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Made available in DSpace on 2022-04-28T20:42:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-01 This work studied the ovarian development of the armored catfish Hypostomus strigaticeps. Between July 2002 and June 2005, 332 females were collected monthly from the Corumbataí River, São Paulo State - Brazil. The ovaries were processed using routine histological techniques - paraffin inclusion and 5 μm thick sections stained in hematoxylin-eosin. Six types of oocytes were observed: Chromatin-nucleolus, Perinucleolar, Cortical-alveolus, Vitellogenic, Ripe and Atresic. Four maturity stages were created based on macroscopic and microscopic morphological observations, as well as on analysis of the gonadossomatic index (GSI): Rest, Maturation, Ripe and Spawned. Centro de Aquicultura Universidade Estedual Paulista, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane, km 5, 14884-900, Jaboticabal, São Paulo Departamento de Zoologia Instituto de Biociências Universidade Estadual Paulista, Rio Claro, São Paulo Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal Feculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, São Paulo Departamento de Zoologia Instituto de Biociências Universidade Estadual Paulista, Rio Claro, São Paulo Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal Feculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, São Paulo

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:22:23Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:34:59Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-35348825606.pdf: 207041 bytes, checksum: 20efa4cc8432e83e71e60f9ca77f4c16 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-01-01 This study aimed to analyze the morphometry of hybrids' eggs under stereomicroscopy. The induced reproduction was carried out in specimens of pintado's females (P. corruscans) and cachara's males (P. fasciatum) from Cepta - Ibama, Pirassununga, state of São Paulo, Brazil. Samples were collected in extrusion moment, during the fertilization, in times of 10 and 30 seconds, 1, 2, 5, 8, 10, 15, 20, 30 and 45 minutes, 1 hour, at every 15 minutes until completing 2 hours, and afterwards, at every hour until the larval hatching. Oocytes and eggs' external morphology were observed, photographed and 30 samples from each moment were measured in stereomicroscopy. Oocytes, in the time of extrusion, and the eggs presented a spherical form and yellowish color. Characteristics such as wide perivitelinic space, somites, presence of optical vesicle and the main phases of embryonic development as egg-cell (blastodisc), 2, 4, 8, 16, 32 and 64 blastomeres, morula, blastula, gastrula, epiboly movements, formation and larvae hatching were verified. Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal Faculdade de Ciência Agrícolas e Veterinária Campus de Jaboticabal, Via de A. Prof. P. D. Castellane s/n, 14884-900, Jaboticabal, Sao Paulo Centro de Aqüicultura Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, São Paulo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Dos Recursos Naturais Renováveis Centro de Pesquisa e Gestão de Recursos Pesqueiros Continentais, Pirassununga, São Paulo Centro de Aqüicultura Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, São Paulo

Submitted by Nivaldo Ferreira do Nascimento (nivaldotec@yahoo.com.br) on 2018-12-30T12:34:26Z No. of bitstreams: 1 Nascimento_nf_dr_jabo_int.pdf: 2579688 bytes, checksum: fa386dd32226811f9dcee60fc17bd82a (MD5) Rejected by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que sejam realizadas as seguintes correções: 1 - Falta agradecimento da CAPES que deve ter a seguinte redação: "O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001" 2- Falta a folha de aprovação da defesa com a assinatura da banca. 3- Falta o resumo em inglês no repositório. Agradecemos a colaboração. on 2019-01-03T11:19:55Z (GMT) Submitted by Nivaldo Ferreira do Nascimento (nivaldotec@yahoo.com.br) on 2019-01-04T19:07:27Z No. of bitstreams: 1 nascimento_nf_dr_jabo_int.pdf: 2691670 bytes, checksum: 943a065574ce11030472c2262257da37 (MD5) Approved for entry into archive by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br) on 2019-01-07T14:00:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nascimento_nf_dr_jabo_parc.pdf: 811269 bytes, checksum: 4bbf8cbde9c44f9518573f165b3d1041 (MD5) Made available in DSpace on 2019-01-07T14:00:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nascimento_nf_dr_jabo_parc.pdf: 811269 bytes, checksum: 4bbf8cbde9c44f9518573f165b3d1041 (MD5) Previous issue date: 2018-11-01 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O objetivo deste estudo foi aplicar técnicas de manipulação cromossômica para obtenção de indivíduos tetraploides e ginogenéticos de lambari (Astyanax altiparanae). Para tetraploidização, foram aplicados diferentes choques de temperatura (40°C por 2 minutos) com 16, 18, 20, 22, 24 e 26 minutos pós-fertilização (mpf) para inibição da clivagem. A análise em citometria de fluxo mostrou que o choque aplicado com 26 mpf garantiu a maior porcentagem de tetraploides (94,55%), sendo os resultados também confirmados por esfregaço sanguíneo e cariotipagem. Para indução de ginogenéticos foi primeiramente avaliada diferentes doses de irradiação UV (40, 80 e 120 mj/cm2) para inativação dos espermatozoides, sendo verificado que a dose de 80 mj/cm2 foi suficiente para assegurar a ativação dos oócitos e obtenção de larvas 100% haploides. Posteriormente, para restaurar a diploidia foi aplicado choque de temperatura (40°C por 2 minutos) para evitar a liberação do segundo corpúsculo polar. A análise molecular confirmou que os peixes ginogenéticos apresentam herança exclusivamente materna e apresentam número de cromossomos idêntico ao grupo controle. Em relação a razão sexual, a grande quantidade de fêmeas obtidas sugere que o sistema genético de determinação sexual seja homogamético para fêmeas (XX; XY). Este foi o primeiro protocolo de ginogênese em uma espécie da região Neotropical e primeiro de tetraploidização em uma espécie da família Characidae. Portanto, os resultados são inovadores e poderão ser aplicados em futuros estudos de manipulação cromossômica em espécies nativas. The aim of this study was to apply techniques of chromosome set manipulation to obtain gynogenetic and tetraploid individuals in lambari (Astyanax altiparanae). For tetraploidization, it was applied different temperature shocks (40°C for 2 min) at 16, 18, 20, 22, 24 and 26 minutes post-fertilization (mpf) to inhibit the cleavage. The flow cytometric analysis showed that heat shock applied at 26 mpf enabled the highest percentage of tetraploids (94.55%), which were also confirmed by nuclear diameter of erythrocytes and chromosome counting. For gynogenetic induction, first it was evaluated the best UV-dosage for inactivation of sperm DNA (40, 80 and 120 mj/cm2) and it was verified that the dosage of 80 mj/cm2 ensure oocyte activation and 100% haploid larvae. Afterwards, to restore the diploidy it was applied a temperature shock (40° for 2 min) to avoid the extrusion of the 2nd polar body. The molecular biology confirmed that that gynogenetic fish present exclusive maternal inheritance e also showed the same number of chromosomes of the control group. Sex ratio showed increased amount of females, which suggest that the genetic system of sexual determination are homogametic for females (XX; XY). This is the first protocol of gynogenesis in a species of the Neotropical region and the first tetraploidizaiton in a species of the family Characidae. Therefore, the results are innovative and could be applied in future studies of chromosome set manipulation in native species. FAPESP 2016/12383-0 CAPES - Código de Financiamento 001

Submitted by Matheus Pereira dos Santos (matheusps.pereira@gmail.com) on 2017-05-30T17:21:07Z No. of bitstreams: 1 Tese de Doutorado.pdf: 4156089 bytes, checksum: 23aa1696809df23647a3e2f39efcd624 (MD5) Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-05-30T18:41:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_mp_dr_jabo_parc.pdf: 995333 bytes, checksum: 3d0cd8bc15c3007dc0f7dad41017d643 (MD5) Made available in DSpace on 2017-05-30T18:41:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_mp_dr_jabo_parc.pdf: 995333 bytes, checksum: 3d0cd8bc15c3007dc0f7dad41017d643 (MD5) Previous issue date: 2017-04-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A androgênese é um mecanismo de reprodução uniparental no qual a progênie possui material genético exclusivamente paterno. Essa forma de manipulação cromossômica pode ser utilizada como estratégia de reconstituição de espécies ameaçadas. O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de estabelecer protocolos de indução à androgênese dispérmica na espécie Astyanax altiparanae, padronizando um pacote tecnológico de manipulação da espécie. Inicialmente, foi investigado se o tempo de estocagem dos oócitos (tempo 0 - controle, com 60 minutos pós extrusão (mpe), 120 mpe, 180 mpe e 240 mpe) afetava sua viabilidade em ser fertilizado e a sua ploidia. Os resultados apontam que uma estocagem superior a 60 minutos pós extrusão pode afetar a ploidia e causar reflexos sobre a viabilidade e sobrevivência, com 4,44% das amostras analisadas sendo triploides. Considerando essas informações, foi posteriormente estabelecido um meio de cultura para os oócitos após a extrusão (Ringer, Hanks e dPBS) e a faixa ideal de irradiação UV para inativar o material genético materno (30’, 60’, 90’ e 120’ segundos). A solução ideal para estocagem dos oócitos pós extrusão foi a de dPBS, por até 120 minutos, permitindo um largo intervalo para manipulação. Nesse tratamento, a taxa de eclosão foi de 92,08 ± 1,75%. A faixa de irradiação mais eficaz em inativar o material genético materno foi a de 90 mW/cm2, com 100% das amostras analisadas haploides. Com o estabelecimento deste protocolo, tornou-se possível os primeiros ensaios para indução à androgênese dispérmica. Foi estabelecido um protocolo de irradiação dos oócitos e fertilização com sêmen de Astyanax altiparanae, Astyanax fasciatus e Hyphessobrycon anisitsi albino, com remoção do córion dos oócitos com enzima pronase, para facilitar a fertilização por mais de um espermatozoide. 