Background: recombinant bovine somatotropin (rbST) is used in bovine embryo donors to improve superovulatory response and embryo quality. Objective: this study evaluated the effect of applying one versus two injections of 500 mg of rbST to donor Holstein heifers on estrus incidence (IE), diameter of the largest preovulatory follicle (dLPF), superovulation response (SR), embryo yield, and pregnancy rate in recipient Holstein cows (PRR). Methods: two superstimulation programs were conducted. Heifers were assigned to one of two treatments: 1) rbST-I, n = 5: heifers received one injection of rbST on day 0 (day of CIDR (controlled internal drug release) removal); 2) rbST-II, n = 5: heifers received the first rbST injection on day -8 and the second one on day 0. Thirty-eight cows were used as recipients and were assigned to receive one embryo from one of the two treatments. Results: there was no effect of treatment (p˃0.05) on PRR, dLPF, IE, and SR. The number of oocytes increased (p˂0.05) in the rbST-I treatment (1.3 ± 0.4 vs 0.2 ± 0.2), but there was no difference in the number (p˃0.05) of degenerated (1.0 ± 0.5 vs 4.5 ± 3.0) or transferable (1.0 ± 0.5 vs 1.4 ± 0.7) embryos between heifers in the rbST-I and rbST-II treatments, respectively. Moreover, no oocytes or embryos were recovered from 36.8% of donor heifers in either treatment. Conclusion: the application of 500 mg of rbST on days -8 and 0 of the follicular wave synchronization program did not increase the superovulatory response but significantly reduced the number of oocytes recovered from superovulated Holstein heifers., Antecedentes: a somatotropina bovina recombinante (rbST) tem sido aplicada em vacas doadoras de embriões com o objetivo de melhorar a resposta superovulatória e a qualidade embrionária. Objetivo: o presente trabalho avaliou o efeito da aplicação de uma contra duas injeções de 500 mg de rbST em novilhas de raça Holandesa doadoras de embriões na incidência do cio (IE), diâmetro do maior folículo pré-ovulatorio (dLFP), resposta superovulatória (SR), produção de embriões e taxa de gestação em vacas receptoras de raça Holandesa (PRR). Métodos: foram feitos dois programas de superestimulação, em cada superstimulação as novilhas foram distribuídas em um de dois tratamentos: 1) rbST-I, n = 5: as novilhas receberam uma injeção de rbST no dia zero (dia de remoção do CIDR -dispositivo intravaginal de liberação controlada de progesterona). 2) rbST-II, n = 5: as novilhas receberam a primeira injeção de rbST no dia -8 e a segunda injeção no dia zero. Trinta e oito vacas foram utilizadas como receptoras e receberam um embrião proveniente de uma doadora de um dos dois tratamentos. Resultados: a aplicação de uma ou duas injeções de rbST não afetou (p˃0,05) a PRR, dLFP, IE nem a SR. O número de oócitos foi maior (p˂0,05) no tratamento rbST-I (1,3 ± 0,4 vs 0,2 ± 0,2), o número de embriões não-viáveis (1,0 ± 0,5 vs 4,5 ± 3,0) ou viáveis (1,0 ± 0,5 vs 1,4 ± 0,7) não foram diferentes (p˃0,05) entre as novilhas do tratamento rbST-I e rbST-II. Além disso, do 36.8% das doadoras de ambos os tratamentos não foi possível coletar nenhum oócito ou embrião. Conclusões: A aplicação de 500 mg de rbST o dia -8 e zero do protocolo de sincronização da onda folicular não aumentou a resposta superovulatória, mas diminuiu significativamente o número de oócitos coletados de novilhas de raça Holandesa superovuladas., Antecedentes: la somatotropina bovina recombinante (rbST) ha sido aplicada en vacas donadoras de embriones con el objetivo de mejorar la respuesta superovulatoria y la calidad embrionaria. Objetivo: este trabajo de investigación evaluó el efecto de aplicar una versus dos inyecciones de 500 mg de rbST a novillas Holstein donadoras de embriones sobre la incidencia de celo (IE), diámetro del folículo preovulatorio de mayor tamaño (dLFP), respuesta superovulatoria (SR), producción de embriones y tasa de concepción en vacas Holstein receptoras de embriones (PRR). Métodos: se llevaron a cabo dos programas de superestimulación. En cada programa las novillas fueron asignadas a uno de dos tratamientos: 1) rbST-I, n = 5: las novillas recibieron una inyección de rbST el día cero (día de remoción del CIDR (dispositivo intravaginal liberador de progesterona); 2) rbST-II, n = 5: las novillas recibieron la primera inyección de rbST el día -8 y la segunda el día cero. Treinta y ocho vacas fueron utilizadas como receptoras. Cada receptora recibió un embrión proveniente de una donadora de uno de los dos tratamientos. Resultados: la aplicación de una o dos inyecciones de rbST no afectó (p˃0,05) la PRR, dLFP, IE ni la SR. El número de ovocitos fue mayor (p˂0,05) en el tratamiento rbST-I (1,3 ± 0,4 vs 0,2 ± 0,2), el número de embriones degenerados (1,0 ± 0,5 vs 4,5 ± 3,0) o transferibles (1.0 ± 0,5 vs 1,4 ± 0,7) no fue diferente (p˃0,05) entre las vaquillas del tratamiento rbST-I y rbST-II. Además, del 36,8% de donadoras de ambos tratamientos no se colectó ningún ovocito o embrión. Conclusión: la aplicación de 500 mg de rbST los días -8 y cero del protocolo de sincronización de la onda folicular no incrementó la respuesta superovulatoria pero redujo significativamente el número de ovocitos recolectados de vaquillas Holstein superovuladas.