Search

Neste trabalho foram analisados, por enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) e imunofluorescência indireta (IFI), 101 soros caninos provenientes da Região Metropolitana de Salvador, Bahia, sendo 30 soros de cães com resultado parasitológico positivo para Leishmania chagasi em cultura esplênica e 71 soros de cães clinicamente sadios. Dez soros de cães com cultivo positivo e com resultados sorológicos concordantes ou não entre os testes ELISA e IFI foram testados pela técnica de Western-Blotting (WB). Das 30 amostras de soro com resultado positivo em cultura, o ELISA detectou 27 amostras positivas e o IFI mostrou resultado positivo em 12. Das 71 amostras de soro de cães clinicamente sadios, todas apresentaram resultados negativos no ELISA e uma apresentou resultado positivo no IFI. A sensibilidade e a especificidade foram de 90% e 100% para o ELISA e 40% e 98,6% para IFI, respectivamente. O índice de concordância Kappa entre os testes foi considerado moderado (0,53), e os resultados do WB apresentaram maior concordância com o ELISA. Este estudo demonstra a possibilidade de falha no teste IFI na detecção de cães infectados e discute a sua implicação no controle da doença em áreas endêmicas. PALAVRAS-CHAVE: Cães, ELISA, IFI, Leishmania chagasi, Western-Blotting.

The sensitivities of spleen and lymph node cultures for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis were compared in 64 anti-Leishmania antibody positive dogs from an endemic area in Brazil. The sensitivity of spleen cultures for Leishmania detection was 97.9%; in lymph node cultures it was 25%. Positive spleen culture was more frequent (p = 0.048, Fisher's exact probability test) in symptomatic (28 out of 33 animals) than in asymptomatic animals (19 out of 31 animals). These results support the use of spleen instead of lymph node aspiration as the choice method for the parasitological diagnosis of the infection.

In order to verify the presence of antibodies against Trypanosoma cruzi in dogs of Barra do Pojuca, Bahia, and assess the possible occurrence of cross-reactivity or infection with Leishmania mixed sp., we tested 265 sera using ELISA and 34 using Western Blot (WB). Among the 265 sera sampled 26 (9.8%) were in the ELISA reagents for T. cruzi and of those, 12 (46.1%) were also reagents to L. chagasi, resulting in double positive antibodies by this technique. Obtained in the WB of T. cruzi 6 sera (17.6%) reagents, featuring 12 protein bands ranging from 49 to 104 kDa, 87 and 104 kDa of the higher frequency, observed in 33.3% of positive sera . In the WB of L. chagasi, 9 (26.5%) sera had 48 bands visible, ranging from 7 to 181 kDa, with of 83 kDa of the higher frequency (55.5% of the samples). Of a total of 60 bands visible, 7 (11.3 %) are common to the two agents (between 53 and 100 kDa), 6 (10 %) were viewed only in WB with antigen of T. cruzi (between 49 and 104 kDa) and the other 47 (78.3 %) were viewed only in WB with L. chagasi (between 7 and 181 kDa). Our studies point to the recognition of anti-T. Cruzi and anti-L. Chagasi in samples of serum canine of the area studied, but the techniques the ELISA and WB using crude antigen was not enough to identify with certainty and mixed reactions cross infections.Objetiva-se com este trabalho verificar a presença de anticorpos contra Trypanosoma cruzi em cães de Barra do Pojuca (BA) e também avaliar a possível ocorrência de reação cruzada ou infecção mista com Leishmania sp. Foram testados 265 soros utilizando ELISA e 34 utilizando Western Blotting (WB). Entre os soros amostrados, 26 (9,8%) foram reagentes no ELISA para T. cruzi e desses, 12 (46,1%) foram também reagentes para L. chagasi, resultando em dupla positividade sorológica por essa técnica. Obteve-se no WB de T. cruzi 6 soros (17,6%) reagentes, apresentando 12 bandas protéicas, variando de 49 a 104 kDa, sendo 87 e 104 kDa as de maior freqüência, observadas em 33,3% dos soros positivos. No WB de L. chagasi, 9 (26,5%) soros apresentaram 48 bandas variando de 7 a 181 kDa, sendo a de 83 kDa mais freqüente (55,5 % das amostras). De um total de 60 bandas visíveis, 7 (11,3%) são comuns aos dois agentes (entre 53 e 100 kDa), 6 (10 %) foram visualizadas somente no WB com antígeno de T. cruzi (entre 49 e 104 kDa) e as outras 47 (78,3 %) foram visualizadas somente no WB com L. chagasi (entre 7 e 181 kDa); 20 (58,8%) soros apresentaram divergência entre os resultados do ELISA e WB. O estudo aponta para o reconhecimento de anticorpos anti-T. cruzi e anti-L. chagasi nas amostras de soro canino da área estudada, porém as técnicas de ELISA e WB, utilizando antígeno bruto, não foram suficientes para identificar com segurança infecções mista, e reações cruzadas.

