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Pereira C.S., Santos L.M.M., Almeida J.F., Pereira V.L.A. & Nascimento E.R. [Mastitis Detected Throught Somatic Cell Count and Bacterial isolation in negative goats for Staphylococcus aureus.] Mastite por contagem de células somáticas e isolamento bacteriano em cabras negativas para Staphylococcus aureus. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 38(1):99-104, 2016. Programa de Pós-Graduação em Higiene Veterinária e Processamento Tecnológico de Produtos de Origem Animal, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brasil Filho, 64, Vital Brazil, Niterói, RJ 24230-340, Brasil. E-mail: camilaserva2@gmail.com A subclinical mastitis study was conducted in nine dairy goat herds in the Rio de Janeiro state to determine the occurrence of infection, detection of Staphylococcus aureus by polymerase chain reaction, evaluate microbiological and cellular profiles of the milk and associate the influence of somatic cell count (SCC) to bacterial isolation. A total of 133 raw milk sample were collected for microbiological culture, Staphylococcus aureus by polymerase chain reaction and SCC. There was bacterial growth in 64 samples (48%), among those 10 obtained isolation of two microorganisms associated. Seventy-seven isolates were found distributed in the following way: 45 (58,4%) coagulase-negative Staphylococcus, 9 (11,58%) coagulase-positive Staphylococcus e gram negative bacilli of the Enterobacteriaceae family, 5 (6,49%) Bacillus spp., 4 (5,19%) Streptococcus spp., 3 (3,89%) Enterococcus spp. e 1 (1,29%) E. coli and Serratia sp. The association of coagulase-negative Staphylococcus and Gram negative Bacilli had the largest number, with 50%, followed by 20% coagulase positive Staphylococcus + Enterococcus sp. and 10% coagulase-negative Staphylococcus + Bacillus spp., Streptococcus spp. + Bacillus spp. and Streptococcus spp. + Gram Negative Bacilli. No milk sample obtained positive for Staphylococcus aureus in culture and PCR. Mean SCC was 2.152.000 cells/ mL of milk. There was no significant association between bacterial isolation and the values obtained in somatic cell count (t-Student p > 0,05). Statistical difference was observed in SCC average of the properties studied (p, Foi realizado um estudo da mastite subclínica em nove rebanhos de cabras leiteiras localizadas no Estado do Rio de Janeiro com o objetivo de investigar a ocorrência da infecção, detecção de Staphylococcus aureus pela reação em cadeia da polimerase, avaliar o perfil microbiológico e celular do leite e associar a influência da contagem de células somáticas (CCS) ao isolamento bacteriano. Foram coletadas 133 amostras de leite de cabra in natura para a realização da análise bacteriológica, Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para Staphylococcus aureus e CCS. Houve crescimento bacteriano em 64 amostras (48%), dentre essas 10 obtiveram isolamento de dois microrganismos associados. Dos 77 isolados encontrados, 45 (58,4%) foram identificados como Staphylococcus coagulase negativa, 9 (11,58%) Staphylococcus Coagulase Positiva e bastonetes gram negativos da família das enterobactérias, 5 (6,49%) Bacillus spp., 4 (5,19%) Streptococcus spp., 3 (3,89%) Enterococcus spp. e 1 (1,29%) E. coli e Serratia sp. A associação de Staphylococcus Coagulase Negativa e Bastonete Gram Negativo apresentou o maior número, com 50%, seguido de 20% Staphylococcus Coagulase Positiva + Enterococcus sp. e 10% Staphylococcus Coagulase Negativa + Bacillus spp., Streptococcus spp. + Bacillus spp. e Streptococcus spp. + Bastonete Gram Negativo. Nenhuma amostra de leite obteve positividade para Staphylococcus aureus no cultivo e na PCR. A média de CCS foi de 2.152.000 células/mL. Não houve associação significativa entre o isolamento bacteriano e os valores obtidos na contagem de células somáticas (t-Student p > 0,05). Foi observada diferença estatística na média de CCS entre as propriedades estudadas (p< 0,05). Concluímos que o Staphylococcus Coagulase Negativa foi o grupo bacteriano isolado com maior frequência e a CCS não se correlaciona com os resultados do isolamento bacteriano, devendo ser avaliada com cautela em estudos sobre mastite subclínica em cabras.

