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Made available in DSpace on 2022-10-10T13:56:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2022-04-20. Added 1 bitstream(s) on 2022-10-10T15:39:50Z : No. of bitstreams: 1 S1519-69842024000100267.pdf: 1493101 bytes, checksum: b025ba89c4ce2e64fcfcd99f9b30b67d (MD5) As armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) foram relatadas pela primeira vez como uma estratégia microbicida para neutrófilos ativados. Por meio de uma resposta imunológica contra vários estímulos, os neutrófilos liberam seu DNA ligado a proteínas de grânulos, núcleo e citoplasma (por exemplo, elastase e mieloperoxidase). Até o momento, os NETs têm sido implicadas em danos aos tecidos durante processos inflamatórios intensos, principalmente quando sua liberação depende da geração de radicais de oxigênio. Os flavonóides são agentes antioxidantes e anti-inflamatórios, e destes, a quercetina é comumente encontrada em nossa dieta diária. Portanto, a quercetina pode exercer alguma atividade protetora contra o dano tecidual induzido por NETs. Em nossos ensaios in vitro, a quercetina reduziu a liberação das NETs, mieloperoxidase (MPO) e elastase a partir de neutrófilos estimulados com forbol 12-miristato 13-acetato (PMA). A atividade dessas enzimas também foi diminuída na presença de quercetina. A quercetina também reduziu o efeito citotóxico dos NETs sobre células alveolares (linha celular A549). Além disso, os ensaios in silico indicaram interações favoráveis entre a quercetina e as proteínas da NET (MPO e elastase). No geral, nossos resultados demonstram que a quercetina diminui os efeitos deletérios das NETs, reduzindo sua liberação à partir de neutrófilos ativados e diminuindo a atividade enzimática de MPO e elastase, possivelmente por meio de interação direta. Neutrophil extracellular traps (NETs) were first reported as a microbicidal strategy for activated neutrophils. Through an immunologic response against several stimuli, neutrophils release their DNA together with proteins from granules, nucleus, and cytoplasm (e.g., elastase and myeloperoxidase). To date, NETs have been implicated in tissue damage during intense inflammatory processes, mainly when their release is dependent on oxygen radical generation. Flavonoids are antioxidant and anti-inflammatory agents; of these, quercetin is commonly found in our daily diet. Therefore, quercetin could exert some protective activity against tissue damage induced by NETs. In our in vitro assays, quercetin reduced NETs, myeloperoxidase (MPO), and elastase release from neutrophils stimulated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). The activity of these enzymes also decreased in the presence of quercetin. Quercetin also reduced the cytotoxic effect of NETs on alveolar cells (A549 cell line). Further, in silico assays indicated favorable interactions between quercetin and NET proteins (MPO and elastase). Overall, our results demonstrate that quercetin decreases deleterious cellular effects of NETs by reducing their release from activated neutrophils, and diminishing the enzymatic activity of MPO and elastase, possibly through direct interaction. Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Ciências e Letras Universidade Estadual Paulista, Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Ciências e Letras Universidade Estadual Paulista (UNESP), Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas

Tese de mestrado em Bioquímica (Bioquímica Médica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2020 Submitted by Cristina Manessiez (camanessiez@fc.ul.pt) on 2021-05-10T14:18:06Z No. of bitstreams: 1 ulfc126211_tm_Lisa_Gaspar.pdf: 7901134 bytes, checksum: c821a45d8ee57975ead074db008b317d (MD5) Made available in DSpace on 2021-05-10T14:18:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc126211_tm_Lisa_Gaspar.pdf: 7901134 bytes, checksum: c821a45d8ee57975ead074db008b317d (MD5) Previous issue date: 2021

