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Orientador: Enílson Antonio Sallum Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: A periodontite é uma doença multifatorial que resulta em perda dos tecidos periodontais através de processos inflamatórios e respostas imunológicas do hospedeiro. Sua progressão pode levar à formação de defeitos ósseos, que limitam a resposta dos tecidos ao tratamento periodontal. Para tal, diversas técnicas e biomateriais regenerativos vêm sendo testados para recuperação do aparato periodontal. O objetivo deste estudo foi avaliar a regeneração óssea estimulada através da aplicação de scaffolds compostos por fibroína de seda (FS), nanocelulose bacteriana (nCB) e hidroxiapatita (HAp), em defeitos ósseos criados na calvária de ratos (ø5 mm). Vinte ratos Wistar machos foram aleatoriamente alocados em 2 grupos – 1) Grupo controle (n=10; preenchimento com coágulo sanguíneo) e 2) Grupo teste (n=10; preenchimento com scaffold). Para comparação entre os grupos, foram realizadas medidas histométricas de extensão total do defeito (ETD), área total do defeito (ATD), área não-preenchida (ANP), área de novo osso (ANO), área de tecido conjuntivo (ATC) e área de material remanescente (AMR). As análises estatísticas foram expressas em média ± desvio padrão com intervalo de confiança de 95% e nível de significância de 5% para todos os grupos. A eutanásia foi feita após 60 dias do preenchimento dos defeitos e os resultados demonstraram que o grupo teste apresentou, em média, aproximadamente 48% de preenchimento de ATC, 18% de ANO e 10% de ANP, enquanto o grupo controle 32%, 5% e 60%, respectivamente. Ainda, a AMR foi de aproximadamente 25% da ATD, apontando a lenta taxa de degradação do material. Estes resultados sugerem que a presença do scaffold poderia contribuir para a agregação de células responsáveis pela formação de tecido ósseo e conjuntivo, com maior preenchimento do defeito favorecendo o grupo teste. Dentro dos limites deste estudo, conclui-se que os scaffolds de FS + nCB + HAp tem potencial para favorecer a regeneração óssea, porém há a necessidade de trabalhos adicionais para aperfeiçoamento do biomaterial Abstract: Periodontitis is a multifactorial disease that results in loss of periodontal tissues through inflammatory processes and immune host responses. Its progression can lead to the formation of bone defects, which limit the tissues response to periodontal therapy. Therefore, a variety of regenerative techniques and biomaterials have been tested to recover lost tissues. The aim of this study was to evaluate bone regeneration stimulated through the application of scaffolds produced of silk fibroin (FS), bacterial nanocellulose (nCB) and hydroxyapatite (HAp) in intrabony defects created in rat calvaria (ø5 mm). Twenty Wistar male rats were randomly allocated into 2 groups – 1) Control group (n=10; filled with blood clot) and 2) Test group (n=10; filled with FS + nCB + HAp scaffold). For comparison between groups, histometric measurements of total defect extension (ETD), total defect area (ATD), unfilled area (ANP), new bone area (ANO), connective tissue area (ATC) and area of remaining material (AMR) were performed. Statistical analyzes were expressed as mean ± standard deviation with a confidence interval of 95% and a significance level of 5% for all groups. Euthanasia was performed after 60 days of filling of the defects and the results showed that, the test group presented, on average, approximately 48% ATC filling, 18% ANO and 10% ANP, while the control group presented 32%, 5% and 60% filling, respectively. The AMR was approximately 25% of the total defect area, indicating a slow rate of degradation of the material. These results suggest that the scaffolds may contribute to the aggregation of cells responsible for bone and connective tissue formation, with greater filling of the defect favoring the test group. Within the limits of the study, it is concluded that FS + nCB + HAp scaffolds have potential to favor osseous regeneration, however further studies are necessary to improve the biomaterial Mestrado Periodontia Mestra em Clínica Odontológica CAPES 88887.480715/2020.00

Orientadores: Selma Candelaria Genari, Arnaldo Rodrigues dos Santos Junior Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Colágeno tem sido extensivamente descrito como um material importante na engenharia de tecido ósseo devido a sua biocompatibilidade, baixa antigenicidade e alta força de tensão. No entanto, suportes de colágeno na sua forma pura apresentam algumas desvantagens e, melhorias em suas propriedades físicas, químicas e biológicas são necessárias para suprir essas inadequações. Recentemente, a hidrólise seletiva de carboxiamidas de resíduos de asparagina e glutamina tem sido empregada, por um lado, na obtenção de um aumento no número de sítios negativos e por outro lado, na melhora nas propriedades piezoelétricas do colágeno. Suportes de colágeno aniônico foram obtidos a partir da hidrólise alcalina do pericárdio bovino por 24 (BP24) e 48 (BP48) horas. Osteoblastos bovinos foram cultivados sobre substratos e matrizes de colágeno nativas para o melhor entendimento das interações celulares responsáveis pela boa osteocondutividade e biocompatibilidade descritas em testes in vivo. Os parâmetros analisados foram a adesão e morfologia celular, o processo de mineralização, produção de condroitin sulfato, fosfatase alcalina, e osteocalcina pelas células. A adesão celular verificada para as matrizes BP24 e BP48 foi considerada tão boa quanto àquela descrita para substratos controles, enquanto a proliferação celular (por análise histológica) nas matrizes BP48 mantidas em meio comum demonstrou-se superior àquela encontrada para as matrizes de colágeno nativas e BP24 mantidas nas mesmas condições de cultura. As matrizes BP48 quando estimuladas a mineralizar, demonstraram um decréscimo na proliferação celular, que deve estar relacionado ao início do processo de diferenciação. Todas as membranas permitiram uma proliferação celular em múltiplas camadas, apresentando semelhanças morfológicas, mas quando estimuladas a mineralizar apresentaram osteoblastos com maior número de vesículas em sua superfície. O processo de mineralização foi verificado em todas as matrizes mantidas em meio de mineralização e, principalmente na superfície das mesmas. A análise por EDS comprovou que esses depósitos são compostos por fosfatos de cálcio. A produção de fosfatase alcalina (ALP) pelos osteoblastos foi verificada em todas as matrizes, no entanto, matrizes mantidas em meio de mineralização apresentaram maior produção de ALP, devido à falta do suplemento nutricional para deposição mineral. Novamente, a matriz BP48 favoreceu a produção de ALP, o que deve também estar relacionado ao maior grau de mineralização da mesma. A detecção de osteocalcina em todas as matrizes mantidas em meio de mineralização, devese ao fato de uma maior diferenciação dos osteoblastos. Baseado nos resultados obtidos, a matriz de colágeno aniônico BP48 demonstrou ser mais adequada para o processo de regeneração óssea por apresentar influência na diferenciação osteoblástica e na produção de matriz óssea comparada àquela obtida para a matriz de colágeno nativo, que apresenta propriedades piezoelétricas reduzidas Abstract: Collagen has been extensively described as an important material in bone tissue engineering due to its biocompatibility, biodegradability, low antigenicity, and high tensile strength. However, collagen scaffolds in their pure form have some drawbacks and improvements in its physical, chemical and biological properties are necessary to overcome those inadequacies. Recently, the selective hydrolysis of carboxyamides groups of asparagine and glutamine residues of collagen has been employed to increase the number of negative sites and enhance the piezoelectric properties. Anionic collagen scaffolds were prepared by hydrolysis of bovine pericardium for both 24 h (BP24), and 48 h (BP48). Bovine osteoblasts were cultured on them and on native matrices to understand the cellular interactions responsible for the good osteoconductivity and biocompatibility reported with in vivo tests. Cellular adhesion and morphology, mineralization process, chondroitin sulfate, alkaline phosphatase (ALP) and osteocalcin were the parameters evaluated. Cellular adhesion was considered satisfactory in all matrices, while cellular proliferation (through histological analysis) in BP48 matrices kept in common medium has shown to be higher than the one found for BP24 and native collagen matrices. When BP48 was stimulated to mineralize, they showed a decrease at the proliferation, which may be related to the beginning of the differentiation process of these cells. All matrices allowed multilayered cellular proliferation, presenting several similar characteristics, but when they were stimulated to mineralize, they presented a higher amount of surface¿s vesicles. Mineralization process was observed at all matrices kept in mineralization medium and, mainly at their surfaces. EDS analysis showed that these deposits were composed of calcium phosphates. ALP production was observed in all matrices, despite the fact that matrices kept in common medium showed a higher production of ALP, due to the lack of nutritional supplement for mineral deposition. BP48 matrix favored ALP production, which may be related to its degree of mineralization. Osteocalcin detection in all matrices kept in the mineralization medium should be due to the fact of a higher differentiation of those osteoblasts. Based on these results, BP48 matrix has shown to be more adequate to the bone regeneration process because of its good influence on osteoblastic differentiation and bone matrix production compared to the results obtained for native matrices, which present reduced piezoelectric properties Doutorado Biologia Celular Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: José Mauro Granjeiro Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O objetivo do trabalho foi avaliar comparativamente a neoformação óssea e o perfil de gelatinases 2 e 9 durante o reparo de defeito crítico em crânio de ratos tratados com osso autógeno ou xenoenxerto desmineralizado. Um defeito ósseo de tamanho crítico (8 mm) foi confeccionado no crânio de 90 ratos Wistar (90 dias de vida), e preenchido com osso autógeno (grupo controle) obtido durante a confecção do defeito ou com matriz óssea bovina desmineralizada (grupo teste). Após os períodos de 7, 14, 21, 30 e 90 dias, os animais foram eutanasiados e as peças coletadas para análises histomorfométrica (em hematoxilina e eosina) e zimográfica. A análise paramétrica foi realizada utilizando análise de variância (teste de Tukey se p

Orientadores: Marcio Zaffalon Casati, Antonio Wilson Sallum Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar histometricamente o reparo ósseo obtido após a utilização do plasmarico em plaquetas (PRP) e/ou de membranas não reabsorvíveis no tratamentode defeitos ósseos peri-implantares, do tipo deiscência, criados cirurgicamente em cães. Foram utilizados 1O cães adultos, machos, sem raça definida, nos quais os pré-molares inferiores (P2,P3, P4)e o primeiro molar foram extraídos. Após 3 meses das extrações, os leitosparaos implantes foram criados e posteriormente 2 deiscências ósseas vestibulares bilaterais, sendo então inseridos 4 implantes dentais de titânio. As deiscências foram designadas aleatoriamente às seguintes modalidades terapêuticas: 1) controle; 2) ROG; 3)PRP;4) PRP + ROG. Após 3 meses do tratamento, os animais foram sacrificados e os blocos contendo os implantes e tecidos duros adjacentes processados para secções não descalcificadas. Na análise histométrica, os parâmetros avaliados foram o contato osso-implante, a área de preenchimento ósseo dentro das roscas, a área e a densidade de tecido ósseo formado na região fora das roscas. Análise deVariância foi utilizada para a análise estatística dos dados (pO,O5). Dentro dos limites do presente estudo, pôde-se concluir ue o PRP não exerce efeitos adicionais no reparo ósseo e que a ROG promove uma maior formação óssea ao redor dos implantes dentais Abstract: The aim of the present study was to evaluate, histometrically, the bone healing after utilizing the platelet-rich plasma (PRP) and/ornon-resorbable membranes on the treatment of peri-implant bone defects, deiscense type, surgically created in dogs. Ten mongrel male adult dogswere used; in which the threel ow premolars (P2,P3,P4) and the first molar were extracted. Three months after dental extraction, dental implants sites were created and lately two bilater albuccal bone dehiscence, in which four titanium dental implants were inserted. Dehiscences werer and omly assignedfor the following treatment: 1) contrai; 2) GBR;3) PRP; 4) PRP+ GBR. After 3 months, animais were sacrificed; dental implants and adjacent hard tissues were pracessed for undecalcified sections. At histometrical analysis,the parameter se valuated were bone-implant contact, bone filling area into threads, bone tissue area and bone density formed out the threads. Variance Analysis was utilized for statistical analysis of the data (pO,O5). Within the limits of the present study, it was concluded that PRP do not exert additional effects on bone healing and that guided bone regeneration provides increased bone formation araund dental implants Doutorado Periodontia Doutor em Clínica Odontológica

Orientadores: Antonio Wilson Sallum, Marcio Zaffalon Casati Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: A grande busca da periodontia é regenerar nos indivíduos que portaram patologias periodontais as estruturas de suporte dental devastadas pela doença infecciosa. Nos últimos anos, materiais para enxertos ósseos vêm sendo testados e utilizados em larga escala com esse intuito. Embora o uso de osso autógeno seja comumente considerado o material de enxerto de primeira escolha, existe uma série de limitações ao seu uso. Nesse trabalho propusemos avaliar o efeito da esponja de chitosan/tricálcio fosfato, que é um bio-polímero natural não tóxico e biodegradável, no reparo de defeitos de tamanho crítico em calvária de ratos. Foram utilizados 20 ratos, machos, adultos, da linhagem Wistar. Confeccionaramse, no osso parietal de cada animal, dois defeitos ósseos de tamanho crítico, com broca trefina de 5mm de diâmetro interno, um dos defeitos recebeu a esponja de chitosan (grupo teste) e o outro foi preenchido com osso autógeno particulado (grupo controle positivo). Após 60 dias, cortes histológicos foram executados observando-se, nos defeitos preenchidos com o chitosan, uma média de 37,79% de remanescentes da esponja. Numa análise linear destes defeitos, o preenchimento ósseo ocorreu numa média de 0,57±0,38mm. Nos defeitos preenchidos com osso autógeno (controle positivo), foi registrada uma média de 5,02mm de osso vital. Comparando os dois grupos experimentais em termos percentuais, observamos que no grupo teste o preenchimento com tecido ósseo foi menor que no grupo controle (7,72% e 68,75%) respectivamente, p

Orientador: Francisco Humberto Nociti Junior Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar, clinicamente, o preenchimento de defeitos ósseos ao redor de implantes após a utilização da regeneração óssea guiada (ROG), isolada ou em combinação com enxerto ósseo (E O) mineralizado, no tratamento da peri-implantite induzida por ligaduras em cães. Uma amostra de cinco cães foi selecionada, onde os segundos, terceiros e quartos pré-molares inferiores (P2, P3 e P4) bilaterais foram extraídos. Três meses após a extração dos dentes, dois implantes de titânio foram colocados bilateralmente em cada cão. Os intermediários foram conectados três meses após a colocação dos implantes e induzido o processo de peri-implantite através de ligaduras ao redor dos implantes. As ligaduras e os intermediários foram removidos após um mês e quatro diferentes modalidades de tratamento foram propostas: descontaminação, descontaminação associada a regeneração óssea guiada, descontaminação associada a enxerto ósseo mineralizado e descontaminação associada a regeneração óssea guiada e enxerto ósseo mineralizado. Os níveis de inserção relativos ao redor dos implantes foram obtidos no momento do tratamento (pré-tratamento) e 5 meses após o tratamento (pós-tratamento) da peri-implantite, com o auxílio de um guia de sondagem, fio de aço e paquímetro digital. Estatisticamente, não houve diferença em relação ao preenchimento do defeito ósseo, entre as modalidades de tratamento propostas (p=0,3779). Logo dentro dos limites do presente estudo, as quatro modalidades de tratamento avaliadas mostraram resultados semelhantes, embora maior preenchimento do defeito tenha sido observado clinicamente quando a descontam inação estava associada à técnica de ROG mais enxerto ósseo, seguido por ROG e enxerto ósseo isolados Abstract: The objective of the present study was to evaluate, clinically, hard tissue fill following treatment of ligature-induced peri-implantitis defects in dogs with guided bone regeneration and/or bone grafts. Five dogs were used. The mandibular premolars were bilaterally removed. After 3 months of healing, two titanium implants were placed on each si de of the mandible. Following abutment connection, 3 months later, experimental peri-implantitis was induced by the placement of cotton ligatures in a submarginal position. Ligatures and abutments were removed after one month and the bony defects were randomly assigned to one of the following treatments: debridement, debridement plus guided bone regeneration, debridement. plus mineralized bone graft and debridement plus guided bone regeneration associated with mineralized bone graft. The peri-implant bone defects were clinically measured before and 5 month post-treatments. No statistically significant differences in hard tissue fill were found between the defects treated by any of the procedures (p=0,3779). Within the limits of this study, it can be concluded that ali tested treatments provided similar results in bone defect fill. However, a trend to improved gains was observed when the debridement procedure was supplemented, sequentially, by bone graft, guided bone regeneration and a combination of both Mestrado Periodontia Mestre em Clínica Odontológica

Orientadores: Marcio Zaffalon Casati, Sergio de Toledo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a resposta clínica das lesões de bifurcação proximais tratadas com proteínas derivadas da matriz do esmalte (EMD). Foram selecionados 24 pacientes com pelo menos uma lesão de bifurcação proximal classe II apresentando profundidade de sondagem (PS) = 5 mm e presença de sangramento a sondagem. As furcas foram divididas aleatoriamente em 2 grupos: Grupo controle (n=20) ¿ acesso para raspagem e alisamento radicular e aplicação de EDTA 24% (PrefGel®); Grupo Teste (n=20) ¿ acesso para raspagem e alisamento radicular + aplicação de EDTA 24% + aplicação das EMD (Emdogain®). Os pacientes foram avaliados quanto ao Índice de Placa (IP) e Sangramento à Sondagem (SS), Profundidade de Sondagem (PS), Posição da Margem Gengival (PMG), Nível Clínico de Inserção Vertical e Horizontal Relativo (NICVR e NICHR, respectivamente), Nível Ósseo Vertical e Horizontal (NOV e NOH) e fechamento da lesão. As avaliações foram realizadas antes do tratamento, 2, 4 e 6 meses após. Aos 6 meses de acompanhamento o ganho de NICVR dos grupos controle e teste foram de 0,63 e 0,74 mm, enquanto o ganho de NICHR foram 1,13 e 1,64 mm, ambos sem diferença entre os grupos. O ganho de NOV e NOH para os grupos controle e teste foram de 0,98 e 0,85 mm e 0,94 e 1,08 mm respectivamente, também sem diferença estatística entre os grupos. Na avaliação do número de bifurcações fechadas aos seis meses, no grupo teste houve fechamento de 4 lesões, enquanto no grupo controle não ocorreu nenhum fechamento (p

Orientador: Luis Augusto Passeri Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: o sucesso do tratamento, através da colocação de implantes, exige leitos receptores adequados, para que ocorra uma osseointegração ideal. O equipamento utilizado para a confecção destas cavidades deve ser o mais preciso possível, devendo promover cortes com paredes bastante regulares e sem áreas de necrose. Com o objetivo de avaliar histologicamente, o efeito das brocas para implantes sobre o tecido ósseo utilizou-se sete cães, confeccionando-se, na mandibula de cada um deles, orifícios para colocação de implantes, seguindo a seqüência de brocas sugerida pelos fabricantes dos sistemas Nobel Biocare, ImpJamed e 3i. Após a confecção das cavidades, removeu-se o fragmento ósseo, e executou-se cortes semi-seriados de 6 f.lIll, no sentido don longo eixo dos cortes, e coloração com hematoxilina e eosina. A avaliação microscópica mostrou cortes regulares com poucas áreas de necrose e esquírolas ósseas, evidenciando que a técnica utilizada foi adequada, atestando a qualidade das brocas Abstract: The success of the treatment through the placement of osseointegrated implants will require appropriate cavities so it happen an ideal osseointegration. The equipment that was needed to make these cavities must be the most accurate promoting holes with uniform wall and without necrosls area. With intention to avaluate the histollogical effects of burs over the osseous tissue it was used eight dogs, made in the lower jaw holes to place the implants following the sequence of burs suggested by manufacturers After the holes were made the osseous fragments were removed and made semiseriate .incisions of 6 JlIIl following the long axis of the holes and stained with heinatoxiline and eosine A microscopic avaluation showed sharp incision, few necrosis area and bone fragments meaning that applied technique was adequated and proving the quality of the burs Mestrado Mestre em Odontologia

