Search

Background Understanding how the host's microbiome shapes phenotypes and participates in the host response to selection is fundamental for evolutionists and animal and plant breeders. Currently, selection for resilience is considered a critical step in improving the sustainability of livestock systems. Environmental variance (VE), the within individual variance of a trait, has been successfully used as a proxy for animal resilience. Selection for reduced VE could effectively shift gut microbiome composition; reshape the inflammatory response, triglyceride, and cholesterol levels; nd drive animal resilience. This study aimed to determine the gut microbiome composition underlying the VE of litter size (LS), for which we performed a metagenomic analysis in two rabbit populations divergently selected for low (n = 36) and high (n = 34) VE of LS. Partial least square-discriminant analysis and alpha- and beta-diversity were computed to determine the differences in gut microbiome composition among the rabbit populations. Results We identified 116 KEGG IDs, 164 COG IDs, and 32 species with differences in abundance between the two rabbit populations studied. These variables achieved a classification performance of the VE rabbit populations of over than 80%. Compared to the high VE population, the low VE (resilient) population was characterized by an underrepresentation of Megasphaera sp., Acetatifactor muris, Bacteroidetes rodentium, Ruminococcus bromii, Bacteroidetes togonis, and Eggerthella sp. and greater abundances of Alistipes shahii, Alistipes putredinis, Odoribacter splanchnicus, Limosilactobacillus fermentum, and Sutterella, among others. Differences in abundance were also found in pathways related to biofilm formation, quorum sensing, glutamate, and amino acid aromatic metabolism. All these results suggest differences in gut immunity modulation, closely related to resilience. Conclusions This is the first study to show that selection for VE of LS can shift the gut microbiome composition. The results revealed differences in microbiome composition related to gut immunity modulation, which could contribute to the differences in resilience among rabbit populations. The selection-driven shifts in gut microbiome composition should make a substantial contribution to the remarkable genetic response observed in the VE rabbit populations. This study was supported by Projects AGL2014-5592, C2-1-P and C2-2-P, AGL2017-86083, C2-1-P and C2-2-P, PID2021-123702OB-I00, and PID2020-115558GB-C21, funded by the Spanish Ministerio de Ciencia e Innovación (MCI)-Agencia Estatal de Investigación (AEI) and the European Regional Development Funds (FEDER).

The identification of resilient sows can improve reproductive performance in farms exposed to multiple challenges. A common challenge is the porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). A key issue to deal with disease resilience is to set up a feasible phenotyping strategy. Our aim was to develop a phenotyping criterion to discriminate susceptible from resilient sows in PRRSV-infected farms. A total of 517 Landrace x Large White gilts were classified as resilient (R) or susceptible (S) to PRRSV virus, following vaccination with MLV-PRRSV at 6-7 wk of age, in a PRRSV negative multiplication farm. Female piglets were phenotyped as R if their serum was negative to PRRSV at 7 and 21 d post-vaccination (DPV) or as S if their serum was positive at 7 and/or 21 DPV. Amongst them, 382 gilts were transferred to a PRRSV-positive production farm, where the number of piglets born alive (NBA), stillborn (NSB), mummified (NMU), lost (NLP=NSB+NMU) and total born (NTB = NBA+NLP) were recorded for almost three years. Data were collected during two periods according to the PRRSV farm health status, which were confirmed as either PRRSV-positive stable (endemic) or inestable (epidemic). Analyses were carried out under a Bayesian approach. The heritability for the resilience criterion was estimated using a threshold model. A linear (for NTB and NBA) and a binomial model (for NSB, NMU and NLP) on the resilience criterion by the farm health status were used to assess the difference between R and S sows. The heritability of the resilience criterion was 0.46 (SD 0.06). The probability of a piglet being lost was greater (≥0.97) in S than in R litters, regardless of whether the delivery occurred during a PRRSV outbreak (20.5% vs 17.0%) or not (15.8% vs 13.7%). The lower piglet mortality rate in R sows was due to NSB, in the endemic phase (13.0% vs 15.0% of NTB, with a posterior probability of 98% of S sows showing higher NSB than R sows), and to NMU, in the epidemic phase (4.0% vs 8.4% of NTB, with a posterior probability of >99% of S sows showing higher NMU than R sows). During a PRRSV outbreak, the S sows were twice as likely to give birth to a mummified piglet as compared to R sows. These findings provide evidence that the described phenotyping scheme has a potential use as a PRRSV resilience criterion. This research was funded by FEDER project (COMRDI16-1-0035-03). Glòria Abella is a recipient of an industrial PhD award from the Government of Catalonia, Spain (No. 2013 DI 027)

Nutritional and genetic strategies are needed to enhance intramuscular fat (IMF) and MUFA content without altering carcass leanness. Dietary vitamin A restriction has been suggested to specifically promote IMF, whereas a polymorphism of the stearoyl-CoA desaturase (SCD) gene has shown to specifically increase MUFA. The purpose of this study was to investigate the combined effects of provitamin A (PVA) carotenoid intake and SCD genotype (AY487830:g.2228T>C) on hepatic retinoid content and on the liver, muscle (LM and gluteus medius [GM]), and subcutaneous fat (SF) content and fatty acid composition. Following a split-plot design, 32 castrated Duroc pigs, half of each of the 2 homozygous SCD genotypes (CC and TT), were subjected from 165 to 195 d of age to 2 finishing diets differing in the PVA carotenoid content (an enriched-carotene diet [C+] and a control diet [C-]). Both diets were identical except for the corn line used in the feed. The C+ was formulated with 20% of a carotenoid-fortified corn (M37W-Ph3) whereas the C- instead used 20% of its near isogenic M37W line, which did not contain PVA carotenoids. No vitamin A was added to the diets. The C- was estimated to provide, at most, 1,300 IU of vitamin A/kg and the C+ to supply an extra amount of at least 800 IU vitamin A/kg. Compared with the pigs fed the C-, pigs fed with C+ had 3-fold more retinoic acid (P < 0.01) and 4-fold more SCD gene expression in the liver (P = 0.06). The diet did not affect performance traits and backfat thickness, but pigs fed the C+ had less fat (4.0 vs. 5.0%; P = 0.07) and MUFA (18.3 vs. 22.5%; P = 0.01) in the liver, less IMF (5.4 vs. 8.3%; P = 0.04) in the GM, and more fat content (90.4 vs. 87.9%; P = 0.09) and MUFA (48.0 vs. 46.6%; P = 0.04) in SF. The TT genotype at the SCD gene increased MUFA (P < 0.05) in all tissues (21.4 vs. 19.5% in the liver, 55.0 vs. 53.1% in the LM, 53.9 vs. 51.7% in the GM, and 48.0 vs. 46.7% in SF for TT and CC genotypes, respectively). Liver fat and MUFA content nonlinearly declined with liver all-trans retinoic acid, indicating a saturation point at relatively low all-trans retinoic acid content. The results obtained provide evidence for a complementary role between dietary PVA and SCD genotype, in the sense that the TT pigs fed with a low-PVA diet are expected to show higher and more monounsaturated IMF without increasing total fat content.

