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Conselho Nacional do Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) O sistema plantio direto de hortaliças (SPDH) é um manejo de solo e água alternativo ao sistema convencional, no qual o plantio é feito sobre os restos culturais do cultivo anterior ou de plantas de cobertura do solo, com revolvimento desolo localizado, restrito às linhas ou berços de plantio. Dentre os benefícios doSPDH destacam-se o aumento dos teores de matéria orgânica do solo, a redução da necessidade da aplicação de agroquímicos, a proteção do solo contra a erosão, a redução da incidência das plantas invasoras e do consumo de água e o aporte denutrientes provenientes das plantas de cobertura. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da implantação do sistema plantio direto de hortaliças nos atributos químicos, físicos e biológicos do solo na região Sudoeste Paranaense.Para isso, foram conduzidos dois experimentos de implantação de SPDH, sendo um em Coronel Vivida e outro em Pato Branco, ambos no estado do Paraná. Em Coronel Vivida foram testados seis consórcios de cobertura de inverno mais uma testemunha (plantio sem cobertura de solo) no plantio direto de brócolis e couve-florem sucessão ao milho verde. Já no experimento em Pato Branco foram testados um tratamento com aveia preta solteira, quatro combinações de plantas de cobertura de inverno, denominadas MIX, e uma testemunha sem cobertura do solo e com manejo do solo simulando o sistema de plantio convencional de hortaliças. No experimento de Pato Branco, onde avaliou-se a produção de brócolis em função das coberturas de solo em SPDH, para as variáveis diâmetro de caule, diâmetro de cabeça e matéria fresca de cabeça observou-se diferença significativa apenas para as plantas cultivadas nas parcelas testemunhas (plantio com manejo convencional do solo). Na avaliação dos atributos químicos, a utilização das plantas de cobertura e a deposição de seus resíduos no SPDH proporcionou acréscimo do teor de matéria orgânica no segundo ano de cultivo no experimento em Pato Branco. Observou-semaior porosidade do solo, em Pato Branco, quando comparado com o tempo zero(momento antes da implantação do experimento). Também no experimento em Pato Branco a atividade biológica nas parcelas cultivadas com plantas de cobertura antecedendo o cultivo de brócolis foi superior quando comparada com a testemunha.Em Coronel Vivida não foram observadas diferenças significativas para os atributos quimicos, físicos e biológicos do solo na implantação do SPDH. The no-till vegetable system (SPDH) is an alternative soil and water management tothe conventional system, in which planting is done on the cultural remains of theprevious crop or on ground cover plants, with localized soil tillage, restricted to rowsor planting holes. Among the benefits of the SPDH, we highlight the increase in soilorganic matter content, reduction in the need for agrochemicals application,protection of the soil against erosion, reduction in the incidence of invasive plantsand the consumption of water, and the nutrient input from cover crops. The presentwork had as objective to evaluate the effect of the implantation of the no-till vegetablesystem on the chemical, physical and biological attributes of the soil in the Southwestregion of Paraná. Regarding this purpose, two SPDH implantation experiments wereconducted, one placed in Coronel Vivida and the other in Pato Branco, both in theParaná state. In Coronel Vivida, six winter cover intercropping plus planting withoutsoil cover were tested in the direct planting of broccoli and cauliflower in successionto green corn. During the experiment in Pato Branco, a treatment with single blackoat, four units of winter cover crops, called MIX, and a control without soil cover andwith soil management, simulating the conventional vegetable planting system, weretested. In the experiment in Pato Branco, in which the broccoli production wasevaluated as a function of soil cover in SPDH, for the stem diameter, head diameterand fresh matter head variables, a difference was observed only for cultivated plantsin the controlled checked plots (planting with conventional soil management). In theevaluation of chemical attributes, the cover crops usage and the deposition of theirnon-SPDH residues provided an increase in the organic matter content in the secondyear of cultivation in the Pato Branco experiment. Greater soil porosity was observedin Pato Branco, when compared to time zero (the moment before the implementationof the experiment). Also, in the Pato Branco experiment, the biological activity in plotscultivated with cover crops prior to broccoli cultivation was higher when comparedwith the control. In Coronel Vivida no differences were observed for the chemical,physical and biological attributes of the soil with the SPDH implementation.