100% dos tratamentos que receberam radiação UV e não tiveram o córion removido com pronase foram haploides, apresentando anormalidades e malformações características da “Síndrome Haploide”. Os oócitos fertilizados com sêmen de Hyphessobrycon anisitsi albino que foram previamente irradiados e tiveram o córion removido com pronase apresentaram um percentual de eclosão de larvas normais de 7,90 ± 4,30%, diferindo significativamente do controle de oócitos frescos fertilizados com sêmen da espécie, que foi de 87,36 ± 12,26% (P = 0,08). Os tratamentos com irradiação, remoção do córion e fertilização com sêmen de Astyanax altiparanae e de Hyphessobrycon anisitsi albino apresentaram, respectivamente, 6,75% e 18,12% de embriões diploides, sinalizando uma alternativa para a produção de androgenéticos diploides em espécies neotropicais. Outra estratégia de indução à androgênese dispérmica foi a fertilização dos oócitos irradiados com sêmen fundido. Foi avaliada a viabilidade após fusão e a morfologia dos gametas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Após a análise, foram realizados cinco tratamentos baseados na dose inseminante para a espécie, para fertilização com sêmen fundido. O protocolo utilizado para fusão dispérmica apresentou 95,5% de viabilidade (células vivas). A microscopia eletrônica apontou a ocorrência de agregados de espermatozoides e fusão com células sem flagelo. O tratamento com sêmen fundido em menor concentração de dose inseminante apresentou percentual de fertilização de 39,08%, com eclosão de 40,06%. Destacou-se um percentual de eclosão de larvas normais de 34,13% nesse tratamento. Além disso, o tratamento também apresentou o maior índice de indivíduos diploides, com 33,33%. Os resultados apontam para um protocolo de indução à androgênese dispérmica na espécie, sugerindo que apesar da fertilização ser menor em tratamentos com dose inseminante reduzida, o percentual de indivíduos diploides é maior, devido à possibilidade de fertilização com mais espermatozoides fundidos. A reunião desses resultados representa um pacote inédito de manipulação cromossômica e reprodução uniparental em espécies nativas. In this treatment, the hatching rate was 92.08 ± 1.75%. The most effective irradiation range to inactivate maternal genome was 90 mW / cm2, with 100% of analyzed samples as haploid. With the establishment of this protocol, the first trials for induction of dispermic androgenesis became feasible. A protocol of oocyte irradiation and fertilization with semen of Astyanax altiparanae, Astyanax fasciatus and albino Hyphessobrycon anisitsi, with removal of the chorion from oocytes with pronase, was established to facilitate fertilization by more than one spermatozoa. 100% of the UV treated oocytes and intact chorion were haploids, presenting abnormalities and malformations characteristic of the "Haploid Syndrome". Oocytes fertilized with albino Hyphessobrycon anisitsi semen that were previously irradiated and had the chorion removed with pronase had a normal hatch percentage of 7.90 ± 4.30%, differing significantly from the control of fresh oocytes fertilized with semen , which was 87.36 ± 12.26% (P = 0.08). The treatments with irradiation, removal of the chorion and fertilization with semen of Astyanax altiparanae and albino Hyphessobrycon anisitsi presented, respectively, 6.75% and 18.12% of diploid embryos, signaling an alternative for the production of androgenetic diploids in neotropical species. Another strategy of induction to the dispermic androgenesis was the fertilization of irradiated oocytes with fused sperm. The viability after fusion and the morphology of the gametes by Scanning Electron Microscopy (SEM) were evaluated. After the analysis, five treatments were performed based on the inseminating dose for the species, for fertilization with fused sperm. The protocol used for dispermic fusion had 95.5% viability (live cells). Electron microscopy pointed to the occurrence of sperm aggregates and fusion with cells without flagella. The treatment with fused soerm in lower concentration of inseminating dose showed a percentage of fertilization of 39.08%, with hatching of 40.06%. A percentage of normal larvae hatching of 34.13% in this treatment was obtained. In addition, the treatment also had the highest percentages of diploid individuals (33.33%). The results point to a protocol for the induction of dispermic androgenesis in the species, suggesting that although fertilization is lower in treatments with reduced insemination dose, the percentage of diploid individuals increased, due to the possibility of fertilization with more fused spermatozoa. The gathering of these results represents an innovative set of chromosome manipulation and uniparental reproduction in native species.

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-29. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:27Z : No. of bitstreams: 1 000854973_20161205.pdf: 410109 bytes, checksum: 5ceaa1852fc805e9d99744c37a96f7bb (MD5) Bitstreams deleted on 2016-12-06T15:11:22Z: 000854973_20161205.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-12-06T15:12:04Z : No. of bitstreams: 1 000854973.pdf: 2773395 bytes, checksum: daf1de70009034e8b87b75a4cc4b7610 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O hormônio liberador de gonadotropina (GnRH) é um dos fatores chaves na regulação neuroendócrina da reprodução dos vertebrados. Alguns peixes apresentam três variantes do GnRH: o GnRH1 envolvido na secreção de gonadotropinas, o GnRH2 que regula o comportamento alimentar e sexual e o GnRH3 expresso no bulbo olfatório e o nervo terminal cujas fibras nervosas inervam a retina e o epitélio olfatório. O zebrafish possui duas variantes do GnRH (GnRH2 e GnRH3), sendo o GnRH3 a variante hipofisiotrófica. Estudos mostram possível envolvimento do GnRH no sistema olfato-retinal. No sistema olfatório o GnRH regula a sensibilidade na detecção de alimento, o reconhecimento intra e interespecífico, entre outros. Na retina, o GnRH3 pode estar envolvido na acuidade visual e do processamento de informação da retina. Existem estudos que reportam a presença de receptores de GnRH em diferentes camadas da retina, no entanto ainda não é clara a presença de receptores no epitélio olfatório. Neste contexto, no presente estudo analisamos a localização do gnrh2, gnrh3 e seus receptores (gnrhr1,2,3 e 4) e do gnih (hormônio inibidor de gonadotropinas) no epitélio olfatório, a retina e o bulbo olfatório de machos e fêmeas adultos e comparamos a expressão destes genes em fêmeas em diferentes estágios de maturação gonadal. Para tanto, o RNA total do epitélio olfatório, retina, bulbo olfatório, cérebro e gônadas foi extraído. Com base na sequência dos genes gnrh2, gnrh3, gnrhr1, gnrhr2, gnrhr3 e gnrhr4, primers forward e reverse foram desenhados para RT-PCR e qPCR. Sondas para a hibridização in situ também foram construídas para verificar os sítios de expressão destas moléculas no epitélio olfatório, retina e gônadas. Imunohistoquímica com os anticorpos anti-GnRH3 (BB8 e GF6) foram realizadas para localizar a proteína do GnRH3 nos tecidos analisados. O presente estudo apresenta um panorama da expressão do sistema... The gonadotropin releasing hormone (GnRH) is one of the key factors involved in the neuroendocrine regulation of vertebrate reproduction. Some fish species have three GnRH variants: GnRH1 involved in gonadotropin secretion, GnRH2 regulating food and sexual behaviors and the GnRH3 which is expressed in the olfactory bulb and terminal nerve whose fibers innervate the retina and the olfactory epithelium. Two GnRH variants (GnRH2 and GnRH3) are present in the zebrafish, in which GnRH3 acts as the hypophisiotrophic variant. Recent studies have been showing the role of GnRH in the olfactory-retinal system. In the olfactory system, GnRH regulates food detection, and intra and interspecific recognition. In retina, GnRH3 may be involved in visual acuity modulation and retinal processing information. Moreover, studies have reported the presence of GnRH receptors in the retina, but not yet in the zebrafish olfactory epithelium. Therefore, the current study analyzed the presence of GnRH2, GnRH3 and its receptors (GnRH-R1,2,3 and 4) and GnIH (gonadotropin inhibitory hormone) in the olfactory epithelium, olfactory bulb, retina and in gonads of adult zebrafish. We also compared the expression of these genes during the different stages of ovarian maturation in zebrafish. For that, total RNA of the olfactory epithelium, olfactory bulb, retina and gonads was extracted with the PureLink® RNA Mini Kit(Ambion®). RT-PCR and qPCR analysis were performed using forward and reverse primers for gnrh2, gnrh3, gnrhr1, gnrhr2, gnrhr3, gnrhr4 for . Probes for in situ hybridization were constructed to verify the expression sites of these molecules in the olfactory epithelium, retina, and gonads. Immunohistochemistry usinganti-GnRH3 antibodies (BB8 and GF6) were performed to identify the GnRH3 protein in these tissues. The current study presents a general expression view of GnRH/GnIH and their receptors in the olfactory epithelium-olfactory bulb-retinal axis during ... FAPESP: 2014/02481-9

