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Exposições repetidas ou intensas a radiações UV (ultravioleta) causam alterações cutâneas pela geração das espécies reativas do oxigênio (EROs), danosas aos tecidos, causando queimaduras, manchas, eritemas, fotoenvelhecimento e mutações no DNA. O uso de protetores solares é um meio de prevenir ou reduzir os efeitos destas exposições, por terem a capacidade de refletir e/ou absorvé-las. Os protetores podem ser de origem sintética ou natural. O desenvolvimento de ativos, capazes de aumentar à eficiência de protetores solares, principalmente os de origem vegetal, representa uma demanda crescente da cosmetologia. Moringa oleifera é uma planta com variadas aplicações farmacológicas, apresenta um rápido crescimento nos países tropicais, e está presente no nordeste brasileiro e norte do estado de Minas Gerais. Com base nisso, esse estudo visa avaliar a utilização de matérias primas de origem natural como agentes fotoprotetores, buscando as tendências do mercado consumidor. Para isso, formulações inéditas de extrato diclorometano de sementes de Moringa oleífera,em associação com diferentes extratos etanólicos de própolis, foram estudadas em relação à capacidade fotoprotetora. Em relação aos extratos de própolis (verde, vermelha e marrom) foram usados os etanólicos 70%. A atividade fotoprotetora foi estudada in vitro. Os resultados mostraram aumentos significativos de FPS para as formulações. O incremento elevado na proteção solar foi verificado na própolis verde, justificado pela maior quantidade de flavonóides que ela apresenta. Concluímos que os extratos de própolis incorporados nas formulações com extrato de diclorometano nas sementes Moringa oleiferaapresentaram um sinergismo na intensificação do fator de proteção solar.

Submitted by Renorbio (renorbioba@ufba.br) on 2022-05-02T13:22:19Z No. of bitstreams: 1 Tese - versão final - João Henrique.pdf: 16697792 bytes, checksum: efbd1edeb74ba6511bed534bea594bc5 (MD5) Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2022-05-10T23:39:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - versão final - João Henrique.pdf: 16697792 bytes, checksum: efbd1edeb74ba6511bed534bea594bc5 (MD5) Made available in DSpace on 2022-05-10T23:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - versão final - João Henrique.pdf: 16697792 bytes, checksum: efbd1edeb74ba6511bed534bea594bc5 (MD5) Previous issue date: 2021-12-03 CAPES A própolis é um composto natural de grande aplicação nas áreas alimentícia, farmacêutica e cosmética sendo uma resina complexa produzida pelas abelhas através da mistura de exsudatos de diferentes plantas, cera e secreções salivares. As variações na composição química, e consequentemente, na atividade biológica de extratos de própolis, estão associadas a muito fatores, como tipo, origem geográfica, sazonalidade, entre outros. Dentro desse contexto, o objetivo desse estudo foi avaliar a influência de diferentes métodos de extração na composição química e biológica de extratos de própolis vermelha de diferentes origens geográficas, bem como determinar as condições de processo para a obtenção de extratos de própolis vermelha utilizando a tecnologia de extração com fluído supercrítico (SFE). Inicialmente, os métodos de extração convencional (etanólica) e assistida por ultrassom foram empregados para extrair compostos ativos de própolis de diferentes regiões do Nordeste do Brasil (Sergipe, Alagoas, Bahia, e Rio Grande do Norte). Teores de compostos fenólicos, flavonoides, atividade antioxidante in vitro, concentração de marcadores (formononetin e kaempferol) e a citotoxidade para linhagens de células tumorais humanas (HCT116 – human colon, HL60 – leukemia, PC3 – carcinoma of prostate e SNB19 – glioblastoma) foram avaliados comparativamente para os doze extratos obtidos a partir de seis diferentes amostras. Adicionalmente, foram obtidos extratos de própolis vermelha por SFE de uma amostra de Alagoas empregando diferentes condições de processo. Para a determinação dos parâmetros de processo aplicando a SFE, foram estudados e obtidos a Curva Global de Extração (OEC - Overall Extraction Curves), o S/F (massa de CO2/massa de própolis), o percentual de co-solvente (etanol – 0, 1, 2 e 4%) e as isotermas de rendimento global (GYI - Global Yield Isotherms) em função das diferentes pressões (250, 350 e 450 bar) e temperaturas (31,7, 40 e 50°C). Foram investigados os compostos fenólicos totais, atividade antioxidante e o teor de formononetina, naringenina e kaempferol nos extratos obtidos nas diferentes condições empregadas (SFE). Como resultados deste estudo, foram identificadas variações significativas (p>0,05) no teor dos compostos investigados nos extratos de própolis vermelha, confirmando que a composição química varia de acordo com a região de coleta das amostras. A maior concentração dos compostos de interesse e a maior atividade antioxidante in vitro foram exibidas pelos extratos obtidos em amostras do estado de Alagoas (A1, A2, B1 e B2), que atualmente é a única no Brasil que apresenta certificação de origem. Os biomarcadores formononetina e kaempferol foram identificados em todas as amostras, independente da origem ou do método de extração empregado. As maiores concentrações de formononetina foram identificadas nos extratos obtidos por ultrassom, indicando uma maior seletividade para a extração desse composto por este método. Em relação à atividade citotóxica, para a linhagem HCT-116, todos os extratos apresentaram inibição superior a 90%, enquanto para as linhagens HL-60 e PC3 a menor inibição identificada foi de 80%. Em geral, não houve diferença significativa (p>0,05) no potencial antiproliferativo quando comparados os métodos de extração. Os resultados mostraram que a composição da própolis vermelha brasileira varia significativamente dependendo da origem geográfica e que o método utilizado influencia os compostos resultantes que estão presentes na própolis. No que se refere a aplicação da SFE como método extrativo, dentro dos parâmetros investigados, as melhores condições encontradas foram um S/F de 131 e o uso de etanol na maior concentração (4%), o que resultou em maiores rendimentos de extrato e maior teor de compostos antioxidantes. A formononetina, principal biomarcador da própolis vermelha, foi o composto encontrado em maiores quantidades nos extratos obtidos por SFE em todas as condições empregadas. Como esperado, as condições de temperatura e pressão também influenciaram no rendimento do processo, sendo 350 bar e 40°C as melhores condições para a obtenção de compostos bioativos a partir de uma amostra de própolis vermelha. Os novos resultados para a própolis vermelha encontrados neste estudo mostram que é possível obter extratos com alto potencial antioxidante utilizando tecnologias alternativas, bem como que a origem geográfica, o tipo de método empregado e as condições de processo influenciam na qualidade do extrato obtido. Propolis is a natural compound of wide application in the food, pharmaceutical and cosmetic areas, being a complex resin produced by bees through the mixture of exudates from different plants, wax and salivary secretions. Variations in the chemical composition, and consequently, in the biological activity of propolis extracts, are associated with many factors, such as type, geographic origin, seasonality, among others. Within this context, the objective of this study was to evaluate the influence of different extraction methods on the chemical and biological composition of red propolis extracts from different geographic origins, as well as to determine the process conditions for obtaining red propolis extracts using the technology extraction with supercritical fluid (SFE). Initially, conventional (ethanolic) and ultrasound-assisted extraction methods were used to extract active compounds from propolis from different regions of Northeastern Brazil (Sergipe, Alagoas, Bahia, and Rio Grande do Norte). Contents of phenolic compounds, flavonoids, in vitro antioxidant activity, concentration of markers (formononetin and kaempferol) and cytotoxicity to human tumor cell lines (HCT116 - human colon, HL60 - leukemia, PC3 - carcinoma of prostate and SNB19 - glioblastoma) were evaluated comparatively for the twelve extracts obtained from six different samples. Additionally, red propolis extracts were obtained by SFE from a sample from Alagoas using different process conditions. To determine the process parameters applying SFE, the Overall Extraction Curves (OEC - Overall Extraction Curves), the S/F (CO2 mass/propolis mass), the percentage of co-solvent (ethanol – 0, 1, 2 and 4%) and the global yield isotherms (GYI - Global Yield Isotherms) as a function of different pressures (250, 350 and 450 bar) and temperatures (31.7, 40 and 50°C). The total phenolic compounds, antioxidant activity and the content of formononetin, naringenin and kaempferol in the extracts obtained under different conditions (SFE) were investigated. As a result of this study, significant variations (p>0.05) were identified in the content of the compounds investigated in red propolis extracts, confirming that the chemical composition varies according to the region where the samples were collected. The highest concentration of the compounds of interest and the highest in vitro antioxidant activity were shown by extracts obtained from samples from the state of Alagoas (A1, A2, B1 and B2), which is currently the only one in Brazil that has certification of origin. The biomarkers formononetin and kaempferol were identified in all samples, regardless of origin or extraction method used. The highest concentrations of formononetin were identified in the extracts obtained by ultrasound, indicating a greater selectivity for the extraction of this compound by this method. Regarding cytotoxic activity, for the HCT-116 strain, all extracts showed inhibition greater than 90%, while for the HL-60 and PC3 strains, the lowest inhibition identified was 80%. In general, there was no significant difference (p>0.05) in the antiproliferative potential when comparing the extraction methods. The results showed that the composition of Brazilian red propolis varies significantly depending on the geographic origin and that the method used influences the resulting compounds that are present in the propolis. Regarding the application of SFE as an extractive method, within the parameters investigated, the best conditions found were a S/F of 131 and the use of ethanol in the highest concentration (4%), which resulted in higher yields of extract and higher content of antioxidant compounds. Formononetin, the main biomarker of red propolis, was the compound found in greater amounts in the extracts obtained by SFE under all conditions used. As expected, the temperature and pressure conditions also influenced the process yield, with 350 bar and 40°C being the best conditions for obtaining bioactive compounds from a red propolis sample. The new results for red propolis found in this study show that it is possible to obtain extracts with high antioxidant potential using alternative technologies, as well as that the geographic origin, the type of method used and the process conditions influence the quality of the extract obtained.

Submitted by Sheila MONTEIRO (sheila.monteiro@ufma.br) on 2022-05-24T12:35:28Z No. of bitstreams: 1 MARCOS - MARINHO.pdf: 252515 bytes, checksum: 0a5900dff3591c7d825467ad40cd3a9e (MD5) Made available in DSpace on 2022-05-24T12:35:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARCOS - MARINHO.pdf: 252515 bytes, checksum: 0a5900dff3591c7d825467ad40cd3a9e (MD5) Previous issue date: 2021-07-16 FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DO MARANHÃO - FAPEMA COORDENAÇÃO DE APERFEIÇOAMENTO DE PESSOAL DE NÍVEL SUPERIOR - CAPES Brazilian red propolis is produced in the Northeast Region of the country by Apis mellifera L. bees and has Dalbergia ecastophyllum as its botanical source. The literature describes propolis antibacterial, antifungal, antitumor, antioxidant, anti-inflammatory, cytotoxic, and antiparasitic activities. The objective of the present study was carrying out a literature review on the chemical composition and leishmanicidal activity of Brazilian propolis by evaluating the leishmanicidal activity and characterizing the chemical composition and palynological profile of red propolis produced in the Brazilian state of Tocantins, a region that has not been mentioned in the literature as a place known for the production of this type of propolis. The first chapter shows a literature survey and discusses studies on evaluation of the chemical composition and leishmanicidal activity of Brazilian propolis found in the following databases: National Library of Medicine (National Institutes of Health, PubMed), Science Direct, Scopus, and Latin America and Caribbean Center on Health Sciences Information. The integrative reviewing method was applied. The search identified 28 articles published between 2004 and 2020 addressing red, green, and brown propolis. Chemical analyses of Brazilian propolis essential oils were carried out by using gas chromatography associated with mass spectrometry or flame ionization and identified the presence of monoterpenes, sesquiterpenes, and phenylpropanoids. Analysis of hydroethanolic extracts were carried out by using high-performance liquid chromatography with UV-Vis detection (HPLC/UV-Vis) and connected to mass spectrometer (HPLC/MS), which identified terpenes, phenolic acids, flavonoids, and benzophenones. Studies that assessed the leishmanicidal activity of Brazilian propolis in different species of Leishmaniawere more abundant between 2007 and 2020 and reported use of hydroethanolic extracts, essential oils, polymeric nanoparticles, and metal complexes in combination with propolis to inhibit promastigote and amastigote forms. The second chapter shows the palynological profile of propolis obtained by applying characterization performed by using HPLC/MS in both positive and negative modes. Botanical analysis identified 22 pollen types that belonged to 15 botanical families, among which Arecaceae, Asteraceae, Fabaceae, Myrtaceae, Melastomataceae, Rubiaceae, and Urticaceae were more frequent. Polliniferous and nectariferous species were identified. However, the palynological profile of Dalbergia ecastophyllum, a species related to production of red propolis in the Brazilian Northeast coast, was not obtained. Mass spectra obtained by using HPLC/MS showed a precursor ion fragmentation pattern compatible with compounds belonging to the classes of isoflavonoids, pterocarpanes, flavanones, chalcones, as well as isoflavones condensed with a chalcone (retusapurpurin). The third chapter shows the results of the evaluation of propolis extracts and fractions regarding leishmanicidal activity against the promastigote form of Leishmania amazonensis and cytotoxicity induced in RAW 264.7 macrophages measured by applying the cell viability method with (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Total phenolic content and flavonoid concentration were measured by using UV-vis spectrophotometry, whereas chemical composition was obtained by HPLC/MS. The extracts inhibited promastigote forms, with IC50 ranging from 21.98 to 86.12 µg/mL. The chloroform fraction was the most effective (16.02 µg/mL). Evaluation of cytotoxicity against RAW 264.7 macrophages indicated that red propolis extract and chloroform fraction showed cell toxicity for concentrations equal to or higher than 100 µg/mL. The samples had high total phenolic content and flavonoid concentration for extracts and chloroform fraction, whereas HPLC/UV-Vis showed similar chemical profiles, with identification of the substances formononetin and biochanin A in all samples, which are considered chemical markers. The results allowed to conclude that red propolis produced in the Brazilian state of Tocantins has leishmanicidal potential, low cell toxicity, and high concentrations of phenolic compounds. This is the first study oriented toward characterizing red propolis produced in Brazilian Amazon and will contribute to the development of apiculture in Tocantins based on production and commercialization of this product. A própolis vermelha brasileira é produzida na região Nordeste por abelhas da espécie Apis mellifera L. e tem como fonte botânica a espécie Dalbergia ecastophyllum. Na literatura são descritas atividades antibacteriana, antifúngica, antitumoral, antioxidante, anti-inflamatória, citotóxica e antiparasitária. O presente trabalho teve como objetivo realizar uma revisão de literatura sobre a composição química e atividade leishmanicida da própolis brasileira, avaliar a atividade leishmanicida, caracterizar a composição química e os tipos polínicos da própolis vermelha produzida no estado do Tocantins, Brasil. Região não mencionada na literatura como produtora desse tipo de própolis. No primeiro capítulo foi realizado o levantamento da literatura investigando publicações sobre avaliação da composição química e atividade leishmanicida da própolis brasileira nas bases de dados National Library of Medicine - National Institutes of Health (PubMed), ScienceDirect, Scopus e Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS) pelo método de revisão integrativa. A busca identificou 28 publicações entre os anos de 2004 a 2020 com própolis vermelha, verde e marrom. As análises químicas com óleos essenciais da própolis brasileira foram realizadas por ensaios de cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massas e com ionização de chama (CG-EM, CG-FID), identificando a presença de monoterpenos, sesquiterpenos e fenilpropanoides. Para análise de extratos hidroetanólicos foram empregadas técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência com detector de ultravioleta e acoplada a espectrômetro de massas (CLAE/UV-Vis e CLAE-EM/EM), que identificaram terpenos, ácidos fenólicos, flavonoides e benzofenonas. Estudos avaliando a atividade leishmanicida de própolis brasileira para diferentes espécies de Leishmania concentram-se entre os anos de 2007 a 2020, utilizando extratos hidroetanólicos, óleos essenciais, nanopartículas poliméricas e complexos metálicos associados à própolis para a inibição de formas promastigotas e amastigotas. O segundo capítulo apresenta a identificação polínica da própolis pelo método de acetólise de Erdtman e a caracterização química por CLAE- EM/EM nos modos positivo e negativo. A análise botânica identificou 22 tipos polínicos, pertencentes a 15 famílias botânicas, com maior frequência para as famílias Arecaceae, Asteraceae, Fabaceae, Myrtaceae, Melastomataceae, Rubiaceae e Urticaceae, identificando espécies poliniferas e nectaríferas, contudo, não foi identificado o tipo polínico de Dalbergia ecastophyllum, espécie associada à produção da própolis vermelha no litoral nordeste do Brasil. Os espectros de massas obtidos por CLAE-EM/EM apresentaram um padrão de fragmentação dos íons precursores compatível com compostos das classes dos isoflavonoides, pterocarpanos, flavonona, chalcona, além da isoflavona condensada com uma chalcona (retusapurpurina). No terceiro capítulo os extratos e frações da própolis foram avaliados quanto à atividade leishmanicida contra a forma promastigotas de Leishmania amazonensis e citotoxicidade frente a macrófagos RAW 264.7, utilizando o método de viabilidade celular com o reagente brometo de 3-(4,5-dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio (MTT), a concentração de fenóis totais e flavonoides foi obtida por espectrofotometria UV-Vis e a composição química por CLAE/UV- Vis. Os extratos inibiram as formas promastigotas, com CI50 variando de 21,98 a 86,12 µg/mL, enquanto a fração clorofórmica foi mais efetiva (16,02 µg/mL). A avaliação da citotoxicidade contra células Raw 264.7 demonstrou que o extrato de própolis vermelha e a fração clorofórmica apresentaram toxicidade celular em concentrações 100 µg/mL. As amostras demonstraram elevada concentração de fenóis totais e flavonoides para os extratos e fração clorofórmica, enquanto nas análises por CLAE/UV-Vis foi observado semelhança no perfil químico, com identificação dos compostos formononetina e biochanina A em todas as amostras, sendo considerados marcadores químicos. Os resultados permitem concluir que a própolis vermelha produzida no estado do Tocantins apresenta potencial leishmanicida, baixa toxicidade celular e elevadas concentrações de compostos fenólicos. Este é primeiro estudo com própolis vermelha produzida na região da Amazônia brasileira e contribuem para o desenvolvimento da apicultura do estado do Tocantins a partir da produção e comercialização de própolis vermelha.

