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Resumen: Objetivo: El objetivo de este estudio fue analizar el proceso diagnóstico de los pacientes con fibrosis pulmonar idiopática en España, desde el inicio de los síntomas hasta el diagnóstico y tratamiento antifibrótico, en relación con la publicación de las sucesivas guías de práctica clínica. Material y métodos: Estudio multicéntrico, observacional, ambispectivo, en el que se analizaron los pacientes incluidos en el registro de la fibrosis pulmonar idiopática de la Sociedad Española de Neumología y Cirugía Torácica. Para ello se habilitó un cuaderno electrónico de recogida de datos en la web de la sociedad. Se recogieron variables sociodemográficas y clínicas al diagnóstico y seguimiento de los pacientes. Resultados: Desde enero de 2012 hasta diciembre de 2019 se incluyeron 1.064 pacientes, siendo finalmente analizados 929. El proceso diagnóstico varió en función del año en el que se realizó el diagnóstico y el patrón radiológico observado en la tomografía computarizada de alta resolución. En 244 (26,3%) pacientes, el diagnóstico se realizó con tomografía computarizada de alta resolución de tórax y evaluación clínica. La biopsia quirúrgica se utilizó hasta en el 50,2% de los casos diagnosticados antes del 2011, y en un 14,2% a partir de 2018. La mediana de tiempo que transcurre desde el inicio de los síntomas hasta el diagnóstico es de 360 días (RIC 120-720), siendo mayor de 2 años en el 21,0% de los pacientes. Recibieron tratamiento antifibrótico al 79,4% de los pacientes. El tiempo desde el diagnóstico hasta el inicio del tratamiento fue de 309 ± 596,5 días, con una mediana de 49 (RIC 0-307). Conclusiones: El proceso diagnóstico, incluyendo el tiempo hasta el diagnóstico y el tipo de pruebas utilizadas, ha ido cambiando desde 2011 hasta 2019, probablemente debido el avance en la investigación clínica y la publicación de guías consenso diagnóstico-terapéuticas. Abstract: Objective: The objective of the study was to analyze the diagnostic process and the time until the start of treatment of patients with idiopathic pulmonary fibrosis in relation to the publication of successive clinical practice guide. Material and methods: Multicenter, observational, ambispective study, in which patients includes in the idiopathic pulmonary fibrosis registry of the Spanish Society of Pulmonologist and Thoracic Surgery were analyzed. An electronic data collection notebook was enabled on the society's website. Sociodemographic and clinical variables were collected at diagnosis and follow-up of the patients. Results: From January 2012 to december 2019, 1064 patients were included in the registry, with 929 finally analyzed. The diagnosis process varied depending on the year in which it was performed, and the radiological pattern observed in the high-resolution computed tomography. Up to 26.3% of the cases (244) were diagnosed with chest high-resolution computed tomography and clinical evaluation. Surgical biopsy was used up to 50.2% of cases diagnosed before 2011, while it has been used in 14.2% since 2018. The median time from the onset of symptoms to diagnosis was 360 days (IQR 120-720), taking more than 2 years in the 21.0% of patients. A percentage of 79.4 of patients received antifibrotic treatment. The average time from diagnosis to the antifibrotic treatment has been 309 ± 596.5 days, with a median of 49 (IQR 0-307). Conclusions: The diagnostic process, including the time until diagnosis and the type of test used, has changed from 2011 to 2019, probably due to advances in clinical research and the publication of diagnostic-therapeutic consensus guidelines.

Este estudio analiza la implementación de un proyecto pedagógico en un Frigorífico Recuperado en Argentina, basado en la educación popular y autogestión desde 2016. La metodología participativa adoptada facilitó la integración comunitaria y el empoderamiento de los trabajadores mediante la alfabetización y la educación secundaria para adultos. Los hallazgos revelan una mejora significativa en la sostenibilidad de la cooperativa y la autoestima de los participantes, subrayando la eficacia de combinar educación y acción comunitaria. La discusión resalta la importancia de las perspectivas pedagógicas críticas y la colaboración universitaria en contextos de marginación social. El trabajo concluye que la educación integrada en proyectos de autogestión fortalece las capacidades individuales y colectivas, contribuyendo a una transformación social sustentable.

Background Fibrotic hypersensitivity pneumonitis (fHP) is an immune-mediated interstitial lung disease caused by sensitisation to chronic allergen inhalation. This study aimed to determine prognostic indicators of progression and mortality in fHP. Methods This was a retrospective, multicentre, observational, cross-sectional cohort study of consecutive patients diagnosed with fHP from 1 January 2012 to 31 December 2021. Multivariate Cox regression analyses were used to calculate hazard ratios (HRs) with 95% confidence intervals for predictors of progression and survival. Results A total of 403 patients were diagnosed with fHP: median (interquartile range) age 66.5 (14.0) years, 51.9% females and 55.1% never-smokers. The cause of fHP was mainly fungal (39.7%) or avian (41.4%). Lung biopsy was performed in 269 cases (66.7%). In the whole cohort the variables that were related to mortality or lung transplant were older age (HR 1.08; p

Several in vitro models have investigated the consequences of mechanical stimuli on osteoclasts (OCs). However, the mechanisms whereby mechanical forces trigger osteoclast responses remain poorly understood, and the generation of reactive oxygen species (ROS) and their relationship with bone resorption in OCs under the influence of mechanical forces require investigation. The present work examined the role of centrifugal force application on ROS production and its effect on osteoclast activity and differentiation. Human U937 macrophage cells, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), and periodontal ligament (PDL) fibroblasts treated with polyethylene glycol (PEG) or N-acetylcysteine (NAC) were subject to centrifugal force. Osteoclast markers such as tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) and bone resorption activities were measured. ROS levels and actin ring formation were determined. Also, U937 cell responses to centrifugal force and PEG-induced fusion were studied. Individual cells subjected to centrifugal exertion increased their ROS levels, formed actin-like rings, revealed TRAP expression and bone resorption activities, and expressed typical osteoclast markers. Control PEG-fused U937 cells also showed these effects, and cell treatment with NAC stopped all these responses. Centrifugal force, as well as PEG-induced cell fusion, can promote osteoclast-like features, including oxidative stress. The present experimental model allowed us to understand the mechanisms underlying the osteoclast differentiation associated with ROS production stimulated by mechanical compressive force, where NAC can contribute to reducing this oxidative stress condition.

Off-patent corn (event TC1507) contains genes coding for CRY1F and PAT proteins, which confer resistance to lepidopteran insects and tolerance to the herbicide glufosinate-ammonium. We employed the substantial equivalence approach to investigate the compositional safety of the corn off-patent event (TC1507). The levels of the nutritional contents of proximate analytes in grain and forage tissues of off-patent genotypes of transgenic maize plants and conventional corn genotypes were compared. The levels of the analytes evaluated in the transgenic plants were found to be within the ranges published in the literature for non-transgenic corn and were statistically indistinguishable from the conventional corn from which they are derived (elite corn lines), indicating substantial equivalence between the off-patent (event TC1507) and its conventional counterpart. These results constitute key evidence of the safety evaluation of the world’s first transgenic corn developed from technologies that are in the public domain.