Orientador: Francisco Humberto Nociti Junior Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: o objetivo deste estudo foi avaliar histometricamente em cães, a utilização de uma combinação do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) e fator de crescimento semelhante à insulina - 1 (IGF-1) ffente à colocação de implantes dentais imediatos. Oito cães adultos foram utilizados neste estudo. Sob anestesia geral, os segundos, terceiros e quartos pré-molares inferiores (P2, P3, P 4) foram extraídos e os alvéolos mesiais de P3 e P 4 dos dois lados da mandíbula receberam implantes dentais de titânio. Aleatoriamente foram determinados o lado teste e o controle, sendo que para o lado teste os implantes receberam 0,10 m1 de gel de metilcelulose a 4%, contendo 5 ~g/m1 de cada um dos fatores PDGF e IGF-1 antes de sua colocação, enquanto os implantes do lado controle receberam apenas 0,10 m1 de gel de metilcelulose a 4% (placebo). Os cães receberam injeção de solução de calceína verde nos períodos de O, 7, 15, 30, 45, 60, 75 e 90 dias para marcação do tecido ósseo neoformado. Os animais foram sacrificados nos períodos de 3, 8 e 12 semanas após a colocação dos implantes. Secções não descalcificadas foram avaliadas histometricamente para as variáveis área de tecido ósseo por rosca do implante, extensão do tecido ósseo em contato direto com a superfície do implante dental e intensidade da marcação do tecido ósseo neoformado. Os dados obtidos foram comparados estatisticamente pelo teste t de Student «.(=0,05) entre os grupos teste e controle para cada tempo experimental e pelo ANOV A nas comparações intragrupos «.(=0,05). Encontrou-se diferença estatística significativa (p=0,002549) para o parâmetro extensão do tecido ósseo em contato direto com a superfície do implante dental entre os grupos teste (22,4 :!: 13,7%) e controle (17,2 :!: 13,6%) no tempo 3 semanas; e entre 3 e 12 semanas (127,8 :!: 42,59 e 56,7 :!: 26,34 respectivamente, em escala de cinzas) para o grupo. teste na variável intensidade da marcação do tecido ósseo neoformado. Ao final do estudo concluiu-se que a combinação de PDGF e IGF-I, dentro das condições experimentais empregadas, demonstrou participação positiva no período inicial da reparação óssea Abstract: The purpose of the present study was to evaluate bone repair around dental implants placed into immediate extraction sockets, associated or not with local application of a combination of platelet derived growth factor (pDGF) and insulin like growth factor - 1 (IGF-1) on the imp1ant surface. Eight adult dogs were used. Under sodium pentobarbithal inserted bilatera1ly. Before implantation, two of the four implants received a single application of 5~g/m1 ofPDGF and IGF-1 delivered in 0,10 m1 of 4% methylcellulose gel. During the experimental period a 2% calcein green solution was administered O, 7, 15, 30, 45, 60, 75 and 90 days after implant insertion. The animals were sacrificed by a lethal injection of sodium penthobarbital in the periods of 3, 8 and 12 weeks after implant insertion. Undecalcified sections were obtained, submitted to histometric analysis and the results analysed by statistical t test (a=O,05) and ANOV A in intragroups analyses (a=0,05). Statistically different results between test and control groups (22,4 i: 13,7 and 17,2 i: 13,6%, respectivelly) were observed for bone/implant contact at 3 weeks timepoint and for intensity of labelled new bone between 3 and 12 weeks (127,8 i: 42,59 and 56,7 i: 26,34, gray scale values) intragroup for test group. It was concIuded that the combination of PDGFIIGF-1 at present experimental conditions activelly took part of the inicial phase of bone repair Mestrado Periodontia Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Jose Ricardo de Albergaria-Barbosa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar, através de análise histológica e histométrica a interferência da matriz óssea bovina desmineralizada e da proteína óssea morfogenética no processo de regeneração óssea guiada em defeitos perimplantares. Para isso foram instalados três implantes em cada tíbia de quatro cães, sendo que dois cães foram sacrificados no 21°, e dois no 42° dias pós-operatório. Foi confeccionado um defeito perimplantar a cada implante, que foram preenchidos e recobertos com membrana de colágeno. No grupo controle o defeito foi preenchido com osso autógeno particulado, no grupo MOS com matriz óssea bovina e no grupo SMP com um "pool" de SMPs adsorvido à hidroxiapatita. A análise histológica mostrou neoformação óssea preenchendo totalmente os defeitos perimplantares no período pós-operatório de 21 dias, com maior maturação óssea no período pós-operatório de 42 dias, nos três grupos estudados. Os dados histométricos revelaram que a média de neoformação óssea no período de 42 dias foi significativamente superior a média de neoformação óssea no período de 21 dias. Entre os grupos houve maior neoformação óssea para o Grupo BMP, nos dois períodos. Porém só houve diferença estatística significante em relação ao Grupo MOS no período pós operatório de 21 dias. Diante da metodologia empregada, a SMP induziu maior neoformação óssea do que os outros grupos e que a BMP e MOS empregadas comprovaram sua efetividade como substitutos ósseos Abstract: The aim of this study was evaluate histologically and histometrically the effect of a bovine demineralized bone matrix and bone morphogenetic protein on guided bone regeneration process in bone fenestration defects associated with dental implants. Therefore, three titanium implants were placed in each tibia of four dogs and the defects were filled with autogenous bone, bovine demineralized bone matrix (BBM) and a "pool" of bone morphogenetic protein bound to hidroxyapatite. Ali defects were protected with collagen membranes. After the periods of three and six weeks the animais were sacrified. The histological results showed bone neoformation filling totally the defects at three weeks, and greatest bone maturation at six weeks in ali groups. The histometric results revealed better scores of bone deposition at six weeks with estatistical difference at three weeks, in ali samples. Among the groups, BMP group was the one that showed the best results, in both periods. However, there was only estatistical difference to the MOB group at the period of three weeks. Within the limits of the present study, the BMP provided better scores of bone deposition, and that the BMP and BBM can be used like bone substitutes Mestrado Cirurgia e Traumatologia Buco-Maxilo-Faciais Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Jose Ricardo de Albergaria-Barbosa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O desenvolvimento de materiais que possam induzir a neoformação de tecido ósseo perdido evita a necessidade de uma segunda cirurgia para obtenção de enxerto ósseo autógeno. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi analisar histologicamente o efeito de dois tipos de matrizes ósseas desmineralizadas, sobre o processo de reparo ósseo em calvária de coelhos. Foram utilizados dezoito coelhos e em cada calvária foram preparadas duas cavidades ósseas cirúrgicas, sendo uma do lado direito e a outra do lado esquerdo da sutura parietal. As cavidades do lado esquerdo foram utilizadas como controle e preenchidas apenas com sangue do animal. No grupo I, as cavidades do lado direito foram preenchidas com uma matriz óssea desmineralizada de origem bovina (OSSEOBOND 'MARCA REGISTRADA¿). No grupo II, as cavidades do lado direito foram preenchidas com uma matriz óssea desmineralizada de origem humana ('DEMBONE POT. TM¿). Os animais foram sacrificados nos períodos pós-operatórios de 3, 7 e 15 semanas. A análise das amostras sob microscopia ótica revelou que no grupo I as partículas foram reabsorvidas mais rapidamente que no grupo II. Nos períodos de 7 e 15 semanas a neoformação óssea foi melhor nos grupos I e II em relação as cavidades de controle. Nos grupos I, II e nas cavidades controle a neoformação óssea foi melhor evidenciada após 15 semanas, apesar de não ter ocorrido regeneração óssea completa em nenhum dos grupos estudados Abstract: The development of materials that can substitute lost bone tissue avoid the necessity of a second surgery to remove an autologous bone graft. Therefore, the aim of this study was to histologically analysis the effect of two different demineralized bone matrix on the bone regeneration process in rabbits skulls. Eighteen rabbits were used, and on each calvaria two surgical bone defects were created, one on the right si de and the other on the left side of the parietal suture. The cavities on the left side were used like control and filled just with the animal blood. In group I, the cavities on the right side were filled with a bovine demineralized bone matrix (Osseobond). In group II, the cavities on the right side were filled with a human demineralized bone matrix (Dembone). The animais were sacrificed in postoperative period of 3,7, e 15 weeks. Histologic analyses of the s~cimens on light microscope revealed that group I the partides were reabsorbed faster than in group II, as seen after 3 and 7 weeks. After 7 and 15 weeks bone repair was better in group I and II, in contrast with control cavities. Group I, II and control cavities had better bone repair after 15 weeks despite, although there was not complete bone repair in none of the groups Mestrado Cirurgia Buco-Maxilo-Facial Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Jose Ricardo de Albergaria-Barbosa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: Esse trabalho teve como objetivo a comparação histológica e biomecânica de dois tipos de superfícies de implantes cilíndricos de titânio comercialmente puros. Para esse estudo foram implantados cilindros de titânio com 6 mm de comprimento e com 3 sulcos regulares em forma de V, na metáfise tibial de 8 coelhos da raça Nova Zelândia. A tíbia esquerda de cada animal recebeu dois implantes com superfície usinada e a tíbia direita recebeu dois implantes com superficie rugosa induzida por jateamento. A estabilidade inicial foi consegui da através do travamento do pescoço do implante na cortical óssea, ma vez que o diâmetro dos orificios ósseos preparados era cerca de 20 a 40 ].lm maior que o diâmetro externo dos cilindros. Os animais foram analisados e sacrificados nos períodos de 21 e 42 dias. Os testes de torque foram realizados em 6 animais e após o sacrificio foram retirados os fragmentos ósseos contendo os implantes, para que as peças fossem descalcificadas e analisadas por microscopia ótica. Os outros 2 animais não foram submetidos ao teste de torque com a finalidade de manter a interface intacta, pois essas peças foram preparadas para obter cortes não descalcificados. Os resultados mostraram que não houve diferenças histológicas e biomecânicas significantes entre os dois tipos de superficies estudadas. Os implantes, nos dois tipos de superficies analisadas e nos dois períodos estudados, mostraram sinais de terem áreas osseointegradas. Concluiu-se também, que o torque necessário para os desrosqueamento dos implantes aumentou em função do tempo Abstract: The purpose of the present study was the histological and biomechanical comparison of two types of surface in commercially pUfe titanium cylinders implants. For this study the titanium implants with 6 mm oflength and 3 regular V Shaped furrows, were inserted in the tíbial metaphysis of 8 New Zealand rabbits. The left tibia, of each animal, received 2 machined surfaced cylinders and the right tibia received 2 sandblasted rough surfaced cylinders. The early stability was reached by the joining of the implant's neck in the cortical bone, because the ~diameter of the holes prepared in the bone was about 20 to 40 pm larger than the outer diameter of the cylinders. The animais were analized and killed at 21 and 42 days after implantation. The removal torque test was done in 6 animais and after the sacrifice the bone fragments that contained the implants were removed for deca1cifed sectioning preparation for light microscopic analysis. The other 2 animais were not submitted to the removal torque test, in order to preserve the intact interface, because these specimens were prepared for undeca1cified sectioning techinique. The results showed no histological and biomechanical differences between both surfaces analyzed. The implants, in both surfaces and in both times analyzed, showed signs of osseointegrated areas.It was concluded that the removal torque for the implants increased in function oftime offollow-u Mestrado Cirurgia e Traumatologia Buco-Maxilo-Faciais Mestre em Clínica Odontológica

Orientador : Francisco Humberto Nociti Junior Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar histometricamente a influência da fumaça de cigarro sobre o reparo e a densidade óssea ao redor de implantes de titânio colocados em tíbias de ratos. Trinta e quatro ratos Wistar, adultos, receberam em cada tíbia um implante composto por titânio comercialmente puro e de superfície usinada (2,2 mm de diâmetro e 4,0 mm de comprimento). Após a colocação dos implantes, os animais foram aleatoriamente divididos em 2 grupos experimentais: grupo 1- animais que não foram expostos à fumaça do cigarro (controle - n=19) e grupo 2- exposição à fumaça de 10 cigarros por três períodos diários de 8 minutos (teste - n=15). Os animais foram sacrificados 60 dias após a colocação dos implantes. Secções não descalcificadas foram obtidas e avaliadas em re}ação aos seguintes parâmetros: densidade óssea na região adjacente ao implante (500 µm) (DO), área do tecido ósseo dentro dos limites das roscas de cada implante (AO) e extensão de tecido ósseo em contato direto com a superfície do implante (CD). Os resultados foram obtidos e avaliados separadamente na região cortical (região A) e medular (região B). Os animais do grupo 2 apresentaram uma redução estatisticamente significante da DO na região B, quando comparados ao grupo 1 (17,57% +- 6,45/ 11,30% +- 6,81, grupos 1 e 2, respectivamente) (P0,05). Em ambas as regiões avaliadas, os animais do grupo 2 mostraram uma redução estatisticamente significante da AO (84,73% +- 4,77 / 79,85% +- 6,17, região A dos grupos 1 e 2, respectivamente / 32,01% +- 6,62 / 20,71% +- 8,57, região B dos grupos 1 e 2, respectivamente - P0.05). In contrast, the BA c1ose to the implant significantly decreased in both zones for the group-2 animals (84.73% +- 4.77 / 79.85% +- 6.17, Zone A in groups 1 and 2, respectively / 32.01% +- 6.62 / 20.71 % +- 8.57, Zone B in groups 1 and 2, respectively - P

Orientadores: Silvana Pereira Barros, Darcy de Oliveira Tosello Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O hormônio paratireóideo (PTH), quando administrado de maneira intermitente, promove anabolismo ósseo. Modelos experimentais em ratos, utilizando PTH intermitente, demonstraram que o anabolismo ósseo promovido diminui a perda óssea ocasionada por periodontite induzida, e acelera o reparo ósseo ao redor de implantes osseointegrados. Neste trabalho, nosso objetivo foi analisar a reparação óssea de defeitos em calotas cranianas de ratos que receberam PTH de maneira intermitente. Nas calotas cranianas de 32 ratos Wistar foram feitos defeitos de 4 mm de diâmetro. Após a cirurgia, 16 ratos receberam 40µg/kg de PTH três vezes por semana, enquanto 16 ratos (controle) receberam 40µg/kg do veículo do PTH com a mesma freqüência. Os animais foram sacrificados após 4 semanas e suas calotas foram removidas, radiografadas e processadas para análise histomorfométrica. As radiografias foram analisadas por meio de um fotodensitômetro, e os valores obtidos, tanto na morfometria quanto da densidade radiográfica, foram submetidos a teste estatístico (teste t). Os resultados mostraram que no grupo tratado com PTH, o tamanho do defeito residual foi menor ( 1,5 mm± 0,73) em relação ao grupo controle (1,98 mm ± 0,68) (p

Orientador: Antonio Fernando Martorelli de Lima Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: Este estudo avaliou o resultado clínico e radiográfico do tratamento de defeitos intra-ósseos por regeneração tecidual guiada com uso de barreira biodegradável, comparando com defeitos similares tratados sem a colocação de barreira - delineamento split mouth. Foram selecionados 30 defeitos com 2 ou 3 paredes ósseas em caninos e pré molares inferiores em 10 pacientes. No exame inicial e 8 meses após durante a reentrada cirúrgica, foram obtidas imagens digitalizadas e apurados os parâmetros Nível Clínico de Inserção (NCI), Nível da Margem Gengival (NMG),. Profundidade de Sondagem (PS), Nível do Defeito Ósseo (NDO) e Nível da Crista Óssea Alveolar (NCOA). Foram realizados retalhos mucoperiosteais para a instrumentação periodontal e os defeitos aleatoriamente divididos em sítios teste tratados com barreira e controle. As imagens digitalizadas foram interpretadas por subtração radiográfica para determinação da Densidade Óptica (DO) e Área de Preenchimento (AP). Os valores médios para todos os parâmetros foram testados pela análise de. variância e teste t de Student. Os resultados mostraram diferença estatística significativa (P < 0,01) entre os exames inicial e final para os parâmetros biométricos NCI, NMG, PS e NDO nos sítios teste e controle. Houve diferença estatística significativa (P < 0,01) para o parâmetro clínico NDO e radiográficos DO e AP entre os sítios teste e controle. Estes achados mostraram que ocorreu maior preenchimento ósseo nos sítios tratados seguindo os princípios da regeneração tecidual guiada Abstract: The aim of this clinical and radiographic study was to evaluate, in a split mouth design, the results of guided tissue regeneration using a biodegradable membrane comparing to conventional therapy in intra-bony defects. Thirty defects of 2 or 3 bony walls in mandibular canines and premolars were selected in 10 patients. Clinical Attachment Levei (CAL), Gingival Margin Levei (GML), Probing Oepth (PO), Sone Oefect Levei (SOL) and Alveolar Sone C resta I Levei (ASCL) were assessed at baseline and reentry procedures after 8 months. Mucoperiosteal flaps were raised to periodontal instrumentation and sites randomized in test treated with the barrier or control sites. Digital subtraction radiography were also taken to assess differences in Optical Oensity (00) and Sone Fill Area (SFA). ANOVA and Student t test were employed to test the differences between means values for ali parameters. The results showed statistically significant difference (P < 0.01) between baseline and reentry for CAL, GML, PO and SOL in both groups, and statistically significant (P < 0.01) greater reduction in SOL, greater gain 00 and greater SFA between test and control sites. These findings shows more bone fil! in sites treated by guided tissue regeneration procedures Mestrado Periodontia Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Luis Augusto Passeri Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: o objetivo deste trabalho foi analisar histologicamente, em mandíbulas de cães, o processo de reparação óssea de defeitos produzidos cirurgicamente com broca tronco-cônica, serra oscilatória e serra reciprocante. Foram utilizados onze cães e em cada um deles confeccionou-se, bilateralmente, defeitos ósseos de 5 mm de profundidade. Os animais foram divididos em três grupos e sacrificados nos períodos pós-operatórios de 10, 20 e 40 dias. A análise dos espécimes sob microscopia óptica revelou neoformação óssea em todas as amostras dos três grupos, embora exibindo índices diferentes. O grupo broca tronco-cônica apresentou menor índice de reparação óssea quando comparado aos grupos serra oscilatória e serra reciprocante. Esta diferença foi mais expressiva nos períodos pós operatórios de 10 e 20 dias Abstract: o objetivo deste trabalho foi analisar histologicamente, em mandíbulas de cães, o processo de reparação óssea de defeitos produzidos cirurgicamente com broca tronco-cônica, serra oscilatória e serra reciprocante. Foram utilizados onze cães e em cada um deles confeccionou-se, bilateralmente, defeitos ósseos de 5 mm de profundidade. Os animais foram divididos em três grupos e sacrificados nos períodos pós-operatórios de 10, 20 e 40 dias. A análise dos espécimes sob microscopia óptica revelou neoformação óssea em todas as amostras dos três grupos, embora exibindo índices diferentes. O grupo broca tronco-cônica apresentou menor índice de reparação óssea quando comparado aos grupos serra oscilatória e serra reciprocante. Esta diferença foi mais expressiva nos períodos pós operatórios de 10 e 20 dias Mestrado Cirurgia Buco-Maxilo-Facial Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Antonio Fernando Martorelli de Lima Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: A extensão e previsibilidade da regeneração periodontal com uso de barreiras físicas no tratamento de defeitos infra-ósseos foram avaliadas em vários estudos. Este estudo avaliou os resultados do ganho no nível clínico de inserção (NCI), redução na profundidade dos defeitos ósseos (PDO), retração da margem gengival (RMG) e controle de placa através dos Índices de Placa (IPI), Gengival (IG) e de Sangramento à Sondagem (ISS). Dezoito defeitos infra-ósseos de 2 a 3 paredes foram divididos em sítios teste (n=10) e controle (n=8). Após 6 meses, nos sítios teste foi observado um ganho no NCI, em média, de 5,0 '+ ou ¿' 1,3 mm com redução na PDO de 1,25 '+ ou ¿' 0,68 mm. Nos sítios controle, observou-se um ganho médio no NCI de 3,6 '+ ou ¿' 1,06 mm com redução na PDO de 0,56 '+ ou ¿' 0,18 mm. Houve diferença estatística significante entre os grupos tratados (p