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:29:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:33:29Z : No. of bitstreams: 1 000855149_20180410.pdf: 413493 bytes, checksum: e4c06095e2fe2a929c1c2ec70d19bde6 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-04-13T13:57:56Z: 000855149_20180410.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-04-13T13:58:44Z : No. of bitstreams: 1 000855149.pdf: 2214724 bytes, checksum: 8547c0bf8fcf53aeace46818556993d9 (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A nutrição de reprodutores é um dos principais aspectos relacionados com a qualidade dos ovos e larvas produzidos. Os lípidos e sua composição em ácidos graxos são considerados importantes para o desenvolvimento das gônadas, sobre hormônios gonadotrópicos e esteroidiais, bem como influencia a formação de estruturas biológicas incluindo membranas celulares. Os ácidos graxos essenciais para os peixes são o ácido linoleico e o ácido linolênico, que quando convertidos fornecem os ácidos graxos poli-insaturados, como ARA, EPA e DHA, respectivamente. O óleo de pescado marinho é considerado uma fonte ideal de ácidos graxos poli-insaturados, no entanto, os óleos vegetais são mais comumente utilizados em dietas de peixe. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o desenvolvimento ovariano e o desempenho reprodutivo de jundiás (Rhamdia quelen) alimentados com diferentes fontes lipídicas (óleo de soja, óleo de peixe marinho, óleo de palma refinado e a mistura dos três óleos). As fontes lipídicas não influenciaram no desenvolvimento do ovário, nos níveis de estradiol e 17α-hidroxyprogesterona, e nos índices gonadossomáticos. No entanto, o ácido graxos influenciaram no perfil de ácidos encontrados no fígado, gônadas e oócitos. Adicionalmente dietas 'a base de o óleo de palma resultou em melhores taxas de fertilização, sendo recomendado sua utilização em substituição ao óleo de pescado marinho Broodstock nutrition is one of the main aspects related with the quality of eggs and larvae produced. Lipids and its fatty acid composition are considered important on gonadal development, gonadotropic and steroid hormones, as well as influencing the formation of biological structures including cell membranes. In fish linoleic and linolenic are the essential fatty acids, which mabe converted into polyunsaturated fatty acids, like ARA, EPA and DHA, respectively. The marine fish oil are good sources of polyunsaturated fatty acids, however, vegetable oils are more communly used in fish diets. Thus, the aim of this study was to evaluate the ovarian and reproductive development of silver catfish (Rhamdia quelen) fed with lipid sources (soybean oil, marine fish oil, refined palm oil and a mixture). The lipid sources did not influence ovarian development, levels of estradiol, 17α-hidroxyprogesterona, and gonadosomatic index. However, the fatty acid changed fatty acid profile found in the liver, gonads and oocytes. Additionally, palm oil give rise to better fertilization rates and are recommended, suggesting that it may be used for fish oil replacement CNPq: 142751/2011-1 FAPESP: 2012/23089-4

Made available in DSpace on 2014-08-27T14:36:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-26Bitstream added on 2014-08-27T15:57:15Z : No. of bitstreams: 1 000777559.pdf: 3234476 bytes, checksum: cc41e2672688abab324484d35dd5bb14 (MD5) A Tese de Doutorado foi estruturada em três capítulos, além da “Introdução Geral”, que abrange uma revisão bibliográfica das espécies em estudo e dos temas abordados, e das “Considerações Finais”. Os três capítulos darão origem a artigos científicos em revistas indexadas. O primeiro artigo (Capítulo I) descreve os parâmetros seminais e a ultraestrutura dos espermatozoides de Brycon vermelha, “vermelha” (Characiformes, Characidae). O sêmen da B. vermelha possuiu consistência viscosa, e concentração espermática média de 4,34 ± 0,75x1010 espermatozoides.mL-1. O tempo de motilidade espermática, quando ativado com água destilada, foi curto, sendo necessários 46,48 ± 0,07 segundos para perda da motilidade de 100% dos espermatozoides. A análise dos espermatozoides por MEV revelou três regiões distintas: cabeça, peça intermediária e flagelo, sendo cada região caracterizada detalhadamente em MET. Tais características sugerem que os espermatozoides de B. vermelha apresentam características ancestrais próprias de peixes com fecundação externa classificando-os como “espermatozoides aquáticos uniflagelados anacrossomais”, ou seja, aquasperm do Tipo I. Estas informações são as primeiras em relação ao sêmen e espermatozoides de B. vermelha, podendo ser uma referência para futuros estudos, embasando especialmente pesquisas que adotem biotécnicas, como a criopreservação e androgênese. O segundo artigo (Capítulo II) descreve, ultraestruturalmente, as alterações dos espermatozoides da Brycon orbignyanus, “piracanjuba” (Characiformes, Characidae) durante o processo de criopreservação. O exame ultraestrutural dos espermatozoides descongelados criopreservados em soluções contendo DMSO, metilglicol e metanol, em três tempos de armazenamento (1 dia, 1 mês e 1 ano), revelou a presença de alterações no espermatozoide, variando desde ... The doctoral thesis consisted of three main chapters besides the “General Introduction”, which includes a bibliographic review of the species studied and the topics discussed, and the “Final Remarks”. Scientific research articles will be published from the data of the three chapters in the scientific journals listed in the index. The first scientific article (Chapter I) describes the seminal parameters and the spermatozoa structure of Brycon vermelha, “vermelha” (Characiformes, Characidae). The semen of the Brycon vermelha is viscous and contains, in average, 4.34 ± 0.75x1010 spermatozoa.mL-1. Spermatozoa motility was of short duration when activated with distilled water, 46.48 ± 0.07 seconds until 100% of spermatozoa lost their motility. Scanning transmission electron microscopy (STEM) of spermatozoa revealed three distinctive parts: head, middle piece and tail (flagellum). Each part was analysed in detail by transmission electron microscopy (TEM). The characteristics observed suggest that the spermatozoa of B. vermelha posses ancestral characteristics of fish that reproduce by external fertilization, and can thus be classified as “uniflagellate anacrosomal aquasperms”, or aquasperms Type I. These are the first reports on B. vermelha semen and spermatozoa and, therefore, could be used as a reference and benchmark for research studies using biotechniques such as cryopreservation and androgenesis. The second scientific article (Chapter II) describes the ultrastructural alterations of Brycon orbignyanus, “piracanjuba” (Characiformes, Characidae) spermatozoa after cryopreservation. Spermatozoa were cryopreserved for 1 day, 1 month or 1 year in solutions containing DMSO, methyl glycol and methanol. The ultrastructural analysis of the frozen-thawed spermatozoa revealed alterations varying from small damages to the different parts of the cell to total destruction of spermatozoa ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-14Bitstream added on 2014-11-10T11:58:09Z : No. of bitstreams: 1 000777313_20150214.pdf: 550077 bytes, checksum: d8e01ff78c8836d4f7aed4afe688ca49 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-02-18T15:02:15Z: 000777313_20150214.pdf,Bitstream added on 2015-02-18T15:02:48Z : No. of bitstreams: 1 000777313.pdf: 519896 bytes, checksum: f1173172b8a785b6cd1ddbebc6b8e207 (MD5) O objetivo deste trabalho foi estudar aspectos básicos dos gametas e o desenvolvimento inicial de Astyanax altiparanae, para futura aplicação na área de biotecnologia, incluindo manipulação cromossômica de embriões. No Capítulo I, os ovócitos foram analisados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e a dose inseminante foi determinada. O sêmen também foi coletado e analisado com sistema de análise computadorizada (CASA). A dose inseminante reduzida encontrada para a espécie foi explicada pela morfologia dos ovócitos através de análise em MEV, que revelou vilosidades que cercam a micrópila relacionadas à orientação do esperma para a fecundação. No capítulo II, vários parâmetros relacionados com a fertilização foram descritos, incluindo a