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We have developed a single process for producing two key COVID-19 vaccine antigens: SARS-CoV-2 receptor binding domain (RBD) monomer and dimer. These antigens are featured in various COVID-19 vaccine formats, including SOBERANA 01 and the licensed SOBERANA 02, and SOBERANA Plus. Our approach involves expressing RBD (319-541)-His6 in Chinese hamster ovary (CHO)-K1 cells, generating and characterizing oligoclones, and selecting the best RBD-producing clones. Critical parameters such as copper supplementation in the culture medium and cell viability influenced the yield of RBD dimer. The purification of RBD involved standard immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC), ion exchange chromatography, and size exclusion chromatography. Our findings suggest that copper can improve IMAC performance. Efficient RBD production was achieved using small-scale bioreactor cell culture (2 L). The two RBD forms - monomeric and dimeric RBD - were also produced on a large scale (500 L). This study represents the first large-scale application of perfusion culture for the production of RBD antigens. We conducted a thorough analysis of the purified RBD antigens, which encompassed primary structure, protein integrity, N-glycosylation, size, purity, secondary and tertiary structures, isoform composition, hydrophobicity, and long-term stability. Additionally, we investigated RBD-ACE2 interactions, in vitro ACE2 recognition of RBD, and the immunogenicity of RBD antigens in mice. We have determined that both the monomeric and dimeric RBD antigens possess the necessary quality attributes for vaccine production. By enabling the customizable production of both RBD forms, this unified manufacturing process provides the required flexibility to adapt rapidly to the ever-changing demands of emerging SARS-CoV-2 variants and different COVID-19 vaccine platforms.

El uso de anticuerpos monoclonales en la lucha contra el cáncer se convierte cada día más en la terapia de elección. Para la introducción de anticuerpos monoclonales en mercados internacionales de alta demanda y con elevados requerimientos de calidad se requiere su producción a gran escala. El incremento de la presencia de dímeros en el producto final afecta su calidad y, por tanto, la eficiencia y eficacia del proceso. El objetivo del presente trabajo fue obtener un modelo matemático que permita relacionar el porcentaje de dímeros con las variables de operación de mayor influencia. Se realizó el ajuste de un modelo de regresión lineal múltiple usando el programa Statgraphics Centurion XVII versión 17.2.00. El modelo se validó con lotes de producción, logrando errores relativos inferiores al 20%. Las variables significativas obtenidas fueron: masa de IgG en el sobrenadante; masa de IgG en el producto de salida del paso de captura de proteína A; pH en el producto de salida del paso de captura de proteína A; pH del producto ajustado y conductividad de salida en la membrana de intercambio aniónico. El modelo permitió encontrar un intervalo de trabajo de las variables de mayor influencia en la formación de dímeros para reducirlos hasta valores inferiores al 3%.

El producto Nimotuzumab, altamente demandado para el tratamiento de cáncer de cabeza y cuello, se produce en el Centro de Inmunología Molecular a partir del cultivo, fermentación y purificación en la línea NS0/H7. El uso de tecnologías adecuadas para la producción a gran escala de anticuerpos monoclonales, de acuerdo con las buenas prácticas de manufactura y con costos de producción razonables, se convierte en una necesidad para introducir anticuerpos terapéuticos en mercados de alta demanda y con elevados requerimientos de calidad. El incremento en la presencia de dímeros en el producto final afecta su calidad, por ende, la eficiencia y eficacia del proceso. Se utilizaron las bases de datos del centro para realizar un análisis de componentes principales, empleando el programa The Unscrambler 10.4 y se determinaron como variables más influyentes en la variabilidad de los resultados: las conductividades del producto ajustado y de salida en la columna de proteína A y membrana SQ y la masa de IgG en sobrenadante y eluato de proteína. Se realizó un análisis de Pareto para determinar los parámetros críticos del proceso, resultando ser: el pH de los tampones de elución y ajuste, del producto ajustado, de la salida en proteína y membrana, la masa de IgG en eluato de proteína y sobrenadante, y la conductividad del producto ajustado.

