Search

Biodegradable implants are promising drug delivery systems for sustained release ocular drug delivery with the benefits such as minimum systemic side effects, constant drug concentration at the target site and getting cleared without surgical removal. Dry eye syndrome (DES) is a common disease characterized with the changes in ocular epithelia surface and results in inflammatory reaction that might lead to blindness. Cyclosporin A (CsA) is a cyclic peptide that is frequently employed for the treatment of DES and it needs to be applied several times a day in tear drops form. The aim of this study was to evaluate in vivo behavior and efficacy of the developed nano-decorated subconjunctival implant systems for sustained release CsA delivery. Biodegradable Poly--caprolactone (PCL) implant or micro-fiber implants containing CsA loaded poly-lactide-co-glycolide (85:15) (PLGA) or PCL nanoparticles were prepared in order to achieve sustained release. Two of the formulations PCL-PLGA-NP-F and PCL-PCL-NP-I were selected for in vivo evaluation based on their in vitro characteristics determined in our previous study. In this study, formulations were implanted to Swiss Albino mice with induced dry eye syndrome to investigate the ocular distribution of CsA following subconjunctival implantation and to evaluate the efficacy. Tissue distribution study indicated that CsA was present in ocular tissues such as cornea, sclera and lens even 90 days after the application and blood CsA levels were found lower than ocular tissues. Efficacy studies also showed that application of CsA-loaded fiber implant formulation resulted in faster recovery based on their staining scores.

ÖZET Bu çalışmada, şalkon ve türevlerinin tiyosemikarbazit, semikarbazit, önce hidrazin ve bunu takiben izotiyosiyanatlarla reaksiyonu sonucu antimikrobiyel ve antidepresan aktivite göstermesini beklediğimiz, 1-tiyokarbamoil-, 1-karbamoil- ve l-N-sübstitüetiyokarbamoil-3,5-difenil- 2-pirazolin yapısında 3 ü literatürde kayıtlı olan 21 bileşiğin sentezi yapılmıştır. Bileşiklerin, bazı fiziksel özellikleri, ince tabaka kromatografisinde Rf değerleri ve UV absorpsiyon özellikleri tespit edilmiş, İR, XH-NMR spektrumları ve literatürde kayıtlı olmayan bileşikler için elemanter analiz ile yapılan kanıtlanmıştır. Sentezi yapılan bileşiklerin, reaksiyon verimleri, erime dereceleri ve kristalizasyon çözücüleri aşağıdaki tabloda verilmiştir.ve 71 Tablo: Sentezi yapılan bileşiklerin reaksiyon verimleri, erime dereceleri kristal izasyon çözücüleri. 72 SUMMARY 21 1-Thiocarbamoyl-, 1 -carbamoyl- and 1 -N-substitutedthiocarba- moyl-3,5-diphenyl-2-pyrazoline derivatives which are expected to have antimicrobial and antidepressant activity have been synthesized by the reaction of chalcone and chalcone derivatives with thiosemicarbazide, semicarbazide, and hydrazine hydrate followed by isothiocyanates. 18 of these compounds were new. Some physical properties, Rf values in thin-layer chromatography and UV absorption properties of the compounds have been determined. Their structures have been proved by IR, iH-NMR spectra and - for new compounds - microanalyses. Reaction yields, melting points and crystallization solvents of the compounds are given below.73 Table : Reaction yields, melting points and crystallization solvents of the compounds. 93

