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Although the immunosuppressive effect of chronic stress has been established, a stress response that downregulates the whole immune system does not make biological sense, especially if an animal has to endure difficult times in which there is also increased infection risk. At high animal densities, animals are faced simultaneously with food restriction (FR), social conflict (SC), and greater parasite–pathogen exposure. We hypothesized that the stress response to chronic stressors that covary with infection risk is not entirely immunosuppressive. Our prediction was that a chronically stressed animal would respond by enhancing innate defenses, while reducing investment in acquired immunity. In a laboratory setting, rats were exposed to prolonged FR and/or SC, and natural and specific antibody levels were repeatedly measured. Our prediction was fulfilled only partly, as FR and SC interacted to enhance natural antibodies, but rats exposed to either or both stressors also showed significantly higher levels of specific antibodies. These results suggest that, in the rat, chronic stress results in a prioritization of both innate and acquired humoral defenses, which makes biological sense provided the stressors examined usually signal an increased infection risk. Fil: Cuervo Bustamante, Pablo Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina Fil: Beldomenico, Pablo Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina Fil: Sanchez, Amorina. Universidad Nacional del Litoral; Argentina Fil: Pietrobon, Elisa Olivia. Laboratorio de Reproduccion y Lactancia, Mendoza; Argentina Fil: Valdez, Susana Ruth. Laboratorio de Reproduccion y Lactancia, Mendoza; Argentina Fil: Racca, Andrea Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina

Fil: Robalino Nieto, Sandra Patricia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. En poblaciones naturales, la respuesta inmune está involucrada en la regulación de interacciones hospedador-parásito, donde la producción de anticuerpos estaría influenciada por factores ecológicos y ambientales. El presente trabajo tuvo como objetivo general contribuir a dilucidar los mecanismos humorales de defensa del cuis común (Cavia aperea) expuestos a diferentes escenarios de densidad poblacional. Para ello se evaluaron componentes del sistema inmune y sus asociaciones con diferentes características del hospedador. Entre 2017 y 2018 se realizaron 15 recapturas de cuises mantenidos en semicautiverio en 4 clausuras (2 de alta y 2 de baja densidad). Se muestrearon 107 individuos (56 hembras) y se obtuvieron 535 muestras de plasma. Los resultados mostraron que los niveles de anticuerpos totales en ambos sexos dependieron de: edad, condición corporal y densidad. A mayor edad, condición corporal y densidad, los individuos tuvieron mayores niveles. Considerando el estado reproductivo, los machos activos (testículos escrotales) tuvieron mayores niveles que los no activos (testículos abdominales) y las hembras lactantes mayores que las no lactantes. Independientemente de la densidad, las hembras tuvieron mayores niveles de anticuerpos naturales que los machos, pero dependió de la edad y condición corporal. Considerando el estado reproductivo, los machos activos tuvieron menores niveles que los no activos y las hembras con preñez temprana menores que las hembras no preñadas. La producción de anticuerpos específicos, fue mayor en hembras, pero dependió de la condición corporal: a mayor condición de los machos la diferencia entre sexos desapareció. La inversión en los diferentes tipos de inmunidad dependió del sexo, las demandas fisiológicas y el contexto. In natural populations, the immune response is involved in the regulation of host-parasite interactions, where antibody production would be influenced by ecological and environmental factors. The goal of this study was to contribute to elucidate the humoral defense mechanisms of wild guinea pig (Cavia aperea) exposed to different population density scenarios. For this purpose, components of the immune system and their associations with different host characteristics were evaluated. Between September 2017 and June 2018, 15 recaptures of wild guinea pigs kept in semi-captivity in 4 enclosures (2 high and 2 low density) were performed. During this period, 107 individuals (56 females) were sampled and 535 plasma samples were obtained. The results showed that total antibody levels in both sexes depended on: age, body condition and density. At higher age, body condition and density, individuals had higher levels. Considering reproductive status, scrotal males (scrotal testicles) had higher levels than inactive males (abdominal testicles) and lactating females had higher levels than non-lactating females. Regardless of density, females had higher levels of natural antibodies than males, but it depended on age and body condition. Considering reproductive status, active males and early pregnant females had lower levels than inactive males and non-pregnant females, respectively. Finally, specific antibodies production was higher in females than males, but this difference depended on body condition: when males had higher body condition, the difference between both sexes tended to disappear. The investment in the different types of immunity depended on sex, physiological demands and context. Universidad Nacional del Litoral Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica

Fil: Peralta, María Belén. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Diferentes estudios han asociado los cambios metabólicos y hormonales ocurridos durante el periodo de transición de vacas lecheras con cambios inmunológicos y a nivel reproductivo. Sin embargo, este período de tiempo dista de la concepción inmediata posterior donde los animales transitan cambios y adaptaciones característicos de su condición de gravidez y aumento productivo. Es por ello que, el objetivo general de esta tesis fue caracterizar el perfil inmune endometrial y sistémico en vacas lecheras, más allá del período de transición, y establecer posibles asociaciones con el estado metabólico-hormonal de dichos animales durante la preñez y la lactancia. A nivel sistémico, aquellos animales que mostraron una menor capacidad fagocítica (CF) de monocitos/macrófagos, lograron la preñez con mayor celeridad. Si bien en este grupo la CF no se vio asociada al contexto metabólico y hormonal, los resultados demostraron que tanto la actividad como la capacidad fagocítica de monocitos/macrófagos se encontró asociada con los niveles metabólicos de β-hidroxibutirato, ácidos grasos no esterificados y glucosa; y con los niveles hormonales de 17β-estradiol y progesterona, en diferentes puntos de la lactancia y la preñez cuando los animales lograron concebir más tardíamente. A nivel endometrial, el contexto dado por los niveles de expresión proteica de IL1β e IL1RA y la presencia de macrófagos infiltrantes, podría estar asociado con condiciones peri-implantatorias claves para el logro de la preñez. De esta manera, el presente trabajo ha permitido conocer aquellos factores inmunológicos sistémicos y endometriales, durante el período cercano a la concepción, que podrían estar implicados en el logro de la preñez con mayor celeridad. Several studies have associated the metabolic and hormonal changes that occur during the transition period of dairy cows with immunological changes and reproductive performance. However, this period of time is far from the subsequent conception where occur changes and adaptations in relation to pregnancy and increased production. For this reason, the general aim of this thesis was to characterize the endometrial and systemic immune profile in dairy cows, beyond the transition period, and to establish possible associations with the metabolic-hormonal status of these animals during pregnancy and lactation. At systemic level, those animals that showed a lower phagocytic capacity (FC) of monocytes/macrophages are pregnant early. Although in this group FC was not associated with the metabolic and hormonal context, the results showed that both phagocytic activity and phagocytic capacity of monocytes/macrophages were associated with metabolic levels of β-hydroxybutyrate, non-esterified fatty acids, and glucose; and with the hormonal levels of 17β-estradiol and progesterone, at different points of lactation and pregnancy in animals that got pregnant later. At the endometrial level, the context given by the protein expression levels of IL1β and IL1RA and the presence of infiltrating macrophages could be associated with an important peri-implantation conditions for achieving pregnancy. In this way, the present study has allowed to know the systemic and endometrial immunological factors, during the period close to conception, that could be involved in achieving pregnancy more quickly. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica Universidad Nacional del Litoral

Fil: Silvestrini, Paula. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Los ginsenósidos (saponinas) de la raíz de Panax ginseng (Pg) han sido utilizados como adyuvantes de vacunas de uso veterinario. Numerosos antecedentes postulan a Pg como un compuesto potenciador de la respuesta inmune en glándula mamaria bovina, incrementando así la resistencia a las infecciones contra mastitis causadas por Staphylococcus aureus (S. aureus). El objetivo general de esta tesis fue estudiar el potencial inmunomodulatorio del ginsenósido Rg1 en cultivos de células MAC-T y células mononucleares de secreción mamaria (MSMC) y evaluar su efecto sobre la activación de MSMC y células mononucleares de sangre periférica (PBMC). Asimismo, se propuso evaluar su capacidad adyuvante in vivo en ratones. In vitro, Rg1 indujo la expresión génica de TLR2 y TLR4 en células MSMC y la expresión proteica de ambos receptores en MSMC y PBMS. Además, Rg1 aumentó la producción de ROS en MSMC y PBMC luego del co-cultivo con S. aureus. Finalmente, Rg1 indujo la expresión de