Las enfermedades transmitidas por alimentos constituyen un problema cada vez más importante a nivel internacional. Según la Organización Mundial de la Salud, entre un 70 y un 80 % de los casos de diarrea que se producen se deben a la ingestión de agua y alimentos contaminados, constituyendo actualmente un desafío, puesto que se desconoce su real incidencia. Motivados por la necesidad de incrementar la vigilancia de los brotes de estas enfermedades y de realizar un adecuado estudios de los mismos, se realizó una investigación epidemiológica observacional descriptiva de un brote de enfermedades transmitidas por alimentos, ocurrido en una instalación hotelera en Varadero, en agosto de 2009. La muestra estuvo constituida por 58 turistas: 29 sanos e igual número de enfermos, a los que se le aplicó la encuesta validada para estudiar estos eventos; de ella se obtuvo la información. Se calculó la Mediana para determinar período de incubación, haciéndolo corresponder con el posible agente etiológico. Se halló la tasa de ataque específica, la cual indicó el alimento sospechoso. Se realizó estudios de laboratorio a muestras de alimentos, especímenes y a manipuladores de alimentos. Se demostró que la no aplicación de las buenas prácticas de manufactura de los alimentos, unido al deterioro del cuadro higiénico de la instalación, fue la causa directa del brote; el agente causal la Samonella D, aislada en el revoltillo y en los especímenes.The diseases transmitted by food are a more and more important problem at the international level. According to the World Health Organization, between the 70 and the 80 % of the diarrheic cases are due to the ingestion of contaminated water and food, being a challenge nowadays, because its real incidence is unknown. Motivated for the necessity of increasing the surveillance of these diseases outbreaks and adequately studying them, we carried out the descriptive, observational, epidemiologic survey of an outbreak of diseases transmitted by foods that took place in a hotel in Varadero, in August 2009. The sample was formed by 59 tourists: 28 healthy and the same number of sick. They applied a survey validated to study these events; the information was taken from it. The media was calculated to determine the incubation period, making it correspond with the possible etiologic agent. We calculated the specific attack rate, indicating the suspecting food. We made laboratory studies of food samples, specimens and food manipulators. It was showed that not applying good practices of food elaboration, together with the worsening of the health situation of the installation, was the direct cause of the outbreak; the causal agent was the Salmonella D, isolated in the scrambled eggs and the specimens.

Neste trabalho analisam-se as características espectrais da turbulência atmosférica na região do Centro de Lançamento de Alcântara (CLA), que sofre a influência de uma falésia e da brisa marítima provinda do oceano, visando obter informações sobre a estrutura turbulenta do local. Determinaram-se os espectros das 3 componentes do vento (u, v e w) na camada limite superficial sobre esse terreno homogêneo, visando aplicações no Projeto e Desenvolvimento dos foguetes de sondagem e do Veículo Lançador de Satélite (VLS) realizado pelo IAE. Os dados foram coletados no mês de agosto do ano de 1999 através de um anemômetro sônico tridimensional. Também se obteve resultados envolvendo as relações σu/u*, σv/u* e σw/u*, todos condizentes com os previstos na literatura.In this work is analyzed the spectral characteristics of atmospheric turbulence in the Alcântara Launching Center (CLA), which suffers the influence of a cliff and of the sea breeze coming from the ocean. The atmospheric spectra were determined for the 3 wind components (u, v, and w) in the superficial boundary layer, to be used for the Research and Developpment (R&D) of sounding rockets and Satellite Launch Vehicle (VLS) build by IAE. The data were collected during the month of August, 1999 using a 3D sonic anemometer. Results involving the σu/u*, σv/u* and σw/u* relations are obtained, and are all consistent with those reported in literature.

Telomerase is an enzyme formed by a protein-ribonucleic acid complex that allows telomere enlargement, non codifying DNA structures. Cellular activation allows its renovation and extends its life time and its possible number of divisions within the organism. These properties of the enzyme are an important factor in prevention and treatment of various diseases. Significant and updated data is collected about the study of this enzyme in ageing process, life time and properties.