Intramuscular fat (IMF) content is an important trait affecting the quality of pork. Two Duroc populations, one under positive selection for IMF and the other selected for decreased backfat but under stabilizing selection for IMF, were used to identify signatures of selection associated with IMF using 60,000 single-nucleotide polymorphism data. The effects of selection were analyzed between 2 lines or groups representing selected and control animals within each population using a discriminant analysis of principal components and Wright's fixation index (FST). Moreover, extended haplotype homozygosity-based approaches were used to examine the changes in haplotype frequency due to recent selection. Each statistical method identified 10 20 selection signatures. A few haplotype-based signatures of selection agreed with results from a genome-wide association study (GWAS), while FST measures showed a better agreement with GWAS results. Agreement of marker-trait associations and signatures of selection was limited, and further examination will be necessary to understand the effect of selection on IMF and why some regions identified by GWAS did not appear to respond to the selection practiced. The genes in 21 consensus selection signatures were examined. Several genes with an effect on overall fatness were identified, but further research is needed to assess whether or not some of them could have a specific effect on IMF. This research was supported in the United States by the College of Agriculture and Life Sciences, the Ensminger program, State of Iowa, and Hatch funding and in Spain by the MINECO-funded projects AGL2009-09779 and AGL2012-33529. Comments made by the editor and 2 reviewers are greatly appreciated.

The adiponectin (ADIPOQ) locus is a positional and functional candidate gene for 2 porcine chromosome 13 (SSC13) QTL influencing cholesterol (CHOL) and low-density lipoprotein (LDL) concentrations in 190-d-old pigs. By sequencing 2.37 kb of the pig ADIPOQ cDNA, we have identified 1 c.*1512G > T 3′ untranslated region polymorphism that has been genotyped in a Duroc pig commercial population with records for serum lipid levels at 45 and 190 d of age. Statistical analysis of the data have revealed significant associations between the ADIPOQ genotype and CHOL (P = 0.0040) and LDL (P = 0.0011) concentrations at 190 d but not at 45 d. In family 3, most of the SSC13 QTL effects on LDL levels at 190 d were explained by the ADIPOQ genotype. We also found an association with triglyceride levels at 45 d (P = 0.0060) but not at 190 d. Measurement of allelic mRNA imbalance demonstrated that the G and T alleles are expressed at very similar levels in muscle and fat tissues, indicating that the c.*1512G > T polymorphism does not affect transcript abundance. As a whole, results obtained in the current work as well as previous data gathered in humans and pigs provide evidence that the magnitude of associations between blood lipid phenotypes and candidate loci genotypes may vary depending on the age of the individual, therefore suggesting the existence of dynamic genotype × environment interactions changing on a temporal scale., This work has been funded by grants AGL2007-66707-C02, AGL2010-22208-C02-01, and AGL2010-22208-C02-02 (Ministerio de Ciencia e Innovación) and CSD 2007-00036 (Ministerio de Ciencia e Innovación, Consolider Ingenio 2010 Program). D. Gallardo and C. Melo were funded with fellowships from the Universitat Autònoma de Barcelona and the Instituto Agronómico Mediterráneo, respectively. A. Zidi received a contractual grant under the framework of CSD 2007-00036.

Quantitative real-time PCR assays are widely used for the quantification of mRNA within avian experimental samples. Multiple stably-expressed reference genes, selected for the lowest variation in representative samples, can be used to control random technical variation. Reference gene assays must be reliable, have high amplification specificity and efficiency, and not produce signals from contaminating DNA. Whilst recent research papers identify specific genes that are stable in particular tissues and experimental treatments, here we describe a panel of ten avian gene primer and probe sets that can be used to identify suitable reference genes in many experimental contexts. The panel was tested with TaqMan and SYBR Green systems in two experimental scenarios: a tissue collection and virus infection of cultured fibroblasts. GeNorm and NormFinder algorithms were able to select appropriate reference gene sets in each case. We show the effects of using the selected genes on the detection of statistically significant differences in expression. The results are compared with those obtained using 28s ribosomal RNA, the present most widely accepted reference gene in chicken work, identifying circumstances where its use might provide misleading results. Methods for eliminating DNA contamination of RNA reduced, but did not completely remove, detectable DNA. We therefore attached special importance to testing each qPCR assay for absence of signal using DNA template. The assays and analyses developed here provide a useful resource for selecting reference genes for investigations of avian biology.

The intramuscular fat (IMF) and oleic acid (OL) content have been favorably related to pork quality and human health. This influences the purchasing behavior of consumers and, therefore, also shifts the attention of breeding companies toward whether these traits are included into the breeding goal of the lines producing for high-valued markets. Because IMF and OL are unfavorably associated with lean content, a key economic trait, the real challenge for the industry is not simply to increase IMF and OL, but rather to come up with the right trade-off between them and lean content. In this paper we review the efforts performed to genetically improve IMF and OL, with particular reference to the research we conducted in a Duroc line aimed at producing high quality fresh and dry-cured pork products. Based on this research, we conclude that there are selection strategies that lead to response scenarios where IMF, OL, and lean content can be simultaneously improved. Such scenarios involve regular recording of IMF and OL, so that developing a cost-efficient phenotyping system for these traits is paramount. With the economic benefits of genomic selection needing further assessment in pigs, selection on a combination of pedigree-connected phenotypes and genotypes from a panel of selected genetic markers is presented as a suitable alternative. Evidence is provided supporting that at least a polymorphism in the leptin receptor and another in the stearoyl-CoA desaturase genes should be in that panel. Selection for IMF and OL results in an opportunity cost on lean growth. The extent to which it is affordable relies on the consumers' willingness to pay for premium products and on the cost to benefit ratio of alternative management strategies, such as specific dietary manipulations. How the genotype can influence the effect of the diet on IMF and OL remains a topic for further research. Based on a presentation at the Triennial Growth and Development Symposium titled “New perspectives and insight into intramuscular adipose tissue” following the Joint Annual Meeting, July 19–23, 2016, Salt Lake City, UT, with publication sponsored by the Journal of Animal Science and the American Society of Animal Science. The authors acknowledge Josep Reixach, Selección Batallé, for his cooperation in the results presented here and for valuable discussions. Research funded by the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness and the European Union Regional Development Funds (AGL2015–65846-R).