Orientador: Yong Kun Park Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Própolis é uma substância resinosa elaborada por abelhas da espécie Apis mellifera e usada como revestimento da colméia. Para a produção da própolis as abelhas usam a matéria-prima coletada de diversas partes da planta como broto, botões florais, exsudatos resinosos e outras partes do tecido vegetal. A própolis é utilizada na medicina popular há 3000 anos a.C. principalmente por apresentar propriedades antimicrobiana, anti-inflamatória e cicatrizante (Marcucci, 1995; Khayyal et al., 1993). Nos últimos anos foi demonstrado que alguns tipos de própolis apresentam atividade antioxidante, hipotensiva, anestésica, anticâncer, anti-HIV e anticariogênica. As própolis brasileiras são classificadas em 13 grupos conforme sua composição físico-química, que é diretamente relacionada com a planta utilizada pelas abelhas para coleta das resinas e exsudatos. Nesse trabalho foi escolhida a própolis do grupo 13 por possuir altas atividades biológicas. Nessa tese foram avaliados a quantidade de compostos fenólicos totais e flavonóides totais presentes na própolis do grupo 13 de diferentes colméias e em diferentes épocas do ano, além de testar suas atividades biológicas. Além disso, foram realizados o isolamento e a identificação da formononetina (7-hidroxi-4¿metoxi-isoflavona), principal isoflavona encontrada na própolis do grupo 13, e foram testadas suas atividades biológicas. Demonstrou-se que a própolis vermelha de João Pessoa - PB apresenta grandes variações entre as colméias e em diferentes épocas do ano em relação à composição de compostos fenólicos totais e flavonóides totais. Mostrou-se também que as própolis com maiores quantidades de compostos fenólicos totais e flavonóides totais apresentaram melhores atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus e atividade antiradical livre. Foi demonstrado um método de extração da formononetina de própolis do grupo 13, e mostrou-se que esse composto possui alta atividade antiradical e antimicrobiana contra Staphylococcus aureus Abstract: Propolis is a resinous substance produced by the honeybee Apis mellifera. Bees use propolis to seal holes and to protect the beehive. To produce propolis the honeybee uses resins of leaf buds and buds, resinous exudates and other parts of plant tissues. Propolis is used as a folk medicine since 3000 BC. Numerous biological properties have been found including antimicrobial, anti-inflammatory and cicatrizing (Marcucci, 1995, Khayyal et al., 1993). Recently, studies revealed that propolis also has antioxidant, hypotensive, anesthetic, anticancer, anti-HIV and anticariogenic activities. The Brazilian propolis is classified into 13 distinct groups according to their chemical composition, which is directly related to the plants used to collect resins and exudates. In this study, propolis of group 13 was chosen, as it shows high biological activity. In this thesis were analyzed the quantity of whole phenolic compounds and flavonoids content was analyzed in each sample of propolis group 13, collected in different beehives and in different seasons. Furthermore, it was tested the biological activities of each sample. In addition, formononetin (7-hydroxy-4¿methoxyisoflavone), the main isoflavonoid found in propolis group 13, was isolated and identified and its biological activity was analyzed. It was demonstrated that João Pessoa ¿ PB red propolis has great variations of phenolic compounds and flavonoids among honeybees and different seasons. It was showed that propolis with greater amount of phenolic compounds and flavonoids have better antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and antiradical activity. It was demonstrated a method of formononetin extraction of red propolis group 13, and it was showed that this compound has high antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and antiradical activity Doutorado Doutor em Ciência de Alimentos

The objective of this study was to evaluate the hepatoprotective effect of the honey bee Apis mellifera ethanolic extract of the red propolis, obtained in four municipalities of the Rio Grande do Norte semi-arid region, through an in vitro evaluation of the antineoplastic potential in human hepatic carcinoma (HepG2) and normal cell lines (L929), and from the comet assay in hepatic cell lines (ZF-L hepatocytes) to evaluate the genoprotective potential of the extract. The hepatoprotective effect was also evaluated in vivo by the induction of chronic experimental hepatic lesions in rodents (Rattus norvegicus Berkenhout, 1769), Wistar line, by intraperitoneal administration of thioacetamide (TAA) at the dose of 0.2g/kg. The animals were distributed in the following experimental groups: G1 (control), G2 (treated with 500mg/kg ethanolic extract of propolis), G3 (treated with 500mg/kg of ethanolic extract and TAA) and G4 (treated with TAA). All rats were submitted to serum biochemical, macroscopic, histological and stereological biochemical exams of the liver. It was verified the genoprotective effect of red propolis since the mean damages promoted to DNA in cells tested with the extract were significantly lower than the mean of the positive control damage (hydrogen peroxide). The red propolis extract did not present cytotoxic activity to the tumor cells of human liver cancer, as well as to normal ones. The absence of cytotoxicity in normal cells may indicate safety in the use of the propolis extract. The results of the serum biochemical evaluation showed that the serum levels of the aminotransferase enzymes (AST) did not differ significantly between G1, G2 and G3 when compared to each other. G4 showed significant increase in levels compared to the other groups, indicating that the administration of the extract did not cause liver toxicity, as well as exerted hepatoprotective effect against the hepatic damage induced by TAA. The G3 and G4 animals developed cirrhosis, but in G3 the livers were characterized by the presence of small regenerative nodules and level with the surface of the organ, whereas in G4 the livers showed large regenerative nodules. The livers of the G1 and G2 animals presented normal histological appearance, whereas the livers of the G3 animals showed regenerative nodules surrounded by thin septa of connective tissue, and in G4 the regenerative nodules were surrounded by thick septa fibrous connective tissue. The analysis of the hepatic tissues by means of stereology showed that there was no statistical difference between the percentage of hepatocytes, sinusoids, and collagens in G1 and G2. In G3 the percentage of hepatocytes, sinusoids, and collagen did not differ significantly from the other groups. It was concluded that the ethanolic extract of the red propolis exerted a hepatoprotective effect, because it promoted in vitro reduction of the damage to the DNA of liver cells, antineoplastic activity in human hepatocellular carcinoma cell line (HepG2) and did not exert cytotoxic effect in normal cells or was able to reduce liver enzyme activity and the severity of cirrhosis induced by TAA in vivo. RESUMO: Este estudo objetivou avaliar o efeito hepatoprotetor do extrato etanólico da própolis vermelha da abelha Apis mellifera, obtido em quatro municípios do semiárido do Rio Grande do Norte, mediante avaliação in vitro do potencial antineoplásico em linhagens de células de carcinoma hepático humano (HepG2) e em linhagens de células normais (L929), além do ensaio cometa em linhagens de células hepáticas (hepatócitos ZF-L) para avaliar o potencial genoprotetor do extrato. O efeito hepatoprotetor também foi avaliado in vivo através da indução de lesões hepática experimental crônica em roedores da espécie Rattus norvegicus (Berkenhout, 1769), linhagem Wistar, pela administração intraperitoneal de tioacetamida (TAA) na dose de 0,2g/kg. Os animais foram distribuídos nos seguintes grupos experimentais: G1 (controle), G2 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico da própolis), G3 (tratados com 500mg/kg de extrato etanólico e TAA) e G4 (tratados com TAA). Todos os ratos foram submetidos aos exames bioquímico sérico, anatomopatológico macroscópico, histológico e esteriológico do fígado. Foi constatado o efeito genoprotetor da própolis vermelha uma vez que as médias dos danos promovidos ao DNA em células testadas com o extrato foram significativamente inferiores à média dos danos do controle positivo (peróxido de hidrogênio). O extrato da própolis vermelha não apresentou atividade citotóxica para células tumorais de câncer de fígado humano, bem como para normais. A ausência de citotoxicidade em células normais, tal como constatado, pode indicar segurança no uso do extrato da própolis. Os resultados da avaliação bioquímica sérica demonstraram que os níveis séricos das enzimas aminotransferase (AST) não diferiram significativamente entre G1, G2 e G3, quando comparadas entre si. No G4 houve aumento significativo dos níveis em relação aos demais grupos, indicando que a administração do extrato não causou toxicidade hepática, bem como exerceu efeito hepatoprotetor frente ao dano hepático induzido pela TAA. Os animais dos G3 e G4 desenvolveram cirrose, porém no G3 os fígados caracterizaram-se pela presença de pequenos nódulos regenerativos e nivelados com a superfície do órgão, enquanto que no G4 os fígados apresentaram grandes nódulos regenerativos. Os fígados dos animais G1 e G2 apresentaram aspecto histológico normal, enquanto que os fígados dos animais do G3 apresentaram nódulos regenerativos circundados por finos septos de tecido conjuntivo, e nos do G4 os nódulos regenerativos foram circundados por espessos septos de tecido conjuntivo fibroso. A análise dos tecidos hepáticos por meio de estereologia mostrou que não houve diferença estatística entre o percentual de hepatócitos, sinusoides e colágenos nos G1 e G2. No G3 o percentual de hepatócitos, sinusoides e colágeno não diferiu significativamente dos demais grupos. Concluiu-se que o extrato etanólico da própolis vermelha exerceu efeito genoprotetor, por promover in vitro redução do dano ao DNA de células hepáticas, atividade antineoplásica em linhagem celular de carcinoma hepatocelular humano (HepG2) e não exerceu efeito citotóxico em células normais ou efeito hepatoprotetor in vivo com diminuição da gravidade da cirrose induzida por TAA.