Submitted by Angela Maria de Oliveira (amolivei@uepg.br) on 2019-12-09T12:25:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Elisangela Gueiber Montes.pdf: 1017271 bytes, checksum: 788af3089fc03cbf084196c7c7e13d86 (MD5) Made available in DSpace on 2019-12-09T12:25:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Elisangela Gueiber Montes.pdf: 1017271 bytes, checksum: 788af3089fc03cbf084196c7c7e13d86 (MD5) Previous issue date: 2019-11-26 Introdução: A artrite reumatoide é uma doença inflamatória que se caracteriza por poliartrite periférica e simétrica. A taxa de prevalência encontrada na população mundial varia entre 0,5% a 1,0%, acometendo preferencialmente mulheres e com pico de incidência entre os 30 e 50 anos. O diagnóstico é feito pela associação de sintomas e sinais clínicos, achados laboratoriais e radiográficos. Na presença de manifestações extra-articulares, a morbidade e a gravidade da doença aumentam, podendo diminuir a expectativa de vida. A administração de glicocorticoides é utilizada no tratamento desta patologia, podendo resultar em efeitos secundários relacionados ao risco cardiovascular. Objetivo: Estabelecer a relação entre o risco cardiovascular, tratamento com glicocorticoides e mieloperoxidase em pacientes com artrite reumatoide. Material e Métodos: Estudo transversal unicêntrico, com 59 voluntários de ambos os gêneros, com artrite reumatoide, atendidos no Hospital Universitário Regional dos Campos Gerais. Os indivíduos foram divididos em dois grupos: com uso de glicocorticoides (n= 39) e sem glicocorticoides (n= 20). Os voluntários foram submetidos à avaliação clínica e exame físico. Foram colhidas amostra de sangue para realização de diferentes testes bioquímicos e imunológicos. Foram aplicados os questionários: inventário de depressão de Beck; SF-36 e Health Assessment Questionnaire, para avaliação de depressão, qualidade de vida e estado funcional dos indivíduos, respectivamente. A análise estatística foi realizada com os testes t de Student e teste não paramétrico de Mann-Whitney. Foi realizada regressão logística para avaliação do risco cardiovascular. O nível de significância foi de 5% (α=0,05). Os cálculos foram realizados com o pacote estatístico SPSS® (Statistical Package for the Social Science) versão 21.0. Resultados: Houve diferença significativa entre os grupos nos valores de glicemia (p= 0,012). Quando avaliamos o risco cardiovascular utilizando os preditores dose de glicocorticoides, tempo de uso de glicocorticoides, mieloperoxidase e proteína C reativa em conjunto, estes foram responsáveis por predizer o risco cardiovascular de forma significativa (p=0,015). Foi demonstrada também uma relação significativa com a variável preditora mieloperoxidase de forma isolada (p=0,037). Foi observada diferença significativa entre os grupos no domínio aspectos físicos do questionário SF-36 (p= 0,004). Discussão: A diferença nos valores de glicemia pode ser explicada pelo diferente percentual de portadores de diabetes entre os grupos. A mieloperoxidase pode ser uma importante preditora de risco cardiovascular entre os indivíduos com artrite reumatoide, sendo que mais estudos são necessários a fim de efetivar sua utilização como biomarcador para este fim. Entre os efeitos colaterais sistêmicos da corticoterapia, estão as alterações de aspectos físicos do indivíduo, demonstradas a partir da diferença entre os grupos estudados, podendo ser importante fator relacionado de forma indireta com o risco cardiovascular. Conclusão: A mieloperoxidase parece ser um importante preditor de risco cardiovascular em pacientes com artrite reumatoide. A corticoterapia pode afetar a qualidade de vida dos indivíduos, no que diz respeito aos aspectos físicos, podendo de forma indireta levar o indivíduo a maiores chances de doenças cardiovasculares. Introduction: Rheumatoid arthritis is an inflammatory disease characterized by symmetrical peripheral polyarthritis. The prevalence rate found in the world population ranges from 0.5% to 1.0%, affecting mostly women with a higher number of patients between 30 and 50 years of age. The diagnosis is made associating clinical symptoms and signs, laboratory and r-ray findings. In the presence of extra-articular manifestations, the morbidity and severity of the disease increases and may reduce life expectancy. Glucocorticoid administration is used to treat this condition and may result in side effects that are related to cardiovascular risk. Objective: Establish the relation between cardiovascular risk, glucocorticoid treatment and myeloperoxidase in rheumatoid arthritis patients. Material and Methods: A unicentric cross-sectional study including 59 male and female volunteers with rheumatoid arthritis receiving treatment at Regional University Hospital of Campos Gerais. Subjects were divided into two groups: using glucocorticoids (n = 39) and without glucocorticoids (n = 20). The volunteers underwent clinical evaluation and physical examination. Blood samples were taken for different biochemical and immunological tests. The following surveys were asked: Beck's depression inventory; SF-36 and Health Assessment Questionnaire, to assess depression, quality of life and functional status of individuals, respectively. Statistical analysis was performed using Student's t-test and non-parametric Mann-Whitney test. Logistic regression was performed to assess cardiovascular risk. The significance level was 5% (α = 0.05). Calculations were performed using the Statistical Package for the Social Science (SPSS®) version 21.0. Results: There has been a significant difference between groups in blood glucose values (p = 0.012). When we assessed cardiovascular risk using the predictors of glucocorticoid dose, time of glucocorticoid use, myeloperoxidase, and C-reactive protein together, these were responsible for significantly predicting cardiovascular risk (p = 0.015). A significant relation between the predictor variable myeloperoxidase alone was also demonstrated (p = 0.037). Significant difference was observed between the groups in the physical aspects domain of the SF-36 survey (p = 0.004). Discussion: Blood glucose values differences can be explained by the different percentage of diabetic patients in the groups. Myeloperoxidase may be an important predictor of cardiovascular risk among individuals with rheumatoid arthritis, and further studies are needed to effectively use it as a biomarker for this purpose. Among the systemic side effects of corticosteroid therapy there are alterations in the physical aspects of the individual, seeing in individuals of the studied groups, and may be an important factor indirectly related to cardiovascular risk. Conclusion: Myeloperoxidase seems to be an important predictor of cardiovascular risk in patients with rheumatoid arthritis. Corticosteroid therapy can affect life quality of individuals regarding physical aspects, and may indirectly lead individuals to greater chances of cardiovascular disease.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Devido a importância das feridas cutâneas diversos estudos têm buscado por compostos que evitem os altos custos, os longos períodos de fabricação e o aumento da resistência bacteriana. Desta forma o dióxido de cloro (ClO2) destaca-se pelo baixo custo, grande capacidade biocida e seu potencial de biocompatibilidade, além de apresentar baixa toxicidade quando comparado a outros antissépticos como a clorexidina. Este trabalho foi realizado em duas etapas distintas, onde no primeiro estudo determinou-se a concentração do dióxido de cloro a ser usado, por meio da técnica de implantação de esponja no subcutâneo de camundongos para avaliação da curva de dose-resposta, e no segundo momento testou-se esta concentração em modelo experimental de feridas cutâneas excisionais em camundongos. Em ambas as etapas foram dosados o colágeno solúvel, hemoglobina, atividade de mieloperoxidase (MPO) e N-acetil-β-D-glicosaminidase (NAG) e quantificados a deposição de colágeno total e dos tipos I e III. Baseado nos resultados apresentados na técnica de implantação de esponjas e levando em consideração a importância da angiogênese e da presença dos neutrófilos e macrófagos no processo de cicatrização, optou-se por testar a concentração de 150 ppm de dióxido de cloro no processo de cicatrização cutânea de camundongos. Nos tempos de 1, 3, 7 e 14 dias de tratamento, o fechamento em % de área da ferida do grupo tratado com dióxido de cloro a 150 ppm foi superior quando comparado com o grupo controle, com diferença estatística em todos os tempos analisados (p≤ 0,05* e p≤ 0,01**). A solução de dióxido de cloro estabilizado a 7% na concentração de 150 ppm foi efetivo em acelerar o fechamento de feridas excisionais cutâneas em camundongos, apresentando influência positiva nas etapas de reparação tecidual, desde a fase inflamatória da ferida até a fase proliferativa, com maior deposição de colágeno total e dos tipos I e III aos14 dias após a realização da ferida. Due to the importance of cutaneous wounds several studies have been looking for compounds that avoid the high costs, the long periods of manufacture and the increase of bacterial resistance. In this way the chlorine dioxide (ClO2) is distinguished by the low cost, great biocidal capacity and its biocompatibility potential, besides presenting low toxicity when compared to other antiseptics like chlorhexidine. This work was carried out in two distinct stages, in which the concentration of chlorine dioxide to be used was determined in the first study by the technique of sponge implantation in the subcutaneous of mice to evaluate the dose-response curve, and in the second This concentration was tested in an experimental model of excisional skin wounds in mice. Soluble collagen, hemoglobin, myeloperoxidase activity (MPO) and N-acetyl-β-D-glicosaminidase (NAG) were measured in both steps and quantified total collagen deposition and types I and III. Based on the results presented by the technique of sponge implantation and taking into account the importance of angiogenesis and the presence of neutrophils and macrophages in the healing process, it was decided to test the concentration of 150 ppm of chlorine dioxide in the cutaneous healing process of mice. At days 1, 3, 7 and 14 days of treatment, the closure in% wound area of the group treated with chlorine dioxide at 150 ppm was higher when compared to the control group, with statistical difference at all times analyzed (p≤0,05 * ep≤0,01 **). The 7% stabilized chlorine dioxide solution at 150 ppm concentration was effective in accelerating the closure of excisional cutaneous wounds in mice, presenting a positive influence on tissue repair stages, from the inflammatory phase of the wound to the proliferative phase, with higher deposition of total collagen and types I and III at 14 days after the wound. Dissertação (Mestrado)

O uso de agrotóxicos é crescente, e os compostos químicos presentes neles podem permanecer no solo, água e alimento, podendo contaminar os seres vivos. Tendo em vista que os répteis são os vertebrados menos estudados em ecotoxicologia, e que os lagartos da espécie Tropidurus torquatus se alimentam principalmente de insetos e partes de plantas, o presente estudo objetivou avaliar, através de análise histológica do fígado e rim e da atividade da enzima mieloperoxidase (MPO) no fígado, a interferência dos agrotóxicos nestes animais presentes em horta com pesticida e de horta orgânica, ambas em Juiz de Fora, Minas Gerais. Além disso, foi feita a quantificação dos metais chumbo (Pb) e cádmio (Cd) no fígado dos animais da horta com pesticidas. O presente estudo utilizou animais coletados em ambientes naturais e encontrou resultados semelhantes ao visto em trabalhos realizados em laboratório, mesmo sem ser possível controlar a dosagem e tempo de exposição aos pesticidas. Na histologia, o fígado dos animas da horta com agrotóxico se apresentou mais comprometido que o rim, sendo os machos mais afetados que as fêmeas. Nos animais adultos da horta com pesticida o fígado apresentou hepatócitos sem núcleo, com grandes vacúolos e fibrosados, além de inúmeros melanomacrófagos. Os jovens apresentaram as mesmas características, porém menos intensas. O rim dos adultos da horta com agrotóxico apresentou vesículas com coloração diferenciada nos túbulos contornados proximais. Animais da horta com uso de pesticidas apresentaram maior atividade de MPO, revelando inflamação no tecido. Através da espectrometria de absorção atômica em chama, não foi possível afirmar que os indivíduos da horta com agrotóxico possuíam acúmulo de cádmio (Cd) e chumbo (Pb) no fígado. Os agrotóxicos e o ambiente antropizado mostraram afetar, principalmente, o tecido hepático de lagartos. The use of agrochemicals is increasing, and the chemical compounds present in them can remain in soil, water and food, and can contaminate living beings. Considering that reptiles are the least studied vertebrates in ecotoxicology, and that the lizards of the species Tropidurus torquatus feed mainly on insects and parts of plants, the present study aimed to evaluate, through histological analysis of the liver and kidney and the activity of the enzyme myeloperoxidase (MPO) in the liver, the interference of pesticides in these animals present in a vegetable garden with pesticide and organic vegetable garden, both in Juiz de Fora, Minas Gerais. In addition, lead (Pb) and cadmium (Cd) metals were quantified in the liver of garden animals with pesticides. The present study used animals collected in natural environments and found results similar to those seen in laboratory studies, even though it was not possible to control the dosage and time of exposure to pesticides. In the histology, the liver of the animals of the garden with pesticides presented more compromised than the kidney, being the males more affected than the females. In the adult animals of the herb garden with pesticide, the liver presented hepatocytes without nucleus, with large vacuoles and fibroses, besides numerous melanomacrophages. Young people presented the same characteristics, but less intense. The adults' kidney in the pesticide garden showed vesicles with differentiated staining in the proximal convoluted tubules. Animals from the vegetable garden with pesticides showed higher MPO activity, revealing inflammation in the tissue. By means of flame atomic absorption spectrometry, it was not possible to state that the individuals in the pesticide garden had accumulation of cadmium (Cd) and lead (Pb) in the liver. Pesticides and the anthropic environment showed mainly the liver tissue of lizards.