6. ÖZET Bu çalışmada 2-feniletilaminin potasyum hidroksit, karbon sülfür, formaldehit ve değişik amino asitler ile reak_ s iyonundan antifungal ve antibakteryel aktivite göstereceğini beklediğimiz 3,5-disübstitüe-tetrahidro-2H-l,3,5-tiadiazin- 2-tion yapısında aşağıda gösterilen on bileşik elde edilmiş_ tir. Sentezi yapılan bileşiklerin fiziksel özellikleri, ince tabaka kromatograf isindeki R değerleri ve UV absorpsiyon özellikleri tespit edilmiş, İR, NMR spektroskopisi ve eleman analizi ile yapıları kanıtlanmıştır. SUMMARY In this study ten 3,5-disubstituted-tetrahydro-2H- 1,3,5-thiadiazine-2-thione derivatives which are expected antifungal and antibacterial activities have been synthesized by the reaction of potassium hydroxide, carbon disulfide, formaldehyde and different amino acids with 2-phenylethylamine. Physical properties, Rf values on thin layer chroma_ tography and UV absorption properties of the synthesized compounds have been determined. Structure of these compounds have been proved by IR, NMR spectroscopy and elemental analysis 73

In this study, nineteen new compounds which have 1-[2-(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)acetyl]-4-substitutedthiosemicarbazide, 3-[(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)methyl]-4-substituted-1H-1,2,4-triazole-5(4H)-thione, 2-substitutedamino-5-[(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)methyl]-1,3,4-thiadiazole and 3-[(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)methyl]-4-substituted-5-methylthio-1H-1,2,4-triazole structures were synthesized and screened for their antimicrobial activities. Starting compound, 2-(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)acetylhydrazine was obtained by the reaction of 5-chloro-2-benzoxazolinone with ethyl bromoacetate followed by hydrazine hydrate. This compound was reacted with methyl, ethyl, allyl, cyclohexyl and phenyl isothiocyanates to obtained 1-[2-(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)acetyl]-4-substituted thiosemicarbazides (Compounds 1-5). Compounds 1-5 were cyclized into 3-[(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)methyl]-4-substituted-1H-1,2,4-triazole-5(4H)-thiones (Compounds 6-10) and 2-substitutedamino-5-[(5-chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)methyl]-1,3,4-thiadiazole (Compounds 15-19) in alkaline and acidic medium respectively. 3-[(5-Chloro-2-benzoxazolinone-3-yl)methyl]-4-substituted-5-methylthio-1H-1,2,4-triazoles (Compounds 11-14) were prepared by reaction of compounds 6-10 with methyl iodide in alkali medium. The physical properties of the synthesized compounds were determined. Their structures have been elucidated by spectral methods (IR, 1H-NMR, 13C-NMR, ESI-MS) and elemental analyses. Their antimicrobial activities were investigated by microdilution method against some bacteria such as Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa and some fungi such as Candida albicans, C. krusei and C. parapsilosis. The synthesized compounds do not show strong antimicrobial activity but it has been found that antifungal activities are higher than their antibacterial activities. İÇİNDEKİLER ONAY SAYFASI iii YAYIMLAMA VE FİKRİ MÜLKİYET HAKLARI BEYANI iv ETİK BEYAN SAYFASI v TEŞEKKÜR vi ÖZET vii ABSTRACT viii İÇİNDEKİLER ix SİMGELER VE KISALTMALAR xi ŞEKİLLER xii TABLOLAR xxiv 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 4 2.1. 