Cathepsins are a family of peptidase enzymes which are involved in the regulation of economically important traits in pigs. The aims of this study were (i) to identify the breed-specific frequency of polymorphisms in the cathepsin B (CTSB), L (CTSL), S (CTSS), and K (CTSK) genes in seven Ukrainian pig breeds, and (ii) to compare the cathepsins polymorphism frequency between Ukrainian breeds, a commonly used European meat breed (Piétrain) and a representative fat breed (Meishan). The Ukrainian breeds used were: Ukrainian Large White, Ukrainian Large Black, Poltava Meat, Myrgorod, Ukrainian Steppe Spotted, Ukrainian Landrace and Ukrainian Steppe White. The study established breed-specific differences in the allele frequencies and informativity of polymorphisms in the CTSB, CTSL, CTSS and CTSK genes in Ukrainian breeds. The following were of particular interest: locus CTSB in Ukrainian Large Black breed, locus CTSL in Ukrainian Steppe Spotted, and loci CTSS and CTSK in Myrgorod breed. The segregation of SNPs in meat quality candidate genes demonstrating intermediate or high polymorphism levels in the Ukrainian breeds Myrgorod, Ukrainian Steppe Spotted and Ukrainian Large Black is of interest for future evaluation in association studies with the view of complementing selection indexes with molecular information This research was supported by a research grant from the National Academy of Agricultural Sciences, Ukraine ( No D Р 0111 U004024 ), EU Marie Curie International Research Staff Exchange Grant “Excelmeat” (No 246760) and Biotechnology and Biological Sciences Research Council Pathfinder grant (No BB/FOF/PF/5/11).

Les paparres són ectoparàsits hematòfags obligats i el segon vector més important de nombrosos patògens. El canvi climàtic, entre altres, està afectant la distribució geogràfica de les paparres i, en conseqüència, les malalties que transmeten als animals i a l'home, resultant en grans pèrdues econòmiques a nivell mundial i una seria amenaça tant per la salut humana, però sobretot per la salut animal, a vegades amb conseqüències mortals per l’hoste. El present treball té l’objectiu d’analitzar l’evolució geogràfica de diferents espècies de paparres i la relació causa-efecte que propicien la seva redistribució. Les dades disponibles a l’European Centre for Disease Control and Prevention mostren l’amplia distribució de nou espècies de paparres entre els països del Paleàrtic Occidental, sent la Ixodes ricinus l’espècie més estesa. Entre els períodes estudiats es pot concloure que el canvi climàtic és una de les causes principals de la redistribució de les paparres al Paleàrtic Occidental, seguint aquestes una tendència a migrar cap al centre i l’est en busca de climes més freds i humits Aquests fluxos també han afavorit malalties emergents a Europa. La bibliografia consultada confirma aquests fets i preveu que les paparres seguiran migrant en el futur acumulant el centre d’Europa la major diversitat d’espècies, el que evidencia la necessitat d’implementar sistemes de vigilància activa d’aquestes espècies al nostre territori

Les paparres són ectoparàsits considerats el segon vector més important de nombroses malalties i, en algunes regions on el clima i les condicions són favorables, l’alta densitat d’aquests artròpodes els situa en el primer lloc. Antigament, les paparres han sigut classificades segons els distintius morfològics intentant amb major o menor error formar l’arbre filogenètic d’aquestes. Recentment aquesta classificació ha estat sota estudi de diversos científics en base a l’aparició dels mètodes moleculars. El present estudi té l’objectiu de recórrer a diferents guies morfològiques per a la classificació de les paparres col·leccionades durant els anys 2011, 2015, 2016 i 2017 en el Pirineu català. A continuació es validarà la classificació realitzada mitjançant mètodes moleculars utilitzant la base de dades del National Center for Biotechnology Information (NCBI). Les claus taxonòmiques obtingudes a través de les diverses guies permeten confirmar la falta d’unificació en la informació, especialment en referència a les nimfes i les larves. A més, la confirmació molecular registrada a les bases de dades genètiques són directament dependents de la correcta classificació realitzada pels científics que hi aporten informació. Tota aquesta sèrie de successos poden comportar errors a l’hora de treure conclusions, pel qual és necessari analitzar els resultats de forma conjunta, conegut també com taxonomia integrativa.

L’aplicació dels panels de marcadors moleculars en el test de paternitat en cavalls és un mètode amb un gran potencial. En aquest treball es demostra que es tracta d’una eina d’identificació fiable que permet definir el perfil genètic d’un èquid amb una senzilla mostra de pèl, sang o hisop bucal i establir les seves relacions de parentesc amb els individus mostrejats. Actualment existeix la necessitat de recórrer a aquestes tècniques genètiques, per exemple com a requisit per la inclusió dels cavalls als llibres de raça. Prenent de referent el cens d’Espanya, segons dades oficials del MAPAMA 2018, un 50% dels cavalls de l’estat són de raça. Aquest fet implica que aquests èquids, a part d’estar identificats amb els sistemes que obliga la legislació, han d’obtenir un anàlisis de paternitat per poder entrar a formar part del llibre de la seva raça pertinent. L’objectiu d’aquest Treball de Fi de Grau ha estat posar a punt el panel ISAG de marcadors genètics de cavall i analitzar-ne les seves aplicacions comercials. Aquest treball s’ha dut a terme en col·laboració amb el laboratori MyADNlab, ubicat a Lleida, interessat en incorporat aquest servei a la seva oferta de serveis genètics, ja que dels 21 laboratoris oficials per dur a terme tests de parentesc en cavall, cap es troba a Catalunya. Amb aquest fi, s’han pres mostres pèl, sang i hisops bucals, d’una població de 50 cavalls de 9 races i 3 països diferents, de les que s’ha extret ADN i obtingut el perfil genètic en les instal·lacions del laboratori MyADNlab. L’eficàcia d’èxit dels perfils genètics va ser més alta en pèl i pitjor en sang. La principal incidència detectada en els perfils ha estat la pèrdua del marcador ABS2, en el 48% de les mostres. En el conjunt de cavalls analitzat s’ha comprovat que tots els marcadors estan segregant, amb una mitjana de 7 al·lels per marcadors i amb 4rangs de freqüències al·lèliques entre 0,015 i 0,56. A més a més, els alts valors d’heterozigositat observada i esperada i d’informativitat (PIC) dels marcadors, així com la baixa probabilitat de no exclusió i no exclusió combinada, indiquen que el panel és capaç de captar la variabilitat genètica de la població. Amb exemples concrets, s’ha demostrat que els perfils obtinguts dels èquids genotipats són efectius en identificar de manera inequívoca cada cavall i assignar correctament les paternitats conegudes. Com a conclusió, es pot afirmar que amb el grau de variabilitat genètica obtingut d’aquest grup de cavalls, pocs marcadors poden ser suficients per identificar inequívocament un cavall i assignar les seves relacions de parentesc.