Submitted by Almir Squinsani (almir.squinsani@unioeste.br) on 2019-04-25T13:35:05Z No. of bitstreams: 2 Thalita_Basso_2019.pdf: 2021893 bytes, checksum: 041871280dbeff2856c6a3f3cf66974b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-25T13:35:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Thalita_Basso_2019.pdf: 2021893 bytes, checksum: 041871280dbeff2856c6a3f3cf66974b (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2019-02-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Introduction: Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) are able to activate neutrophils through binding to their antigens, such as myeloperoxidase (p-ANCA), inducing neutrophil degranulation and respiratory burst even in sterile situations. This corroborates for cellular and tissue damage, and may be involved in the development and progression of breast cancer. Objective: This study measured pANCA levels in serum and breast tissue of women (n= 150) diagnosed with benign breast lesions (n= 58) and mammary carcinoma (n= 92), correlating these levels with clinicopathological aspects. Methods: Peripheral blood and breast tissue samples were collected from women attended at Francisco Beltrão Cancer Hospital - CEONC, Paraná, Brazil, from May 2015 to December 2017. Blood samples were centrifuged to obtain serum, and the tissue fragments were homogenized and centrifuged for further analysis of the supernatants. The analyses were conducted in pools, grouped according to different clinicopathological characteristics. The pANCA dosage was performed by enzyme immunoassay (IBL International Myeloperoxidase-Ab ELISA Kit, RE75601). The results were evaluated by the statistical program GraphPad Prism 6.0, considering p≤0,05 as significant. Results: p-ANCA levels were found to be elevated in pools related to worse prognostic aspects such as high histological grade (serum p=0.0465, tissue p

Objective: To study the effect of 6-shogaol, a bioactive ginger compound with neuroprotective, anti-inflammatory and antioxidant properties, on behavioral and biochemical parameters in a preclinical model based on prenatal bacterial infection from maternal immune activation by lipopolysaccharide (LPS). Methodology: Twelve pregnant Wistar rats received 100 µg/kg of LPS or saline on gestational day (GD) 9.5. Male offspring participated in the study, on the postnatal days (PND) 30 and 55 respectively, they were supplemented with 6-shogaol or saline by gavage (10mg/kg/day) for 5 days. In PND 35 and 60 the animals performed behavioral tests: grooming, crossing, rearing and memory. In PND 37 and 62, death followed by hippocampal dissection for biochemical analyzes of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK 1/2), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), enolase (NSE), lipid and protein damage and myeloperoxidase (MPO) activity. Result: Prenatal exposure to LPS significantly increased grooming and crossing episodes in PND 37 and 62, reduced rearing episodes in PND 37. Short-term memory (STM) at PND 37 and long-term memory (LTM) at PND 62 worsened. Decreased ERK and BDNF levels in PND 37 and 62, increased levels of NSE and lipid damage in PND 37 and protein damage in PND 62. Administration of 6-shogaol reversed behavioral parameters, improved STM and LTM, in PND 37 and 62. Increased ERK and BDNF levels in PND 37 and 62, reduced lipid damage in PND 37 and MPO activity in PND 62. Conclusion: 6-shogaol reversed behavioral and biochemical parameters in male offspring exposed to prenatal LPS, acting as a therapeutic component against neurological disorders associated with maternal immune activation in an animal model of autism. Objetivo: Estudar o efeito do 6-shogaol, composto bioativo do gengibre, com propriedade neuroprotetora, anti-inflamatória e antioxidante, sobre parâmetros comportamentais e bioquímicos, em um modelo pré-clínico baseado em uma infecção bacteriana pré-natal a partir da ativação imune materna por lipopolissacarídeo (LPS). Metodologia: Doze ratas Wistar prenhes, receberam 100 µg/Kg de LPS ou salina no dia gestacional (DG) 9.5. Participaram do estudo as proles de machos, nos dias pós-natal (DPN) 30 e 55 respectivamente, foram suplementados com 6-shogaol ou salina, por gavagem (10mg/Kg/dia), por 5 dias. No DPN 35 e 60 os animais realizaram testes comportamentais: grooming, crossing, rearing e memória. No DPN 37 e 62, ocorreu a morte, em seguida a dissecação do hipocampo para as análises bioquímicas da cinase regulada por sinal extracelular 1 / 2 (ERK 1 / 2), fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), enolase (NSE), dano em lipídeos e proteínas e atividade da mieloperoxidase (MPO). Resultado: A exposição pré-natal ao LPS aumentou significativamente os episódios de grooming e crossing em DPN 37 e 62, reduziu episódios de rearing em DPN 37. Piorou a memória de curta duração (MCD) em DPN 37 e a memória de longa duração (MLD) em PND 62. Diminuiu níveis de ERK e BDNF em DPN 37 e 62, aumentou níveis de NSE e dano em lipídeos no DPN 37 e dano em proteínas no DPN 62. A administração de 6-shogaol reverteu parâmetros comportamentais, melhorou a MCD e MLD, em DPN 37 e 62. Aumentou níveis de ERK e BDNF em DPN 37 e 62, reduziu dano em lipídeos em DPN 37 e atividade da MPO em DPN 62. Conclusão: O 6-shogaol reverteu parâmetros comportamentais e bioquímicos na prole de machos exposta ao LPS em período pré-natal, atuando como componente terapêutico contra os distúrbios neurológicos associados a ativação imune-materna em modelo animal de autismo.

