Search

Cilj ovog istraživanja bio je istražiti utjecaj različitog vremena ekvilibracije u postupku dubokog smrzavanja bičjeg sjemena (DSS). U tu svrhu korišteni su ejakulati od 10 bikova koji se koriste u redovitoj proizvodnji duboko smrznutog bičjeg sjemena. Istraživanje je provedeno na 60 ejakulata (6 ejakulata po biku). Kako bi ustanovili učinak različitog vremena ekvilibracije na kvalitetu sjemena nakon otapanja, svaki dan prilikom kojeg je dobivan ejakulat uključivao je različite periode ekvilibracije i to: 3 sata (kontrola), 24 sata i 48 sati. Kvalitativne karakteristike sjemena procjenjivane su neposredno nakon uzimanja uzoraka te nakon otapanja duboko smrznutog sjemena (DSS), za sva 3 ekvilibracijska vremena. Utvrđeno je da prolongirani period ekvilibracije (24 sata i 48 sati) nije imao negativan učinak na kvalitetu DSS. Pokretljivost spermija, koja je ujedno i jedan od važnijih pokazatelja oplodnog potencijala bila je neznatno veća kod ekvilibracijskog perioda od 24h i 48h. Utvrđena je korelacija između vremena ekvilibracije i integriteta membrane te vijabilnosti spermija nakon dubokog smrzavanja pri čemu je 48-satni period ekvilibracije bio superiorniji u odnosu na onaj od 3 sata. U tom periodu (48 sati) ustanovljen je i veći postotak spermija s abnormalnostima glave u odnosu na period od 3 sata, ali ujedno i manji postotak abnormalnosti akrosome i spojnog dijela u odnosu na kontrolni period (3 sata). Rezultati ovog istraživanja pokazali su da je produženi period ekvilibracije jednako učinkovit kao i standardni trosatni period ekvilibracije te se može se jednako uspješno primjenjivati u standardnoj proizvodnji duboko smrznutog bičjeg sjemena, a u svrhu optimiziranja proizvodnje.

The knowledge that spermatozoa differ in morphological and functional characteristics has initiated studies in order to isolate subpopulation of spermatozoa with better functional abilities. The aim of this study was to determine spermatozoa subpopulations based on morphometric parameters of spermatozoa head (MPSH) and tail (MPST) in ejaculates of bucks (N=12) over a period of 3 months. Semen smears were prepared and stained with method of Bloom to establish the proportion of live spermatozoa. By using a computer assisted-image analyses system, morphometric measurements were performed (50 spermatozoa per smear) with the "SFORM" program. Morphometric data were collected for spermatozoa head, mid-piece and tail (area, outline, length, width), and for head shape (regularity, rugosity, ellipticity, elongation). By analyzing of principal components, two values were obtained explaining 85% of variance for MPSH and 78.5% for MPST. For MPSH, the 1st component focused on measurements of size and the 2nd on head shape. The 1st component for MPST focused on length and the 2nd on the width of the mid-piece. Cluster analysis of the most important parameters for each component revealed 4 spermatozoa subpopulations based on MPSH and MPST. The 1st subpopulation of MPSH comprised small sized spermatozoa with high rugosity spermatozoa (17%), the 2nd the biggest sized (4.8%), the 3rd elliptical and elongated (24.5%) and the 4th average sized spermatozoa (53.4%). The 1st spermatozoa subpopulation based on MPST comprised spermatozoa with the smallest size of the mid-piece (63.0%), 2nd spermatozoa with the widest mid-piece but the shortest tail (10.9%), the 3rd spermatozoa with the longest tail (21.6%) and 4th spermatozoa with the greatest length, area and outline of mid-piece (4.5%). Morphometric analysis of the principal components and cluster analysis, could provide data about semen quality and the freezing ability, according to the proportions of the individual subpopulations in the semen.

Učinak egzogenog melatonina na spolni nagon (libido) i kakvoću sjemena jarčeva nije dostatno istražen, a podaci o učinku melatonina na plodnost ovnova su poprilično oprečni. Stoga je cilj ovoga rada bio istražiti učinak egzogenog melatonina na libido te standardne pokazatelje kakvoće sjemena jarčeva izvan rasplodne sezone. Jarčevi pasmine Francuska alpina (n=12) u dobi od 2 do 4 godine podijeljeni su u pokusnu i kontrolnu skupinu. Pokusnu su skupinu činili jarčevi (n=6) kojima je krajem ožujka aplicirano 4 melatoninska implantanta (74 mg), a kontrolnu jarčevi (n=6) bez melatoninskih implantata. Uzorci ejakulata uzimani su pomoću umjetne vagine jednom tjedno od ožujka do lipnja, a istovremeno se procjenjivao libido svakog jarca. Vremensko razdoblje trajanja pokusa od tri mjeseci podijeljeno je na 6 razdoblja, tako da je svaki mjesec podijeljen u prvu i drugu polovicu. U uzorcima je određen volumen i koncentracija ejakulata, masovno gibanje i gibanje spermija, udio živih i patoloških oblika spermija te su izračunati ukupni broj spermija i ukupni funkcionalni broj spermija u ejakulatu. Pokusna skupina jarčeva imala je značajno veće vrijednosti masovnog gibanja i gibanja spermija u prvoj polovici travnja te udjela živih spermija u prvoj i drugoj polovici travnja (p0, 05). Dobiveni rezultati ukazuju da egzogeni melatonin neposredno nakon aplikacije značajno pridonosi poboljšanju kakvoće ejakulata jarčeva (povećanju masovnog gibanja i gibanja spermija te udjelu živih spermija i smanjenju patoloških oblika spermija u ejakulatu), a što bi se moglo pripisati antioksidativnom djelovanju melatonina na spermije što će se istražiti u daljnjim analizama.