Introduction: Cancer is the second leading cause of death in the United States, surpassed only by cardiovascular disease. However, cancer has now overtaken cardiovascular disease as the main cause of death in 12 countries in Western Europe. The burden of cancer is posing a major challenge to health care systems worldwide and demanding improvements in methods for cancer prevention, diagnosis, and treatment. Alternative and complementary strategies for orthodox surgery, radiotherapy, and chemotherapy need to be developed. Objective: To determine the oncolytic potential of tumor cell-adapted rotavirus in terms of their ability to infect and lysate murine myeloma Sp2/0-Ag14 cells. Materials and methods: We inoculated rotaviruses Wt1-5, WWM, TRUYO, ECwt-O, and WTEW in Sp2/0-Ag14 cells and we examined their infectious effects by immunocytochemistry, immunofluorescence, flow cytometry, and DNA fragmentation assays. Results: Rotavirus infection involved the participation of some heat shock proteins, of protein disulfide isomerase (PDI), and integrin β3. We detected the accumulation of viral antigens within the virus-inoculated cells and in the culture medium in all the rotavirus isolates examined. The rotavirus-induced cell death mechanism in Sp2/0-Ag14 cells involved changes in cell membrane permeability, chromatin condensation, and DNA fragmentation, which were compatible with cytotoxicity and apoptosis. Conclusions: The ability of the rotavirus isolates Wt1-5, WWM, TRUYO, ECwt-O, and WTEW to infect and cause cell death of Sp2/0-Ag14 cells through mechanisms that are compatible with virus-induced apoptosis makes them potential candidates as oncolytic agents.

Resumen: Introducción: El objetivo del estudio fue conocer el manejo de los pacientes con enfermedad pulmonar intersticial difusa (EPID) asociada a enfermedades autoinmunes sistémicas (EAS) en las consultas de neumología especializadas en EPID en el territorio español. Metodología: El área de trabajo de EPID de la Sociedad Española de Neumología y Cirugía torácica (SEPAR) diseñó un cuestionario autocumplimentable de 25 preguntas, sobre aspectos relacionados con el diagnóstico y tratamiento de las EPID- EAS. Este se repartió entre los asistentes de la reunión de invierno del Área EPID y posteriormente vía e-mail a todos los integrantes del área de EPID de SEPAR. La participación fue anónima, voluntaria y sin contraprestación. Resultados: Participaron 74 neumólogos de 58 hospitales. El 77% disponía de una consulta especializada de EPID. Todas las unidades con acreditación SEPAR tenían un comité integrado por neumólogos y radiólogos y participación mayoritaria de patólogos y reumatólogos. En el 75% de los centros había una colaboración estrecha con reumatología para el manejo de las EPID-EAS. Un 85% consideró que la frecuencia de las EPID-EAS en las consultas está en aumento, siendo la más frecuente la EPID asociada a artritis reumatoide. El tratamiento de las EPID-EAS se decide consensuadamente entre neumología y reumatología en el 91,3% de los casos. El 67% de los neumólogos considera que los inmunosupresores y las terapias biológicas pueden enlentecer la progresión de las EPID-EAS. Un 51% utiliza antifibróticos en estas patologías. Conclusiones: La práctica totalidad de las unidades de EPID españolas acreditadas, por SEPAR ha establecido colaboraciones con reumatología para el adecuado manejo de los pacientes con EPID-EAS, habiéndose ido extendiendo esta práctica a unidades aun no acreditadas. Abstract: Introduction: The aim of the study was to know the management of patients with diffuse interstitial lung disease (ILD) associated with a systemic autoimmune diseases (SAD) in pulmonology outpatient clinics in Spain. Methodology: The ILD work area of the Spanish Society of Pulmonology and Thoracic Surgery (SEPAR) designed a self-completed questionnaire of 25 questions, on aspects related to the diagnosis and treatment of ILD-SAD. This was distributed among the attendees of the winter meeting of the ILD Area and later via e-mail to all the members of the ILD area of SEPAR. Participation was anonymous, voluntary and without consideration. Results: 74 pulmonologists from 58 hospitals participated. 77% had a specialized ILD consultation. All Units with SEPAR accreditation had a committee made up of pulmonologists and radiologists and a majority participation of pathologists and rheumatologists. In 75% of the centers there was a close collaboration with Rheumatology for the management of ILD-SAD. 85% considered that the frequency of ILD-SAD consults is increasing, the most frequent being ILD associated with rheumatoid arthritis. The treatment of ILD-SAD is decided by consensus between pulmonologist and rheumatologist in 91.3% of the cases. 67% of pulmonologists consider that immunosuppressants and biological therapies can slow down the progression of ILD-SAD. 51% use antifibrotics therapies in these pathologies. Conclusions: Almost all of the accredited Spanish ILD Units by SEPAR have established collaborations with Rheumatology for the adequate management of patients with ILD-SAD, this practice having been extended to units not yet accredited.

A low-cost custom-made pseudo-anthropomorphic lung phantom, offering a model for ultrasound-guided interventions, is presented. The phantom is a rectangular solidstructure fabricated with polyvinyl alcohol cryogel (PVA-C) and cellulose to mimic the healthy parenchyma. The pathologies of interest were embedded as inclusions containing gaseous, liquid, or solid materials. The ribs were 3D-printed using polyethylene terephthalate, and the pleura was made of a bidimensional reticle based on PVA-C. The healthy and pathological tissues were mimicked to display acoustic and echoic properties similar to that of soft tissues. Theflexible fabrication process facilitated the modification of the physical and acoustic properties of the phantom. The phantom’s manufacture offers flexibility regarding the number, shape, location, and composition of the inclusions and the insertion of ribs and pleura. In-plane and out-of-plane needle insertions, fine needle aspiration, and core needle biopsy were performed under ultrasound image guidance. The mimicked tissues displayed a resistance and recoil effect typically encountered in a real scenario for a pneumothorax, abscesses, and neoplasms. The presented phantom accurately replicated thoracic tissues (lung, ribs, and pleura) and associated pathologies providing a useful tool for training ultrasound-guided procedures.

La financiarización de grandes corporaciones no financieras ha hecho énfasis sobre dos hechos que se identifican a partir de la década de 1980, a los cuales la literatura atribuye efectos negativos sobre la inversión. Estos hechos están representados por el aumento de pagos a accionistas y la acumulación de activos financieros. En este estudio, se analiza la evolución en la composición de activos de grandes empresas no financieras haciendo uso de la información financiera disponible de la base Compustat North America para el periodo 1980-2018. A partir de la exploración de datos, se identifica que existe una característica adicional que consiste en la creciente participación de intangibles que se observa en las estructuras de balance financiero. Esta evidencia permite discutir cómo este tipo de activos pueden dar cuenta de la forma como se instrumenta la financiarización de grandes empresas. Esto también tiene que ver con los marcos normativos de información financiera y sus disposiciones para el reconocimiento de intangibles en los reportes financieros. Como aspecto diferencial, se agrega a la literatura actual que el reforzamiento de una tendencia de acumulación de activos financieros e intangibles está caracterizando el citado proceso de financiarización en el ámbito de las firmas no financieras.