Orientador: Marcos José Salvador Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: As plantas e os micro-organismos estão entre os recursos naturais que apresentam considerável importância para a busca de novos metabólitos bioativos. Plantas da família Gesneriaceae são uma interessante fonte de metabólitos secundários com diversidade em termos químicos e relatos de algumas moléculas com atividades antioxidante, anti-inflamatória, analgésica e anticâncer. No entanto, poucas espécies de Sinningia Nees (Gesneriaceae) foram quimicamente estudadas, não sendo conhecida a diversidade de endofíticos a elas associada e o impacto desses micro-organismos na biossíntese de substâncias bioativas. Portanto, é um universo químico e biológico inexplorado que precisa ser estudado, dado o potencial dessas plantas e seus simbiontes como fonte de moléculas com aplicações terapêuticas e tecnológicas. Neste contexto, este estudo objetivou avaliar as condições de cultivo, a bioatividade e o potencial metabólico de Sinningia speciosa (Lodd.) Hiern (Gesneriaceae) "grupo Fyfiana" (planta in natura, plântula in vitro e calos) e de Geosmithia sp. SSP7, endófito oriundo de suas folhas. Para tanto, procedeu-se o estabelecimento das condições de cultivo do material vegetal (planta in natura, plântulas in vitro e calos); o cultivo, a identificação morfológica e molecular de Geosmithia sp. SSP7 e a obtenção de extratos metanólicos da biomassa da planta e das culturas desse fungo, os quais foram submetidos à análises por UHPLC/ESI-MS (de alta e baixa resolução) e à avaliação das atividades antioxidante, antimicrobiana, anti-Leishmania e do efeito citotóxico. Plântulas in vitro foram obtidas tanto de sementes, quanto por via organogênese indireta em meio MS suplementado com fitorreguladores 1,0 mg/L BAP x 0,2 mg/L ANA, resultando em uma alta eficiência de regeneração após 4 semanas. Os calos foram obtidos a partir de um balanço relativamente baixo em concentração (0,05 mg/L) de BAP e de 2,4-D. Os resultados da caracterização morfológica e molecular sugerem que a cepa SSP7 pertence ao gênero Geosmithia. Em termos de produção de biomassa, o meio de cultura caldo MID foi o que melhor favoreceu o crescimento fúngico, enquanto a maior quantidade de extrato metanólico em massa (mg) foi obtida a partir do cultivo no meio CZP. Quando comparado o perfil cromatográfico do extrato metanólico da planta in natura, plântula in vitro, cultura de calos e de Geosmithia sp. SSP7, verificou-se a ocorrência de regiões com similaridade de picos cromatográficos e outras em que os picos diferiram bastante entre a amostra da planta e do fungo. Por UHPLC/ESI-MS/MS foram identificados e quantificados um glicosídeo fenólico, Calceolariosídeo B, e uma antraquinona, ¿ Pustulina 7-hidroxi-6-metoxi-tectoquinona, ambas substâncias detectadas na maioria dos extratos provenientes da planta e em co-cultura in vitro da plântula ou cultura de calos com Geosmithia sp. SSP7. Os resultados mostraram que a associação endófito-planta levou a aumento da concentração destas duas substâncias, sugerindo modulação positiva da associação simbiótica na biossíntese destas moléculas. Ainda, verificou-se que fatores como a luminosidade e balanço de fitorreguladores nas etapas de cultivo, bem como o estímulo biológico por parte de Geosmithia sp. SSP7, impactaram positivamente no desenvolvimento das culturas da planta in vitro, no teor de Calceolariosídeo B e de Pustulina e na capacidade antioxidante dos extratos estudados. Os extratos apresentaram uma capacidade antioxidante promissora, com valores ? 800 µmol TE/g. Por outro lado, não foi detectada atividade antimicrobiana e frente a promastigotas de Leishmania amazonensis (PH8) para os extratos analisados nas condições experimentais utilizadas e, também a maioria dos extratos não apresentou efeito citotóxico na viabilidade celular da linhagem proveniente de fibroblasto de embrião de camundongo 3T3 com valores de IC50 ? 