A Sclerotinia sclerotiorum é um importante fungo fitopatógeno, em parte devido à vasta gama de hospedeiros que este fungo possui, em torno de 408 espécies, e em parte devido a sua habilidade de formar estruturas de resistência denominadas escleródios, podendo estes sobreviver no solo por ate 11 anos. Dentre as espécies hospedeiras deste fungo destacam-se a soja e o feijão devido a sua grande importância econômica, a doença causada na planta pela Sclerotinia sclerotiorum chamada mofo branco causa o apodrecimento do caule da planta, a formação de escleródios na vagem das plantas acarreta em grandes prejuízos devido a significativa redução na produção que este provoca, cerca de 70%. A Sclerotinia sclerotiorum possui atividade carcinogênica comprovada quando ingerida em altas concentrações, como sabe-se que atividade anticarcinogênica e atividade anti-inflamatória estão relacionadas faz-se necessário investigar a potencial farmacológico deste fungo. Assim buscou-se neste trabalho determinar a possível atividade anti-inflamatória in vivo do extrato bruto e das frações acetato, hexânica e Hidroalcoólica de Sclerotinia sclerotiorum, bem como isolar e identificar compostos constituintes destes e posteriormente avaliar a atividade inflamatória destes compostos. Para avaliar a atividade anti-inflamatória realizou-se o teste de edema de orelha, sendo possível observar que a fração hexânica possui atividade anti-inflamatória comprável com a do fármaco de referencia, reduzindo o edema em 70% enquanto que o fármaco de referencia inibiu 60%. A fim de determinar-se a via inflamatória inibida no teste de edema de orelha realizou-se o teste de recrutamento de neutrófilos, neste observou-se que a fração hexânica reduziu significativamente os níveis de mieloperoxidase (MPO) indicando que esta iniba a via inflamatória da lipooxigenase (LOX). Isolou-se através de coluna cromatográfica e de coluna Sephadex da fração acetato de Sclerotinia sclerotiorum dois compostos, sendo estes identificados por ressonância magnética nuclear (RMN) de 13C e 1H como sendo o manitol e o peroxido de ergosterol. O manitol e o peroxido de ergosterol foram então submetidos ao teste de edema de orelha aonde pode-se observar que ambos possuem atividade anti-inflamatória, apresentando porcentagem de inibição do edema 53% e 68%, o que comprova que a relação entre atividade antitumoral e atividade anti-inflamatória visto que o peroxido de ergosterol possui atividade anticarcinogênica, imunossupressora e antioxidante comprovada. A fração hexânica foi analisada em massas de alta resolução desta forma foi possível desreplicar vários compostos que possivelmente constituem esta fração sendo estes de diversas classes como flavonoides, cumarina e também terpenos. A maioria dos compostos desreplicados pertence a classe dos flavonoides, estes possuem atividade anti-inflamatória comprovada o que nos permite inferir que a ação anti-inflamatória da fração hexânica se deve possivelmente a grande quantidade de flavonoides observada nesta. Sclerotinia sclerotiorum is an important phytopathogenic fungus, in parts due to the wide range of hosts that this fungus has, around of 408 species, and partly due to its ability to form resistance structures called sclerodes, Which can survive in soil for up to 11 years. Among the host species of this fungus stand out soybeans and beans due to its economic importance, the disease caused in the plant by Sclerotinia sclerotiorum called white mold causes the stem rot, the sclerodes formation in leguminous plants entails large losses due to a significant reduction in production that this causes, about 70%. Sclerotinia sclerotiorum has proven carcinogenic activity when ingested at high concentrations, as it is known that anticarcinogenic activity and anti-inflammatory activity are related it is necessary to investigate the pharmacological potential of this fungus. Sclerotinia sclerotiorum has proven carcinogenic activity, as it is known that anticarcinogenic activity and anti-inflammatory activity are related it is necessary to investigate the potential anti-inflammatory activity of this fungus. The aim of this work was to determine the possible in vivo anti-inflammatory activity of the crude extract and the acetate, hexane and hydroalcoholic fractions of Sclerotinia sclerotiorum, as well as to isolate and identify constituent compounds of these and later to evaluate the inflammatory activity of these compounds. To evaluate the anti-inflammatory activity, the ear edema test was performed, and it was possible to observe that the hexane fraction had anti-inflammatory activity compatible with that of the reference drug, reducing edema by 70%, while the reference drug inhibited 60%. In order to determine the inhibited inflammatory pathway in the ear edema test the neutrophil recruitment test was performed, in which it was observed that the hexane fraction significantly reduced myeloperoxidase (MPO) levels indicating that it inhibited the inflammatory pathway of lipoxygenase (LOX). Two compounds were isolated by chromatographic column and Sephadex column from the acetate fraction of Sclerotinia sclerotiorum, which were identified by 13C and 1H nuclear magnetic resonance (NMR) as mannitol and ergosterol peroxide. Mannitol and ergosterol peroxide were then submitted to the ear edema test, where it can be observed that both have anti-inflammatory activity, presenting a 53% and 68% inhibition of edema, which proves that the relation between antitumor activity and anti-inflammatory activity since ergosterol peroxide has proven anticarcinogenic, immunosuppressive and antioxidant activity. The hexane fraction was analyzed in masses of high resolution of this form it was possible to dereplicate several compounds that possibly constitute this fraction being these of diverse classes like flavonoids, coumarin and also terpenes. Most of the compounds that are not replicated belong to the class of flavonoids, these have a proven anti-inflammatory activity, which allows us to infer that the anti-inflammatory action of the hexanic fraction is possibly due to the large number of flavonoids observed in this class. Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Made available in DSpace on 2015-08-26T19:21:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-01. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-31T13:04:38Z : No. of bitstreams: 1 S0001-37652015000100183.pdf: 841248 bytes, checksum: 5c9bd55e6d1101c0044c5e1ab5a476fa (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Nesse estudo, nós avaliamos o efeito da nicotina sobre a oxidação da LDL pelo sistema MPO/H2O2/Cl- e o efeito do HOCl sobre a LDL e alguns de seus componentes, tais como metil linoleato, vitamina E e o aminoácido triptofano. Nicotina, em concentração micromolar, amplia a oxidação do triptofano, livre em solução ou presente na LDL. A nicotina promove a diminuição da formação de dienos conjugados e consumo de oxigênio no sistema metil linoleato/HOCl, e houve evidência que sugere aumento na formação de clorohidrinas. O aumento da oxidação da vitamina E pelo HOCl também foi observada na presença de nicotina. Esses dados mostram que a interação da nicotina e HOCl pode promover alterações bioquímicas significativas na partícula de LDL e alguns de seus componentes envolvidos na patogênese de doenças cardiovasculares e de outras doenças. In this study, the effect of nicotine on the LDL oxidation by the MPO/H2O2/Cl- system and the effect of HOCl on LDL and some of its components, such as methyl linoleate, vitamin E and the amino acid tryptophan were explored. Nicotine, in micromolar concentrations, enhanced the tryptophan oxidation, either present in LDL or free, in solution. Nicotine also decreased the formation of conjugated dienes and oxygen consumption in a methyl linoleate / HOCl system, and there was evidence to suggest an increase in chlorohydrin formation. Acceleration of the vitamin E oxidation by HOCl was also observed in the presence of nicotine. These data show that the interaction of nicotine and HOCl can promote significant biochemical modifications in LDL particle and some of its components involved in the pathogenesis of cardiovascular and other diseases. Universidade Estadual Paulista, Instituto de Química Departamento de Bioquímica e Tecnologia Química Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara UNICENTRO Departamento de Farmácia Universidade Estadual Paulista, Instituto de Química Departamento de Bioquímica e Tecnologia Química Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara FAPESP: 1999/10229-6

Submitted by Luiza de Carvalho Bertozo null (luiza_bertozo@yahoo.com.br) on 2017-03-10T15:12:20Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO LUIZA DE CARVALHO BERTOZO.pdf: 2801595 bytes, checksum: 5005c69ba30f3937ca6c34753eaf84ae (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-03-16T18:26:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bertozo_lc_me_bauru.pdf: 2801595 bytes, checksum: 5005c69ba30f3937ca6c34753eaf84ae (MD5) Made available in DSpace on 2017-03-16T18:26:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bertozo_lc_me_bauru.pdf: 2801595 bytes, checksum: 5005c69ba30f3937ca6c34753eaf84ae (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A enzima mieloperoxidase (MPO), proveniente dos neutrófilos e monócitos, é capaz de catalisar a oxidação de íons Cl- e Br- a partir da redução do peróxido de hidrogênio. Os oxidantes formados, ácido hipocloroso (HOCl) e ácido hipobromoso (HOBr) são intensamente reativos e atuam como agentes bactericidas, podendo estar envolvidos em processos deletérios que caracterizam doenças de cunho inflamatório. A determinação da atividade halogenante específica da MPO não é trivial, pois devido ao alto potencial redox da forma ativa composto I (1,16 V), além de Cl- e Br-, ela é capaz de catalisar a oxidação de vários compostos orgânicos pelo mecanismo peroxidásico. Assim, são poucas as metodologias utilizadas até o momento que medem exclusivamente a atividade halogenante. Neste trabalho desenvolvemos uma metodologia para a determinação da atividade halogenante da MPO utilizando a sonda fluorescente dansilglicina (DG), a qual se mostrou insensível a ação peroxidásica da enzima, mas susceptível ao ataque eletrofílico dos ácidos HOCl e HOBr. Os estudos de cinética rápida mostram que a velocidade de reação entre a DG e o HOCl aumenta com a adição de Br-. Foi possível verificar a queda linear na intensidade de fluorescência da DG quando concentrações crescentes de HOCl foram adicionadas ao meio reacional juntamente com uma concentração fixa de Br-. Os mesmos resultados foram obtidos utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e, quando acoplado ao espectrômetro de massas, foi possível identificar o produto da reação, o composto bromossubstituído da DG. Os estudos utilizando a enzima MPO comprovaram a especificidade da metodologia, visto que a queda de fluorescência na ausência de Cl- e Br- foi mínima. A peroxidase de eosinófilos tambem é capaz de catalisar a oxidação de haletos, produzindo principalmente o HOBr. Desta maneira, ao aplicar a metodologia da DG na determinação da atividade halogenante da EPO, a produção de HOCl/HOBr tambem pode ser analisada. Posteriormente, ao utilizar a metodologia da DG, em estudos com inibidores, foi possível distinguir o mecanismo de um inibidor reversível do mecanismo de um inibidor irreversível, em estudos realizados para a MPO e para a EPO. Concluímos que o método baseado na queda de fluorescência da DG possui grande potencial como técnica para detecção direta e específica da atividade halogenante das enzimas MPO e EPO. The enzyme myeloperoxidase (MPO) is able to catalyze the oxidation of chloride (Cl-) and bromide (Br-) ions from the reduction of hydrogen peroxide. The formed oxidizing agents, hypochlorous acid (HOCl) and hypobromous acid (HOBr) are highly reactive and involved in deleterious inflammatory processes that characterizes many diseases. The determination of the specific halogenating activity of MPO is not trivial, because due to high redox potential of the active form of compound I (MPO-I, 1.16 V), MPO is also capable to catalyze the oxidation of various organic compounds by the peroxidase mechanism. Thus, there are few methods used to date to measure only the halogenating activity. In this work, we developed a methodology for determining the halogenating activity of MPO using the fluorescent probe dansylglycine (DG), which proved insensitive to peroxidase action, but susceptible to electrophilic attack of HOCl and HOBr. The fast kinetics studies show that the reaction rate between DG and HOCl increases with the addition of Br-. It was possible to verify a linear decrease in fluorescence intensity of DG when increasing concentrations of HOCl were added to the reaction medium together with a fixed concentration of Br-. The same results were obtained using high performance lquid chromatography (HPLC) and, when coupled to mass spectrometry, it was possible to identify the product of the reaction, the compound bromo-dansylglycine. The abstraction of Cl- and Br- from the buffer blocked totally the fluorescence decay of dansylglycine. Eosinophil peroxidase is also capable of catalyzing the oxidation of halides, mainly producing HOBr. Thus, when applying the DG methodology in the determination of the halogenating activity of EPO, the production of HOCl / HOBr was also verified. By applying the DG methodology in studies with MPO and EPO inhibitors, it was possible to distinguish the mechanism of a reversible inhibitor from an irreversible one. In conclusion, this method based on the DG fluorescence bleaching has a great potential as a direct and selective analytical technique and for detection of MPO and EPO halogenating activity. FAPESP: 2015/08267-1

