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Este proceso inicial se incrementa ligeramente cuando el suscrito es nombrado Decano de Posgrado pero dado que este era incipiente, el desarrollo de la Investigación Básica como tal, no fue significativa. Afortunadamente en 1999, sucede el hecho más trascendental de esta institución al convertirse oficialmente en Universidad, la cual, después de ser dirigida como Rectora por la Dra. María Gabriela Stein esposa del preclaro fundador Dr. Andrés Vesalio Guzmán Calleja, correspondió al suscrito asumir dicha Rectoría; y ahora sí, aquí nació un sueño: convertir a la UCIMED en la primera universidad privada en contar con un Departamento de Investigación de prestigio.

Costa Rica es un país privilegiado en cuanto a su abundante flora y fauna la cual alberga en sus ricos nichos ecológicos una exuberante naturaleza de la que nos preciamos a nivel internacional. A pesar de ser un país pequeño en donde realmente en pocas horas, podemos ir de costa a costa y de frontera a frontera, la cantidad de especies de plantas y de animales que poseemos constituyen un verdadero ejemplo de naturaleza viviente. De esto podemos dar fe quienes por razón de nuestros estudios, que luego resumiremos, hemos tenido el privilegio de observar.

Cuando en el 2000 la universidad me hizo el honor de nombrarme Rector de esta institución, me hice el propósito que luego compartí con mi compañera la Dra. Idalia Valerio, de establecer un proceso de investigación básica importante dentro de la universidad pensando, especialmente en un principio fundamental de que una universidad sin investigación no es una universidad conceptualmente hablando. Aunque la formación de profesionales de calidad siempre ha sido la meta desde su formación como Escuela de Ciencias Médicas, le faltaba la investigación, sello indiscutible de calidad académica. Pues bien, ahí comenzamos la Dra. Valerio y yo, delantales a la cintura, manos en lavatorio a preparar tubos, placas de Petri, láminas, cubreobjetos, etc., para empezar a producir algún tipo de investigación en la UCIMED. En esos momentos, debo confesarlo, fue bastante duro el inicio puesto que inclusive la Junta Administrativa de la época en que se inició este proceso, obviamente no se creía mucho en el modelo de hacer investigación básica en la UCIMED; inclusive, por qué no decirlo, hasta se sugirió que lo que estábamos intentando tenía algo de diversión. A pesar de todo comenzamos aproximadamente antes del 2000 en conjunto con la Universidad de Costa Rica y específicamente con el Dr. Gustavo Gutiérrez que tenía un proyecto relacionado con un estudio genético en monos de este país. Aunque desarrollaba ese proyecto ya había empezado en la UCR, cuando asumí la Rectoría lo traspasamos en parte a esta universidad, para el cual inclusive la administración le dio el apoyo económico para seguir adelante en el mismo.

La leishmaniosis es una enfermedad muy importante para el ser humano pero su tratamiento es bastante difícil. Por esta razón muchos investigadores han venido buscando plantas que contengan componentes químicos activos contra esta parasitosis. En Costa Rica no se tienen estudios al respecto y por eso el objetivo de este estudio fue la búsqueda de componentes activos contra Leishmania sp. en plantas de Costa Rica; 67 especies de la Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB) fueron seleccionadas para realizar este trabajo. Para ello se prepararon extractos crudos hidro-alcohólicos de material fresco o desecado de raíz, tallo, hojas maduras o tiernas, flores y frutos inmaduros o maduros. Usando pruebas presuntivas y luego específicas, se analizó el efecto de tales extractos sobre una cepa de Leishmania (OCR). Se consideraron plantas promisorias solamente aquellas en que al menos una de sus partes presentara un CI50

Antecedentes: la toxoplasmosis es una enfermedad que aunque casi siempre cursa en una modalidad de tipo crónica usualmente asintomática, eventualmente puede causar problemas en el ser humano como aborto y lesiones oculares. Por tal razón, conocer las posibles fuentes de contaminación al ser humano es importante y en este estudio se tiene como objetivos revisar la literatura en cuanto a la trasmisión por productos cárnicos y determinar la positividad por Toxoplasma gondii en dos tipos de productos cárnicos para consumo humano, comparando los datos actuales con los obtenidos hace más de 10 años. Métodos: animales de laboratorio fueron alimentados con carne molida o chorizo obtenido de los diferentes surtidores de estos productos y usando técnicas inmunológicas se determinó si los animales se contaminaron con el parásito al ingerir dichos productos. Resultados: en el 4 % de los animales alimentados con chorizo o con carne molida se presentaron anticuerpos contra T. gondii, porcentaje considerablemente más bajo que el encontrado 12 años antes bajo la misma metodología. Conclusión: después de hacer un análisis histórico del tema se concluye que aparentemente ha habido una disminución en la carne infectada con T. gondii.Background: Toxoplasmosis is usually an asymptomatic chronic disease which can eventually cause problems for humans, such as abortion and eye damage. Therefore, it is important to know about possible infection sources for humans. The objective of this study is to review the literature related to transmission through meat products and to compare the infection level for Toxoplasma gondii in meat for human consumption to that occurred 10 years ago. Methods: laboratory animals were fed with ground meat or chorizo (a type of sausage) obtained from various suppliers of this product and immunological techniques were used to determine whether the animals’ contamination with the parasite came from eating such products. Results and conclusions: In 4% of the animals fed with ground meat or sausage, there were traces of antibodies against T. gondii. This result is significantly lower than the one reported twelve years ago using the same method. After a historical analysis of the subject, the conclusion is that there has been a reduction in meat infected with T. gondii.

