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International audience; Purpose To establish a training data set of digital images and to investigate the scoring criteria and dose assessment of the dicentric assay within the European network of biodosimetry (RENEB), a web based scoring inter-comparison was undertaken by 17 RENEB partners. Materials and methods Two sets of 50 high resolution images were uploaded onto the RENEB website. One set included metaphases after a moderate exposure (1.3 Gy) and the other set consisted of metaphases after a high dose exposure (3.5 Gy). The laboratories used their own calibration curves for estimating doses based on observed aberration frequencies. Results The dose estimations and 95% confidence limits were compared to the actual doses and the corresponding z-values were satisfactory for the majority; only the dose estimations from two laboratories were too low or too high. The coefficients of variation were 17.6% for the moderate and 11.2% for the high dose. Metaphases with controversial results could be identified for training purposes. Conclusions Overall, the web based scoring of the two galleries by the 17 laboratories produced very good results. Application of web based scoring for the dicentric assay may therefore be a relevant strategy for an operational biodosimetry assistance network. © 2016 The Author(s). Published by Informa UK Limited, trading as Taylor and Francis Group.

Fragestellung: Das Mammakarzinom fasst eine heterogene Gruppe von Tumoren zusammen von denen etwa 20% als Triple-negativ (TNBC) bezüglich des Rezeptorstatus bezeichnet werden. Wichtige Parameter und therapeutische Angriffspunkte der TNBC Biologie sind eine hohe Proliferationsaktivität, ein Basal-artiger und mesenchymaler Phänotyp und ein Defekt im DNA Reparaturweg Homologe Rekombination (HR) welcher eine erhöhte chromosomale Instabilität dieser Tumore begünstigt. TNBCs weisen darüber hinaus eine Anreicherung von Tumorstammzellen und Therapieresistenz auf. Ziel des Projektes ist es Strategien unter gleichzeitiger Ausnutzung von HR-Defizienz und Stammzelleigenschaften durch spezifische Inhibition zur Intensivierung der Therapie weiter zu entwickeln. Dies wurde für die Inhibition von RAD51-, CHK1- und PARP1 nach Bestrahlung untersucht. Dafür wurde eine TNBC-Zelllinie (MDA-231 WT), zwei isogenen Sublinien, die präferentiell in Knochen (-SA) und Gehirn (-BR) metastasieren im Vergleich zu einer luminalen Zelllinie (MCF7) eingesetzt. Methodik: In MDA-MB-231 WT/BR/SA und MCF7-Zellen wurde die Expression bezüglich HR (RAD51, BRCA1, PTEN, CHK1, MRE11, ATR, ATM) und Stammzelleigenschaften (ZEB1, E-Cadherin, ß-Catenin, ALDH1) charakterisiert, HR mittels RAD51-Foci, MMC-Sensitivität und Reporterplasmiden eingeordnet, Replikationsprozesse analysiert und die Migrationsfähigkeit überprüft. Strahlenempfindlichkeit wurde unter Gabe verschiedener Inhibitoren im Kolonietest dokumentiert und mit der Metabric Datenbank (952 TNBC) hinsichtlich des chromosomalen Instabilitätsindex (CIN) korreliert. Ergebnisse: Es zeigten sich klare Unterschiede in der Expression von Reparaturproteinen, mit einem Anstieg von CHK1, MRE11 und ATM in BR und SA. Beide Linien zeigten Stammzell-übliche Expressionsprofile, entsprechend eine stärkere Migrationsfähigkeit und in der SA Linie eine verbesserte HR (2,5-fach), Resistenz gegen MMC (IC50 von 1,6µg/ml im Vergleich zu 0,75µg/ml in BR und 2,1 µg/ml in SA) und geringere DNA Schäden (0,75-fach). Nach Bestrahlung zeigte sich kein Überlebensvorteil für BR und SA. Dies deutet darauf hin, dass nicht HR, sondern übergeordnet CHK1-vermittelte Prozesse für die Strahlenempfindlichkeit verantwortlich sind. Bestätigt wird dies durch die deutliche Strahlensensitivierung nach CHK1i, wobei die strahlenresistenteste Linie sich am stärksten sensitivieren ließ, mit VF von 3. Dies spiegelt sich auch in den Replikationsprozessen wieder, je sensitiver, desto stärker inhibiert. Momentan wird der Einfluss weiterer Inhibitoren auf die zelluläre Strahlenempfindlichkeit überprüft. Topkandidat ist RAD51i, da in einer Metabric-Analyse TNBC mit hohem CIN, also besonders aggressiven Tumoren, RAD51 und CHK1 deutlich stärker exprimiert werden als in TNBCs mit niedrigem CIN. Schlussfolgerung: Eine veränderte Expression von HR-Proteinen und ein Stammzell-artiger Phänotyp hängen eng zusammen und determinieren gemeinsam die Therapieresistenz.

International audience; Purpose To set up an operational basis of the Realizing the European Network of Biodosimetry (RENEB) network within which the application of seven established biodosimetric tools (the dicentric assay, the FISH assay, the micronucleus assay, the PCC assay, the gamma-H2AX assay, electron paramagnetic resonance and optically stimulated luminescence) will be compared and standardized among the participating laboratories. Methodology Two intercomparisons were organized where blood samples and smartphone components were irradiated, coded and sent out to participating laboratories for dosimetric analysis. Moreover, an accident exercise was organized during which each RENEB partner had the chance to practice the procedure of activating the network and to handle large amounts of dosimetric results. Results All activities were carried out as planned. Overall, the precision of dose estimates improved between intercomparisons 1 and 2, clearly showing the value of running such regular activities. Conclusions The RENEB network is fully operational and ready to act in case of a major radiation emergency. Moreover, the high capacity for analyzing radiation-induced damage in cells and personal electronic devices makes the network suitable for large-scale analyses of low doses effects, where high numbers of samples must be scored in order to detect weak effects. © 2016 The Author(s). Published by Informa UK Limited, trading as Taylor and Francis Group.