CMH-II y CD80 en PBMS pero no en MSMC. En un modelo de inmunización in vivo en ratones con un lisado de S. aureus, Rg1 estimuló la respuesta inmune humoral mediante la producción de anticuerpos IgG total específicos anti-S. aureus e indujo la proliferación celular en células re-estimuladas. El presente trabajo ha sido de utilidad para conocer el efecto inmunoestimulante de Rg1 y su capacidad adyuvante, con el fin de utilizarlo como posible candidato en prototipos de vacuna contra mastitis bovina causada por S. aureus. The ginsenosides (saponins) from the root of Panax ginseng (Pg) have been used as adjuvants in veterinary vaccines. Numerous antecedents postulate Pg as a compound that enhances the immune response in the bovine mammary gland, increasing resistance to infections against mastitis caused by Staphylococcus aureus (S. aureus). The aim of this thesis was to study the immunomodulatory potential of Rg1 ginsenoside in MAC-T cells and mammary secretory mononuclear cells (MSMC) and to evaluate its effect on the activation of MSMC and peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Moreover, it was proposed to evaluate its adjuvant capacity in mice in an experimental model in vivo. In vitro, Rg1 induced the gene expression of TLR2 and TLR4 in MSMC cells and the protein expression of both receptors in MSMC and PBMS. Furthermore, Rg1 increased ROS production in MSMC and PBMC after co-cultivation with S. aureus. Finally, Rg1 induced the expression of MHC-II and CD80 in PBMS but not in MSMC. In an in vivo immunization model with S. aureus lysate, Rg1 stimulated the humoral immune response by producction of anti-S. aureus specific antibodies and induced cell proliferation in S. aureus re-stimulated cells. The present work has been useful to know the immunostimulant effect of Rg1 and its adjuvant capacity, in order to use it as a possible candidate in prototypes of vaccine against bovine mastitis caused by S. aureus. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica Universidad Nacional del Litoral

Fil: Sacco, Sofía Clara. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. El objetivo general de este trabajo fue estudiar diferentes aspectos de la compleja interacción entre genotipos bacterianos definidos y caracterizados como de alta y baja adaptación a la glándula mamaria (GM) con el hospedador, para poder comprender en parte, el establecimiento y cronicidad de las infecciones intramamarias (IIM) causadas por Staphylococcus aureus en bovinos. Se seleccionó la cepa 806 transitoria (T), cap8, icaACD, agrII, fuerte productora de biofilm, pulsotipo D, ST350 y poco invasiva en células epiteliales mamarias (MAC-T); y la cepa 5011 persistente (P), cap5, icaACD, agrI, blaZ, débil productora de biofilm, pulsotipo O, CC188 y altamente invasiva. La cepa P presentó mayor sobrevida intracelular en MAC-T y macrófagos. MAC-T infectadas con ambas cepas murieron por apoptosis, induciendo la cepa P mayores porcentajes de muerte. Los macrófagos infectados con la cepa P mostraron mayor capacidad fagocítica. La producción de especies reactivas de oxígeno y de óxido nítrico (ON) fue similar para ambas cepas. Los resultados de la IIM experimental difirieron entre ambas cepas, la T indujo aumento del recuento de células somáticas (RCS), ON, IL-1β, IL-6 e IgG total en leche a las 48 hs post-infección (pi); en sangre, indujo una disminución de los monocitos, linfocitos T gamma delta y CD8. La cepa P, indujo un aumento del RCS a los 7 días pi y del ON 14 días pi. La combinación de factores de virulencia de S. aureus podría determinar el inicio de la interacción patógeno-hospedador e influenciar la respuesta inmune de la GM y la evolución del proceso infeccioso. The general objective of this study was to investigate the interaction between Staphylococcus aureus with different genotypes adaptation (low and high) to de bovine mammary gland (MG) and to de host immune response in order to understand intramammary establishment and chronicity. Two strains of S. aureus were isolated from transient (T) and persistent (P) intramammary infections (IMI). The first was S. aureus 806 (strain cap8, icaACD, agrII, strong biofilm producer, D pulsotype, ST350 and low invasion ability in bovine mammary epithelial cells-MAC-T). The second one was S. aureus 5011 (strain cap5, icaACD, agrI, blaZ, weak biofilm producer, O pulsotype, CC188 and high invasion ability). Strain P showed higher survival capacity in MAC-T and macrophages than strain T. MAC-T infected with both strains died by apoptosis. P strain produced higher apoptosis percentage than T strain. The macrophages infected by strain P showed a higher percentage of phagocytosis than those infected by strain T. Macrophages infected with both strains showed similar production of reactive oxygen species and nitric oxide (NO). Bovine experimental IMI showed that T strain produced an increase in somatic cell count (SCC), ON, IL-1β, IL-6 and IgG in milk 48 h post-infection (pi) and a decrease of CD14 monocytes, gamma delta T and CD8 lymphocytes. P strain produced an increase in SCC 7 days pi and in ON 14 days pi. The MG immune response, the evolution of the process as well as the pathogen-host interaction could be determined by the combination of bacterial virulence factors. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas

Fil: Stassi, Antonela Florencia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. La producción de ovocitos y la secreción hormonal en los ovarios determinan la eficiencia reproductiva y en consecuencia, la producción de bovinos de leche y carne. La progresión a través del desarrollo folicular requiere de una comunicación entre el ovocito, las células de la granulosa y las células de la teca; y en dicho intercambio de información participan las citoquinas. El presente estudio fue diseñado para determinar la localización celular específica y expresión de las principales citoquinas y receptores que podrían participar en la enfermedad quística ovárica en bovinos y en la persistencia folicular asociada. El desarrollo del modelo experimentale resultó apropiado para el estudio de los estadios iniciales de la enfermedad así como el desarrollo de la persistencia encontrándose algunas diferencias entre el modelo y los casos espontáneos, las cuales podrían explicarse principalmente por el tiempo de persistencia. Se demostró que existe un posible efecto de las citoquinas en la patogénesis de la enfermedad, balance proliferación/apoptosis y diferenciación celular descriptas previamente en ovarios quísticos. Conociendo la fuerte justificación económica para desarrollar medidas preventivas y tratamientos para las alteraciones foliculares, los resultados obtenidos en esta tesis aumentan el conocimiento de la etiopatogenia de la enfermedad quística ovárica y los mecanismos involucrados en la persistencia folicular proveyendo una invaluable herramienta para estudios adicionales así como para la evaluación de medidas preventivas y terapéuticas. The production of oocytes and the hormonal secretion in the ovaries, determine the reproductive and consequently, productive efficiency in dairy and beef cattle. Progression through follicular development requires a communication between the oocyte, the granulosa and the theca cells, in the exchange of information between these cells are involved cytokines. The present study was designed to determine the specific cellular localization and expression of the major cytokines and receptors who could participate in ovarian cystic disease in cattle and in the follicular persistence associated. The development of the experimental models was appropriate for the study of the early stages of the disease and the development of persistence found some differences between model and spontaneous cases, which could be explained mainly by the persistence time. We showed that there is a possible effect of cytokines on the pathogenesis of the disease, balance proliferation/apoptosis and cell differentiation previously described in cystic ovaries. Knowing the strong economic justification for developing preventive measures and treatments for follicular disorders, the results obtained in this thesis increase the knowledge of the pathogenesis of cystic ovarian disease and the mechanisms involved in the follicular persistence providing an invaluable tool for additional studies and for the evaluation of preventive and therapeutic actions. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

Fil: Cuervo Bustamante, Pablo Fernando. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Los animales despliegan diversas estrategias para afrontar los desafíos ambientales, siendo moduladas por la respuesta de estrés. Un desenlace habitual de su acción sostenida es la inmunosupresión, suponiendo consecuencias sobre la interacción hospedador-parásito. En vista del rol de los roedores como reservorios de agentes infecciosos, se evaluaron tres hipótesis: i) los factores estresantes poseen un efecto diferencial sobre los diferentes compartimentos del sistema inmune del roedor; ii) el incremento de un compartimento específico del sistema inmune redunda en la reducción de otro, cuya magnitud depende de la exposición al estrés; iii) la inversión diferencial en los distintos compartimentos del sistema inmune, influenciada por niveles de estrés, se encuentra asociada al tipo e intensidad de agente parasitario presente. Las primeras dos hipótesis se abordaron mediante un experimento de estrés crónico con ratas de laboratorio, en el que se evidenció que la exposición prolongada a restricción alimentaria y/o conflicto social resultó en diferentes patrones de inversión somática, y en la estimulación de la inmunidad humoral innata y adquirida. La tercera hipótesis se evaluó con un ensayo con roedores de vida libre, en que se manipuló la disponibilidad de alimento. Este ensayo develó que la densidad de individuos y la disponibilidad de recursos constituirían estímulos estresores; difiriendo las estrategias de defensa según especie y sexo