Orientador: Fausto Berzin Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: Este traballio verificou a capacidade de uma membrana de colágeno, associada ao extrato etanólico de própolis (EEP) a 10 %, em impedir a entrada de tecidos moles em falhas ósseas criados nas fibulas de ratos albinos Wistar, com idade média de 50 dias e peso médio de 175 gramas. As falhas ósseas foram criadas na diáfise das fibulas esquerdas e direitas através da retirada ,de um fragmento de 3,0 a 3,5 mm de comprimento, na região de transição entre os terços proximal e médio. A membrana embebida em 15 'mu' l de EEP a 10 % foi adaptada no local do defeito das fibulas esquerdas de 20 animais, enquanto que as fibulas direitas permaneciam sem membrana, servindo portanto, para observar a taxa de regeneração espontânea do osso. Ainda como controle, em 20 animais adaptou-se no defeito ósseo, a membrana embebida em 15 'mu' l de etanol a 80 % e nos outros 20 animais, a membrana embebida 15 'mu' l de solução fisiológica. Fez-se a dosagem da fosfatase alcalina no soro dos animais, uma vez que esta enzima encontra-se relacionada com o processo de consolidação de fraturas. Os animais foram sacrificados 14 e 28 dias após a cirurgia; seus membros posteriores esquerdo e direito removidos; radiografados; e as fibulas dissecadas e processadas para a análise histológica. Os cortes foram feitos em sentido longitudinal e corados em H.E. O sangue para se dosar a fosfatase alcalina foi coletado no momento do sacrificio. Os resultados mostraram que a taxa de regeneração do osso foi pequena, não havendo diferenças significativas entre as fibulas direitas (controle) e as esquerdas (implante de membrana). A membrana mostrou-se bastante eficiente em evitar a entrada de tecidos moles, especialmente tecido muscular, no interior do defeito ósseo, quando embebida em EEP a 10% e em solução fisiológica. Porém, embebida em álcool a 80 %, não foi eficiente em impedir a invasão do defeito osseo pelos tecidos circunjacentes. Observou-se pouca formação de cartilagem na área da fratura, contrariamente ao que geralmente ocorre na consolidação de fraturas de osso longos. A fosfatase alcalina mostrou-se elevada nas fases iniciais, decrescendo à medida que o processo de regeneração se processa. Pôde ser constatado que a membrana de colágeno, quando associada ao EEP a 10 %, foi eficiente em impedir que tecidos moles circunjacentes invadissem o defeito ósseo. Entretanto, a utilização desta membrana parece retardar o processo de consolidação Abstract: A collagen membrane associated to 10% propolis ethanolic extract (PEE) was evaIuated in its ability to prevent the penetration of soft tissues into bone defects made in aIbino Wistar rats with an average age of 50 days and weigbing around 175 grams. The osseous defects were made in the diaphysis of the left and right fibulae by removing a 3.0 by 3.5 mm long fragment from the transitional region between the proximal and medium thirds. Soaked in 15 'mu' l of 10% PEE, the membrane was applied to the defect of the left fibulae of 20 animals, while the right fibulae remained without a membrane in order to provide a site for the observation of the rate ofbone spontaneous repair. Still as control, 20 animaIs had the osseous defects covered by a collagen membrane soaked in 15 'mu' l of 80% ethanol, while a collagen membrane soaked in 15 'mu' l of saline was used in the fibula defects of other 20 animaIs. The serum alkaline phosphatase was titrated in the animaIs, once that enzyme is related to the process of bone repair. The animals were sacrificed in 14 and 28 days after the surgery; their left and right hind limbs were removed and x-rayed, and the fibulas were dissected and histologically processed. Cut longitudinally, the sections were stained by H.E. Blood was collected at the time of sacrifice for the titration of al.kalinephosphatase. The results showed a low rate of bone repair without any signillcant differences between the right (control) and left (membrane implant) fibulae. When soaked in 10% PEE, the membrane was very efficient in preventing the penetration of soft tissues, especially muscular tissue, into the osseous defect; however, when soaked in 80% ethanol it was not efficient in preventing the invasion of the defect by the surrounding tissues. Cartilage formation was small in the fracture area, in opposition to what generally occurs in the repair of long bones. Alkaline phosphatase was high in the initiaI stages, decreasing as the regeneration process continued. When associated to 10% PEE, the collagen membrane was efficient in preventing the surrounding soft tissues to invade the osseous defect. However, the use of such a membrane seems to slow the repair process Doutorado Anatomia Doutor em Biologia Buco-Dental

Orientador: Jose Angelo Camilli Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Procedimentos que permitem a reconstrução e acelerem o reparo de fraturas ósseas são de grande importância clínica. Sendo assim, considerando as vantagens oferecidas pelos biomateriais como substitutos aos enxertos ósseos autógenos e os efeitos positivos do laser de baixa energia no processo de regeneração óssea, as propostas do presente trabalho foram estudar a contribuição do laser de baixa energia no processo de reconstrução de falhas ósseas tratadas com enxerto ósseo autógeno, assim como, analisar "in vitro" e "in vivo" a eficácia da cerâmica de fosfato de cálcio como possível substituta aos enxertos ósseos autógenos. O resultado da laserterapia na dosagem estabelecida em nosso trabalho demonstrou que a mesma acelerou a osteogênese na área de enxertia somente nos primeiros períodos do tratamento e esse efeito foi dose dependente.Enquanto isso, o estudo "in vivo" da biocerâmica demonstrou que o implante foi tão eficiente quanto o enxerto ósseo autógeno no processo de reconstrução da falha óssea. No estudo "in vitro", os osteoblastos humanos apresentaram boa interação com a cerâmica, apresentando maior preferência pelas superfícies mais irregulares do material Abstract: Procedures that allow the reconstruction and speed up the bone repair are of great clinical importance. Being thus, considering the advantages offered for the biomaterials as substitute to the autogenous bone graft and the positive effect of the low-power-laser in the process bone regeneration, the proposals of the present work had been to study the contribution of the low-power-laser in the process of reconstruction of bone defect treated with autogenous bone graft, as well as, to analyze "in vitro" and "in vivo" the efficiency of calcium phosphate ceramic as possible substitute to the autogenous bone graft. The result demonstrated that laser irradiation at the grafted site stimulated osteogenesis during the initial stages of the healing process in na skull defect and this effect was dose dependent. While this, the "in vivo" study of the bioceramic demonstrated that the implantation was so efficient how much autogenous graft in the bone reconstruction process. In the study "in vitro", the human osteoblast had presented' good interaction with ceramics, presenting bigger preference for the surfaces most irregular of the material Doutorado Anatomia Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Eliane Maria Ingrid Amstalden Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A necessidade da utilização de enxertos naturais e/ou materiais sintéticos para auxiliar no reparo ósseo é diretamente proporcional a perda tecidual nas lesões. A administração de substâncias antibióticas é necessária para prevenir, ou mesmo combater a ação de agentes bacterianos que possam vir a retardar o reparo tecidual. Este estudo teve como objetivo avaliar a aplicação de um polímero bioabsorvível associado à uma droga antobiótica na regenereção óssea. Foram realizados implantes ósseos de microesferas da blenda de poli(L-ácido lático)PLLA/poli(óxido de etileno)PEO na composição 80:20 associadas ao cloridrato de vancomicina e não associados ao cloridrato de vancomicina em ratos. Os implantes foram colocados em cavidades de 3 mm de diâmetro realizadas em tíbias de ratos da linhagem Wistar. Grupos com 5 animais cada. foram submetidos a períodos experimentais de 2 e 4 dias e 1, 2, 4, 8, 16 e 32 semanas. Os achados morfológicos foram semelhantes em ambos grupos. Houve primeiramente a formação de malha de fibrina e hemorragia ao redor das microesferas, as quais foram gradualmente sendo substituídas por tecido de granulação. A partir do quarto dia, houve a formação inicial de matriz óssea envolvendo as microesferas centripetamente, tornando-se mais evidente e madura da primeira até a trigésima segunda semana de implantação. A comparação entre os achados histomorfométricos e semí-quantitativos, quanto à formação óssea, demonstraram não ter havido diferença significativa entre os dois grupos. Reações de rejeição tecidual não foram observadas. Pode-se concluir, portanto, que além da evidente osteointegração das microesferas de PLLA/PEO, a associação com o cloridrato de vancomicina não prejudicou a regeneração óssea podendo ser este material utilizado como enxerto, bem como ser útil na prevenção de infecções bacterianas Abstract: The use of natural graft and synthetic materials to help bone regeneration is directly relative to cause of bone injury and bone requirement to compose a graft. The antibiotics drugs management is necessary to prevent and combat bacterial agents that could retard the tissue repair The aim of this study was to evaluate the bioabsorbable polymeric implants antibiotic associated behavior during the bone healing. Poly(L-lactic acid)PLLA/poly(ethylene oxide)PEO microspheres blends 80:20 vancomicyn associated bone implants, was compared with PLLA/PEO blend without vancomycin. The implants were inserted in a 3 mm proximal tibiae defect in adult Wistar rats. Periods from 2 and 4 days and 1. 2, 4, 8 16 and 32 weeks were evaluated in 5 animals per group. The histological findings were similar among groups. A fibrin net and hemorrhage were observed primarily around the microspheres and both were progressively replaced by granulation tissue. In four-day implant, the initial bone formation around microspheres was noted. The growth of bone tissue was initially characterized by wolven bone with progressive maturation to lamellar bone, centripetally to microspheres group. The quantity of new bone growth, measured by histomorphometric method and semi-quantitative analysis showed no differences between groups in each experimental interval. Therefore we conclude that mixing vancomycin chloridrate into PLLA/PEO microspheres did not affect the bone regeneration. Besides, the PLLA/PEO vancomycin associated microspheres allowed the osteointegration. For those reasons, the material could be used as bone graft, helping the bone repair In addiction, the associating with antibiotic drugs could be useful to prevent infections during bone healing Doutorado Ciências Biomédicas Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Antonio Wilson Sallum Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O ácido hialurônico (HA) é um importante componente da matriz extracelular e desempenha importante papel na cicatrização. Além de sua função durante o processo cicatricial ele também atua na homeostasia dos tecidos e no reparo ósseo. Devido as suas características propomos este estudo com o objetivo de avaliar o efeito do tratamento de defeitos ósseos com ácido hialurônico em ratos normais e diabéticos. Para este trabalho foram utilizados 64 ratos Wistar machos, sendo que 32 destes animais tiveram um quadro de diabetes induzida por meio de injeção única intraperitoneal de estreptozotocina (STZ) (60mg/Kg). Os animais somente foram considerados diabéticos quando o nível de glicose no sangue ultrapassasse 250mg/dL. Dois defeitos de tamanho crítico, de 5mm de diâmetro, foram confeccionados na calota dos animais e os tratamentos 1) gel de HA a 1%; 2) gel de HA a 1% associado a esponja de colágeno absorvível (ACS); 3) ACS; 4) controle (coágulo sanguíneo) foram aleatoreamente distribuídos entre os defeitos. Após 60 dias do procedimento cirúrgico os animais foram sacrificados e os especimes passaram por processamento histológico para posterior avaliação histométrica. Análise histométrica foi realizada tomando duas medidas lineares nos defeitos: tamanho inicial e tamanho final do defeito. A quantidade de preenchimento do defeito foi obtida pela diferença entre os tamanhos inicial e final do defeito e os dados obtidos analisados estatisticamente. Para análise dos dados foram utilizados o teste t de Student para comparação entres os pesos inicial e final dos animais. O teste ANOVA comparou os níveis glicêmicos dos animais diabéticos antes e após a administração de STZ e no sacrifício, e o teste de Tukey foi utilizado para detectar as diferenças significativas. Para comparação dos tratamentos o teste ANOVA one-way foi usado com o teste de Bonferroni post hoc. O nível de significânica foi estabelecido a 5%. Os animais apresentaram ganho de peso significativo (p0.05). Dentro dos limites deste estudos pode-se concluir que o HA pode ser utilizado como adjunto no tratamento de defeitos ósseos. Abstract: Hyaluronic acid (HA) is an important component of extracellular matrix and has an important role in wound healing. Besides its role in wound healing it also participates in tissue hemostasis e bone repair. Due to these characteristics this study was suggested with the aim of evaluating the effects of HA treatment of bone defects in normal and diabetic animals. Sixty-four male Wistar rats were used in this study, and 32 of these animals underwent diabetes induction by a single intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ) (60mg/Kg). The animals were considered diabetic only if their glucose levels were higher that 250mg/dL. Two 5mm round defects were created in the calvaria of the animals and four treatments were randomly distributed: 1) 1% HA gel, 2) 1% HA gel soaked absorbable collagen sponge (ACS), 3) ACS and 4) control (blood clot). Sixty days post-surgery the animals were sacrificed and the specimens processed for histometric analysis. Histometric analyses were performed and 2 measurements were taken: initial and final sizes of the defect. The amount of bone fill was calculated as the difference between the initial and final sizes of the defects and the data statistically analyzed. For statistical analysis Student t test was used to compare initial and final body weights. One-way ANOVA test compared glucose levels between diabetic animals before and after STZ injections and at sacrifice, Tukey test was used to identify significant differences. Comparisons between treatments were performed by one-way ANOVA and Bonferroni post hoc. Significance level was set at 5%. The animals had a significant increase in body weight (p0.05), though. Within the limits of this study it can be concluded that HA can be used as an adjunct in the treatment of bone defects. Doutorado Periodontia Doutor em Clínica Odontológica

Orientador: José Angelo Camilli Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma doença neuromuscular resultante da ausência de distrofina. Em virtude do enfraquecimento muscular e do uso de glicocorticóides, pacientes com DMD têm ossos frágeis. O camundongo mdx é o modelo experimental largamente utilizado para o estudo da DMD e apresenta falta da distrofina, processo inflamatório intenso e degeneração da fibra muscular. Além disso, apresenta ciclos de degeneração/regeneração muscular que se iniciam de forma mais marcante após o vigésimo primeiro dia de vida. Estudos demonstraram que camundongos mdx têm níveis elevados de fatores de crescimento de fibroblasto e proteína quimiotática de monócito-1, bem como aceleração da cicatrização em lesões da pele. Com base nessas evidências, elaboramos duas hipóteses. A primeira hipótese é que podem existir alterações nos ossos de camundongos mdx por influência da ausência de distrofina ou por algum outro mecanismo inerente à doença mesmo antes da sua manifestação clínica. A segunda hipótese é que o processo de reparo ósseo espontâneo também possa estar acelerado, de modo semelhante à cicatrização da pele. Para testar a primeira hipótese o fêmur e o músculo quadríceps do camundongo mdx foram analisados aos 21 dias de vida. Para verificar a segunda hipótese foi produzido um defeito no osso parietal direito e a regeneração foi analisada após 15, 30 e 60 dias pós-cirúrgicos. Na análise morfológica do quadríceps as fibras musculares apresentavam núcleos periféricos e não foram observadas fibras positivas para o corante azul de Evans em ambos os grupos, indicando que não houve degeneração das fibras no grupo mdx. O fêmur do grupo mdx demonstrou osteopenia, menor quantidade de osteoblastos, menor conteúdo mineral e menor resistência mecânica na ausência de sinais de degeneração muscular em relação ao grupo controle. No estudo do osso parietal, os dados mostraram que não há diferença significante no volume de osso neoformado entre os grupos controle e mdx nos três tempos pós-operatórios e também entre os três tempos, independentemente do grupo estudado. Diante destes resultados, concluímos que o fêmur dos camundongos mdx com 21 dias de vida pode conter um distúrbio interligado a algum fator genético, diretamente ou não relacionado com a ausência de distrofina. Isto demonstrou que a perda da qualidade óssea em camundongos mdx não ocorre somente em função do enfraquecimento muscular. Considerando a qualidade óssea inferior do fêmur e a similaridade estatística da taxa de regeneração óssea, entendemos que a capacidade osteogênica da calvária mdx foi mais expressiva do que a dos camundongos controle, igualando a taxa de reparo ósseo de um tecido com menor qualidade à de ossos normais Abstract: Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a neuromuscular disease caused by lack of dystrophin. DMD patients have brittle bones because of muscle weakness and use of glucocorticoids. The mdx mouse is widely used as experimental model for the study of DMD and it presents lack of dystrophin, intense inflammatory process and muscle fiber degeneration. Moreover, it presents cycles of muscle degeneration/regeneration that becomes more marked after the twenty-first day of life. Studies have shown that mdx mice have elevated levels of fibroblast growth factor and monocyte chemoattractant protein-1, as well as accelerate wound healing in skin lesions. Based on this evidence, we formulate two hypotheses. The first hypothesis is that there may be changes in the bones of mdx mice by the influence of the absence of dystrophin or by some other mechanism inherent to the disease even before clinical manifestation. The second hypothesis is that the process of spontaneous bone repair can also be accelerated, similar to skin healing. To test the first hypothesis, the femur and the quadriceps muscle of mdx mice were analyzed at 21 days of life. To verify the second hypothesis a defect was produced in the right parietal bone and the regeneration was evaluated after 15, 30 and 60 days after surgery. In the morphological analysis of quadriceps were observed muscle fibers with peripheral nuclei and were not seen Evans blue dye positive fibers in both groups, indicating that there was no fiber degeneration in mdx group. The femur of the mdx group demonstrated osteopenia, lower number of osteoblasts, lower mineral content and lower mechanical strength in the absence of signs of muscular degeneration compared to the control group. In the study of the parietal bone, the data showed no significant difference in newly formed bone volume between control and mdx groups in the three moments after the operation and also between the three moments, regardless of the studied group. Given these results, we conclude that the femur of mdx mice at 21 days of life can contain a disorder linked to some genetic factor, directly or not related to the absence of dystrophin. This demonstrated that loss of bone quality in mdx mice occurs not only because of muscle weakening. Considering the lower femur bone quality and statistical similarity in the rate of bone regeneration, we believed that the osteogenic capacity of mdx calvaria was more expressive than that of control mice, equaling the rate of bone repair of a tissue with lesser quality to that of normal bones Doutorado Anatomia Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Cecilia Amélia de Carvalho Zavaglia Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: A produção de scaffolds tem-se demonstrado como uma sólida opção na bioengenharia na busca pela neoformação tecidual devido suas características que favorecem o recrutamento e proliferação celulares podendo, inclusive, prover as características mecânicas necessárias durante as fases de restabelecimento tecidual. Diversas combinações têm sido propostas na fabricação de biomateriais como a associação de componentes que possam incrementar ou potencializar sua ação no tecido hospedeiro. Este trabalho foi realizado visando produzir e avaliar in vitro malhas compósitas formadas pelo polímero policaprolactona e o polifenol resveratrol, produzidas pelo processo de rotofiação, como material de enxertia óssea vislumbrando futuras utilizações em engenharia tecidual. Foram produzidas as amostras: malha de policaprolactona (controle), malhas de policaprolactona com resveratrol 1%, 3% e 5%. Na avaliação morfológica sob microscopia eletrônica de varredura, evidenciou-se que as malhas produzidas possuem fibras com distribuição aleatória, diâmetros e porosidades que podem favorecer a migração e adesão celulares. As análises in vitro, demonstraram que as amostras possuem comportamento semelhante ao controle no período de 24h e que a malha de PCL/RESV 5% propiciou o crescimento celular ao longo do tempo na avaliação em 72h e, visto que o PCL é um polímero de uso consolidado na produção de biomateriais, as malhas demonstraram-se promissoras no carreamento de fitoterápicos, como o resveratrol, durante o processo de neoformação tecidual. Estudos in vivo fazem-se necessários para comprovação da eficácia dos biomateriais produzidos neste estudo Abstract: The production of scaffolds has advanced as a solid option for bioengineering and tissue regeneration due to its characteristics favoring the recruitment and proliferation of cells and providing necessary mechanical suport during tissue restoration phases. Several solutions have been proposed in biomaterials’ manufacturing as the association of components that can increase or enhance their action on the host tissue. The present study aimed to produce and evaluate in vitro composite meshes procuced by polycaprolactone and resveratrol by the rotary jet spinning process, as an alternative for bone regeneration and its future use in tissue engineering. The samples produced were: polycaprolactone mesh (control), polycaprolactone meshes with 1%, 3% and 5% of resveratrol. Morphological’s evaluation under scanning electron microscopy, emphasized that the produced meshes have fibers with random distribution, diameters and porosities that can favor to cell migration and adhesion. In vitro analyzes showed that the samples have behavior similar to the control group (24h evaluation) and that PCL/RESV 5% scaffold have provided cell growth over time (72h evaluation), facts of scientific relevance, as well the PCL is a polymer of consolidated use in the production of biomaterials and the meshes have shown promise in the transport of herbal medicines, such as resveratrol, during the process of tissue neoformation. In vivo studies are recommended to prove the effectiveness of the biomaterials developed in the present study Doutorado Materiais e Processos de Fabricação Doutor em Engenharia Mecânica