Orientador: Alexandra Christine Helena Frankland Sawaya Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A palavra própolis tem origem Grega: pro significa em defensa de, e polis significa comunidade. A própolis é usada pelas abelhas para fortalecer as paredes da colmeia e para cobrir as paredes internas e por devido a sua atividade antimicrobiana. A composição química da própolis é variável segundo a biodiversidade e a origem geográfica. A própolis vermelha, encontrada no nordeste e norte do Brasil, apresenta promissoras atividades biológicas: atividade antimicrobiana, antiparasitária, antioxidante, citotóxica, antiinflamatória, analgésica, efeitos antiobesidade, contra psoríase e hepatoprotetores. A composição química da própolis vermelha, relatada na literatura, parece variar qualitativa e quantitativamente, inclusive entre amostras coletadas na mesma região. Isto pode ser devido a variações sazonais, a flora direitamente ao redor das colméias ou aos métodos de análise. A maioria das classes de substâncias já identificadas pode ser analisada adequadamente por espectrometria de massas com ionização por eletrospray e cromatografia líquida. Os constituintes de média e alta polaridade (como fenólicos, flavonóides e benzofenonas) são responsáveis por muitas das atividades biológicas reportadas à própolis vermelha. A cromatografia líquida de ultra-eficiência acoplada à espectrometria de massas (UHPLC-MS) é um método moderno, rápido e sensível. Permite avaliar os perfis químicos das amostras e determinar sua composição qualitativamente, comparando os espectros de massas (MS/MS) dos componentes das amostras com informações na literatura. Portanto UHPLC-MS é a ferramenta mais adequada para a avaliação da composição de matrizes complexas como a própolis. A comparação do perfil químico de diversas amostras de própolis vermelha brasileira e a avaliação de sua atividade antimicrobiana e antioxidante permitirá identificar substâncias que possam estar contribuindo para sua bioatividade, e levar á identificação de marcadores químicos para o controle de qualidade destas amostras, bem como possibilitará definir se há um ou vários tipos de própolis vermelha Abstract: The word, propolis is of Greek origin: pro means in defense of and polis means community. Propolis is used by bees to strengthen the hive walls and cover the inner walls for its antimicrobial activity. The chemical composition of propolis varies depending on the biodiversity and geographic origin. Red propolis from the north and northeast of Brazil shows promising biological activity: antimicrobial, antiparasitic, antioxidant, cytotoxic, anti-inflammatory, analgesic, antiobesity, antipsoriasic and hepatoprotective effects. The chemical composition of red propolis reported in literature seems to vary qualitatively and quantitatively, even between samples collected in the same region. This may be due to seasonal variations, the flora directly around the hives or differences in the analytical methods. Most of the compounds already identified can be analyzed by mass spectrometry with electrospray ionization and liquid chromatography. These compounds of medium and high polarity (phenolics, flavonoids and benzophenones) are responsible for most of the biological activities reported. Ultra efficient liquid chromatography coupled with mass spectrometry (UHPLC-MS) is a modern, fast and sensitive method. It allows the characterization of the chemical profile of the samples and determines their qualitative composition, by comparison of the mass spectra (MS/MS) of the compounds with data from literature. Therefore it is the most adequate tool to evaluate the composition of complex matrixes such as propolis. The comparison of the chemical profile of diverse red propolis samples and evaluation of their antimicrobial and antioxidant activities allow us to identify the compounds responsible for these activities, indicate the marker compounds and define if there is one type, or several types, of red propolis Mestrado Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde Mestra em Ciências

O presente estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade do extrato hidroalcóolico de própolis vermelha (RPHE) e suas frações obtidas por partição, nhexano (HF), diclorometano (DF), acetato de etila (AF) e n-butanol (BF), em linhagens tumorais e linhagens celulares não tumorais. Para isso, o ensaio colorimétrico do XTT foi realizado em fibroblastos pulmonares humanos (GM07492A, células não tumorais), adenocarcinoma mamário (MCF-7), glioblastoma (U343) e células de adenocarcinoma de colo do útero (HeLa). Os resultados mostraram que RPHE, HF e DF apresentaram não apenas potencial citotóxico para todas as linhagens celulares tumorais, mas também para a linhagem celular normal, indicando ausência de seletividade. HF apresentou o IC50 mais baixo (concentração inibitória mínima; 33,8-133,3 μg/mL), com diferença significativa daquelas observado para RPHE (137.0-262,7 μg/mL). BF e AF revelaram um IC50 superior a 1250 μg/mL em todas as linhagens celulares. Os resultados mostraram que a própolis vermelha possui substâncias com atividade antiproliferativa, indicando que sua fração hexanânica pode ter substâncias com potencial citotóxico. Palavras-chave: citotoxicidade, própolis vermelha, ensaio colorimétrico XTT. The present study aimed to evaluate the cytotoxicity of red propolis hydroalcoholic extract (RPHE) and its fractions obtained by partition, hexanes (HF), dichloromethane (DF), ethyl acetate (AF) and n-butanol (BF), on tumor and non-tumor cell lines. For this purpose, the XTT colorimetric assay was performed on human lung fibroblasts (GM07492A, nontumor cell), breast adenocarcinoma (MCF-7), glioblastoma (U343) and cervix adenocarcinoma (HeLa) cells. The results showed that RPHE, HF and DF presented not only cytotoxic potential to all tumor cell lines but also to normal cell line, indicating selectivity absence. HF presented the lowest IC50 (half minimal inhibitory concentration; 33.8-133.3 µg/mL), with significant difference from those observed for RPHE (137.0-262.7 µg/mL). BF and AF revealed an IC50 which was higher than 1250 µg/mL in all cell lines. The results showed that red propolis has substances with antiproliferative activity, indicating that its hexanes fraction may have substances with cytotoxic potential. Key-words: cytotoxicity, red propolis, XTT colorimetric assay

This study sought to verify the action of red propolis as an edible coating in the conservation of the apple of the cultivar “Fuji”, using temperatures of 7 ° C (refrigerated) and 30 ° (ambient) and in the concentrations of propolis at 3% and 5%, for the research, this fruit was used for its nutritional value, rich pectin, tannin and flavonoids, which are phytonutrients, which act as antioxidants and prevent various diseases. The filmogenic solution applied was red propolis extract, which has substances that delay the ripening of the cultivar, thus contributing to the increase of its useful life. The samples were immersed in the concentrations, then placed in their proper environments, from where they were taken every 5 days, for 30 days, microbiological analyzes were carried out, which confirmed the absence of Salmonela ssp and Staphylococcus spp, and the delay of the development of filamentous fungi, coliforms 35 ° and coliforms 45 ° until the 15th day for the concentration at 3%, and 25 days for the 5%, confirming the efficiency of the coating against the development of Microorganism, In relation to physical-chemical , the samples showed an interaction in the ratio, contributing to the ripeness of the fruit. Este estudio buscó verificar la acción del propóleo rojo como recubrimiento comestible en la conservación de la manzana del cultivar “Fuji”, utilizando temperaturas de 7 ° C (refrigerada) y 30 ° (ambiente) y en las concentraciones de propóleo al 3% y 5%, para En la investigación, esta fruta fue utilizada por su valor nutricional, rico en pectina, tanino y flavonoides, que son fitonutrientes, que actúan como antioxidantes y previenen diversas enfermedades. La solución filmógena aplicada fue el extracto de propóleo rojo, el cual posee sustancias que retrasan la maduración del cultivar, contribuyendo así al aumento de su vida útil. Las muestras se sumergieron en las concentraciones, luego se colocaron en sus ambientes adecuados, de donde se tomaron cada 5 días, durante 30 días se realizaron análisis microbiológicos, los cuales confirmaron la ausencia de Salmonela ssp y Staphylococcus spp, y se observó el retraso. del desarrollo de hongos filamentosos, coliformes 35 ° y coliformes 45 ° hasta el día 15 para la concentración al 3%, y a los 25 días para el 5%, confirmando la eficiencia del recubrimiento frente al desarrollo de Microorganismos, en relación a los efectos físico-químicos, las muestras mostraron una interacción en la proporción, contribuyendo a la madurez del fruto. Esse estudo buscou verificar a ação da própolis vermelha como revestimento comestível na conservação da maçã da cultivar “Fuji”, utilizando temperaturas de 7°C (refrigerada) e 30° (ambiente) e nas concentrações de própolis a 3% e 5%, para a pesquisa, foi utilizado essa fruta por seu valor nutricional, rica pectina, tanino e flavonóides, que são fitonutrientes, que agem como antioxidantes e previnem diversas doenças. A solução filmogênica aplicada foi extrato de própolis vermelha, que possui substâncias que retardam o amadurecimento da cultivar, assim contribuindo para o aumento da sua vida útil. As amostras foram imergidas nas concentrações, em seguida postas em seus devidos ambientes, de onde eram retiradas a cada 5 dias, durante 30 dias, foram realizadas analises microbiológicas, que constatom a ausência de Salmonela ssp e Staphylococcus spp, e observou-se o retardo do desenvolvimento de fungos filamentosos, coliformes 35° e coliformes 45° até o 15° dia para a concentração a 3%, e 25 dias para a 5%, confirmando a eficiência do revestimento contra o desenvolvimento de Microorganismo, Em relação a físico-química, as amostras apresentaram uma interação no ratio, contribuindo para o estado de maturação do fruto.

A resistência aos antibacterianos está também vinculada com a existência de genes contidos no microrganismo que codificam diferentes mecanismos bioquímicos que impedem a ação dos fármacos. As infecções causadas por esses microrganismos multirresistentes são um problema emergente mundial, e nos últimos anos um número considerável, estão desenvolvendo resistência aos antibacterianos convencionais. O resultado global do surgimento de organismos patogênicos humanos exibindo resistência a múltiplas drogas tem sido a busca de novas substâncias antimicrobianas de outras fontes, incluindo plantas. A própolis é usada como medicamento popular desde 300 aC, na literatura já foram relatadas numerosas propriedades biológicas. A composição da própolis é variável, dependendo da região e da época da coleta. Em face deste potencial biológico demonstrado pela própolis, da escassez de novos antibacterianos e do constante aumento de bactérias multirresistentes, o objetivo deste estudo foi avaliar as atividades, antibacteriana, antibiofilme, sinérgica e antivirulência, da própolis vermelha (extrato bruto, frações - diclorometano, acetato, hexano, nbutanol, e substâncias isoladas – gutiferona E e oblongifolina) frente a bactérias multirresistentes. Para a avaliação da atividade antimicrobiana, utilizou-se como parâmetros de análise a concentração inibitória mínima (CIM), concentração bactericida mínima (CBM), inibição da formação do biofilme (CIMB50), índice de concentração inibitória fracionada (ICIF) e antivirulência frente a cepa multirresistente de S. aureus (ATCC 43300). Os resultados evidenciaram uma atividade antibacteriana promissora (CIM e CBM de 31,25 e 62,5 μg/mL) para o extrato bruto da própolis vermelha, frente cepas multirresistentes de Staphylococcus spp. Para as substâncias isoladas também foram encontrados resultados promissores onde a CIM foi de 12,5 μg/mL para Staphylococcus spp. As frações da própolis vermelha não apresentaram atividade antibacteriana contra o painel de bactérias multirresistentes avaliadas. Na avaliação da inibição da formação dos biofilmes frente bactérias multirresistentes, as substâncias gutiferona E e oblongifolina inibiram os biofilmes em mais de 50% em concentrações entre 1,56 e 6,25 μg/mL para as cepas de Staphylococcus spp. No ensaio da determinação do ICIF, as substâncias isoladas – gutiferona E e oblongifolina - combinados com a vancomicina, apresentaram somente efeito indiferente nessas combinações frente às bactérias avaliadas. Na determinação da antivirulência, apenas a substância gutiferona E (12,5 μg/mL) foi capaz de inibir a catalase, um dos fatores de virulência do S. aureus (ATCC 43300) avaliados. Portanto, podemos concluir que os resultados desse estudo evidenciaram o potencial antibacteriano promissor das substâncias gutiferona E e oblongifolina, podendo ser utilizados no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para combater cepas multirresistentes. Palavras-chave: Bactérias multirresistentes; produtos naturais; própolis vermelha; atividade antibacteriana; atividade antivirulência. Resistance to antibacterials is also linked to the existence of genes contained in the microorganism that encode different biochemical mechanisms that impede the action of drugs. Infections caused by these multi-resistant microorganisms are an emerging problem worldwide, and in recent years a considerable number are developing resistance to conventional antibacterials. The global result of the emergence of human pathogens exhibiting multi-drug resistance has been the search for new antimicrobial substances from other sources, including plants. Propolis has been used as a popular medicine since 300 BC, in the literature numerous biological properties have been reported. The composition of propolis varies, depending on the region and time of collection. In view of this biological potential shown by propolis, the scarcity of new antibacterials and the constant increase in multiresistant bacteria, the aim of this study was to evaluate the antibacterial, antibiofilm, synergistic and antivirulence activities of red propolis (crude extract, fractions - dichloromethane, acetate, hexane, nbutanol, and isolated substances – gutiferone E and oblongifolin) against multiresistant bacteria. For the evaluation of antimicrobial activity, the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (CBM), inhibition of biofilm formation (CIMB50), fractional inhibitory concentration index (ICIF) and antivirulence against multiresistant strain of S. aureus (ATCC 43300). The results showed a promising antibacterial activity (MIC and CBM of 31.25 and 62.5 μg/mL) for the crude extract of red propolis, against multiresistant strains of Staphylococcus spp. For the isolated substances, promising results were also found where the MIC was 12.5 μg/mL for Staphylococcus spp. The red propolis fractions did not show antibacterial activity against the panel of multiresistant bacteria evaluated. In evaluating the inhibition of biofilm formation against multiresistant bacteria, the substances gutiferone E and oblongifolin inhibited biofilms by more than 50% at concentrations between 1.56 and 6.25 μg/mL for Staphylococcus spp. In the ICIF determination assay, the isolated substances - gutiferone E and oblongifolin - combined with vancomycin, showed only an indifferent effect in these combinations against the evaluated bacteria. In the determination of antivirulence, only the substance gutiferone E (12.5 μg/mL) was able to inhibit catalase, one of the virulence factors of S. aureus (ATCC 43300) evaluated. Therefore, we can conclude that the results of this study evidenced the promising antibacterial potential of the substances gutiferone E and oblongifolin, which can be used in the development of new therapeutic strategies to combat multiresistant strains. Keywords: Multi-resistant bacteria; natural products; red propolis; antibacterial activity; antivirulence activity.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O objetivo deste estudo foi avaliar os níveis de fenóis, flavonóides totais, bem como as atividades antioxidante, genoprotetora e fotoprotetora do extrato etanólico de própolis vermelha produzido por Apis mellifera. Diferentes concentrações do extrato foram avaliadas in vitro por espectrofotometria. O efeito fotoprotetor do extrato foram avaliados in vivo em 30 ratos Wistar divididos em três grupos: Grupo I - a pele não recebeu aplicação tópica do extrato e não foi submetida à irradiação ultravioleta; Grupo II - a pele não foi submetida à aplicação tópica de extrato e foi irradiada; Grupo III - a pele foi submetida à aplicação tópica de extrato e foi irradiada. A pele foi avaliada macroscopicamente e a densidade de células inflamatórias, mastócitos, células necróticas e fibras de colágeno foram quantificados. O extrato apresentou altos teores de fenóis e flavonóides com capacidade antioxidante e genoprotetora, protegendo a pele da irradiação. No grupo II, foram observados eritemas, bolhas e crosta superficial. Não houve diferenças significativas nos valores médios da densidade de mastócitos e fibras colágenas não diferiram entre os grupos I e III. Concluiuse que o extrato etanólico da própolis vermelha exerceu efeitos genoprotetores e fotoprotetores, promovendo absorvências satisfatórias da radiação ultravioleta e foi capaz de proteger a pele das lesões induzidas pela radiação UVB. The objective of this study was to evaluate the levels of phenols, total flavonoids, as well as the antioxidant, genoprotective and photoprotective activities of the red propolis ethanolic extract produced by Apis mellifera. Different concentrations of the extract were evaluated in vitro by spectrophotometry. The photoprotective effect of the extract was evaluated in vivo in 30 Wistar rats divided into three groups: Group I - the skin received no topical application of the extract and was not submitted to ultraviolet irradiation; Group II - the skin was not subjected to topical application of extract and were irradiated; Group III - skin underwent topical application of extract and were irradiated. The skin was evaluated macroscopically and the density of inflammatory cells, mast cells, necrotic cells and collagen fibers was quantified. The extract presented high levels of phenols and flavonoids with antioxidant and genoprotective capacity, protecting the skin from irradiation. In group II, erythemas, blisters and superficial crust were observed. No significant differences in mean values of mast cell density and collagen fibers did not differ between groups I and III. It was concluded that the ethanolic extract of red propolis exerted genoprotective and photoprotective effects by promoting satisfactory absorbances of ultraviolet radiation and was able to protect the skin from lesions induced by UVB irradiation.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Atualmente um dos problemas de saúde que cada vez mais ganha destaque em escala mundial são as patologias hepáticas. Este fator contribui para que a indústria farmacêutica desenvolva novas drogas hepatoprotetoras e que sejam realizadas pesquisas testando produtos naturais que possuam potencial hepatoprotetor e que atuem deprimindo o estresse oxidativo e estimulando a proteção contra danos ao DNA. No Brasil, realiza-se várias pesquisas sobre a atividade hepatoprotetora e genoproterota de diferentes própolis de Apis mellifera, entretanto não existem estudos com a própolis vermelha produzida no semiárido do Rio Grande do Norte. Sendo assim, a presente pesquisa teve por objetivos avaliar o efeito hepatoprotetor do extrato hidroetanólico da própolis vermelha produzida pela abelha Apis mellifera, obtido junto a apicultores do semiárido do Rio Grande do Norte. Foram determinadas a composição química e atividade antioxidante da própolis da referida abelha, o potencial hepatoprotetor, através da indução da cirrose experimental em ratos; além da avaliação in vitro do potencial antineoplásico da própolis em linhagem de células de carcinoma hepático humano (HepG2), e também do potencial genoprotetor em linhagem de células normais (L929), expost s o per xido de hidrog nio H2O2). As amostras apresentaram teores de fenois totais de 74,92±0,51 a 141,07±1,27 mg GAE/100g, flavonoides de 2,42± 0,17 a 8,35±0,28 mg QE/100g e atividade antioxidante IC50 de 129,10±0,49 a 54,14±1,50 μg/ml. O extrato da própolis não apresentou citotoxicidade em células normais e apresentou efeito antigenotóxico ou genoprotetor, com percentuais de redução de genotoxicidade de 90,17% ±3,01; 71,15%±2,64 e 43,07%±2,64 respectivamente, para as concentr ções de 500, 250 e 100μl/ml do extrato. Os resultados dos níveis séricos das enzimas indicadoras de lesão hepática alanina aminotrasferase (ALT) e aspartato aminotrasferase (AST), indicaram que o extrato hidroetanólico da própolis não causou toxicidade hepática e exerceu efeito hepatoprotetor frente ao dano hepático induzido pela tioacetamida (TAA). Através da avaliação macroscópica e histológica dos fígados foi possível também sugerir que o extrato da própolis analisado exerceu efeito hepatoprotetor na gravidade da cirrose, uma vez que nos fígados dos animais do grupo tratados foi possível constatar que os nódulos regenerativos característicos da cirrose foram menores e mais discretos, quando comparados aos dos animais do grupo cirrótico. Da mesma forma, houve redução significativa do percentual de colágeno do grupo tratado em relação ao grupo cirrótico, demonstrando o efeito hepatoprotetor da própolis, o qual foi capaz de reduzir o dano aos hepatócitos, embora não tenha sido verificada diferença estatística do peso dos fígados nos referidos grupos, a análise estereológica demonstrou que houve diferença significativa no percentual de hepatócitos e de colágenos entres esses grupos. Assim, conclui-se que o extrato da própolis vermelha apresenta composição química variada e promissoras atividades farmacológicas, destacando-se a antioxidante, não citotóxica, genoprotetora e hepatoprotetora, visto que exerceu efeito hepatoprotetor mediante a lesão hepática induzida pela TAA At present, one of the health problems that is increasingly prominent worldwide is liver disease. This factor contributes to the pharmaceutical industry developing new hepatoprotective drugs and conducting research testing natural products that have potential hepatoprotective and that act to depress oxidative stress and stimulating protection against DNA damage. In Brazil, several studies on the hepatoprotective and genoproterobic activity of different propolis of Apis mellifera are carried out, however there are no studies with the red propolis produced in the semi-arid region of Rio Grande do Norte. Therefore, the present research had the objective of evaluating the hepatoprotective effect of the hydroethanolic extract of the red propolis produced by Apis mellifera bee, obtained from beekeepers in the semi - arid region of Rio Grande do Norte. The chemical composition and antioxidant activity of the bee propolis, the hepatoprotective potential, through the induction of experimental cirrhosis in rats were determined; in addition to the in vitro evaluation of the antineoplastic potential of propolis in human hepatic carcinoma cell line (HepG2), and also the potential genotype in normal cell line (L929), exposed to hydrogen peroxide (H2O2). The samples had total phenotype contents from 74.92 ± 0.51 to 141.07 ± 1.27 mg GAE / 100g, flavonoids from 2.42 ± 0.17 to 8.35 ± 0.28 mg QE / 100g and antioxidant activity IC50 of 129.10 ± 0.49 to 54.14 ± 1.50 μg / ml. The propolis extract did not present cytotoxicity in normal cells and presented antigenotoxic or genoprotective effect, with genotoxicity reduction percentages of 90.17% ± 3.01; 71.15% ± 2.64 and 43.07% ± 2.64, respectively, for the concentrations of 500, 250 and 100 μl / ml of the extract. The results of serum levels of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) hepatic enzymes indicated that the hydroethanolic extract of propolis did not cause liver toxicity and exerted a hepatoprotective effect against hepatic damage induced by thioacetamide (TAA). Through the macroscopic and histological evaluation of livers, it was also possible to suggest that the extract of the propolis analyzed exerted a hepatoprotective effect on the severity of cirrhosis, since in the livers of the animals of the treated group it was possible to verify that the regenerative nodules characteristic of cirrhosis were smaller and more discrete, when compared to the animals in the cirrhotic group. Likewise, there was a significant reduction in the percentage of collagen in the treated group compared to the cirrhotic group, demonstrating the hepatoprotective effect of propolis, which was able to reduce damage to hepatocytes, although no statistical difference was observed in livers weight in the stereological analysis showed that there was a significant difference in the percentage of hepatocytes and collagens among these groups. Thus, it is concluded that the extract of red propolis presents a varied chemical composition and promising pharmacological activities, being outstanding the antioxidant, non-cytotoxic, genoprotective and hepatoprotective, since it exerted a hepatoprotective effect through the hepatic lesion induced by TAA