El PRRS és actualment la patologia més important econòmicament en la producció porcina. El virus per diverses vies, entre elles la transplacentària, provocant símptomes greus en les ventrades. Fins al moment la vacunació és l'estratègia de control més utilitzada, encara que té poc èxit en el camp. En aquest estudi es van pretendre identificar gens i biomarcadors associats a caràcters de resistència a aquesta infecció. Es va realitzar una recerca bibliogràfica per determinar les regions del genoma porcí més rellevants pel que fa a característiques reproductives i immunitàries, i es van localitzar gens candidats per aquests caràcters (SGK1 i TAP1). Es va seqüenciar la regió codificant d'aquests gens en un subgrup de 32 truges. Es van identificar diferents polimorfismes i es van dissenyar primers específics per a aquestes regions; finalment es van seleccionar dos marcadors: SGK1_M6 i TAP1_M3. Es van genotipar els polimorfismes trobats mitjançant la tècnica qPCR-HRM. El genotip AA per al marcador SGK1_M6 del gen SGK1 es va relacionar amb una disminució del nombre total de garrins nascuts per part així com en el nombre del nombre de garrins nascuts i en el nombre de garrins vius (p

Aquesta tesi doctoral forma part d'una línia de recerca sobre la millora genètica de la qualitat de la carn en porcí. Un dels recents objectius inclòs en algunes línies paternes seleccionades per mercats de qualitat és aconseguir un nivell òptim de greix intramuscular i de composició en àcids grassos sense penalitzar el rendiment magre. Aquesta tesi està formada per quatre estudis realitzats en una línia pura de porcs Duroc destinats a la producció de càrnics d'alta qualitat. Els estudis es van dissenyar amb l'objectiu d'entendre millor la variabilitat genètica subjactent al contingut de greix i a la composició en àcids grassos i d’identificar marcadors potencials a la selecció. El primer estudi va examinar els paràmetres genètics de la ruta de l'àcid linoleic (C18:2) a l'àcid araquidònic (C20:4). En particular, es va demostrar que s’espera que la selecció pel valor absolut de C18:2 proporcioni una resposta a la selecció similar a la selecció pel greix intramuscular a greix dorsal restringit. Aquests resultats van conduir a investigar el gen de la desaturasa-2 dels àcids grassos (FADS2), com a gen candidat per a la ruta metabòlica de C18:2. Així, el segon estudi va avaluar els efectes d'una variant (el polimorfisme rs321384923 es va utilitzar com a marcador) al promotor del gen FADS2. Els resultats van demostrar que aquest polimorfisme afecta el perfil d'àcids grassos n-6 millorant l'eficiència de desaturació de C18:2 a C20:4. Addicionalment, es va avaluar l'associació dels gens de les perilipines (PLIN) i del gen de la proteína d’unió al guanilat 1 (GBP1) amb caràcters de creixement i de qualitat de la carn. Així, el tercer estudi va examinar els efectes de dos polimorfismes als gens PLIN1 i PLIN2, relacionats amb l'emmagatzematge i la mobilització de lípids. Els resultats indiquen que el polimorfisme rs333231747 a PLIN2 està associat al creixement primerenc i al pes magre. L'últim estudi va demostrar que GBP1 té dos senyals de poliadenilació actius i que el seu ús depèn del genotip rs80800372. Els porcs portadors de l'al·lel G, associat a una menor viremia després de la infecció pel virus reproductiu i respiratori porcí, van tenir transcripcions més llargues i una menor expressió gènica. En condicions no epidèmiques, l'al·lel G va augmentar el contingut de greix intramuscular, però va disminuir el pes magre. El contingut de C18:2 i els marcadors genètics investigats es poden utilitzar per dissenyar estratègies de selecció adequades per millorar la qualitat de la carn i el creixement magre. Esta tesis doctoral es parte de una línea de investigación sobre la mejora genética de la calidad de la carne en porcino. Uno de los recientes objetivos incluido en algunas líneas paternas seleccionadas para mercados de calidad es lograr un nivel óptimo de grasa intramuscular y de composición en ácidos grasos sin penalizar el crecimiento magro. Esta tesis comprende cuatro estudios realizados en una línea pura de cerdos Duroc destinados a la producción de cárnicos de alta calidad. Los experimentos se diseñaron con el objetivo de comprender mejor la variabilidad genética subyacente en el contenido de grasa y la composición en ácidos grasos e identificar marcadores potenciales a la selección. El primer estudio examinó los parámetros genéticos de la ruta del ácido linoleico (C18:2) al ácido araquidónico (C20:4). En particular, se demostró que se espera que la selección del valor absoluto de C18:2 proporcione una respuesta similar a la selección por grasa intramuscular a grasa dorsal restringida. Estos hallazgos llevaron a investigar el gen de la desaturasa-2 de los ácidos grasos (FADS2), como gen candidato para la ruta del C18:2. Por lo tanto, el segundo estudio evaluó los efectos de una variante (el polimorfismo rs321384923 se usó como marcador) en el promotor del gen FADS2. Los resultados mostraron que este polimorfismo afecta el perfil de ácidos grasos n-6 al aumentar la eficiencia de desaturación de C18:2 a C20:4. Además, se evaluó la asociación de los genes de las perilipinas (PLIN) y el gen de la proteína de unión a guanilato 1 (GBP1) con caracteres de crecimiento y de calidad de la carne. De este modo, el tercer estudio examinó los efectos de dos polimorfismos en PLIN1 y PLIN2, relacionados con la deposición y la movilización de lípidos. Los resultados indicaron que el polimorfismo rs333231747 en PLIN2 se asocia con el crecimiento temprano y con el peso magro. El último estudio mostró que GBP1 tiene dos señales de poliadenilación activas y que su uso depende del genotipo rs80800372. Los cerdos portadores del alelo G, asociado con una menor viremia después de la infección por el virus reproductivo y respiratorio porcino, tenían transcritos más largos y una menor expresión génica. En condiciones no epidémicas, el alelo G aumentó el contenido de grasa intramuscular pero disminuyó el peso magro. El contenido de C18:2 y los marcadores genéticos investigados se pueden usar para diseñar estrategias de selección adecuadas para mejorar la calidad de la carne y el crecimiento magro. This PhD dissertation is part of a research line on the genetic improvement of pork quality. One of the latest goals to be included in some sire lines selected for premium markets is to achieve an optimum level of intramuscular fat and fatty acid composition without penalizing lean growth performance. This thesis is comprised of four studies conducted on a purebred Duroc line used for producing high-quality meat products. The experiments were designed with the aim to better understand the genetic variability underlying fat content and fatty acid compostion and to identify potential markers for breeding. The first study examined the genetic parameters of the linoleic acid (C18:2) to arachidonic acid (C20:4) pathway. In particular, it was showed that selection for the absolute value of C18:2 is expected to deliver a similar response outcome as selection for intramuscular fat at restrained backfat thickness. These findings led to investigate the fatty acid desaturase-2 (FADS2) gene, as a candidate gene for C18:2 metabolism route. Thus, the second study evaluated the effects of a variant (rs321384923 was used as a tag single nucleotide polymorphism) in the promoter of the FADS2 gene. Results showed that this polymorphism affects the n-6 fatty acid profile by enhancing the desaturation efficiency of C18:2 to C20:4. Additionally, the association of perilipin (PLIN) genes and guanylate-binding protein-1 (GBP1) gene with growth and meat quality traits was assessed. Thus, the third study examined the effects of two polymorphisms in PLIN1 and PLIN2, which have been related to lipid storage and mobilization. Results indicated that the rs333231747 polymorphism on PLIN2 is associated to early growth and lean weight. The last study showed that GBP1 has two active polyadenylation signals and that their usage depends on the rs80800372 genotype. The pigs carrying the G allele, which has been associated with lower viraemia after porcine reproductive and respiratory virus infection, had longer transcripts and lower gene expression. In non-epidemic conditions, the G allele increased intramuscular fat content but decreased lean weight. Linoleic acid content and the investigated genetic markers can be used to design appropriate selection strategies to enhance meat quality and lean growth.