The aim of this work was to study different desalination technologies as alternatives to conventional reverse osmosis (RO) through a systematic literature review. An expert panel evaluated thermal and membrane processes considering their possible implementation at a pilot plant scale (100 m3/d of purified water) starting from seawater at 20 °C with an average salinity of 34,000 ppm. The desalination plant would be located in the Atacama Region (Chile), where the high solar radiation level justifies an off-grid installation using photovoltaic panels. We classified the collected information about conventional and emerging technologies for seawater desalination, and then an expert panel evaluated these technologies considering five categories: (1) technical characteristics, (2) scale-up potential, (3) temperature effect, (4) electrical supply options, and (5) economic viability. Further, the potential inclusion of graphene oxide and aquaporin-based biomimetic membranes in the desalinization processes was analyzed. The comparative analysis lets us conclude that nanomembranes represent a technically and economically competitive alternative versus RO membranes. Therefore, a profitable desalination process should consider nanomembranes, use of an energy recovery system, and mixed energy supply (non-conventional renewable energy + electrical network). This document presents an up-to-date overview of the impact of emerging technologies on desalinated quality water, process costs, productivity, renewable energy use, and separation efficiency.

Today’s firms face a new global economy powered by knowledge rather than physical resources and natural raw materials. Universities are crucial actors in ensuring economic development, not only by training highly qualified human capital, but also by producing new knowledge with innovation potential. University–industry research collaborations (UICs) have been increaingly recognized as an innovation mode. Highly qualified people, mainly at Ph.D. level, are fundamental for the increase of the knowledge pool from which firms and society as a whole can benefit in terms of the production of innovation. The demand for more specialized researchers in business/industry has led to new versions of doctoral programs, such as Industrial Ph.D. Programs (IPPs), which are well-established in a number of countries. After using an analytical international and comparative education methodology, we have found that the cooperation with industry to develop Ph.D. programs in Colombia is relatively weak and requires to be enhanced. In this paper, we argue for the alignment of the so-called third academic mission of economic development with the traditional academic missions of teaching and research through the implementation of IPPs as a mechanism for strengthening the innovation process of firms and country’s economic growth.

Introducción. La entrada de rotavirus a las células parece estar mediado por interacciones secuenciales entre las proteínas estructurales virales y algunas moléculas de la superficie celular. Sin embargo, los mecanismos por los cuales el rotavirus infecta la célula diana aún no se comprenden bien. Existe alguna evidencia que muestra que las proteínas estructurales de rotavirus VP5* y VP8* interactúan con algunas moléculas de la superficie celular. La disponibilidad de las proteínas estructurales de rotavirus recombinantes en cantidad suficiente se ha convertido en un aspecto importante para la identificación de las interacciones específicas de los receptores virus-célula durante los eventos tempranos del proceso infeccioso. Objetivo. El propósito del presente trabajo es realizar un análisis de las interacciones entre las proteínas estructurales de rotavirus recombinante VP5*, VP8* y VP6, y las proteínas celulares Hsc70 y PDI utilizando sus versiones recombinantes purificadas. Materiales y métodos. Las proteínas recombinantes de rotavirus VP5* y VP8* y las proteínas recombinantes celulares Hsc70 y PDI se expresaron en E. coli BL21 (DE3), mientras que VP6 se expresó en células MA104 con virus vaccinia recombinante transfectada. La interacción entre el rotavirus y las proteínas celulares se estudió mediante ELISA, co-inmunoprecipitación y SDS-PAGE/ Western. Resultados. Las condiciones óptimas para la expresión de proteínas recombinantes se determinaron y se generaron anticuerpos contra ellas. Los resultados sugirieron que las proteínas virales rVP5* y rVP6 interactúan con Hsc70 y PDI in vitro. También se encontró que éstas proteínas virales recombinantes interactúan con Hsc70 en las balsas lipídicas (“Rafts”) en un cultivo celular. El tratamiento de las células, ya sea con DLP o rVP6 produjo significativamente la inhibición de la infección por rotavirus. Conclusión. Los resultados permiten concluir que rVP5 * y rVP6 interactúan con Hsc70 y PDI durante el proceso de la infección por rotavirus.

Cancer is a major health problem that poses a great challenge to health care systems worldwide. Tools for cancer treatment have rapidly advanced in recent years, resulting in therapeutic strategies which are alternative and complementary to conventional treatment. To identify the cell surface receptors used by a tumor cell-adapted rotavirus and the cell death markers induced by its infection, we use Wt1-5, a rotavirus isolate recently adapted to tumor cells, to infect the human acute lymphoblastic leukemia cell line, Reh. The expression of cell surface receptors used by Wt1-5 was determined using flow cytometry and an antibody blocking assay to test for their implication in virus infection. Viral antigens and cell death markers induced by rotavirus infection were followed by flow cytometric analysis. The present study showed that rotavirus Wt1-5 was able to use cell surface proteins such as heat shock proteins (HSPs) 90, 70, 60 and 40, Hsc70, PDI and integrin β3. Rotavirus Wt1-5 induced cytotoxic effects including changes in cell membrane permeability, alteration of mitochondrial membrane potential, DNA fragmentation and activation of cell death signaling. Wt1-5 deserves to be further studied as a candidate oncolytic agent due to its ability to induce apoptosis in lymphoblastic leukemia-derived cells.

Live attenuated vaccines have recently been introduced for preventing rotavirus disease in children. However, alternative strategies for prevention and treatment of rotavirus infection are needed mainly in developing countries where low vaccine coverage occurs. In the present work, N-acetylcysteine (NAC), ascorbic acid (AA), some nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) agonists were tested for their ability to interfere with rotavirus ECwt infectivity as detected by the percentage of viral antigen-positive cells of small intestinal villi isolated from ECwt-infected ICR mice. Administration of 6 mg NAC/kg every 8 h for three days following the first diarrhoeal episode reduced viral infectivity by about 90%. Administration of AA, ibuprofen, diclofenac, pioglitazone or rosiglitazone decreased viral infectivity by about 55%, 90%, 35%, 32% and 25%, respectively. ECwt infection of mice increased expression of cyclooxygenase-2, ERp57, Hsc70, NF-κB, Hsp70, protein disulphide isomerase (PDI) and PPARγ in intestinal villus cells. NAC treatment of ECwt-infected mice reduced Hsc70 and PDI expression to levels similar to those observed in villi from uninfected control mice. The present results suggest that the drugs tested in the present work could be assayed in preventing or treating rotaviral diarrhoea in children and young animals.