Wound healing is a complex physiological process whose goal is to restore the tissue after a trauma. This area is of great interest in the development of wound dressings through the association of biomaterials with natural active principles. In this work we characterized the red propolis ethanolic extract (RP), optimized the development of fiber mats made of poly(ᴅ-lactic acid) (PLA) and produced fibers of PLA and poly(ethylene glycol) (PEG) blends in different proportions (w/w) (PLA:PEG 100:0, 90:10, 80:20 and 70:30) containing 16% w/w of RP by the solution blow spinning (SBS) system with the purpose of healing cutaneous wound. RP was evaluated through its antioxidant and antimicrobial activities and the fiber properties were characterized by SEM; physical-chemical by TGA, FTIR and XRD; adsorption, encapsulation efficiency and RP’s flavonoids release by UVvis; microbiological by Staphylococcus aureus growth kinetics; and immunological by cytotoxicity with different RP concentrations, oxidative stress through reactive oxygen species (ROS) and cytokine modulation. PLA solutions were dissolved in dimethylcarbonate (DMC) in 8, 10 and 12% w/v concentrations and spun at 80, 100 e 120 L.min-1. Results show that the polymeric concentration was the main factor to increase the fiber diameters statistically (p

Traditionally the cosmetics sector figures as one of the strongest segments of the national economy, where Brazil remains as the fourth largest consumer market in beauty products worldwide, behind only Japan, China and United States. After researches in two scientific articles bases, it was verified that the red propolis has chemical and biological properties of great applicability in cosmetic sector. For the present monitoring, it was used six patent search bases – one of them for national research, which allowed to verify that a greater flow of patent applications was found since 2004, most of the patentees consisting of legal entities. As conclusion, after the harmonization of the monitored data, it was found a great potential for the use of compounds using red propolis in their formula, highlighting patents under the classification A61K and that currently the Japanese and Brazilian offices are the ones with the largest number of published applications. Tradicionalmente, o setor dos cosméticos representa um dos segmentos mais fortes da economia nacional, no qual o Brasil segue como o 4º maior mercado consumidor mundial de produtos de beleza, atrás apenas do Japão, China e Estados Unidos. Depois de pesquisas em bases de artigos científicos, o estudo verificou que a própolis vermelha possui propriedades químicas e biológicas de grande aplicabilidade para o setor dos cosméticos. Neste monitoramento foram utilizadas seis bases patentárias, entre elas uma nacional, sendo possível verificar que, a partir de 2004, houve um maior fluxo de pedidos de patentes envolvendo a própolis vermelha, cuja a maioria dos titulares é pessoas jurídicas. Concluiu, depois de harmonização dos dados monitorados, que há um enorme potencial para o uso de compostos à base de própolis vermelha no ramo dos cosméticos, destacando-se as patentes sob aclassificação A61K, despontando os escritórios japonês e brasileiro como os que possuem o maior número de pedidos publicados.

Meat has important nutritional characteristics for the diet, being a source of high biological value animal protein, and containing important vitamins for the organism. Ground beef is one of the most consumed meat products, which has an increased surface area, and also a high potential for inadequate storing conditions, which reinforces the relevance of innovative technologies for its preservation, such as the use of propolis – a highly diversified product with antimicrobial and antioxidant activities, seen as a component capable of prolonging shelf life. This study evaluated the effects of the addition of Brazilian red propolis extract to ground beef as a natural antioxidant for 0, 7, 14 and 21 days of storage at a temperature of 7 ºC. The physicochemical parameters of water, protein, lipids and ash content remained stable until the 14th day of storage, while the microbiological ones presented peaks of contamination by Coliforms at 35 and 45 ºC in the same period, however, the absence of Salmonella sp/25g in the meat analyzed, made it suitable for human consumption, thus confirming the effectiveness of using red propolis extract in its conservation. La carne es un alimento que posee importantes características nutricionales para la dieta, siendo una fuente de proteína animal de alto valor biológico, poseyendo importantes vitaminas para el organismo. La carne molida es uno de los productos cárnicos más consumidos, con una mayor superficie y un alto potencial de condiciones de almacenamiento inadecuadas, lo que refuerza la relevancia de tecnologías innovadoras para la conservación de este material, como el propóleo, un producto altamente diversificado, con propiedades antimicrobianas. y actividades antioxidantes, visto como un componente capaz de prolongar la vida útil. Por tanto, se evaluaron los efectos de la adición de extracto de propóleo rojo a la carne molida de res como antioxidante natural durante 0, 7, 14 y 21 días de almacenamiento a una temperatura de 7 ºC. Los parámetros físico-químicos de contenido de agua, proteínas, lípidos y cenizas se mantuvieron estables hasta el día 14 de almacenamiento, mientras que los parámetros microbiológicos mostraron picos de contaminación por Coliformes a 35 y 45ºC en el mismo período, sin embargo, la ausencia de Salmonella sp / 25g en la carne analizada aa la hicieron apta para el consumo humano, confirmando así la eficacia del extracto de propóleo rojo en su conservación. A carne é um alimento que possui características nutricionais importantes para a dieta, tratando-se de uma fonte proteica animal de alto valor biológico, possuindo vitaminas importantes para o organismo. A carne moída é um dos produtos cárneos mais consumidos, tendo uma área de superfície aumentada e um alto potencial a condições inadequadas de armazenamento, o que reforça a relevância de tecnologias inovadoras para a conservação dessa matéria, como a própolis – um produto altamente diversificado, com atividades antimicrobianas e antioxidantes, visto como um componente capaz de prolongar a vida de prateleira. Portanto, foram avaliados os efeitos da adição de extrato de própolis vermelha à carne bovina moída como antioxidante natural durante 0, 7, 14 e 21 dias de armazenamento a uma temperatura de 7 ºC. Os parâmetros físico-químicos de teor de água, proteína, lipídeos e cinzas mantiveram-se estáveis até o 14º dia de armazenamento, já os microbiológicos, apresentaram picos de contaminação por Coliformes a 35 e 45ºC nesse mesmo período, contudo, a ausência de Salmonella sp/25g na carne analisada a tornou adequada para o consumo humano, confirmando, assim, a eficácia do uso de extrato de própolis vermelha em sua conservação.

Submitted by JOELMA NASCIMENTO (joelma_goldmann@hotmail.com) on 2019-03-27T14:15:39Z No. of bitstreams: 1 ANDRÉIA KARLA ANACLETO DE SOUSA - DISSERTAÇÃO - PPGSA - ACADÊMICO 2018.pdf: 1755883 bytes, checksum: d2e5e90185f6361d44e6a4147c9fb908 (MD5) Made available in DSpace on 2019-03-27T14:15:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANDRÉIA KARLA ANACLETO DE SOUSA - DISSERTAÇÃO - PPGSA - ACADÊMICO 2018.pdf: 1755883 bytes, checksum: d2e5e90185f6361d44e6a4147c9fb908 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 A atividade biológica de produtos naturais é reconhecida no Brasil e no mundo. Os produtos apícolas têm apresentado destaque por serem de fácil obtenção e mostrarem inúmeras propriedades farmacológicas. A própolis é uma matéria resinosa colhida por abelhas de diferentes exsudatos de plantas, com funções de selar e proteger as colmeias contra proliferação de microrganismos, dentre outras. Existem relatos sobre atividades da própolis relacionadas à ação antimicrobiana, cicatrizante, antioxidante, anti-inflamatória. Cepas de Streptococcus na cavidade oral apresentam resistência a múltiplas drogas, o que potencializa o interesse pelo uso de produtos de origem natural com propriedades farmacológicas. O objetivo do estudo foi avaliar a atividade antibacteriana do extrato hidroalcóolico da própolis vermelha sobre cepas de Streptococcus pyogenes; como também, verificar a interação do extrato da própolis vermelha em associação a antibióticos. A concentração inibitória mínima foi determinada pelo método de microdiluição em poços e serviu para avaliação das substâncias como moduladoras da resistência aos antibióticos. O ensaio de microdiluição não demonstrou atividade antimicrobiana relevante contra Streptococcus pyogenes. Na avaliação da atividade modulatória, foi observada ação sinérgica do extrato da própolis vermelha com amicacina, ciprofloxacino, oxacilina; em associação com benzilpenicilina, não houve efeito sinérgico. The biological activity of natural products is recognized in Brazil and in the world. Apiculture products have been highlighted because they are easy to obtain and show numerous pharmacological properties. Propolis is a resinous material harvested by bees of different plant exudates, with the functions of sealing and protecting hives against the proliferation of microorganisms, among others. There are reports on propolis activities related to antimicrobial, healing, antioxidant, anti-inflammatory action. Strains of Streptococcus in the oral cavity present resistance to multiple drugs, which increases the interest in the use of products of natural origin with pharmacological properties. The objective of the study was to evaluate the antibacterial activity of the hydroalcoholic extract of the red propolis on strains of Streptococcus pyogenes; as well as to verify the interaction of red propolis extract in combination with antibiotics. The minimum inhibitory concentration was determined by the microdilution method in wells and served for evaluation of the substances as modulators of resistance to antibiotics. The microdilution assay did not demonstrate relevant antimicrobial activity against Streptococcus pyogenes. In the evaluation of the modulatory activity, the synergistic action of the extract of the red propolis with amicacin, ciprofloxacin, oxacillin; in combination with benzylpenicillin, there was no synergistic effect.