La prevalencia de infecciones por Toxoplasma gondii en el ser humano es de 5-90% según la zona geográfica; en Costa Rica por ejemplo, la seroprevalencia es de un 58%, por lo que es importante comprender algunos procesos inmunológicos, propios en estas afectaciones parasitarias. Con el objeto de determinar si el Trypanosoma musculi ejerce procesos de inmunosupresión sobre Toxoplasma gondii se realizó un experimento en el que se inocularon ratones Swiss con T. musculi cuatro, cinco, seis y siete días previos a la infección con T. gondii, ocurriendo la inmunosupresión cuando la inoculación con T. musculi fue hecha cuatro días antes. Además, la cantidad de tripomastigotos inoculados no influyó en el proceso. Se probaron tres cepas de T. gondii aisladas de las heces de un gato casero (TFC), de un Leopardus pardalis (TLP), de un Leopardus wiedii y de la carne de un Bos taurus (TBT). La cepa TLP resultó ser muy patógena, matando a los animales en un tiempo corto, independientemente de la inoculación con T. musculi; para las otras cepas se mantuvo el patrón de inmunosupresión en los ratones. Se reporta entonces un modelo experimental de inmunosupresión, aspecto muy en boga en este momento, por su relación con enfermedades que inducen esta condición en el ser humano, especialmente a enfermedades como el cáncer y el SIDA. Este modelo es más fácil de aplicar experimentalmente que el correspondiente con T. lewisi previamente descrito, el cual usa ratas blancas de más difícil manejo que los ratones usados en este estudio.

Treatment with the usual antimalarial drugs, have induced parasite resistance, reinforcing the need to finding natural antimalarial components that would be found on plants from the forest. Therefore, we decided to look for these components in Costa Rican plants from a protected forest area. Fresh and dry extracts of roots, bark, leaves, flowers and fruits of 25 plants from a biological reserve in Costa Rica, Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB), were studied in vitro for the presence of substances with antimalarial activity. By studying the inhibition of P. berghei schizogony, we assessed the antimalarial activity of several plant extracts: Aphelandra aurantiaca, A. tridentata (Acanthaceae); Xanthosoma undipes (Araceae); Iriartea deltoidea (Arecaceae); Neurolaena lobata (Asteraceae); Senna papillosa, Pterocarpus hayessi, Lonchocarpus pentaphyllus (Fabaceae); Nectandra membranacea, Persea povedae, Cinamomum chavarrianum (Lauraceae); Hampea appendiculata (Malvaceae); Ruagea glabra, Guarea glabra (Meliaceae); Psidium guajava (Myrtaceae); Bocconia frutescens (Papaveraceae); Piper friedrichsthalii (Piperaceae); Clematis dioica (Ranunculaceae); Prunus annularis (Rosaceae); Siparuna thecaphora (Siparunaceae); Solanum arboreum, Witheringia solanácea (Solanaceae); Ticodendrum incognitum (Ticodendraceae); Heliocarpus appendiculatus (Tiliaceae) and Myriocarpa longipes (Urticaceae). We used different parts of the plants as well as fresh and dried extracts for testing IC50. The solid content of the extracts ranged from 1-71.9μg/mL. The fresh extracts showed stronger activity than the dry ones. Since the plants showing the strongest antimalarial activity are very common in Central America, and some similar genera of these plants have shown positives results in South America, we considered important to present these findings for discussion. On the other hand, this is the first systematic study of this kind ever realized in a circumscribed and protected area of Costa Rica. Rev. Biol. Trop. 60 (2): 881-891. Epub 2012 June 01.