Teixeira V.C.M., Baptista D.Q., Carlos F.C., Menezes W.R., José D.S., Barreto M.L., Abreu D.L.C., Pereira V.L.A. & Nascimento E.R. [Epidemiological situation of avian mycoplamosis in the State of Rio de Janeiro, Brazil.] Situação epidemiológica da micoplasmose aviária no Estado do Rio de Janeiro. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 37(4):379-385, 2015. Departamento de Saúde Coletiva Veterinária e Saúde Pública, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brasil, 64, Santa Rosa, Niterói, RJ 24320-340, Brasil. E-mail: petlela@hotmail.com This study was conducted to characterize the Mycoplasmosis epidemiological situation in Rio de Janeiro State. The state was divided into three regions considered significant in poultry production in the state and 252 samples of tracheal specimens were taken, using swabs dipped in 1.5ml of Frey medium and 2.5 ml of blood from 884 birds, in 47 flocks, from 11broiler chickens farms, 6 laying hens farms and 1 broiler breeders farm, of which were evaluated 334 broilers, 205 laying hens and 345 broilers breeders. The serums were subjected to Rapid Serum Agglutination (RSA) and ELISA for detection of antibodies against Mycoplasma gallisepticum (MG) and M. synoviae (MS) and the swabs used in the polymerase chain reaction (PCR) for those agents detection. Were obtained by SAR for MG and MS in the 884 birds studied, frequencies of 14.25% (126/884) and 13.68% (121/884), respectively. By ELISA, were btained 16.17% (143/884) for MG and 15.61% (138/884) for MS. According to the type of production, it was found in broilers chickens by SAR, 11.37% (38/334) for MG and 9.5% (32/334) for MS and in the ELISA, 9.28% (31/334) for MG and 9.88% (33/334) for MS. In laying chickens, the frequency of positive birds by SAR for MG and MS were in an amount of 42.92% (88/205) and 43.41% (89/205), respectively, and by ELISA, 54.63% (112/205) for MG and 49.75% (102/205) for MS. The broiler breeders shown to be negative for MG by SAR and by ELISA, but for MS, 0.86% (2/345) were positive only by ELISA. When comparing the frequencies for MG and MS in the flocks studied, by SAR, was obtained a total of positivity of 55.31% (26/47) for MG and 63.82% (30/47) for MS, and by ELISA, 51.06% (24/47) and 68.08% (32/47), respectively. For each type of production, was obtained for the broilers chickens a positivity to the SAR of 40% (10/25) for MG e 56% (14/25) for MS; and to the ELISA, 28% (7/25) e 60% (15/25) for MG and MS, respectively. In laying chickens was obtained values of 80% (16/20) for the MG and MS by SAR, whereas by ELISA, was obtained 85% (17/20) for MG and 75% (15/20) for MS. In breeders, by ELISA both two flocks studied were positive only for MS. By PCR, the total of positivity for MG and MS were in an amount of 1.19% (3/252) and 9.92% (25/252), respectively. For each type of production, were obtained 0.78% (1/127) of positive for MS in broilers chickens. In laying hens chickens, the results were 2.6% (3/115) positive for MG and 20.86% (24/115) for MS. About the broiler breeders, there was no positivity by PCR. The frequency of positives for MG and MS, by PCR, in the total of the flocks studied were, respectively, 2.12% (1/47) and 21.27% (10/47). By type of production, were not found positive flocks for MG, however, for MS was obtained 4% (1/25) in the broilers. In laying chickens, it was verifiedthat 5% (1/20) of the flocks were positive for MG and 45% (9/20) for MS. All flocks of broiler breeders were negative for MG and MS. Higher prevalence for MS were detected in the layeing hens farms than in the broilers farms and breeders farm, such as by serology as by PCR. The prevalence of MG was higher in broilers chickens than in broilers breeders. There was high positivity in laying hens, whose data was not considered because included vaccinated chickens. There were differences in the results obtained for the broilers flocks and laying hens flocks and in the positivity among the flocks, which can