2-Benzoksazolinonlar 4 2.1.1. Sentez Yöntemleri 4 2.1.2. Kimyasal Özellikleri 9 2.1.3. Spektral Özellikleri 14 2.1.4. Biyolojik Özellikleri 17 2.2. Tiyosemikarbazitler 22 2.2.1. Sentez Yöntemleri 23 2.2.2. Kimyasal Özellikleri 24 2.2.3. Spektral Özellikleri 29 2.2.4.Biyolojik Özellikleri 31 2.3. 1,2,4-Triazol-5-tiyon ve 5-Alkiltiyo-1,2,4-Triazoller 34 2.3.1. Sentez Yöntemleri 35 2.3.2. Kimyasal Özellikleri 46 2.3.3. Spektral Özellikleri 51 2.3.4. Biyolojik Özellikleri 55 2.4. 1,3,4-Tiyadiazoller 75 2.4.1. Sentez Yöntemleri 75 2.4.2. Kimyasal Özellikleri 80 2.4.3. Spektral Özellikleri 84 2.4.4. Biyolojik Özellikleri 85 2.5. Antibakteriyel-Antifungal Aktivite Tayin Yöntemleri 98 2.5.1. Dilüsyon Yöntemi 98 2.5.2. Difüzyon Yöntemi 100 3. GEREÇ VE YÖNTEM 101 3.1. Kimyasal Çalışmalar 101 3.1.1. Materyal 101 3.1.2. Genel Sentez Yöntemleri 101 3.1.3. Analitik Yöntemler 103 3.2. Biyolojik Aktivite Çalışmaları 104 3.2.1. Materyal 104 3.2.2. Yöntem 105 3.2.3. Sonuçların Değerlendirilmesi 106 4. BULGULAR 107 4.1. Kimyasal Çalışmalar 107 4.2. Biyolojik Aktivite Çalışmaları 128 5. TARTIŞMA 130 6. SONUÇ VE ÖNERİLER 152 7. KAYNAKLAR 154 8. EKLER EK-1: Tez çalışması ile ilgili bildiriler 9. ÖZGEÇMİŞ Bu çalışmada, 1-[2-(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)asetil]-4-sübstitüetiyosemikarbazit, 3-[(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)metil]-4-sübstitüe-1H-1,2,4-triazol-5(4H)-tiyon, 3-[(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)metil]-4-sübstitüe-5-metiltiyo-4H-1,2,4-triazol, 2-sübstitüeamino-5-[(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il) metil]-1,3,4-tiyadiazol yapısında literatürde kayıtlı olmayan on dokuz yeni bileşiğin sentezi yapılarak bu bileşiklerin antimikrobiyal aktiviteleri incelenmiştir. Bileşiklerin sentezinde, 5-kloro-2-benzoksazolinondan hareket edilmiş ve önce etil bromoasetat, takiben hidrazin hidrat ile reaksiyona sokularak 2-(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)asetilhidrazin elde edilmiştir. Bu bileşiğin metil, etil, allil, sikloheksil ve fenil izotiyosiyanat ile reaksiyonu sonucu 1-[2-(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)asetil]-4-sübstitüetiyosemikarbazit türevlerine (Bileşik 1-5) ulaşılmıştır. Bileşik 1-5’in alkali ortamda siklizasyonu sonucu 3-[(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)metil]-4-sübstitüe-1H-1,2,4-triazol-5(4H)-tiyon (Bileşik 6-10), asidik ortamda siklizasyonu sonucu 2-sübstitüeamino-5-[(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)metil]-1,3,4-tiyadiazol türevleri (Bileşik 15-19), Bileşik 6-10’un alkali ortamda metil iyodürle reaksiyonu sonucu ise 3-[(5-kloro-2-benzoksazolinon-3-il)metil]-4-sübstitüe-5-metiltiyo-4H-1,2,4-triazoller (Bileşik 11-14) kazanılmıştır. Sentezi yapılan bileşiklerin fiziksel özellikleri belirlenmiş, yapıları IR, 1H-NMR, 13C-NMR, ESI-MS spektral yöntemleri ve eleman analizleri ile aydınlatılmış, antimikrobiyal aktiviteleri Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli ve Pseudomonas aeruginosa gibi bakteri, Candida albicans, C. krusei ve C. parapsilosis gibi mantarlara karşı mikrodilüsyon yöntemi kullanılarak incelenmiştir. Sentezi yapılan bileşiklerde kuvvetli antimikrobiyal etki göstermemekle beraber, antifungal etkilerinin antibakteriyel etkilerine kıyasla daha yüksek olduğu tespit edilmiştir.

