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En este trabajo fundamentamos la importancia de promover y fortalecer hábitos saludables de nutrición e higiene, tomando como eje la relación que existe entre ellos y la prevención de enfermedades, en particular las producidas por parásitos intestinales. En nuestro país las parasitosis intestinales constituyen una problemática severa, afectando al 50 % de los niños, en especial a aquellos en situación de vulnerabilidad. Las estrategias en pos de otorgar una respuesta a esta problemática requieren un carácterintegral, donde la prevención y la promoción de hábitos saludables son fundamentales. En este marco, los niños pueden actuar como agentes de cambio a través de la transferencia de la información a la comunidad y desde los cambios en sus conductas, actuando como multiplicadores. Mediante este trabajo, buscamos brindar a las escuelas información y herramientas útiles que permitan un abordaje claro y sencillo sobre esta temática. Se debe destacar que dicho abordaje se ve beneficiado por la incorporación de diversos conceptos básicos y de suma importancia en todo programa de educación para la salud. Así, mediante textos, dibujos y esquemas adecuados para ser aplicados en niveles primarios de educación, trabajamos sobre los conceptos básicos de salud y enfermedad haciendo énfasis en la importancia del buen estado nutricional e inmunológico del niño y en los hábitos de higiene necesarios para hacer frente a estas infecciones. Este trabajo está organizado en dos partes principales. La primera busca proporcionar base teórica al cuerpo docente. En la segunda presentamos una propuesta para trabajar en el aula, basada en material educativo generad o luego de una experiencia de trabajo con niños y familias vinculados al Centro Integrador Comunitario (CIC)-Salsipuedes (Córdoba). Fil: Nores, María Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; Argentina Fil: Rivero, Maria Romina. Instituto de Inv. Med. Mercedes y Martin Ferreyra; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto para el Desarrollo Agroindustrial y de la Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto para el Desarrollo Agroindustrial y de la Salud; Argentina Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina Fil: Touz, Maria Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2021 Resumen: La evidencia acumulada a lo largo de las últimas décadas demuestra una estrecha interrelación entre los sistemas neuroendócrino e inmune. Con el fin de mantener la homeostasis del organismo y dirigir respuestas coordinadas frente a los distintos desequilibrios y patologías, ambos sistemas se encuentran en constante comunicación a través de una variedad de citoquinas, hormonas, neurotransmisores y sus receptores. En los últimos años el estudio de la relación entre las hormonas tiroideas (HTs) y el sistema inmune ha tomado relevancia. Sin embargo, la comprensión de la conexión entre las HTs y el sistema inmune es todavía incompleta debido a la complejidad de cada sistema y más aún a su interacción. Actualmente las HTs son reconocidas por desempeñar un rol esencial en las células de la inmunidad innata y adaptativa, y sus respuestas asociadas. El papel de las HTs en el inicio de la respuesta inmune y su efecto en el direccionamiento de la respuesta inmune adaptativa fue abordado hace poco más de una década. En este sentido el laboratorio donde se desarrolló esta tesis doctoral reportó los primeros hallazgos del efecto de triiodotironina (T3) sobre las características y funcionalidad de las Células Dendríticas (DCs), consideradas las principales células presentadoras de antígenos. En este contexto, se evidenció por primera vez la expresión de receptores de HTs (TR) en DCs murinas, principalmente la isoforma β1. Además, se demostró que niveles fisiológicos de la HT activa, T3, inducen la maduración de DCs y su capacidad de secreción de IL-12. A su vez, las DCs estimuladas con T3 incrementaron la capacidad aloestimulatoria de linfocitos T, direccionando la respuesta inmune hacia los perfiles proinflamatorios T helper 1 (Th1), Th17 y citotóxicos con aumentada producción de la citoquina efectora IFN-. Asimismo, el tratamiento de las DCs con T3 aumentó significativamente la producción de las citoquinas TNF-α, IL-6 e IL-23, involucradas en la producción de IL-17 y disminuyó la población de células T regulatorias. Por otro lado, T3 fue capaz de reducir la apoptosis de DCs y aumentar su migración hacia los ganglios linfáticos. Considerando estos resultados se desarrolló una vacunación antitumoral basada en DCs estimuladas con T3 en un modelo tumoral de melanoma. Este tratamiento fue capaz de aumentar el porcentaje de animales libres de tumor, retrasar la aparición y disminuir el volumen del tumor en los ratones afectados, aumentando la sobrevida de los mismos. Sobre la base de los antecedentes presentados, esta tesis doctoral implica la profundización del efecto de las HTs sobre la inducción de respuestas inmunes adaptativas a través de las DCs como objetivo general. En lo particular, este trabajo abordó 2 objetivos específicos: 1) Desarrollo de una estrategia de vacunación para el tratamiento antitumoral basada en la manipulación de DCs estimuladas con T3 expuestas a antígenos asociados al tumor (AATs) y 2) Estudio de los efectos de T3 sobre las características y funcionalidad de las DCs humanas. 