Orientador: Paulo Sollero Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: O tecido ósseo é um arranjo de estruturas que está constantemente se adaptando a estímulos. Com o envelhecimento populacional, o número de doenças relacionadas ao tecido ósseo vem crescendo significativamente. O tratamento dessas enfermidades envolve uma fixação interna que, sob a presença de fatores de risco, como a osteoporose, pode causar fraturas adicionais devido ao fenômeno de stress shielding (REISER ET AL., 2013). Com o objetivo de superar este problema, alguns autores têm proposto estratégias como biomateriais porosos e functionall graded (HE ET AL.; RYAN ET AL.; SHIRAZIA ET AL., 2017; 2006; 2017). Assim, para implementar com sucesso tais estratégias, é necessário conhecer as propriedades elásticas anisotrópicas do tecido ósseo a ser tratado, buscando a modelagem personalizada das próteses. Este trabalho apresenta uma análise de homogeneização multiescala elastoestática de estruturas ósseas utilizando o BEM. O tecido ósseo é analisado desde a escala subnano até osso total. A escala subnano foi analisada usando a teoria de Voigh e Reuss (YOON AND COWIN, 2008). As escalas nano, matriz de osteon e osso trabecular foram analisadas com a formulação elastostática do BEM, solução fundamental baseada em séries duplas de Fourier e em um algoritmo de múltiplos domínios. Os osteônios e a trabécula foram analisados com sucesso utilizando a técnica de homogeneização proposta neste trabalho, mostrando a capacidade de considerar a anisotropia curvilínea das lamelas. A solução numérica dos campos de tensão e deformação de todo o osso foi avaliada em um modelo real de fêmur. Os osteônios e geometrias corticais foram modelados a partir de uma microscopia real e todo o osso foi modelo utilizando uma CT real. Os tensores de rigidez homogeneizados de todas as escalas mostraram uma dependência linear em relação ao MVF (v versions). A consideração do 19% do MVF, dentro das fibrilas (abordagem multiescala 1), mostra um aumento na rigidez em relação ao modelo onde o mesmo não considerado (outras abordagens multiescala). Os valores do tensor de rigidez elástica de todas as escalas mostram uma redução de mais de 30% entre uma pessoa normal (v = 4) e uma pessoa que sofre de osteoporose grave (v = 1). Na escala do osteon, os valores do tensor de rigidez elástica mostram uma alteração menor que 3% de um osteon para outro. Na escala cortical, as cavidades (canais de Havers) diminuíram a rigidez do tecido em relação à nanoescala, resultando em uma alteração de 10% dos valores do tensor de rigidez elástica. Finalmente, o tecido ósseo trabecular cuja função é absorver cargas de impacto, mostra valores de tensores de rigidez de, aproximadamente, 10% da nanoescala Abstract: Bone tissue is an intricate arrangement of structures which are constantly adapting in response to biomechanical and biochemical stimuli. Many health conditions are related with bone tissue. The treatment commonly involves an internal fixation. Which, under the presence of risk factors, like osteoporosis, could cause further fractures due to the stress shielding phenomenon (REISER ET AL., 2013). Aiming to overcome this problem, some authors have proposed strategies like porous and functionally graded biomaterials ( HE ET AL., 2017; RYAN ET AL., 2006; SHIRAZIA ET AL., 2017). Therefore, to successfully implement such strategies, it is necessary to know the anisotropic elastic properties of the bone tissue to be treated, in pursuance of personalized internal fixations and prosthesis design. This work presents a multiscale elastostatic BEM homogenization analysis of bone structures from the sub-nano to the whole bone. The sub-nanoscale was analyzed using Voigh and Reuss bonds theory, as is suggested in (YOON AND COWIN, 2008). The nano, cortical, osteon¿s matrix and trabecular bone scales were analyzed using the elastostatic BEM formulation with the fundamental solution based on double Fourier series and the multidomain algorithm. The osteons and the single trabecula were successfully analyzed using the homogenization technique proposed in this work, bringing the ability to consider the lamella¿s curvilinear anisotropy. Finally, the numerical solution of the stress and strain fields of the whole bone were assessed on a real femur model. The osteons and cortical geometries were model from a real high-resolution microscopy and the whole bone was model from a real computerized tomography. Additionally, it was proposed a 3D BEM meshing methodology, which evidenced great versatility and was extremely useful in the high complex mesh bone modeling process. The homogenized stiffness tensors of all scales shown a linear dependence with respect to the MVF (v versions). The consideration of the 19% of the MVF, inside the fibrils (multiscale approach 1), shows an increase in stiffness regards to no consider it (others multiscale approaches). The elastic stiffness tensor values of all scales show a reduction more than 30% between a normal person (v = 4) and one who suffer severe osteoporosis (v = 1). The elastic stiffness tensor values of the osteon scale show a change less than 3% from one osteon to another. Into the cortical scale, the hollows (Haversian canals) decreased the stiffness of the tissue regards to the nanoscale, resulting in a change of 10% of elastic stiffness tensor values. Finally, the trabecular bone tissue, who has a function to absorb impact loads, show stiffness tensor values of approximately 10% of the nanoscale Mestrado Mecânica dos Sólidos e Projeto Mecânico Mestre em Engenharia Mecânica CAPES 1784767

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O objetivo principal deste trabalho foi testar e avaliar compósitos de hidroxiapatita associada à nanopartículas magnéticas de ferrita de cobalto (CoFe 2 O 4 ), como sistema de liberação do antibiótico ciprofloxacina, buscando a caracterização e utilização de um biomaterial, que promova liberação controlada de fármaco, para o tratamento da osteomielite seguida de uma regeneração óssea mais eficaz e em menor tempo. Foram utilizados compósitos preparados com hidroxiapatita comercial HAP-91 ® , fabricada na JHS Laboratório Químico, e hidroxiapatita sintetizada no Laboratório de Síntese de Materiais Cerâmicos (LABSMAC) do Centro de Ciências e Tecnologia da Universidade Federal de Campina Grande, sintetizadas utilizando nanopartículas de CoFe 2 O 4 com o fármaco ciprofloxacina na concentração de 10%. As características físico-químicas dos biomateriais foram analisadas por meio das microscopias eletrônicas de varredura e da difração de raio-x. A confirmação da eficácia do antibiótico em inibir o crescimento bacteriano da cepa utilizada na indução da osteomielite foi testada in vitro. Foram realizados testes de biocompatibilidade in vivo. Após a realização dos testes supracitados, quatro biomateriais foram selecionados para o tratamento de infecção óssea induzida experimentalmente. Para isso, foram utilizados 30 coelhos da raça Nova Zelândia, com aproximadamente 1 ano de idade e peso médio de 3,5 Kg, aleatoriamente distribuídos em cinco grupos com tamanho amostral igual a 6. Em todos os animais foi produzido um orifício córtico-medular na metáfise proximal do úmero para inoculo bacteriano de unidades formadoras de colônia (UFC) de Staphylococcus aureus (cepas isoladas de mastite caprina). Após 15 dias, da inoculação bacteriana, os grupos iniciaram os tratamentos, com o desbridamento e implantação óssea dos biomateriais em procedimento cirúrgico. Em um dos grupos nenhum tipo de biomaterial foi implantado, tendo sido usado como controle. Aos dias 42 após a implantação dos compósitos, foram feitas análises radiográficas das lesões e os animais foram eutanasiados por sobredose anestésica para a coleta de material para estudo histológico e tomografia microcomputadorizada. Os testes realizados com os biomateriais, mostraram que estes são biocompatíveis, degradáveis e eficazes como carreadores de drogas. O quadro de infecção óssea foi induzido com sucesso nos animais, porém os biomateriais não pareceram exercer papel curativo, sendo que ao final do experimento, muitos animais ainda apresentavam um quadro compatível com osteomielite crônica. Com relação à formação óssea, não se observou diferença estatística significativa entre a quantidade de osso formado no grupo controle e nos grupos tratados. Palavras-chave: Biomateriais. Regeneração Óssea. Osteomielite. Hidroxiapatita. Nanopartículas Magnéticas. The main objective of this study was to test and evaluate hydroxyapatite composites associated with cobalt ferrite nanoparticles (CoFe2O4) as a release system for the antibiotic ciprofloxacin, seeking the characterization and use of a biomaterial, which promotes controlled drug delivery, for the treatment of osteomyelitis followed by more effective bone regeneration in less time. Composites prepared with commercial hydroxyapatite HAP-91®, manufactured at JHS Laboratório Químico, and hydroxyapatite synthesized at the Laboratory of Ceramic Materials Synthesis (LABSMAC) of the Science and Technology Center of the Federal University of Campina Grande, were used, synthesized using nanoparticles of CoFe2O4 with the drug ciprofloxacin in 10% concentration. The physical-chemical characteristics of biomaterials were analyzed by scanning electron microscopy and X-ray diffraction. The confirmation of the antibiotic's efficacy in inhibiting bacterial growth of the strain used in osteomyelitis induction was tested in vitro. In vivo biocompatibility tests were performed. After the above tests, four biomaterials were selected for the treatment of experimentally induced bone infection. For that, 30 New Zealand rabbits with approximately 1 year of age and a mean weight of 3.5 kg, randomly distributed in five groups with sample size equal to 6, were used. In all animals, a cortico-medullary defect was produced in the proximal metaphysis of the humerus for bacterial inoculation of Staphylococcus aureus colony forming units (CFU) (isolated strains of goat mastitis). After 15 days of bacterial inoculation, the groups began treatment with debridement and bone implantation of biomaterials through a surgical procedure. In one of the groups no biomaterial was implanted and it was used as a control. On the 42nd day after the implantation of composites, radiographic analyses of the lesions were performed and the animals were euthanized by anesthetic overdose to collect material for histological study and micro computerized tomography. The tests performed with the biomaterials showed that they are biocompatible, degradable and effective as drug carriers. Bone infection was successfully induced in the animals, but the biomaterials did not seem to play a healing role, and at the end of the experiment, many animals still presented a condition compatible with chronic osteomyelitis. Moreover, no statistically significant difference was observed between the amount of bone formed in the control group and in the treated groups. Keywords: Biomaterials. Bone Regeneration. Osteomyelitis. Hydroxyapatite. Magnetic Nanoparticles.

Orientadores: José Angelo Camilli, Wagner José Fávaro Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A osteoporose é caracterizada pela perda progressiva da massa óssea, causando fragilidade do esqueleto e elevando o risco de fraturas. Até os dias de hoje, as terapias disponíveis são insuficientes devido à diversidade de efeitos colaterais ou eficácia limitada, portanto, novas abordagens terapêuticas se fazem necessárias. Neste contexto, a planta medicinal Equisetum giganteum L. parece ser uma opção terapêutica viável, pois vem sendo usada empiricamente no Brasil há muito tempo para tratamento da osteoporose e consolidação de fraturas, porém, a literatura carece de estudos científicos que comprovem estas atividades. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial terapêutico do extrato hidroalcoólico de E. giganteum em modelo experimental de osteoporose pós-menopausa. Para isto, foram utilizadas ratas Sprague-Dawley submetidas a ovariectomia bilateral (OVX) para indução experimental de osteoporose pós-menopausa. Depois de 90 dias, as mesmas ratas foram submetidas a uma osteotomia (OST) no fêmur direito para indução de uma lesão óssea para o estudo da dor e do reparo ósseo em osso osteoporótico. O tratamento com o extrato hidroalcoólico de E. giganteum (EHEg) foi administrado diariamente por via intragástrica (i.g.) em quatro doses (0.1, 1, 10 e 100 mg/kg), por até 95 dias. Nossos resultados mostraram que o tratamento crônico com extrato reduz comportamento do tipo dor, sem alterar a deambulação espontânea, em relação aos grupos Sham e OVX+OST. Porém, somente a dose de 1 mg/kg do EHEg foi capaz de prevenir prejuízos sobre a coordenação e equilíbrio no teste do rotarod. Além disso, a microtomografia computadorizada (µCT) revelou que o EHEg (1 e 100 mg/kg) previne a perda de massa óssea nos animais. A histomorfometria revelou que o EHEg (1 mg/kg) foi capaz de induzir neoformação óssea significativa na extensão da lesão. Ademais, o EHEg (1-100 mg/kg) não causa toxicidade sobre a estrutura e função de órgãos vitais. Com isto, concluímos que a planta medicinal E. giganteum tem potencial analgésico e promove o reparo ósseo sem produzir efeitos tóxicos aparentes. Ademais, o efeito antiosteoporótico do EHEg se deve, em parte, pelo aumento das moléculas antirreabsortivas de osteoprotegerina (OPG) e das formadoras de osso, como a fosfatase alcalina óssea. Estes resultados destacam a E. giganteum como uma alternativa terapêutica útil e segura para prevenção da perda de massa óssea, no reparo de lesões ósseas e alívio da dor em quadros de osteoporose agravada Abstract: Osteoporosis is characterized by the progressive loss of bone mass, causing fragility of the skeleton and increasing the risk of fractures. Until today, the available therapies are insufficient due to the diversity of side effects or limited efficacy, therefore, new therapeutic approaches are necessary. In this context, the medicinal plant Equisetum giganteum L. seems to be a feasible therapeutic option, as it has been used empirically in Brazil for a long time to treat osteoporosis and consolidate fractures. However, the literature lacks scientific studies to prove these activities. The objective of this work was to evaluate the therapeutic potential of the hydroalcoholic extract of E. giganteum in an experimental model of postmenopausal osteoporosis. For this, Sprague-Dawley rats submitted to bilateral ovariectomy (OVX) were used for experimental induction of postmenopausal osteoporosis. After 90 days, the same rats were submitted to an osteotomy (OST) in the right femur to induce a bone lesion for the study of pain and bone repair in osteoporotic bone. Treatment with E. giganteum hydroalcoholic extract (EHEg) was administered daily, intragastrically (i.g.), in four doses (0.1, 1, 10 and 100 mg/kg), for up to 95 days. Our results showed that chronic treatment with extract reduces pain-like behavior, without affecting spontaneous walking, in relation to the Sham and OVX+OST groups. However, only the dose of 1 mg/kg of EHEg was able to prevent damage to coordination and balance in function of vital organs. With this, we conclude that the medicinal plant E. giganteum has analgesic potential and promotes bone repair without producing apparent toxic effects. In addition, the anti-osteoporotic effect of EHEg is due, in part, to the increase in osteoprotegerin (OPG), an antiresorptive molecule, and bone alkaline phosphatase, a bone-forming molecule. These results highlight E. giganteum as a useful and safe therapeutic alternative to prevent bone loss, repair bone lesions and relieve pain in cases of aggravated osteoporosis.the rotarod test. In addition, computed microtomography (µCT) revealed that EHEg (1 and 100 mg/kg) prevents bone mass loss in animals. Histomorphometry revealed that EHEg (1 mg/kg) was able to induce significant bone neoformation in the extent of the lesion. Furthermore, EHEg (1-100 mg/kg) does not cause toxicity to the structure and function of vital organs. With this, we conclude that the medicinal plant E. giganteum has analgesic potential and promotes bone repair without producing apparent toxic effects. In addition, the anti-osteoporotic effect of EHEg is due, in part, to the increase in osteoprotegerin (OPG), an antiresorptive molecule, and bone alkaline phosphatase, a bone-forming molecule. These results highlight E. giganteum as a useful and safe therapeutic alternative to prevent bone loss, repair bone lesions and relieve pain in cases of aggravated osteoporosis Doutorado Anatomia Doutora em Biologia Celular e Estrutural CAPES 001 CNPQ 141564/2017-2; 141767/2018-9 FAEPEX 2445/19

Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o papel do L-PRP durante o reparo ósseo e desenvolvimento de área medular em defeitos artificiais em calvárias de ratos tratados e não tratados com L-PRP, através da análise da expressão imunoistoquímica das proteínas TGF-β, osteoprotegerina, osteocalcina, esclerostina, CD34, IGF-1, JAK2, STAT5, IP3R e SMA. Metodologia: Um defeito ósseo de 5mm de diâmetro x 1mm de profundidade foi criado na calvária de 48 ratos witsar machos. Em seguida, foram divididos em dois grupos (L-PRP + autoenxerto de osso particulado e apenas autoenxerto de osso particulado) e tratados de acordo com o enxerto do seu grupo. Os animais sofreram eutanásia em 15 e 40 dias pós-cirúrgicos. A análise dos resultados foi realizado através de interpretações de imunoistoquímica. Resultados: Os resultados desta pesquisa revelaram uma diminuição na formação da matriz óssea, e uma alteração na diferenciação da área medular nos grupostratados com L-PRP. Conclusão: A presença do L-PRP prejudicou o reparo ósseo e produziu alterações na área medular, demonstrando condições similares a processos fibróticos patológicos. Aim: The aim of this study was to evaluate the role of L-PRP during bone repair and medullary differentiation in artificial defect in mice calvary treated and not treated with L-PRP through the analysis of the immunohistochemical expression of TGF-β, osteoprotegerin, osteocalcin, sclerotin, CD34, IGF-1, JAK2, STAT5, IP3R and SMA. Methods: A bone defect was created on the calvaria of 48 wisteria mice. They were divided into four groups (L-PRP + particulate bone autograft and only particulate bone autograft; 15 and 40 days euthaniasia) and treated according to their group graft. The animals were euthanized 15 and 40 days postoperatively. The analysis of the results was performed through immunohistochemistry interpretations. Results: The results of this research revealed a decrease in bone matrix formation, and a change in medullary differentiation in L-PRP treated groups. Conclusion: The presence of L-PRP impaired bone repair and produced changes in medullary differentiation, demonstrating conditions similar to pathological fibrotic processes.

Agradecimentos: The authors acknowledge the use of the analytical instrumentation facility at the Institute of Chemistry, the University of Campinas, which is supported by the State of Paulo. This work was carried out with the support of the São Paulo Research Foundation - FAPESP (Grant: 2010/05394-9, 2010/12376-5, 2010/00863-0, 2011/09240-9, and 2011/17877-7) and the National Council for Scientific and Technological Development (CNPq/PIBITI) for the financial support. The authors would like to thank Brazilian Nanotechnology National Laboratory (LNNano) for technical support during SEM and AFM analyzes especially Dr. Carlos Alberto Rodrigues Costa for his technical assistance with AFM analysis Abstract: In vitro and in vivo experiments were undertaken to evaluate the solubility, apatite-forming ability, cytocompatibility, osteostimulation, and osteoinduction for a series of Nb-containing bioactive glass (BGNb) derived from composition of 45S5 Bioglass. Inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP-OES) revealed that the rate at which Na, Ca, Si, P, and Nb species are leached from the glass decrease with the increasing concentration of the niobium oxide. The formation of apatite as a function of time in simulated body fluid was monitored by 31P Magic Angle Spinning (MAS) Nuclear magnetic resonance spectroscopy. Results showed that the bioactive glasses: Bioglass 45S5 (BG45S5) and 1 mol%-Nb-containing-bioactive glass (BGSN1) were able to grow apatite layer on their surfaces within 3 h, while glasses with higher concentrations of Nb2O5 (2.5 and 5 mol%) took at least 12 h. Nb-substituted glasses were shown to be compatible with bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMMSCs). Moreover, the bioactive glass with 1 mol% Nb2O5 significantly enhanced cell proliferation after 4 days of treatment. Concentrations of 1 and 2.5 mol% Nb2O5 stimulated osteogenic differentiation of BMMSCs after 21 days of treatment. For the in vivo experiments, trial glass rods were implanted into circular defects in rat tibia in order to evaluate their osteoconductivity and osteostimulation. Two morphometric parameters were analyzed: (a) thickness of new-formed bone layer and (b) area of new-formed subperiostal bone. Results showed that BGNb bioactive glass is osteoconductive and osteostimulative. Therefore, these results indicate that Nb-substituted glass is suitable for biomedical applications CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQ FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO - FAPESP Fechado