be attributed to differences in farm building and structures, in the ambience and manger inherent to each type of production. In this research for MG and MS in poultry production, was obtained higher frequency of positive by ELISA than by SAR, with a low agreement between the tests., Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da Micoplasmose no Estado do Rio de Janeiro, o qual foi dividido em três regiões consideradas expressivas em produção avícola no Estado. Foram realizadas coletas de 252 espécimes de traqueia, utilizando suabes imersos em 1,5ml de meio de Frey e 2,5 ml de sangue de 884 aves, em 47 lotes, provenientes de 11 propriedades de criação de frangos de corte, 6 de postura e em 1 de matrizes pesadas, das quais foram avaliados 334 frangos de corte, 205 galinhas de postura e 345 matrizes pesadas. Os soros foram submetidos à Soroaglutinação rápida (SAR) e ao ELISA para detec- ção de anticorpos contra MG e MS e os suabes utilizados na reação em cadeia pela polimerase (PCR), para detecção desses agentes. Foram obtidas à SAR para Mycoplasma gallisepticum (MG) e M. synoviae (MS) nas 884 aves estudadas, frequências de 14,25% (126/884) e 13,68% (121/884), respectivamente. Ao ELISA, foram obtidos 16,17% (143/884) para MG e 15,61% (138/884) para MS. De acordo com o tipo de produção, verificou-se nos frangos de corte pela SAR 11,37% (38/334) para MG e para MS, 9,5% (32/334) e no ELISA, 9,28%(31/334) para MG e 9,88% (33/334) para MS. Em galinhas de postura, as frequências de aves positivas à SAR para MG e MS foram de 42,92% (88/205) e 43,41% (89/205), respectivamente, e ao ELISA, 54,63% (112/205) para MG e 49,75% (102/205) para MS. As matrizes pesadas apresentaram-se negativas para MG à SAR e ao ELISA, mas para MS, 0,86% (2/345) foram positivas apenas ao ELISA. Quando comparadas as frequências para MG e para MS nos lotes estudados, à SAR, obtive-se um total de positividade de 55,31% (26/47) para MG e 63,82% (30/47) para MS, e ao ELISA, 51,06% (24/47) e 68,08% (32/47), respectivamente. Por tipos de produção, obteve-se para os frangos de corte uma positividade à SAR de 40% (10/25) para MG e 56% (14/25) para MS; e ao ELISA, 28% (7/25) e 60% (15/25) para MG e MS, respectivamente. Em galinhas de postura, obteve- -se valores de 80% (16/20) para MG e MS à SAR, enquanto que ao ELISA, obteve-se 85% (17/20) para MG e 75% (15/20) para MS. Nas matrizes, ao ELISA os dois lotes estudados foram positivos apenas para MS. À PCR, os coeficientes de positividade total das aves para MG e MS foram de 1,19% (3/252) e 9,92% (25/252), respectivamente. Por tipos de produção, foram obtidos 0,78% (1/127) de positividade para MS em frangos de corte. Nas galinhas de postura, os resultados foram 2,6% (3/115) positivos para MG e 20,86% (24/115) para MS. Quanto as matrizes, não houve positividade à PCR. A frequência de positivos para MG e MS, à PCR, no total de lotes estudados foi, respectivamente, 2,12% (1/47) e 21,27% (10/47). Por tipo de produção, não foram encontrados lotes positivos para MG, entretanto para MS obteve-se 4% (1/25) nos frangos. Na postura comercial, verificou-se que 5% (1/20) dos lotes foram positivos para MG e 45%(9/20), para MS. Todos os lotes de matrizes pesadas foram negativos para MG e MS. Foi detectada maior prevalência para MS nas criações de postura que nas criações de frangos de corte e reprodução tanto pela sorologia como pela PCR. A prevalência de MG foi maior em frangos de corte que nas matrizes pesadas. Houve alta positividade em poedeiras comerciais, não sendo considerados esses dados porque incluíam galinhas vacinadas. Houve diferença nos resultados obtidos para as criações de frangos de corte e de postura comercial e na positividade entre os lotes, o que pode ser atribuído às diferenças nas instalações, na ambiência e no manejo inerentes ao tipo de produção. Na pesquisa para MG e MS nas criações avícolas, foi obtida maior frequência de positivos ao ELISA que à SAR, com uma fraca concordância entre os testes.