1) Los resultados obtenidos en la primera parte de este trabajo de tesis doctoral indicaron, por un lado, que el tratamiento con T3 no modifica la capacidad de captación antigénica de las DCs frente a antígenos propios del tumor, sin embargo, esta hormona es capaz de incrementar la expresión del marcador de maduración CD86. Además, se evidenció un marcado aumento por parte de las DCs en la producción de citoquinas proinflamatorias, como IL-12, IL-6 y TGF- luego de ser tratadas con T3. En el modelo murino de carcinoma de colon, T3 potenció los efectos antitumorales de la vacunación a base de DCs cargadas con antígenos tumorales, evidenciados por una reducción en el tamaño tumoral. En efecto, la respuesta inmune generada por la inmunoterapia basada en DCs estimuladas con T3 consistió en un marcado incremento en las poblaciones Th1 (CD4+ IFN-+), Th17 (CD4+ IL-17+), como así también en las células T citotóxicas CD8+ IFN-+, y citotóxicas 17 (Tc17), acompañada por un incremento en la secreción de IFN- e IL-17. Teniendo en cuenta estos resultados y los antecedentes del grupo que relacionan estrechamente la estimulación de las DCs con T3 con una mayor producción de IL-17, sumado a las controversias bibliográficas relacionadas al papel de esta citoquina en cáncer, decidimos analizar la importancia de IL-17 como mediador de los efectos inmunoterapéuticos en nuestro tratamiento antitumoral. Para ello evaluamos el crecimiento tumoral en ratones IL-17 A/F-doble Knockout (IL-17KO), aplicando el mismo esquema de vacunación y comparando dicho crecimiento en ratones Wild Type (WT) como control. De este modo, pudimos evidenciar que la ausencia de IL-17 en los ratones IL-17KO conduce a un mayor crecimiento tumoral, dado que observamos un significativo aumento del volumen del tumor, al comparar los ratones transgénicos que fueron vacunados con DCs cargadas con AATs y tratadas con T3, con aquellos animales WT que recibieron el mismo tratamiento. A su vez, observamos que IL-17 presentaría un rol en la angiogénesis tumoral, lo que favorecería la reducción del tumor por la inmunoterapia basada en DCs estimuladas con T3 en el modelo de carcinoma de colon MC38. En conclusión, los resultados aquí presentados refuerzan los conocimientos de las propiedades adyuvantes de T3 para su utilización en la vacunación antitumoral basada en DCs, y profundizan en los mecanismos involucrados en el desarrollo de una respuesta inmune eficiente luego de la vacunación. 2) Los resultados obtenidos en la segunda parte de este trabajo de tesis doctoral demuestran que concentraciones fisiológicas de T3 tienen efectos inmunomoduladores sobre las DCs diferenciadas a partir de monocitos de sangre periférica (huDCs). Esto fue evidenciado por una mayor expresión de la molécula CD86 en la superficie celular y una tendencia a incrementar en el porcentaje de células CD11c+ HLA-DR+ luego del tratamiento con la hormona. Por otro lado, se demostró que la presencia de T3 es capaz de inducir una mayor producción de la citoquina proinflamatoria IL-12 por parte de las huDCs. Estos resultados iniciales aportan en el conocimiento del efecto de T3 sobre la maduración y la activación de DCs humanas, induciendo la liberación de IL-12 por parte de estas células, y probablemente favoreciendo la polarización de la respuesta inmune hacia un perfil proinflamatorio. Estos hallazgos son prometedores y alientan la profundización del estudio del efecto de T3 sobre DCs humanas, aspecto muy poco explorado y de trascendencia considerando la potencial transferencia de los resultados obtenidos en modelos murinos a la oncología humana. 2023-09-30 Fil: Soler, María Florencia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Montesinos, María Del Mar. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Montesinos, María del Mar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigación en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Porporatto, Carina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto de Investigación; Argentina. Fil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Fil: Pellizas, Claudia Gabriela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Pellizas, Claudia Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Toscano, Marta Alicia. Salta. Gobierno de la Provincia de Salta. Ministerio de Salud Pública. Hospital Doctor Arturo Oñativia. Laboratorio de Biología Molecular y Citogenética; Argentina.