Submitted by LILLIAM ROCHA PENHA null (lilliamrocha@hotmail.com) on 2017-03-09T17:09:57Z No. of bitstreams: 1 Lilliam Rocha Penha - Dissertação de mestrado.pdf: 849686 bytes, checksum: deef16a22eee2d019fc6da257e55fe86 (MD5) Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-03-14T20:25:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 penha_lr_me_bot_parc.pdf: 537129 bytes, checksum: 19075ba4cb35e2c8b1bdf90aff0cb935 (MD5) Made available in DSpace on 2017-03-14T20:25:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 penha_lr_me_bot_parc.pdf: 537129 bytes, checksum: 19075ba4cb35e2c8b1bdf90aff0cb935 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A enzima mieloperoxidase (MPO) é caracterizada por produzir substâncias altamente reativas e é reconhecida por desencadear estresse oxidativo e disfunção endotelial mediada, em parte, pela interferência com o vasodilatador óxido nítrico. Neste estudo, nós investigamos a relação entre o óxido nítrico e a MPO in vitro incubando o plasma de gestantes saudáveis, hipertensas e com pré-eclâmpsia com células endoteliais (HUVEC). Foram observados maiores níveis de MPO no sobrenadante de células incubadas com o plasma de pacientes com pré-eclâmpsia comparado ao de células incubadas com plasma de gestantes saudáveis, e que a inibição da atividade enzimática aumentou a disponibilidade de óxido nítrico. Posteriormente, nós avaliamos a concentração e atividade da MPO no plasma de 219 gestantes saudáveis, 130 hipertensas gestacionais (com e sem terapia anti-hipertensiva) e 143 gestantes com pré-eclâmpsia (com e sem terapia anti-hipertensiva). Nós observamos que pacientes com síndromes hipertensivas e sob tratamento anti-hipertensivo apresentaram menores níveis e atividade desta enzima e, curiosamente, pacientes que tiveram o plasma coletado antes do tratamento anti-hipertensivo apresentaram níveis elevados de MPO. Nossos resultados indicam um elevado risco cardiovascular em gestantes com síndromes hipertensivas e que a MPO ativa pode ter um papel na disfunção endotelial nestas síndromes pelo comprometimento da disponibilidade do óxido nítrico. Além disso, o uso de drogas anti-hipertensivas parece reduzir os níveis e a atividade enzimática, sugerindo um novo mecanismo protetor para estas drogas. Myeloperoxidase is characterized by production of highly reactive substances and recognized to trigger oxidative stress and endothelial dysfunction meditated in part by nitric oxide impairment. In this study, we investigated the relation between nitric oxide and MPO in vitro incubating plasma from healthy, gestational hypertensive and preeclampsia with endothelial cells. We found higher levels of myeloperoxidase in cultures incubated with plasma from preeclampsia group compared to healthy pregnant, and the inhibition of MPO activity improved nitric oxide bioavailability. Further, we measured plasma concentration and activity of myeloperoxidase in 219 healthy pregnant women, 130 gestational hypertension (on antihypertensive therapy or not) and 143 preeclampsia patients (on antihypertensive therapy or not). We found that patients with hypertensive disorders and on antihypertensive treatment showed lower levels and activity of this enzyme and interestingly patients who the plasma was collected before antihypertensive treatment showed elevated levels of MPO. Our results indicate a higher cardiovascular risk in pregnant with hypertensive disorders, and that active myeloperoxidase may play a role in the endothelial dysfunction in this conditions by impairment of nitric oxide availability. Besides, the use of antihypertensive drugs seems to decrease enzyme levels and activity suggesting a new protective mechanism for these drugs.

Nicotine, an oxidizing agent, is certainly one of the most widely used alkaloids in the world. It is, together with its main metabolite, cotinine, responsible for tobacco-dependence. The use of tobacco is closely associated with lung disease, morphological leukocyte modification and generation of oxidant species. The aim of this study was to look for a possible relationship between cotinine, oxidant species generation and oxidative processes. After studying the action of cotinine in some chemical oxidation models and on the enzymatic kinetics of peroxidases (myeloperoxidase and horseradish peroxidase), we concluded that cotinine does not act directly upon H2O2, HOCl, taurine chloramines, horseradish peroxidase or myeloperoxidase.A nicotina, um agente oxidante, é certamente um dos alcalóides mais amplamente utilizados no mundo. Juntamente com seu principal metabolito, a cotinina, a nicotina é responsável pela tabaco-dependência. O uso de tabaco está intimamente associado a doenças pulmonares, modificações morfológicas em leucócitos e a geração de espécies oxidantes. O principal objetivo deste estudo foi identificar uma possível relação entre cotinina, geração de espécies reativas do oxigênio e processos oxidativos. Após o estudo da ação da cotinina em diferentes modelos químicos e em cinéticas enzimáticas com peroxidases (mieloperoxidase e peroxidase de raiz forte), conclui-se que a cotinina não age diretamente sobre H2O2, HOCl, taurine cloramina, peroxidase de raiz forte ou mieloperoxidase.

As reações iniciais dos materiais capeadores sobre o tecido pulpar não estão bem elucidadas. A metaloproteinase da matriz (MMP) atua no remodelamento da matriz extracelular e a mieloperoxidase (MPO) está associada com infiltração neutrofílica nos tecidos. O objetivo deste estudo foi avaliar polpas de molares de ratos após pulpotomia com agregado trióxido mineral (MTA), BiodentineTM (BDT) e Hidróxido de cálcio (HC) associado à solução salina estéril, nos períodos de 24, 72 horas, 7 e 15 dias correlacionando a atividade da MPO com neutrófilos ativos e atividade de MMP8 (EC3.4.24.34) com remodelação tecidual. Foram utilizados 36 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos grupos controle, MTA, BDT e HC e subdividos conforme o tempo de 24, 72 horas, 7 e 15 dias após pulpotomia e um foi utilizado para o controle.. A atividade da MMP8 foi avaliada utilizando a técnica de fluorescência e a atividade de MPO foi determinada utilizando o ensaio de MPO. Houve diminuição gradativa da atividade de MPO e MMP8 para o MTA ao longo dos períodos experimentais (p

A planta Sideroxylon obtusifolium, conhecida popularmente como "quixabeira", é utilizada na medicina popular para o tratamento de processos inflamatórios e dolorosos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a possível ação cicatrizante, bem como anti-inflamatória tópica, do extrato etanólico (EE) da entrecasca da S. obtusifolium no modelo de ferida e cicatrização cutânea. Para isso, ratos Wistar foram anestesiados, submetidos à incisão dorsal, e discos de esponja de álcool polivinílico foram inseridos subcutâneamente. Quarenta e oito horas após os animais foram eutanasiados avaliando-se medidas de tensão de ruptura nas cicatrizes da pele dorsal, a atividade de mieloperoxidase (MPO), e a contagem de células nos exsudatos das esponjas. A atividade sequestradora do radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) foi determinada para avaliar a capacidade antioxidante do EE. Observamos que a administração tópica, 2 vezes ao dia, do EE da S. obtusifolium (3-30 mg 0,4 mL-1 de creme Lanette(r)) não alterou a tensão de ruptura das cicatrizes. Entretanto, o EE da S. obtusifolium (30 mg 0,4 mL-1 de creme Lanette(r)) foi capaz de diminuir a atividade de MPO (p