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais A osteoporose é uma doença metabólica, caracterizada pelo desequilíbrio entre a formação e reabsorção óssea. A capacidade de regeneração fica comprometida, sendo muitas vezes necessária a utilização de enxertos, que, devido à fatores como baixa disponibilidade, morbidade associada ao local doador e a possibilidade de transmissão de doenças, tem dado lugar à biomaterial osteocondutor e reabsorvível. A utilização de medicamento associado aos compósitos pode trazer benefícios à reparação óssea. Um desses medicamentos é o alendronato, um dos mais potentes fármacos do grupo dos bifosfonatos, que tem sido largamente utilizado na prevenção da reabsorção óssea sistêmica na osteoporose. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial reparador do compósito hidroxiapatita (HAP), policaprolactona (PCL) e alendronato (ALN) em defeitos ósseos experimentais no olecrano de coelhas com osteoporose induzida. Foram utilizadas 18 coelhas, que passaram por ovariectomia e posterior aplicação de metilprednisolona 1mg/kg em dias alternados durante duas semanas para indução da osteoporose. Estabelecida a osteoporose, foi realizado defeito de 5 mm de diâmetro no olecrano, sendo todos defeitos preenchido por três diferentes tratamentos: HAP+PCL; HAP+PCL+ALN; e controle (sem preenchimento). Logo após o procedimento cirúrgico, foi realizada avaliação clínica dos animais, onde foram avaliados a presença ou ausência de dor, edema, deiscência e inflamação. Foram realizadas radiografias seriadas para acompanhamento da densidade radiográfica. Aos 45 dias após a cirurgia, foi realizada coleta do olecrano para processamento e posterior análise tomográfica e histopatológica. Características histológicas e avaliação clínica foram analisadas descritivamente. As variáveis quantitativas foram submetidas à análise de variância, seguido de teste de Tukey em caso de significância. A ovariectomia e a aplicação de glicocorticoide foram capazes de desencadear perda óssea significativa nos animais. Na avaliação clínica, a presença de edema se restringiu aos primeiros dias pós-operatório, com evolução clínica satisfatória sugerindo biocompatibilidade do compósito. A densidade radiográfica dos animais que receberam algum tipo de tratamento foi significativamente maior que o grupo controle, diminuindo ao longo do tempo. A microtomografia computadorizada mostrou um crescimento de tecido ósseo em quase todo o defeito nos grupos HAP+PCL e controle, enquanto no grupo HAP+PCL+ALN haviam raras trabéculas ósseas restritas à borda do defeito ósseo. A histologia revelou formação de tecido ósseo imaturo entremeado à medula óssea e tecido conjuntivo nos grupos HAP+PCL e controle. No grupo HAP+PCL+ALN ocorreu inibição severa da regeneração óssea, havendo apenas a formação de uma matriz extracelular disposta de maneira desorganizada, que não se diferenciou em nenhum outro tecido. Concluiu-se que o compósito HAP+PCL é eficaz para o preenchimento de defeito ósseo crítico, entretanto, a aplicação local do alendronato interferiu negativamente na regeneração óssea. Osteoporosis is a metabolic disease, characterized by imbalance between bone formation and resorption. The regeneration ability is impaired, being often necessary to use grafts wich due to factors like low availability, morbidity associated to the donor site and the possibility of disease transmission, have given rise to osteoconductive and resorbable biomaterials. The use of medication associated to composites may be beneficial to bone repair. One such drug is alendronate (ALN), one of the most potent drugs in the bisphosphonate group, that has been widely used to prevent systemic bone resorption in osteoporosis. The present study aimed to evaluate the repair potential of hydroxyapatite (HAP), polycaprolactone (PCL) and alendronate composites in experimental bone defects in the olecranon of rabbits with induced osteoporosis. Animals were submitted to ovariectomy and subsequent application of 1mg / kg methylprednisolone every other day for two weeks to induce osteoporosis. Once the osteoporosis was established, a 5 mm defect was made in olecranon, and defects were filled by three different treatments: HAP + PCL; HAP + PCL + ALN; and SHAM (unfilled). Right after surgical procedure, clinical evaluation of the animals was performed, in which pain, edema, dehiscence and inflammation were observed. Serial radiographs were performed to monitor radiographic density. At 45 days after surgery, olecranon was collected for processing and subsequent histopathological and microcomputed tomography analysis. Histological characteristics and clinical evaluation were analyzed descriptively. Quantitative variables were submitted to variance analysis, followed by Tukey test in case of significance. Ovariectomy and glucocorticoid application were able to trigger significant bone loss in the animals. In clinical evaluation, presence of edema was restricted to the first postoperative days, with a satisfactory clinical evolution suggesting composite biocompatibility. Radiographic density of animals that received some type of treatment was significantly higher than control group, decreasing over the time. The microcomputed tomography showed bone tissue growth in almost all defects from HAP + PCL and control groups, whereas in HAP + PCL + ALN group there were rare bone trabeculae restricted to the defect edge. Histology revealed formation of immature bone tissue interspersed with bone marrow and connective tissue in HAP + PCL and control groups. In the HAP + PCL + ALN group, severe inhibition of bone regeneration occurred, with only formation of a disorganized extracellular matrix, which did not differentiate in any other tissue. Taken together, the results showed that the HAP + PCL composite is effective for critical bone defect filling, however, the local application of alendronate interfered negatively in bone regeneration.

Orientador: Paulo Henrique Ferreira Caria Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O aumento da expectativa de vida e a busca de alternativas para auxiliar a reposição do tecido ósseo potencializam o avanço da bioengenharia no desenvolvimento de novos biomateriais como matriz para a liberação sustentada utilizados no processo de regeneração óssea guiada. O objetivo desse trabalho foi avaliar, através de análise histométrica e radiográfica o efeito da membrana de látex pura e também tratada com beta- tricalcio- fosfato no processo de regeneração óssea guiada em calvária de ratos machos adultos. Para isso, foi utilizado um total de 60 ratos, com idade média de três meses, divididos em três grupos, dois grupos de acordo com o tipo de membrana sobreposta no defeito ósseo, ou seja, membrana de látex pura (GA), membrana de látex incorporada com ß- tricálcio- fosfato ¿ ß-TCP (GB) e um grupo controle negativo, em que o defeito ósseo crítico foi preenchido apenas pelo coágulo sanguíneo (GC). Cada grupo composto por 20 animais, onde cada grupo teve 4 períodos de eutanásia (15, 30, 60 e 120 dias pós-operatórios), sendo assim, mortos então 5 animais em cada período de cada grupo. Foi criado um defeito ósseo crítico de 8mm de diâmetro nas calvárias dos ratos em seguida, foram tratados de acordo com o grupo experimental. Os animais foram mortos e as regiões removidas para a análise radiográfica e posteriormente as amostras foram fixadas, descalcificadas e processadas para a análise histométrica. Os dados radiográficos mostraram que no tempo de 15 dias o GA (120.5%±16.6) teve maior densidade radiográfica, nos tempos de 30 e 120 dias não tivemos diferença estatística entre os grupos e no tempo de 60 dias o GA foi semelhante ao GB e este ao GC. Já na análise histométrica, no tempo de 15 dias não tivemos diferença estatística entre os grupos, no tempo de 30 dias tivemos maior neoformação óssea no grupo GB que não diferiu estatisticamente do GC seguido do GA. No tempo de 60 dias o GB (1166.8%±51.0) teve maior neoformação óssea quando comparado com os outros dois grupos e por fim, no tempo de 120 dias quando comparados os grupos o GC (915.5%±42.0) teve maior neoformação óssea. Conclui- se que a membrana de látex pura, assim como a tratada com ß-TCP é um material osteocondutor, atuando como uma barreira oclusiva eficiente, principalmente no estágio inicial do reparo ósseo e a incorporação do ß-TCP proporcionou uma maior neoformação óssea nos tempos de 30 e 60 dias Abstract: The increase in life expectancy and the search for alternatives to help the replacement of bone tissue potentiate the bioengineering advancement in the development of new biomaterials as a matrix for the sustained release used in the process of guided bone regeneration. The aim of this study was to evaluate, through histometric and radiographic analysis, the effect of pure latex membrane also treated with beta- tricalcium- phosphate in the process of bone regeneration guided in calvarial of adult male rats. A total of 60 rats, with average age of three months, divided into three groups, two groups according to the type of overlying membrane on the bone defect, pure latex membrane (GA), latex membrane integrated with ßeta- tricalcium- phosphate - ß-TCP (GB) and a negative control group, in which the critical bone defect was filled only by the blood clot (CG), each group composed of 20 animals where each group had 4 periods of euthanasia (15, 30, 60 and 120 postoperative days), being sacrificed, thus, 5 animals in each period of each group. A critical bone defect of 8 mm in diameter was created in the calvaries of rats and then treated according to the experimental group. The animals were killed and the regions were removed for radiographic analysis and the samples were subsequently fixed, decalcified and processed for histometric analysis. The radiographic data showed that in 15 days the GA (120.5% ± 16.6) had a higher radiographic density, in the period of 30 and 120 days there was no statistical difference between the groups and in the period of 60 days the GA was similar to GB and this to GC. In the histometric analysis, in the period of 15 days we had no statistical difference between the groups, in the period of 30 days we had greater bone neoformation in the GB group that did not differ statistically from the GC followed by GA. At 60 days the GB (1166.8% ± 51.0) had greater bone neoformation when compared with the other two groups and, finally, at 120 days when compared the groups, the GC (915.5% ± 42.0) had greater bone neoformation. It is concluded that, the pure latex membrane, as well as that treated with ß-TCP, is an osteoconductive material, acting as an efficient occlusive barrier, mainly in the initial stage of bone repair and the incorporation of ß-TCP provided a greater bone neoformation at times of 30 and 60 days Doutorado Anatomia Doutora em Biologia Buco-Dental

Orientador: William Dias Belangero Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Distúrbios da consolidação óssea após fraturas afetam anualmente milhares de indivíduos em todo o mundo e incentivam a busca por novos métodos terapêuticos que auxiliem na sua solução. A avaliação da eficácia desses métodos necessita de modelos experimentais que possibilitem analisar qualitativa e quantitativamente seus efeitos. Este estudo teve como objetivo avaliar um modelo experimental de baixo custo para análise quantitativa da regeneração óssea ao longo do tempo. Foram produzidos defeitos monocorticais com diâmetro de 3,2 mm na face medial da metáfise proximal da tíbia de ratos Wistar. Após uma, duas, quatro, oito e 12 semanas de seguimento, o tecido formado no interior dos defeitos foi submetido a ensaios de macroindentação utilizando-se indentadores com pontas de 3,2 e 5,0 mm de diâmetro. Paralelamente, o tecido foi caracterizado por microscopia óptica, microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia Raman, espectrometria de raios X por energia dispersiva (EDS) e microtomografia computadorizada (microCT). As forças médias de indentação aumentaram progressivamente com o tempo, exceto para o grupo de duas semanas. O indentador de 5,0 mm mostrou-se superior ao de 3,2 mm por detectar de modo significativo as forças médias de indentação entre quatro e oito semanas, enquanto que o de 3,2 mm detectou diferença entre quatro e 12 semanas. Em relação aos modelos experimentais normalmente usados, este tem como vantagens o uso de defeitos padronizados, a redução do tempo de cirurgia, a eliminação de implantes, a minimização da influência do tamanho do osso e das tensões e deformações oriundas do peso e da movimentação dos animais e a simplificação na preparação das amostras para ensaio. A principal limitação é a restrição de sua aplicação para tempos de seguimento inferiores a quatro semanas, devido à elevada força média de indentação observada no grupo de duas semanas, justificada pela intensa neoformação de tecido conjuntivo denso no interior da cavidade medular, produzindo um efeito de massa que dificultou a penetração do indentador. Pode-se concluir que o modelo apresentado foi eficaz para apontar aumento na resistência mecânica do tecido de reparação no intervalo entre quatro e oito semanas de seguimento. Este modelo poderá ser usado como uma ferramenta quantitativa, de fácil execução e com sensibilidade para identificar a influência positiva e ou negativa de métodos terapêuticos que tenham a finalidade de estimular ou não a reparação óssea Abstract: Complications of the fracture healing process affect thousands of people every year worldwide and encourage the search for new therapeutic methods to help facing this problem. The evaluation of the effectiveness of such methods demands the development of experimental models that allow quantitative and qualitative analysis of their effects. The aim of this study was to evaluate a low cost experimental model for quantitative analysis of bone healing over time. For this, monocortical defects with a diameter of 3.2 mm were drilled on the medial face of the proximal metaphysis of Wistar rats. After follow-up times of one, two, four, eight and twelve weeks, macroindentation tests were performed on the tissue formed within the defects. Two indenter tip diameters were testes: 3.2 mm and 5.0 mm. Simultaneously, the tissue was characterized by optical microscopy, scanning electron microscopy (SEM), Raman spectroscopy, energy dispersive x-ray spectroscopy (EDS) and micro=computed tomography (micro-CT). It was observed that the average indentation force increased steadily over time, except for the two-week follow-up group. The indenter with tip of 5.0 mm was superior to that with tip of 3.2 mm because it allowed detection of statistically significant increase of the average indentation force from four to eight weeks of follow-up, as long as the other indenter allowed it only from four to twelve weeks of follow-up. Regarding other experimental models usually employed, this one has the advantages of using standard defects, reducing surgery time, eliminating implants, minimizing the influence of bone size and of the stresses and strains arising from animals¿ weight bearing and movement, and simplifying the test samples preparation. The main limitation of this model is its inapplicability to follow-up times shorter than four weeks due to the high average indentation force observed in the two-week follow-up group. This finding could be justified by the intense neoformation of dense connective tissue inside the medullary cavity, producing a mass effect which made more difficult the penetration of the indenter. It can be concluded that the model presented was effective to point increase in mechanical resistance of the repair tissue in the interval between four and eight weeks of follow-up. This model can be used as a quantitative tool, easy to perform and with sensitivity to identify the positive and negative influence of therapeutic methods that have the purpose of stimulating bone repair or not Doutorado Fisiopatologia Cirúrgica Doutora em Ciências CAPES 02-P-3369/2017 FAPES 2014/26729-0

Orientador: Marcio de Moraes Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: Introdução: Seios maxilares pneumatizados e reabsorção do osso residual em região posterior de maxila após extração dentária requerem procedimentos cirúrgicos para restauração do tecido ósseo nos planos horizontal e vertical, previamente à instalação de implantes dentários. Atualmente, tem sido amplamente difundido à diversificação no emprego de substitutos ósseos utilizados em cirurgia de levantamento do seio maxilar (CLSM), fortalecendo os estudos comparativos e randomizados. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi comparar através de dados clínicos, radiográficos e histomorfométricos a utilização de dois substitutos ósseos inorgânicos em CLSM. Materiais e métodos: Pacientes edêntulos em região posterior de maxila bilateralmente, sistemicamente saudáveis, que apresentassem remanescente ósseo residual ? 4mm e que objetivassem à instalação futura de implantes dentários, caracterizando a terapia em duas etapas, foram incluídos no estudo. 15 pacientes satisfizeram os critérios estabelecidos e estes foram submetidos à CLSM bilateralmente, com a utilização do substituto ósseo inorgânico de maneira randomizada em relação ao lado operado e o biomaterial utilizado (Bio-Oss® ou Lumina-Bone Porous®). Exames imaginológicos foram realizados no período pré-operatório e 6 meses após a terapia reconstrutiva para mensuração do ganho ósseo. Espécimes de tecido ósseo foram obtidos através da utilização de trefina cirúrgica no momento da realização dos implantes para avaliação histomorfométrica em relação ao percentual de osso neoformado, partículas residuais do substituto ósseo inorgânico, tecido conjuntivo e volume ósseo total. A análise estatística foi realizada através da distribuição de normalidade (Shapiro-Wilk) além de teste-t pareado e ANOVA two-way. Resultados: 13 pacientes permaneceram no estudo, com uma média de idade de 55 anos ± 8,13. A taxa de sobrevivência de implantes instalados após 3 anos de reparo nas áreas reconstruídas foi de 100% no Bio-Oss® e 88,88% no Lumina-Bone Porous®; através de tomografia computadorizada por feixe cônico o aumento ósseo dos rebordos residuais atróficos foi de 3,11 ± 0,83mm para 11,56 ± 2,03mm no Bio-Oss® e 2,38 ± 0,75mm para 10,62 ± 1,93mm no Lumina-Bone Porous®. Por meio de análise histomorfométrica, resultados correspondentes ao novo osso formado no Bio-Oss® foi de 20,4 ± 5,4% e Lumina-Bone Porous® foi de 22,8 ± 8,5% (p=0,40); em relação às partículas residuais dos substitutos ósseos no momento de instalação dos implantes no Bio-Oss® foi de 19,9 ± 8,6% e no Lumina-Bone Porous® foi de 14,6 ± 5,6% (P=0,015); em relação ao tecido conjuntivo no Bio-Oss® foi de 59,74 ± 9,2% e 62,61 ± 11,8 no Lumina-Bone Porous® (p= 0,174); o volume ósseo total foi de 40,25 ± 9,2 no Bio-Oss® e 37,38 ± 11,8 no Lumina-Bone Porous® (p= 0,174). Conclusão: Considerando aplicações clínicas, esses resultados são relevantes para direcionar o desenvolvimento e aplicabilidade de substitutos ósseos utilizados em cirurgias de levantamento de seio maxilar, tendo ambos mostrado diferenças no volume e formação óssea, porém com sucesso e manutenção dos implantes instalados após 3 anos de acompanhamento Abstract: Background: Pneumatized maxillary sinuses and reabsorption of residual bone in posterior maxillary region after dental extraction require surgical procedures to restore bone tissue in the horizontal and vertical planes, prior to the placement of dental implants. Currently, it has been widely disseminated to the diversification in the use of bone substitutes used in maxillary sinus floor augmentation (MSFA), strengthening comparative and randomized studies. In this context, the purpose of the present study was to compare, through clinical, radiographical and histomorphometrical data, the use of two inorganic bone substitutes in MSFA. Materials and Methods: Patients edentulous in the posterior maxilla, systemically healthy, presenting residual bone remnants ? 4 mm and aiming at the future installation of dental implants, characterizing the two-step therapy, were included in the study. 15 patients met the established criteria and were submitted to MSFA bilaterally, using the inorganic bone substitute in a randomized manner to the operated side and the biomaterial used (Bio-Oss® or Lumina-Bone Porous®). Imaging examinations were performed in the preoperative period and 6 months after reconstructive therapy to measure bone augmentation. Bone tissue specimens were obtained through the use of surgical trephine at the moment of placement implants for histomorphometric evaluation in relation to the percentage of neoformed bone, residual particles of the inorganic bone substitute, connective tissue and total bone volume. Statistical analysis was performed through of the normal distribution (Shapiro-Wilk) in addition to paired t-test and ANOVA two-way. Results: 13 patients remained in the study with a mean age of 55 years. The survival rate of implants installed after 3 years of repair in the reconstructed areas was 100% in Bio-Oss® and 88.88% in Lumina-Bone Porous®; through cone beam computed tomography, the bone augmentation of the atrophic residual bone was 3.11 ± 0.83 mm for 11.56 ± 2.03 mm in Bio-Oss® and 2.38 ± 0.75 mm for 10.62 ± 1.93mm on Lumina-Bone Porous®. By means of histomorphometric analysis, results corresponding to the new bone formed in Bio-Oss® were 20.4 ± 5.4% and Lumina-Bone Porous® was 22.8 ± 8.5% (p = 0.40) ; residual bone substitutes at the time of implantation of Bio-Oss® implants was 19.9 ± 8.6% and in Lumina-Bone Porous® was 14.6 ± 5.6% (P = 0.015 ); connective tissue in Bio-Oss® was 59.74 ± 9.2% and 62.61 ± 11.8 in Lumina-Bone Porous® (p = 0.174); the total bone volume was 40.25 ± 9.2 in Bio-Oss® and 37.38 ± 11.8 in Lumina-Bone Porous® (p = 0.174). Conclusion: Considering clinical applications, these results are relevant to guide the development and applicability of bone substitutes used in maxillary sinus surgeries Doutorado Cirurgia e Traumatologia Buco-Maxilo-Faciais Doutor em Clínica Odontológica CAPES