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2020 La fasciolosis es una enfermedad parasitaria que daña el hígado del huésped infectado y es causada por la migración y la actividad alimentaria de un trematodo: Fasciola hepatica, que afecta principalmente a rumiantes domésticos como el ganado vacuno y ovino. La fasciolosis ha generado pérdidas económicas significativas en el sector agrícola en todo el mundo debido a la reducción de la producción de carne y leche. El ser humano es susceptible a la fasciolosis por ingestión de las metacercarias en vegetales contaminados. El triclabendazol es el medicamento de elección utilizado para controlar la fasciolosis y es el único medicamento recomendado por la OMS para tratar la fasciolosis humana. Sin embargo, la resistencia al triclabendazol en F. hepatica se ha reportado en muchos países, incluida Australia, Irlanda, Brasil y Argentina. Estas limitaciones de la quimioterapia han llevado a que el desarrollo de vacunas para prevenir contra la infección por F. hepatica sea una prioridad en distintos laboratorios alrededor del mundo. Este hallazgo permitiría aumentar la seguridad de los alimentos y ayudar en la disminución de la producción de contaminación ambiental. En numerosos estudios se determinó que la mejor forma de eliminar a F. hepatica es durante la etapa migratoria de la larva juvenil hacia el hígado. En este período, se expresa entre otras, una proteína tipo Kunitz (FhKTM), la cual es un inhibidor de proteasas, capaz de inhibir las enzimas propias y del huésped. Esta proteína que se encuentra en el intestino, el tegumento y los productos excretores-secretores del parásito, puede ser considerada como inmunógeno para el desarrollo de una vacuna dada su participación en la supervivencia del patógeno Los ensayos de inmunización utilizando péptidos sintéticos es una de las nuevas tecnologías nuevas implementadas en la inmunoterapia. La adición de un adyuvante refuerza el potencial de respuesta inmune del antígeno. CpG-ODN/Coa-ASC16, una nanoestructura de cristal líquido formada por autoensamblaje de éster de palmitato de 6-O-ascorbilo (Coa-ASC16) y el oligodesoxinucleótido sintético que contiene motivos de citosina-guanina no metilados (CpG-ODN), fue elegido por su capacidad de generar una respuesta Th1 y Th17 con una fuerte respuesta humoral y celular especifica demostrado en modelos utilizando OVA como antígeno. Además, tiene la ventaja de proteger con su estructura de cristal líquido del ambiente enzimático hostil y generar una liberación gradual del péptido. En el presente trabajo de tesis evaluamos el potencial de FhKTM formulado con CpG-ODN/Coa-ASC16 en un modelo experimental de fasciolosis en ratones y la respuesta inmune asociada con la protección del huésped. Nuestros resultados mostraron que la inmunización de ratones con FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16 induce protección contra el desafío de F. hepatica al prevenir el daño hepático y mejorar la sobrevida después de la infección. Además, en los ratones inmunizados con FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16 se indujo una potente respuesta inmune caracterizada por la secreción de IFN-γ e IL-17A con altos niveles de anticuerpos séricos IgG1, IgG2a e IgA específicos de antígeno. Tanto las células del peritoneo como el intestino evidenciaron una activación frente a la inmunización con FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16. Esta reacción permite considerar estos sitios como los lugares donde se generará una respuesta inmune efectiva que podría provocar la eliminación del parásito para evitar la llegada al hígado. El bloqueo sistémico de