Título en ingles: Expression and purification of rotavirus structural proteins VP5* and VP8* in bacteria E. coli BL21(DE3) Resumen La caracterización de las proteínas estructurales del rotavirus y de las proteínas de la superficie de la célula hospedera implicadas en la unión y penetración del virion requiere de la disponibilidad de cantidades suficientes y de alto grado de pureza de estas proteínas. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue expresar y purificar las proteínas estructurales del rotavirus de la cepa RRV, VP5* y VP8*, y producir anticuerpos policlonales dirigidos contra ellas. Se expresaron las proteínas recombinantes VP5* (rVP5*) y VP8* (rVP8*) en bacterias E. coli BL21(DE3) transfectadas con el plásmido pGEX-4T que contenía sus secuencias codificantes. Se consideraron como variables el medio de crecimiento, número de bacterias antes de inducir la expresión, concentración del inductor y tiempo de inducción. La mayor proporción de rVP8* se obtuvo cuando las bacterias transformadas se cultivaron en medio LB y la inducción se llevó a cabo con 1 mM de IPTG cuando el cultivo alcanzó una OD 600 nm de 0.5 y la inducción se mantuvo durante 6 h. rVP5* alcanzó la mayor proporción cuando células a una OD 600 nm de 0.2 fueron inducidas con 0.5 mM de IPTG durante 4 h en medio 2XYT en presencia de glucosa al 2 %. Las proteínas recombinantes obtenidas, acumuladas en la fracción insoluble, fueron solubilizadas con detergentes iónicos y no iónicos, seguido de purificación mediante cromatografía de afinidad antes de ser empleadas como antígenos para la producción de anticuerpos policlonales en conejos. Estos anticuerpos se caracterizaron mediante su capacidad de reconocimiento de los antígenos correspondientes en ELISA, “Western blotting”, y en ensayos de inmunocitoquímica en células infectadas con rotavirus RRV. La cantidad y el grado de pureza de las proteínas recombinantes obtenidas, y los anticuerpos dirigidos contra ellas, anticipan su utilidad como herramientas en la caracterización de la interacción virus-célula. Palabras clave: rotavirus; VP5*; VP8*; proteínas recombinantes; E. coli BL21(DE3) Abstract The characterization of rotavirus structural proteins and the cell surface proteins involved in virion binding and penetration depends on the availability of substantial amounts of highly purified proteins. The aim of the present work was to express and purify the rotavirus structural proteins VP5* and VP8* in order to produce polyclonal antibodies against them. Recombinant proteins VP5* (rVP5*) and VP8* (rVP8*) were expressed in E. coli cells transfected with pGEX-4T or pET 28a containing their corresponding encoding sequences. Culture medium, bacterial concentration before induction, inductor concentration and induction time were used as variables. The greater proportion of rVP8* was obtained when transfected bacteria were grown in medium LB and induction was started by adding 1 mM IPTG to cells at OD 600 nm 0.5 followed by 6 h-induction. The highest proportion of rVP5* was reached when cells at OD 600 nm 0.2 were induced with 0.5 mM IPTG for 4 h in medium 2XYT containing 2% glucose. The recombinant proteins accumulated in the insoluble fraction were solubilized with ionic and non-ionic detergents, and purified by affinity chromatography before being used as antigens for production of rabbit polyclonal antibodies. The antibodies produced were characterized through their ability to recognize the corresponding antigens in ELISA, Western blotting, and immunochemistry assays in rotavirus infected cells. The amount and purity of recombinant proteins obtained in this work, and the antibodies against them, are expected to be useful for the characterization of the virus-cell interaction. Keywords: rotavirus; VP5*; VP8*; recombinant proteins; E. coli BL21(DE3)

Rotavirus infection has been reported to induce an inflammatory response in the host cell accompanied by the increased expression or activation of some cellular molecules including ROS, NF-κB, and COX-2. PPARγ stimulation and N-acetylcysteine (NAC) treatment have been found to interfere with viral infections including rotavirus infection. Small intestinal villi isolated from in vivo infected mice with rotavirus ECwt were analyzed for the percentage of ECwt-infected cells, the presence of rotavirus antigens, and infectious virion yield following treatment with pioglitazone. Isolated villi were also infected in vitro and treated with PPARγ agonists (PGZ, TZD, RGZ, DHA, and ALA), all-trans retinoic acid (ATRA), and NAC. After treatments, the expression of cellular proteins including PPARγ, NF-κB, PDI, Hsc70, and COX-2 was analyzed using immunochemistry, ELISA, immunofluorescence, and Western blotting. The results showed that rotavirus infection led to an increased accumulation of the cellular proteins studied and ROS. The virus infection-induced accumulation of the cellular proteins studied and ROS was reduced upon pioglitazone treatment, causing also a concomitant reduction of the infectious virion yield. We hypothesized that rotavirus infection is benefiting from the induction of a host cell proinflammatory response and that the interference of the inflammatory pathways involved leads to decreased infection.

A number of viruses show a naturally extended tropism for tumor cells whereas other viruses have been genetically modified or adapted to infect tumor cells. Oncolytic viruses have become a promising tool for treating some cancers by inducing cell lysis or immune response to tumor cells. In the present work, rotavirus strains TRF-41 (G5) (porcine), RRV (G3) (simian), UK (G6-P5) (bovine), Ym (G11-P9) (porcine), ECwt (murine), Wa (G1-P8), Wi61 (G9) and M69 (G8) (human), and five wild-type human rotavirus isolates were passaged multiple times in different human tumor cell lines and then combined in five different ways before additional multiple passages in tumor cell lines. Cell death caused by the tumor cell-adapted isolates was characterized using Hoechst, propidium iodide, 7-AAD, Annexin V, TUNEL, and anti-poly-(ADP ribose) polymerase (PARP) and -phospho-histone H2A.X antibodies. Multiple passages of the combined rotaviruses in tumor cell lines led to a successful infection of these cells, suggesting a gain-of-function by the acquisition of greater infectious capacity as compared with that of the parental rotaviruses. The electropherotype profiles suggest that unique tumor cell-adapted isolates were derived from reassortment of parental rotaviruses. Infection produced by such rotavirus isolates induced chromatin modifications compatible with apoptotic cell death.

Introducción. La entrada del rotavirus a la célula implica un mecanismo de múltiples pasos; las proteínas virales externas interaccionan con cuatro diferentes integrinas y Hsc70. Recientemente reportamos que la infección por rotavirus disminuye cuando se bloquea la proteína disulfuro-isomerasa de la superficie celular, lo que sugiere su interacción con el rotavirus en el proceso de entrada. Objetivo. Establecer la interacción del rotavirus con la proteína disulfuro-isomerasa en un sistema in vitro utilizando la proteína aislada de hígado bovino y, en un sistema celular, utilizando vellosidades intestinales de ratón y células MA104. Materiales y métodos. Se aisló la proteína disulfuro-isomerasa a partir de un homogenizado de hígado bovino utilizando anticuerpos anti-proteína disulfuro-isomerasa acoplados a agarosa mediante enlace hidrazona. La proteína disulfuro-isomerasa purificada se examinó por SDS-PAGE y Western blot y se utilizó para estudiar su interacción in vitro con rotavirus. Esta interacción se comparó con aquella observada en células MA104 y en las vellosidades intestinales de ratón. Resultados. La proteína disulfuro-isomerasa purificada mostró homogeneidad electroforética y fue capaz de unirse a rotavirus en un sistema in vitro. La interacción proteína-rotavirus fue detectada por ELISA de captura usando la proteína disulfuro-isomerasa bovina purificada y rotavirus de las cepas RRV y silvestre ECwt. La interacción de partículas de rotavirus purificadas con la proteína disulfuro-isomerasa celular se evidenció con ELISA, usando lisado celular después de la inoculación viral. Conclusión. La interacción rotavirus-proteína disulfuro-isomerasa fue demostrada in vitro, en células MA104 y en vellosidades intestinales de ratón lactante.

