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Sampling mainstream cigarette smoke is a challenging and stimulating laboratory activity for undergraduate students. In addition to the public health significance, cigarette smoke is an unusual source of analytes to examine the differences between gaseous matrices versus liquid or solid matrices. Sophisticated automated smoking machines complying with international standards are not affordable for educational purposes. However, a less expensive and simple smoking apparatus can be easily built in any laboratory that yields reproducible smoking conditions and allows several cigarettes to be smoked simultaneously. We describe the construction of such an apparatus utilizing a solid-phase extraction manifold and chamber, and how it can be used by undergraduate students to generate cigarette smoke and trap the total particulate matter (TPM). The TPM can be later gravimetrically quantified and eluted with 2-propanol containing an internal standard to quantify th nicotine content. Because a set of six cigarettes can be “smoked” simultaneously, the proposed procedure allows the comparison of TPM and nicotine content in mainstream smoke from normal and light cigarettes, Universidad Complutense de Madrid, Depto. de Química en Ciencias Farmacéuticas, Fac. de Farmacia, TRUE, pub

AbstractThe quantitation of the natural cytotoxic and anti‐inflammatory alkaloid luotonin A and five recently synthesized derivatives is described, constituting the first report of a HPLC method for the analysis of these compounds in human serum samples. The conditions for the chromatographic separation were optimized and the method was validated for the analysis of these compounds in biological samples according to international guidelines. An RP‐HPLC method with fluorimetric detection and a C18 stationary phase was applied. Different ACN/water mobile phases were assayed, including 0–4% of a mobile phase modifier such as tetrahydrofuran, dioxane or tert‐butyl methyl ether. Isocratic and gradient elution conditions are compared. The influence of pH on the efficiency and resolution of the separation was also considered. The developed method was applied to the determination of luotonins in pooled human serum samples by gradient elution RP‐HPLC using a simple cleanup procedure. The proposed chromatographic method exhibits satisfactory analytical figures of merit, with LOD from 1.0×10−10 to 2.0×10−10 M, intraday and interday precision below 6% except for the concentration level closest to LOD, and good agreement between experimental and theoretical concentrations. Therefore, the developed method is suitable, reliable, rapid, and simple., Ministerio de Ciencia e Innovación, Depto. de Química en Ciencias Farmacéuticas, TRUE, pub

A supramolecular phthalocyanine–squaraine ensemble which exhibits a large coverage of the solar spectrum from 850 to 250 nm has been prepared and characterized both photophysically and in bulk heterojunction solar cells., Depto. de Química en Ciencias Farmacéuticas, Fac. de Farmacia, TRUE, pub

Depto. de Química en Ciencias Farmacéuticas, TRUE, pub

Acetonitrile and methanol are the most popular solvents employed in analytical HPLC, but they suffer from a number of drawbacks from the environmental point of view. Alternative, greener mobile phases employing methanol or the less toxic solvent ethanol as the sole organic solvent are proposed in this paper, and applied to the problem of the separation of b-carbolines on C18-stationary phases. The use of b-cyclodextrin (b-CD) and (2-hydroxypropyl)-b-cyclodextrin (HPb-CD) as mobile phase additives allowed us to increase the proportion of water in the mobile phases without loss in the resolution or efficiency of the separations, leading initially to a considerable reduction of the proportion of methanol in the mobile phase (from 70% to 50%) and at a later stage, to the development of a mobile phase containing only 30% of ethanol. The b-carboline–cyclodextrin association constants were determined by HPLC, and the inclusion complexes were also characterized by 1 H-NMR, 13C-NMR and 2D-ROESY experiments, and these studies were used to explain the chromatographic behaviour. The new chromatographic methodology developed was validated and applied to the quantitation of b-carboline derivatives in spiked human serum samples. For the extraction of b-carboline alkaloids from serum samples, liquid–liquid extraction (LLE) and solid-phase extraction (SPE) procedures were compared. It was concluded that the combination of a pre-treatment procedure (ionic exchange SPE) with a water-enriched chromatographic separation leads to a promising, environmentally friendly new methodology., Ministerio Ciencia e Innovación, Grupos de Investigación UCM, Depto. de Química en Ciencias Farmacéuticas, Fac. de Farmacia, TRUE, pub

Se ha desarrollado una actividad combinada de Aprendizaje Basado en Proyectos (ABP) y Aprendizaje Basado en Simulación (ABS) durante el primer semestre del curso 2022-23, dentro de la asignatura obligatoria de Química Analítica II, que se imparte en el segundo curso del Grado en Farmacia y del Doble Grado en Farmacia y Nutrición Humana y Dietética de la UCM. Según la metodología propuesta, los estudiantes partieron de la idea de desarrollar un nuevo método analítico para cuantificar un compuesto de su interés presente en muestras alimentarias, farmacéuticas, clínicas o ambientales. Para ello, elaboraron una propuesta y solicitaron un proyecto de investigación en una convocatoria simulada que lanzaron los profesores en el campus virtual de la asignatura. Al final del semestre, se celebró una sesión de pósteres en la que se invitó a los estudiantes a presentar su trabajo, de forma similar a un congreso. El objetivo principal de la actividad ha sido familiarizar a los estudiantes con el formato habitual de los documentos científicos (IMRD), concienciarles sobre cómo elaborar una propuesta con soporte bibliográfico y desarrollar habilidades de comunicación oral y escrita que necesitarán en su desarrollo profesional y, en un futuro próximo, en la elaboración de sus TFGs y TFMs. La actividad se diseñó como una tarea complementaria al programa de la asignatura. Participaron voluntariamente en la actividad 46 estudiantes de dos grupos de la asignatura (45%) y se presentaron 13 propuestas. La presentación de los carteles y la sesión informativa fueron especialmente participativas y brindaron a los estudiantes la oportunidad de desarrollar un pensamiento crítico al juzgar los pósteres. Los profesores valoraron la actividad como una herramienta prometedora para el desarrollo competencial de los estudiantes, que anima al profesorado como diseñadores de entornos de aprendizaje activo.