Submitted by Auxiliadora Costa (aucydj@gmail.com) on 2019-04-22T18:20:28Z No. of bitstreams: 1 ROGÉRIA MÔNICA SEIXAS XAVIER DE ABREU - DISSERTAÇÃO PPGSA ACADÊMICO 2018.pdf: 2685964 bytes, checksum: 772c6b6a6c8cacc3e4a549f041a38a1e (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-22T18:20:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ROGÉRIA MÔNICA SEIXAS XAVIER DE ABREU - DISSERTAÇÃO PPGSA ACADÊMICO 2018.pdf: 2685964 bytes, checksum: 772c6b6a6c8cacc3e4a549f041a38a1e (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 A própolis vermelha é um produto resinoso popularmente consumido no Brasil, melhora a saúde e é considerado um nutraceutical. Sua origem botânica provém da Dalbergia ecastophyllum (L) Taub, conhecida popularmente como rabo-de-bugio, encontrada nos mangues e costa do mar e dos rios, nos estados de Alagoas, Paraíba, Pernambuco, Sergipe e Bahia, estados do Nordeste do Brasil. A Pseudomonas aeruginosa é um bacilo não fermentador, gram-negativo, presente em diversos ambientes naturais, como no solo, na água, em frutas e vegetais. Possui elevada resistência a antibióticos, capaz de infectar insetos, animais e seres humanos, além de necessidade nutricional mínima. O objetivo geral foi avaliar a atividade antibacteriana do extrato hidroalcoólico da própolis vermelha paraibana sobre a cepa de Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853). E específicos, determinar a concentração inibitória mínima (CIM) do extrato da própolis vermelha; verificar a interação do extrato da própolis vermelha em associação com os antibióticos amicacina, benzilpenicilina, ciprofloxacino e oxacilina. O extrato hidroalcoólico da própolis foi diluído em Twim a 80% e água destilada estéril, a concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição em placa de 96 poços. Para avaliar a atividade moduladora da ação dos antibióticos, utilizou-se a concentração subinibitória do extrato e os antibióticos em concentrações decrescentes, partindo de 1024μg/mL, diluídas sequencialmente até 16μg/mL. A análise estatística foi realizada utilizando o ANOVA. Os resultados dos testes mostraram que o extrato da própolis vermelha paraibana não possui atividade antimicrobiana clinicamente relevante para P. aeruginosa (ATCC27853), pois o valor do CIM foi ≥ 1024 μg/mL. Os antibióticos amicacina e ciprofloxacino demostraram atividade antibacteriana contra essa cepa, enquanto que a benzilpenicilina e oxacilina demonstraram não possuir este tipo de ação. Não foi observado efeito sinérgico quando associamos o extrato aos antibióticos. Mediante o fato de o extrato não ter demonstrado ação antibacteriana sobre a referida cepa da pseudomonas aeruginosa, cujos motivos não foi possível relatar, sugere-se identificar os componentes químicos da própolis vermelha paraibana, pois pode apresentar variação em virtude da sazonalidade, período de coleta, origens geográficas diferentes, presença de contaminantes, entre outros. Red propolis is a resinous product popularly consumed in Brazil, improves health and is considered a nutraceutical. Its botanical origin comes from the Dalbergia ecastophyllum (L) Taub, popularly known as the howler-tail, found in mangroves and coast of the sea and rivers, in the states of Alagoas, Paraíba, Pernambuco, Sergipe and Bahia, Northeastern Brazil . Pseudomonas aeruginosa is a gram-negative non-fermentative bacillus present in several natural environments, such as soil, water, fruits and vegetables. It has high resistance to antibiotics, capable of infecting insects, animals and humans, in addition to minimal nutritional need. The general objective was to evaluate the antibacterial activity of the hydroalcoholic extract of paraiban red propolis on the Pseudomonas aeruginosa strain (ATCC27853). And specific, to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the red propolis extract; to verify the interaction of red propolis extract in combination with the antibiotics amikacin, benzylpenicillin, ciprofloxacin and oxacillin. The hydroalcoholic extract of propolis was diluted in Twim to 80% and sterile distilled water, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by the 96-well plate microdilution method. The subinhibitory concentration of the extract and the antibiotics were used in decreasing concentrations, starting from 1024 μg / mL, diluted sequentially up to 16 μg / mL. Statistical analysis was performed using ANOVA. The results of the tests showed that the extract of paraibanic red propolis does not have clinically relevant antimicrobial activity for P. aeruginosa (ATCC27853), since the MIC value was ≥ 1024 μg / mL. The antibiotics amikacin and ciprofloxacin demonstrated antibacterial activity against this strain, while benzilpenicillin and oxacillin were shown to lack this type of action. No synergistic effect was observed when the extract was associated with antibiotics. Due to the fact that the extract did not show antibacterial action on the aforementioned pseudomonas aeruginosa strain, the reasons for which it was not possible to report, it is suggested to identify the chemical components of the red propolis of Paraiba, as it may present variation due to the seasonality, collection period , different geographic origins, presence of contaminants, among others.

The pharmacological and toxicological effects of the Ethanol extract of Brazilian Red Propolis (EPVP) from João Pessoa (Paraíba, Brazil) were studied. Thin layer chromatography was used to characterize its major compounds. In order to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) of the EPVP alone and in combination with Chlorhexidine (Clx), different in vitro antimicrobial studies were used. In carrying out the toxicological studies of the EPVP, tests of antioxidant activity and cytotoxicity were carried out using human red blood cells obtained from the Lauro Wanderley University Hospital blood bank. In the in vivo toxicity studies, the Brine Shrimp Test was performed using larvae of Artemia salina L., a microcatchus of the class Anostracea in the form of methanuplium, in addition to the chorioallantoic membrane toxicity test using fertilized chicken eggs, observing signs of vascular alteration . In the mouse assays, the Swiss species from the Thomas George / UFPB Bioternium were used and the genotoxicity and acute toxicity of the EPVP were evaluated. The antimicrobial activity experiments showed that EPVP promoted an antibacterial effect against species of the genus Streptococcus and Pseudomonas aeruginosa, with MIC ranging from 62.5 to 125 μg/mL and CBM ranging from 250 to 500 μg/mL. In the Clx association test, the substances MIC decreased by up to 16 fold, exhibiting synergism against S. mutans, S. oralis and S. salivarius. EPVP has been shown to have a potent antibiofilm effect against S. mutans, S. mitis, S. oralis and multispecies. EPVP at concentrations up to 500 μg/mL did not induce death in A. salina nor did it prove to be an irritant in the chorioallantoic membrane test in chicken eggs as it failed to promote vasoconstriction, hemorrhage or coagulation in the vascularization. In addition, EPVP induced weak hemolysis (

Orientadores: Fernando Antonio Cabral, Rodney Alexandre Ferreira Rodrigues Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Os compostos bioativos possuem propriedades químicas e físicas, tais como antioxidante e corante, que enriquecem os alimentos e influenciam na saúde. Os flavonoides são uma das principais classes de pigmentos funcionais pelas quais as indústrias de alimentos, cosmética e farmacêutica têm apresentado maior interesse. Diversos métodos de extração e de fracionamento de extratos têm sido empregados na obtenção dos compostos bioativos. Técnicas de extração e fracionamento que utilizam fluidos supercríticos, vêm se destacando por proporcionarem a obtenção seletiva de compostos bioativos com elevada qualidade, uma vez que estão incluídas no conceito de "química verde", do desenvolvimento sustentável e por serem economicamente viáveis quando comparadas aos respectivos métodos convencionais. Nos métodos convencionais, grandes quantidades de solventes orgânicos, longos tempos de processo e altas temperaturas são requeridas, o que pode promover a degradação, com perda de compostos fenólicos, de capacidade antioxidante e de cor. No campo da tecnologia supercrítica, pesquisas são desenvolvidas com o objetivo de estudar processos que venham a aumentar o rendimento de extração e o teor de compostos fenólicos nos extratos. Estuda-se alterações nas condições de processo, como na pressão e temperatura e pela adição de etanol ou de mistura etanol-água como co-solventes do dióxido de carbono supercrítico (scCO2). Para compostos de alta polaridade, o fracionamento de extratos aquosos, etanólicos e hidroalcoólicos são obtidos utilizando scCO2 como antisolvente. Neste contexto, esse trabalho visou estudar a extração com CO2 supercrítico de compostos fenólicos de Milho roxo (Zea mays L.) do Peru, de própolis verde e de própolis vermelha do Brasil usando processos em uma etapa ou processos sequenciais em várias etapas. Estudou-se também o uso do CO2 como antisolvente para fracionar extratos etanólicos e hidroalcoólicos de propolis verde e vermelha. A composição dos extratos foi avaliada quanto a Antocianinas Monoméricas Totais, Fenóis Totais, Flavonóis Totais, capacidade antioxidante por DPPH expressa em CE50 e cor avaliada pelos parâmetros do CIELAB. Todas essas análises mencionadas foram feitas por espectrofotometria. A análise de compostos específicos do milho roxo (Zea mays L.) e da própolis verde foi feita por HPLC, análises in vitro de atividade antiproliferativa foi feita para o pericarpo de milho roxo (Zea mays L.) e atividade antimicrobiana para a própolis verde. Os resultados mostraram que as extrações de milho roxo com scCO2 foram fortemente influenciadas pelo uso de co-solventes. As extrações em duas etapas sequenciais, extração com scCO2 seguida da extração com EtOH-H2O (70:30, v/v) da própolis verde e da própolis vermelha tiveram uma influência no rendimento geral de extração e sobre o conteúdo fenólico. O uso de scCO2 como antisolvente no fracionamento da própolis verde e vermelha produziu frações de extratos com altos teores de compostos fenólicos. No geral, todos os extratos demostraram ação potencial na atividade antioxidante Abstract: Bioactive compounds have chemical and physical properties, such as antioxidants and dyes, which enrich foods and influence health. Flavonoids are one of the main classes of functional pigments for which the food, cosmetic and pharmaceutical industries have shown greater interest. Several methods of extraction and fractionation of extracts have been used to obtain the bioactive compounds. Extraction and fractionation techniques using supercritical fluids have been distinguished by their selective extraction of bioactive compounds with high quality, since they are included in the concept of "green chemistry", of sustainable development and because they are economically viable when compared to the respective conventional methods. In conventional methods, large amounts of organic solvents, long process times and high temperatures are required, which can promote degradation, with loss of phenolic compounds, antioxidant capacity and color. In the field of supercritical technology, researches are developed with the objective of studying processes that increase the extraction yield and the content of phenolic compounds in the extracts. Changes in process conditions, such as pressure and temperature, and the addition of ethanol or ethanol-water mixture as co-solvents of supercritical carbon dioxide (scCO2) are studied. For high polarity compounds, the fractionation of aqueous, ethanolic and hydroalcoholic extracts are obtained using scCO2 as antisolvent. In this context, this work aimed to study the supercritical CO2 extraction of phenolic compounds of Peruvian purple maize (Zea mays L.), green propolis and Brazilian red propolis using one - step processes or sequential processes in several stages. It was also studied the use of CO2 as antisolvent to fractionate ethanolic and hydroalcoholic extracts of green and red propolis. The composition of the extracts was evaluated for Total Monomeric Anthocyanins, Total Phenols, Total Flavonols, antioxidant capacity by DPPH expressed in EC50 and color evaluated by CIELAB parameters. All such analyzes were done by spectrophotometry. The analysis of specific compounds of purple maize (Zea mays L.) and green propolis was done by HPLC, in vitro analyzes of antiproliferative activity was done for the purple maize pericarp (Zea mays L.) and antimicrobial activity for green propolis. The results showed that extractions of purple corn with scCO2 were strongly influenced by the use of co-solvents. Two-step sequential extraction, scCO2 extraction followed by EtOH-H2O extraction (70:30, v/v) of the green propolis and the red propolis had an influence on the overall extraction yield and phenolic content. The use of scCO2 as antisolvent in the fractionation of green and red propolis produced fractions of extracts with high contents of phenolic compounds. In general, all extracts showed potential action on antioxidant activity Doutorado Engenharia de Alimentos Doutora em Engenharia de Alimentos CNPQ 140286/2013-6 FAPESP

Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Débora Barbosa Vendramini Costa Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O microambiente tumoral oferece múltiplos alvos para a terapia anticâncer e o co-tratamento com medicamentos que modifiquem esse microambiente pode promover uma resposta adjuvante na quimioterapia agindo em alvos específicos. A Própolis Vermelha Brasileira apresenta uma composição química única enriquecida em isoflavonoides e a combinação entre fármacos anticâncer e extratos ou compostos derivados de própolis vermelha pode oferecer uma vantagem significativa e eficaz na sensibilização da monoterapia, superando a resistência induzida por fármacos em pacientes com câncer. Esse estudo teve como objetivo avaliar os efeitos antitumorais do extrato etanólico da própolis vermelha (EEPV) in vitro e in vivo, juntamente com sua atividade anti-inflamatória e avaliação de mecanismos de morte celular. A atividade antiproliferativa in vitro foi avaliada em diferentes linhagens celulares tumorais humanas e o aprofundamento dos mecanismos de ação in vitro foram realizados na linhagem PC-3 (adenocarcinoma prostático humano). A atividade antitumoral in vivo do EEPV foi analisada através do modelo de tumor sólido de Ehrlich em camundongos Balb / C machos, tratados por via oral com EEPV (50, 100 e 200 mg / kg) e em camundongos transgênicos para o adenocarcinoma de próstata (TRAMP) que foram tratados com EEPV (50 mg/Kg) cinco vezes por semana durante 30 dias (8 a 12 semanas de idade). A atividade anti-inflamatória foi avaliada pelo edema de orelha induzido por óleo de cróton e pelo edema de pata induzido por carragenina e por diferentes agentes (composto 48/80, bradicinina, prostaglandina E2) em camundongos Balb / C machos. A ativação de neutrófilos foi avaliada através da atividade de mieloperoxidase no modelo de edema de orelha induzido por óleo de cróton. Para o fracionamento bioguiado, o EEPV passou por diferentes métodos de fracionamento e purificação (partição líquido-líquido, coluna seca, coluna aberta com C18, HPLC preparativo, HPLC analítico e RMN), sendo que as frações obtidas em cada passo foram submetidas ao teste para avaliação da atividade antiproliferativa in vitro. O EEPV promoveu inibição do crescimento e citotoxicidade de maneira dependente da concentração, sem seletividade para um tipo tumoral, o que indica que seus efeitos são direcionados a um processo tumoral comum a diferentes tipos de tumor. A investigação do mecanismo de ação em linhagem de próstata (PC-3) revelou que o EEPV foi capaz de inibir a proliferação celular, induzindo a interrupção do ciclo celular na fase G1 e induzindo morte celular por uma combinação de apoptose e necroptose. O EEPV foi capaz de diminuir o crescimento do tumor solido de Ehrlich nas três doses testadas, e nos animais TRAMP, o EEPV retardou a progressão do adenocarcinoma prostático, reduziu a proliferação de células epiteliais, induziu apoptose e diminuiu a expressão de COX-2. Além disso, nos modelos de inflamação, o EEPV apresentou atividade dose-dependente no edema de pata induzido por carragenina, com a maior dose (200 mg / kg) inibindo a formação de edema desde as primeiras horas até o final do experimento. O pré-tratamento com EEPV (200 mg / kg) inibiu significativamente a formação de edema de pata induzida pelos compostos 48/80, bradicinina e PGE2, evidenciando seus efeitos sobre mediadores vasoativos, e a inibição da ativação de neutrófilos foi confirmada pelo edema de orelha induzido por óleo de cróton em camundongos. Por fim, através da avaliação dos dados físico-químicos e espectrométricos desse estudo foi possível o isolamento e a determinação estrutural de uma molécula inédita, que será descrita pela primeira vez na literatura. Sendo assim, as atividades antitumorais e anti-inflamatórias combinadas sugerem que o EEPV atua em múltiplas características do câncer, afetando diretamente a proliferação de células tumorais e o ambiente tumoral, possivelmente modulando a tumorigênese e a inflamação associada ao tumor Abstract: The tumor microenvironment offers multiple targets for anticancer therapy and the co-treatment with drugs that modify this environment may provide an adjuvant response to chemotherapies with specific targets. Brazilian Red Propolis presents a unique chemical composition enriched in isoflavonoids and the combination between anticancer drugs and extracts or compounds derived from red propolis could offer a significant and effective advantage in the sensitization of monotherapy, overcoming drug-induced resistance in cancer patients. The objective of this study was to evaluate the antitumor effects of the Ethanolic Extract of Red Propolis (EERP) in vitro and in vivo, together with its anti-inflammatory activity and evaluation of mechanisms of cell death. The in vitro antiproliferative activity was evaluated in different human cancer cell lines and the in vitro mechanisms of action were further explored in the PC-3 line (human prostatic adenocarcinoma). In vivo antitumor activity was analyzed by the Ehrlich solid tumor model in male Balb / C mice, orally treated with EERP (50, 100 and 200 mg / kg) and in transgenic adenocarcinoma of the prostate (TRAMP) mice who were treated with EERP (50 mg / kg) five times a week for 30 days (8 to 12 weeks of age). The anti-inflammatory activity was evaluated through carrageenan-induced paw edema and through different agents (compound 48/80, bradykinin, prostaglandin E2) in male Balb / C mice. Neutrophil activation was assessed by myeloperoxidase activity in croton oil-induced ear edema. For Bioassay-guided fractionation, EERP has gone through different fractionation and purification methods (liquid-liquid partition, dry column, C18 open column, preparative HPLC, analytical HPLC and RMN), and the fractions obtained at each step were evaluated in vitro for antiproliferative activity in cancer cell lines. EERP promoted growth inhibition and cytotoxicity in a concentration-dependent way, without selectivity for a tumor type, indicating that its effects are directed to a tumor process common among all tumor cells tested. The investigation of the mechanism of action in prostate cell line (PC-3) revealed that the EERP inhibited cell proliferation, inducing cell cycle arrest in the G1 phase and inducing cell death by a combination of apoptosis and necroptosis. EERP was able to decrease Ehrlich solid tumor growth in the three doses tested, and in TRAMP animals, EERP treatment delayed the prostatic adenocarcinoma progression, reduced epithelial cells proliferation, induced apoptosis, and decreased COX-2 expression. In the inflammation models, EERP showed dose-dependent activity in the carrageenan-induced paw edema, with the highest dose (200 mg/kg) inhibiting the formation of edema within the first hours until the end of the experiment. Pre-treatment with EERP (200 mg/kg) significantly inhibited paw edema formation induced by compound 48/80, bradykinin and PGE2, illustrating their effects on vasoactive mediators. Moreover, the inhibition of neutrophil activation was confirmed using the croton oil-induced ear edema in mice. Finally, through the evaluation of physicochemical and spectrometric data of this study it was possible for the isolation and structural determination of an unpublished molecule, which will be described for the first time in the literature. Thus, the combined antitumoral and anti-inflammatory activities suggest that EERP targets multiple hallmarks of cancer, directly affecting tumor cell proliferation and the tumor environment, modulating tumorigenesis possibly through the reduction of tumor-associated inflammation Doutorado Biologia Celular Doutora em Biologia Celular e Estrutural FAPESP 2013/24416-1

Red propolis has been deeply studied and has become a promising element in the treatment of numerous infectious diseases and in the formulation of new products with potential application in various industrial sectors. In this sense, the present study aimed to present the technological mapping through patents related to the use of red propolis, in order to verify the evolution of patent deposits. As for the methodology, the research was based on a mapping of patent deposits through the National Institute of Industrial Property (INPI) database and the European Patent Office (Espacenet), using the keywords "red propolis" in the abstract field . The data indicated deposits from 2014 to 2016, with China being the largest depositor of red propolis. It was verified that the largest deposited share was made up of individual inventors and that Brazil falls short. A própolis vermelha tem sido profundamente estudada e tem se configurado um elemento promissor no tratamento de inúmeras doenças infecciosas e na formulação de novos produtos com potencial aplicação em diversos setores industriais. Neste sentido, o presente estudo teve como objetivo apresentar o mapeamento tecnológico por meio de patentes relacionadas ao uso da própolis vermelha, com o intuito de verificar a evolução dos depósitos de patentes. Quanto à metodologia, a pesquisa baseou-se num mapeamento dos depósitos de patentes através da base de dados do Instituto Nacional de Propriedade Industrial (INPI) e do European Patent Office (Espacenet), utilizando as palavras-chave “própolis vermelha” no campo resumo. Os dados indicaram depósitos de 2014 a 2016, tendo a China como maior depositante de própolis vermelha. Verificou-se que a maior parcela depositada foi constituída por inventores individuais e que o Brasil fica aquém do seu potencial. Salvador

Orientadores: Alexandra Christine Helena Frankland Sawaya, Marcos Nogueira Eberlin Tese (doutorado) ¿ Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A própolis vermelha é um produto apícola resinoso típico dos estados do nordeste do Brasil. A composição da própolis varia bastante segundo a sua origem botânica e geográfica, e também segundo o tipo de abelha envolvida no processo de coleta. A própolis vermelha de Alagoas possui indicação de origem geográfica, embora esta resina colorida também é produzida em outras regiões do nordeste do Brasil, e possui promissoras atividades biológicas como antimicrobiana, antioxidante e citotóxica entre outras. Desta forma, foi realizado um desenho experimental com o intuito de se identificar potenciais compostos bioativos. Posteriormente foi feito o desenvolvimento do método de isolamento por cromatografia contracorrente (CCC) e o scale-up do método, obtendo-se assim frações e compostos isolados. A purificação das frações foi feita por HPLC preparativa e a identificação foi feita por espectrometria de massas de alta resolução (QTOF). Por outro lado, existem vários fatores que podem afetar a sua composição, é necessário que exista uma padronização da sua composição devido ao uso popular da própolis. Para tanto, foi desenvolvido e validado um método analítico para identificar e quantificar nove compostos presentes na própolis vermelha (formononetina, pinocembrina, liquiritigenina, isoliquiritigenina, daidzeina, biochanina A, C38H50O6, C17H18O4 e C32H27O7) sendo usados também os compostos isolados desta resina. A identificação e quantificação destas substâncias foi feita em vinte e uma amostras de própolis vermelha de Alagoas, Bahia, Paraiba e Sergipe, junto com duas amostras de Dalbergia ecastophyllym (a sua origem vegetal) de Paraiba e Brasilia, assim como dez amostras de Sergipe coletadas ao longo do ano para verificar a variabilidade da composição da própolis vermelha. A atividade antioxidante e antimicrobiana dos compostos isolados foi avaliada, assim como a ação sinérgica destes compostos. Neste trabalho foi possível desenvolver um método de isolamento por CCC, foram isolados três compostos (C38H50O6, C17H18O4 e C32H27O7). Foi desenvolvido e validado um método analítico aplicado a amostras de própolis vermelhas de diferentes estados do nordeste do Brasil, sendo observada uma variabilidade da composição nas amostras da mesma região assim como amostras de regiões diferentes. Também foi avaliada a variabilidade sazonal das amostras de Sergipe, sendo que o mês de março foi o que menor teor dos compostos avaliados apresentou. Finalmente, foi demostrado que todos os compostos testados são bioativos (formononetina, pinocembrina, liquiritigenina, isoliquiritigenina, daidzeina, biochanina A, C38H50O6, 7-o-metilvestitol e retusapurpurin A), e foi observada uma ação sinérgica deles na atividade antimicrobiana e antioxidante Abstract: Red propolis is a resinous bee product typical from the northeastern states of Brazil. Its composition varies widely depending on the botanical and geographical origin, and on the type of bee involved in the collecting process. Red propolis from Alagoas, received the mention of geographical origin indication, however this resin is also produced in other regions and it displays promising biological activities such as antimicrobial, antioxidant and cytotoxic among others. An experimental design was assessed aiming to identify the potential bioactive compounds. Then, an isolation method was developed by counter current chromatography (CCC) followed by the scale-up of the method, reaching fractions and isolated compounds. The purification of the fractions was made by preparative HPLC and the identification was performed by high-resolution mass spectrometry (QTOF). There are many variables that influence the composition of red propolis and it is necessary to standardize the composition due to the popular use of the resin. Thus, an analytical method was developed and validated to quantify nine of the substances present in red propolis (formononetin, pinocembrin, liquiritigenin, isoliquiritigenin, daidzein, biochanin A, retusapurpurin A, 7-O-methylvesitol and C38H50O6) including the ones isolated in this study. The identification and quantification method was applied to twenty samples of red propolis from Alagoas, Bahia, Paraiba and Sergipe, together with samples of Dalbergia ecastophyllym (the botanical source) from Paraiba and Brasilia, as well as ten samples collected throughout the year in Sergipe to verify the seasonal variation of the composition. The antioxidant and antimicrobial activity of the isolated compounds was evaluated as well as the synergistic action of these compounds. In this work, it was possible to develop a method for isolation of bioactive compounds by CCC and it was possible to isolate three compounds (retusapurpurin A, 7-O-methylvesitol and C38H50O6). An analytical method was developed and validated and it was applied to red propolis samples from different states of the northeastern region of Brazil, and a variation of the composition was observed in samples from the same region as well as samples from different geographical origins. The seasonal variation of red propolis from Sergipe showed that samples collected in March presented less amount of the compounds evaluated. Finally, it was demonstrated that all the tested compounds are bioactive (formononetin, pinocembrin, liquiritigenin, isoliquiritigenin, daidzein, biochanin A, retusapurpurin A, 7-O-methylvesitol and C38H50O6) and a synergic action was observed in the antimicrobial and antioxidant activities Doutorado Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde Doutora em Ciências FAPESP 2013/20313-3 CAPES

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-05T16:43:08Z No. of bitstreams: 1 Dissert_Flavia Regina Sobreira Correa.pdf: 2444095 bytes, checksum: e98a658ecb9de97036875d668140d6b5 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-05T16:43:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert_Flavia Regina Sobreira Correa.pdf: 2444095 bytes, checksum: e98a658ecb9de97036875d668140d6b5 (MD5) Previous issue date: 2016-05-06 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Propolis is a resinous substance rich in polyphenols and extensively used in alternative medicine. The same is produced by bees Apis mellifera species, in order to protect their hives against the action of other insects, many infectious agents or other external aggressors. Among the diverse species of propolis highlight the Brazilian red propolis in which the botanical origin was identified as Dalbergia ecastophyllum popularly known as monkey-tail, coming from the State of Alagoas. The propolis is rich in phenolic compounds, and various biological effects are attributed to the composition of potentially beneficial compounds to health. The objective of this study was to evaluate the effects of the polyphenols of red propolis (PPV) in the skin repair process in mice tissue repair. Swiss mice (18) mice were subjected to total excising lesions using 8 mm biopsy punch on the shaved back. The animals were treated orally with daily doses of vehicle (2% hydroalcoholic solution of ethanol control group) or 100 mg/kg of PPV (P100 group) or 200 mg/kg of PPV (P200 group). At the end of the experiment it was observed that the group treated with 100 mg / kg / polyphenol day of propolis (PPV) showed improvement in tissue repair, improves the contraction of the injury, acceleration of the inflammatory phase evidenced by lower volume density inflammatory cells (p

As formas de proteção existentes e o avanço tecnológico são de extrema importância para a sociedade. A inserção de novos produtos no mercado gera a possibilidade de desenvolvimento socioeconômico. No contexto de desenvolvimento regional, este trabalho apresenta o mapeamento tecnológico da Própolis Vermelha do estado de Alagoas - PVA , tendo como objetivo realizar um levantamento dos projetos, pesquisas e ações desenvolvidas e pedidos de depósitos de patentes. Foram realizadas pesquisas nas bases de patentes do INPI e da WIPO, e base de dados da Universidade Federal de Alagoas. Identificou-se que existem depósitos de patentes efetuados, registro de Indicação Geográfica concedido, projetos sendo executados e pesquisas em desenvolvimento relacionados ao tema, bem como produtos derivados sendo comercializados. Palavras Chave: Própolis Vermelha, Inovação, mapeamento