Almeida D.O., Tortely R., Nascimento E.R., Khan M., Pereira V.L.A & Babapoor S. [Use of RT-PCR and elisa techniques for the diagnostic of infectious bronchitis virus in broilers at slaughter.] Uso das técnicas de RT-PCR e elisa no diagnóstico da bronquite infecciosa em frangos de corte ao abate. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 37(1):55-59, 2015. Departamento de Saúde Coletiva Veterinária e Saúde Pública, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brazil Filho, 64, Santa Rosa, Niterói, RJ 24230-340, Brasil. E-mail: elmiro@vm.uff.br Avian infectious bronchitis (IB) is a viral, acute and highly contagious disease caused by infectious bronchitis virus (IBV). The disease affects broilers improvement and performance causing major economic losses in the world poultry industry. Generally, IBV infections can be diagnosed by detection of IBV itself or the specific antibody response. This study aimed to detect IBV in broilers under Sanitary Inspection by RT-PCR and ELISA, comparing the results and relating them with the average weight of the flock. Samples were collected from 40 vaccinated broiler flocks under Sanitary Inspection at slaughter. Ten birds from every flock were randomly selected and blood samples were collected for ELISA as well three birds had their trachea and caecal tonsils collected for RT- -PCR test. From 40 flocks, 30 were IBV positive by ELISA and 26 by RT-PCR, in which 15 were detected simultaneously in trachea and caecal tonsil and 5 in each sample. There was no agreement between ELISA and RT-PCR results regarding IBV diagnosis as well positivity in both tests was not statistically significant with the average weight of the flock. There was an improvement on IBV diagnosis when caecal tonsils and tracheas were used instead of just one of them. Considering the only vaccine serotype allowed by Brazilian government is the Mass serotype and its persistence in broilers would only be detected up to 28 days, possibly the studied broilers were challenge with a field strain. A bronquite infecciosa das galinhas (BI) é uma doença viral, aguda e altamente contagiosa causada pelo vírus da bronquite infecciosa (VBI). A doença afeta os índices zootécnicos dos frangos de corte, o que gera grandes perdas econômicas na indústria avícola mundial. Em geral, as infecções peloVBI podem ser diagnosticadas pela detecção do vírus e pela resposta de anticorpos específicos. O presente trabalho teve como objetivo detectar o VBI em frangos de corte ao abate pela realização da RT-PCR e de anticorpos anti-VBI ao ELISA, comparando os resultados e relacionando-os com o peso médio dos lotes. Foram coletadas amostras de um total de 40 lotes de frangos de corte vacinados ao primeiro dia de idade em abatedouro sob Inspeção Sanitária Federal. De cada lote, 10 aves foram selecionadas para coleta de sangue para realização do ELISA e três para necropsia em que coletou-se traqueia e tonsilas cecais para a RT-PCR. Dos 40 lotes estudados, 30 foram considerados positivos (75%) para BI ao ELISA e 25 (62,5%) na RT-PCR, sendo 15 positivos detectados na traqueia e tonsilas cecais e cinco em cada um dos espécimes. Não houve concordância entre os resultados de ELISA e RT-PCR no diagnóstico da BI, assim como a relação da positividade ao ELISA e na RT-PCR com o peso médio dos frangos não foi estatisticamente significante. Houve um incremento no diagnóstico quando se utilizou simultaneamente espécimes da tonsila cecal e traqueia ao invés de somente um deles. Possivelmente os frangos ao abate foram desafiados por uma cepa de campo considerando que a cepa vacinal utilizada no Brasil (Mass) só seria detectada até os 28 dias.

Silva C.C., Brandão M.D.M., Nascimento E.R., Almeida J.F., Abreu D.L.C., Barreto M.L., Soares M.V., Machado L.S. & Pereira V.L.A. [Mycoplasma gallinarum in laying hens with respiratory disease.] Mycoplasma gallinarum em galinhas poedeiras com doença respiratória. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 36(4):347-350, 2014. Curso de Pós-Graduação de Higiene Veteriná- ria e Processamento Tecnológico de Produtos de Origem Animal, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brasil Filho, 64, Vital Brazil, Niterói, RJ 25230-340, Brasil. E-mail: catinha_cardoso@hotmail.com Mycoplasma gallisepticum (MG), M. synoviae (MS) and M. meleagridis (MM) are recognized as pathogens of indisputable concern for the Poultry Industry. These species of mycoplasms are often related to apparent or subclinical infection, causing acute or chronic disease in hens, turkeys and other birds. M. gallinarum has been considered a commensal microrganism. This case report describes the diagnosis M. gallinarum in an outbreak of respiratory disease in laying hens. It was analyzed a total of 25 birds from four flocks in two farms from Rio de Janeiro state, Brazil. The hens showed a similar clinical picture, with respiratory signs, increased mortality and decreased egg production. Necropsies were performed in some birds after euthanasia by atlanto-occipital dislocation. Gross lesions of conjunctivitis, tracheitis, aerossacculitis, perihepatitis and peritonitis were observed. In two of the flocks, the hens had also cyanosis and hepatic lesions. Tracheal swabs were collected, for PCR and isolation of mycoplasmas. For PCR, DNA extraction was done by phenol/chloroform method and generic primers for Mycoplasma spp. and specific primers for MG, MS and M. gallinarum were used A total of 25 isolates positive for