Normal bone remodeling is maintained by a balance between osteoclast and osteoblast activity, whereas defects in osteoclast activity affecting such balance result in metabolic bone disease. Macrophage-macrophage fusion leading to multinucleated osteoclasts being formed is still not well understood. Here we present PEG-induced fusion of macrophages from both U937/A and J774 cell lines and the induced differentiation and activation of osteoclast-like cells according to the expression of osteoclast markers such as tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) and bone resorptive activity. PEG-induced macrophage fusion, during the non-confuent stage, signifcantly increased the osteoclastogenic activity of macrophages from cell lines compared to that of spontaneous cell fusion in the absence of PEG (polyethylene glycol). The results shown in this work provide evidence that cell fusion per se induces osteoclast-like activity. PEG-fused macrophage differential response to pretreatment with osteoclastogenic factors was also examined in terms of its ability to form TRAP positive multinucleated cells (TPMNC) and its resorptive activity on bovine cortical bone slices. Our work has also led to a relatively simple method regarding those previously reported involving cell co-cultures. Multinucleated osteoclast-like cells obtained by PEG-induced fusion of macrophages from cell lines could represent a suitable system for conducting biochemical studies related to basic macrophage fusion mechanisms, bone-resorption activity and the experimental search for bone disease therapeutic alternatives.

Los rotavirus son la causa más común de gastroenteritis severa en niños menores de cinco años, ocasionando episodios diarreicos agudos responsables de 454.000 a 705.000 muertes anuales a nivel mundial. Aunque la frecuencia de infección con rotavirus es muy similar a través del mundo, en los países en desarrollo la gastroenteritis rotaviral es la mayor causa de muerte infantil. La diarrea rotaviral severa cursa con vómito y fiebre, produciendo deshidratación con shock, desbalance electrolítico, y muerte si esta no es tratada. En los países desarrollados, la infección rotaviral es responsable del 30 - 50% de las hospitalizaciones debidas a gastroenteritis en menores de 5 años. Además, los rotavirus son una causa importante en la gastroenteritis nosocomial.

Antecedentes. La HSC70 actúa como coreceptor celular de los rotavirus durante la infección en células MA104, pero no se conocen los cambios en la expresión de esta proteína durante la infección del rotavirus. Objetivo. Determinar si los niveles de acumulación de la proteína HSC70 en células MA104 cambian después de la infección con rotavirus. Materiales y métodos. Se estudió la expresión de la proteína de estrés HSC70 mediante inmunofluorescencia, “Western blotting” y ELISA en células de la línea MA104 infectadas con tres cepas de rotavirus: Wa (humana), Rf (bovina), RRV (simio) durante un ciclo de replicación (0 hasta 16 h p.i.). Igualmente, se produjo un anticuerpo policlonal en conejo contra rotavirus que se utilizó para detectar los rotavirus. Resultados La inmunofluorescencia en células infectadas con cada una de las tres cepas de rotavirus muestran una correlación directa entre el aumento de fluorescencia en el citoplasma con el aumento del antígeno viral. La fluorescencia en citoplasma es mayor 1.1. a dos veces en las células infectadas comparadas con las del control, mientras que, la fluorescencia en la membrana celular es semejante a aquella de las células no infectadas del control. La técnica de “western blotting” no permitió establecer diferencias entre los lisados de células MA104 infectadas y no infectadas, porque el aumento de la proteína no alcanza a ser detectado. Según los resultados de ELISA, la HSC70 aumenta en células MA104 después de la infección con RRV de 1.3 a dos veces después de ocho h p.i. Con Rf 1.3 y 2.5 veces después de diez h p.i. y Wa 1.7 a tres veces después de dos h p.i. Conclusión. Los resultados sugieren que la HSC70 aumenta su expresión durante la infección con rotavirus y probablemente está implicada en los pasos del ciclo replicativo: la entrada, el empaquetamiento y la liberación de nuevas partículas virales.

La utilización de la tecnología transgénica en la modificación de las fuentes alimentarias ha permitido desarrollar alimentos menos caros y más saludables. Esta tecnología tiene la potencialidad de reducir el uso de plaguicidas químicos, incrementar la productividad y proteger el hábitat de los humanos y de otras especies. No obstante, los alimentos genéticamente modificados (GM) han dado origen a preocupaciones públicas entre las organizaciones no gubernamentales (NGOs), los consumidores y los medios con relación a su potencial toxicidad, alergenicidad y alteración de los nutrientes. Se presenta una revisión crítica de la literatura reciente sobre las respuestas inmunológicas adversas a las proteínas de los alimentos. Esta revisión incluye las características físicas y químicas de los alergenos, la heterogeneidad en la prevalencia de la alergia a los alimentos y los avances en la comprensión de los desordenes alérgicos producidos por alimentos. Se realiza una descripción del espectro clínico de las reacciones alérgicas inducidas por alimentos, las cuales son responsables de una variedad de síntomas que afectan la piel, el tracto respiratorio y el tracto gastrointestinal. Los métodos utilizados en las pruebas para evaluar la seguridad de los alimentos derivados de los cultivos GM se presentan y discuten. Se concluye que los riesgos alergénicos potenciales introducidos por los alimentos GM no son mayores que los presentados por los alimentos derivados de cultivos modificados genéticamente por los métodos convencionales.

Antecedentes. Los organismos vivos responden al estrés aumentando la síntesis de proteínas. El estrés por choque térmico ha sido el más estudiado y las proteínas que se inducen, se han denominado genéricamente como proteínas de choque térmico. Objetivo.En este trabajo se establecieron las condiciones óptimas de producción de la proteína HSC70, expresada en E.coli BL21 (DE3) y de los anticuerpos policlonales que permitan identificarla. Material y métodos. Mediante varios ensayos se establecieron las concentraciones óptimas del agente inductor isopropil- -D-thiogalacto­piranosido (PTG), del inóculo bacteriano, de empleo de los plásmidos de expresión pET-3a y pET-28a (+); y el método más eficiente para la recuperación de las formas soluble o insoluble de la proteína y de anticuerpos policlonales que la identifiquen. Resultados. Encontramos que el inóculo de cinco colonias con IPTG (2mM) en tubos con cinco mililitros de medio modificado e incubadas por 24 horas a 37°C con agitación constante (200 r.p.m) y tratamiento de sonicación, produce el mejor rendimiento de HSC70. La calidad de la proteína inducida se estableció mediante "Western blotting". Conclusión. La proteína recombinante así obtenida permitió, generar anticuerpos policlonales que a su vez permiten detectar la proteína HSC70 natural en la membrana citoplasmática de diferentes células por inmunofluorescencia, en ELISA, en Western Blot y en pruebas de bloqueo de infección de rotavirus.