del hospedador, y el tipo de parásito. Estos hallazgos de ensayos con distinto grado de control y realismo, suscitan nuevos interrogantes acerca de la interrelación hospedador-parásito-ambiente, expandiendo nuestra comprensión sobre la susceptibilidad del hospedador y las dinámicas parasitarias. Animals display a series of strategies to cope with environmental challenges, which are met in light of the stress response. A frequent outcome of its sustained action is immunosuppression, which entails consequences for the host-parasite interaction. Due to the importance of rodents as reservoirs of infectious diseases, three hypotheses were evaluated: i) stressors pose a differential effect on distinct compartments of the rodent’s immune system; ii) the enhancement of a specific compartment of the immune system results in the reduction of the other, and its magnitude depends on the exposure to stress; iii) the differential investment on distinct compartments of the immune system, influenced by the levels of stress, is associated with the type and intensity of the infectious agent. The first two hypotheses were assessed with a chronic stress experiment with laboratory rats, which evidenced that the prolonged exposure to food restriction and/or social conflict resulted in different patterns of somatic investment and the increase of the humoral immunity, both innate and acquired. The third hypothesis was evaluated with a trial with free-ranging field mice, where food availability was manipulated. The later revealed that density and resource availability constitute environmental stressors. The defence strategies displayed differed according to host species and sex, but also the type of parasite. These findings from trials with a diverse degree of control and realism, elicit new questions about the host-parasite-environment interaction, expanding our understanding of host susceptibility and the dynamics of parasites. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica Universidad Nacional del Litoral

Fil: Baldi, Cecilia Josefina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Ciertos factores antropogénicos y/o ambientales pueden ocasionar diferentes tipos de estrés influyendo sobre el sistema inmune de animales silvestres. La valoración del estado inmunitario de estos individuos es fundamental para dilucidar la ecoepidemiología de enfermedades que afectarían la salud del hombre y los animales. En el presente trabajo, fueron evaluados componentes del sistema inmune innato (Anticuerpos naturales (AcN) y citocinas: TNF-alfa, IL-1beta e IL-10) e índices genéricos de salud (condición corporal y parámetros hematológicos), a partir de un modelo experimental de estrés en carpinchos (Hydrochoerus hydrochaeris). El objetivo fue establecer si estos marcadores eran sensibles al estrés crónico (estrés nutricional y psico-físico). Los resultados mostraron un impacto negativo de ambos tipos de estrés en la condición corporal de los individuos y un efecto positivo en componentes inmune no específicos (eosinófilos y AcN). La determinación de la expresión de ARNm de las citocinas evaluadas no se vio modificada por el estrés. Estos resultados sugieren que durante períodos prolongados de estrés los carpinchos invierten en componentes del sistema inmune como: AcN y eosinófilos, lo cual podría ser considerado una profilaxis dependiente del estrés. Estos marcadores constituirían una importante herramienta para el estudio de la dinámica de salud en poblaciones silvestres de carpinchos. Some anthropogenic and/or environmental factors may cause different kinds of stress influencing the immune system of wild animals. Assessing the immune-competence of these individuals is crucial to elucidate the eco-epidemiology of many diseases of importance for humans and animals. In this work, two components of innate immune system: natural antibodies (NAb) and cytokines (TNF-alpha, IL-1beta and IL-10) and generic indices of health (body condition and hematological parameters) were assessed as markers in stressed capybara (Hydrochoerus hydrochaeris) from an experimental model. The goal was to assess the effect of two types of chronic stress -food restriction and physical restraint- on these markers. The results showed that both stress treatments had a marked negative impact on body condition, but they had a significant positive effect on some components of the immune system (eosinophil and NAb). Expression of cytokines messenger ribonucleic acid levels has not been affected by both types of stress. These results suggest that during prolonged periods of stress capybaras preventively invest in some components of their innate defenses: NAb and eosinophils, which could be considered a stress-dependent prophylaxis. These markers have the potential to be an important tool for the study of dynamics of health in wild populations of capybaras. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica Secretaría de Estado de Ciencia, Tecnología e Innovación de la Provincia de Santa Fe