Mycoplasma spp. and negative for MG and MS were subjected to growth in liquid and solid Frey´s media and seven were typing by immunoperoxidase as M. gallinarum. These isolates were confirmed as M. gallinarum by PCR specific. The absence of MG and MS and the detection of M. gallinarum in hens studied, suggested that the clinical manifestations and the lesions observed, could be related to this agent. Consequently, further evaluate of this M. gallinarum strain pathogenicity is needed. Mycoplasma gallisepticum (MG), M. synoviae (MS) e M. meleagridis (MM) são reconhecidos como patógenos de interesse indiscutível para a indústria avícola. Estas espécies de micoplasmas estão muitas vezes relacionadas à infecção aparente ou subclínica, causando doença aguda ou crônicaem galinhas, perus e outras aves. M. gallinarum tem sido considerado um microrganismo comensal. Este relato de caso descreve o diagnóstico M. gallinarum em um surto de doença respiratória em galinhas poedeiras. Um total de 25 aves de quatro lotes em duas granjas do Rio de Janeiro, Brasil foi analisado. As galinhas apresentavam um quadro clínico semelhante, com sinais respiratórios, aumento da mortalidade e diminuição da produção de ovos. Foram necropsiadas algumas galinhas, após eutanásia por deslocamento atlanto-occipital. Foram observadas lesões macroscópicas de conjuntivite, traqueíte, aerossacculite perihepatite e peritonite. Em dois dos lotes, as galinhas também tinham cianose e lesões hepáticas. Suabes de traquéia foram coletados para PCR e isolamento de micoplasmas. Para a PCR, a extração de DNA foi realizada pelo método de fenol / clorofórmio e utilizados primers genéricos para Mycoplasma spp. e específicos para o MG, MS e M. gallinarum. Um total de 25 isolados positivos para Mycoplasma spp. e negativo para MG e MS foi submetido ao crescimento em meios líquidos e sólidos Frey e sete foram tipificados por imunoperoxidase como M. gallinarum. Estes isolados foram confirmados como M. gallinarum por PCR específico. A ausência de MG e MS e a detecção de M. gallinarum nas galinhas estudadas sugere que as manifestações clínicas e as lesões observadas, podem estar relacionadas com este agente. Por conseguinte, a avaliação suplementar da patogenicidade desta cepa de M. gallinarum é necessária.

Carrijo K.F., Nascimento E.R., Pereira V.L.A., Morés N., Klein, C.S., Domingues L.M. & Tortelly R. [Diagnosis of porcine enzootic pneumonia by post mortem sanitary inspection: comparison with other diagnostic methods.] Diagnóstico da pneumonia enzoótica suína pela inspeção sanitária post mortem: comparação com outros métodos de diagnóstico. Revista Brasileira de Veterinária Brasileira 36(2):188-194, 2014. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Av. Pará, 1720, Bloco 2T, Jardim Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brasil. E-mail: keniacarrijo@ famev.ufu.br To compare the concordance of the diagnosis of porcine enzootic pneumonia (PEP) by post-mortem Sanitary Inspection with other methods (histophatology and immunohistochemistry - IHC), were used lung tissue samples from 100 pigs slaughtered under sanitary inspection, and 50 of these had macroscopic lesions suggestive of PEP and 50 had no such lesions. These were fixed in 10% buffered formalin and processed by routine procedures for paraffin embedding and IHC technique for Mycoplasma hyopneumoniae using a monoespecific polyclonal antibody. The study demonstrating that there is concordance between the diagnosis of Sanitary Inspection with histophatology, between the diagnosis of Sanitary Inspection with IHC and histophatology with IHC. It can be conclude that when the lung has gross lesions of PEP, the probability the result is positive to M. hyopneumoniae by IHC and the presence of microscopic lesions increases. Thus, the microscopic diagnosis for PEP is feasible because it is associated to the other, so that the diagnosis given by the officials of Sanitary Inspection in slaughterhouses is not wrong; the macroscopic diagnosis is therefore a valid method for the diagnosis of PEP, it being understood this is not to say that the detection of M. hyopneumoniae. Para a comparação da concordância do diagnóstico de pneumonia enzoótica suína (PES) pela Inspeção Sanitária post-mortem com outros mé- todos (histopatologia e imunohistoquímica - IHQ), foram utilizadas amostras de tecido pulmonar de 100 suínos abatidos em um matadouro-frigorífico sob inspeção sanitária, sendo que destes 50 eram portadores de lesões macroscópicas sugestivas de PES e 50 não tinham tais lesões. Estas foram conservadas em formalina 10% tamponada e submetidas às técnicas habituais para inclusão em parafina e IHQ para Mycoplasma hyopneumoniae usando-se um anticorpo policlonal monoespecífico. Foi demonstrado que há concordância entre o diagnóstico da Inspeção Sanitária com a histopatologia, entre o diagnóstico da Inspeção Sanitária com a IHQ e da histopatologia com a IHQ. Pode-se concluir que quando os pulmões tem lesões macroscópicas de PES, a probabilidade de o resultado ser positivo na IHQ para M. hyopeumoniae e a presença de lesões microscópicas aumenta. Assim, o diagnóstico macroscópico para PES é factível porque está associado aos demais, de forma que o diagnóstico conferido pelos funcionários da Inspeção Sanitária nos matadouros não está equivocado; o diagnóstico macroscópico é, portanto um método válido para o diagnóstico de PES, entendendo-se que isto não significa dizer que seja a detecção de M. hyopneumoniae.