A busca por terapêuticas que almejam o crescimento ósseo vertical, na reconstrução dos maxilares, abrange a utilização de guias cirúrgicos, materiais de enxertia, associados ao uso de carreadores e hormônios. O objetivo deste estudo foi: 1) descrever uma metodologia simplificada e de fácil confecção de um capacete de resina (“resin cap”) para crescimento ósseo vertical em calvária de ratos e 2) avaliar o efeito local e sistêmico do paratormônio (PTH) associado ao uso de biomateriais de origem bovina ou sintética no crescimento ósseo vertical em calvárias de ratos por meio das análises histológica e histomorfométrica. Para atingir o primeiro objetivo foram confeccionados 14 “resin caps” utilizando resina acrílica inserida em cápsulas plásticas de medicamentos. Na calvária de 14 ratos foram realizados dois defeitos de 5 mm de diâmetro (defeito A e defeito B). O defeito A serviu de leito doador do osso autógeno, que foi particulado e preencheu o defeito B, que foi coberto com o “resin cap” que serviu de guia para o crescimento ósseo vertical. Esses animais foram distribuídos em dois subgrupos para a eutanásia com 15 e 60 dias de pós-operatório. Os resultados foram analisados por histologia na qual revelou a presença de tecido ósseo neoformado por quase todo o espaço interno do “resin cap” em ambos os períodos experimentais. Para atingir o segundo objetivo 28 ratos machos foram aleatoriamente distribuídos em 4 grupos: Grupo B (Bio-Oss®), Grupo B_PTH (Bio-Oss® com PTH), Grupo N (Nanosynt®) e Grupo N_PTH (Nanosynt® com PTH) (n = 7). Na calvária dos animais, foram criados, dois defeitos ósseos em formato de fenda circular com diâmetro de 5 mm com mais cinco sítios decorticalizados. As fendas ósseas circulares serviram para encaixar os capacetes de resina acrílica (5 mm de diâmetro, 3 mm de altura e 0,2 mm de espessura), preenchidos com os biomateriais, associados ou não ao PTH. No Grupo B, o interior do capacete de resina foi preenchido apenas com Bio-Oss®; no Grupo B_PTH, o interior do capacete de resina foi preenchido com BioOss® embebido com 20 µg PTH; no Grupo N o interior do capacete de resina foi preenchido apenas com Nanosynt®; no Grupo N_PTH o interior do capacete de resina foi preenchido com Nanosynt® embebido com 20 µg PTH. Nos animais dos grupos Grupo B_PTH e Grupo N_PTH foram feitas aplicações sistêmicas, via subcutânea, de PTH, na dose de 20 µg a cada 10 dias, até o período da eutanásia. Os animais dos grupos B e N receberam, da mesma forma e pelo mesmo período injeções de solução salina. A eutanásia foi realizada com 15 e 60 dias de pós-operatório. Foram realizadas as análises histológica e histomorfométrica. Os dados foram submetidos a análise estatística (teste de ANOVA de dois fatores com pós teste de Tukey) com nível de significância 0,05. Aos 15 dias, em todos os grupos, observou-se partículas remanescentes do biomaterial permeadas por tecido conjuntivo fibroso e neoformação óssea imatura. Sendo o grupo B foi o que apresentou maior quantidade de biomaterial remanescente (2,75 mm2 ± 0,74 mm2 ), em relação aos demais grupos, grupo B_PTH (1,58 mm2 ± 0,36 mm2 ), grupo N (1,54 mm2 ± 0,73 mm2 ), grupo N_PTH (1,31 mm2 ± 0,51 mm2 ). Não houve diferença em relação a quantidade de osso neoformado entre os grupos. Aos 60 dias, em todos os grupos, a neoformação óssea estava madura e permeava as partículas do biomaterial e o tecido conjuntivo a partir da base do defeito seguindo as paredes internas do capacete de resina até preencher praticamente todo o espaço. Os capacetes de resina mantiveram o material em seu interior e a cicatrização isolada dos tecidos adjacentes. Não houve diferença em relação a quantidade de biomaterial remanescente e osso neoformado entre os grupos. Conclui-se que os “resin caps” idealizados neste estudo são de confecção simples e econômica, biotoleráveis aos tecidos adjacentes ao campo cirúrgico, com encaixe preciso à ranhura óssea e que o crescimento ósseo vertical é possível de ser alcançado com esta metodologia e que ambos os biomateriais pesquisados podem ser considerados como escolhas para esses procedimentos. A utilização não intermitente do PTH, na periodicidade de dez dias, parece não gerar benefícios ao enxerto e a neoformação óssea. The search for therapies that target vertical bone growth in the reconstruction of the maxillaries includes the use of surgical guides, grafting materials, associated to the use of carriers and hormones. The objective of this study was: 1) to describe a simplified and easy-to-make resin cap for vertical bone growth in calvaria of rats and 2) to evaluate the local and systemic effect of the parathyroid hormone (PTH) associated with the use of biomaterials of bovine or synthetic origin in vertical bone growth in calvaries of rats through histological and histomorphometric analysis. To reach the first objective were made 14 resin caps using acrylic resin inserted in plastic capsules of medicines. In the calvaria of 14 rats two defects of 5 mm in diameter (defect A and defect B) were performed. The defect A served as a donor area of the autogenous bone, which was particulate and filled with defect B, which was covered with the resin cap that served as a guide for vertical bone growth. These animals were subdivided into two subgroups for euthanasia at 15 and 60 postoperative days. The results were analyzed by histology in which it revealed the presence of neoformed bone tissue by almost all the internal space of the resin cap in both experimental periods. To achieve the second objective, 28 male rats were randomly divided into 4 groups: B group (Bio-Oss®), B_PTH group (Bio-Oss® with PTH), N group (Nanosynt®) and N_PTH group (Nanosynt® with PTH) (n = 7). In calvaria of the animals, two bone defects were created in a circular slit shape with a diameter of 5mm with five decorticalized sites. Circular bone crevices were used to fit acrylic resin caps (5 mm in diameter, 3 mm in height and 0.2 mm in thickness), filled with biomaterials, associated or not with PTH. In Group B, the inner of the resin cap was filled only with Bio-Oss®; in Group B_PTH, the inner of the resin cap was filled with Bio-Oss® soaked with 20 μg PTH; in Group N the inner of the resin cap was filled only with Nanosynt®; in Group N_PTH, the inner of the resin cap was filled with Nanosynt® soaked with 20 μg PTH. In the animals of the Groups B_PTH and Groups N_PTH, systemic applications were done subcutaneously of PTH at a dose of 20 μg every 10 days until the euthanasia period. The animals of Groups B and N received, in the same way and for the same period, injections of saline solution. Euthanasia was performed at 15 and 60 postoperative days. Histological and histomorphometric analyzes were performed. The data were submitted to statistical analysis (two-way ANOVA test with Tukey post test) with a significance level of 0.05. At 15 days, in all groups, remaining biomaterial particles were observed permeated by fibrous connective tissue and immature bone neoformation. The B group showed the highest amount of biomaterial remaining (2.75 ± 0.74), in relation to the other groups, B_PTH group (1.58 ± 0.36), N group (1.54 ± 0, 73), N_PTH group(1.31 ± 0.51). There was no difference in the amount of neoformed bone between the groups. At 60 days, in all groups, the new bone formation was mature and permeated the biomaterial particles and connective tissue from the base of the defect following the internal walls of the resin cap until filling almost the entire space. Resin caps kept the material inside and wound healing isolated from adjacent tissues. There was no difference in the amount of remaining biomaterial and neoformed bone between the groups. It is concluded that the resin caps idealized in this study are simple and economical, biotolerable to the tissues adjacent to the surgical field, with precise fitting to the bone groove and that vertical bone growth is possible to be achieved with this methodology and both the researched biomaterials can be considered as choices for these procedures. The non-intermittent use of PTH, at the periodicity of ten days, does not seem to generate benefits to graft and bone neoformation.

Orientador: Celso Aparecido Bertran Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química Resumo: O biovidro 45S5® é um dos materiais mais promissores para reparo de danos no tecido ósseo, especialmente em intervenções buco-maxilares, devido à sua biocompatibilidade, bioatividade e osteoindutividade. Porém, sua reduzida janela de sinterização faz com que a maioria das tentativas de construir "scaffolds" deste biovidro com um bom compromisso entre porosidade e propriedades mecânicas resulte em cristalização, o que afeta as propriedades que o tornam um material tão promissor. Nessa dissertação, foi desenvolvida uma estratégia para produção de "scaffolds" de biovidro 45S5v® a partir do uso de partículas grandes e pequenas do biovidro produzidas pela técnica de fusão e resfriamento. Os "scaffolds" foram preparados pela aglutinação dessas partículas com um sol-gel de mesma composição e um agente porogênico, sendo posteriormente moldados em cilindros. Foram avaliados sóis-géis catalisados pelos ácidos nítrico e fórmico. Analisou-se também a associação de surfactante Renex 120® aos sóis-géis, visando melhorar a molhabilidade das partículas de biovidro. Peróxido de hidrogênio em conjunto com surfactante e microesferas de poliestireno foram avaliadas como agentes porogênicos. Para conseguir valores de porosidade e resistência mecânica adequadas, foram estudadas razões de partículas/sol-gel e partículas/microesferas de poliestireno, assim como diversas metodologias de calcinação. Inicialmente, foram testadas somente as partículas grandes, e os resultados obtidos mostraram que o sol-gel catalisado por ácido fórmico 0,1 mol L-1 leva ao melhor recobrimento e o uso de microesferas de poliestireno como agente porogênico permitiu obter "scaffolds" com poros interconectados maiores que 50 µm. Para as partículas pequenas, utilizou-se a mesma metodologia, sendo obtidos poros interconectados de tamanhos inclusive maiores que 100 µm. O melhor tratamento térmico foi planejado considerando a estabilidade cinética dos vidros. Os "scaffolds" foram termicamente tratados em estágios para eliminação dos solventes (120 °C por 3 horas), da matéria orgânica (250 °C por 6 horas) e dos nitratos (400 °C por 12 horas) e, finalmente, calcinados (1200 °C por 10 segundos). O grau de cristalização obtido foi muito menor que o reportado na literatura para "scaffolds" de 45S5®. A cristalização parcial pode ser justificada pela possível formação de cristais durante a calcinação devido à reação das partículas com o sol-gel. A caracterização dos "scaffolds" mostrou que esse material possui a composição esperada para o 45S5® e os ensaios de lixiviação mostram um comportamento típico de biovidro 45S5® não cristalizado. Os resultados confirmam que a estratégia de unir partículas de biovidro 45S5® com um sol-gel com a mesma composição representa uma alternativa válida para a construção de "scaffolds" de biovidro com cristalinidade reduzida, especialmente quando preparados com as partículas pequenas Abstract: The 45S5® bioglass is one of the most promising materials to repair bone tissue damage, especially in Bucco-Maxillo interventions, due to its biocompatibility, bioactivity and osteoinductivity. However, due to its reduced sintering window, attempts to construct scaffolds with a good compromise between porosity and mechanical properties of this bioglass result in crystallization, which affects the properties that make it such a distinctive material. In this dissertation, a strategy was developed for the production of 45S5® bioglass "scaffolds" using large and small particles produced by the melting-quenching technique. The "scaffolds" were prepared by agglutinating these particles with a sol-gel of the same composition and adding a porogenic agent, then moulding into cylinders. Sol-gel catalyzed by nitric and formic acids were evaluated. The association of Renex 120® surfactant with sol-gel was also studied in order to improve the wettability of the bioglass particles. Hydrogen peroxide with surfactant and polystyrene microspheres were evaluated as porogenic agents. In order to obtain adequate porosity and mechanical strength, ratios of particles/sol-gel and particles/polystyrene microspheres were studied, as well as various calcination methodologies. Initially, only the large particles were tested, and the results showed that the sol-gel catalyzed by formic acid 0.1 mol L-1 leads to the best coating and the use of polystyrene microspheres as a porogenic agent allowed to obtain scaffolds with interconnected pores greater than 50 µm. For the small particles, the same methodology was used, obtaining interconnected pores bigger than 100 µm. The best heat treatment was planned considering the kinetic stability of the glasses. The "scaffolds" were thermally treated in stages to eliminate solvents (120 °C for 3 hours), organic matter (250 °C for 6 hours) and nitrates (400 °C for 12 hours) and finally calcined (1200 °C for 10 seconds). The degree of crystallization obtained was much lower than that reported in the literature for 45S5® "scaffolds". The partial crystallization can be justified by the possible formation of crystals during calcination due to the reaction of the particles with the sol-gel. The characterization of the "scaffolds" showed that this material has the expected composition and the leaching tests show a typical behaviour of uncrystallized 45S5® bioglass. The results confirm that the strategy of joining bioglass particles with a sol-gel of the same composition represents a valid alternative for the construction of bioglass "scaffolds" with reduced crystallinity, especially when prepared with the small particles Mestrado Físico-Química Mestre em Química CNPQ FAPESP 2017/13932-6

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Terapias com células indiferenciadas são uma promissora ferramenta para aprimorar a reparação de diversos tecidos e órgãos. Muitos benefícios já foram demonstrados in vitro, entretanto, esforços têm sido dedicados para manter as células aplicadas in vivo no sítio em que se deseja a reparação, e, nesse contexto, biomateriais têm sido desenvolvidos. Assim, o objetivo do presente trabalho foi dispobilizar um método completo para obtenção, expansão e caracterização de células mesenquimais estromais (CME) oriundas da medula óssea de coelhos e avaliar o potencial de reparação óssea destas células quando utilizadas em associação com um novo biomaterial composto de hidroxiapatita e fibroína de seda (HAP/FS). Células mononucleares da medula óssea (CMMO) do úmero e fêmur de coelhos foram obtidas e, para avaliar sua taxa de proliferação, três meios de cultura diferentes foram testados. As CMMO também foram cultivadas em meios de indução osteogênico, condrogênico e adipogênico para comprovar a sua multipotencialidade. Em seguida, o biomaterial proposto foi caracterizado por difração de raios-x e microscopia eletronica de varredura, e seus efeitos na viabilidade celular e na ativação de leucócitos foram investigados. Finalmente, foi avaliada a habilidade deste biomaterial em atuar como um carreador de CME e o efeito da associação das CME ao biomaterial na reparação de defeitos ósseos na calvaria de coelhos também foi investigado. Os resultados mostraram que as técnicas aqui apresentadas fornecem um método completo para obtenção, expansão e caracterização de CME da medula óssea de coelhos de forma adequada e que a utilização destas células em associação com o compósito de HAP/SF teve um efeito benéfico na reparação dos defeitos em calvaria de coelhos. Therapies based on undifferentiated cells has been shown to be a promising tool to improve the repair of various tissues and organs. Many benefits have been demonstrated in vitro already, however, efforts have been addressed to maintain the cells applied in vivo at the site where the reparation is desired, and, in this context, biomaterials have been developed. Therefore, the aim of this study was to provide a full method to harvest, expand and characterize mesenchymal stromal cells (MSCs) from rabbits’ bone marrow and to assess the bone repair potential of these cells when applied in combination to a new biomaterial composed of hydroxyapatite and silk fibroin (HAP/SF). Bone marrow mononuclear cells (BMMCs) were harvested from rabbits’ humerus and femur and their proliferation rate were tested using three different culture media. BMMCs were also cultured in osteogenic, chondrogenic and adipogenic media to prove their multipotentiality. Next, the biomaterial proposed was characterized by x-ray diffraction and scanning electron microscopy, and its effects on cell viability and leukocytes activation were assessed. Finally, the biomaterial ability to act as MSCs carrier was evaluated, and its effect, in combination with the proposed biomaterial, on the repair of bone defects in rabbits’ calvaria was also investigated. The results showed that the techniques presented here provide a full method for successful isolation, expansion and characterization of MSCs from rabbits’ bone marrow and the utilization of these cells combined to the HAP/SF composite have had a benefic effect on the defects repair in calvaria of rabbits.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico As lesões ou perdas de tecido ósseo são condições que afetam diretamente a qualidade de vida dos seres humanos e animais. Os processos de reparação podem não ocorrer de maneira eficiente quando existirem condições clínicas desfavoráveis. Alguns compósitos, polímeros e proteínas são utilizados na formação de matrizes por promover maior eficiência nesse processo reparador. Entretanto, os biomateriais utilizados hoje no tratamento dessas afecções ainda apresentam algumas propriedades que devem ser adequadas ao uso do mesmo. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial reparador do compósito constituído de hidroxiapatita (HAP) e fibroína da seda (FS) na presença de ácido hialurônico (AH) em diferentes concentrações, utilizado para o tratamento de defeitos ósseos experimentais realizados na ulna de coelhos. Primeiramente, foram realizadas análises de difração de raios-X e microscopia eletrônica de varredura com o objetivo de caracterizar a topografia de superfície, porosidade e grau de cristalinidade de cada compósito. Posteriormente, foram realizados testesin vivode biocompatibilidade e biodegradabilidade do compósito. Para tal, foram utilizados três coelhos que receberam, cada um, quatro implantes no subcutâneo de um mesmo compósito. O coelho numero 1 recebeu quatro implantes referentes ao compósito 1 (HAP+FS). O coelho numero 2 recebeu quatro implantes referentes ao compósito 2 (HAP+FS+1%AH). E por fim, o coelho número 3 recebeu quatro implantes referentes ao compósito 3 (HAP+FS+3%AH). Uma amostra de cada animal foi coletada em cada um dos dias 15, 30, 60 e 90 dias, após a cirurgia e processadas para avaliação histológica.Por fim, avaliou-se também a capacidade de osteocondução e osseointegração através da implantação dos compósitos 1, 2 e 3 em um defeito previamente criado no olecrano dos animais. As cirurgias de implantação no olecranoforam realizadas após divisão dos grupos experimentais, contendo 10 animais cada, em grupo tratado e controle, sendo o grupo controle não recebendo nenhum tipo de tratamento.As avaliações clínicas foram realizadas durante os sete dias e depois aos 30 dias de pós-operatório. Radiografias dos membros operados foram realizadas no pós-operatório imediato, após sete e 30 dias de tratamento.Atomografia microcomputadorizada e as análises histológicasforam realizadas coletando-se as amostras aos sete e 30 dias de implantação do compósito no tecido ósseoe a microscopia eletrônica de varredura somente após 30 dias de implantação. Os resultados das análises de difração de raios-X revelaram três compósitos de alta cristalinidade, e as imagens de microscopia eletrônica de varredura demonstraram que o compósito HAP+FS+3%AH possuía uma topografia mais complexa e porosa, em relação aos outros dois compósitos HAP+FS e HAP+FS+1% AH, demonstrando ser uma superfície ideal para a adesão e proliferação celular. Ao teste de biocompatibilidade, os três compósitos apresentaram integração com o tecido, com proliferação tecidual, fragmentação do compósito e, ao final da avaliação, observou-se a formação de um tecido fibroso organizado ao redor do biomaterial. As avaliações clínicas demonstraram um compósito biocompatível e tolerado pelos animais, e as radiografias dos grupos tratados demonstraram diminuição da radiopacidade óssea, tornando-se semelhante ao osso adjacente aos 30 dias de pós-operatório. A tomografia microcomputadorizada demonstrou, através de imagens tridimensionais, uma perda maior na regularidade da borda do defeito no grupo tratado com HAP+FS+3%AH em comparação com os outros grupos, sugestivo de crescimento de tecido ósseo e demonstrando ser o melhor compósito para o tratamento do ponto de vista dessa análise. A histopatologia e a microscopia eletrônica de varredura revelaram uma interação compósito e tecido, com a formação de tecido ósseo ao redor do implante e a análise histomorfométrica revelou quantidade maior de trabéculas ósseas jovens no grupo tratado com HAP+FS+3%HA, demonstrando ser o melhor tratamento utilizado neste estudo para os defeitos criados nos olecranos de coelhos. The lesions or bone loss are conditions that directly affect the quality of life of humans and animals. The repair process may not occur efficiently when there are unfavorable conditions. Some composites, polymers, and proteins are used to form matrices to promote higher efficiency in this repairing process. However, the biomaterials used today in the treatment of these diseases still have some properties so that these biomaterials could suitable for use. The objective of this work was to evaluate the reparative potential of the composite consisting of hydroxyapatite (HAP) and fibroin silk (FS) in the presence of hyaluronic acid (HA) in different concentrations used for the treatment of experimental bone defects made in the rabbits ulna. First, diffraction of X-rays and scanning electron microscopy analyzes were performed in order to characterize the surface topography, porosity and degree of crystallinity of each composite. Later, in vivo biocompatibility and biodegradability of the composite tests were performed. To this end, three rabbits were used who received each four implants into the subcutaneous tissue of the same composite. The number one rabbit received four implants for the composite 1 (HAP + FS). The number 2 rabbit received four implants for the composite 2 (HAP + FS + 1% AH). Finally, the rabbit number 3 received four implants for the composite 3 (HAP + FS + 3% AH). A sample of each animal was collected in each of days 15, 30, 60 and 90 days after surgery and processed for histological evaluation. Finally, we assessed whether her ability to osteoconductive and osseointegration through the deployment of composite 1, 2 and 3 in a defect previously created in the olecranon animals. The implementation of the olecranon surgeries were performed after division of experimental groups of 10 animals each, in treated and control group, and the control group not receiving any kind of treatment. Clinical evaluations were performed 7 days and then at 30 days postoperatively. X-rays of operated limbs were performed in the immediate postoperative period, after 7 and 30 days of treatment. The microcomputadorizada tomography and histological analyzes were performed by collecting samples at seven and 30 days of composite implantation into bone tissue and scanning electron microscopy only after 30 days of implantation. The results of the analysis of diffraction X-rays revealed three composite of high crystallinity, and scanning electron microscopy pictures show that the composite HAP + FS + 3% HA had a more complex porous topography another two composites HAP + FS e HAP+FS+ 1% AH, proving to be an ideal surface for cell adhesion and proliferation. When biocompatibility test, the three composites showed integration with the tissue with tissue proliferation, composite fragmentation and at the end of the evaluation was observed the formation of an organized fibrous tissue around the biomaterial. Clinical evaluations demonstrated a biocompatible composite tolerated by the animals, and radiographs of the treated groups showed decreased bone radiopacity, making it similar to the adjacent bone at 30 days postoperatively. The microcomputadorizada tomography demonstrated by means of three-dimensional images, a greater loss in the defect edge regulariy in the group treated with HAP + FS + 3% HA in comparison with other groups, suggestive of bone growth and demonstrated to be the best composite to treating point of view this analysis. Histopathology and scanning electron microscopy revealed a compositeand tissue interaction with the formation of bone tissue around the implant and histomorphometric analysis revealed a greater number of young trabecular bone in the group treated with PAH + FS + 3% HA, proving to be the best treatment used in this study for defects created in rabbits ulna.