Se realizó una evaluación in vivo de la actividad antimalárica de las hojas, flores, frutos, corteza y raíz de 25 plantas de la Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB), situada en San Ramón, Alajuela, Costa Rica. Las plantas estudiadas fueron Aphelandra aurantiaca (Scheidw.) Lindl., Aphelandra tridentata Hemsl. (Acanthaceae), Xanthosoma undipes (K. Koch & C.D. Bouché) K. Koch. (Araceae), Iriartea deltoidea Ruiz & Pav. (Arecaceae), Neurolaena lobata (L.) Cass. (Asteraceae), Lonchocarpus pentaphyllus (Poir.) Kunth ex DC., Pterocarpus hayesii Hemsl., Senna papillosa (Britton & Rose) H.S. Irwin & Barneby., Cinnamomum chavarrianum (Hammel) Kosterm. (Fabaceae), Nectandra membranacea (Sw.) Griseb., Persea povedae W.C. Burger. (Lauraceae), Hampea appendiculata (Donn. Sm.) Standl. (Malvaceae), Guarea glabra Vahl., Ruagea glabra Triana & Planch. (Meliaceae), Psidium guajava L. (Myrtaceae), Bocconia frutescens L. (Papaveraceae), Piper friedrichsthalii C. DC. (Piperaceae), Clematis dioica L. (Ranunculaceae), Prunus annularis Koehne. (Rosaceae), Siparuna thecaphora (Poepp. & Endl.) A. DC. (Siparunaceae), Solanum arboreum Dunal., Witheringia solanacea L'Hér. (Solanaceae), Ticodendron incognitum Gómez-Laur. & L.D. Gómez. (Ticodendraceae), Heliocarpus appendiculatus Turcz. (Tiliaceae) y Myriocarpa longipes Liebm. (Urticaceae). Los extractos alcohólicos frescos y secos, fueron evaluados por su actividad inhibitoria de la parasitemia causada por Plasmodium berghei en ratones Swiss. Al realizar las prueba de CI50 las plantas en que esa actividad fue muy relevante fueron (en mg kg-1 de peso): 12 para la corteza de B. frutescens, 18 para la raíz de H. appendiculata, 14 para la raíz de I. deltoidea, 4 para el fruto inmaduro de M. longipes, 21 para la raíz de N. membranacea, 19 para las hojas tiernas de P. povedae y 16 para el fruto inmaduro de S. tecaphora. Los extractos frescos presentaron una mayor actividad antimalárica que los sometidos a desecación. Este estudio es una contribución más al conocimiento del valor potencial farmacológico de la biodiversidad botánica costarricense.An evaluation of the antimalarial activity of the leaves, flowers, fruits, bark and roots of 25 plants from the Reserve Alberto Manuel Brenes Biological (REBAMB) was performed. The reserve is located in San Ramon, Alajuela, Costa Rica and the plants studied were Aphelandra aurantiaca (Scheidw.) Lindl., Aphelandra tridentata Hemsl. (Acanthaceae), Xanthosoma undipes (K. Koch & C.D. Bouché) K. Koch. (Araceae), Iriartea deltoidea Ruiz & Pav. (Arecaceae), Neurolaena lobata (L.) Cass. (Asteraceae), Lonchocarpus pentaphyllus (Poir.) Kunth ex DC., Pterocarpus hayesii Hemsl., Senna papillosa (Britton & Rose) H.S. Irwin & Barneby., Cinnamomum chavarrianum (Hammel) Kosterm. (Fabaceae), Nectandra membranacea (Sw.) Griseb., Persea povedae W.C. Burger. (Lauraceae), Hampea appendiculata (Donn. Sm.) Standl. (Malvaceae), Guarea glabra Vahl., Ruagea glabra Triana & Planch. (Meliaceae), Psidium guajava L. (Myrtaceae), Bocconia frutescens L. (Papaveraceae), Piper friedrichsthalii C. DC. (Piperaceae), Clematis dioica L. (Ranunculaceae), Prunus annularis Koehne. (Rosaceae), Siparuna thecaphora (Poepp. & Endl.) A. DC. (Siparunaceae), Solanum arboreum Dunal., Witheringia solanacea L'Hér. (Solanaceae), Ticodendron incognitum Gómez-Laur. & L.D. Gómez. (Ticodendraceae), Heliocarpus appendiculatus Turcz. (Tiliaceae) y Myriocarpa longipes Liebm. (Urticaceae). The fresh and dry alcoholic extracts were evaluated in Swiss mice for their inhibitory activity on multiplication of Plasmodium berghei. When making the test IC50, the only plants whose activity (mg kg-1 of body weight) was relevant were: 12 for bark in B. frutescens, 18 for root in H. appendiculata, 14 for root in I. deltoidea, 4 for unripe fruits in M. longipes, 21 for root in N. membranacea, 19 for young leaves in P. povedae and 16 for unripe fruits in S. tecaphora. The fresh extracts showed greater antimalarial activity than those previously dried. This study is a contribution to the knowledge of potential medicinal value of botanical biodiversity of Costa Rica.

La deforestación de bosques tropicales está amenazando la biodiversidad de las especies de primates y su estado de salud, dependiente de un lugar ecológicamente equilibrado. Con el fin de evaluar esta relación, se analizó la presencia de parásitos en los intestinos de esta especie. El estudio se realizó en la Estación Biológica La Suerte (EBLS), Limón, Costa Rica. El grupo de monos capuchinos cariblancos (Cebus capucinus) fue observado entre marzo y diciembre de 2006. Se recolectaron 75 muestras de heces a las que se les identificó las plantas ingeridas, y se procesaron en el laboratorio para evaluar la prevalencia de parásitos. Moraceae fue la familia de plantas más reportada. Strongyloides spp. y acantocéfalos fueron los más comunes. La distribución positiva de las mismas fue similar independientemente del sexo y la edad. Microsporidios se reportaron mayoritariamente en heces asociadas con la familia Piperaceae. Fue encontrada una baja existencia de éstos parásitos en muestras asociadas con Myrtaceae en cuyo género Psidium, se han reportado compuestos activos antiparasitarios. La aparición de parásitos fue relativamente mayor en la EBLS, comparado con muestras de otras regiones más secas de Costa Rica. Por lo tanto, esa expresión parasitaria puede deberse al hecho de ser la EBLS una selva lluviosa, además de estar rodeada por zonas con actividades antrópicas. Se sugiere incrementar las investigaciones de parasitología de campo en primates neotropicales con el fin de entender plenamente las relaciones parásitos-hospederos, para en un largo plazo poder comprender los ecosistemas donde conviven, y en consecuencia, preservar la diversidad biológica.Intestinal parasites in white-faced capuchin monkeys Cebus capucinus Primates: Cebidae) inhabiting a protected area in the Limón province of Northeastern Costa Rica. Deforestation of tropical forests is threatening monkey biodiversity and their health status, dependent of an ecologically undisturbed area. To asses this relationship, we analyzed parasite occurrence in their intestines. The study was conducted at the Estación Biológica La Suerte (EBLS), Limón, Costa Rica. The group of white-faced capuchin monkeys (Cebus capucinus) was observed between March and December of 2006. A total of 75 feces samples were obtained. Once a sample was collected, the eaten plant type was identified to family and species level, and feces were processed in the laboratory to determine parasite incidence. Results showed that Moraceae was the most represented family in the samples. Among parasites, Strongyloides spp. and Acanthocephala were the most common. Positive prevalence of parasites was found similar and independent of sex and age of capuchin individuals. Microsporids were mainly reported in feces associated with Piperaceae. A low presence of these parasites was found in samples associated with Myrtaceae, with possible anti-parasite active components. The occurrence of parasites was relatively high in EBLS, when compared to other regions in Costa Rica. The higher occurrence of parasites observed in capuchins at EBLS may be due to the fact that this rain forest is surrounded by areas affected by human activities. We suggest the promotion of research in neotropical primates parasitology, for a better comprehension of the parasite-host relationship, and in a long term, being able to understand the ecosystems where they coexist, and consequently, preserve the biodiversity of the whole region. Rev. Biol. Trop. 58 (4): 1335-1346. Epub 2010 December 01.