Machado L.S., Santos F.F., Santos L.M.M., BrandãoM.D.M., Abreu D.L.C., Gouvêa R., Pereira V.L.A. & Nascimento E.R. [Detection of Mycoplasma gallisepticum in oviduct of SPF hens - Case report.] Detecção de Mycoplasma gallisepticum em oviduto de galinhas SPF - Relato de caso. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 38(1):45-48, 2016. Faculdade de Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brasil Filho, 64, Bairro Icaraí, Niterói, RJ 24230-340, Brasil. E-mail: leomachadovet@gmail.com Mycoplasma gallisepticum (MG) has horizontal transmission, by direct contact with respiratory secretions, or vertical. Serological tests such Serum Agglutination Reaction (SAR), ELISA and PCR detection by agent are among the analyzes recommended by government programs for monitoring mycoplasmosis in poultry. This study used 40 Leghorn chickens “Specific Pathogen Free” housed in farm with historically positive by MG. The chickens were monitored monthly by SAR, ELISA, from the serum of birds and PCR from tracheal swabs. At 33 weeks old, four birds were randomly selected for analyze in the necropsy. Fragments were analyzed from different parts of the oviduct (infundibulum, magnum and isthmus) by PCR. All chickens were negative for MG to the SAR, the ELISA and PCR to 33th week of age. In the PCR, the four samples of oviduct, three were positive in the infundibulum; two in the magnum; two on the isthmus; all chickens infected with at least a portion of the oviduct. MG infection was diagnosed by PCR from the oviduct of birds which were negative by conventional monitoring techniques, prior to seroconversion by PCR and trachea swabs. Hens negative for MG using PCR from tracheal swabs and serological tests showed positive PCR results for oviduct samples., Mycoplasma gallisepticum (MG) possui transmissão horizontal, mediante o contato direto com secreções respiratórias, ou vertical. Testes sorológicos como a Soroaglutinação Rápida (SAR) e ELISA e a detecção do agente por PCR estão entre as análises recomendadas por programas governamentais para o monitoramento de micoplasmoses em aves. Neste estudo foram utilizadas 40 galinhas Leghorn “Specific Pathogen Free” alojadas em instalações históricamente positivas para MG. As galinhas foram monitoradas mensalmente por SAR, ELISA, a partir do soro das aves e PCR, a partir de suabes traqueais. Na 33ª semana de idade, quatro aves foram selecionadas aleatoriamente para avaliação à necropsia. Foram analisados fragmentos de diferentes partes do oviduto (infundíbulo, magno e do istmo) por PCR. Todas as galinhas foram negativas para MG à SAR, ao ELISA e à PCR até 33ª semana de idade. À PCR, das quatro amostras de oviduto, três, foram positivas no infundíbulo; duas no magno; duas no istmo; sendo todas as galinhas infectadas em pelo menos uma parte do oviduto. Galinhas negativas para MG utilizando PCR em esfregaços de traqueia e testes sorológicos mostraram resultados positivos da PCR para amostras do oviduto.