extrusão do segundo corpúsculo polar, a fusão dos pronúcleos e a formação do cone de fertilização. Além disso, o efeito de três temperaturas (22°C, 26°C e 30°C) sobre os estádios de desenvolvimento foi determinado. A extrusão do segundo corpúsculo polar ocorreu em 4-6 minutos pós-fertilização (mpf), e os pronúcleos fundiram-se com 8-10 mpf. O espermatozoide apresentou uma cabeça esférica, peça intermediária e flagelo. Como esperado, as temperaturas mais elevadas deram origem a um desenvolvimento e incubação mais rápidos. As informações obtidas neste estudo irão abrir novas possibilidades no campo da manipulação cromossômica de embriões, incluindo poliploidia, quimerismo, transgenia e outras técnicas The aim of this study was to study basic aspects of gametes and early development of yellowtail tetra Astyanax altiparanae, for future application in biotechnology including chromosome and embryo manipulation. In Chapter I, the oocytes were analyzed by Scanning Electron Microscopy (SEM) and the insemination dose was determined. Semen was also collected and analyzed using a Computer Assisted Sperm Analysis (CASA). Such a reduced inseminating dose was explained by oocyte morphology because SEM analysis revealed villosities surrounding the micropyle that is related to the sperm guidance for fertilization. In addition, the duration of sperm motility was longer in comparison to most teleosts, what may improve fertilization ability. In Chapter II, several parameters related with fertilization were described, including the second polar body extrusion, fusion of the pronuclei and the formation of the fertilization cone. Moreover, the effect of three temperatures (22°C, 26°C and 30°C) on developmental stages was determined. 2nd polar body was extruded at 4-6 minutes post fertilization (mpf), and the pronuclei were formed at 8-10 mpf. The sperm showed a spherical head, midpiece and flagellum. As expected, higher temperatures gave rise to faster development and hatching. The information obtained in this study will open new possibilities in the field of chromosome and embryo manipulation including poliploidy, chimerism, transgenesis and other techniques

Made available in DSpace on 2014-08-27T14:36:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-14Bitstream added on 2014-08-27T15:56:58Z : No. of bitstreams: 1 000777135.pdf: 741642 bytes, checksum: 2c0e77ce18654878247daffec8587cac (MD5) Tendo em vista a importância do cultivo de girinos para obter bons resultados na ranicultura, este trabalho objetivou determinar a exigência de proteína digestível para girinos de rã-touro e avaliar a deposição de nutrientes corporais. Foram utilizados 9120 girinos de rã-touro, alojados em 24 caixas experimentais e alimentados com dietas isoenergéticas (3676 kcal ED kg-1) contendo 21, 23, 25, 27, 29 e 31% de proteína digestível (PD). Avaliou-se o ganho de peso, consumo da dieta, consumo proteico, conversão alimentar, taxa de crescimento específico (TCE) e taxa de eficiência proteica (TEP). Foi utilizado o modelo Logístico para descrever a deposição dos nutrientes. O melhor nível estimado para o ganho de peso através da regressão segmentada (broken line), foi de 27,7% PD. O consumo da dieta diminuiu, o consumo proteico e a TCE se elevaram e a conversão alimentar melhorou com o aumento dos níveis de PD da dieta. Não houve diferença estatística com relação à TEP. Os girinos alimentados com as dietas com 27, 29 e 31% PD apresentaram maior deposição de proteína, água e cinzas e menor de gordura Given the importance of growing tadpoles to get good results in frog farming, this study aimed to determine the digestible protein requirement for bullfrog tadpoles and evaluate the deposition of body nutrients. 9,120 bullfrog tadpoles were used, housed in 24 tanks and fed with isocaloric diets (3,676 kcal DE kg- 1) containing 21, 23, 25, 27, 29 and 31 % digestible protein (DP). We evaluated weight gain, feed intake, protein intake, food conversion, specific growth rate (SGR) and protein efficiency rate (PER). The Logistic model was used to describe the deposition of nutrients. The best estimated level to gain weight by segmented regression (broken line) was 27.7% DP. Feed intake decreased, the protein intake and SGR increased and the food conversion rate improved with increasing levels of PD. There was no statistical difference in the PER. Tadpoles fed diets with 27, 29 and 31% DP showed greater deposition of protein, water and ash and less fat

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-07Bitstream added on 2014-08-13T18:00:56Z : No. of bitstreams: 1 000750528.pdf: 388655 bytes, checksum: 5e25e9cb8343db7711c8612a05c569a2 (MD5) O Pseudoplatystoma fasciatum é uma espécie nobre que apresenta carne sem espinhos, sabor delicado e textura firme. Nesta espécie, as fêmeas atingem maior tamanho e apresentam melhores taxas de crescimento que os machos. Assim, o objetivo desde trabalho foi descrever o processo de desenvolvimento e diferenciação gonadal do P. fasciatum e avaliar a possibilidade da feminilização com uso do hormônio 17β-estradiol. Para a descrição da diferenciação e desenvolvimento gonadal, os juvenis de P. fasciatum foram obtidos por meio de reprodução induzida de reprodutores mantidos em diversas estações de reprodução e pisciculturas de reprodução induzida (Centro de Aquicultura da UNESP “CAUNESP”, piscicultura Andrade e piscicultura Mar & Terra); já para o tratamento hormonal, os juvenis foram obtidos e mantidos na piscicultura Mar & Terra. As coletas para a diferenciação e desenvolvimento gonadal foram realizadas em tempos pré-estabelecidos, iniciando a partir de 39 dias pós-fertilização (dpf) e até completarem 240 dpf. Para o tratamento hormonal os juvenis com 39dpf receberam ração incorporada com 17β-estradiol e alimentados diariamente até a saciedade. Foi utilizado um grupo controle e três grupos tratados (50, 100, 150mg/Kg de ração comercial extrusada com 40% de proteína bruta). As coletas iniciaram com 39 dpf e depois periodicamente nos seguintes tempos 45, 57, 70, 100 dpf. Aos 39 dpf observaram-se pares de gônadas indiferenciadas como estruturas simples, localizadas dorsalmente ao intestino e ventralmente ao rim. Entre 39 e 45 dpf observamos pela primeira vez evidências histológicas no início de diferenciação em gônada feminina e gônada masculina. Com 60 a 70 dpf as diferenças externas e internas das gônadas femininas e masculinas permitiam a identificação morfológica de precursores de ovários e testículos, porém, tanto a gônada feminina quanto a masculina ... Pseudoplatystoma fasciatum is an important species, with unspined meat, delicate flavor and firm texture. Females of this species reach larger sizes and have better growth rates than males. The objective of this study was to describe the gonad development and differentiation of P. fasciatum and evaluate the potential feminization effect of the 17β - estradiol hormone. For development and gonadal differentiation description, P. fasciatum juveniles were obtained through the hormonal induction of various breeders maintained in different reproductive stations and fish farms of inducted reproduction (Centro de Aquicultura Unesp “CAUNESP”, Andrade and Mar&Terra piscicultures); for the hormonal treatment juveniles were obtained and maintained in Mar&Terra pisciculture. Samples for development and gonadal differentiation were performed on pre-set points starting from 39 days post-fertilization (dpf) until complete 240 dpf. For the hormonal treatment juveniles (39 dpf) were fed daily to satiation with artificial food incorporated with 17β-estradiol. We used a control group and three treated groups (50, 100, 150mg/kg of commercial extruded feed containing 40% crude protein). Sampling started at 39 (dpf) and periodically at the following times 45, 57, 70 and 100 dpf. At 39 dpf gonads were undifferentiated observed as simple structures, located ventrally to intestine and dorsally to kidney. From 39 to 45 dpf we observed the first histological clues of female and male gonad differentiation. At 60-70 dpf the external and internal differences of male and female gonads enabled the morphological identification of ovaries and testes precursors, however, both the male and the female gonad consisted mainly of somatic cells and rare germ cells of the undifferentiated type, referred as oogonia for female gonads and spermatogonia for male gonads. From 100 to 113 dpf, gonads from both sexes increased in size ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-05Bitstream added on 2014-06-13T20:10:21Z : No. of bitstreams: 1 000748420.pdf: 10455273 bytes, checksum: 5531ec5e20aa8e0ad2b7bd68b8dde10a (MD5) O presente estudo teve como objetivo analisar os índices reprodutivos e definir os aspectos reprodutivos da espécie Astyanax fasciatus no Córrego Rico, São Paulo, Brasil e confirmar duas hipóteses - Esta espécie possui desova do tipo parcelada neste ambiente especificamente e uma amostra da população colocada em cativeiro pode desenvolver a maturação gonadal. Foram capturados 40 exemplares da espécie, por meio de coletas mensais padronizadas realizadas no período de outubro de 2012 a janeiro de 2013 por meio de rede espera. Além disso, mais 120 exemplares de A. fasciatus foram coletados e transferidos