Search

FACEPE Pilosocereus gounellei, conhecida como xique-xique, é usada popularmente para o tratamento de inflamações. A presente tese avaliou a toxicidade aguda e subaguda e os efeitos antinociceptivo, antipirético e anti-obesidade do extrato salino do caule de P. gounellei (ES) em camundongos. A composição química foi investigada por cromatografia de camada delgada e cromatografia líquida de alta eficiência. No ensaio de toxicidade aguda, foram utilizadas doses únicas de 2000 e 5000 mg/kg (v.o.) e análise 7 dias após a administração. Os animais também foram submetidos aos testes de campo aberto e rotarod. No teste de toxicidade subaguda, ES (250, 500 e 1000 mg/kg, v.o.) foi administrado diariamente durante 28 dias. Para avaliação das atividades biológicas foram utilizadas as doses 125, 250 e 500 mg/kg (v.o.). Atividade antinociceptiva foi avaliada através dos testes de contorções abdominais induzidas por ácido acético, de imersão da cauda e da formalina. A atividade antipirética foi investigada utilizando modelo de febre induzida por levedura. O efeito anti-obesidade foi testado sobre camundongos submetidos à dieta hiperlipídica. Foram avaliados tolerância à glicose, resistência à insulina, perfil lipídico e índices aterogênicos, bem como marcadores de estresse oxidativo e organização histológica de fígado, músculo e tecido adiposo epididimal. Os animais obesos foram tratados com ES ou solução salina diariamente por 21 dias; um grupo não obeso foi utilizado como controle. A análise fitoquímica revelou presença de flavonoides e açúcares redutores. No teste de toxicidade aguda, o ganho de peso e consumo de ração e água não foram afetados no tratamento a 2000 mg/kg. Não foram detectadas alterações histológicas no fígado, coração, pulmão, rim e baço. Os testes de campo aberto e rotarod mostraram que ES não afetou a função motora e a atividade exploratória. No ensaio de toxicidade subaguda, os tratamentos não afetaram ganho de peso, consumo de água e ração e parâmetros hematológicos. Proteinúria e alterações histológicas no fígado e nos pulmões foram detectadas em camundongos tratados com 1000 mg/kg. Atividade antinociceptiva foi detectada nos três modelos utilizados, indicando interferência tanto na dor não-inflamatória quanto inflamatória. ES (500 mg/kg) apresentou efeito antipirético a partir de 60 minutos após ser administrado. Animais obesos tratados com ES apresentaram peso menor e redução nos níveis de colesterol total, LDL-colesterol, triglicerídeos, marcadores da função hepática e renal, bem como aumento da tolerância à glicose e redução da resistência à insulina, em comparação com animais obesos tratados com salina. Os índices aterogênicos também foram menores nos animais tratados com ES, atingindo valores semelhantes ao controle não-obeso no tratamento a 500 mg/kg. De forma geral, ES evitou o aumento da peroxidação lipídica nos órgãos avaliados e aumentou os níveis de superóxido dismutase. Os animais tratados com ES apresentaram redução da esteatose, da deposição de colágeno e da inflamação no fígado, em comparação ao tratamento com solução salina. A gordura epididimal também foi reduzida nos grupos tratados com extrato. Em conclusão, ES apresentou baixa toxicidade e tem potencial para avaliações futuras visando sua aplicação como agente analgésico e antitérmico e para o controle de obesidade. Pilosocereus gounellei, known as xique-xique, is popularly used for the treatment of inflammation. The present thesis evaluated the acute and subacute toxicity and the antinociceptive, antipyretic and antiobesity effects of the saline extract (SE) of P. gounellei stem in mice. The chemical composition was investigated by thin layer chromatography and high-performance liquid chromatography. In the acute toxicity test, single doses of 2000 and 5000 mg/kg (per os) were used and analysis made 7 days after administration. The animals were also submitted to the open field and rotarod tests. In the subacute toxicity test, SE (250, 500 and 1000 mg/kg, per os) was administered daily for 28 days. For the evaluation of biological activities, the doses 125, 250 and 500 mg/kg (per os) were used. Antinociceptive activity was assessed through the abdominal writhings induced by acetic acid, tail immersion, and formalin tests. Antipyretic activity was investigated using a yeast-induced fever model. The anti-obesity effect was tested on mice submitted to the hyperlipidic diet. Glucose tolerance, insulin resistance, lipid profile and atherogenic indexes, as well as markers of oxidative stress and histological organization of liver, muscle and epididymal adipose tissue were evaluated. Obese