Machado L.S., Santos F.F., Santos L.M.M., BrandãoM.D.M., Abreu D.L.C., Gouvêa R., Pereira V.L.A. & Nascimento E.R. [Detection of Mycoplasma gallisepticum in oviduct of SPF hens - Case report.] Detecção de Mycoplasma gallisepticum em oviduto de galinhas SPF - Relato de caso. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 38(1):45-48, 2016. Faculdade de Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brasil Filho, 64, Bairro Icaraí, Niterói, RJ 24230-340, Brasil. E-mail: leomachadovet@gmail.com Mycoplasma gallisepticum (MG) has horizontal transmission, by direct contact with respiratory secretions, or vertical. Serological tests such Serum Agglutination Reaction (SAR), ELISA and PCR detection by agent are among the analyzes recommended by government programs for monitoring mycoplasmosis in poultry. This study used 40 Leghorn chickens “Specific Pathogen Free” housed in farm with historically positive by MG. The chickens were monitored monthly by SAR, ELISA, from the serum of birds and PCR from tracheal swabs. At 33 weeks old, four birds were randomly selected for analyze in the necropsy. Fragments were analyzed from different parts of the oviduct (infundibulum, magnum and isthmus) by PCR. All chickens were negative for MG to the SAR, the ELISA and PCR to 33th week of age. In the PCR, the four samples of oviduct, three were positive in the infundibulum; two in the magnum; two on the isthmus; all chickens infected with at least a portion of the oviduct. MG infection was diagnosed by PCR from the oviduct of birds which were negative by conventional monitoring techniques, prior to seroconversion by PCR and trachea swabs. Hens negative for MG using PCR from tracheal swabs and serological tests showed positive PCR results for oviduct samples. Mycoplasma gallisepticum (MG) possui transmissão horizontal, mediante o contato direto com secreções respiratórias, ou vertical. Testes sorológicos como a Soroaglutinação Rápida (SAR) e ELISA e a detecção do agente por PCR estão entre as análises recomendadas por programas governamentais para o monitoramento de micoplasmoses em aves. Neste estudo foram utilizadas 40 galinhas Leghorn “Specific Pathogen Free” alojadas em instalações históricamente positivas para MG. As galinhas foram monitoradas mensalmente por SAR, ELISA, a partir do soro das aves e PCR, a partir de suabes traqueais. Na 33ª semana de idade, quatro aves foram selecionadas aleatoriamente para avaliação à necropsia. Foram analisados fragmentos de diferentes partes do oviduto (infundíbulo, magno e do istmo) por PCR. Todas as galinhas foram negativas para MG à SAR, ao ELISA e à PCR até 33ª semana de idade. À PCR, das quatro amostras de oviduto, três, foram positivas no infundíbulo; duas no magno; duas no istmo; sendo todas as galinhas infectadas em pelo menos uma parte do oviduto. Galinhas negativas para MG utilizando PCR em esfregaços de traqueia e testes sorológicos mostraram resultados positivos da PCR para amostras do oviduto.

A patogenicidade das cepas de Escherichia coli está relacionada à expressão de fatores de virulência encontrados em elementos genéticos denominados plasmídios. O patotipo APEC, responsável por diferentes tipos de doenças em aves, pode apresentar o gene iss que aumenta a resistência das cepas de E. coli aos efeitos líticos do soro, além da resistência a diversos antimicrobianos. Este estudo foi conduzido para detectar E. coli em traquéias de codornas destinadas ao abate e avaliar, pela presença do gene iss e o perfil de susceptibilidade antimicrobiana, o potencial patogênico para aves e humanos dos isolados obtidos. Foram coletadas 180 traquéias de codornas para detecção de E. coli, determinação do perfil de resistência a agentes antimicrobianos e posterior detecção, por reação em cadeia da polimerase (PCR), do gene iss. Das traquéias analisadas, 8,9 % (16/180) foram positivas para E. coli, sendo obtidos 20 isolados deste agente. A maioria dos isolados foi resistente à Tetraciclina (16/20), seguida pela Ceftazidima (13/20) e Ácido Nalidíxico (12/20), sendo apenas um resistente à Amoxicilina. A detecção do gene iss ocorreu em 55% (11/20) dos isolados. A presença do gene iss e a resistência a múltiplos antimicrobianos dos isolados obtidos neste estudo pode indicar um possível potencial patogênico das cepas de E. coli tanto para codornas quanto para outros tipos de aves e animais e mesmo para o ser humano que fique em contato com as mesmas. The pathogenicity of Escherichia coli strains is partially related to the expression of virulence factors genes, present in genetic elements called plasmids. APEC strains responsible for diseases in birds may present the iss gene which increases the resistance of E. coli strains to the lityc effect of the host's serum, besides resistance to several antimicrobials. This study was conduced in order to detect E. coli in tracheae of meat-type quails and to evaluate, by the presence of the iss gene and the profile of antimicrobial susceptibility, the pathogenic potential of the isolated samples for birds and humans. One hundred and eighty tracheae of quails were collected for detection of E. coli, antimicrobial sensitivity tests, and for polymerase chain reaction (PCR), for detection of iss gene. From the examined quails, 8.9 % (16/180) were positive for E. coli, from which 20 strains of this bacterium were obtained. Most of them were resistant to Tetracycline (16/20), followed by Ceftadizime (13/20) and Nalidixic-acid (12/20) and only one isolate was resistant to Amoxicillin. The detection of iss gene occurred in 55% (11/20) of the isolates, indicating that these strains had the potential to be pathogenic not only for quails, but also for other kinds of birds, other animals and even human beings that would be in contact with these E. coli isolates.