Parasites have been investigated for some New World primates; however, very little is known about ectoparasites and specifically fur mites. In this study, Alouatta palliata, Cebus capucinus, Saimiri oerstedii, and Ateles geoffroyi monkeys from different areas of Costa Rica were searched for fur mites. A total of 276 monkeys were evaluated, and 51 of them were positive for mites of the family Atopomelidae. Listrocarpus alouattae was identified on 22.3% of A. palliata; Listrocarpus capucinus on 12.8% of C. capucinus; and Listrocarpus costaricensis on 36.8% of S. oerstedii; No fur mites were found on A. geoffroyi. Sex was not considered a determinant of mite infestation, but prevalence was significantly higher in the Central Volcanic Mountain Range Conservation Area for L. alouattae (p=0.01) and in the Central Pacific Conservation Area for L. capucinus (p=0.002). These primate fur mites are highly host-specific. Differences in the geographical distribution may be due to monkey behavior and history, as well as to environmental conditions. Rev. Biol. Trop. 57 (1-2): 353-360. Epub 2009 June 30.Muy poco se conoce sobre los ectoparásitos, específicamente de los ácaros del pelo, de primates del Nuevo Mundo. En este estudio se buscaron ácaros del pelo en monos Alouatta palliata, Cebus capucinus, Saimiri oerstedii y Ateles geoffroyi provenientes de diferentes áreas de Costa Rica. Se evaluaron 276 monos en total y 51 de ellos se encontraron positivos por ácaros de la familia Atopomelidae. Se identificó Listrocarpus alouattae en el 22.3% de los A. palliata, Listrocarpus capucinus en el 12.8% de los C. capucinus y Listrocarpus costaricensis en el 36.8% de los S. oerstedii. El sexo no fue un determinante de la infestación por ácaros, pero la prevalencia de L. alouattae fue significativamente mayor en el Área de Conservación Cordillera Volcánica Central (p=0.01) y la de L. capucinus fue mayor en el Área de Conservación Pacífico Central (p=0.002). Estos ácaros del pelo de primates son altamente específicos en relación con su hospedero. Las diferencias en la distribución geográfica podrían deberse al comportamiento e historia de los monos, así como a las condiciones ambientales.

El efecto inmunosupresor de la infección de T. lewisi sobre la multiplicación de T. gondii fue comparado en macrófagos peritoneales (MP) y alveolares (MA) de rata. El número de parásitos (taquizoitos) intracelulares (TI) fue contado por microscopía de luz. Los macrófagos alveolares y peritoneales (MP) de animales con 4 días de infección con T. lewisi muestran un aumento significativo en la multiplicación de T. gondii. A diferencia de los MP (que muestran un aumento en la multiplicación de T. gondii al cuarto día de infección con T. lewisi disminuyendo hacia el séptimo día), los MA mantienen un aumento en la multiplicación del parásito desde el cuarto, aumentando hacia el séptimo día de infección. Esta diferencia se puede deber a la ruta de infección utilizada para los experimentos que afectan directamente los MP donde se observa un efecto mayor y más temprano en comparación con los MA aislados de los pulmones, compartimiento afectado cuando la infección se vuelve sistémica entre el cuarto y sexto día de infección. La inmunidad contra T. gondii es similar entre ambas células fagocíticas, pero el tiempo de infección y el compartimiento donde se encuentren las células hace la diferencia en el tiempo de respuesta contra un parásito dado, en nuestro caso T. gondii. No hubo evidencia de que los sobrenadantes de cultivos de macrófagos provenientes de ratas infectadas ni el lisado de tripanosomas indujeran el efecto inmunosupresor.The immunosuppressant effect of T. lewisi (Kinetoplastidae) infection on the multiplication of Toxoplasma gondii (Sarcocystidae) on alveolar and peritoneal macrophages of the white rat. The immunosuppressant effect of T. lewisi infection on the multiplication of T. gondii was compared in peritoneal (MP) and alveolar macrophages (MA) of white rat. Two animal groups were infected with T. lewisi and sacrificed after four days and seven days post infection. A group without infection was maintained as a control. The number of intracellular parasites (tachyzoites) (IT) was counted by light microscopy, calculating the rate infection rate per 100 total cells (TC) and per infected cells (IC) for each group of phagocyte cells. The relation quotient IT, TC or IC multiplied percent, provided a statistical ratio (RE) of the relative number of parasites in both cellular types for each time interval. MA as well as MP obtained after 4 days showed a significant increase in the multiplication of T. gondii with respect to the control. Unlike the MP (which had an increase in the multiplication of T. gondii the fourth day of infection with T. lewisi diminishing towards the seventh day), the MA had an increase in the multiplication of the parasite from the fourth to the seventh day. This difference can be related to the route of infection used for the experiments, that affect the MP directly with a greater effect in comparison with the MA of the lungs. Lung compartment will be affected later, when the infection becomes systemic between the fourth and sixth day of infection. The immunity against T. gondii is similar between both phagocytes, but the time of infection and the compartment where the cells are located, makes the difference in the response time against T. gondii. Supernatants from macrophage cultures or T. lewisi by rat did not induced any immunosuppression. Rev. Biol. Trop. 57 (1-2): 13-22. Epub 2009 June 30.