Hyperbaric oxygen (HBO) treatment consists in the inhalation of pure oxygen under pressure, which has been used for improve the repair of damaged tissues as well as in the prevention or treatment of tissue necrosis. This therapy has shown positive effects on bone healing with increased osteogenesis and angiogenesis. This study aimed to evaluate the effect of HBO on bone healing through the evaluation of histological (qualitative) and morphometric (bone formation and mast cell count) parameters. Fourty rats were distributed into four groups with 5 animals each (control and HBO). Bone defects were created and the animals in the experimental group were subjected to HBO sessions (90minutos under 2.5 ATA pressure). After 1, 3, 5 and 7 days the animals were euthanized, femurs were removed, processed and analyzed histologically. HBO reduced the amount of mast cells only in the period of 3 days. There was a significant difference in the percentage of bone matrix between the control group and HBO within 5 days. In general, hyperbaric oxygenation fastened the resolution of inflammation and bone repair within one week. A oxigenação hiperbárica (HBO) é um tratamento de inalação de oxigênio puro sob pressão que tem sido utilizada para favorecer o reparo de tecidos lesados, bem como na prevenção ou tratamento de necrose tecidual. Essa terapia tem mostrado efeitos positivos no processo de reparo ósseo com aumento da osteogênese e angiogênese. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da HBO no reparo ósseo, por meio de parâmetros histológicos (qualitativos) e histomorfométricos (neoformação óssea e contagem de mastócitos). Foram utilizados 40 ratos separados em quatro grupos com 5 animais cada (Controle e HBO). Foram criados defeitos ósseos no fêmur dos animais e os animais do grupo experimental foram submetidos a sessões de HBO (90minutos sob pressão de 2,5 ATA). Após 1, 3, 5 e 7 dias os animais foram sacrificados e os fêmures removidos, processados e analisados histologicamente. A HBO reduziu a quantidade de mastócitos apenas no período de 3 dias. Houve diferença significante na porcentagem de matriz óssea entre os grupos controle e HBO no período de 5 dias. De modo geral, a oxigenação hiperbárica acelerou a resolução do processo inflamatório e o reparo ósseo no período de uma semana. Mestre em Odontologia

Orientador: Marcos Akira D'Ávila Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: Na engenharia tecidual, um scaffold altamente poroso é necessário para servir como suporte e guia no crescimento de células e para promover a regeneração de tecidos em três dimensões. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e caracterizar scaffolds tridimensionais hierárquicos produzidos pela combinação das técnicas de bioextrusão e eletrofiação visando sua aplicação na regeneração de tecido ósseo. A nova proposta foi combinar essas tecnologias para produzir arquiteturas hierárquicas com macro- e micro-porosidades. A arquitetura filamentar tridimensional foi obtida por bioextrusão, que confere resistência mecânica e define os aspectos dimensionais do scaffold. Sendo construídas estruturas tridimensionais de poli(?-caprolactona) (PCL) e PCL reforçado com partículas de hidroxiapatita (HA) nas composições de 20 e 25% em peso. Enquanto que a arquitetura fibrosa da manta porosa foi obtida por eletrofiação, esta melhora a interação celular no scaffold. Os scaffolds tridimensionais hierárquicos são formados pelas estruturas tridimensionais combinadas com as mantas fibrosas de poli(L-ácido láctico) (PLLA) ou fibroína de seda (SF). Foram realizadas caracterizações morfológicas dos scaffolds utilizando microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microtomografia computadorizada (Micro-CT), estudo das propriedades térmicas mediante a análise termogravimétrica (TGA) e calorimetria exploratória diferencial (DSC). Além disso, a presença do reforço cerâmico foi verificada mediante difração de raios X (DRX), a estrutura química mediante espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e propriedades hidrofílicas mediante medição do ângulo de contato. Finalmente, foram realizados testes in vitro de cultura de células, para avaliar a citocompatibilidade dos scaffolds. Com a análise de MEV e Micro-CT foi verificada a interligação entre os poros, adesão entre as camadas de material e presença de partículas de HA dispersas nos filamentos. Através das caraterizações de DSC e DRX, observou-se que as partículas de HA não promoveram a cristalização nos scaffolds compostos. Dentre os scaffolds tridimensionais hierárquicos, aqueles contendo mantas de fibras de SF apresentaram resposta biológica favorável. Concluiu-se que os scaffolds tridimensionais hierárquicos representam uma alternativa para serem explorados na regeneração tecidual Abstract: In tissue engineering, a highly porous artificial scaffold is required in order to act as a supporting structure for guiding and to promote tissue regeneration in three dimensions. The goal of this study was to develop and characterize hierarchical three-dimensional scaffolds produced by combining both bioextrusion and electrospinning aiming applications in bone tissue regeneration. The motivation was to combine these technologies to produce hierarchical architectures with macro- and micro-porosities. The three-dimensional filamentary architecture was obtained by bioextrusion that provide mechanical strength and define the dimensional aspects of the scaffolds. Three-dimensional structures polycaprolactone (PCL) and PCL reinforced with hydroxyapatite (HA) particles with the concentrations of 20 to 25 %wt. were obtained. Whereas the fiber architecture of the porous mats was obtained by electrospinning, this improves cell interaction in the scaffolds. Hierarchical three-dimensional scaffolds are formed by the three-dimensional structures combined with the fibrous mats of poly (L-lactic acid) (PLLA) and silk fibroin (SF). Scaffolds morphological characterizations were using scanning electron microscopy (SEM) and computed microtomography (Micro-CT), study of the thermal properties by thermogravimetric analysis (TGA) and differential scanning calorimetry (DSC). Moreover, the presence of the ceramic reinforcement was analyzed by X-ray diffraction (XRD). Chemical structure was analyzed by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and hydrophilic properties by contact angle measurements. Finally, in vitro cell culture assay to assess cytocompatibility of scaffolds was performed. With the SEM analysis and Micro-CT was observed interconnection between the pores, the adhesion between the layers of material and the presence of HA particles dispersed in the filaments. Using characterizations of DSC and XRD, it was noted that the HA particles did not promote crystallization in composite scaffold. Among the hierarchical three-dimensional scaffolds, favorable biological response where observed with the ones that include in its structure the fibrous mats of SF. It was concluded that the hierarchical three-dimensional scaffolds can be an alternative to be explored in tissue regeneration Doutorado Materiais e Processos de Fabricação Doutora em Engenharia Mecânica CAPES 33003017

PURPOSE: To analyze the effects of simvastatin (SVT) in the locomotion, anxiety and memory of rats, as a reflection of the administration of a minimum dose capable of stimulating bone regeneration in defects in the calvariae.METHODS: Surgical procedures were performed in 15 female Wistar rats, 2-month old, to insert the grafting material regenerator (Bone-ceramic(r)) and/or SVT, followed by behavioural and cognitive assessments in the 7th, 30th and 60th days post surgery.RESULTS: The SVT locally applied with the goal of bone regeneration in defects created in rat calvariae does not interfere with locomotion, anxiety levels and/or memories of rats, except for the first week following surgery, when an anxiolytic effect was observed, as a result of a possible central action.CONCLUSION: Failure to provoke any response within 30 and 60 days post surgical procedures suggests that SVT may constitute a good choice in stimulating bone regeneration without affecting the long term neural functions.

Made available in DSpace on 2014-08-27T14:36:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-06Bitstream added on 2014-08-27T15:57:09Z : No. of bitstreams: 1 000750034_20151206.pdf: 121129 bytes, checksum: 6db018df5ceff35f98c716e2cb23896e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-12-07T09:44:41Z: 000750034_20151206.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-07T09:45:18Z : No. of bitstreams: 1 000750034.pdf: 8693354 bytes, checksum: 974db9f2b05e2b1eaf29e1a4b9764bcd (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Objetivo: A proposta deste estudo foi avaliar a regeneração óssea de defeitos criados cirurgicamente e naturais circunferenciais (gap) de implantes pósexodônticos. Materiais e método: Para este estudo foram utilizados 8 cães da raça labrador, nos quais foram instalados implantes imediatos (pós-exodônticos) nos alvéolos dos dentes P2 (2o pré-molar) e M1 (1o molar) inferiores bilaterais. Nos implantes da região dos 2º pré-molares bilaterais foram criados cirurgicamente defeitos peri-implantares vestibulares que foram preenchidos de um lado por osso autógeno – OA e do outro por osso bovino inorgânico Bio-Oss ®- OB. Nos alvéolos correspondentes aos primeiros molares (M1) os implantes foram instalados e os gaps (defeitos naturais) existente entre a tábua óssea vestibular e o implante, foram preenchidos por Bone Ceramic ® - (grupo BC) ou somente coágulo (grupo COA). Todos os sítios cirúrgicos foram posteriormente recobertos por membrana de colágeno reabsorvível (Biogide ®) e mantidos com cicatrizador. Após 4 meses de pós-operatório, os animais foram eutanasiados e os blocos ósseos processados laboratorialmente para análise histomorfométrica. Resultados: Os resultados obtidos nos implantes instalados na região do P2 mostraram que os valores do IS-C foram ligeiramente maior (2.3±0.8mm) no grupo OA, comparado ao grupo OB (1.7± 0.7 mm), enquanto o IS-B dos grupos OA e OB foram respectivamente de 2.7±0.7mm e 2.2±1.0 mm no lado vestibular e de 1.6±0.8mm e 0.8±0.5mm no lado lingual. As médias dos valores de PM-C, PM-B e PM-IS no grupo OA e OB foram respectivamente de 4.3±0.9mm, 4.7±0.9mm, 2.0±1.6mm e 4.3±0.6mm... Objective: The purpose of these studies were to evaluate bone regeneration at natural or surgically-created buccal defects at implants placed immediately into extraction sockets (IPIES). Material and methods: Eight Labrador dogswere used and implants were placed immediately into the extraction sockets of P2 (second premolar ) and M1 (first molar), bilaterally. At P2, the buccal wall of the extraction sockets was removed bilaterally to create a standardized defect, 4 mm wide coronally, 2 mm wide apically, and 6 mm height. At P2 sites, Bio-Oss at the test (OB) or autogenous bone at the control (OA) sites were used to fill the defects. At M1 sites, Bone Ceramic ® at the test (BC) or the clot alone (COA) were used to fill the defects. All surgical sites were subsequently covered by a resorbable collagen membraneand a non-submerged healing was allowed . After 4 months the animals were euthanized, bone blocks harvested and processed for histomorphometric analysis . Results: at P2 sites, IS- C values were slightly higher (2.3±0.8mm) in the OA compared to the OB (1.7±0.7 mm). IS- B were 2.7 ± 0.7mm and 2.2 ± 1.0mm on the buccal side and 1.6 ± 0.8mm and 0.8 ± 0.5mm on the lingual side at OA and OB groups, respectively. The average values of PM- C , B - PM and PM -IS in OA and OB groups were 4.3 ± 0.9mm , 4.7 ± 0.9mm , 2.0 ± 1.6mm and 4.3 ± 0.6mm , 4.8 ± 0.6mm , 2.5 ± 0.8mm, respectively. A statistically significant difference was only observed in the thickness of the buccal bony crest at 2-5 mm apically to IS (the implant neck) when the biomaterial (S -OCbt )... FAPESP: 10/15286-9

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-11Bitstream added on 2014-06-13T21:06:12Z : No. of bitstreams: 1 pola_nm_dr_araca.pdf: 634797 bytes, checksum: 8b4ab7ef9455c2193ad36e3bcf123e2a (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este estudo avaliou a influência do Plasma Rico em Plaquetas (PRP) e da Fibrina Rica em Plaquetas (FRP) no reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico (DTC) criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 90 ratos foram aleatoriamente divididos em 3 grupos: C (controle), PRP e FRP. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. Nos grupos PRP e FRP, os defeitos foram preenchidos com PRP e FRP, respectivamente. Os animais foram eutanasiados aos 7, 15 ou 30 dias pós-operatórios. Análises histomorfométrica e imunoistoquímica foram realizadas. A Área de Osso Neoformado (AON) foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Imunomarcações do antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt 2 (Runx2), proteína morfogenética óssea - 2 (BMP-2) e fosfatase alcalina específica do osso (BALP) foram realizadas. Células positivas para PCNA e Runx2 foram quantificadas e as imunomarcações para BMP-2 e BALP foram semi-quantificadas. Os dados foram estatisticamente analisados. Aos 7 dias, o Grupo PRP (10,74 ± 4,80%) apresentou AON significativamente maior do que os grupos C (0,86 ± 0,98%) e FRP (2,95 ± 2,37%). Aos 15 dias, os grupos C, PRP e FRP apresentaram AON similares (13,07 ± 4,48%; 14,19 ± 2,85%; 18,83 ± 6,71%, respectivamente). Aos 30 dias, os grupos PRP (32,75 ± 7,39%) e FRP (28,73 ± 10,67%) apresentaram AON significativamente maior do que o Grupo C(13,55 ± 4,62%). Não houve diferenças estatisticamente significativas entre os grupos PRP e FRP aos 30 dias. Aos 7 dias, os grupos PRP e FRP apresentaram número de células PCNA-positivas significativamente maior do que o Grupo C. Aos 15 dias, o Grupo FRP apresentou número de células... This study evaluated the influence of Platelet-Rich Plasma (PRP) and Platelet-Rich Fibrin (PRF) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSD) in rat calvaria. 90 rats were randomly divided into 3 groups: C (control), PRP and PRF. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In groups PRP and PRF, the defects were filled with PRP and PRF, respectively. Animals were euthanized 7, 15 or 30 days postoperatively. Histomorphometric and immunohistochemical analyses were performed. Newly formed bone area (NFBA) was calculated as percentage of the total area of the original defect. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), Runt-related transcription factor 2 (Runx2) Bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) and Bone Alkaline phosphatase (BALP) immunohistochemical staining were performed. PCNA-positive and Runx2-positive cells were quantified and BMP-2 and BALP immunostaining were semi-quantified. Data were statistically analyzed. At 7 days, Group PRP (10.74 ± 4.80) had significantly greater NFBA than groups C (0.86 ± 0.98) and PRF (2.95 ± 2.37). At 15 days, groups C, PRP and PRF presented similar amount of NFBA (13.07 ± 4.48; 14.19 ± 2.85; 18.83 ± 6.71, respectively). At 30 days, groups PRP (32.75 ± 7.39) and PRF (28.73 ± 10.67) presented significantly greater NFBA than Group C (13.55 ± 4.62) and no significant differences were observed between groups PRP and PRF. At 7 days, Groups PRP and PRF showed a significantly higher number of PCNA-positive cells than Group C. At 15 days, Group PRF had a significantly higher number of PCNA-positive cells than groups C and PRP; Group PRP had a significantly higher number of these cells than Group C... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-05Bitstream added on 2014-06-13T18:41:38Z : No. of bitstreams: 1 colli_vc_dr_araca.pdf: 1176842 bytes, checksum: 7b5e4f64a86568d1041b8b5218994711 (MD5) A ação da ocitocina (OT) como regulador direto da massa óssea foi reportada em roedores jovens e este efeito anabólico foi atribuído à ação periférica deste hormônio. O objetivo deste estudo foi investigar a ação periférica de OT no processo de reparo alveolar de ratas Wistar de 12, 18 e 24 meses. Ratas de 12 meses com ciclo estral normal e ratas de 18 e 24 meses em diestro permanente receberam duas injeções intra-peritoniais (12 horas de intervalo) de salina (NaCl 0,15M – grupos controle) ou OT (134g/Kg – grupos tratados). Sete dias após, o incisivo direito foi extraído e as análises foram realizadas com 28 dias de reparo alveolar (35 dias após administração de salina ou OT). Os resultados plasmáticos de cálcio e fósforo não diferiram entre os grupos. Os marcadores bioquímicos sistêmicos de formação óssea, fosfatase alcalina (FAL) e osteocalcina (OC), não revelaram diferença significativa de valores na comparação entre grupos controle e tratado de 12 meses, porém esta diferença foi significativa para os dois marcadores quando os animais tratados de 18 e 24 meses foram comparados com os respectivos controles. A análise histomorfométrica e a reação de imunohistoquímica contra OC confirmaram estes resultados mostrando que o tratamento com OT, promoveu maior formação óssea nos animais de 18 e 24 meses. O marcador sistêmico de reabsorção óssea, fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) não foi estatisticamente diferente entre animais dos grupos controle e tratado de 12 e 18 meses, porém nos de 24 meses este valor foi significativamente menor nos animais tratados indicando diminuição de reabsorção por ação de OT nos animais desta idade. A imunomarcação para TRAP realizada nos cortes alveolares confirmou os... The action of oxytocin (OT) as a direct regulator of bone mass has been reported in young rodents and this anabolic effect was attributed to the peripheral action of this hormone. The aim of this study was to investigate the peripheral action of OT in the process of alveolar repair of Wistar rats with 12, 18 and 24 months. Rats of 12 months with normal estrous cycle and rats with 18 and 24 months in permanent diestrus received two intra-peritoneal injections (12 hours apart) of saline (NaCl 0.15 M - control group) or OT (134  g / kg - treated groups). Seven days later, the right incisor was extracted and the analyzes were performed with 28 days of alveolar repair (35 days after administration of saline or OT). The plasma results of calcium and phosphorus did not differ between groups. The systemic biochemical bone formation markers, alkaline phosphatase (ALP) and osteocalcin (OC), revealed no significant difference of values in animals of 12 months, but this difference was significant for both markers when treated animals of 18 and 24 months were compared to controls. The histomorphometric analysis and immunohistochemical reaction against osteocalcin confirmed these results showing that treatment with OT, promoted greater bone formation in animals with 18 and 24 months. The systemic marker of bone resorption, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) was not statistically different between animals of the control and treated groups of 12 and 18 months, but in 24 months the values were significantly lower in treated animals indicating decreased resorption action of OT in animals of this age. The immunostaining for TRAP performed on alveolar cuts confirmed the results of the results of systemic markers in groups of 12 and 24 months... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-01-15Bitstream added on 2014-06-13T20:41:19Z : No. of bitstreams: 1 valentinineto_r_dr_araca.pdf: 348074 bytes, checksum: fe35ce64122835a7383e6940b91d45a5 (MD5) Proposição: Este estudo avaliou a resposta tecidual ao implante xenógeno inorgânico de osso bovino, por meio de análise histomorfológica e histomorfométrica, variando-se o método de esterilização. Materiais e Método: Discos de 8 mm costela bovina foram obtidos por processamento específico para remoção de parte orgânica e foram esterilizados por meio de autoclavagem ou radiação gama. Em seguida, 20 coelhos brancos (Nova Zelândia) foram cirurgiados para instalação dos discos na face lateral dos gônios mandibulares, bilateralmente, através de parafuso de fixação de enxertos, originando dois grandes grupos: Grupo EA - implante autoclavado; Grupo EI – implante gama-irradiado. As lâminas foram obtidas nos períodos de 15 e 45 dias pós-operatórios e as imagens teciduais foram analisadas qualitativa e quantitativamente. Resultados: O teste de Kruskal-Wallis foi aplicado e não identificou diferença significativa entre as medidas lineares das interfaces osso/implante (BIC) dos grupos dentro dos mesmos períodos (15 dias: p=0,100; 45 dias: p=0,940). Conclusão: De acordo com a metodologia aplicada, foi possível concluir que o estabelecimento da integração osso/implante cursou com atraso quando o implante foi esterilizado por radiação, porém, com a evolução da reparação, o método de esterilização não ocasionou alterações significativas no período final Proposition: This study evaluated the tissue response to the implant inorganic xenogenic bovine bone through the histomorphological analysis, varying the method of sterilization. Materials and Methods: Discs of 8 mm bovine rib were obtained by specific processing to remove organics phase and were sterilized by autoclaving or gamma radiation. Then, 20 white rabbits (New Zealand) were operated for discs installation on gonion external side of mandibular, bilaterally, through screw grafts, yielding two large groups: EA - implant autoclaved; EI Group - gamma-irradiated implant. Slides were obtained at 15 and 45 days post-operative tissue and the images were analyzed qualitatively and quantitatively. Results: The Kruskal-Wallis test was used and no difference was found between linear interfaces of the bone / implant (BIC) groups within the same period (15 days: p = 0.100; 45 days: p = 0.940). Conclusion: According to the methodology, it was concluded that the establishment of integration bone / implant occurred later when the implant was sterilized by radiation in initial period, but with the evolution of repair, the method of sterilization did not cause significative changes in the final period