para um tanque no Centro de Aquicultura da UNESP, Jaboticabal, SP e mantidos em cativeiro. Coletas mensais também foram realizadas no mesmo período das coletas in situ para biometria e análise histológica das gônadas. A hipótese de desova parcelada foi corroborada pela análise concomitante da variação dos índices gonadossomático, hepatossomático, fator de condição e volume gonadal além da análise histológica observando fêmeas parcialmente desovadas em mais de uma coleta. A hipótese de maturação gonadal em ambiente de cativeiro também foi corroborada por meio de análise histológica associada à análise dos índices reprodutivos. Nesse contexto, os resultados obtidos geram subsídios para estudos no tocante à biologia reprodutiva e sua aplicação na reprodução em ambiente de aquicultura This study aim to study the reproductive biology of redtail tetra Astyanax fasciatus from a stream in Jaboticabal,SP and confirm two hypothesis - this specie have a fractional spawning in this place specifically and A. fasciatus can maturate gonads in capitivity environment. Adult males and females (n=40) were sampled monthly during the rainy season from October 2012 to January 2013 by gillnets. Besides, more 120 adult males and females were sampled and transferred to a pond in UNESP Aquaculture Center, Jaboticabal,SP. Monthly samples were realized in the same period that in situ samples for biometrics and histological analysis. The hypothesis of fractional spawning was corroborated by concurrent analysis of gonadosomatic index, hepatosomatic index, condition factor and gonadal volume in addition to histological analysis watching females partially spawned in more than one sample. The hypothesis of gonadal maturation in captivity environment also be corroborated by histological analysis in addition to reproductive indexes analyslis. In this context, the results generate data for studies regarding the reproductive biology and its application in breeding aquacultural environment

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:40:28Z : No. of bitstreams: 1 paes_mcf_dr_jabo.pdf: 652606 bytes, checksum: 36fc9416b423c16aa4b65e4486ef48e2 (MD5) O gênero Brycon tem despertado grande interesse nas instituições de pesquisa, não só pela excelente qualidade e sabor da carne, mas também por características adequadas à pesca esportiva, rápido crescimento e ganho de peso. A piracanjuba tem sofrido drástica redução dos estoques em decorrência da ação antrópica estando na lista do IBAMA de espécies ameaçadas de extinção. A criopreservação de gametas e embriões de espécies migradoras e espécies raras surge como uma alternativa para a reprodução, repovoamento, criação de banco genético, transporte e possível obtenção de larvas ao longo do ano. Assim, este trabalho teve por objetivo ampliar os conhecimentos de criogenia utilizando embriões de piracanjuba (Brycon orbignyanus), com o intuito de estabelecer um protocolo de resfriamento para ser utilizado em projetos de reprodução e conservação desta espécie. Após a obtenção dos embriões por meio de reprodução induzida, estes, quando na fase de fechamento do blastóporo, foram contados e subdivididos em parcelas, considerando como unidade experimental um tubo (vacutainer) contendo 100 embriões. Cada tratamento teve oito repetições. Com exceção dos grupos controles, os demais tratamentos foram submetidos a diferentes combinações e concentrações de crioprotetores (sacarose, metanol, etilenoglicol e DMSO), diferentes temperaturas (0,0±2,0°C e 8,0±2,0ºC) e tempos de estocagem em refrigerador (6h, 10h, 24h, 72h, 168h). Transcorridos os tempos de estocagem, os embriões foram aclimatados, rehidratados e transferidos para incubadoras para monitoramento do desenvolvimento e aferições das taxas de eclosão, sobrevivência e deformidade. Para avaliar o desenvolvimento de tecidos e células após a realização do experimento, amostras foram fixadas, observadas em estereomicroscópio e... The genus Brycon have aroused great interest of research institutions, not only for the excellent quality and flavor of the meat, but also for characteristics suited to sport fishing, quick growth and weight gain. Piracanjuba suffers drastic reduction in natural environment as a result of human action and is in the list of endangered species of IBAMA. The cryopreservation of gametes and embryos of migratory and rare species is an alternative to reproduction, repopulation, creating genetic database, transport of larvae and obtainment of larvae throughout the year. The aim of this study is expand the knowledge of cryogenics using embryos of piracanjuba (Brycon orbignyanus) and establishing a cooling protocol to be used in projects of reproduction and conservation of this species. After obtaining embryos from induced reproduction, those ones that were in this phase of blastopore closuring, were colected, counted and divided into groups, considering as experimental unit each tube (vacutainer) containing 100 embryos. Each treatment had eight replications. Except for the control groups, the other treatments were subjected to different combinations and concentrations of cryoprotectants (sucrose, methanol, ethylene glycol and DMSO), different temperatures (0,0 ± 2,0ºC and 8,0 ± 2,0°C) and storage time on refrigerator (6h, 10h, 24h, 72h, 168h). Elapsed times of storage, the embryos were acclimated, washed and transferred to incubators for monitoring the development of measurements and hatching rates, survival and deformity. To evaluate the development of tissues and structures after the experiment, samples were put on fixative solution and observed under stereomicroscope, and after that were processed and analyzed by light microscopy and transmission electron microscopy. It was observed that... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-06-13T20:32:47Z : No. of bitstreams: 1 silva_rc_me_jabo.pdf: 14525132 bytes, checksum: 1591a87a342d1b6b0e63b988daf82474 (MD5) O Betta splendens destaca-se como uma das espécies ornamentais mais cultivadas no mundo. Dentre os fatores que determinam o sucesso de criação, estão aqueles relacionados às alterações morfológicas do trato digestório e o desenvolvimento normal das gônadas. Este estudo objetivou acompanhar e registrar o desenvolvimento do trato digestório e gonadal do B. splendens por meio de técnicas de histologia e de microscopia eletrônica de varredura (MEV). As larvas foram obtidas a partir de reprodução natural, mantidas sob cuidado parental do macho e coletadas em tempos préestabelecidos durante o desenvolvimento. Em cada tempo de coleta, os peixes foram anestesiados em solução de bezoncaína, pesados e fixados em formol 4% tamponado e também em Karnovsky modificado. A temperatura da água durante a ontogênese foi de 28,0±2,0ºC e o pH 6,9±0,3. A eclosão ocorreu 28 horas pós-fertilização. Neste momento, as larvas apresentavam-se com trato digestório incompleto, sendo visualizado um tubo reto e simples com um epitélio constituído por uma camada de células colunares na região ventral e posterior da larva, representando o intestino primitivo. Com 18 horas pós-eclosão (hpe) foi observada a abertura bucal e dentes maxilares. O tubo digestório estava totalmente aberto com 32 hpe e a língua apresentava botões gustativos e melanóforos na região dorsal com 40 hpe. A absorção total do saco vitelínico ocorreu com 74 hpe, quando foi observado conteúdo no estômago e intestino. Neste período, o trato digestório e glândulas anexas estavam totalmente diferenciados e funcionais. Levando em consideração o hábito alimentar e suas particularidades, o conhecimento morfofuncional do trato digestório se faz necessário para estabelecer dietas que atendam às exigências desta espécie, visando melhorias... The Betta splendens highlights like one of the most cultivated ornamental fish in the world. Among the factors that determine the success of rearing, are factors related to morphological changes of the digestive tract and normal development of the gonads. This study aimed to monitor and record changes in the digestive tract morphology and gonadal development of B. splendens by techniques of histology and scanning electron microscopy (SEM). The larvae were obtained from natural reproduction and were kept under male parental care and collected in pre-established time of development. At each sampling time, fish were anesthetized in a solution of bezoncaine, weighed and fixed in 4% buffered formaldehyde y and either in modified Karnovsk solution. The water temperature during ontogeny was 28.0 ± 2.0 °C and pH 6.9 ± 0.3. The hatching occurred at 28 hours after fertilization. At this time the larvae presented an incomplete digestive system, being viewed as a straight tube lined by a simple epithelium that consisted by a layer of columnar cells located in the ventral and posterior regions of the larva, representing the primitive gut. At 18 hours post-hatching (hph) was observed the mouth opening, and maxillary teeth. The digestive tract was totally opened at 32 hph and tongue showed taste buds and melanophores in the dorsal region at 40 hpe. The total absorption of the yolk sac occurred at 74 hph, when feed particles were observed into the stomach and intestine. In this period, the digestory tract and annexes glands were