IL-17A durante la infección disminuyó los niveles de anticuerpos IgG2a e IgA, así como la producción de IFN-γ, lo que debilitó el potencial protectivo de la inmunización con FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16 aumentando la mortalidad de los ratones. La presencia de IL-17A se convierte así en un factor fundamental para el desarrollo de la respuesta inmune contra la infección por F. hepatica durante la vacunación con FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16. En base a los resultados el presente estudio destaca el potencial de una nueva formulación de vacuna para mejorar el control y ayudar a la erradicación de la infección por F. hepatica, con posibles aplicaciones para huéspedes naturales como el ganado bovino y ovino. 2022-11-30 Fil: Silvane, Leonardo Micael. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Cervi, Laura Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica; Argentina. Fil: Cervi, Laura Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Cerban, Fabio Marcelo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Fil: Cerban, Fabio Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Fil: Porporatto, Carina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto de Investigación; Argentina. Fil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Fil: Ropolo, Andrea Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Fil: Marcipar, Iván Sergio. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Fil: Marcipar, Iván Sergio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2020 En este Trabajo de Tesis se describieron tres enzimas presentes en la base genómica de datos de G. lamblia como posibles histonas metiltransferasas, HMT1, HMT2 y SET2 encargadas de metilar residuos de lisina en histonas. Se estudió su rol durante el crecimiento y el enquistamiento de G. lamblia. Se observó que estas enzimas presentaban una localización nuclear, perinuclear y citoplasmática y que regulaban tanto positiva como negativamente el proceso de enquistamiento. A su vez, se identificaron y estudiaron las diferentes modificaciones post-traduccionales presentes en las histonas de los trofozoítos de G. lamblia. En primera instancia, se aislaron e identificaron diferentes péptidos de H2A, H2B, H3 y H4 comprendidos en la base de datos de histonas de G. lamblia. Se encontraron modificaciones conservadas en otros organismos, tales como metilación, acetilación y ubiquitinación de lisinas, metilación de argininas, y también fosforilación de treoninas, tirosinas y lisinas. Con respecto a la metilación de argininas, en el genoma de G. lamblia no hay enzimas descriptas como HRMT (histona-arginina metiltransferasa), por lo que la presencia de argininas metiladas indica que posiblemente algunas de las HMTs (histona metiltransferasas) las que normalmente modifican lisinas, puedan estar modificando a su vez argininas. Este trabajo proporciona la primera caracterización a gran escala del código de las histonas de G. lamblia, lo cual constituye una plataforma para el desarrollo de futuras investigaciones en el campo de la epigenética en este parásito. 2023-06-30 Salusso, Agostina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Ropolo, Andrea Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Echenique, José Ricardo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Monti, Mariela Roxana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Nicola, Juan Pablo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Ténicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Carranza, Pedro Gabriel. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Salud, Tecnología y Desarrollo; Argentina.