Extractos alcohólicos, hexánicos y diclorometánicos de 751 muestras de artrópodos fueron estudiados por la presencia de actividad antimalárica. En este trabajo se empleó un modelo murino usando el Plasmodium berghei, modelo que es biológicamente similar a la malaria humana. El estudio fue realizado determinando el efecto del extracto sobre el parásito por la inclusión o no del colorante azul de cresil brillante. Estimando como positivos aquellos extractos cuya actividad antimalárica se mostró en concentraciones no mayores de 50 mg, se encontró que los órdenes más promisorios fueron Lepidoptera (24.1%), Polydesmida (81.3%), Blattodea (25%) y Opiliones, entre otros. Las formas inmaduras de Lepidoptera fueron las más positivas, por lo que se analizaron las plantas hospederos de donde se alimentaban dichos organismos. Las familias de estas plantas eran Malvaceae, Acanthaceae, Rutaceae, Myrtaceae, Solanaceae, Fabaceae, Urticaceae, Anacardiaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae y Caprifoliaceae. Especies de casi todas estas familias han sido reportadas con actividad antimalárica. En el caso de los órdenes Polydesmida, Opiliones y Blattodea, cuyas formas adultas presentaron alguna actividad contra P. berghei, encontramos que todos esos grupos se alimentan también de plantas. En el caso de Opiliones sus especies son predadores de lepidópteros, coleópteros, hemípteros fitófagos y otros artrópodos, además de que producen sustancias de defensas tales como alcoholes, cetonas y quinonas, entre otros, todo lo cual podría explicar la actividad encontrada. Algunas especies del Orden Polydesmida, también secretan ciertas sustancias químicas, las cuales podrían tener un efecto antiparasitario. Así, a través de este trabajo en artrópodos hemos llegado a identificar fuentes vegetales potenciales para componentes antimaláricos.Natural concentration of antimalaric components in Tropical arthropods (in vitro). Alcohol, hexane and dichlorometane extracts of 751 samples of Costa Rican arthropods were studied for the presence of antimalaric components. With Plasmodium berghei we set an in vitro model in which the effect of the extract was determined by staining of the parasites with cresil brilliant blue. Active extracts at concentration of 50 mg or less, were considered positive. Promissory extracts were found in the orders Lepidoptera (24.1%), Coleoptera (32.8%), Hemiptera (38.5%) and Polydesmida (81.3%). Since most of the Lepidoptera samples were in the immature stages, the relation with the host plant was analyzed. Cannaceae, Flacourtiaceae, Crisobalanaceae, Lauraceae, Fagaceae, Ulmaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae and Caprifoliaceae were related with the Lepidoptera larvae, and an antimalaric effect has been reported in most of these families. In the orders Polydesmida, Opiliones and Blattodea, the extract from adults also had some important effect, probably because all of them fed on plants. Polydesmida and Opiliones have chemical substances that probably serve as defensive purposes; these chemicals could also have some antiparasitic effect. Therefore, the detection of antimalaric components in arthropod species led to the identification of plants with promissory antimalaric components. Rev. Biol. Trop. 56 (2): 473-485. Epub 2008 June 30.

Dos cepas de Trypanosoma cruzi, una originaria de Costa Rica (TCR-4) y otra de El Salvador (UES-1) fueron comparadas in vitro en cuanto a su infectividad y multiplicación en células miocárdicas de ratón blanco NGP, ratón C3H y rata Sprague Dowley con el fin de determinar la resistencia natural de las células de estos animales. Las células miocárdicas fueron cultivadas en cubreobjetos y posteriormente infectadas con tripomastigotos sanguíneos de la cepa respectiva en una relación de un parásito por célula miocárdica y posteriormente incubados a 37 ºC con 10 % de CO2 en atmósfera húmeda. Para determinar la capacidad infectante y multiplicación intracelular se analizaron muestras a las 24, 72, 96 y 120 h de infección, determinándose la curva de crecimiento y la tasa de multiplicación intracelular. Se encontró que las dos cepas fueron capaces de multiplicarse en las células miocárdicas de ratón C3H, muy poco en ratón NGP y prácticamente nada en rata, lo que sugiere una resistencia natural de las células de estos últimos dos animales. La cepa UES-1 tuvo una tasa de multiplicación e invasión mayor (p=0.001) sugiriendo por lo tanto una virulencia, al menos in vitro superior a la cepa TCR-4.In vitro growth kinetics of two Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) clones in myocardial cells from rodents of different susceptibility. Two Trypanosoma cruzi isolates, TCR-4 from Costa Rica and UES-1 from El Salvador, were studied in vitro to compare their infectivity or resistance and intracellular replication in myocardial cells in three strains of mice and rats: NGP white mice, C3 H mice and Sprague Dowley rats. Myocardial cells were cultured on coverslips at 37 º C in a humid 10 % CO2 atmosphere and then infected at a ratio of one tripomastigote per cell. Samples were studied after 24, 72, 96 and 120 h of infection to determine parasite infection capacity and intracellular multiplication. Both parasites had the highest infection capacity in C3 H mice, followed by NGP mice cells with a very low infection rate. Lastly, almost no Trypanosoma cruzi multiplication was observed in Sprague Dowley rats, suggesting a strong natural resistance in this animal to both strains of the parasite. The UES-1 isolate presented higher multiplication and greater invasion than the TCR-4 strain, showing greater virulence of UES-1 in heart cells, at least in vitro. Rev. Biol. Trop. 55 (1): 121-126. Epub 2007 March. 31.