fully differentiated and functional. Taking in consideration the feeding habit and your peculiarities, the morphofunctional knowledge of the digestory tract becomes necessary for estabilish diets that meet the requirements of this species, looking for improvement in the productive performance and health of the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:48:58Z : No. of bitstreams: 1 faustino_f_me_jabo.pdf: 2111122 bytes, checksum: 04ec462df798e747d75a33b6720ccf5b (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Universidade Estadual Paulista (UNESP) Brycon gouldingi é uma espécie endêmica da Bacia Tocantins-Araguaia e estudos acerca de sua biologia e desenvolvimento ontogenético não se encontram na literatura. Analises morfométrica e morfológica dos períodos embrionário e larval desta espécie contribuirão para o conhecimento de sua biologia e potencial para o cultivo. Para este trabalho, foram capturados exemplares adultos da espécie, provenientes do Rio das Mortes - MT, principal afluente do Rio Araguaia e adaptados em cultivo por cerca de sete meses. Dez coletas foram realizadas na Piscicultura Buriti, Nova Mutum — MT, nos meses de dezembro de 2007 e janeiro de 2008, apos a reprodução induzida dos exemplares, sendo feitas amostragens nos seguintes tempos: extrusão, fertilização (tempo zero), 10, 20 e 30 segundos, 1 min, 1 min e 30s, a cada minuto ate completar 10min, a cada 5min ate atingir 30min, aos 45min, de hora em hora ate completar 24 horas, a cada 2 horas ate completar 48 horas e a cada 3 horas ate a absorção total do vitelo. Ovócitos, ovos, embriões e larvas foram observados em estereomicroscópio, microscopia eletrônica de varredura e microscopia de luz. Foi realizada também a morfometria dos ovócitos liberados por cada fêmea e das larvas desde o momento da eclosão ate a absorção total do vitelo, registrando-se valores de comprimento total da larva, altura e comprimento do saco vitelínico. A temperatura media da água nas incubadoras foi de 26,4±1,12 °C. 0 diâmetro dos ovócitos foi de 1,13±0,06 mm e 54% deles possuíam entre 1,11 e 1,20 mm. 0 período embrionário teve uma duração media de 13,9±0,06 horas pós-fertilização (hpf) sendo dividido em sete fases (zigoto,'1. clivagem, mórula, blástula, gástrula, histogênese/organogênese... Brycon gouldingi is an endemic species of Tocantins-Araguaia basin and studies about its biology and ontogenetic development are not available in the literature. Morphometric and morphological analyses of embryonic and larval stages of this species will increase the knowledge about its biology and aquaculture potential. To perform this work, adult specimens from Mortes River- MT, the main tributary of Araguaia River were collected and adapted to captivity for seven months. Ten collections were carried out at Buriti Fishculture, Nova Mutum — MT, between December 2007 and January 2008, after induced spawning, comprising samplings in the following periods: extrusion, fertilization (time zero), 10, 20 and 30 seconds, lmin, lmin e 30s, at each minute up to 10min, each 5min up to 30min, at 45min, each hour up to 24 hours, each 2 hours up to 48 hours and each 3 hours up to total yolk absorption. Oocytes, eggs, embryos and larvae were observed under stereomicroscope, scanning electron microscope and light microscope. Morphometry analyses were also performed in the oocytes released by each female and in the oocytes up to total yolk absorption taking into account total larval length, yolk sac height and length values. The mean water temperature in the incubators was 26.4±1.12 °C. The oocyte diameter was equal to 1.13±0.06 mm and 54% of them were between 1.11 and 1.20 mm. The mean duration of the embryonic period was 13.9±0.06 hours post-fertilization (hpf) being divided into seven stages (zygote, cleavage, blastula, gastrula, histogenesis/organogenesis and hatching). At hatching, the total larval length was equal to 3.40±0.07 mm and the yolk sac volume was 0.46±0.081.iL. During the larval development, the appearance of adhesive organs on the cephalic dorsal region plus heart... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-15Bitstream added on 2014-06-13T20:40:29Z : No. of bitstreams: 1 makino_lc_dr_jabo.pdf: 1684591 bytes, checksum: c96f97cc47fc21cfbeedc2d7d920bac2 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Universidade Estadual Paulista (UNESP) O presente trabalho teve por objetivo descrever o aparelho digestório sob os pontos de vista estrutural, ultraestrutural e histoquímico de uma espécie de peixe de água doce: o curimba (Prochilodus lineatus) (Characidae, Prochilodontidae). Adicionalmente foi realizado um estudo da diversidade da microbiota intestinal do Prochilodus lineatus e do cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi). Para os estudos morfológicos de anatomia, histologia, histoquímica e de microscopia eletrônica de varredura, foram utilizados 40 curimbas adultos. Para os estudos microbiológicos, além dos curimbas, foram coletados também exemplares adultos de cascudo cinza, no qual além dos métodos de cultura e análise tradicionais, que incluíram cultivos em meios aeróbios e anaeróbios facultativos, contagem de colônias e estudo da morfologia das mesmas pelo método de Gram, também englobou técnicas de observação da microbiota em microscopia eletrônica de varredura. Os dados numéricos obtidos tanto nos trabalhos morfológicos descritivos quanto nos microbiológicos foram submetidos à análise estatística pelo programa SAS versão 9.0. O trato digestório do curimba foi dividido em intestino cefálico, intestino anterior, intestino médio e intestino posterior, os quais foram constituídos histologicamente pelas camadas mucosa, submucosa, muscular e serosa. Células caliciformes foram observadas em toda a extensão do tubo intestinal. Ao longo do tubo digestivo detectou-se a presença de mucinas neutras, ácidas ou ambas. A vesícula biliar mostrou-se como um órgão sacular alongado, oco, de fundo cego e com paredes delgadas. O fígado apresentou-se trilobado e de consistência maciça, com coloração vermelho-acastanhado, com os hepatócitos organizados em placas duplas circundadas por sinusóides. Na contagem de bactérias intestinais totais foram encontrados valores que variaram... The aim of this study was to describe the digestive tract of species of neotropical freshwater fish, the curimba (Prochilodus lineatus) (Characidae, Prochilodontidae) under the structural, ultrastructural and histochemical aspects. Additionally a research was made about the diversity of the intestinal microflora of Prochilodus lineatus and the gray armored catfish (Pterygoplichthys anisitsi). For morphological studies, which were subdivided into gross anatomy, histology, and histochemistry and also in scanning electron microscopy were used 40 fish. For microbiological researches, were used adult specimens of the gray armored catfish, where besides of traditional methods of culture and analysis that included culture in aerobic and facultative anaerobic conditions, counting of colonies and the study of colonies morphology by Gram and also to observation of gut microbiota by scanning electron microscopy were sampled 20 fish of each species, totaling 40 animals. The numerical data obtained in the descriptive morphological researches and in the microbiological studies were analyzed by statistical software SAS, version 9.0. The digestive tract of curimba was divided into cephalic gut, foregut, midgut and hindgut, which were made histologically by the following layers: mucosal, submucosal, muscular and serosa. Goblet cells were observed throughout the length of the intestinal tube. Neutral mucins and acid or both were detected along the digestive tract. The gallbladder was an elongated saccular body, hollow, blind background and with thin walls. The liver was trilobed and compacted red-brown mass, with hepatocytes arranged in double plates surrounded by sinusoids. The count of the total intestinal bacteria showed values that ranged between 103 e 104 cfu.mL-1 (colonyforming units). The morphotypes of gram positive microorganisms found most frequently were coccoid-shaped and rod-shaped bacteria... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-26Bitstream added on 2014-06-13T19:48:39Z : No. of bitstreams: 1 paes_mcf_me_jabo.pdf: 990222 bytes, checksum: f08cd87c9c978169ebdb4fdbd5287e5d (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O Astronotus ocellatus é originário da Bacia Amazônica, climatizado e disseminado, desde 1938, em açudes e rios do Nordeste brasileiro, pelo Departamento Nacional de Obras Contra as Secas. Trata-se de um peixe de grande potencial, devido a características adequadas para pesca esportiva, cultivado como ornamental e com uma carne saborosa e apreciada pela população do Norte e Nordeste do Brasil. Existem na literatura atual poucos estudos a respeito da biologia reprodutiva dessa espécie. Embora seja de desova parcelada e se reproduza bem em cativeiro, estudos de reprodução artificial têm suma importância para diversas pesquisas de biologia e desenvolvimento embrionário, cujos eventos devem ser acompanhados numa faixa de tempo conhecida e assim contribuir para uma melhor compreensão do cultivo, manejo e controle da espécie. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a resposta do Astronotus ocellatus a aplicação de dois hormônios estimuladores de reprodução (gonadodropina coriônica humana - HCG e extrato de hipófise de carpa - EHC) e estudar a estrutura, ultraestrutura e morfometria de seus ovos e larvas. Foram utilizados 16 casais de reprodutores pertencentes ao Centro de Aqüicultura da Universidade Estadual Paulista, Campus de Jaboticabal (SP) e quatro desovas ocorridas naturalmente nos viveiros. Observouse que cinco das dezesseis fêmeas responderam ao estímulo hormonal, sendo três com HCG e duas com EHC. Dos machos, apenas um respondeu positivamente ao HCG. O acará-açu possui ovos demersais, adesivos, pouco resistentes ao tato, de formato ovóide pouco acentuado. “In vivo” apresentaram coloração amarelada, quando fertilizados, e branca opaca, quando não fertilizados, com grande esfera vitelina e pequeno espaço perivitelino. As desovas apresentaram ovos com valores médios variando de 1,75±0,056 a... Astronotus ocellatus is a fish from the Amazon Basin, adapted and widely reared since 1938 in ponds and rivers of Brazilian northeast region by the Departamento Nacional de Obras Contra as Secas. This fish has a great potential due to appropriate characteristics for sporting fishing, reared as ornamental and owning a very tasty meat being appreciate by the people in north and northeast regions of Brazil. Despite having all these adjectives for aquaculture there are a few studies about reproductive biology of this species. Although spawning does not occur at once and reproduction in captivity is well successful, studies about artificial reproduction are extremely important for several researches in biology and early embryonic development of which events must be followed in a known lack of time and like this to contribute for a better understanding of rear conditions, management and control of the species. Therefore, this present research aimed to assess the Astronotus ocellatus responses to administration of two kinds of reproductive hormones (Human Chorionic Gonadotropin - HCG and carp hypophysis extract – CHE) and studying the structure, ultrastructure and morphometry of its eggs and larvae. Sixteen couples from Centro de Aqüicultura of Universidade Estadual Paulista, Campus of Jaboticabal (SP) and four spawnings occurred naturally in ponds were also catched. Five of sixteen females responded to hormonal stimuli, three of them with HCG and two with CHE. In relation to males, only one responded favorably to HCG. Acará-açu females have demersal and adhesive eggs, somewhat resistant to the touch, discreet egg shape-like, yellowish colour “in vivo” and when fertilized and white opalescent without fertilization, with a large vitelline sphere and a small space between yolk and chorion. The spawnings presented eggs with average values of 1,75±0,056 ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-28Bitstream added on 2014-06-13T20:00:48Z : No. of bitstreams: 1 neumann_e_dr_jabo.pdf: 2015477 bytes, checksum: 10c733a9b7bed4381b1a72046f8484fb (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este estudo teve por objetivo descrever fases iniciais do ciclo de vida de Brycon amazonicus, analisando momentos da fertilização e do desenvolvimento inicial por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia de luz (ML) e análise de variações morfométricas corporais. A temperatura média da água foi de 27,98 ± 0,81 ºC em laboratório, envolvendo período entre a extrusão dos gametas e 76 horas após a fertilização (PF), e de 30,30 ± 1,98 ºC em viveiro, onde as larvas foram estocadas de 76 h PF a 25 dias de idade. O diâmetro dos ovócitos na extrusão foi de 1,21 ± 0,06 mm, quando 87,7% deles tinham entre 1,11 e 1,30 mm. Até 180 min PF ocorreu aumento do espaço perivitelino e o diâmetro dos ovos chegou a 3,81 ± 0,40 mm. A penetração dos espermatozóides na micrópila e formação de cones de proteção ocorreram entre 10 e 30 segundos após a ativação dos gametas e a embriogênese foi concluída 13 h PF. No momento da eclosão as larvas possuiam 3,45 ± 0,38 mm de comprimento padrão, o volume do saco vitelino foi de 0,54± 0,17 μL e sua reabsorção total ocorreu 53 horas após a eclosão (PE). A maior eficiência de consumo de vitelo ocorreu entre 33 e 47 h PE. Com 25 h PE primórdios de dentes foram visualizados na boca conectada ao tubo retilíneo aberto com lume revestido por epitélio simples cilíndrico. Com 243 h PE o trato digestório estava dividido em cavidade bucofaríngea e esôfago revestidos por epitélio estratificado pavimentoso, estômago em forma de U com camada simples de células cilíndricas no lume e glândulas tubulares na região cárdica, e intestino médio com inúmeros cecos pilóricos na região proximal, dividido do intestino posterior por septo retal. O epitélio destes dois últimos segmentos era similar ao do estômago, diferenciando-se na quantidade e distribuição de células claras em seu interior... The present work aimed to describe the early phases of the life cycle of Brycon amazonicus. Methods included the analysis of fertilization and early development by scanning electron microscopy (SEM), light microscopy (LM) and the analysis of the variations in body morphometry. The period from gametes extrusion and 76 hours after fertilization (AF) was assessed in laboratory with a water temperature of 27.98 ± 0.81 ºC. From 76 hours AF to 25 days old the larval assessment was performed in fishery with a water temperature of 30.30 ± 1.98 ºC. The oocytes diameter at extrusion was 1.21 ± 0.06 mm, when 87.7% of them measured between 1.11.and 1.30 mm. Up to 180 min AF there was an enlargement of the perivitelline space and the oocytes diameter reached 3.81 ± 0.40 mm. The spermatozoa entrance inside micropyle and the formation of protection cones occurred between 10 to 30 seconds after gametes activation and embryogenesis was achieved 13 h AF. At hatching, total larval length was 3.45 ± 0.38 mm; the yolk sac volume was 0.54 ± 0.17 μL and its total reabsorption occurred 53 hours after hatching (AH). The greater consumption efficiency of yolk occurred between 33 to 47 h AH. At 25 h AH rudimentary teeth were observed in the mouth. Mouth was connected to the open linear tube with lumen covered by simple cylindrical epithelium. 243 h AH, digestory tract was divided in bucopharyngeal cavity and esophagus covered by squamous stratified epithelium; stomach had a U shape with a single layer of cylindrical cells at the lumen and tubular glands at cardiac region; midgut showed countless pyloric caeca at the anterior region, separated from hindgut by rectal septum. Midgut and hindgut had an epithelium similar to the stomach, except for the amount and distribution of clear vesicular cells inside it... (Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-25Bitstream added on 2014-06-13T21:01:17Z : No. of bitstreams: 1 bahia_vrlo_dr_jabo.pdf: 5914838 bytes, checksum: a4109e25129929b7572704f28e3ae1ad (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A importância da fase de girino para a ranicultura reside no fato de que após a metamorfose existirão animais em condições compatíveis com os índices zootécnicos. Entretanto, a compreensão dos processos morfológicos e fisiológicos pelos quais os girinos passam durante o seu desenvolvimento e metamorfose ainda é limitada. Neste contexto, este estudo tem como objetivo descrever as mudanças morfológicas do sistema digestório e o perfil das enzimas digestivas dos girinos da rã touro (Rana catesbeiana), durante seu desenvolvimento e metamorfose. Os girinos utilizados foram cedidos pelo Setor de Ranicultura do CAUNESP. As análises biométricas, anatômicas e histológicas foram realizadas no Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal e no Laboratório de Microscopia Eletrônica e as análises das enzimas digestivas realizadas no Departamento de Tecnologia da FCAV-UNESP. Para a biometria, anatomia e histologia, os girinos foram separados em estágios de desenvolvimento, anestesiados em água com gelo a 4ºC e tiveram seu comprimento total, parcial e peso registrados. Posteriormente, o tubo digestivo foi dissecado e avaliou-se o comprimento, a largura e o peso do intestino, fígado e pâncreas. Para a microscopia de luz, o tubo digestivo foi fragmentado em intestino anterior, intestino médio e posterior, fígado e pâncreas, que foram fixados em Bouin e processados de acordo com a metodologia do Laboratório de Histologia do Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal. Para microscopia eletrônica de varredura, a região oral foi dissecada, fixada em solução de Karnovsky e pós-fixada em tetróxido de ósmio, e as amostras processadas de acordo com o Laboratório de Microscopia Eletrônica. Para a análise das enzimas digestivas, os girinos foram separados em estágios de desenvolvimento e permaneceram em jejum por 24 horas... The importance of the tadpole phase to the raniculture is due to the fact that from this phase animals that are in agreement with zootechnical indexes must be obtained, after metamorphosis. However, few studies aim to understand the physiological and morphological processes that tadpoles undergo during their development and metamorphosis. In such context, the present study describes the morphological changes and the enzymatic