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Liliane Werle Lima.pdf: 3601191 bytes, checksum: 5783e9d4437866bebca28c4080abc069 (MD5) Previous issue date: 2014-11-10 Pesticides are widely used around the world for pest control and guarantee increased productivity. As is harmful to insects and weeds, are also toxic to humans . Pesticides are related to alterations of the immune system, are neurotoxic, and involved with alterations em endocrine system, besides interfering with metabolism. Exposure to pesticides is monitored by measurement of biomarkers, especially cholinesterase , and through changes in laboratory tests. The most commonly used pesticides are those belonging to the class of organophosphates, whose mechanism of action is irreversible inhibition of cholinesterase. Pesticides being involved in alterations of the immune system, and cardiovascular disease, this study aimed to evaluate the activity of myeloperoxidase (present in phagocytic cells) in individuals chronically exposed to pesticides, in addition to other laboratory markers. This study included 79 volunteers , divided into 3 groups : 1 ) EDP : direct exposure to pesticides ; 2) EIP : indirect exposure to pesticides , and 3) C : control, volunteers not exposed, or low exposure to pesticides. Laboratory tests for glucose, total cholesterol and fractions , triglycerides , AST, ALT, urea, creatinine, myeloperoxidase (MPO) , alpha-1- acid glycoprotein (AGP), high sensitive C-reactive protein (Hs-CRP), total antioxidant capacity, cholinesterase were performed and CBC . There were significant increases in urea in the EDP group. High levels of MPO, AGP and glucose were found for the EDP and EIP groups. The Hs-CRP showed a direct correlation with the values of AGP, but was elevated only for the EIP group. Significant reduction in total antioxidant capacity of serum was found in groups EDP and EIP. The cholinesterase values showed significantly higher activity in the EDP group. With these results we concluded that chronic exposure to pesticides can lead to an adaptive increase in cholinesterase activity resulting in decreased anti-inflammatory action of acetylcholine, with increased levels of myeloperoxidase and other markers of inflammation. Os praguicidas são largamente utilizados em todo o planeta para controle de pragas e garantia de aumento de produtividade. Assim como são nocivos para insetos e ervas daninhas, também são tóxicos para os seres humanos. Os pesticidas estão relacionados com alterações do sistema imunológico, nervoso, endócrino, alem de interferir no metabolismo. A exposição aos praguicidas é monitorada pela dosagem de biomarcadores, especialmente a colinesterase, e através de alterações em exames laboratoriais. Os pesticidas mais usados são aqueles pertencentes à classe dos organofosforados, que tem como mecanismo de ação a inibição irreversível das colinesterases. Estando os pesticidas envolvidos em alterações do sistema imunológico, e com a doença cardiovascular, este estudo teve por objetivo avaliar a atividade da enzima mieloperoxidase (presentes em células fagocíticas) em indivíduos expostos cronicamente a pesticidas, alem de outros marcadores laboratoriais. Este estudo incluiu 79 voluntários, divididos em 3 grupos: 1) EDP: exposição direta aos praguicidas; 2)EIP:exposição indireta aos praguicidas; e 3) C: controle, voluntários com pouca ou nenhuma exposição aos praguicidas. Foram realizados exames laboratoriais para dosagem de glicose, colesterol total e frações, triglicerídeos, TGO, TGP, ureia, creatinina, mieloperoxidase (MPO), alfa-1-glicoproteína ácida (AGP), proteína C reativa ultrassensível (PCR-us), colinesterase, capacidade antioxidante total e hemograma. Ocorreram aumentos significativos na ureia no grupo EDP. Níveis elevados de MPO, AGP e glicose foram encontrados para os grupos EDP e EIP. A PCR-us apresentou correlação direta com os valores de AGP, contudo mostrou-se elevada apenas para o grupo EIP. Significante redução na capacidade antioxidante total do soro foi encontrada nos grupos EDP e EIP. A colinesterase apresentou valores de atividade significativamente maiores no grupo EDP. Com estes resultados concluímos que a exposição crônica aos pesticidas pode levar a um aumento adaptativo da atividade da colinesterase resultando em diminuição da ação anti-inflamatória da acetilcolina, com aumento dos níveis de mieloperoxidase e outros marcadores da inflamação.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior We investigated the action of butane-2,3-dione thiosemicarbazone oxime against the testicular damage caused by cadmium chloride (CdCl2) in mice swiss adult male. The animals received a single injection of CdCl2 at the dose of 5 mg/kg, intraperitoneally, and after thirty minutes, the oxime was administered subcutaneously at the dose of 10 mg/kg. Twenty four hours after administration of the oxime, the animals were euthanized the blood were collected and after killed the testes were removed for analysis. The parameters determined were δ-aminolevulinate dehydratase (δ-ALA-D), myeloperoxidase (MPO), glutathione-S-transferase (GST) and glutathione peroxidase (GPx) activities, in testicular tissue. The levels of thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS), nonprotein thiols (NPSH), ascorbic acid and the quantity of cadmium in testes were also evaluated. In addition, levels of testosterone in serum and cytokines (proinflammatory, IL-1, IL-6, TNF-α, IFN-γ and anti-inflammatory IL-10) were determined. Histological analysis of testicular tissue was also performed. Our results demonstrated that the oxime was effective in restoring partially the inhibition in δ-ALA-D activity induced by CdCl2. The activation of MPO and increase in IL-1, IL-6, TNF-α and IFN-γ levels induced by CdCl2 were also reduced by oxime. IL-10, which was reduced by cadmium, was partially restored by oxime administration. In addition, the oxime was effective in restoring the increase in TBARS levels and partially the reduction on NPSH levels induced by CdCl2. However, the oxime did not have action on the decreased levels of ascorbic acid induced by CdCl2 or on the decrease in enzymatic activity of GST and the increased enzymatic activity of GPx caused by CdCl2. Our results demonstrated that oxime was effective in restoring the histological alterations induced by CdCl2, preventing the loss of elongated spermatids. In addition, oxime was able to increase the testosterone levels reduced by cadmium exposure. In conclusion, the oxime tested was effective in reducing the testicular damage induced by CdCl2 in mice. The beneficial effects of this oxime are related to its antioxidant and anti-inflammatory action. Investigamos a ação da oxima butano-2,3-dionatiossemicarbazona contra o dano testicular causado por cloreto de cádmio (CdCl2) em camundongos swiss adultos machos. Os animais receberam uma única injeção de CdCl2 na dose de 5mg/kg, intraperitonialmente e, após trinta minutos, foi administrada a oxima subcutâneamente na dose de 10 mg/kg. Vinte quarto horas após a administração da oxima, os animais foram anestesiados o sangue foi coletado, após a eutanásia tiveram os testículos removidos para as análises. Os parâmetros determinados foram as atividades das enzimas δ-aminolevulinato desidratase (δ-ALA-D), mieloperoxidase (MPO), glutationa-S-transferase (GST) e glutationa peroxidase (GPx), no tecido testicular. Os níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), tióis não protéicos (NPSH), ácido ascórbico e quantidade presente de cádmio nos testículos também foram avaliados. Além dos níveis de testosterona no soro, onde também se quantificou as citocinas (pró-inflamatórias IL-1, IL-6, TNF-α, IFN-γ e anti-inflamatória, IL-10). Também foi realizada a análise histológica de tecido testicular. Nossos resultados demonstraram que a oxima foi efetiva em restaurar parcialmente a inibição da atividade da enzima δ-ALA-D induzida por CdCl2. A ativação da MPO e o aumento dos níveis de IL-1, IL-6, TNF-α e IFN-γ induzidos por CdCl2 também foram reduzidos pela oxima. A IL-10, que foi reduzida pelo cádmio, teve seus níveis restaurados parcialmente pela oxima. Além disso, a oxima foi efetiva em restaurar o aumento nos níveis de TBARS e parcialmente a redução nos níveis de NPSH induzidos pelo CdCl2. Porém, não teve ação sobre a queda dos níveis de ácido ascórbico provocado pelo CdCl2, nem sobre a diminuição da atividade enzimática da GST e sobre o aumento da atividade enzimática da GPx causados pelo CdCl2. Nossos resultados demonstraram que a oxima foi efetiva em conter as alterações histológicas causadas pelo CdCl2, prevenindo a perda de espermátides alongadas. A oxima também foi capaz de aumentar os níveis de testosterona reduzidos pela exposição ao cádmio. Em conclusão, a oxima testada foi efetiva em reduzir os danos testiculares induzidos pelo CdCl2. Os efeitos benéficos desta oxima estão relacionados às suas propriedades antioxidantes e sua ação anti-inflamatória.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JOSILAINE TONIN RIBAS.pdf: 1837470 bytes, checksum: be68534292ab10fcde99fb22913162f3 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná During pregnancy, some physiological changes occur in women, mostly lipid changes and development of insulin resistance. Probably, these changes are associated with increased hepatic effect of estradiol, progesterone and placental lactogen during this period, because progestins are known to alter the profile of LDL cholesterol and decrease the activity of hepatic lipase. The occurrence of such changes can indicate increased risk in these women, in developing atherogenic diseases in the future. Furthermore, this population also noted an increase in the number of neutrophils and monocytes into the peripheral circulation, especially of women with preeclampsia which has the consequence that the production and secretion mechanism of myeloperoxidase (MPO). Thus, it becomes important to investigate metabolic and inflammatory changes which occur during pregnancy, to assist in the diagnosis and prognosis of future cardiovascular disease in these individuals and myeloperoxidase can be studied as a novel biomarker associated with cardiovascular risk and occurrence of oxidative stress. Addition of serum MPO, the determination of the total antioxidant capacity and identification of other laboratory abnormalities, such as markers of inflammation (CRP, alpha-1-acid glycoprotein and leukocytes) for the prevention, diagnosis and treatment of possible future cardiac events or markers such as glycosylated hemoglobin (HbA1c) and glucose to identify the occurrence of gestational diabetes, are useful in assessing the quality of life of the pregnant woman and the developing fetus. Thus, the aim of this study was to evaluate biochemical and immunological for correlation with cardiovascular risk in pregnant women each trimester parameters. Total cholesterol, triglycerides, serum total antioxidant capacity (ABTS), compared ABTS/albumin, total protein, acid uric: results statistically different between the control (non-pregnant) and pregnant women (first, second and third quarter) the following parameters were obtained acid uric and leukocytes. Elevated levels of CRP between groups of pregnant women, which qualifies as a useful parameter for laboratory monitoring of pregnancy, were observed. However, no significant changes in MPO levels, which thus appears to be a suitable for risk prediction of cardiovascular disease in pregnant women were observed marker. No período gestacional, algumas mudanças fisiológicas ocorrem nas mulheres, principalmente alterações lipídicas e desenvolvimento de resistência à insulina. Provavelmente, tais alterações estão associadas ao aumento do efeito hepático da progesterona, estradiol e lactogênio placentário nesse período, pois os progestogênios são conhecidos por alterar o perfil de colesterol LDL e diminuir a atividade da lipase hepática. A ocorrência de tais alterações pode indicar probabilidade aumentada, nestas mulheres, em desenvolver doenças aterogênicas no futuro. Além disso, nessa população, nota-se também um aumento do número de neutrófilos e monócitos para a circulação periférica, principalmente das mulheres com préeclâmpsia, que tem como consequência desse mecanismo a produção e secreção da mieloperoxidase (MPO). Assim, torna-se importante investigar quais alterações metabólicas e inflamatórias ocorrem na gestação, para auxiliar no diagnóstico e prognóstico de doenças cardiovasculares futuras nesses indivíduos e se a mieloperoxidase pode ser estudada como um novo biomarcador relacionado ao risco cardiovascular e ocorrência de estresse oxidativo. Além da MPO sérica, a determinação da capacidade total antioxidante e identificação de outras alterações laboratoriais, tais como marcadores de inflamação (PCR-us, alfa-1-glicoproteína ácida e leucócitos) para a prevenção, diagnóstico e tratamento de possíveis eventos cardíacos futuros ou marcadores como hemoglobina glicosilada (HbA1c) e glicose que identifiquem ocorrência de diabetes gestacional, são úteis na avaliação da qualidade de vida da gestante e do desenvolvimento fetal. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar parâmetros bioquímicos e imunológicos para a correlação com risco cardiovascular em gestantes a cada trimestre de gestação. Foram obtidos resultados estatisticamente diferentes entre os grupos controle (não gestante) e gestantes (primeiro, segundo e terceiro trimestre) nos seguintes parâmetros: colesterol total, triglicerídeos, capacidade antioxidante total no soro (ABTS), relação ABTS/albumina, proteínas totais, acido úrico e leucócitos. Foram observados níveis elevados de PCR-us entre os grupos de gestantes, o que a qualifica como parâmetro útil no acompanhamento laboratorial da gestação. Entretanto, não foram observadas alterações significativas nos níveis de MPO, que desta forma, parece não ser um marcador apropriado para a predição de risco de doença cardiovascular em mulheres grávidas.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gisele C Parabocz.pdf: 1495859 bytes, checksum: 56f08069e8fd4cf1a7e0f79f60114e3e (MD5) Previous issue date: 2013-02-18 Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná Obesity has become epidemic in XXI century and it is estimated that there are about 1.4 billion overweight adults. The existing subclinical chronic inflammation in obesity is associated with increased risk of cardiovascular disease. Adipose tissue, in addition to its energy function, has endocrine role through the secretion of adipokines. In obesity, adipocytes become dysfunctional, producing excess proinflammatory adipokines at the expense of anti-inflammatory. This inflammatory process is the link between obesity and atherogenesis. Thus, inflammation markers are potential targets for prevention, diagnosis and treatment of atherosclerosis. Myeloperoxidase (MPO), an enzyme found primarily on neutrophils, participates on innate defense mechanisms of the body through the production of oxidizing species that have antimicrobial activity. However, these oxidants and MPO act in events that feature key role in atherogenesis, such as oxidation of LDL-cholesterol, consumption of nitric oxide and activation of proteases. Therefore, the MPO has become subject of research and many studies have shown its value as predictor of cardiac risk in certain situations. However, its usage is not yet standardized and its benchmark values are not well established for laboratory diagnosis. The aim of this study was to evaluate the levels of MPO and other biomarkers in different Body Mass Index (BMI) ranges. The results indicated significant differences between the groups in the following parameters: systolic and diastolic blood pressure, HDL-cholesterol, triglycerides/HDL rate, HDL/LDL rate and white blood cells count. Elevated levels of hs-CRP were observed in the groups with obese individuals, but no significant changes were observed to serum MPO. Therefore, serum levels of MPO did not provide information on clinically significant laboratory differentiation of groups. A obesidade tornou-se a epidemia do século XXI, estimando-se a existência de 1,4 bilhão de adultos com excesso de peso. A inflamação crônica subclínica existente na obesidade é associada com o aumento do risco de doenças cardiovasculares. O tecido adiposo, além de sua função energética, possui papel endócrino por meio da secreção das adipocinas. Na obesidade, os adipócitos tornam-se disfuncionais, produzindo, em excesso, adipocinas pró-inflamatórias, em detrimento das anti-inflamatórias. O desencadeamento do processo inflamatório é a ligação entre a obesidade e a aterogênese. Desta forma, marcadores de inflamação são alvos em potencial para a prevenção, diagnóstico e tratamento da aterosclerose. A mieloperoxidase (MPO) é uma enzima presente principalmente em neutrófilos, participante dos mecanismos de defesa inata do organismo, através da produção de espécies oxidantes que possuem atividade antimicrobiana. Contudo, os oxidantes originados e a própria MPO participam de eventos que apresentam papel fundamental na aterogênese, tais como oxidação do LDL-colesterol, consumo de óxido nítrico e ativação de proteases. Destarte, a MPO tornou-se objeto de pesquisa e muitos estudos demonstram seu poder preditor de risco cardíaco em determinadas situações. Não obstante, seu uso ainda não está padronizado e os valores referenciais não estão bem estabelecidos para o diagnóstico laboratorial. O objetivo deste trabalho foi avaliar os níveis de MPO e outros biomarcadores em indivíduos com diferentes faixas de Índice de Massa Corporal (IMC). Os resultados obtidos indicaram diferenças significativas entre os grupos nos seguintes parâmetros: pressão arterial sistólica e diastólica, HDL colesterol, taxa triglicerídeos/HDL, taxa HDL/LDL e contagem de leucócitos. Níveis elevados de PCR-us foram observados nos grupos com indivíduos obesos, porém não se constataram alterações significativas para a MPO. Portanto, os níveis séricos de MPO não forneceram informações laboratoriais clinicamente significativas na diferenciação dos grupos estudados.