Se estudiaron las heces de 102 monos de la especie Alouatta palliata (monos aulladores o congos) de las siguientes regiones de Costa Rica. Valle Central: San Ramón (Alajuela); Pacífico Central: Isla Chira y Parque Manuel Antonio (Puntarenas); Pacífico Norte: Palo Verde, Playa Potrero, Nicoya (Guanacaste) y Caribe: Cahuita (Limón). Los animales capturados fueron anestesiados con dardos conteniendo Telazol®. La mayoría defecaron espontáneamente o se les estimulaba a defecar. Las muestras se estudiaron en el laboratorio en forma directa en solución salina (0.85%) y una solución de yodo o teñidas con hematoxilina para identificar los parásitos correspondientes. El material fue cultivado en el medio de Dobell para determinar la presencia de amebas y flagelados. Se encontraron helmintos de los géneros Trypanoxyuris, Strongyloides y Controrchis y protozoarios de los géneros Endolimax, Entamoeba, Trichomonas y Giardia. Los porcentajes de infección por protozoarios oscilaron entre 16.7% y 80% y se encontraron helmintos en un 3.4% a un 80% de los animales de acuerdo con la zona estudiada. No se encontraron diferencias importantes de parasitosis relacionadas con el sexo pero si existió mayor infección en los animales más jóvenes. Se establece la relación entre los índices de infección y algunos parámetros tales como las áreas estudiadas, el peso de los animales y el contacto con el ser humano.Intestinal parasites in howler monkeys Alouatta palliata (Primates: Cebidae) of Costa Rica. Fecal samples of 102 howler monkeys (Alouatta palliata) from several sites of Costa Rica were studied for intestinal parasites. The zones studied were: Central Valley (San Ramón, Alajuela), Central Pacific (Chomes and Manuel Antonio National Park, Puntarenas), North Pacific (Palo Verde Park and Playa Potrero, Guanacaste), Chira Island in the Nicoya Gulf and Caribean area (Cahuita, Limón). Animals were anesthetized with dards containing Telazol in order to collect the fecal material; some monkeys defecated spontaneously and others by direct stimulation. Samples were studied in saline solution (0.85%) and a Iodine solution, or stained with Haematoxylin. The material was also cultured in Dobell culture medium to determine the presence of amoeba and flagellates. Strongyloides, Controrchis, Trypanoxyuris genera were found in 3.4% of the samples. In addition 16.7% to 80% of the animals showed protozoa infection with Endolimax, Entamoeba, Trichomonas and Giardia. It is discussed the relationships of parasite infection with environmental conditions, animal population and human presence, specially in the monkey conservation programs point of view. Rev. Biol. Trop. 53(3-4): 437-445. Epub 2005 Oct 3.

La presencia de Cyclospora sp., Cryptosporidium sp., microsporidios y los niveles de coliformes fecales fueron determinados en lechuga, apio, cilantro, fresas y moras adquiridas en ferias del Agricultor del Valle Central de Costa Rica, con el fin de establecer el riesgo de transmisión de estos microorganismos y otros patógenos a partir del consumo de productos crudos. Durante el Segundo semestre del 2001 y primero del 2002, 50 muestras de cada producto fueron evaluadas, 25 durante la estación seca y 25 durante la estación lluviosa y provenientes de cinco diferentes ferias del Agricultor. El recuento de coliformes fecales fue realizado de acuerdo a la técnica recomendada por Vanderzant & Splittstoesser. La determinación de parásitos fue hecha utilizando las tinciones de Ziehl Nielsen y Weber a partir de un sedimento obtenido por el lavado de los productos mencionados, usando agua peptonada estéril 0,1% y centrifugando a 900 G por 15 min. 100% de las muestras de vegetales presentaron coliformes fecales, y la mayor prevalencia fue obtenida durante la estación lluviosa. A pesar de que todos los vegetales presentaron coliformes fecales en altas concentraciones, la lechuga y cilantro presentaron diferencias estadísticamente significativas entre la estación lluviosa y la seca, siendo mayor durante la estación lluviosa. No se detectó coliformes fecales en fresas y moras probablemente debido a su bajo pH. Todos los productos evaluados presentaron, aunque sea una vez, Cyclospora sp., Cryptosporidium sp. y microsporidios, demostrando el riesgo que representan para la Salud Pública. Cryptosporidium sp. estuvo presente en todos los productos excepto fresas. Los microsporidios fueron aislados de todos los productos excepto moras y Cyclospora sp. únicamente fue aislado de lechuga durante la estación seca. Los resultados demuestran la importancia de introducir en el país las Buenas Prácticas Agrícolas, especialmente debido a la resistencia de Cyclospora sp. y Cryptosporidium sp. a agentes desinfectantes.Prevalence of Cyclospora sp., Cryptosporidium sp, microsporidia and fecal coliform determination in fresh fruit and vegetables consumed in Costa Rica. The presence of Cyclospora sp., Cryptosporidium sp. and microsporidia and the levels of fecal coliforms were determined in lettuce, parsley, cilantro, strawberries and blackberries acquired in local agricultural markets of the Central Valley of Costa Rica, in order to establish the possible transmission risk of these microorganisms and other pathogens from the consumption of these raw products. During the second semester of 2001 and the first of 2002, 50 different samples of each product, 25 taken in the dry season and 25 in the rainy season and coming from five different local agricultural markets were evaluated. The fecal coliforms count was done according to the technique recommended by Vanderzant & Splittstoesser. The parasite determination was done using Zielh Nielsen and Weber staining techniques from a sediment obtained through the rinse of the mentioned products, using sterile peptonated water 0,1% and centrifuging at 900 G for 15 min. One hundred per cent of vegetable samples had fecal coliforms and the greatest prevalence was obtained during the rainy season. Although all vegetables presented fecal coliforms in high concentrations, lettuce and cilantro presented statistical difference between rainy and dry season, being greater during the rainy season. Fecal coliforms were not detected in strawberries and blackberries probablydue to its low pH. All products evaluated presented, at least once, Cryptosporidium sp., Cyclospora sp. and microsporidia, showing the risk they represent to Public Health. Cryptosporidium was present in all products but strawberries. Microsporidia was present in all products except blackberries and Cyclospora was only isolated from lettuce during the dry season. These results show the importance of introducing in the country Good Agricultural Practices, especially due to the resistance of Cryptosporidium and Cyclospora to disinfecting agents.