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2019 Giardia lamblia es un organismo parásito tempranamente divergente en la línea de evolución de los eucariotas. Es el agente causante de giardiasis y en la actualidad, es el segundo microorganismo parásito encontrado en brotes transmitidos por aguas contaminadas a nivel nacional con una prevalencia de hasta un 30% para niños menores de 10 años. De acuerdo a su condición evolutiva de divergencia temprana, este microorganismo presenta una maquinaria celular simplificada y sin pérdida de funciones en relación a los eucariotas superiores. Tanto durante el crecimiento de este parásito, como en el proceso de diferenciación a quiste, distintas proteínas atraviesan la envoltura nuclear para localizarse dentro de los núcleos. Por lo cual, dicho transporte nuclear activo en G. lamblia estaría mediado por homólogos de las carioferinas descriptas en organismos menos divergentes en la evolución eucariota. De modo que identificar la presencia de transportadores nucleares específicos y analizar su rol funcional en la translocación nuclear de proteínas durante el ciclo de vida de G. lamblia, fue el objetivo principal de este trabajo de Tesis Doctoral. Con la integración de análisis in silico y técnicas de biología celular y molecular, se demostró la presencia de una Importina  y una Importina  en G. lamblia, que al ser sobre-expresadas muestran localización nuclear y perinuclear por ensayos de inmunofluorescencia en el estadío de trofozoíto. Durante el proceso de diferenciación a quiste de este parásito, dicha sobre-expresión de Importina  e Importina  induce un aumento en la expresión de los genes específicos del enquistamiento conjuntamente con una mayor producción de quistes. Por otro lado, el uso de distintos compuestos que interrumpen el transporte nuclear de proteínas, como el inhibidor de Importina  llamado Importazol y el inhibidor de Importinas / denominado Ivermectina, mostraron tener un efecto dosis dependiente sobre el crecimiento de G. lamblia. Además, estos inhibidores demostraron tener un efecto que varía con el tiempo de exposición de acuerdo a los distintos tiempos de inducido el proceso de enquistamiento, produciendo principalmente un arresto en el estadío de trofozoíto durante todo el proceso. El inhibidor del transporte nuclear Ivermectina, un antiparasitario de amplio espectro utilizado a nivel mundial y nacional contra infecciones por helmintos y en filariasis y escabiosis, presentó efectos totales sobre G. lamblia, bloqueando la producción de quistes a concentraciones que no afectan el crecimiento de este microorganismo. Incluso impide la localización nuclear de proteínas claves para este proceso, como es el caso de la enzima Arginina deiminasa, favoreciendo su localización perinuclear. Tales resultados muestran la participación de las distintas importinas como mediadoras activas de la localización nuclear de proteínas en G. lamblia. A su vez, los efectos encontrados para Ivermectina sugieren que se podría utilizar este antiparasitario para el efectivo tratamiento de giardasis.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2019 En la presente Tesis Doctoral se caracterizó a nivel molecular y funcional un nuevo mecanismo presente en la bacteria patógena Pseudomonas aeruginosa, el cual interrelaciona dos de los principales procesos metabólicos del ADN: la replicación y la reparación. Particularmente, se estudiaron tres proteínas: MutS del “Sistema de reparación de bases apareadas en forma incorrecta” (Mismatch Repair ó MMR) y dos proteínas replicativas, el factor de procesividad  clamp y la ADN Polimerasa (Pol) IV. Por un lado, MutS inicia el proceso de reparación ya que reconoce y se une a la base mal apareada (MM) reclutando los factores involucrados en las etapas subsiguientes. Por otro lado,  clamp es un anillo que envuelve al ADN y mantiene unidas a las Pols aumentando su procesividad. Mientras que Pol IV es una Pol alternativa de baja fidelidad capaz de aliviar bloqueos en la replicación debido a la presencia de lesiones en el sustrato de ADN (Síntesis de Translesión, TLS), MMs o ciertos contextos de secuencia. Previamente, en el laboratorio se observó una clara asociación entre la proteína MutS y  clamp de P. aeruginosa, la cual no posee un rol importante en las funciones que al momento han sido asignadas a MutS en bacterias. Las evidencias al inicio de esta Tesis indicaban que la función de la interacción MutS- clamp podría ser regular el acceso de Pol IV a los sitios de replicación, lo cual corresponde a un nuevo mecanismo para mantener la fidelidad de la replicación. Sin embargo, no había evidencias de cuáles podrían ser las bases moleculares del mismo, por lo cual el objetivo general fue describir el mecanismo molecular que utiliza MutS para regular el acceso de Pol IV a la replicación. El trabajo se dividió en dos secciones, la primera consistió en ensayos bioquímicos utilizando proteínas recombinantes y en la segunda se estudió este nuevo