RESUMO: Apreseotamos o caso clínico de um doente de 68 anos de idade, com glomerulonefrite rapidamente progressiva e hemorragia pulmonar, presença de anticorpos anti-citoplasma dos neutrófilos (padrão perinuclear com especificidade anti-mieloperoxidase), e anticorpos anti-cardiolipina. A histologia renal confirmou o diagnóstico de poliarterite microscópica. A propósito deste caso, são feitas algumas considerações sobre a utilidade dos auto-anticorpos no diagnóstico das diferentes formas de vasculite. ABSRTRACT: We present the case report of a 68 year old man with rapidly progressive glomerulonephritis and pulmonary haemorrhage, with anti-neutrophil cytoplasmic auto-antibodies, perinuclear pattern with myeloperoxidase specifity, and anti-cardiolipin antibodies. Renal histology supported the diagnosis of microscopic polyarteritis. In reference to this case, some considerations regarding the usefullness of autoantibodies in different forms of vasculitis are made. Palavras-chave: Autoanticorpos, Antoantigénios, Endotélio Vascular, Mieloperoxidase, Neutrófilos, Serina proteinase, Vasculites, Key-Words: Autoantibodies, Autoantiges, Endothelium, vascular, Myelope-roxidase, Neutrophils, Serine proteinase, Vasculitis

