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Introduction. Acquired resistance against the antibiotics that are active against Ureaplasma species has been described. Hypothesis/Gap Statement. Diagnostics combined with antimicrobial sensitivity testing are required for therapeutic guidance. Aim. To report the prevalence of antimicrobial resistance among Cuban Ureaplasma isolates and the related molecular mechanisms of resistance. Methodology. Traditional broth microdilution assays were used for antimicrobial sensitivity testing in 262 clinical Ureaplasma species isolates from Cuban patients between 2013 and 2018, and a subset of samples were investigated in parallel with the commercial MYCO WELL D-ONE rapid culture diagnostic assay. The underlying molecular mechanisms for resistance were determined by PCR and sequencing for all resistant isolates. Results. Among the tested isolates, the tetracycline and erythromycin resistance rates were 1.9 and 1.5%, respectively, while fluoroquinolone resistance was not found. The tet(M) gene was found in all tetracycline-resistant isolates, but also in two tetracycline-susceptible Ureaplasma clinical isolates. We were unable to determine the underlying mechanism of erythromycin resistance. The MYCO WELL D-ONE kit overestimated tetracycline and erythromycin resistance in Ureaplasma spp. isolates. Conclusions. Although low levels of antibiotic resistance were detected in Cuban patients over a 5-year period, continued surveillance of the antibiotic susceptibility of Ureaplasma is necessary to monitor possible changes in resistance patterns.

Bacterial endophthalmitis is the most severe form of vision-threatening ocular infection. Mycoplasma pneumoniae is a primary respiratory pathogen that has been associated with several extrapulmonary manifestation, including ocular infection. In this work, we presented the microbiology diagnosis of an endophalmitis by M. pneumoniae using a novel A.R.I. WELL D-ONE® (CPM Scientifica, Italy) commercial micromethod in a Cuban pediatric patient. After positive M. pneumoniae confirmation, treatment with levofloxacin was initiated and successfully eliminated the ocular infection.

El diagnóstico de las infecciones por Mycoplasmagenitalium mediante métodos bacteriológicos tradicionales resulta laborioso y poco práctico. Es por ello que los métodos moleculares basados en la amplificación del ADN se utilizan con fines diagnósticos de infecciones causadas por este microorganismo. En Cuba no existen informes de la implementación y utilización de los métodos de reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR) para la detección y cuantificación de este patógeno. En este trabajo se implementó una qPCR para la detección y cuantificación de M. genitalium mediante la amplificación de un fragmento del gen mgpB que codifica para la proteína adhesina celular, mediante la tecnología LightCycler®(Roche), utilizando los métodos de qPCRSYBR Green I y TaqMan. Se evaluó la especificidad y sensibilidad de dicha PCR utilizando ADN de M. genitalium y de otros micoplasmas de origen humanos. Se logró la implementación de ambos métodos de qPCR con un límite de detección de 3,6 geq/µL, siendo la plataforma TaqManla que mostró mejor eficiencia. Ambos métodos mostraron una alta especificidad para la detección de M. genitalium y no se detectaron reacciones cruzadas con otros micoplasmas de origen humano. Se implementó por primera vez en Cuba una qPCR para la detección de M. genitalium. El método TaqMan mostró mejor desempeño parala futura aplicación de esta metodología en muestras clínicas. El presente trabajo permitirá realizar estudios de caracterización genética y antigénica de las cepas circulantes en Cuba, útiles para conformar un inmunógenovacunal.

El diagnóstico de las infecciones por Mycoplasma genitalium mediante métodos bacteriológicos tradicionales resulta laborioso y poco práctico. Es por ello que los métodos moleculares basados en la amplificación del ADN se utilizan con fines diagnósticos de las infecciones causadas por este microorganismo. En Cuba se han realizado pocos estudios sobre la presencia de M. genitalium en el tracto urogenital. El objetivo de la presente investigación fue detectar M. genitalium en individuos cubanos sexualmente activos mediante la implementación de métodos de PCR simple. Se implementaron dos PCR simples para la detección de fragmentos de 427 pb del gen ARN ribosomal 16S y 281 pb del gen de la adhesina celular MgPa de M. genitalium, que se evaluaron en muestras de exudado endocervical provenientes de 300 mujeres con sintomatología urogenital y muestras de orina de 49 hombres asintomáticos sexualmente activos. Se logró un límite de detección de la PCR del ARNr 16S de aproximadamente 5 copias de genoma por reacción, mientras que para la PCR MgPa se logró la amplificación de solo 50 copias de genoma por reacción. El 3% (10/300) de los exudados endocervicales y el 24,5% (12/49) de las muestras de orina de hombres asintomáticos resultaron positivas mediante ambas PCR. El mayor porcentaje de muestras positivas correspondió a las muestras de orina provenientes de hombres asintomáticos, que resultó superior a lo esperado. El presente trabajo permitirá realizar estudios futuros de caracterización genética y antigénica de las cepas de Mycoplasma genitalium circulantes en Cuba, útiles para conformar un inmunógeno vacunal.