animals were treated with SE or saline daily for 21 days; a non-obese group was used as control. Phytochemical analysis revealed the presence of flavonoids and reducing sugars. In the acute toxicity test, weight gain and food and water intake were not affected in the treatment at 2000 mg/kg. No histological changes were detected in the liver, heart, lung, kidney and spleen. Open field and rotarod tests showed that SE did not affect motor function and exploratory activity. In the subacute toxicity test, treatments did not affect weight gain, water and food intake, and hematological parameters. Proteinuria and histological changes in the liver and lungs were detected in mice treated with 1000 mg/kg. Antinociceptive activity was detected in the three models used, indicating interference in both non-inflammatory and inflammatory pain. SE (500 mg/kg) showed antipyretic effect from 60 minutes after being given. Obese animals treated with SE presented lower weight and reduced levels of total cholesterol, LDL-cholesterol, triglycerides, markers of liver and renal function, as well as increased glucose tolerance and reduced insulin resistance compared to obese animals treated with saline. Atherogenic indexes were also lower in SE-treated animals, reaching similar values to the non-obese control in the treatment at 500 mg/kg. In general, SE prevented the increase of lipid peroxidation in the evaluated organs and increased levels of superoxide dismutase. SE-treated animals had a reduction in steatosis, collagen deposition and inflammation in the liver compared to treatment with saline solution. Epididymal fat was also reduced in the extract-treated groups. In conclusion, SE presented low toxicity and has potential for future evaluations aiming its application as an analgesic and antipyretic agent and for the control of obesity.

CAPES FACEPE CNPQ Morus alba L. (amoreira branca) é uma planta utilizada em todo o mundo no tratamento de diversas enfermidades, incluindo distúrbios inflamatórios. Essa planta tem origem asiática, mas demonstrou boa adaptação ao solo brasileiro. Diante da expansão do uso medicinal de M. alba, inclusive comercialmente, o presente trabalho teve por objetivos construir um painel de toxicidade para extrato etanólico das folhas dessa planta e determinar seu potencial como agente antimicrobiano e anti-inflamatório. O extrato foi analisado quanto à composição química por cromatografia em camada delgada. As análises toxicológicas realizadas foram: ensaio de letalidade para o microcrustáceo Artemia salina (concentrações: 100–1000 μg/mL); ensaio de toxicidade aguda por via oral para camundongos (doses: 300 e 2000 mg/kg); determinação da genotoxicidade in vivo para camundongos através do teste do micronúcleo (doses: 75, 150 e 300 mg/kg v.o.); e ensaios de citotoxicidade para as células tumorais humanas NCI-H292, HEp-2, HT-29, MCF-7 e HL-60 (concentração: 50 μg/mL). Na avaliação do potencial anti-inflamatório, foi utilizado o modelo de inflamação aguda induzida por carragenina em bolsão de ar (doses: 75, 150 e 300 mg/kg v.o.). A ação anti-inflamatória foi avaliada através da quantificação do número de leucócitos nos exsudatos coletados dos bolsões. Atividade antimicrobiana foi avaliada contra bactérias e fungos de importância médica. A análise fitoquímica revelou a presença de cumarinas, flavonoides, taninos e triterpenos no extrato, o qual não promoveu mortalidade dos náuplios de A. salina. No teste de toxicidade aguda, não houve mortalidade nem alterações comportamentais nos camundongos tratados com o extrato durante 14 dias. Contudo, a análise de parâmetros hematológicos e bioquímicos revelou que os animais que receberam a dose mais alta apresentaram valores significativamente (p < 0,05) menores de volume corpuscular médio eritrocitário (VCM) e concentração média de hemoglobina corpuscular (CMHC), bem como atividade aumentada de fosfatase alcalina no plasma. Nos tratamentos com o extrato a 300 e 2000 mg/kg, houve redução no número de leucócitos, com diminuição da percentagem de linfócitos e aumento na proporção de células segmentadas. Análise histopatológica dos órgãos dos animais tratados com o extrato a 2000 mg/kg revelou turgidez dos túbulos contorcidos renais, presença de infiltrado leucocitário ao redor da veia centrilobular hepática e elevada dispersão da polpa branca esplênica. Avaliação do potencial genotóxico in vivo revelou que o extrato não causou aumento na frequência de micronúcleos, em comparação com o controle negativo. O extrato também não demonstrou citotoxicidade para as linhagens celulares testadas. Com base nos resultados obtidos nos testes de