La oliva es el fruto del olivo y es reconocida como una fuente de antioxidantes y de ácidos graos saludables altamente recomendables en una dieta equilibrada para mantener la salud y prevenir y mejorar numerosas enfermedades. Los antioxidantes serán importantes tanto en aquellos organismos que los ingieran como en la protección del propio alimento y en la de otros que van a mejorar su conservación al añadirlos. Las olivas sufren una serie de procesos para la obtención del aceite que deben controlarse para obtener la máxima calidad y garantizar su correcta conservación. La determinación de antioxidantes en alimentos no es una tarea fácil y son necesarios experiencia y conocimientos adecuados para producir resultados que sean exactos, precisos, selectivos y válidos, por lo que es necesario conocer los métodos analíticos disponibles y los avances en investigación. Este Trabajo Fin de Grado revisa algunos de los ensayos que determinan la capacidad antioxidante de las olivas dividiéndolos en métodos espectrofotométricos (métodos ORAC, DPPH, Folin-Ciocalteu, CUPRAC y FRAC), y cromatográficos (HPLC, GC) y otros métodos que pueden ser útiles o con perspectiva de serlo en el futuro.

La vitamina C o ácido ascórbico (AA) es un nutriente esencial en la dieta humana. Por su importancia para la vida, es importante desarrollar metodologías analíticas para su determinación. Estas métodos pueden ser: Enzimáticos: Este método utiliza una enzima peroxidasa que cataliza la hidroperoxidación de la p-fenilendiamina (PPDA) a través de una forma semiquinoide reversible a un producto de condensación coloreado. El AA interrumpe la formación del producto coloreado por la reducción del semiquinoide. Químicos: Están basados en la medida de la capacidad reductora del AA, entre ellas, la valoración iodimétrica y el método del indofenol, que se basa en la reducción del 2,6-diclorofenolindofenol. Electroquímicos: (voltamperométricos) Basados en la determinación del potencial de oxidación del AA en soluciones ácidas. Se están desarrollando sensores electroquímicos que ofrecen una mayor especificidad. Espectroscópicos: (espectrofotométricos y fluorimétricos) Los métodos espectrofotométricos pueden ser directos ya que el AA presenta un máximo de absorción a 260 nm, o bien con indirectos basados en la reacción del AA con 4-metoxi2-nitro anilina, y el producto obtenido tiene un máximo de absorción a 570 nm. Este método es altamente específico y presenta menos interferencias. También se puede utilizar otros reactivos como 2,4-dinitrofenilhidrazina(DNPH) o 2,2-difenil-1- picrilhidrazilo (DPPH). Fluorimétricos: El AA se oxida a ADA y reacciona con un marcador fluorogénico (o-fenilenediamina (PDA)) , formando un complejo fluorescente. Cromatográficos: Se utiliza el método de la cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) con distintos detectores. Es un principal método analítico utilizado los detectores UV-VIS/DAD, fluorimétrico y MS para la determinación de vitamina C.

En este trabajo se desarrollaron metodologías sostenibles en el contexto de la química analítica, que fueron aplicadas a la determinación de beta-carbolinas en muestras de suero, y de antitumorales derivados de la luotonina A en sueros y cultivos celulares, así como a su caracterización espectrofluorimétrica y al estudio de su actividad biológica in-vitro. Se redujo el consumo de disolvente orgánico en un 37% usando ciclodextrinas en las fases móviles para separar heterociclos derivados de beta-carbolina en columnas C-18. Las columnas C-1 permitieron ahorrar un 70% del componente orgánico, minimizando la generación de residuos. Se desarrolló, optimizó y validó un nuevo método cromatográfico para la cuantificación de luotonina A y varios análogos en muestras de suero. Se comparó la selectividad de tres fases estacionarias fenil-hexil-, pentafluorofenil-propil- y octadecil-silano (PH, PFP y C-18, respectivamente). Sólo la C-18 consiguió resolver todos los compuestos. Se comparó el comportamiento de estas tres fases estacionarias en columnas empaquetadas con partículas de sílice totalmente porosas y con partículas core-shell. Las columnas core-shell mejoraron la eficacia y el tiempo de análisis (más de un 50%) manteniendo las presiones de trabajo. Se optimizó la separación en la columna core-shell C-18 y se aplicó un gradiente logrando la separación de la camptotecina, la luotonina A y sus 6 derivados. La metodología se validó y aplicó a la determinación de los antitumorales en líneas celulares. Se estudió por primera vez la luminiscencia de la luotonina A y sus derivados, diseñando un método sostenible y miniaturizado en formato multi-pocillo para estudiar el aumento de la solubilidad de los derivados de luotonina A tras formar complejos de inclusión con ciclodextrinas. Finalmente, se evaluó la potencia antitumoral de los derivados estudiados mediante ensayos enzimáticos de inhibición de topoisomerasa 1 y el efecto citotóxico ejercido sobre líneas celulares tumorales