Bu çalışmada, 1-(2-(7-metoksi-2-naftiloksi)asetil)-4-sübstitüe-3-tiyosemikarbazit, 5-((7-metoksi-2-naftiloksi)metil)-2-sübstitüeamino-1,3,4-tiyadiazol ve 3-((7-metoksi-2-naftiloksi)metil)-4-sübstitüe-1,2,4-triazol-5-tiyon yapısında 12 yeni bileşiğin sentezi yapılarak, 2-sübstitüeamino-1,3,4-tiyadiazol ve 4-sübstitüe-1,2,4-triazol-5-tiyon yapısındaki sekiz bileşiğin COX-1 and COX-2 enzimleri üzerindeki inhibitör etkileri incelenmiştir. Bileşiklerin COX-2 enzimi ile etkileşmeleri ?Molecular Operating Environment? (MOE) programı kullanılarak yorumlanmıştır. 5-((7-Metoksi-2-naftiloksi)metil)-2-sübstitüeamino-1,3,4-tiyadiazol (Bileşik 2a-d) ve 3-((7-metoksi-2-naftiloksi)metil)-4-sübstitüe-1,2,4-triazol-5-tiyon türevleri (Bileşik 3a-d) 1-(2-(7-metoksi-2-naftiloksi)asetil)-4-sübstitüe-3-tiyosemikarbazitlerin siklizasyonu ile elde edilmişlerdir. Sentezi yapılan bileşiklerin yapıları IR, 1H-NMR, 13C-NMR, kütle spektrumları ve elemental analiz ile aydınlatılmıştır. Aktivitesi incelenen bileşikler (Bileşik 2a-d ve 3a-d) COX-2 enzimi üzerinde inhibitör etki göstermekle beraber, hiçbiri standart bileşikler NS-398 ve indometazin kadar etkili değildir. Sentez edilen türevler arasında 5-((7-Metoksi-2-naftiloksi)metil)-2-etilamino-1,3,4-tiyadiazolün (Bileşik 2b) COX-2 enzimine, 3-((7- metoksi-2-naftiloksi)metil)-4-etil-1,2,4-triazol-5-tiyon ve 3-((metoksi-2-naftiloksi) metil)-4-allil-1,2,4-triazol-5-tiyonun (Bileşik 3b ve 3c) COX-1 enzimine karşı seçici olarak en aktif bileşikler olduğu gözlenmiştir. COX-2 enzimi üzerinde yapılan docking çalışmaları sonucunda, Bileşik 2b?nin her iki enzimde ortak olan hidrofobik kısımlara yerleşerek enzim ile etkileştiği ancak COX-2?ye özgü ve Val349, Tyr355, Leu359 and Leu531 tarafından oluşturulan bölgeye yerleşemedikleri gözlenmiştir. In this study, twelve 1-(7-methoxy-2-naphthyloxyacetyl)-4-subtituted-3-thiosemicarbazide, 5-(7-methoxy-2-naphthyloxymethyl)-2-substituted amino-1,3,4-thiadiazole and 3-(7-methoxy-2-naphthyloxymethyl)-4-substituted-1,2,4-triazole-5-thione derivatives have been synthesized and the compounds having 2-substitutedamino-1,3,4-thiadiazole and 4-substituted-1,2,4-triazole-5-thione structure were evaluated for inhibitory effects on COX-1 and COX-2 enzymes. The interaction between the Compound 2b and the COX-2 enzyme was interpreted by using ?Molecular Operating Environment? MOE program.5-(7-Methoxy-2-naphthyloxymethyl)-2-substitutedamino-1,3,4-thiadiazole (Compounds 2a-d) and 3-(7-methoxy-2-naphthyloxymethyl)-4-substituted-1,2,4-triazole-5-thione derivatives (Compounds 3a-d) were synthesized by cyclization of 1-(7-methoxy-2-naphthyloxyacetyl)-4-subtituted-3-thiosemicarbazides (Compounds 1a-d). Chemical structures of the compounds were elucidated by IR, 1H-NMR, 13C-NMR and mass spectra and elemental analysis.The synthesized compounds (Compounds 2a-d and 3a-d) showed lower inhibitory activities on COX-2 enzyme then standard compounds NS-398 and indomethacin. 2-(7-Methoxy-2-naphthyloxymethyl)-5-ethylamino-1,3,4-thiadiazole (Compound 2b) is more selective against COX-2, 3-(7-methoxy-2-naphthyloxy methyl)-4-ethyl-1,2,4-triazole-5-thione and 3-(7-methoxy-2-naphthyloxymethyl)-4-allyl-1,2,4-triazole-5-thione (Compounds 3b and 3c) are more selective against COX-1 than rest of the compounds. As a result of the docking studies on COX-2 enzyme, it was observed that the Compound 2b is fitted and interacted with the hydrophobic parts in the active pocket of COX-2, Val349, Tyr355, Leu359 and Leu531. 121