The genome-wide association study of the Psychiatric Genomics Consortium identified over one hundred schizophrenia susceptibility loci. The number of non-coding variants discovered suggests that gene regulation could mediate the effect of these variants on disease. Expression quantitative trait loci (eQTLs) contribute to variation in levels of mRNA. Given the co-occurrence of schizophrenia and several traits not involving the central nervous system (CNS), we investigated the enrichment of schizophrenia associations among eQTLs for four non-CNS tissues: adipose tissue, epidermal tissue, lymphoblastoid cells and blood. Significant enrichment was seen in eQTLs of all tissues: adipose (β = 0.18, p = 8.8 × 10-06), epidermal (β = 0.12, p = 3.1 × 10-04), lymphoblastoid (β = 0.19, p = 6.2 × 10-08) and blood (β = 0.19, p = 6.4 × 10-06). For comparison, we looked for enrichment of association with traits of known relevance to one or more of these tissues (body mass index, height, rheumatoid arthritis, systolic blood pressure and type-II diabetes) and found that schizophrenia enrichment was of similar scale to that observed when studying diseases in the context of a more likely causal tissue. To further investigate tissue specificity, we looked for differential enrichment of eQTLs with relevant Roadmap affiliation (enhancers and promoters) and varying distance from the transcription start site. Neither factor significantly contributed to the enrichment, suggesting that this is equally distributed in tissue-specific and cross-tissue regulatory elements. Our analyses suggest that functional correlates of schizophrenia risk are prevalent in non-CNS tissues. This could be because of pleiotropy or the effectiveness of variants affecting expression in different contexts. This suggests the utility of large, single-tissue eQTL experiments to increase eQTL discovery power in the study of schizophrenia, in addition to smaller, multiple-tissue approaches. Our results conform to the notion that schizophrenia is a systemic disorder involving many tissues.

Una carne de porcino de calidad necesita una cantidad óptima de grasa intramuscular (GIM), que varía en carne fresca o en productos curados. El depósito y la composición de la grasa están relacionados con el fondo genético de cada raza. Por lo que es posible utilizar información de marcadores genéticos para seleccionar por estos caracteres. Dada la correlación genética positiva que existe entre la GIM y la grasa dorsal (GD), la selección por magro conlleva a una disminución indirecta de la GIM. Sin embargo, en la mutación c2456C>A descrita por Latorre et al., 2016, el alelo A es el que presenta un mayor contenido de GIM pero una disminución en la GD. Ante esta situación, en este TFG se han genotipado cerdos de la raza Duroc y cruce Large White x Landrace, para validar estos resultados y estudiar el efecto de la mutación en crecimiento y composición de la grasa. Los resultados no han permitido validar los resultados de Latorre et al., 2016 y el marcador tuvo poca influencia sobre la composición de la grasa, particularmente en Duroc. Estos resultados tampoco permiten validar la mutación PCK1 c2456C>A como causal. Esto podría ser debido a la interacción de otros genes (pleiotropía) o a la existencia de otra mutación próxima, como las que hemos identificado en el promotor PCK1, que sería la causal del efecto diferencial sobre GIM y GD. Una carn de porcí de qualitat necessita una quantitat òptima de greix intramuscular (GIM), que varia en carn fresca o en productes curats. El dipòsit i la composició del greix estan relacionats amb el fons genètic de cada raça. Pel que és possible utilitzar informació de marcadors genètics per seleccionar per aquests caràcters. Donada la correlació genètica positiva que existeix entre la GIM i el greix dorsal (GD), la selecció per magre comporta una disminució indirecta de la GIM. No obstant això, en la mutació c2456C>A descrita per Latorre et al., 2016, l'al·lel A és el que presenta un major contingut de GIM però una disminució en la GD. Davant d'aquesta situació, en aquest TFG s'han genotipat porcs de la raça Duroc i el creuament Large White x Landrace, per validar aquests resultats i estudiar l'efecte de la mutació en creixement i composició del greix. Els resultats no han permès validar els resultats de Latorre et al., 2016 i el marcador va tenir poca influència sobre la composició del greix, particularment en Duroc. Aquests resultats tampoc permeten validar la mutació PCK1 c2456C>A com causal. Això podria ser degut a la interacció d'altres gens (pleiotropía) o a l'existència d'una altra mutació pròxima, com les que hem identificat en el promotor PCK1, que seria la causal de l'efecte diferencial sobre GIM i GD. A quality pigmeat need an optimal intramuscular fat content (IMF), which differs from fresh meat and cured products. The deposit and fat composition are related to the genetic background of each breed. So, it is possible to use information from genetic markers to select for these characters. Because of the positive genetic correlation between IMF and backfat thickness (BT), selection for lean results in an indirect decrease in IMF. However, allele A of the mutation c2456C>A, described by Latorre et al., 2016, is having a larger content of IMF but a decrease in BT. In this situation, pigs Duroc and Large White x Landrace crossing were genotyped to validate these results and to study the effect of the mutation in growth and fat composition. The results differ from the results of Latorre et al., 2016 and the marker had little influence on the composition of fat, particularly in Duroc. These results confirm that the mutation PCK1 c2456C>A is not causal. This could be due to the interaction of other genes (pleiotropy) or to the existence of another close mutation, as we have identified in the promoter, which would be the causal of differential effect on IMF and BT.