AGUIAR, Gisele Rocha. Estudo químico e avaliação biológica da própolis vermelha de Alagoas. 2015. 103 f. Dissertação (mestrado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. The red propolis originally from the state of Alagoas has a chemical composition rich in isoflavones and has been used as traditional popular medicine presented as an antioxidant and antiviral properties. Its relevance to this study is mainly due to the same present several biological properties, among them: antimicrobial, anti-cancer, cytotoxic and anti-tumor. In this work it was performed the study of the fixed compounds present in hexane fraction of propolis, which presented three esters: the methyl hexadecanoate (15,20%), the methyl tetracosanoate (10,40%) and the methyl octadecanoate (2,39%). Four isoflavanes were isolated from the thanolic extract (2'-hydroxy-4',7-dimethoxyisoflavane [PV-1], 2',7-dihydroxy-4'-methoxyisoflavane [PV-3],4',7-dihydroxy-2'-methoxyisoflavane [PV-4] and 2',4'-ihydroxy-7-methoxyisoflavane [PV-5]), one chalcone (2',4 ',4-trihydroxychalcone [PV-6]) and a triterpene (lup-20(29)-en-3-ol [PV-2]), known in red propolis. The structural determination of substances were performed by spectroscopic methods IR, 1H NMR, 13C-BB NMR,13C NMR DEPT-135°, COSY, HSQC, HMBC and GC-MS. It was performed the determination of total phenols, using a spectrophotometer, in the ethanolic extract (EEPV), which presented a phenolic content of 133.3 ± 4.35 mg GAE / g sample, a result lower than those reported in the literature. Another test was performed on the antioxidant activity, the scavenging method using DPPH radical, both ethanolic extract and the hexane, dichloromethane, ethyl acetate and metanol fractions, with satisfactory results and higher than standart Vitamin C. Besides the antioxidant test, if was performed the inhibition of acetylcholinesterase assay by colorimetric method, of the ethanolic extract and hexane, dichloromethane, ethyl acetate and metanol fractions, that yielded positive results in almost all, regarding standart Eserine salt. A própolis vermelha oriunda do Estado de Alagoas possui uma composição química rica em isoflavonoides e tem sido usada como remédio tradicional na medicina popular por apresentar propriedades antioxidante e antiviral. Sua relevância decorre, principalmente, por apresentar diversas propriedades biológicas, dentre elas: antimicrobiana, anti-cancerígena, citotóxica e antitumoral. Neste trabalho foi realizado o estudo dos compostos fixos presentes na fração hexânica da própolis, o qual apresentou três ésteres: o hexadecanoato de metila (15,20%), o tetracosanoato de metila (10,40%) e o octadecanoato de metila (2,39%). Foram isoladas do extrato etanólico quatro isoflavanas (2’-hidroxi-4’,7-dimetoxiisoflavana [PV-1], 2’,7-dihidroxi-4’-metoxiisoflavana [PV-3], 4’,7-dihidroxi-2’-metoxiisoflavana [PV-4] e 2’,4’-dihidroxi-7-metoxiisoflavana [PV-5]), uma chalcona (2’,4’,4-trihidroxichalcona [PV-6]), e um triterpeno (lup-20(29)-en-3-ol [PV-2]), já conhecidos na própolis vermelha. A determinação estrutural das substâncias foi realizada através de métodos espectroscópicos de IV, RMN de 1H, RMN de 13C-BB, RMN de 13C-DEPT 135º, COSY, HSQC, HMBC e CG-EM. Realizou-se a determinação de fenóis totais, usando espectofotômetro, no extrato etanólico (EEPV), o qual apresentou um teor de compostos fenólicos de 133,3 ± 4,35 mg de EAG/ g de amostra, resultado inferior aos relatados na literatura. Outro teste realizado foi o de atividade antioxidante, usando o método de sequestro do radical DPPH, tanto no extrato etanólico, quanto nas frações hexânica, diclorometano, acetato de etila e metanólica, apresentando resultados satisfatórios e superiores ao do padrão Vitamina C. Além deste, foi realizado o ensaio de inibição da enzima acetilcolinesterase, através de método colorimétrico, no extrato etanólico e nas frações hexânica, diclorometano, acetato de etila e metanólica, quase todos apresentando resultados positivos em relação ao padrão sal de Eserina.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Leishmania is the etiological agent of leishmaniasis. are protozoan trypanosomes genus, obligatory intracellular parasite of the phagocytic system cells mononuclear, with a flagellate form (promastigote), found in the intestinal tract of the insect vector and other intracellular aflagellate (amastigote). In leishmaniasis chemotherapy, pentavalent antimonial are used as first choice drugs. Other drugs such as pentamidine and amphotericin B have been used as alternative drugs. However, these drugs require parenteral administration in the long-term and exhibit serious side effects. Thus, the high toxicity, costs and associated resistance treatments available make it increasingly a search for new substances which can be used in therapy, especially those obtained from natural sources. The objective of this study was to evaluate the chemical profile and the leishmanicide effect in vitro red propolis extracts and Dalbergia ecastophyllum in promastigotes forms of Leishmania chagasi and Leishmania amazonensis. Red Propolis samples and Dalbergia ecastophyllum were collected in the low São Francisco River in Sergipe state, Brazil. The chemical characterization of hydroethanolic extract of propolis was made by Reverse Phase High-performance liquid chromatography (HPLC-FR). Leishmanicidal effect of red propolis extracts and D. ecastophyllum were made in promastigotes of Leishmania chagasi and Leishmania amazonensis by using the Alamar Blue staining method. The cytotoxicity of the propolis extract was evaluated in human macrophages J774 line using the MTT method. By chemical analysis could be identified in red propolis extracts the following phenolic compounds: Vanillic Acid, Ferulic Acid, Rutin, Isoliquiritigenin, Formononetin and Biochanin A, whereas the D. ecastophyllum extract were identified: vanillic acid, Isoliquiritigenin, Formononetin and Biochanin A. As the viability assessment, the obtained ICs50 for red propolis were: 21.54 μg/mL for L. chagasi and 9.73μg/mL for L. amazonensis. For the extract of D. ecastophyllum the ICs50 obtained were 70.47 μg/mL for L. chagasi and 53.42 μg/mL for L. amazonensis. The CC50 of propolis extract in macrophages was 72.63 μg/mL. These results show that the red propolis extract of the low São Francisco has the D. ecastophyllum as botanical origin and it presents leishmanicide potential, with low toxicity. Os agentes etiológicos da leishmaniose são protozoários tripanossomatídeos do gênero Leishmania, parasito intracelular obrigatório das células do sistema fagocítico mononuclear, com uma forma flagelada (promastigota), encontrada no tubo digestivo do inseto vetor e outra aflagelada intracelular (amastigota). Na quimioterapia da leishmaniose, são utilizados os antimoniais pentavalentes como fármacos de primeira escolha. Outros medicamentos tais como pentamidina e anfotericina B, têm sido empregados como drogas alternativas. Entretanto, estas drogas necessitam de administração parenteral em longo prazo e exibem efeitos secundários graves. Logo, a elevada toxicidade, os custos e a resistência associada aos tratamentos disponíveis fazem com que seja crescente a busca por novas substâncias que possam ser utilizadas na terapia, especialmente aquelas obtidas de fontes naturais. O Objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil químico e o efeito leishmanicida in vitro de extratos da própolis vermelha e Dalbergia ecastophyllum, em formas promatigotas de Leishmania chagasi e Leishmania amazonensis. As amostras de própolis vermelha e Dalbergia ecastophyllum foram coletadas na região do baixo São Francisco em Sergipe, Brasil. A caracterização química do extrato hidroetanólico da própolis e D. ecastophyllum foi feita por Cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (CLAE-FR). A efeito leishmanicida dos extratos da própolis vermelha e da D. ecastophyllum foi feita em promastigotas de Leishmania chagasi e Leishmania amazonensis utilizando método colorimétrico com Resazurina. A citotoxicidade do extrato de própolis foi avaliada em macrófagos humanos da linhagem J774 utilizando o método do MTT. Pela análise química puderam ser identificados no extrato da própolis vermelha os seguintes compostos fenólicos: Ácido Vanílico, Ácido Ferúlico, Rutina, Isoliquiritigenina, Formononetina e Biochanina A, enquanto que no extrato de D. ecastophyllum foram identificados: ácido vanílico, Isoliquiritigenina, Formononetina e Biochanina A. Quanto a avaliação da viabilidade, as ICs50 obtidas para a própolis vermelha foram: 21,54 μg/mL para promastigotas de L. chagasi e 9,73 μg/mL para L. amazonensis. Para o extrato de D. ecastophyllum as ICs50 obtidas foram 70,47 μg/mL para L. chagasi e 53,42 μg/mL para L. amazonensis. A CC50 do extrato de própolis em macrófagos foi de 72,63 μg/mL. Tais resultados mostram que o extrato da própolis vermelha do Baixo São Francisco tem a D. ecastophyllum como origem botânica e que o mesmo apresenta potencial leishmanicida, com baixa toxicidade.

Propolis is an heterogeneous mixture of substances, produced by melliferous bees from plants in close proximity with the bee´s hives. It is usually classified according to its botanical origin and chemical composition that vary according to geographical origin. Studies have shown that red propolis have physicochemical and biological properties that are diverse from other propolis types. There is a scarcety of studies with Brazilian red propolis, and no study with the red propolis from Igarassu (PE, Brazil), and thus its botanical origin, chemical characterization, and pharmacological activities have not been determined. The aim of this study was to perform a bioassay-guided fractionation of two propolis samples, collected from Igarassu, in order to determine the substances responsible for its antimicrobial, antioxidant, antileukemic and leishmanicidal activities, as well as its palynological profile. The samples of propolis were collected in Igarassu-PE, in natura, in May 2012 in two apiaries. They were submitted to palynological analyses to identify the pollen types and their frequency in the samples. Then, samples in natura were powdered, extracted with 96% ethanol and concentrated to obtain the crude ethanol extract. This extract was dissolved in a mixture of methanol:water (1:1, v/v) and partitioned with hexane and ethyl acetate, obtaining the hexane, ethyl acetate and hydroalcoholic fractions. The acetate fraction was submitted to column chromatography with Sephadex LH20 for isolation of the compounds. The propolis in natura was subjected to preliminary phytochemical screening. The ethanol extract was evaluated for identification of compounds by HPLC-MS. The propolis in natura, ethanol extract, hexane fraction, ethyl acetate and hydroalcoholic were submitted to HPLC analysis for identification and quantification of phenolic compounds. A total of 28 different pollen types belonging to 16 families and 30 genera were found in the samples. The most frequent were: Serjania and Dalbergia (sample 1 April 2011), Fabaceae 1 and Dalbergia (sample 2 April 2011), Stigmaphyllon (sample 1 and 2 May 2012). It was found the presence of flavonoids and steroids in propolis in natura. Twenty five compounds were identified in the crude ethanol extract of the samples 1 and 2. The major compounds belong to the class of flavonols, flavanas, isoflavones and prenylated benzophenones pterocarpans, demonstrating the usefulness of the technique of LC - Orbitrap - FTMS. The chemical profile of samples 1 and 2 of propolis are characterized by the presence of benzophenone. In propolis in natura, ethanol extract, hexane fraction, ethyl acetate and hydroalcoholic, we were able to identify and quantify 8 substances, 1 phenolic acid and 7 flavonoids. In the ethyl acetate fraction of sample 1 the isoflavone formononetin was isolated. It is observed that during the fractionation, starting from propolis in natura crushed to formononetin isolated substance, there was an increase in fungistatic power. It is observed that with fractionation, starting from propolis in natura to formononetin isolated substance, there was an increase in fungistatic power. Regarding antioxidant activity against DPPH radical, it was observed that all samples showed antioxidant power, with the exception of isolated formononetin. In descending order, in relation to antioxidant power, the most nonpolar samples had higher activity than polar samples. Both propolis in natura as crude ethanol extract showed strong activity against Leishmania promastigotes of L. amazonensis. The antileukemic activity on the cell line HL- 60 also increased with fractionation. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A própolis é uma mistura heterogênea de compostos e é produzida por abelhas a partir de vegetais encontrados próximos às colmeias. É classificada de acordo com a origem botânica e a composição química que pode variar entre as regiões. Estudos têm demonstrado que a própolis vermelha possui características físico-químicas e biológicas diferenciadas. No estado de Pernambuco, até o momento são poucos os trabalhos realizados com a própolis vermelha, e não há na literatura estudos com a própolis vermelha de Igarassu PE, com isso sua origem botânica, caracterização química e suas atividades farmacológicas, ainda não estão definidas. O objetivo deste estudo foi realizar um fracionamento biomonitorado de duas amostras de própolis vermelha, coletadas em Igarassu PE, a fim de determinar os compostos responsáveis pelas atividades antimicrobiana, antioxidante, antileucêmica e antileishmania, além de traçar um perfil palinológico. As amostras de própolis vermelha foram coletadas em Igarassu-PE, na forma in natura, em maio de 2012, em dois apiários. Foram submetidas à análise palinológica, para identificação dos grãos de pólen e dos tipos polínicos presentes. Em seguida, as amostras in natura foram trituradas, extraídas em etanol 96% e concentradas obtendo-se o extrato etanólico bruto seco. Esse extrato foi suspenso em uma mistura de metanol-água (1:1) e fracionado por separação líquido-líquido com hexano e acetato de etila, obtendo-se as frações hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica. A fração acetato foi refracionada em coluna de Sephadex LH-20 para isolamento dos compostos. A própolis in natura foi submetida ao screening fitoquimico preliminar. O extrato etanólico foi avaliado para identificação dos compostos por CLAE-EM. A própolis in natura, extrato etanólico, frações hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica foram submetidas a análise do perfil cromatográfico por CLAE, análise do perfil fenólico, identificação e quantificação de compostos fenólicos e avaliação das atividades farmacológicas. Nas amostras in natura, foram encontrados 28 tipos polínicos, pertencentes a 16 famílias e 30 gêneros botânicos. Os tipos polínicos que apareceram em maior frequência foram: Serjania e Dalbergia (amostra 1- abril de 2011), Fabaceae 1 e Dalbergia (amostra 2-abril de 2011), Stigmaphyllon (amostra 1 e 2-maio de 2012). Verificou-se a presença de flavonoides e esteroides na própolis in natura. Foram identificados 25 compostos no extrato etanólico bruto das amostras 1 e 2 de própolis vermelha, onde as principais substâncias identificadas pertencem à classe dos flavonols, flavanas, isoflavonas, pterocarpanos e benzofenonas preniladas, demonstrando a utilidade da técnica de LC - Orbitrap - FTMS. O perfil químico das amostras 1 e 2 de própolis vermelha são caracterizados pela presença de benzofenonas. Na própolis in natura, extrato etanólico, frações hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica, foram identificadas e quantificadas 8 substâncias, sendo 1 ácido fenólico e 7 flavonoides. Na fração acetato de etila da amostra 1, foi isolada a isoflavona formononetina. Observa-se que ao longo do fracionamento, partindo da própolis in natura triturada até a substância isolada formononetina, houve um aumento no poder fungistático. Em relação a atividade antioxidante, medida pelo método de DPPH, observou-se que todas as amostras apresentaram poder antioxidante, com exceção da substância isolada. Em ordem decrescente, em relação ao poder antioxidante, as amostras mais apolares tiveram maior atividade que as amostras polares. Tanto a própolis in natura triturada assim como o extrato etanólico bruto apresentaram forte atividade antileishmania sobre as formas promastigotas de L. amazonensis. A atividade antileucêmica também aumentou ao longo do fracionamento, sobre a linhagem celular HL-60.