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-04Bitstream added on 2014-06-13T19:43:12Z : No. of bitstreams: 1 000736221.pdf: 1133063 bytes, checksum: cf2c29136503b497970c0d4a6bde96bf (MD5) O uso de enxertos ósseos provenientes de bancos de tecidos, também conhecidos como enxertos homólogos, tem aumentado nos últimos anos. Seu uso é indicado na ausência de osso autólogo para captação, ou em casos aonde o paciente apresenta resistência frente à necessidade de manipulação de um segundo leito cirúrgico para captação do biomaterial autólogo. Existem poucos estudos a respeito do comportamento biológico destes enxertos, em especial comparando blocos corticais e cortico medulares, e qual a sua eficiência quando comparado aos enxertos autólogos. O objetivo desta pesquisa foi avaliar, em humanos, a incorporação dos enxertos ósseos homólogos cortical (AL C) e cortico medular (AL CM) comparativamente ao autólogo (AT), com análises tomográfica, histológica e histomorfométrica. Para tal foram avaliados 45 pacientes, sendo que 15 foram submetidos a enxertos ósseos AT, 15 a enxertos ósseos AL CM e 15 com enxerto AL C. Tomografias foram obtidas em três períodos distintos para todos os grupos(AT, AL CM e AL C), antes da cirurgia de enxerto, imediatamente após e oito meses (período final) depois da realização dos enxertos. Após o período final para cada grupo foram removidas biópsia dos enxertos. Análise histomorfométrica dos cortes descalcificados foram realizadas para avaliar a quantidade de osso vital e não vital. Os resultados da análise tomográfica demonstraram maior perda de volume ósseo no grupo AL CM. A análise histomorfométrica mostrou que o grupo AT apresentou maior quantidade de osso vital (27,6%), seguido pelo AL CM (20,3%) e pelo AL C (12,4%). As diferenças foram estatisticamente significantes. Desta forma, pode-se concluir que o osso homólogo cortical apresentou um grande atraso na remodelação óssea. The use of bone grafts obtained from tissue banks, also known as allografts has increased in recent years. Its use is indicated in the absence of autologous bone for capture, or in cases where the patient is resistant towards the need for manipulation of a second surgical site to capture autologous biomaterial. There are few studies on the biological behavior of these grafts, especially comparing cortical and cortico spinal blocks, and what is its efficiency when compared to autologous grafts. The aim of this study was to evaluate, in humans, the incorporation of homologous cortical bone grafts (AL C) and cortical medullary (AL CM) compared to autologous (AT) with tomographic analysis, histology and histomorphometry. To this end, we evaluated 45 patients, 15 underwent bone grafts AT, 15 bone grafts and 15 AL CM graft AL C. CT scans were obtained in three separate periods for all groups (AT, CM and AL AL C) before graft surgery, immediately after eight months (late) after the completion of the grafts. After the final period for each group were removed biopsy of the grafts. Histomorphometric analysis of decalcified sections were performed to assess the amount of vital and non-vital bone. The results of tomographic analysis showed a greater loss of bone volume in the LA group CM. Histomorphometric analysis showed that the AT group had a higher amount of vital bone (27.6%) followed by CM AL (20.3%) and AL C (12.4%). The differences were statistically significant. Thus, one can conclude that homologous cortical bone showed a large delay in bone turnover.

As biocerâmicas têm sido amplamente usadas na Odontologia para preenchimentos de defeitos ósseos. Com o objetivo de avaliar a viabilidade celular foi realizado um estudo in vitro onde foram utilizadas três tipos de biocerâmicas. O efeito citotóxico dos materiais foi avaliado de duas formas diferentes: células mononucleares do sangue periférico de adultos sadios plaqueadas por 24 horas em contato direto com hidroxiapatita sintética (HA), beta tricálcio fosfato sintético (BTCP) e uma associação de ambos os materiais composta por 60% hidroxiapatita sintética e 40% beta tricálcio fosfato sintético (HABTCP) e por diluição seriada. Após 24 horas, as placas passaram por teste de viabilidade celular por MTT-Formazan, com leitura a 570 nm. Para análise estatística, foi aplicado teste não paramétrico de Kruskall-Wallis para análises múltiplas (α=0,05). Em 24 horas, não foram detectadas diferenças significativas nos níveis de absorbância das células mononucleares cultivadas em contato com os três materiais em análise (p>0.05). Nos testes de diluição também não foram encontradas diferenças significativas quando os materiais foram comparados uns com os outros ou mesmo entre si nas diferentes diluições. Nenhum dos materiais mostrou-se significativamente diferente do controle positivo. Conclui-se que os biomateriais avaliados não interferiram na viabilidade celular. The bioceramics has been widely used in Dentistry for fillings of bone defects. With the objective to evaluate the cell viability was performed an in vitro study where we used three types of bioceramics. The cytotoxic effect of the materials was evaluated in two different ways: peripheral blood mononuclear cells of healthy adults tagged for 24 hours in direct contact with synthetic hydroxyapatite (HA), beta tricalcium phosphate synthetic (BTCP), an association of both materials composed of 60% synthetic hydroxyapatite and 40% beta tricalcium phosphate synthetic (HABTCP) and by serial dilution. After 24 hours, the plates were test cell viability by MTT-Formazan Product, with reading at 570 nm. For statistical analysis, non-parametric test was applied Kruskall-wallis Test for multiple analyzes (α=0.05). In 24 hours, no significant differences were found in the levels of absorbance of the mononuclear cells grown in contact with the three materials in analysis (p>0.05). In the tests of dilution also no significant differences were found when the materials were compared with each other or even among themselves in various dilutions. None of the materials was significantly different from the positive control. It appears that the biomaterials evaluated did not interfere with the cellular viability. Dissertação (Mestrado)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-27Bitstream added on 2014-06-13T18:57:04Z : No. of bitstreams: 1 santinoni_cs_me_araca_parcial.pdf: 217418 bytes, checksum: c2320ac05362883a971d3134049288f9 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-07-02T12:36:05Z: santinoni_cs_me_araca_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-02T12:37:29Z : No. of bitstreams: 1 000696925_20200101.pdf: 218230 bytes, checksum: 32560a67e9778b2825cc4d3b11ab4887 (MD5) Bitstreams deleted on 2020-01-06T18:04:04Z: 000696925_20200101.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2020-01-06T18:05:09Z : No. of bitstreams: 1 000696925.pdf: 390251 bytes, checksum: 9a758796c643834cfa1ef728e789e392 (MD5) Bitstreams deleted on 2020-01-06T18:44:06Z: 000696925.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2020-01-06T18:45:03Z : No. of bitstreams: 1 000696925.pdf: 390251 bytes, checksum: 9a758796c643834cfa1ef728e789e392 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente e histometricamente, o processo de cicatrização óssea em defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos e tratados com aspirado de medula óssea (AMO), laser em baixa intensidade (LLLT) ou a associação de ambas as terapias. 40 ratos foram divididos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sangüíneo somente. No Grupo AMO, o defeito foi preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu aplicação da LLLT (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo e AMO, respectivamente, e recebeu novamente a aplicação da LLLT. Todos os animais foram submetidos à eutanásia aos 30 dias pós-operatórios. Análises histomorfométrica, usando software de análise de imagem, e histológica foram realizadas. A Área de Osso Neoformado (AON) foi calculada como uma porcentagem da área total do defeito original. Os dados foram analisados estatisticamente (ANOVA, Tukey, p

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-18Bitstream added on 2014-06-13T19:23:17Z : No. of bitstreams: 1 machado_als_dr_sjc.pdf: 853651 bytes, checksum: c30b47cd05bda2d3f73754c40bac76c1 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A osteoporose é uma doença crônica degenerativa caracterizada por deterioração progressiva e silenciosa da microarquitetura óssea, que requer tratamento, pois aumenta o risco de fraturas. Entre os medicamentos mais utilizados para tratar osteoporose estão os bifosfonatos como o alendronato. Na literatura, há poucos trabalhos que descrevam a ação de medicamentos homeopáticos com possível indicação para o tratamento da osteoporose. O objetivo deste trabalho foi analisar a ação da Calcarea phosphorica em comparação à ação do alendronato sódico na remodelação óssea no fêmur de ratas com deficiência estrogênica. Foram utilizadas 120 ratas divididas em quatro grupos de 30 animais. Aos três meses de idade, três grupos foram submetidos à ovariectomia (OVZ) e um grupo à falsa castração (Sham). Após 60 dias os tratamentos foram iniciados de acordo com os seguintes grupos: Sham com placebo, OVZ com placebo, OVZ com Calcarea phosphorica 6CH (2 glóbulos/ml de água/dia/animal) e o OVZ com alendronato sódico (1,2mg/kg/três vezes/semana/animal). Os animais em grupo de 6 foram sacrificados após 3, 6, 10, 17 e 28 dias de tratamento. O fêmur direito de cada animal foi submetido às analises, histomorfométrica do volume ósseo no colo do fêmur e imunohistoquímica para osteocalcina. Os resultados mostraram que os animais tratados com Calcarea phosphorica responderam ao tratamento com estímulo à proliferação de osteoblastos e aumento de volume ósseo no colo do fêmur enquanto o tratamento com alendronato influiu apenas na diminuição de reabsorção óssea. Concluiu-se que o tratamento com Calcarea phosphorica é valido para o controle da remodelação óssea na osteoporose Ostoporosis is a chronic degenerative disease characterized by bone loss due to progressive damage in the bone microarchitecture. It requires treatment because of the increased risk of fractures. There are few reports describing the effects of homeopathic medication on bone remodeling regarding its possible application in the treatment of osteoporosis. The aim of this study was to analyze the effect of Calcarea phosphorica in comparison to Alendronate on bone remodeling of the proximal area of femurs of osteoporotic rats. For that 120 rats 3 months old were used, divided in 4 groups of 30 animals. Three groups went through bilateral ovariectomy in order to induce osteoporosis, and one group had a sham surgery to become a control group. After 60 days the following treatments began: Sham treated with placebo, ovariectomized treated with placebo, ovariectomized treated with Calcarea phosphorica 6CH (2 globules/1 ml of water/day/animal) and ovariectomized treated with Alendronate sodium (1,2mg/kg/3 times a week/animal). The animals (n= 6) were sacrificed after 3, 6, 10, 17 and 28 days of treatment. The right femur was removed, and representative sections of the femoral epiphysis and trocanter area were selected to histomorphometric and imunohistochemical analyzes. The results showed that the animals treated with the homeopathic remedy Calcarea phosphorica 6CH had a positive response with proliferation of osteoblasts while treatment with alendronate had effect on the osteoclasts inhibiting bone resorption. It is concluded that treatment with Calcarea phosphorica is valid to control bone remodeling in osteoporosis

Objetivo: o objetivo deste estudo foi comparar o desempenho de diferentes tipos de membranas na infiltração de tecido conjuntivo em alvéolos de ratos pós-exodontia. Material e métodos: utilizaram-se 36 ratos divididos em quatro grupos (controle-GC, membrana teflon-GT, membrana de polipropileno-GP e membrana de celulose impregnada com doxiciclina-GCD). Os incisivos centrais superiores direito de cada animal foram extraídos e recobertos com a membrana selecionada exceção o controle onde não se utilizou membrana. Os animais foram sacrificados e obtiveram-se lâminas da região da exodontia. Após a digitalização das amostras mensurou-se a profundidade de tecido conjuntivo invaginado. Resultado: não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos (p=0,0856) com desempenho superior das membranas de teflon em relação às demais. Conclusão: apesar de não haver diferença estatística significante, todas as membranas apresentaram um comportamento semelhante, onde se observou uma tendência de redução da profundidade de infiltração de tecido conjuntivo. Destacou-se o menor grau de infiltração observado no grupo das membranas de teflon. Objective: the aim of this study was to compare the behavior of different kinds of membrane over conjuntive tissue infiltration in the rat¿s aoveolus after extractions. Materials and methods: it was used 36 rats randomly divided in four groups (control-GC, Teflon membrane-GT, Polypropylene membrane-GP, Cellulose impregnated with doxiciclina-GCD). The upper right central incisor to each animal were extracted and recovered with selected membrane, excepted to control group where none membrane were used. The animals were sacrificed and laminas were obtained from each animal. After image digitalization the conjuntive invatination deep were measured. Results: there wasn¿t significative difference between groups (p value = 0,0856). Conclusion: All the membranes have reduced the depth of tissue infiltration. It should be noted the lowest degree of infiltration observed in the group of Teflon membrana.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-09-19Bitstream added on 2014-06-13T20:05:26Z : No. of bitstreams: 1 spinneto_r_dr_arafo_parcial.pdf: 65317 bytes, checksum: 275e7069f99f952d335d29b5b32e4e0f (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:01:11Z: spinneto_r_dr_arafo_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:27Z : No. of bitstreams: 1 000681242_20160919.pdf: 65168 bytes, checksum: eeb0f0531797627ec3d5057c70d2c3e8 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-09-19T11:17:07Z: 000681242_20160919.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-19T11:17:40Z : No. of bitstreams: 1 000681242.pdf: 3371933 bytes, checksum: 68a515cba0d4f0cc221856293f73c5d7 (MD5) O objetivo deste estudo foi avaliar, em humanos, a incorporação do enxerto ósseo homólogo e sua capacidade de osseointegrar implantes de titânio, por meio de análise tomográfica, histológica e histomorfométrica, além de fazer uma avaliação imunológica sistêmica, buscando fatores que indiquem a ocorrência de resposta imune contra esses enxertos, seguindo sua implantação. Para tal foram avaliados 35 pacientes, sendo que 15 foram submetidos a enxertos ósseos autólogos e 20 a enxertos ósseos homólogos, que passaram por avaliação tomográfica (antes, imediatamente após e seis meses depois da realização desses enxertos), por exames imunológicos (hemograma associado às dosagens séricas de TNF-α, IFN-γ, IL-1β e IL-10) anteriormente, e 15, 30 90 e 180 dias após a realização dos enxertos e nos quais foram feitas biópsias, tanto do tecido ósseo (no momento da reabertura dos enxertos para instalação dos implantes) quanto do tecido ósseo com um mini-implante instalado (biopsiado no momento da reabertura da região para instalação de cicatrizadores). Os resultados demonstraram remodelação mais lenta do biomaterial homólogo, em comparação ao autólogo, associada a um maior índice de reabsorção nos seis primeiros meses pós-enxertia, sem alterações hematológicas ou sorológicas relevantes. Os parâmetros associados à osseointegração dos mini-implantes (contato osso implante e área óssea entre as roscas) também foram semelhantes entre os dois grupos tratados. Conclui-se que, dentro das condições experimentais deste estudo, o enxerto ósseo homólogo mostrou-se inferior ao enxerto ósseo autólogo, com processo de incorporação mais lenta, também relacionado a uma maior reabsorção óssea radiográfica, aos seis meses pós-enxertia, e sem alterações hematológicas ou sorológicas... The purpose of this study was to evaluate, in humans, fresh-frozen allogeneic bone grafts incorporation and its capacity of implants osseointegration, using tomographic, histological and histomorphometric evaluation, also looking for signs of systemic immune reaction toward these grafts. For this, we evaluated 35 patients, 15 treated with autologous bone grafts and 20 with fresh-frozen allogeneic bone grafts, who underwent CBCT evaluation (before, immediately after and six months after the completion of these grafts), immunological tests (blood count associated with serum TNF-α, IFN-γ, IL-1β and IL-10), before and 15, 30 90 and 180 days after the graft, and in whom biopsies were taken from both the bone (at the time of reopening grafts for installation of the implants) and the bone tissue with a mini-implant installed (biopsied at the time of reopening the area for installation of healing abutments). Results showed a slower remodeling rate for fresh-frozen allogeneic bone grafts, compared to the autologous material, associated with a higher resorption rate in the first six months post-grafting, with no significant hematological or serum alteration. The parameters associated with mini-implants osseointegration (bone-to-implant contact and bone area between the threads) were also similar between the two studied groups. We conclude that, under the experimental conditions of this study, the fresh-frozen allogeneic bone grafts proved to be inferior to autologous bone graft, with a lower incorporation process, and an increased resorption six months post-grafting, with no significant alterations in blood cell populations or sera. The short term assessment of the parameters related to osseointegration also showed similarity between the groups

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-09-09Bitstream added on 2014-06-13T20:04:02Z : No. of bitstreams: 1 scala_a_dr_araca.pdf: 881800 bytes, checksum: e5815e800d5d9d273ba4ee24380c2131 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Objetivo: Avaliar a influência da plataforma Switching sobre a remodelação dos tecidos peri-implantares. Material e métodos: Em 6 cães labradores, foram extraídos os pré-molares e primeiro molares inferiores bilateralmente. Após 3 meses de cicatrização, na região correpondente ao 1º molar, foi instalado um implante cônico em cada lado da mandíbula, com o ombro do mesmo posicionado ao nível da crista óssea alveolar vestibular. No lado direito da mandíbula, foi utilizado um pilar de diâmetro reduzido em relação à plataforma do implante, criando uma incompatibilidade de 0,85 milímetros (grupo teste), enquanto no lado esquerdo selecionou-se um pilar do mesmo diâmetro da plataforma do implante (grupo controle). Os retalhos foram suturados permitindo a cicatrização não-submersa. Após 4 meses, os animais foram eutanasiados para obtenção dos cortes histológicos para avaliação histométrica. Resultados: Todos os implantes apresentaram-se completamente osseointegrados. No grupo teste foram observados que os níveis ósseos apresentaram-se superiores ao grupo controle. No entanto, a diferença estatisticamente significativa foi encontrada apenas na região vestibular e na região proximal. A dimensão vertical dos tecidos moles foi maior no grupo controle em comparação ao grupo teste. No entanto, foi encontrada diferença estatisticamente significativa apenas na vestibular. Conclusões: O presente estudo demonstrou diferenças nas dimensões dos tecidos duros e moles peri-implantares (vestibular e proximal) como resultado da incompatibilidade do implante / pilar de 0,85 milímetros, quando o ombro do implante foi posicionado ao nível da crista óssea vestibular Aim: to evaluate the effect of platform switching on the peri-implant tissue remodeling. Material & methods: Mandibular premolars and first molars of 6 Labrador dogs were extracted bilaterally. After 3 months of healing, 1 tapered implant was installed on each side of the mandibular molar region with the implant shoulder placed at the level of the alveolar buccal bony crest. On the right side of the mandible, an abutment of reduced diameter in relation to the platform of the implant was used creating a mismatch of 0.85mm (test), while an abutment of the same diameter of the implant platform was affixed in the left side of the mandible (control). The flaps were sutured to allow a non-submerged healing. After 4 months, the animals were sacrificed and ground sections were obtained for histometric assessment. Results: All implants were completely osseointegrated. Bone levels were superior at the test than at the control sites. However, statistically significant differences were found only at the buccal and proximal aspects. The soft tissue vertical dimension was higher at the control compared to the test sites. However, statistically significant differences were demonstrated only or at the buccal aspects. Conclusions: The present study demonstrated differences in peri-implant (buccal and proximal) hard and soft tissue dimensions as a result of an implant/abutment mismatch of 0.85mm, when the implant shoulder was placed at the level of the buccal bony crest