En este estudio se presenta un modelo in vitro de cultivo de fibroblastos de piel de hámster, ratón y rata hecho con el propósito de determinar diferencias en cuanto a la susceptibilidad a la infección por dos especies del género Leishmania (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). Se realizó además un estudio ultraestructural por microscopía electrónica de transmisión con el fin de establecer si las formas intracelulares observadas correspondían a multiplicación interna o a fagocitosis múltiple. Se estudió la multiplicación de los parásitos en los fibroblastos de las tres especies de roedores infectados tanto por Leishmania infantum como por L. mexicana (cepa OCR) y las diferencias entre las tres fueron estadísticamente significativas (p< 0.05). Se observó la reproducción del parásito en las células de hámster y ratón no así en las de rata, razón por la cual a este último animal se le consideró refractario a la infección. Con base en lo anterior se sugiere que la afinidad de un protozoario por las células de un individuo así como la resistencia al ambiente intracelular pueden depender de la constitución genética de este. El análisis ultraestructural demostró la reproducción de los amastigotos dentro de vacuolas parasitóforas por lo que se descarta que la presencia de estos se deba a su transformación luego de la entrada al fibroblasto. Se sugiere entonces que dichas células podrían servir para la supervivencia del parásito y la permanencia de este parásito en los animales infectadosInfection and multiplication of Leishmania infantum and L. mexicana inside of skin fibroblasts from hamsters, mice and rats was achieved. This process was demonstrated either by counting parasites inside the stained cells or by electronic microscopy studies. In addition multiplication rate differences in the cells from these rodent species were determined, for L. infantum as well as for L. mexicana. Parasite development in hamsters and mice fibroblasts was evident but there was not multiplication in rat cells showing that apparently they are refractory to Leishmania infection. These results suggest that the parasite affinity for each animal, as well as any intracellular environment resistance, could involve genetic factors in the parasite multiplication. On the other hand, presence of amastigote multiplication inside of parasitophorus vacuole, showed by electronic microscopy images, probes a true parasite transformation. Therefore it is suggested that fibroblasts could work as host cells for parasite survival and permanency in the infected animals

The infection and multiplication of Toxoplasma gondii and Trypanosoma cruzi were compared in primary cultures of white rat, mouse and hamster astrocytes. These cells were cultured on cover slides and infected with T. gondii tachyzoites or T. cruzi blood trypomastigotes. Results show that hamster astrocytes are more susceptible to the multiplication of both parasites than rat and mouse cells. There was no statistical difference between the T. gondii infection in rat and mouse astrocytes (pSe comparó la infección y multiplicación de Toxoplasma gondii y Trypanosoma cruzi en cultivos celulares primarios de astrocitos, a partir de células de cerebro de rata blanca, ratón y hámster. Las células fueron cultivadas en cubreobjetos e infectadas con taquizoitos de T. gondii o tripomastigotos sanguíneos de T. cruzi. Los resultados muestran que los astrocitos de hámster son más susceptibles que los de rata y ratón a la multiplicación de ambos parásitos. No se encontró diferencia estadísticamente significativa entre la infección por T. gondii en los astrocitos de ratón y rata (p

Treatment of toxoplasmosis usually causes secondary effects. It is important to find active substances extracted from natural organisms. In this work we studied some arthropod extracts that have effect against Toxoplasma multiplication inside mouse macrophages. After studying 382 extracts, 23 were selected on the basis of the activity and we found that 13 extracts from orders Polydesmida, Lepidoptera, Orthoptera and Hymenoptera exerted an important inhibition of Toxoplasma multiplication.

Justificación: La mayoría de las infecciones por microsporidios en el ser humano se han reportado en el tracto gastrointestinal, sin embargo, es posible hallarlos parasitando otros sitios anatómicos como el tracto genitourinario, en donde las patologías pueden variar desde uretritis hasta falla renal. Tradicionalmente esas infecciones se deben al género Encephalitozoon, parásito contra el cual el Albendazol ha demostrado ser un medicamento efectivo. Objetivo: Determinar la prevalencia de microsporidios en personas que son referidas al laboratorio para urocultivo, dados los antecedentes clínicos que presentan. Métodos: El procesamiento de las muestras incluyó su toma con técnica aséptica, su cultivo en los medios de Agar Sangre, MacConkey y Manitol - sal para su estudio por presencia de bacterias y/u hongos y la realización del antibiograma, según los parámetros establecidos por la CCSS para los urocultivos. Adicional a esto se centrifugó una alícuota de 9 ml separando 50 microlitos del sedimento urinario, al cual se le añadió igual volumen de KOH al 5%. Se hicieron frotis los cuales se fijaron con alcohol metílico una vez secos, y se tiñeron con la técnica trierómica de Weber, obviando el paso de la decoloración y la deshidratación. Resultados: Se encontró un 25% de orinas positivas por microsporidios. Los pacientes con edades entre 26 y 55 años presentaron mayor positividad. Conclusiones: El porcentaje de prevalencia encontrado (25%) y el hecho de que estas infecciones pueden llegar a causar severos daños al ser humano, hacen imperativa la necesidad de realizar diagnósticos más certeros de esta parasitosis, para lo cual proponemos la tinción de Weber con la modificación presentada en este trabajo para el diagnóstico de las infecciones por microsporidios en el tracto urinario.

Peritoneal macrophages from Wistar rats, inoculated and non-inoculated with 10(6) T. lewisi trypomastigotes, were cultured and infected with 10(6) T. gondii tachyzoites. Multiplication rates of this parasite were studied after 1, 24 and 48 h of infection but there were not significant differences between the number of parasites found inside of macrophages coming, either from T. lewisi infected or non infected rats. On the other hand, in vivo studies of Toxoplasma multiplication inside peritoneal macrophages, showed that there is an increase of parasite number in cells from T. lewisi infected rats, as compared with those macrophages from non infected rats. This effect was statistically significant and was more evident after four days of infection. Therefore, it has been demonstrated that in vivo, but not in vitro T. lewisi infections, causes an important decrease of the natural resistance to T. gondii of the white rats, which is manifested by the major invasion and multiplication of the parasite inside of peritoneal macrophages.