rol en la mutagénesis de células de P. aeruginosa. En conjunto, los resultados nos llevaron a plantear un modelo molecular mediante el cual MutS regularía el acceso de Pol IV a la replicación. En condiciones normales de crecimiento, Pol IV accede a la replicación mediante su interacción con β clamp cuando Pol III se detiene, aliviando la parada de replicación. Sin embargo, si introduce una base incorrectamente, la interacción MutS -β clamp está favorecida, desplazando a Pol IV de la replicación. Por el contrario, en condiciones estresantes, donde se acumula ADN simple cadena (ADNsc), MutS no controlaría el acceso de Pol IV, promoviendo la posible aparición de mutaciones beneficiosas. Brevemente, las principales evidencias de esta Tesis que apoyan dicho modelo son: (i) Pol IV interacciona mediante el motivo conservado QLxLF con β clamp con menor afinidad que MutS; (ii) MutS no interacciona directamente con Pol IV; (iii) MutS es capaz de desplazar a Pol IV del anillo de  clamp compitiendo por la unión al bolsillo hidrofóbico de  clamp; (iv) Diferentes estructuras de ADN modulan esta función de MutS: MutS mostró un control más estricto sobre la unión de Pol IV a β clamp en presencia de ADN “primeados” (ADNp), mientras que la afinidad de la interacción MutS- β clamp aumenta en presencia de ADNp conteniendo un MM de tipo GT; (v) En condiciones normales de crecimiento, MutS limita a Pol IV cuando realiza replicación mutagénica (ADN no dañado), mientras que no la controla cuando lleva a cabo replicación libre de errores (TLS); (vi) En condiciones de inducción de estrés, MutS no controlaría la acción de Pol IV. 2022

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2018. Los linfositos B, además de producir anticuerpos, son capaces de presentar Antigenos T. El Rituximab es un anticuerpo citoquinas, a través de las cuales pueden regular la respuesta deimab" es un anticuerpo anti-CD20 que se utiliza para el tratamiento patologias que efectivamente elimina la población de linfocitos B. En un En respuestas uestro laboratorio reportamos la capacidad que tienen los linfocitos - i erleuquina (IL) 17A durante la infección experimental con i, patógeno causal de la enfermedad de Chagas, así como otras uesta inmune protectora contra T. cruzi depende fuertemente de 8+. Para evaluar si los linfocitos B podrían modular la respuesta de T durante la infección con T. cruzi implementamos un modelo de --=:::,...==-'-.L == estas células, mediante una única inyección del anticuerpo monoclonal I la CD20, 8 días previos a la infección. Pudimos observar a los 20 días ~~:~-: ( pi) que los animales depletados presentaban un aumento significativo isular en diferentes órganos blancos de la infección, en comparación . 01 infectado. Además, los animales depletados de linfocitos B e cresentaron un porcentaje y número significativamente menor de linfocitos -= es y específicos contra el antígeno Tskb20, en comparación al grupo - éado. La respuesta de linfocitos T CD8+ con fenotipo de memoria y = - ontraba significativamente disminuida en el grupo de animales carentes ==-='::=5:' ,en comparación con el grupo control, determinado a los 20 dpi. rte, el estudio de las características fenotípicas y funcionales reflejó que en - ocitos B, los linfocitos T CD8+ proliferaban menos, mostraban un perfil una mayor apoptosis celular y presentaban un aumento de receptores comparación con el grupo control. Posteriormente, observamos que en linfocitos B la funcionalidad de los linfocitos T CD8+ se encontraba _ os mismos resultados fueron observados cuando la depleción de e realizada en animales donde la respuesta de linfocitos T CD8+ ya se liado casi en su totalidad (12 dpi), sugiriendo que los linfocitos B están la respuesta de los linfocitos T CD8+ a través del sostenimiento de su y/o sobrevida. Adicionalmente, encontramos que la frecuencia de icas productoras de IL-17A estuvo significativamente disminuida en los ados depletados de linfocitos B. Finalmente, la inyección de IL-17A '""="--,-- - e rescató la frecuencia, el fenotipo y la función de los linfocitos T CD8+ ~:e::=-.::::- e- la ausencia de linfocitos B. Los resultados indican que la producción de . arte de los linfocitos B o por aquellas células productoras de IL-17A que iadas por los linfocitos B, es clave para el mantenimiento y la función de =:;::;:r:os T CD8 + específicos de T. cruzi. a es: linfocito B, linfocito T CD8+, Trypanosoma cruzi, anti-CD20, IL-17A. 2020-12-31 Fiocca Vernengo, Facundo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Gruppi, Adriana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Caputto, Beatriz Leonor. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Ropolo, Andrea Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Stempin, Cinthia Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Faculta de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Laucella, Susana Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Nacional de Parasitología Dr. M. Fatala Chaben; Argentina.