El mecanismo de entrada de los rotavirus es un proceso de múltiples pasos el cual no está completamente entendido. La proteína de choque térmico HSC70 (heat shock cognate 70) ha sido propuesta como molécula co-receptora para la entrada de rotavirus. Mediante inmunoprecipitación identificamos la interacción de las proteínas VP6 y VP4 de la cápside del rotavirus RRV con HSC70 en lisados de células MA104 previamente infectadas con rotavirus, sugiriendo la interacción de HSC70 con más de una proteína viral. Posteriormente se dedujeron las secuencias 531-554 de VP4 y 280-297 de VP6 en base a secuencias reconocidas que unen a HSC70. En este estudio determinamos que DLPs y los péptidos sintéticos (280-297) de VP6 y (531-554) de VP4, deducidos teóricamente como de unión a HSC70, inhibían la entrada de los rotavirus RRV, YM y WA de manera dosis dependiente en células MA104 y Caco-2. Igualmente la adición de los péptidos VP4 y VP6 o de DLPs más los péptidos, a concentraciones de inhibición media máxima, inhibió la infección de las tres cepas de manera aditiva. Sueros hiper-inmunes contra los péptidos bloquearon la infección de partículas infecciosas TLPs. Además mediante un ensayo in vitro se determinó la interacción de DLPs con HSC70. Estos resultados sugieren que VP6 participa durante el proceso de entrada de rotavirus uniéndose a HSC70. En resumen, este y otros trabajos confirman la función de la proteína HSC70 como molécula receptora durante la entrada de los rotavirus. Probablemente los dominios 280-297 de VP6 y 531-554 de VP4 son regiones utilizadas por los rotavirus para unirse a HSC70, lo cual apoya el modelo de entrada de múltiples pasos involucrando cambios conformacionales en la partícula viral. Palabras claves: rotavirus, infección, heat shock cognate HSC70, partículas con doble capa (DLPs), péptidos sintéticos.

Un nuevo fantasma parece recorrer el mundo: el fantasma de las plantas transgénicas. Sólo que ahora la santa cruzada que pretende darle cacería la encabezan algunas organizaciones no gubernamentales (ONG), ambientalistas, ecologistas y hasta espontáneos inquisidores de oficio que se abrogan la representación de las más caras preocupaciones públicas sobre los organismos genéticamente modificados (GMO). Al decir de los expertos más recalcitrantes y ortodoxos, estos héroes de los albores del nuevo milenio prometen poner fin al crimen transgénico organizado, talar de una vez y para siempre los bosques de "frankenstrees", adelantar todas las acciones legales nacionales e internacionales tendientes a declarar crimen de lesa humanidad la producción de GMO, e inclusive ofrecen su generosa y antigénica sombrilla para proteger a la humanidad de la más recia y chernobilesca lluvia biotecnológica.

En el presente trabajo se realizó un estudio del virus moteado del clavel (CarMV), en el cual se analizaron con la prueba de ELISA muestras de clavel de diferentes variedades de la Sabana de Bogotá. Esta prueba indicó que el82% de las muestras analizadas eran positivas para el CarMV. El CarMV presente en las muestras positivas fue inoculado mecánicamente en plantas de clavel certificadas libres de virus. La partícula viral se purificó utilizando centrifugación en gradientes y colchones de sacarosa. La proteína de la cápside fue analizada por electroforesis SDS-PAGE, encontrándose una banda de proteína de masa molecular relativa aproximada de 38kDa. El tejido infectado con el CarMV se sometió a un proceso de extracción de RNA de doble cadena (dsRNA) encontrándose de 3 a5 componentes electroforéticos cuyos tamaños fluctuaron aproximadamente entre 8.0 y 0.9 kpb. Este patrón de dsRNA pennitió diferenciar al menos 3 aislamientos virales. El análisis electroforético en geles de agarosa del RNA genómico de varios aislamientos virales, mostró una banda de peso molecular aproximado de 4.0 kb. El análisis del RNA genómico digerido con RNAsa TI pennitió diferenciar 2 grupos de patrones electroforéticos de los aislamientosestudiados.

Before the advent of genome-wide association studies (GWAS), ADAM33, ADRB2, CD14, MS4A2 (alias FCER1B), IL13, IL4, IL4R, and TNF constituted the most replicated non-HLA candidate genes with asthma and related traits. However, except for the IL13-IL4 region, none of these genes have been found in close proximity of genome-wide significant hits among GWAS for asthma or related traits. Here we aimed to assess the reproducibility of these asthma associations and to test if associations were more evident considering the effect of age at diagnosis.We systematically evaluated 286 common single nucleotide polymorphisms (SNPs) of these 8 genes in a sample of 1,865 unrelated Spanish individuals (606 asthmatics and 1,259 controls). We found that variants at MS4A2, IL4R and ADAM33 genes demonstrated varying association effects with the age at diagnosis of asthma, with 10 SNPs showing study-wise significance after the multiple comparison adjustment. In addition, in silico replication with GWAS data supported the association of IL4R.Our results support the important role of MS4A2, IL4R and ADAM33 genes in asthma and/or atopy susceptibility. However, additional studies in larger samples sets are needed to firmly implicate these genes in asthma susceptibility, and also to identify the causal variation underlying the associations found.

Los rotavirus aislados de muestras diarreicas de infantes atendidos por gastroenteritis en diferentes centros asistenciales pediátricos de 13ciudad de Bogotá, fueron sometidos a análisis electroforético de patrones de dsRNA. Los rotavirus examinados presentaron 11 segmentos de dsRNAs genómicos distribuidos en cuatro regiones, La movilidad electroforética de estos fragmentos genómicos permitió agrupar los rotavirus examinados en seis electroferotipos, correspondientes a los tipos generales corto y supercorto, aparentemente diferentes a los informados hasta ahora para Latinoamérica, En los electroferotípos cortos se observó variación en los fragmentos genómicos 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9. Con base en estas diferencias se establecieron cinco variantes, designadas en este trabajo con las convenciones 81, 82, 83, 84 y 85. EI patrón electroforético supercorto (SSI) presento variación en las regiones I y II del electroferotipo. EI número de muestras positivas encontradas en este estudio, así como su procedencia geográfica, el corto intervalo en que fueron tomadas y su heterogeneidad electroforética sugieren una variabilidad genética relativamente alta en los rotavirus que afectan a la población infantil de Bogotá.