Neste trabalho, foram estudadas algumas condições operacionais para extração de própolis verde em água e em solução alcoólica (etanol), e de própolis vermelha em solução alcoólica (etanol), visando ao melhor aproveitamento da própolis bruta. A própolis verde utilizada foi considerada de excelente qualidade, pois foram encontrados baixos percentuais de umidade (5,1%) e de cera (14,2%) e uma elevada concentração de flavonoides (3.500mg/100g de própolis bruta), o que lhe conferiu a classificação de própolis bruta Ultra Green. A própolis vermelha apresentou baixo teor de umidade (4,5%), mas um elevado percentual de ceras (38,4%), que, apesar de alto, é considerado comum para este tipo de própolis. A presença de formononetina na própolis vermelha foi identificada e sua concentração foi estimada após extração realizada em quatro diferentes concentrações alcoólicas (60, 70, 80, 90 °GL), sendo o melhor resultado (6,2mg/g de própolis bruta), obtido para a extração realizada em solução alcoólica 80 °GL. Por outro lado, a maior quantidade de sólidos solúveis totais (SST),69,8 g, foi obtida para a extração de própolis vermelha em solução a 90 °GL, levando a um percentual de resíduo seco igual a 8,39% e a um rendimento de extração de 46,6%. Na extração de própolis verde, as relações massa de própolis bruta/massa de solvente que levaram à obtenção das maiores quantidades de SST foram a de 35% para a extração em solução alcoólica 90 °GL e a de 15% para a extração em água. Nessas condições, foram obtidos, respectivamente, 80,64 g de SST e um percentual de resíduo seco igual a 21,0%, e 40,56 g de SST e percentual de resíduo seco igual a 6,8%. Observou-se, ainda, que a extração em dois estágios em corrente cruzada, leva a um melhor aproveitamento da própolis bruta, visto que houve um aumento na massa de SST de 60% para a própolis verde em solução alcoólica (38,62g), 54% para própolis verde em água (12,58g) e de 16% para própolis vermelha em etanol 90 °GL (11,02g). In this work, some operating conditions for the extraction of propolis in water and alcohol solution, and propolis in alcoholic solution, to maximize the use of raw propolis were studied. The propolis used was considered of excellent quality because low percentage of moisture (5.1%) and wax (4.2%) and a high concentration of flavonoids (3,500 mg/100g) were found, which will confered the rank of crude propolis Ultra Green. The propolis showed low moisture content (4.5%), but a high percentage of waxes (38.4 %), that is, although high, considered common for this type of propolis. The presence of formononetin in red propolis were identified and their concentration was estimated after for the extraction carried out in four alcohol concentrations (60, 70, 80, 90 °GL), the best result obtained (6.2 mg/g) for extraction performed at 80 °GL alcohol solution. On the other hand, the larger amount of total soluble solids (TSS) (69.8 g) was obtained for the extraction of propolis with the solution at 90 °GL, leading to an average dry matter percentage equal to 8.39% and one average extraction yield of 46.6%. The extraction of propolis in operating conditions used, the mass of crude propolis/mass of solvent that led to obtaining larger quantities of soluble solids relationships were 35% for the extraction solution in alcohol 90 °GL and 15 % for extraction in water, obtaining 80.64 g of total soluble solids (TSS) and dry matter percentage equal to 21.08%, for the extraction solution in alcohol 90 °GL, and 40.56 g of total soluble solids (TSS) and percent dry weight equal to 6.8% for extraction in water. It was observed also that the extraction conditions used in this work, with the two stage extraction in cross- current, there is a better use of raw propolis, since there was an increase in the mass of total soluble solids of 60% for green propolis alcoholic solution 54% in water for green propolis and 16% to 90 °GL alcohol solution for red propolis.

The aim was to evaluate the addition of different levels the residue of the alcoholic extract of redpropolis as an additive in diets for Nile tilapia fingerlings. We used 80 fingerlings of tilapia (Oreochromisniloticus) masculinized with initial weight of 0.11 ± 0.03 g, distributed in 20 aquariums of 15L of water ina completely randomized design with four treatments and five replications in a recirculation systemwater with constant aeration. The diets were prepared with commercial ration mashed with theaddition of (0, 0.50, 1.00 and 1.50%) of residue. The variables studied were: ultimate weight (UW),Weight gain (WG), Whole-length (WL), Standard length (SL), Length of head (LH), Index profile (IP),Index head (IH), Condition factor (CF), Width and Height. There was no positive effect (P, Objetivou-se avaliar a adição de diferentes níveis do resíduo de própolis vermelha numa raçãocomercial sobre o desempenho de alevinos de tilápia do Nilo. Foram utilizados 80 alevinos de tilápiado Nilo (Oreochromis niloticus), masculinizados, com peso médio inicial de 0,11 ±0,03g, distribuídosem 20 aquários com 15L de água, num delineamento inteiramente casualizado, com quatrotratamentos e cinco repetições, em um sistema de recirculação de água com aeração constante.As dietas foram elaboradas com rações comerciais fareladas com a adição de (0; 0,50; 1,0 e 1,5%)de resíduo de própolis vermelha. Os alevinos foram alimentados quatro vezes ao dia, às 08:00; 11:30;13:30; 15:30h. As variáveis estudadas foram: Peso final (PF), Ganho de peso (GP), Comprimento total(CTOTAL), Comprimento padrão (CPADRÃO), Comprimento de cabeça (CCAB), Índice de perfil(IPERFIL), Índice de cabeça (ICAB), fator de condição (FC), largura e altura. Não houve efeitopositivo (P

Mast cells are connective tissue cells responsible for initiating the inflammatory reaction and chronicity of the process, and play an important role in the dynamics of the repair scar. The use of natural or synthetic biological membranes in the repair of extensive dermal wounds, in turn, has been widely discussed in the literature, particularly those based on collagen, due to biocompatibility and interactivity of these materials. Propolis is a natural product that presents anti-inflammatory properties, so that it could be useful to the repair scar. The red variety of this product, however, is still less studied, although there are some reports of a probable healing action. Thus, the objective of this study was to analyze the effect of the combination of collagen membranes to red propolis on the mast cells population during repair scar by second intention in rats. For this purpose, membranes were prepared from collagen extracted from bovine tendon (10-15mm thick) containing hydroalcoholic extract of red propolis to 0.1%. Subsequently, 1cm2 standard-sized wounds were performed in th back of 30 Wistar rats, which were divided into six groups (n=5): G1- untreated animals sacrificed at 7 days; G2 – animals treated with collagen membrane sacrificed at 7 days; G3 – animals treated with collagen membrane containing red propolis sacrificed at 7 days; G4 - untreated animals sacrificed at 14 days; G5 – animals treated with collagen membrane sacrificed at 14 days; and G6 – animals treated with collagen membrane containing red propolis sacrificed at 14 days. The removed specimens were fixed, histologically processed and embedded in paraffin and histological sections were stained with toluidine blue. On the seventh day, the average population of mast cells in total and marginal G1 was significantly lower than in G2 and G3 (P

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Candidíase esofágica (CE) é uma infecção oportunista comum em hospedeiros imunossuprimidos. Devido à identificação inadequada e imprecisa, o surgimento de espécies não-C. albicans como patógenos potenciais tem sido subestimado. Assim, os objetivos deste trabalho foram isolar espécies de Candida da cavidade oral e mucosa esofágica de pacientes diagnosticados para esofagite, comparar as amostras isoladas por marcadores moleculares e avaliar in vitro e in vivo o efeito antifúngico do extrato de própolis vermelha. Um total de 1.482 pacientes com sintomas gastrointestinais foi examinado. Destes, 42 apresentaram lesões sugestivas para CE durante a endoscopia. Amostras da cavidade oral e do esôfago foram obtidas e cultivadas em Sabouraud dextrose ágar. A identificação foi realizada por métodos clássicos e moleculares. As espécies isoladas da mucosa oral e esofágica foram C. albicans, C. glabrata, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. krusei, C. guilliermondii, C. kefyr e Trichosporon inkin. O polimorfismo inter e intraespecífico dos isolados de Candida foi avaliado pela técnica de PCR com primer derivado de regiões dos espaços intergênicos (T3B), e primers microssatélites (GTG)5 e (GACA)4. O primer (GACA)4 revelou variabilidade inter e intraespecífica e nenhuma similaridade foi observada entre os isolados orais e esofágicos, demonstrando a independência na patogênese entre a candidíase oral e CE. Testes in vitro conduzidos pelo M27-A3 (CLSI) apresentaram concentrações inibitórias mínimas entre 32-512 μg ml-1 para própolis vermelha (Rp) e 0,125-16 μg ml-1 para fluconazol (Flz), respectivamente. Para realização dos testes in vivo, camundongos foram imunossuprimidos com doses diárias de dexametasona (0,5 mg/animal) por via intraperitoneal durante 14 dias, com intervalos de três dias. A infecção foi realizada, após o período de imunossupressão, com 1x108 células viáveis de C. albicans URM6285 por swab via intra-esofágica seguida pela administração intragástrica de 0,2 mL desta suspensão. Sete dias após a infecção, os camundongos foram divididos em 6 grupos (n = 5) e tratados diariamente por via oral com Flz e Rp em diferentes concentrações. O tratamento exclusivo com Rp 150 mg/kg/dia e doses combinadas com Flz:Rd em diferentes concentrações eliminou a levedura da língua e mucosa do esôfago. Este estudo destaca a possível utilização do extrato de própolis vermelha isoladamente ou em combinação com medicamentos antifúngicos comerciais para o tratamento da CE

A própolis é uma substância resinosa coletada pelas abelhas de diversas partes das plantas. Sua composição depende da época, vegetação e local de coleta. Apresenta diversas atividades biológicas como antimicrobiana, antioxidante, antitumoral, dentre outras. Foi realizado estudo da variabilidade sazonal, nos meses de fevereiro, junho e outubro de 2006, dos constituintes voláteis da própolis vermelha de Pernambuco através da extração por headspace dinâmico e identificação por cromatografia gasosa acoplada com espectrometria de massas (CG-EM). Foram identificados 34 constituintes voláteis, sendo monoterpenos e monoterpenóides, sesquiterpenos e sesquiterpenóides, fenilpropanóides, aldeídos, cetonas e η-alcanos. Os constituintes majoritários foram o trans-anetol, α-copaeno e o metil cis-isoeugenol. Também foi realizado o perfil fitoquímico por cromatografia em camada delgada (CCD), através da qual os constituintes fenólicos foram identificados como majoritários. Com o extrato bruto metanólico da própolis, realizou-se o ensaio de letalidade em Artemia salina, que demonstrou DL50 de 18,9 µg/mL, sugerindo uma possível atividade antitumoral. Propolis is a resinous hive product collected by honeybees from plant sources. The composition of the propolis depends on the season, the vegetation, and the area of collection. It presents a diverse biological activities such as antimicrobial, antioxidant and antitumoral. The seasonal variability of the red propolis constituents from Pernambuco State were accomplished in the months of February, June and October of 2006. The volatile red propolis constituients were captured by the dynamic headspace technique and analyzed by GC-MS. In the analysis of the samples, 34 constituents were identified as the mono and sesquiterpens, phenylpropanoids, aldehydes, cetons and n-alcanes, presenting as majority constituents the trans-anethol, α-copaene and methyl cis-isoeugenol. The phytochemistry profile was performed by thin layer chromatography (TLC). Through this technique the majority constituents were identified as phenols. The Brine shrimp bioassay was used to evaluate of the red propolis methanolic extract, which demonstrated a DL50 of 18.9 µg/mL and an activity antitumoral was possibly suggested.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A própolis é uma substância balsâmica de origem vegetal, coletada e transportada pelas abelhas dos ramos, flores, brotos, polém e exudatos de árvores, acrescentada de secreção salivar. Tem por objetivo proteger a colméia vedando frestas e inibindo a proliferação microbiana, tornando o interior da colméia tão asséptico quanto uma sala cirúrgica. É composta por uma infinidade de substâncias de acordo com sua origem, época de coleta e características das abelhas, sendo caracterizadas mais de 300 substâncias. É utilizada pelo homem desde a antiguidade por apresentar propriedades terapêuticas como: bactericida, fungicida, virocida, antiinflamatória, imunoestimulante, antioxidante, cicatrizante, dentre outras. As amostras de própolis brasileiras podem ser classificadas em 13 grupos, dos quais o grupo mais estudado é o da própolis verde, mais comum no sudeste e o menos estudado é o grupo da própolis vermelha, que ocorre no litoral nordeste. A ocorrência da própolis vermelha já foi citada na literatura, ocorrendo desde o litoral do Estado da Bahia até o litoral da Paraíba. O presente estudo caracterizou uma amostra de própolis do litoral de Pernambuco do ponto de vista da composição química e das atividades biológicas, bem como realizou o desenvolvimento farmacotécnico de formulações semi-sólidas, para uso vaginal. A caracterização química mostrou como constituintes voláteis majoritários os compostos trans-anetol, -copaeno e o metil cis-isoeugenol, apresentando atividade tóxica contra Artemia salina, com CL50 de 18,9 μg/mL, antioxidade, tanto no modelo in vitro, quanto in vivo, atividade antigenotóxica, assim como atividades antiinflamatória e antifúngica. O extrato hidroalcoólico se mostrou compatível em formulações de gel mucoadesivo, apresentando boas características físico-químicas. Conclue-se que, complementando-se com testes clínicos, o gel desenvolvido pode tornar-se um grande aliado no combate às vaginites inespecíficas, que acometem milhares de mulheres

A própolis é um material resinoso e balsâmico produzido pelas abelhas a partir do exudato de árvores, ramos, pólen e flores. Sua composição depende da época, vegetação e local de coleta, entre outros fatores, sendo, portanto, bastante variada. A própolis tem sido objeto de estudos farmacológicos devido às suas propriedades antibacteriana, antifúngica, antiviral, antiinflamatória, hepatoprotetora, antioxidante, antitumoral, cicatrizante, entre outras. O presente trabalho teve por objetivos a caracterização do extrato de própolis vermelha de Goiana-PE, Brasil, através da determinação dos seus constituintes voláteis por CG-EM; biomonitoramento, através da avaliação de sua toxicidade sobre Artemia salina Leach; avaliação de suas propriedades biológicas, antioxidante e cicatrizante; e desenvolvimento de gel à base do extrato, avaliando a estabilidade das preparações obtidas, bem como validando a metodologia para o doseamento de flavonóides nos géis. Através da extração por headspace dinâmico e identificação por cromatografia gasosa acoplada com espectrometria de massas (CG-EM), foram identificados 34 constituintes voláteis, tendo como constituintes majoritários o trans-anetol, α-copaeno e o metil cis-isoeugenol. O ensaio de letalidade em Artemia salina Leach demonstrou DL50 de 18,9 μg/mL, sugerindo uma possível atividade antitumoral. Quanto à atividade antioxidante, os resultados demonstraram que a própolis vermelha analisada possui atividade antioxidante, comprovada por diferentes métodos, e que tal atividade está relacionada ao seu teor de compostos fenólicos, bem como à época de sua coleta. A própolis em estudo apresentou bons resultados no estudo de cicatrização por segunda intenção em dorso de ratos, quando comparada ao padrão D-pantenol. Os resultados obtidos na validação do método analítico para doseamento de flavonóides foram tratados estatisticamente por Análise de Variância one-way (ANOVA) e teste t de Student. O método demonstrou atender aos requisitos exigidos pela legislação vigente, RE nº 899, da Agência Nacional de Vigilância Sanitária, sendo linear, exato e preciso