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2017 El síndrome de Rett (RTT) es una enfermedad del neurodesarrollo que forma parte del grupo de trastornos del espectro autista (TEA). En 1999 se describió que la principal causa del RTT consiste en mutaciones en la proteína unidora de metil-CpG 2 (MeCP2). Esta proteína es un miembro de la familia de proteínas unidoras de metil-CpG que se unen a promotores de genes y regulan su expresión. Si bien RTT es uno de los pocos TEA del cual se sabe la causa, poco se conoce acerca de los defectos que ocurren durante el neurodesarrollo como consecuencias de mutaciones en MeCP2. El objetivo general de este trabajo fue definir mecanismos moleculares por los cuales la falta de MeCP2 genera alteraciones en la conectividad neural durante el desarrollo, a fin de entender las bases de la patología neuronal que caracteriza a los TEA. Para ello, utilizamos modelos animales deficientes en MeCP2, paradigmas de actividad in vivo, técnicas biológicas y moleculares y estudios comportamentales para caracterizar el efecto inducido por la ausencia de MeCP2 funcional sobre la formación del circuito “mossy fibers-CA3” en hipocampo; identificar qué moléculas claves en la conectividad neural son afectadas en ausencia de MeCP2 y establecer relaciones causales entre las alteraciones estructurales/funcionales en hipocampo y alteraciones cognitivas presentes en ratones mutantes para MeCP2. Nuestros resultados mostraron que en ausencia de MeCP2 ocurre un retraso en el “pruning” o refinamiento de mossy fibers durante el desarrollo postnatal temprano (días P20-30), que fue acompañado de alteraciones en la expresión de moléculas de guiado axonal de la familia de Semaforinas clase 3 en hipocampo de animales carentes de MeCP2. Por otra parte, en animales adultos se logró demostrar que la falta de MeCP2 interfiere con procesos de plasticidad estructural dependientes de actividad sináptica en hipocampo, afectando la maduración de neuronas nuevas generadas en adultos y la señalización de BDNF. Asimismo, mostramos que estos defectos de plasticidad observados correlacionan con fallas en un test de aprendizaje espacial (laberinto de Barnes). Estos estudios sientan las bases para establecer un modelo que nos permita evaluar el efecto de la manipulación de vías específicas involucradas en guiado axonal, sinaptogénesis, maduración en un circuito específico y correlacionarlo con cambios en el comportamiento. Entender los mecanismos que subyacen al compromiso neuronal causado por mutaciones en MeCP2 proporcionará información sobre el mecanismo patogénico de los TEA y mejorará nuestra comprensión acerca del desarrollo del cerebro y de las bases moleculares del comportamiento. Bertoldi, María Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Degano, Alicia Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Roth, German Alfredo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Ropolo, Andrea Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Molina, Victor Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología; Argentina. Jerusalinsky, Diana. Universidad Nacional de Buenos Aires. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología Celular y Neurociencia Profesor E. De Robertis; Argentina.