de suma importância na susceptibilidade a diversas infecções. Neste estudo, os SNPs -52G/A, -44C/G e -20 G/A na região 5' UTR do gene DEFB1 foram analisados através de sequenciamento, em um grupo de 160 pacientes do sexo feminino HPV positivas e 71 indivíduos sadios. As análises estatísticas foram feitas utilizando o Teste exato de Fisher e o Teste do Qui-quadrado. Os resultados indicam que o alelo -44G e o haplótipo ACA podem estar relacionados com a susceptibilidade à infecção pelo HPV de alto risco. Os resultados não apontam diferenças significativas nas frequências alélicas e genotípicas dos outros polimorfismos entre pacientes infectados com HPV de alto risco e indivíduos sadios. Também não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas nas frequências alélicas e genotípicas nos pacientes HPV positivos quanto ao grau de lesão cervical.

O papilomavírus humano (HPV) é o principal agente etiológico de lesões malignas, a exemplo do câncer cervical e de suas lesões precursoras, as Neoplasias Intraepiteliais Cervicais (NICs). Investigamos se os polimorfismos de base única (SNPs) no gene da Beta-Defensina Humana 1 (DEFB1) poderiam estar associados à susceptibilidade à infecção e à progressão da lesão cervical provocadas por HPV de alto risco. Polimorfismos neste gene têm sido alvo de diversos estudos e revelaram ser de suma importância na susceptibilidade a diversas infecções. Neste estudo, os SNPs -52G/A, -44C/G e -20 G/A na região 5' UTR do gene DEFB1 foram analisados através de sequenciamento, em um grupo de 160 pacientes do sexo feminino HPV positivas e 71 indivíduos sadios. As análises estatísticas foram feitas utilizando o Teste exato de Fisher e o Teste do Qui-quadrado. Os resultados indicam que o alelo -44G e o haplótipo ACA podem estar relacionados com a susceptibilidade à infecção pelo HPV de alto risco. Os resultados não apontam diferenças significativas nas frequências alélicas e genotípicas dos outros polimorfismos entre pacientes infectados com HPV de alto risco e indivíduos sadios. Também não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas nas frequências alélicas e genotípicas nos pacientes HPV positivos quanto ao grau de lesão cervical. Human papillomavirus (HPV) is the main etiological agent for development of cervical cancer and its precursor lesions, the cervical intraepithelial neoplasia (CINs). We investigated whether single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in the human Beta-Defensin 1 gene (DEFB1) could be associated with susceptibility to infection and progression of cervical lesions caused by high-risk HPV. Polymorphisms in this gene have been the subject of several studies and proved to be extremely important in susceptibility to various infections. In this study, SNPs -52 G/A, -44 C/G and -20 G/A in the 5 'UTR of DEFB1 were analyzed by direct sequencing in a group of 160 HPV-positive female patients and 71 healthy individuals. Statistical analysis was performed using Fisher's exact Test and Chisquare. The results indicate that the -44G allele and haplotype ACA may be associated with susceptibility to infection caused by high-risk HPV. The results show no significant differences in allelic and genotypic frequencies of the other polymorphisms in patients infected with high-risk HPV and healthy individuals. We also found no statistically significant differences in allelic and genotypic frequencies in HPV-positive patients related to the progression of cervical lesion.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-22T13:02:10Z No. of bitstreams: 1 Suzianny Maria Bezerra Cabral Silva.pdf: 1259614 bytes, checksum: e36cf9293552877b5a90863a34eee04d (MD5) Made available in DSpace on 2017-02-22T13:02:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Suzianny Maria Bezerra Cabral Silva.pdf: 1259614 bytes, checksum: e36cf9293552877b5a90863a34eee04d (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq The Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei is the most important shrimp species in volume in world aquaculture. However, in recent decades, outbreaks of several diseases, especially viral diseases, were responsible for significant economic losses, threatening the sustainability of shrimp farming worldwide. In 2004, Brazilian shrimp farming was seriously affected by a new disease, caused by the Infectious myonecrosis virus (IMNV). Thus, disease control based on rapid and sensitive pathogen detection methods has become a priority worldwide. In this study, specific quantification method for IMNV was developed using real-time PCR with SYBR Green dye and viral load of the principal target tissues was quantified. A recombinant plasmid that contains the target IMNV sequence was constructed and a linear relationship between plasmid DNA and Ct values (R² = 0.992) was obtained for a range from 108 to 10² copies of IMNV. Viral load of IMNV was different for various tissues, being higher in haemolymph and muscle, followed by pleopods and gill. O camarão marinho (Litopenaeus vannamei) é a mais importante espécie de camarão em volume na aqüicultura mundial. Entretanto, nas últimas