profile of the bullfrog tadpole's (Rana catesbeiana) digestive system, during development and metamorphosis. The animals used in the tests were made available by the CAUNESP's Frog Farming Sector. Biometrical, anatomical and histological analyses were performed at the Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal and Laboratório de Microscopia Eletrônica. The analysis of the digestive enzymes were performed at the Laboratório de Tecnologia of FCAV-UNESP. For biometry, anatomy and histology, tadpoles were separated according developmental stages and anesthetized in water with ice at 4ºC. Their total and partial lengths, as well as their weight were recorded. Afterwards, the digestive tubes were removed and the length, width and weight of the intestine, liver and pancreas were registered. For light microscopy, the digestive tube was fragmented into stomach, esophagus, medium and posterior intestines, liver and pancreas. Fragments were fixated in Boiun's solution according to the methodology of the Histology Laboratory of the Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal. For scanning electronic microscopy, oral region was dissected and fixated in Karnovsky's solution. A second fixation was performed in osmium tetroxide. All samples were processed according to the Laboratorio de Microscopia Eletrônica. For the analysis of digestive enzymes, tadpoles were separated according their developmental stages and unfed for 24 hours... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-09-22Bitstream added on 2014-06-13T20:48:50Z : No. of bitstreams: 1 takahashi_elh_me_jabo.pdf: 1262645 bytes, checksum: 7dd065f23c1f6fb1a08fe2fc4ebc4fb4 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O ciclo reprodutivo da Tabarana, Salminus hilarii (VALENCIENNES, 1849) foi estudado no rio Sorocaba, estado de São Paulo. Entre abril de 2004 até março de 2006 foram realizadas coletas mensais totalizando 109 exemplares coletados. O período reprodutivo ocorreu entre os meses de novembro e dezembro e foi determinado pela analise do índice Gonadossomático (IGS) e pela determinação dos estádios gonadais em cada bimestre. A desova do tipo total foi constatada pela da análise microscópica dos ovários e distribuição da freqüência do diâmetro dos ovócitos de ovários maduros. A fecundidade foi estimada em 54.157 (DP ± 19.991) ovócitos com os diâmetros não alcançando não mais que 1428 m. Nos ovários foram observados seis tipos de ovócitos: Cromatina-nucléolo, Perinucleolar, Alvéolo-cortical, Vitelogênico, Maduro e Atrésico. Uma escala de maturidade foi construída baseando-se em observações morfológicas tanto macroscópicas quanto microscópicas e também pelo IGS em quatro estádios distintos: Repouso, Maturação, Maduro e Desovado. Nos testículos foram observados cinco tipos de células: Espermatogônia primária, Espermatogônia secundária, Espermatócito, Espermátide e Espermatozóide. A partir de observações macroscópicas e microscópicas foram identificados testículos em estádio de Maturação, Maduro e Esgotado. Tabarana´s reproductive cycle, Salminus hilarii (VALENCIENNES, 1849) was studied in Sorocaba River, São Paulo state, Brazil. Between april 2004 until march 2006 collections were carried out monthly and 109 specimens were captured. Spawning period occured between november and dezember and was given by gonadossomatic index (GSI) analysis and through determination of the gonadal stages in each two months. Total spawning was noticied by microscopic analysis of the ovaries and oocyte distribution by size-diameter class from mature ovaries. Fecundity was valued in 54.157 (SD ± 19.991) oocytes, with largest diameter reaching no more than 1428 m. Six types of oocytes were observed in ovaries: Choromatin-nucleolus, Perinucleolar, Alveolus-cortical, Vitellogenic, Ripe and Atresic. A maturity scale has been made based in morphological observations as macroscopic as microscopic an either thorugh GSI in four distinct phases: Recovering, Mature, Ripe and Spawned. In the testis were observed five kinds of cells: primary and secondary spermatogonias, spermatocytes, spermatides and spermatozoa. Mature, Ripe and Empty stages were identificated by macroscoy and microscopy analysis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-04-03Bitstream added on 2014-06-13T19:19:25Z : No. of bitstreams: 1 mataqueiro_mi_dr_jabo.pdf: 565768 bytes, checksum: 9c312d8045e79c1a6f25b2c153b020c0 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Universidade Estadual Paulista (UNESP) O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade do triclorfom em curto prazo no pacu (Piaractus mesopotamicus), determinando a atividade da colinesterase no plasma e cérebro dos peixes, além de determinar a quantidade residual de triclorfom no plasma e na água através de cromatografia gasosa. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 4 concentrações (tratamentos) e 3 repetições (caixas) por tratamento, com 10 peixes por caixa. As concentrações de triclorfom usadas foram: 0,0; 0,025; 0,05 e 0,1 mg/L. Os efeitos subagudos do triclorfom nos peixes foram avaliados 1, 2, 7 e 15 dias após ter adicionado o triclorfom às caixas com o fluxo de água interrompido por 24 horas, mantendo a oxigenação. A atividade da colinesterase no plasma e no cérebro foi inibida pelo triclorfom, especialmente nas concentrações 0,05 e 0,1 mg/L, no 1º e 2º dias após exposição dos peixes ao praguicida, mas esse efeito desapareceu a partir do 7º dia. Para a análise cromatográfica, o éster correspondente da derivação do triclorfom apresentou limite de detecção de 3,0 g/L. O lindane foi usado como padrão interno na concentração de 50 pg/ L. O tempo de retenção do triclorfom foi de 2,12 minutos e do padrão interno 5,56. Ótima linearidade foi obtida na faixa de 2 a 100 pg/ L. Não foi detectado resíduo de triclorfom nas amostras de plasma durante todo o período experimental, mas somente traços em algumas amostras da maior concentração (0,1mg/l), sendo o valor encontrado menor que o limite de detecção. The aim of this research was to evaluate the toxicity in a short time of the trichlorfon to pacu (Piaractus mesopotamicus) determining cholinesterase activity in plasma and in fish brain, and the residual amount of trichlorfon in fish plasma and water by gas chromatography. Experimental design was all fortuitous with 4 concentrations (treatment) and 3 repetitions (boxes) per treatment, with 10 fish each box. Used concentrations were 0.0; 0.025; 0.05 and 0.1 mg/L. Subacute effects of trichlorfon in fish were estimated 1, 2, 7 and 15 days after added trichlorfon to boxes with interrupted water flow by 24 hours after applications, keeping the aeration rate. Cholinesterase activity in plasma and brain was inhibited by trichlorfon, specially in concentrations 0.05 and 0.1 mg/L in the first and second days after exposition of fish to the pesticides, but this effect desappeared in the 7th day. To the chromatography analysis, esther corresponds from trichlorfon derivation, that showed detection limit of 3 g/L. Lindane was used as intern standard in concentration of 50 pg/ L, Retention time of trichlorfon was 2.12 minutes and for the intern standard was 5.56. Great linearity was obtained between 2 to 100 pg/ L. It was not detected trichlorfon residues in plasma samples of higher concentration (0.1 mg/L) and the value obtained was lesser than detection limit.

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-04-12. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:23Z : No. of bitstreams: 1 000178132.pdf: 1208797 bytes, checksum: 13414d12b43a559456935af3c18cd62e (MD5) A literatura foi revisada em relação à célula de Sertoli de peixes teleósteos, levando em conta seus aspectos morfofuncionais, sua importância, a terminologia e a interação entre ela e outras células do testículo. No universo de 76 trabalhos pesquisados, foi notado que as células de Sertoli têm função de fagocitose, nutrição das células germinativas, esteroidogênese, participa na formação do cisto de células germinativas, e na formação da barreira hemotesticular. Além dessas funções, nos peixes teleósteos com fertilização interna a célula de Sertoli participa na formação dos dúctulos eferentes e das estruturas especializadas para levar grupos de espermatozóides para dentro do oviduto. A despeito da diferença entre a morfologia e a localização das células de Sertoli de mamíferos, a célula encontrada nos teleósteos foi considerada homóloga à mesma, devido à similaridade de funções The literature was reviewed around the Sertoli cells in teleost fish, regarding their morphological and functional aspects, importance, terminology and interaction with other testis cells. In the 76 reports searched, it was observed that the Sertoli cells have these functions: phagocytose, nutrition of germinative cells, take part in development of germinative cists, development of the hemotesticular barrier and efferent ducts, and formation of the specialized structures to carry the cluster of sperm in the female oviduct of teleost species that have internal fertilization. In spite of the morphological differences and localization of the Sertoli cells of mammals, the cell found in the teleost was considered homologs to this one, because its similarity in functions