250,0 µg/mL Abstract: Plants and microorganisms are among the natural resources presenting substantial importance in the search for new bioactive metabolites. Plants belonging to Gesneriaceae¿s family are an interesting source of secondary metabolites which possess a great chemical diversity and scientific reports of some bioactive molecules (antioxidant, anti-inflammatory, analgesic and anticancer activity). However, few species of Sinningia Ness (Gesneriaceae) were chemically studied, and the diversity of endophytes associated with them as well as the impact of these microorganisms on the biosynthesis of bioactive substances are unknown. Therefore, it is an unexplored chemical and biological universe that needs to be studied, given the potential of these plants and their symbionts as a source of molecules with therapeutic and technological applications. In this sense, this study aimed to evaluate the cultivation conditions, bioactivity and metabolic potential of Sinningia speciosa (Lodd.) Hiern (Gesneriaceae) "Fyfiana group", (in natura plant, in vitro seedling and callus culture) and of Geosmithia sp. SSP7, endophyte from its leaves. For this, we established the conditions for the cultivation of the plant material mentioned above, and morphological and molecular identification of the endophytic strain SSP7. Methanolic extracts of the plant biomass and the fungal cultures were obtained, which were submitted to UHPLC/ESI-MS analysis and the evaluation of antioxidant, antimicrobial, anti-Leishmania and cytotoxic activities. In vitro seedlings were obtained from both seeds and indirect organogenesis in MS medium supplemented with 1.0 mg/L BAP x 0.2 mg/L NAA phyto-regulators, resulting in a high regeneration efficiency after 4 weeks. Callus was obtained from a relatively low concentration balance (0.05 mg/L) of BAP and 2,4-D. The results of fungal morphological and molecular characterization suggest that the SSP7 strain belongs to the genus Geosmithia. In terms of biomass production, the MID broth culture medium was the one that most favored fungal growth, while the largest amount of mass methanolic extract (mg) was obtained from cultivation in CZP medium. When comparing the chromatographic profiles of the methanolic extract from in natura, in vitro seedling and callus culture with Geosmithia sp. SPP7, regions with similar chromatographic peaks and others in which peaks significantly differed between plant and fungus samples were found. Through UHPLC/ESI-MS/MS, a phenolic glycoside-Calceolarioside B and an anthraquinone-Pustuline (7-hydroxi-6-methoxy-tectoquinone) were identified and quantified. Both substances were detected in most extracts from plant and co-culture in vitro of seedling or callus culture with Geosmithia sp. SSP7. The results showed that the endophyte-plant association increased the concentration of these two substances, suggesting a positive modulation of the symbiotic association in the biosynthesis of these molecules. In addition, factors such as luminosity and phyto-regulator balance in the cultivation stages as well as biological stimulation by the Geosmithia sp. SSP7 had a positive impact on the development of the in vitro plant cultures, on Calceolarioside B and Pustuline contents, and in the antioxidant capacity of the extracts. The extracts showed a promising antioxidant capacity with values ? 800 µmol TE/g. On the other hand, antimicrobial activity and effect against Leishmania amazonensis (PH8) promastigotes for the extracts analyzed under the experimental conditions used were not detected, and most of the extracts also did not show a cytotoxic effect on cell viability of the lineage from 3T3 mouse embryo fibroblast with IC50 ? 250.0 µg/mL Mestrado Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde Mestre em Ciências CAPES 88882.435462/2019-01

Conselho Nacional do Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) A utilização de Sistemas Integrados de Produção Agropecuária, em áreas conduzidas no Sistema Plantio Direto, melhora as condições de solo, desde que ambos sejam corretamente utilizados. Caso contrário, as áreas podem apresentar problemas com compactação e concentração de nutrientes na camada superficial, comprometendo o crescimento radicular das plantas e o rendimento de grãos, especialmente em anos de déficit hídrico. Nesse contexto, o objetivo foi avaliar a dinâmica de nutrientes no perfil do solo e o desempenho agronômico da cultura da soja implantada com diferentes mecanismos sulcadores, combinado com formas de correção/condicionamento da acidez do solo, em área anteriormente pastejada no inverno. O experimento foi implantado no município de Vitorino – PR, num Latossolo Vermelho Distroférrico, em área cultivada com soja no verão e aveia preta para pastejo animal no outono-inverno. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso, em esquema bifatorial (2x4) em parcelas subdivididas, com quatro repetições. Nas parcelas principais foram utilizados dois mecanismos sulcadores na semeadura da soja (discos duplos desencontrados e hastes sulcadoras). Nas subparcelas foram aplicados quatro fatores de correção/condicionamento da acidez do solo (sem correção; dose recomendada de calcário – 1 t ha-1; dose de gesso – 2 t ha-1; mistura calcário + gesso – 3 t ha-1). A cultivar de soja utilizada foi a TMG “7262”. O solo foi caracterizado quimicamente aos seis e aos 12 meses após a aplicação dos tratamentos, em cinco profundidades. Também foram determinados parâmetros de uniformidade na semeadura, componentes de rendimento e rendimento de grãos de soja na safra 2019/2020. Foram observadas modificações no pH e nos teores de cálcio e de magnésio apenas nas camadas mais superficiais do solo e quando foi utilizado o sistema de discos duplos desencontrados em presença de calcário, sem efeitos nas camadas mais profundas, nem pelo uso do gesso, tampouco pelo uso de haste sulcadora na semeadura da soja. O uso da haste sulcadora, juntamente com o gesso ou sua mistura com calcário, aumentou o estande final de plantas de soja e a porcentagem de plântulas de soja com espaçamento normal. Apesar de maior altura de inserção da primeira vagem com o uso de discos duplos desencontrados e de maior número de grãos por planta com calcário e gesso, o rendimento de grãos não foi influenciado pela ação dos fatores mecanismos sulcadores e formas de correção/condicionamento da acidez do solo, possivelmente pela ausência de limitação hídrica durante o cultivo. The use of integrated systems of agricultural in areas under a no-tillage system improves the soil conditions as long as both are used correctly. If an inappropriate use of these systems is carried out, the areas might present problems both on soil compaction and on nutrients concentration on their superficial layer, which may harm the root growth of plants and the grain yield, especially during long periods of water deficit. Considering all the above-mentioned, the aim of the experiment was to evaluate the nutrient dynamics in soil profile and the agronomic performance of soybean crop implanted with different furrow mechanisms, combined with ways of correting and conditioning soild acidity in an area previously grazed in winter. The experiment was carried out in Vitorino, a town in the State of Paraná, on a distrophic Oxisol, in a field that was cultivated with soy in the summer and black oats for animal grazing in fall-winter. The experiment was carried out in a randomized blocks design, in a bifactorial scheme (2x4) in subdivided plots with four repetitions. In the main plots, two furrow mechanisms were used in the soybean sowing operations were allocated (mismatched double discs and hoe furrow opener). In the subplots, four ways of correcting and conditioning soil acidity were applied (without any corrections; with the recommended dose of limestone - 1 t ha-1; with the dose of gypsum - 2 t ha-1; a gypsum-limestone mixture - 3 t ha-1). The soybean cultivar tested was TMG “7262”. Also, the soil was chemically characterized twice at five different depths. The first time it was characterized six months after the treatment was applied, and on the second time, twelve months after the treatment started. Sowing uniformity parameters as well as yield components and soybean yield in the 2019/20 harvest were also determined. Small changes in pH and calcium and magnesium rates were observed only in the most superficial layers of the soil when it was prepared with the use of mismatched double disks and limestone, but it did not have any effects on deeper layers, nor by the use of gypsum, nor by the use of a hoe furrow opener in the soybean sowing. The use of the hoe furrow opener along with gypsum or its mixture with limestone increased the final stand of soybean plants and the percentage of soybean seedlings with normal spacing. Despite the greater height of insertion of the first pod with the use of mismatched double discs and a greater number of grains per plant with limestone and gypsum, the grain yield was not influenced by the action of the furrow mechanisms and the ways of correcting and conditioning soil acidity, possibly because there was no water limitation during cultivation.