The purpose of this study was to report a description of the clinical profile of naturally infected dogs from an endemic area for Leishmania chagasi (infantum)-caused visceral leishmaniosis in Brazil, where a wide range of clinical signs are attributed to the infection in dogs. Sixty one dogs, seropositives for anti-L. chagasi antibodies by ELISA, from the urban and peri urban areas of Jequie, in Bahia State were studied. Each clinical sign of disease was recorded. Parasitological diagnosis of Leishmania infection was positive by culture of spleen aspirated samples in 21.3 % (13/61) seropositive dogs, although all of them (100%) were defined as symptomatic by physical examination. A positive statistical correlation was found between seropositivity with high levels of optical density (above 1.0) in ELISA and presence of parasites in culture of spleen aspirates (r=0.8555; p=0.00327), cutaneous disease (p=0.0402), conjunctivitis (p=0.050), enlargement of spleen (p=0.0272) and lameness (p=0.0256). A tendency of lowered red blood cell counts was also found among animals with higher seropositivity. The group of animals with positive parasitological tests presented more mucosal lesions (p=0.0106), apathy (p=0.0469), and leucocytosis with left deviation (p=0.0224). The conjunct of clinical alterations associated to positive serological or parasitological diagnosis for Leishmania chagasi infection were similar to the reported signs of disease caused by L infantum and L. donovani in Old World countries.A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma zoonose de importância em Saúde Pública, causada no Novo Mundo pela Leishmania chagasi e é associada a uma doença sistêmica crônica à qual se atribui uma gama variada de sinais clínicos. Foram examinados 61 cães, identificados como soropositivos pelo teste ELISA indireto para anticorpos anti-Leishmania, provenientes do município de Jequié, área endêmica para LVC na Bahia, tendo-se como o objetivo delinear o perfil clínico dos animais infectados. Os caninos foram submetidos ao exame físico e estudo parasitológico por cultivo do parasito em amostras de aspirado esplênico. Todos os cães foram classificados como sintomáticos, sendo 13 positivos ao exame parasitológico. Foi encontrada correlação entre os resultados positivos de cultura esplênica e a densidade óptica obtida no ELISA dos cães estudados (r=0,8555; p=0,00327) e entre os resultados de ELISA e a presença de alterações cutâneas (p=0,0402), conjuntivite (p=0,050), esplenomegalia (p=0,0272) e dificuldade de locomoção (p=0,0256), além de tendência à redução no número de hemácias nos animais. Observaram-se positividade na cultura e alterações das mucosas (p=0,0106), apatia (p=0,0469), aumento de bastonetes (p=0,0224) e leucocitose com desvio à esquerda. O conjunto de sinais clínicos encontrados mostrou-se equivalente aos sinais descritos na literatura em cães infectados por L. infantum e L. donovani nos países do velho mundo.

Neste trabalho foram analisados, por enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) e imunofluorescência indireta (IFI), 101 soros caninos provenientes da Região Metropolitana de Salvador, Bahia, sendo 30 soros de cães com resultado parasitológico positivo para Leishmania chagasi em cultura esplênica e 71 soros de cães clinicamente sadios. Dez soros de cães com cultivo positivo e com resultados sorológicos concordantes ou não entre os testes ELISA e IFI foram testados pela técnica de Western-Blotting (WB). Das 30 amostras de soro com resultado positivo em cultura, o ELISA detectou 27 amostras positivas e o IFI mostrou resultado positivo em 12. Das 71 amostras de soro de cães clinicamente sadios, todas apresentaram resultados negativos no ELISA e uma apresentou resultado positivo no IFI. A sensibilidade e a especificidade foram de 90% e 100% para o ELISA e 40% e 98,6% para IFI, respectivamente. O índice de concordância Kappa entre os testes foi considerado moderado (0,53), e os resultados do WB apresentaram maior concordância com o ELISA. Este estudo demonstra a possibilidade de falha no teste IFI na detecção de cães infectados e discute a sua implicação no controle da doença em áreas endêmicas. PALAVRAS-CHAVE: Cães, ELISA, IFI, Leishmania chagasi, Western-Blotting.