décadas, surtos de diversas doenças especialmente as de etiologia viral foram responsáveis por perdas econômicas significativas,ameaçando a sustentabilidade da carcinicultura mundial. Em 2004, a carcinicultura brasileira foi seriamente afetada por uma nova doença, causada pelo vírus da Mionecrose infecciosa (IMNV). Assim, o controle de doenças baseado em métodos de detecção rápida e sensível de patógenos tornouse uma prioridade em nível mundial. No presente estudo, um método específico de quantificação para IMNV foi desenvolvido usando PCR em tempo real com o corante SYBR Green e a carga viral dos principais tecidos-alvo usados para o diagnóstico de IMNV foi determinada. Um plasmídeo recombinante contendo uma seqüência do vírus foi construído e uma relação linear de 0,992 foi obtida entre a quantidade de DNA plasmidial e os valores de Ct para uma faixa de 108 a 10² cópias de IMNV. A carga viral detectada nos tecidos mostrou que há diferença entre eles e os maiores valores estiveram presentes na hemolinfa e músculo, seguida de pleópodo e brânquia.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-18T16:38:26Z No. of bitstreams: 1 Maria da Conceicao Gomes de Lima.pdf: 801087 bytes, checksum: 43f85b76b58e0c35ef65f029302287e9 (MD5) Made available in DSpace on 2016-10-18T16:38:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria da Conceicao Gomes de Lima.pdf: 801087 bytes, checksum: 43f85b76b58e0c35ef65f029302287e9 (MD5) Previous issue date: 2009-02-09 Mastitis is the inflammatory process of mammary gland which has infectious origin or not. It is characterized by physic-chemical and bacteriological alterations of milk and unrepairable lesions on the mammary tissue. In goats used for milk production, mastitis is a serious problem, as much for increasing production costs as for public health risks. In this work, the sequencing of exons 1 and 2 of MBL (mannose-binding lectin) gene was made and they were related to subclinic mastitis susceptibility in goats. 145 strain and age varied goats which were not at colostral time and drying time were used to collect blood and milk samples. These samples were evaluated through auxiliary diagnosis method, somatic cell count (SCC) to identify subclinic mastitis. Evaluations of milk physic-chemical characteristics (fat, protein, lactose and total solids) and bacteriological examination were also made. DNA was extracted from blood samples and exons 1 and 2 of MBL gene were sequenced. It was observed the presence of polymorphisms on exon 2 of MBL gene in 8 samples of the 1662 region of animals considered as healthy. It was seen that 60% of samples presented SCC values lower than 1.0 x 106 cells/mL, which reveals lack of subclinic mastitis and 40% of samples showed SCC values higher than 1.0 x 106 cells/mL, which reveals presence of subclinic mastitis. 87.5% of the milk samples presented total bacteriological counting (TBC) lower than 500,000 and 11.5% had values higher than 500,000. Although, by comparing results obtained on sequencing and lack of polymorphisms for exon 2 of MBL gene on samples with and without subclinic mastitis, it can not be affirmed that presence of subclinic mastitis is related to MBL gene polymorphism. A mastite é o processo inflamatório da glândula mamária de origem infecciosa ou não.Caracteriza-se por alterações físico-químicas e bacteriológicas do leite e lesões irreparáveis no tecido mamário. Em cabras exploradas para a produção de leite, a mastite é um grave problema, tanto por aumentar os custos da produção quanto pelos riscos à saúde pública. Neste estudo foram realizados os seqüenciamentos dos exons 1 e 2 do gene para MBL (lectina ligadora de manose) com o objetivo de correlaciona-los à suscetibilidade a mastite subclínica em caprinos. Utilizaram-se 145 cabras de raças e idades variadas e que não estavam no período colostral nem na época de secagem, onde foram coletadas amostras de sangue e leite. No leite foi realizada a contagem de células somáticas (CCS) a fim de identificar a mastite subclínica, realizadas avaliações das características físico-químicas (gordura, proteína, lactose e sólidos), e exames bacteriológicos do leite. Das amostras de sangue foi extraído o DNA genômico para seqüenciamento dos exons 1 e 2 do gene da Mannose-Binding Lectin (MBL). Observou-se, a partir dos resultados obtidos, a presença de polimorfismo no exon 2 do gene da MBL em 8amostras na região 1662 de animais considerados saudáveis. Foi observado ainda que 60% das amostras apresentaram valores para CCS inferiores a 1,0 x 106 células/mL revelando ausência de mastite subclínica e 40% das amostras mostraram CCS acima de 1,0 x 106 células/mL mostrando a presença da mastite subclínica. E ainda, 87,5% das amostras de leite apresentaram contagem bacteriana total (CBT) com valores inferiores 500.000 e 11,5% com valores iguais ou superiores a 500.000. Comparando-se os resultados obtidos no seqüenciamento, e pela presença do polimorfismo para o gene da MBL no exon 2, de animais com ausência de mastite subclínica, não se pode afirmar que a presença da mastite subclínica esteja relacionada ao polimorfismo nesse gene.