An in vivo model to study the antimalaric effect of plant extracts is described. White mice (25-30g body weight) are treated subcutaneously with 0.6ml of the diluted extract starting seven days before P. berghei infection; treatment continues until death or for 30 days. Simultaneously 0.2ml of the extract are applied per os starting three days before infection. In a test of the model, treated and non-treated animals differed in body weight, survival time, haematocrite, parasitemia development, and spleen or liver weight of recent dead or killed mice.

The role of nitric oxide in the immunosuppressive effect of Trypanosoma lewisi on the response to Toxoplasma gondii in WISTAR rats was evaluated. Two groups of rats were infected with T. gondii tachyzoites. One of these groups had been infected with T. lewisi four days earlier. A third group vas infected with T. lewisi only. The concentration of nitrates, as a reflection of nitric oxide production, was measured in serum during 10 days after infection with T. gondii. The results show that rats infected with T. lewisi only, do not at any time display altered levels of serum nitrate. T. lewisi infection does, however, partially inhibit the increase of serum nitrate levels caused by T. gondii 2 days after infection, a time point at which T. gondii multiplication in T. lewisi infected rats is exacerbated.

Los hallazgos más recientes en cuanto a la trasmisión del Toxoplasma gondii en Costa Rica nos indican que la ingestión de carne poco cocida, así como de algunos embutidos, en donde se ha encontrado el parásito en forma viable, son mecanismos de infección importante. Estos aspectos han hecho variar un poco la concepción anterior de que la ingestión de ooquistes del parásito era la principal, sino la única, vía de infección en nuestro país. Por ello se propone un nuevo ciclo de trasmisión para este parásito, comparándolo con el previamente establecido. Este nuevo patrón epidemiológico establece mayores posibilidades de infección con este parásito para los costarricenses.

La fauna helmintológica de ejemplares de Sigmodon hispidus capturados en Costa Rica, varió de acuerdo a la región de procedencia. En las ratas provenientes de una zona extensa del Pacífico seco, (Guanacaste) que ofrecía una dieta variada, se encontraron 6 especies de nemátodos y 2 especies de céstodos. En las provenientes de la Meseta Central, (Alajuela) que disfrutaban de una dieta única y abundante, se aislaron solamente dos especies: una de ellas, Angiostrongylus costaricensis, de gran importancia en salud humana, estuvo presente en el 42% de las ratas de esa región.The helminthological fauna of the cotton rat, Sigmodon hispidus in a tropical environment varies according to habitat and feeding behavior. Six species of nematodes (Longistriata adunca, Trichostrongylus sigmodontis, Strongyloides sigmodontis, Litomosoides carinii, Monodontus sp. and Protospirura sp.) and two species of cestodes (Hymenolepis diminuta and Raillietina sp.) were found in rats from extensive dry lands in Guanacaste where hot temperatures and heterogeneous diet are the rule. Only two species of nematodes (Longistriata adunca and Angiostrongylus costaricensis) were found in rats collected in a humid pineapple plantation in the Central Plateau (Alajuela) where mild temperatures predominate. A. costaricensis, a metastrongylid of medical importance, was found in 42% of them.

White rats were inoculated with 10(6) trypomastigotes of Trypanosoma lewisi, simultaneously or two days before and after inoculation with 10(5) oocysts of T. gondii. A greater number of cysts was found in the brain of the animals having concomitant inoculations, as compared with rats inoculated with either one of the two parasites. An apparent immunosuppressive effect is likely. Since both organisms can be found in rat, it is possible that infections with T. lewisi, could make this rodent another intermediate host for Toxoplasma infections.

Cotton rats (Sigmodon hispidus) were collected from Ojo de Agua, Alajuela (N=74) and Cañas, Guanacaste (N=29). Feces had 31 E. sigmodontis, nine E. tuskegeensis, eight E. roperi, three E. webbae and two Eimeria sp. This is the first report of these coccidian parasites for Costa Rica.

La presencia de Cyclospora sp., Cryptosporidium sp., microsporidios y los niveles de coliformes fecales fueron determinados en lechuga, apio, cilantro, fresas y moras adquiridas en ferias del Agricultor del Valle Central de Costa Rica, con el fin de establecer el riesgo de transmisión de estos microorganismos y otros patógenos a partir del consumo de productos crudos. Durante el Segundo semestre del 2001 y primero del 2002, 50 muestras de cada producto fueron evaluadas, 25 durante la estación seca y 25 durante la estación lluviosa y provenientes de cinco diferentes ferias del Agricultor. El recuento de coliformes fecales fue realizado de acuerdo a la técnica recomendada por Vanderzant & Splittstoesser. La determinación de parásitos fue hecha utilizando las tinciones de Ziehl Nielsen y Weber a partir de un sedimento obtenido por el lavado de los productos mencionados, usando agua peptonada estéril 0,1% y centrifugando a 900 G por 15 min. 100% de las muestras de vegetales presentaron coliformes fecales, y la mayor prevalencia fue obtenida durante la estación lluviosa. A pesar de que todos los vegetales presentaron coliformes fecales en altas concentraciones, la lechuga y cilantro presentaron diferencias estadísticamente significativas entre la estación lluviosa y la seca, siendo mayor durante la estación lluviosa. No se detectó coliformes fecales en fresas y moras probablemente debido a su bajo pH. Todos los productos evaluados presentaron, aunque sea una vez, Cyclospora sp., Cryptosporidium sp. y microsporidios, demostrando el riesgo que representan para la Salud Pública. Cryptosporidium sp. estuvo presente en todos los productos excepto fresas. Los microsporidios fueron aislados de todos los productos excepto moras y Cyclospora sp. únicamente fue aislado de lechuga durante la estación seca. Los resultados demuestran la importancia de introducir en el país las Buenas Prácticas Agrícolas, especialmente debido a la resistencia de Cyclospora sp. y Cryptosporidium sp. a agentes desinfectantes.