Mycoplasmas were searched in the ear canal flushing of 60 bovine in Brazil. The prevalence obtained was 80%. The percentages of typified species were 12.5%, for M. alkalenses; 2.1%, M. arginini; 8.35%, M. bovirhinis; 2.1%, M. bovis; 25.0%, M. conjunctivae; 14.6%, M. mycoides subsp. mycoides LC and 10.4% M. capricolum. Foram pesquisados micoplasmas no conduto auditivo de 60 bovinos no Brasil. A prevalência obtida foi de 80%. A porcentagem das espécies tipificadas foi de M. alkalenses, 12,5%; M. arginini, 2,1%; M. bovirhinis, 8,35%; M. bovis, 2,1%; M. conjunctivae, 25,0%; M. mycoides subsp. mycoides LC, 14,6% e M. capricolum, 10,4%.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Salmonella spp. é frequentemente associada a casos de infecções em humanos no mundo todo. O consumo de alimentos contaminados, destacando os produtos de origem avícola (carne e ovos), são os mais associados a esses casos. Controlar a presença de Salmonella spp. e de outros micro-organismos na produção avícola é um desafio, principalmente devido à capacidade de produzir biofilmes. Nesse contexto, a nanotecnologia, com o desenvolvimento de nanopartículas surge com novas possibilidades de controle e prevenção de contaminações. No presente trabalho objetivou-se avaliar nanopartículas de óxido de zinco dopado com prata (ZnO-Ag) no controle de micro-organismos bioindicadores, prevenção da formação de biofilmes e da passagem de Salmonella spp. para o interior de ovos de perus. Observou-se efetividade da ação biocida da nanopartícula no controle de micro-organismos indicadores (mesófilas, coliformes totais, Escherichia coli e bolores/leveduras), redução na carga contaminante de S. Enteretidis em biofilmes em cascas de ovos e inibição da formação de biofilmes de S. Heidelberg em ovos tratados com a nanopartícula previamente à contaminação com a bactéria. Também foi verificado comportamento diverso entre diferentes sorovares de Salmonella spp. para características de adesão e formação de biofilmes. Ainda foram geradas imagens, em microscopia Confocal e eletrônica de varredura, que permitiram observar características rugosa da estrutura da casca de ovos de perus e evidenciar a não interferência da nanopartícula de óxido de zinco dopada com prata na superfície das cascas dos ovos de perus. Os resultados de efetividade das nanopartículas de ZnO-Ag no controle de micro-organismos bioindicadores e de Salmonella spp., além da redução na contaminação de ovos e menor passagem de Salmonella spp. para o interior dos ovos, apresentam a nanopartícula de ZnO-Ag como potencial substância para uso na avicultura. No entanto, são necessários resultados que evidenciem a segurança toxicológica do uso da mesma e a determinação precisa de doses e concentrações efetivas. Salmonella spp. is often associated with cases of human infections worldwide. The consumption of contaminated foods, especially products of poultry origin (meat and eggs), are the most associated with these cases. Control the presence of Salmonella spp. and other microorganisms in poultry production is a challenge, mainly due to the ability to produce biofilms. In this context, nanotechnology with the development of nanoparticles appears with new possibilities of control and prevention of contaminations. The objective of this study was to evaluate silver-doped zinc oxide (ZnO-Ag) nanoparticles in the control of bioindicator microorganisms, the prevention of biofilm formation and the passage of Salmonella spp. to the inside of turkey eggs. Effect of the biocidal action of the nanoparticle on the control of indicator microorganisms (mesophiles, total coliforms, Escherichia coli and molds / yeasts), reduction of the contaminating load of S. Enteretidis on biofilms in egg shells and inhibition of biofilm formation of S. Heidelberg in eggs treated with the nanoparticle prior to contamination with the bacterium. It was also verified diverse behavior among different serovars of Salmonella spp. for adhesion characteristics and formation of biofilms. Still images were generated in Confocal microscopy and scanning electron, which allowed to observe rough characteristics of the turkey egg shell structure and to show the non - interference of silver - doped zinc oxide nanoparticle on the surface of the eggshells of turkeys. The results of the ZnO-Ag nanoparticles in the control of bioindicators and Salmonella spp., in addition to the reduction in egg contamination and lower passage of Salmonella spp. to the interior of the eggs, present the ZnO-Ag nanoparticle as a potential substance for use in poultry farming. However, results are needed to demonstrate the toxicological safety of its use and the precise determination of effective doses and concentrations. Dissertação (Mestrado)