En este trabajo se desarrollaron metodologías sostenibles en el contexto de la química analítica, que fueron aplicadas a la determinación de beta-carbolinas en muestras de suero, y de antitumorales derivados de la luotonina A en sueros y cultivos celulares, así como a su caracterización espectrofluorimétrica y al estudio de su actividad biológica in-vitro. Se redujo el consumo de disolvente orgánico en un 37% usando ciclodextrinas en las fases móviles para separar heterociclos derivados de beta-carbolina en columnas C-18. Las columnas C-1 permitieron ahorrar un 70% del componente orgánico, minimizando la generación de residuos. Se desarrolló, optimizó y validó un nuevo método cromatográfico para la cuantificación de luotonina A y varios análogos en muestras de suero. Se comparó la selectividad de tres fases estacionarias fenil-hexil-, pentafluorofenil-propil- y octadecil-silano (PH, PFP y C-18, respectivamente). Sólo la C-18 consiguió resolver todos los compuestos. Se comparó el comportamiento de estas tres fases estacionarias en columnas empaquetadas con partículas de sílice totalmente porosas y con partículas core-shell. Las columnas core-shell mejoraron la eficacia y el tiempo de análisis (más de un 50%) manteniendo las presiones de trabajo. Se optimizó la separación en la columna core-shell C-18 y se aplicó un gradiente logrando la separación de la camptotecina, la luotonina A y sus 6 derivados. La metodología se validó y aplicó a la determinación de los antitumorales en líneas celulares. Se estudió por primera vez la luminiscencia de la luotonina A y sus derivados, diseñando un método sostenible y miniaturizado en formato multi-pocillo para estudiar el aumento de la solubilidad de los derivados de luotonina A tras formar complejos de inclusión con ciclodextrinas. Finalmente, se evaluó la potencia antitumoral de los derivados estudiados mediante ensayos enzimáticos de inhibición de topoisomerasa 1 y el efecto citotóxico ejercido sobre líneas celulares tumorales, In the present work we developed sustainable analytical methodologies that were applied to the quantitation of beta-carboline alkaloids in serum samples and of antitumor luotonin A-derivatives in sera and cell cultures, as well as to their spectrofluorimetric characterization and to the study of their in vitro biological activities. Organic solvent consumption was reduced by 37% by using cyclodextrins as mobile phase modifiers in the separation of beta-carboline heterocycles on C-18 columns. C-1 columns allowed for a 70% saving on the use of organic solvent, minimizing waste generation. We developed and validated a new chromatographic method for the quantitation of luotonin A and several analogues in serum samples. The selectivity of three stationary phases (phenyl-hexyl-, pentafluorophenyl-propyl- and octadecylsilyl – namely PH, PFP and C-18–) was compared. Only the C-18 column was able to resolve all of the compounds. The behaviour of such three stationary phases was compared in columns packed with fully-porous and core-shell particles. Columns packed with core-shell particles improved the efficiency and shortened the analysis time over 50% while keeping the backpressures within conventional-HPLC limits. Separation was optimized on the core-shell C-18 column and a gradient was applied to adequately separate camptothecin, luotonin A and 6 derivatives of the latter. The methodology was validated and applied to the determination of the antitumor drugs in cell culture samples. The luminescence of luotonin A and its derivatives was studied for the first time, leading to the development of a sustainable, miniaturized analysis in multi-well plate format to study the solubility enhancement of luotonin A derivatives upon formation of inclusion complexes with cyclodextrins. Finally, the antitumor potency of the studied compounds by means of topoisomerase 1 inhibition assays and the cytotoxic effect exerted on colorectal, cervix and lung tumor cell lines.

El presente trabajo tiene como objetivo conocer el contenido de 7 metales esenciales: co, cr, cu, fe, mn, ni y zn, y 2 tóxicos: cd y pb. asi como sus variaciones estacionales, en las aguas del río arlanzón, desde su nacimiento en la sierra de la demanda hasta su llegada a la ciudad de Burgos. Estas aguas se destinan principalmente al abastecimiento público y regadío. Se realizaron 7 muestreos con frecuencia bimestral entre julio de 1991 y junio de 1992, tomando muestras en 21 puntos. Se determinaron estos metales por e.a.a., en sus contenidos tanto totales como disueltos. También se analizaron 6 parametros físico/químicos y 4 de contaminación que pueden influir en el contenido metalico. Los niveles medios anuales encontrados para los metales totales fueron gr (<1ppb)<100 ppb)