Improvement in feed conversion efficiency can improve the sustainability of beef cattle production, but genomic selection for feed efficiency affects many underlying molecular networks and physiological traits. This study describes the differences between steer progeny of two influential Angus bulls with divergent genomic predictions for residual feed intake (RFI). Eight steer progeny of each sire were phenotyped for growth and feed intake from 8 mo. of age (average BW 254 kg, with a mean difference between sire groups of 4.8 kg) until slaughter at 14-16 mo. of age (average BW 534 kg, sire group difference of 28.8 kg). Terminal samples from pituitary gland, skeletal muscle, liver, adipose, and duodenum were collected from each steer for transcriptome sequencing. Gene expression networks were derived using partial correlation and information theory (PCIT), including differentially expressed (DE) genes, tissue specific (TS) genes, transcription factors (TF), and genes associated with RFI from a genome-wide association study (GWAS). Relative to progeny of the high RFI sire, progeny of the low RFI sire had -0.56 kg/d finishing period RFI (P = 0.05), -1.08 finishing period feed conversion ratio (P = 0.01), +3.3 kg^0.75 finishing period metabolic mid-weight (MMW; P = 0.04), +28.8 kg final body weight (P = 0.01), -12.9 feed bunk visits per day (P = 0.02) with +0.60 min/visit duration (P = 0.01), and +0.0045 carcass specific gravity (weight in air/weight in air-weight in water, a predictor of carcass fat content; P = 0.03). RNA-seq identified 633 DE genes between sire groups among 17,016 expressed genes. PCIT analysis identified >115,000 significant co-expression correlations between genes and 25 TF hubs, i.e. controllers of clusters of DE, TS, and GWAS SNP genes. Pathway analysis suggests low RFI bull progeny possess heightened gut inflammation and reduced fat deposition. This multi-omics analysis shows how differences in RFI genomic breeding values can impact other traits and gene co-expression networks.

Iberian pig production includes purebred (IB) and Duroc-crossbred (IBxDU) pigs, which show important differences in growth, fattening and tissue composition. This experiment was conducted to investigate the effects of genetic type and muscle (Longissimus dorsi (LD) vs Biceps femoris (BF)) on gene expression and transcriptional regulation at two developmental stages. Nine IB and 10 IBxDU piglets were slaughtered at birth, and seven IB and 10 IBxDU at four months of age (growing period). Carcass traits and LD intramuscular fat (IMF) content were measured. Muscle transcriptome was analyzed on LD samples with RNA-Seq technology. Carcasses were smaller in IB than in IBxDU neonates (p < 0.001), while growing IB pigs showed greater IMF content (p < 0.05). Gene expression was affected (p < 0.01 and Fold change > 1.5) by the developmental stage (5,812 genes), muscle type (135 genes), and genetic type (261 genes at birth and 113 at growth). Newborns transcriptome reflected a highly proliferative developmental stage, while older pigs showed upregulation of catabolic and muscle functioning processes. Regarding the genetic type effect, IBxDU newborns showed enrichment of gene pathways involved in muscle growth, in agreement with the higher prenatal growth observed in these pigs. However, IB growing pigs showed enrichment of pathways involved in protein deposition and cellular growth, supporting the compensatory gain experienced by IB pigs during this period. Moreover, newborn and growing IB pigs showed more active glucose and lipid metabolism than IBxDU pigs. Moreover, LD muscle seems to have more active muscular and cell growth, while BF points towards lipid metabolism and fat deposition. Several regulators controlling transcriptome changes in both genotypes were identified across muscles and ages (SIM1, PVALB, MEFs, TCF7L2 or FOXO1), being strong candidate genes to drive expression and thus, phenotypic differences between IB and IBxDU pigs. Many of the identified regulators were known to be involved in muscle and adipose tissues development, but others not previously associated with pig muscle growth were also identified, as PVALB, KLF1 or IRF2. The present study discloses potential molecular mechanisms underlying phenotypic differences observed between IB and IBxDU pigs and highlights candidate genes implicated in these molecular mechanisms. © 2016 Ayuso et al. This is an open access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited.