Antecedentes. En la actualidad, no se dispone de integrina b3 de manera comercial y la PDI comercial tiene costos muy altos, lo cual dificulta el acceso a estas dos proteínas para realizar estudios conducentes a establecer si b3 y PDI interactúan con cepas de rotavirus silvestres. Objetivo. Explorar una metodología que permitiese aislar las proteínas b3 y PDI a partir de plaquetas humanas para generar anticuerpos policlonales en conejo contra la integrina b3 y evaluar la interacción entre las proteínas PDI y b3 con el rotavirus ECwt. Material y métodos. Mediante la técnica de electroforesis preparativa en condiciones reductoras, se separaron las proteínas de un lisado de plaquetas humanas y posteriormente se electroeluyeron. Mediante las técnicas de coinmunoprecipitación, “Western blotting” y ELISA de captura se analizó la interacción del rotavirus ECwt con las proteínas b3, y PDI. Resultados. Las proteínas totales de un lisado de plaquetas humanas se separaron mediante electroforesis en condiciones reductoras, se identificaron las proteínas b3 y PDI en un segmento del gel, utilizando anticuerpos comerciales en “Western blotting” y luego se aislaron estas dos proteínas del resto del gel. Posteriormente las proteínas se electroeluyeron del segmento del gel y se analizó su pureza. La proteína b3 se utilizó para generar anticuerpos policlonales en conejo. Igualmente, b3 y PDI eluidas se incubaron con el rotavirus ECwt y mediante la técnica de co-inmunoprecipitación y ELISA de captura encontramos que estas dos proteínas se unen in vitro. Esta misma unión se observó cuando se incubó las vellosidades aisladas de intestino delgado de ratón lactante con el rotavirus. Conclusión. Se logró purificar parcialmente a partir de plaquetas humanas, utilizando electroforesis preparativa, cantidades relativamente altas de proteína b3 y PDI. El aislamiento de estas proteínas nos permitió generar un anticuerpo policlonal contra b3 y establecer que b3 y PDI se unen in vitro, luego de incubar las proteínas aisladas con el rotavirus ECwt, e in vivo, después de incubar el rotavirus con las vellosidades aisladas del intestino delgado de ratón lactante de la cepa ICR.

Sin excepción, todas las instituciones académicas tienen su historia, su propia historia. Pero cualquiera que ella sea, no la han construido al margen de los desarrollos más universales. Prácticamente, la comunidad académica que las compone no tiene fronteras geográficas, está unida por ciertos paradigmas compartidos, que le son propios, que son inherentes a su naturaleza. Todas las instituciones han recibido el legado de las generaciones pasadas, de sus mayores, de los que ya no están. Han construido el presente y construirán el futuro apoyadas en el pasado. Las instituciones académicas de los países menos desarrollados, de aquellos de aparición tardía en la historia intelectual de la humanidad, de manera inevitable han sido receptoras del legado de los países más desarrollados.

Antecedentes. La infección rotaviral es causa principal de gastroenteritis aguda severa en niños menores de cinco años. La capa protéica externa de la partícula viral está implicada en las interacciones iniciales virus-superficie celular. El mecanismo rotaviral de unión y entrada a la célula parece ser un proceso de múltiples pasos donde las proteínas rotavirales VP4 y VP7 interaccionan con diferentes moléculas de la superficie celular. Objetivo. Proponer un mecanismo de entrada de rotavirus a la célula que incorpore la actividad de la proteína disulfuro isomerasa (PDI). Material y métodos. Utilizando bases de datos electrónicas, se realizó una búsqueda de literatura original y de revisión publicada entre 1990 y 2009 sobre moléculas de la superficie rotaviral o celular participantes en el proceso de entrada del virus. El análisis de los resultados enfatizó las bases moleculares y celulares de las interacciones temporo-espaciales de las proteínas virales y las moléculas de unión/receptoras de la célula. Resultados. Se encontró fundamentos moleculares y celulares para incorporar la actividad de PDI a un mecanismo coherente de vías secuenciales o alternativas previas a la penetración viral. Se propone un mecanismo en que interaccionan las proteínas virales VP4, VP6 y VP7 con las moléculas de la superficie celular ácido siálico, integrinas, Hsc70 y PDI en un proceso endocítico caveola/“raft”-dependiente, caveolina/clatrina-independiente, dinamina-dependiente y sensible a depleción de colesterol. Conclusión. Se amplía el concepto de múltiples pasos en el proceso de entrada de rotavirus, donde la participación de PDI podría ser un blanco potencial de la acción de inhibidores de grupos tiol/disulfuro.

En respuesta a la continua expansión del nuevo virus de influenza A H1N1, la Organización Mundial de la Salud (OMS) elevó mundialmente el nivel de alerta pandémica a Fase 6 el 11 de junio de 2009 y declaró que el mundo se encontraba en el comienzo de la pandemia de influenza 2009. El presente artículo revisa y actualiza algunas de las características moleculares de los virus de la influenza A, las cuales le permiten a estos virus evadir la respuesta inmune adaptativa de largo plazo. Se destacan especialmente las características antigénicas, genéticas y epidemiológicas del nuevo virus de influenza A H1N1 de origen porcino. Dado que la influenza es una infección viral asociada con morbilidad y mortalidad significativas, este artículo revisa algunos temas clínicos, tales como características clínicas, diagnóstico diferencial y complicaciones relacionadas con la influenza. La preocupante emergencia y expansión de cepas de los virus de la influenza A resistentes a drogas antivirales es presentada en el contexto del tratamiento de la influenza. Se enfatizan los efectos de la vitamina D sobre la inmunidad innata como una probable explicación para algunas de las incongruencias epidemiológicas de la influenza. Se concluye que la vigilancia mundial debe ser intensificada para asegurar la prevención, el diagnóstico y el tratamiento de la influenza.

The progress made in plant biotechnology has provided an opportunity to new food crops being developed having desirable traits for improving crop yield, reducing the use of agrochemicals and adding nutritional properties to staple crops. However, genetically modified (GM) crops have become a subject of intense debate in which opponents argue that GM crops represent a threat to individual freedom, the environment, public health and traditional economies. Despite the advances in food crop agriculture, the current world situation is still characterised by massive hunger and chronic malnutrition, representing a major public health problem. Biofortified GM crops have been considered an important and complementary strategy for delivering naturally-fortified staple foods to malnourished populations. Expert advice and public concern have led to designing strategies for assessing the potential risks involved in cultivating and consuming GM crops. The present critical review was aimed at expressing some conflicting points of view about the potential risks of GM crops for public health. It was concluded that GM food crops are no more risky than those genetically modified by conventional methods and that these GM crops might contribute towards reducing the amount of malnourished people around the world. However, all this needs to be complemented by effective political action aimed at increasing the income of people living below the poverty-line.

Se comparó la respuesta inmune humoral inducida por las proteínas estructurales del virus de la estomatitis vesicular (serotipos Indiana y New Jersey), utilizando sueros de bovinos vacunados e infectados natural y experimentalmente. Para ello, se usó la técnica de inmunotransferencia (Western blot) a través de la cual se observó el reconocimiento exclusivo de la proteína G en sueros de animales vacunados, así como de las proteínas G y N en sueros de animales infectados. Los sueros de los animales infectados experimentalmente presentaron reacción cruzada en el caso de la proteína N. Se realizaron corridos electroforéticos y densitométricos de 13 subclones del virus de la estomatitis vesicular aislados en distintas áreas endémicas del país. Los resultados mostraron una homología completa e dependiente de su lugar de origen, lo cual es coherente con la literatura reportada.