toxicidade, o potencial anti-inflamatório do extrato foi avaliado utilizando doses menores e igual a 300 mg/kg. Foi verificada redução do número de leucócitos nos grupos tratados com 75 (56,8%), 150 (62,9%) e 300 (65,6%) mg/kg, em comparação com o grupo controle. A dose de 300 mg/kg mostrou efeito de inibição similar ao observado no grupo padrão, que recebeu indometacina a 10 mg/kg, i.p (64,7%). Por fim, o extrato apresentou atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Candida krusei, Candida tropicalis e Aspergillus flavus. Em conclusão, o extrato etanólico de folhas de M. alba apresentou potencial anti-inflamatório e antimicrobiano, não sendo letal nem apresentando efeito genotóxico para camundongos quando ingerido na dose de 300 mg/kg. Contudo, a utilização do extrato na dose de 2000 mg/kg deve ser evitada, devido às alterações bioquímicas, hematológicas e histopatológicas detectadas no ensaio de toxicidade aguda. Morus alba L. (white mulberry) is a plant used around the world for treatment of several infirmities, including inflammatory disorders. This plant is originated from Asia but showed good adaptation to Brazilian soil. In view of the expansion of the medicinal use of M. alba, including commercially, the present work aimed to build a toxicity panel for an ethanolic extract from leaves of this plant and to determine its potential as antimicrobial and anti-inflammatory agents. The extract was analyzed for chemical composition through thin layer chromatography. The toxicological analyses performed were: lethality assay with the microcrustacean Artemia salina (concentrations: 100–1000 μg/mL); acute oral toxicity assay to mice (doses: 300 and 2000 mg/kg); determination of in vivo genotoxicity to mice by micronucleus test (doses: 75, 150 and 300 mg/kg per os); and cytotoxicity assays to the human tumor cells NCI-H292, HEp-2, HT-29, MCF-7 and HL-60 (concentration: 50 μg/mL). In the evaluation of anti-inflammatory potential, it was used the model of acute inflammation induced by carrageenan in air pouch (doses: 75, 150 and 300 mg/kg per os). The anti-inflammatory action was evaluated by the quantification of the number of leukocytes in exudates collected from the pouches. Antimicrobial activity was evaluated against bacteria and fungi of medical importance. The phytochemical analysis revealed the presence of coumarins, flavonoids, tannins and triterpenes in the extract, which did not promote mortality of A. salina nauplii. In the acute oral toxicity assay, there was no mortality or behavioral alterations in mice treated with the extract during 14 days. However, the analysis of hematologic and biochemical parameters revealed that animals that received the highest dose showed significantly (p < 0.05) lower values of mean erythrocyte corpuscular volume (MCV) and mean concentration of corpuscular hemoglobin (MCHC) as well as increased activity of alkaline phosphatase in plasma. In the treatments with the extract at 300 and 2000 mg/kg, there was reduction in the number of leukocytes, with decrease of lymphocyte percentage and increase in the proportion of segmented cells. Histopathological analysis of the organs from animals treated with the extract at 2000 mg/kg revealed turgidity of renal contorted tubules, presence of leukocyte infiltration around the hepatic centrilobular vein and high dispersion of the spleen white pulp. Evaluation of the in vivo genotoxic potential revealed that the extract did not cause increase in the frequency of micronuclei, in comparison with negative control. The extract also did not show cytotoxicity to the cell lines tested. Based on the results obtained in the toxicity assays, the anti-inflammatory potential of the extract was evaluated using doses lower and equal to 300 mg/kg. It was verified a reduction in the number of leukocytes in the groups treated with the extract at 75 (56.8%), 150 (62.9%) and 300 (65.6%) mg/kg, in comparison with control group. The dose of 300 mg/kg showed inhibitory effect similar to that observed in the standard group, which received indometacin 10 mg/kg, i.p (64.7%). Finally, the extract showed antimicrobial activity against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Candida krusei, Candida tropicalis and Aspergillus flavus. In conclusion, the ethanolic extract from M. alba leaves showed anti-inflammatory and antimicrobial potential, being not lethal and showing no genotoxic effect when ingested by mice at the dose of 300 mg/kg. However, the use of the extract at 2000 mg/kg should be avoided, due to the biochemical, hematological and histopathological alterations detected in the acute toxicity assay.