Iberian ham production includes both purebred (IB) and Duroc-crossbred (IBxDU) Iberian pigs, which show important differences in meat quality and production traits, such as muscle growth and fatness. This experiment was conducted to investigate gene expression differences, transcriptional regulation and genetic polymorphisms that could be associated with the observed phenotypic differences between IB and IBxDU pigs. Nine IB and 10 IBxDU pigs were slaughtered at birth. Morphometric measures and blood samples were obtained and samples from Biceps femoris muscle were employed for compositional and transcriptome analysis by RNA-Seq technology. Phenotypic differences were evident at this early age, including greater body size and weight in IBxDU and greater Biceps femoris intramuscular fat and plasma cholesterol content in IB newborns. We detected 149 differentially expressed genes between IB and IBxDU neonates (p < 0.01 and Fold-Change > 1. 5). Several were related to adipose and muscle tissues development (DLK1, FGF21 or UBC). The functional interpretation of the transcriptomic differences revealed enrichment of functions and pathways related to lipid metabolism in IB and to cellular and muscle growth in IBxDU pigs. Protein catabolism, cholesterol biosynthesis and immune system were functions enriched in both genotypes. We identified transcription factors potentially affecting the observed gene expression differences. Some of them have known functions on adipogenesis (CEBPA, EGRs), lipid metabolism (PPARGC1B) and myogenesis (FOXOs, MEF2D, MYOD1), which suggest a key role in the meat quality differences existing between IB and IBxDU hams. We also identified several polymorphisms showing differential segregation between IB and IBxDU pigs. Among them, non-synonymous variants were detected in several transcription factors as PPARGC1B and TRIM63 genes, which could be associated to altered gene function. Taken together, these results provide information about candidate genes, metabolic pathways and genetic polymorphisms potentially involved in phenotypic differences between IB and IBxDU pigs associated to meat quality and production traits.

La present Tesi Doctoral s’emmarca dins d’una línia d’investigació dedicada a l’estudi de les bases genètiques del metabolisme dels greixos en relació a la producció de carn de porcí d’alta qualitat i saludable. L’objectiu final és la identificació de polimorfismes i mecanismes de regulació responsables de la variabilitat genètica d’aquests caràcters complexes en l’espècie porcina. En aquest context, s’han utilitzat mètodes de genòmica estructural (mapes de QTL d’expressió (eQTL); estudis de gens candidats) i funcional (estudis d’expressió gènica) a més a més d’anàlisis proteics i cel·lulars en mostres de múscul i greix de porcs seleccionats per les seves característiques de qualitat de carn. Així, mitjançant la tècnica de microarrays s’ha analitzat el patró d’expressió d’ARNm en mostres de múscul gluteus medius obtingudes a partir de porcs d’una població comercial Duroc amb fenotips divergents per diversos paràmetres relacionats amb la deposició dels lípids. Com a resultat, s’han observat nombrosos gens diferencialment expressats entre els animals amb perfils divergents d’engreixament. Un estudi ontològic/funcional va revelar que aquests gens estaven particularment relacionats amb el metabolisme lipídic, el creixement i la diferenciació muscular, la immunitat i la captació de glucosa en la ruta de la insulina. D’altra banda, les anàlisis d’eQTL han revelat l’existència de regions genòmiques responsables de la variació de l’expressió gènica en el múscul gluteus medius porcí; algunes de les quals mostren una concordança posicional amb varis QTL per caràcters de qualitat de cran i engreixament detectats prèviament a la mateixa població Duroc. Complementàriament, s’ha realitzat un estudi més exhaustiu de quatre gens candidats (ACACA, HMGCR, SCD i 6D), directament implicats en caràcters relacionats amb la qualitat de la carn al ser els principals responsables de la síntesis i dessaturació d’àcids grassos i colesterol. Combinant els resultats de l’anàlisi d’expressió gènica, mapes d’eQTL i els gens candidats estudiats s’ha elaborat una llista de gens candidats funcionals i posicionals que serà la base de futures investigacions cap a l’establiment de les xarxes gèniques i els mecanismes moleculars implicats en el metabolisme dels lípids musculars i els caràcters relacionats amb la qualitat de la carn en porcí., La presente Tesis Doctoral se enmarca en una línea de investigación dedicada al estudio de las bases genéticas del metabolismo de las grasas en relación a la producción de carne de porcino de alta calidad y saludable. El objetivo final es la identificación de polimorfismos y mecanismos de regulación responsables de la variabilidad genética de estos caracteres complejos en porcino. Para ello se han utilizado métodos de genómica estructural (mapas de QTL de expresión (eQTL); estudio de genes candidatos) y funcional (estudios de expresión génica) y también de análisis proteico y celular en muestras de músculo y grasa de cerdos seleccionados por sus características de calidad de carne. Así, mediante la técnica de microarrays se ha analizado el patrón de expresión de ARNm en muestras de músculo gluteus medius obtenidas a partir de cerdos de una población comercial Duroc con fenotipos divergentes para varios parámetros relacionados con la deposición de los lípidos. Como resultado, se han observado numerosos genes diferencialmente expresados entre los animales con perfiles divergentes de engorde. Un estudio ontológico/funcional mostró que estos genes estaban particularmente relacionados con el metabolismo lipídico, el crecimiento y la diferenciación muscular, la inmunidad, y la captación de glucosa en la ruta de la insulina. Por otra parte, un análisis de eQTL ha revelado la existencia de regiones genómicas responsables de la variación de la expresión génica en el músculo gluteus medius porcino, algunas de las cuales muestran una concordancia posicional con varios QTL para caracteres de calidad de carne y engorde detectados previamente en la misma población Duroc. Complementariamente, se ha realizado un estudio más exhaustivo de cuatro genes candidatos (ACACA, HMGCR, SCD y 6D) directamente implicados en caracteres relacionados con la calidad de la carne al ser los principales responsables de la síntesis y desaturación de ácidos grasos y colesterol. Combinando los resultados del análisis de expresión génica, mapas de eQTL y los genes candidatos estudiados se ha elaborado una lista de genes candidatos funcionales y posicionales que será la base de futuras investigaciones hacia el establecimiento de las redes génicas y los mecanismos moleculares implicados en el metabolismo de los lípidos musculares y los caracteres relacionados con la calidad de la carne en porcino., This PhD is part of a line of research devoted to studying the genetic basis of lipid metabolism and fat deposition in pigs with a view to producing healthy and high quality meat. The main objective is the identification of polymorphisms and regulatory mechanisms responsible for the genetic variability of these complex characters in pigs. In this sense, we have used several methods in the fields of structural (expression QTL (eQTL) maps; candidate genes studies) and functional (gene expression studies) genomics and also protein and cell studies in muscle and fat samples from pigs selected by meat quality parameters. In this context, using microarrays we analyzed the mRNA expression pattern in gluteus medius muscle samples obtained from a commercial Duroc pig population with divergent phenotypes for several parameters related to lipid deposition. As a result, we have obtained a list of genes differentially expressed between animals with divergent profiles related to lipid deposition. The ontological/functional study showed that these genes were particularly related to lipid metabolism, growth and muscle differentiation, immunity and glucose uptake in the insulin pathway. Moreover, analysis of eQTL has revealed the existence of genomic regions responsible for the variation of gene expression in porcine gluteus medius muscle. Some of these eQTL show positional concordance with several QTL related to meat quality and fat deposition previously identified in the same Duroc population. Additionally, we have performed a comprehensive study of four candidate genes (ACACA, HMGCR, SCD and 6D) directly involved in traits related to meat quality, playing an important role in fatty acids and cholesterol synthesis and desaturation. Combining the results of gene expression analysis, eQTL maps and candidate genes studied have resulted in a list of functional and positional candidate genes representing a valuable contribution to the understanding of the genetic regulation of skeletal muscle individual gene expression in swine species. This is a first step towards disentangling gene networks and molecular mechanisms involved in muscular lipid metabolism and meat quality traits in pigs.