El virus de la tristeza de los cítricos (CTV) pertenece a la familia Closteroviridae que incluye a los únicos virus vegetales que poseen en su genoma genes homólogos a las proteínas de choque térmico celulares HSP70. Recien­temente se ha demostrado que las proteínas virales HSP70h, como la p65 de CTV, realizan funciones para el ensam­blaje del virión, como proteína de unión a microtúbulos y de movimiento célula a célula. De allí la importancia de desarrollar trabajos relacionados con esta proteína en el CTV, considerado el patógeno más deletéreo para los cítricos. En el presente estudio, fueron utilizados cuatro péptidos sintéticos correspondientes a la región carboxi-terminal de la proteína de choque térmico p65 del virus de la tristeza de los cítricos (CTV), para inmunizar conejos con el objetivo de obtener anticuerpos policlonales. Todos los péptidos utilizados fueron inmunogénicos. Ninguno de los anticuerpos obtenidos reaccionó contra el extracto de plantas no infectadas pero sí detectaron las proteínas p65 presentes en los extractos proteicos de cítricos infectados con el CTV. Se demostró un comportamiento inmunológico del anticuerpo anti p65 que parece ser independiente de la severidad sintomática del aislado de CTV utilizado, sobre la base de la exposición del anticuerpo a dos aislados colombianos con características serológicas diferentes. Se demostró que el ORF que codifica en el CTV para el homólogo de la HSP70 se expresa in vivo aunque el anticuerpo anti p65 solamente detectó extractos proteicos concentrados de plantas infectadas, lo que apoya lo informado en otros estudios sobre la baja concentración de esta proteína en plantas infectadas con el CTV. Es la primera vez que se obtiene en Colombia un anticuerpo policlonal anti CTV y, particularmente, contra p65, proteína que interviene en el ensamblaje y movimiento viral. La adaptación de una técnica de obtención de anticuerpos anti p65 a través de la utilización de péptidos sintéticos como inmunógenos podría ser útil en un futuro para la detec­ción o diagnóstico de proteínas p65 presentes en diversos aislados colombianos de CTV y, especialmente, para desarrollar estudios que aporten mayor comprensión sobre la biología viral, su control y la relación con el huésped.

La tecnología transgénica en la agricultura se ha visto recientemente implicada en un intenso debate entre dos corrientes opuestas. Algunas organizaciones no gubernamentales (ONG) consideran esta tecnología como de alto riesgo para la salud, el ambiente y la economía de los países no desarrollados. Por el contrario, la comunidad científica ha respaldado públicamente esta tecnología asegurando que la clave para su aceptación es la educación. Aunque los alimentos genéticamente modificados (GM) poseen el potencial de proveer beneficios en calidad alimentaria, salud y ambiente, es necesario considerarlos dentro de estrictos protocolos de bioseguridad. No obstante la ausencia de evidencias acerca de que los alimentos transgénicos son más peligrosos para la salud que los alimentos convencionales, aquellos transgénicos deben ser examinados con las metodologías científicas más rigurosas disponibles. Esta revisión se centra en el efecto potencial de los alimentos transgénicos sobre la salud humana.

Un nuevo fantasma parece recorrer el mundo: el fantasma de las plantas transgénicas. Sólo que ahora la santa cruzada que pretende darle cacería la encabezan algunas organizaciones no gubernamentales (ONG), ambientalistas, ecologistas y hasta espontáneos inquisidores de oficio que se abrogan la representación de las más caras preocupaciones públicas sobre los organismos genéticamente modificados (GMO). Al decir de los expertos más recalcitrantes y ortodoxos, estos héroes de los albores del nuevo milenio prometen poner fin al crimen transgénico organizado, talar de una vez y para siempre los bosques de "frankenstrees", adelantar todas las acciones legales nacionales e internacionales tendientes a declarar crimen de lesa humanidad la producción de GMO, e inclusive ofrecen su generosa y antigénica sombrilla para proteger a la humanidad de la más recia y chernobilesca lluvia biotecnológica.

Los cultivos de ganglio espinal son utilizados para estudiar la interacción entre el virus de la rabia y las neuronas sensoriales presentes en ellos. Se conoce que in vivo, el virus utiliza estas neuronas como una de las puertas de entrada al Sistema Nervioso Central en donde posteriormente se produce una encefalopatía letal. La patología producida por el virus es debida a su marcado tropismo hacia las neuronas, que depende a su vez de la unión entre el virus y receptores específicos en la membrana neuronal. Entre las moléculas que se han reportado como posibles receptores virales están el Receptor Nicotínico de Acetilcolina (RNACh), la Molécula de Adhesión Celular Neuronal (NCAM) y el receptor de baja afinidad para las neurotrofinas (p75NTR). Se sabe que en cultivos de neuronas sensoriales adultas, las neurotrofinas pueden promover la regeneración neurítica y mantener los fenotipos neuronales. Además existe evidencia de que en líneas celulares el Nerve Growth Factor (NGF) modifica la calidad y cantidad de RNACh y NCAM expresados, así en estos cultivos primarios (que expresan toda clase de receptores para neurotrofinas) se pudieran estar presentando también tales cambios, que conlleven a modificaciones en la infección por el virus de rabia. De esta manera, el objetivo de este estudio, fue evaluar el efecto de las neurotrofinas sobre la regeneración neurítica y la supervivencia neuronal (en cultivos no infectados) y sobre la proporción de células infectadas por virus de rabia. Para ello, los cultivos se trataron desde el inicio con NGF, Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF) y Neurotrophin-3 (NT-3) a tres diferentes concentraciones y algunos de ellos fueron infectados con virus de la rabia, cepa CVS (Challenge Virus Standard) obtenido en cerebro de ratón. A los cultivos no infectados se les realizó una técnica inmunocitoquímica para la subunidad de 200 kDa del neurofilamento, con el fin de detectar únicamente las neuronas y sus prolongaciones, como una forma de evaluar la regeneración y la supervivencia neuronal, usando análisis de imágenes. A los cultivos infectados se les realizó una inmunoperoxidasa indirecta para detectar y contar las células infectadas y adicionalmente se realizó análisis morfométrico de las neuronas. Los resultados demostraron que las concentraciones mas altas de NGF (50ng/ml) y NT-3 (10ng/ml) producen un aumento significativo en la regeneración neurítica y solo NGF (50, 10 y 2 ng/ml) produce modificaciones en la supervivencia neuronal. El análisis cuantitativo de las neuronas infectadas, demostró que NGF (2 y 10ng/ml) y NT-3 (1 y 5ng/ml) disminuyen significativamente la proporción de infección, mientras que la proporción de células no neuronales infectadas (fibroblastos y células de Schwann), no se modifica. El análisis morfométrico de estos cultivos mostró que el tratamiento con las neurotrofinas, ocasiona un cambio en la subpoblación de neuronas que se infectan preferencialmente, pues los diámetros de esta subpoblación cambian dependiendo de la presencia de NGF (10 ng/ml ) y NT-3 (10 y 5ng/ml). Los anteriores resultados confirman el papel de las neurotrofinas en la regeneración neurítica in vitro y aportan la primera evidencia del papel que cumplen en la supervivencia neuronal en cultivos adultos. Adicionalmente estos datos podrían estar indicando la participación de los receptores para neurotrofinas (de alta y baja afinidad) en la interacción virus-neuronas en los pasos iniciales de la infección.