Animal Pharming es defineix com l'ús d'animals de renda transgènics per a la síntesi de proteïnes recombinants, utilitzades posteriorment com a fàrmacs en humans. Aquestes pràctiques comporten una sèrie de processos biotecnològics, els quals solen causar controvèrsia. L'objectiu principal d'aquest estudi és sondejar l'opinió pública i analitzar els factors que influeixen en l'acceptació d'aquests biofàrmacs, com pot ser l'edat, el sexe, els estudis o el nivell de coneixement sobre el tema dels participants. S'han comparat diferents metodologies per conèixer l'opinió pública i s'ha portat a terme mitjançant la via més efectiva: una enquesta d'opinió en línia. S'ha dissenyat una enquesta ramificada que permet, d'una banda, catalogar als participants segons el seu coneixement previ sobre el tema i, per una altra, aplicar un model diferent d'enquesta en base a aquesta classificació. Així, els 327 participants han estat classificats en coneixement LIMITAT (68,5%), MITJÀ (19,6%) i ALT (11,9%). Tan sols tres dels 327 participants tenen clars quins productes transgènics són comercialitzats actualment a Espanya, i únicament 39 de 327 (11,9%) coneixen el terme d'Animal Pharming. D'altra banda, la valoració mitjana de tots els participants sobre aquestes pràctiques és de 2,51 sobre 5 (on el punt neutre seria 3 i el més favorable el 5). Curiosament, els grups de coneixement no mostren diferències d'opinions sobre l'aplicació d'Animal Pharming, però sí que hi ha diferències entre els grups d'edat, sexe i estudis. Basant-se en els nostres resultats, els factors que més influeixen sobre l'acceptació de la comercialització d'aquests fàrmacs és el sexe i l'edat dels participants, tenint les dones i els participants més joves una opinió més negativa que els homes i les persones de més edat. Com a conclusió general, aquest tema és molt desconegut en la nostra societat. Addicionalment, es percep una certa oposició a utilitzar animals transgènics, excepte en casos extrems d'urgència mèdica. Animal Pharming se define como el uso de animales de renta transgénicos para la síntesis de proteínas recombinantes, usadas posteriormente como fármacos en humanos. Estas prácticas conllevan una serie de procesos biotecnológicos, los cuales suelen causar controversia. El objetivo principal de este estudio es sondear la opinión pública y analizar los factores que influyen en la aceptación de dichos biofármacos, como puede ser la edad, el sexo, los estudios o el nivel de conocimiento sobre el tema de los participantes. En este trabajo se han comparado diferentes metodologías para conocer la opinión pública y se ha llevado a cabo mediante la vía más efectiva: una encuesta de opinión online. Se ha diseñado una encuesta ramificada que permite, por una parte, catalogar a los participantes según su conocimiento previo sobre el tema, y por otra, aplicar un modelo distinto de encuesta en base a esta clasificación. Así, los 327 participantes han sido clasificados en conocimiento LIMITADO (68,5%), MEDIO (19,6%) y ALTO (11,9%). Tan sólo tres de los 327 participantes tienen claros qué productos transgénicos son comercializados actualmente en España, y únicamente 39 de 327 (11,9%) conocen el término de Animal Pharming. Por otra parte, la valoración media de todos los participantes sobre estas prácticas es de 2,51 sobre 5 (donde el punto neutro sería 3 y el más favorable el 5). Curiosamente, los grupos de conocimiento no muestran diferencias de opiniones acerca de la aplicación de Animal Pharming, pero sí hay diferencias entre los grupos de edad, sexo y estudios. En base a nuestros resultados, los factores que más influyen sobre la aceptación de la comercialización de dichos fármacos es el sexo y la edad de los participantes, teniendo las mujeres y los participantes más jóvenes una opinión más negativa que los hombres y las personas de más edad. Como conclusión general, este tema es muy desconocido en nuestra sociedad. Adicionalmente, se percibe una cierta oposición a utilizar animales transgénicos, excepto en casos extremos de urgencia médica. Animal Pharming is defined as the use of transgenic livestock for the synthesis of recombinant proteins, to be used as drugs in humans. These practices involve a series of biotechnological processes, which often cause controversy. The main objective of this study is to survey public opinion and analyze the factors that influence the acceptance of these biopharmaceuticals, such as age, sex, studies or the participants' level of knowledge on the subject. To do this, different methodologies for ascertaining public opinion have been compared and this has been carried out in the most effective way: an online opinion survey. A branched survey has been designed, which allows, on the one hand, to classify the participants according to their prior knowledge on the subject, and on the other, to apply a different survey model based on this classification. Thus, the 327 participants are classified as LIMITED (68.5%), MEDIUM (19.6%) and HIGH (11.9%). Only three of the 327 participants have a clear idea about which transgenic products are currently marketed in Spain, and only 39 of 327 (11.9%) are acquaintance with the term Animal Pharming. Moreover, the mean assessment value of these practices is 2.51 out of 5 (where the neutral point would be 3 and the most favorable would be 5). Interestingly, the knowledge groups do not show differences of opinion about the application of Animal Pharming, but there are differences between age groups, sex and studies. Based on our results, the factors that most influence the acceptance of the marketing of these drugs is the sex and age of the participants, with women and younger participants having a more negative opinion than men and older people. As a general conclusion, this topic is largely unknown in our society. Additionally, there is a certain opposition to using transgenic animals, except in cases of extreme urgency.