Made available in DSpace on 2016-09-23T15:12:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RELATORIO_FINAL_Carolina_belichar_2011.pdf: 594735 bytes, checksum: e19d941123968068b707caf254395996 (MD5) Previous issue date: 2011-07-01 CNPQ A mieloperoxidase (MPO) é uma enzima heme derivada de leucócitos geradora de espécies de oxidante reativas, as quais são componentes que antecedem a lesão arterial, podendo ser aterogênicas. Estes oxidantes têm sido implicados como os principais mediadores de danos nos tecidos, pois seu excesso pode sobrecarregar as defesas antioxidantes e, levar ao estresse oxidativo e consequente lesão tecidual oxidativa. Alguns estudos relataram dados in vitro demonstrando a eficácia antioxidante dos flavonóides estruturalmente diversos em muitas circunstâncias de stress oxidativo. Dessa forma, a utilização de flavonóides com intuito de inibir a MPO, justifica-se pelo aumento das relações estrutura-atividade para futuras estratégias terapêuticas. A atividade inibitória de flavonóides disponíveis comercialmente e isolados de plantas da Amazônia será medida através do método de oxidação do guaiacol e do ensaio de inibição da atividade em sobrenadante de cultura de célula HL60. Pretende-se com o trabalho identificar flavonóides como importantes inibidores de MPO que possam ser utilizados futuramente como estratégias terapêuticas.

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielleBorato.pdf: 790899 bytes, checksum: 01d3aff9b0911e734c31a2a00b5c7bdc (MD5) Previous issue date: 2011-06-17 Atherosclerotic cardiovascular disease has become an important cause of morbidity and mortality among individuals with human immunodeficiency virus (HIV). Currently, most of these patients have access to antiretroviral drugs, which has decreasing the risk for AIDS and increasing life expectancy. Therefore, it is necessary a better monitoring of traditional cardiovascular risk factors, whose changes are often more common in individuals with HIV infection. It is considered important the laboratorial evaluation in patients infected with HIV, with or without development of Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) and the establishment of preventive health policies, through the monitoring of mortality and its risk factors. So, there is the necessity to set new trends in laboratory monitoring in patients infected with HIV, such as percentage of CD4+ T cells and early and sensitive biochemical indicators for the risk of developing cardiovascular disease, in order to diagnose life-threatening conditions of the individual, thus increasing the chance of success of treatments needed. Currently, there is growing interest in myeloperoxidase (MPO; 1.11.1.7) as a marker of cardiac risk because of the possibility of performing with high serum levels occurring in the biomolecules that are currently used for this purpose, such as ultra-sensitive C-reactive protein (hs-CRP). This study aimed to assess the levels of MPO levels in HIV-infected individuals, as a possible biomarker for early indication of cardiac risk, together with different laboratory tests for immune monitoring and evaluation of these patients. The results indicated, among others, differences in the percentages of CD4 + T lymphocytes obtained by different methodologies, which could cause conflict in clinical decisions related to treatment and care of people infected with HIV. In addition, there were significant differences in the values of ultrasensitive C-reactive protein (hs-CRP) and serum myeloperoxidase, suggesting their application as laboratory markers with predictive value for cardiovascular events in HIV-infected patients. A doença cardiovascular aterosclerótica tem se tornado uma importante causa de morbidade e mortalidade entre indivíduos com o vírus da imunodeficiência humana (HIV). Atualmente, a maioria destes pacientes tem acesso aos medicamentos antiretrovirais, o que diminuiu o risco para a AIDS e elevou a expectativa de vida. Sendo assim, torna-se necessária uma melhor monitorização dos fatores de risco cardiovasculares tradicionais, cujas alterações são muitas vezes mais comuns em indivíduos com infecção pelo HIV. Considera-se importante a avaliação laboratorial em pacientes infectados pelo HIV, com ou sem desenvolvimento da Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (AIDS) e o estabelecimento de políticas preventivas em saúde, por meio do monitoramento da morbimortalidade e seus fatores de risco. Há, portanto, a necessidade em se definir novas tendências no monitoramento laboratorial em pacientes infectados pelo HIV, tal como a avaliação percentual de células T CD4+ no monitoramento imunológico e indicadores bioquímicos sensíveis e precoces para o risco de desenvolvimento de doenças cardiovasculares, no sentido de se diagnosticar condições de risco de morte do indivíduo, elevando assim a chance de sucesso dos tratamentos necessários. Atualmente, observa-se o interesse crescente na mieloperoxidase (MPO; 1.11.1.7) como marcador do risco cardíaco, devido à possibilidade desta se apresentar com níveis séricos elevados precocemente em relação às biomoléculas utilizadas atualmente para tal fim, como a proteína C reativa ultrassensível (PCR-us). O presente trabalho teve por objetivo avaliar os níveis de MPO sérica em indivíduos infectados pelo HIV, como possível biomarcador para indicação precoce de risco cardíaco, em conjunto com diferentes exames laboratoriais para avaliação e o monitoramento imunológico destes pacientes. Os resultados obtidos indicaram, dentre outros, diferenças nos valores percentuais de linfócitos T Cd4+ obtidos por diferentes metodologias, o que poderia causar conflito nas decisões clínicas relacionadas ao tratamento e à assistência de pessoas infectadas pelo HIV. Além disso, observaram-se diferenças significativas nos valores de proteína C reativa ultrassensivel (PCR-us) e da mieloperoxidase sérica, sugerindo o uso como elemento laboratorial com valor preditivo de eventos cardiovasculares nos pacientes infectados pelo HIV.

Este estudo teve como objetivo avaliar a infiltração de leucócitos e a imunorreatividade antimieloperoxidase em granulócitos da mucosa e submucosa do intestino grosso de equinos submetidos à sobrecarga dietética com amido. Oito equinos adultos foram distribuídos aleatoriamente em três tratamentos: Tratamento I (Controle) (n = 2), equinos eutanasiados sem sobrecarga com amido; Tratamento II (n = 3) e III (n = 3), equinos submetidos à sobrecarga com amido, com infusão gástrica de 17,6 g de amido/kg de peso vivo e eutanasiados após 24 e 36 horas, respectivamente. Observou-se apenas afluxo de neutrófilos (leucocitoestase) nos vasos sanguíneos da mucosa e submucosa intestinal. Eosinófilos foram as células predominantes na mucosa e submucosa em todos os equinos, independente da sobrecarga dietética, com grau de infiltração de leve a moderada. Infiltração por linfócitos também foi observado em todos os equinos, porém com menor intensidade quando comparado aos eosinófilos. Congestão, edema e dilatação de vasos linfáticos foram as principais alterações circulatórias observadas, com maior intensidade na submucosa. Maior imunorreatividade para anticorpos antimieloperoxidase foi observado na mucosa e submucosa dos equinos 36 horas após a sobrecarga. Equinos submetidos à sobrecarga dietética com amido apresentam resposta inflamatória intestinal com predominância de eosinófilos, leucocitoestase e alterações circulatórias variando de discreta a moderada. This study was carried out to evaluate leukocyte infiltration and anti-myeloperoxidase immunoreactivity in granulocytes of the mucosa and submucosa of the large intestine of horses submitted to dietetic starch overload. Eight adult horses were allocated randomly in three treatments: Treatment I (Control) (n = 2), animals euthanized without starch overload; and Treatments II (n = 3) and III (n = 3), animals undergoing starch overload, with gastric infusion of 17.6 g starch per kg of body weight, euthanized after 24 and 36 hours, respectively. Only afflux of neutrophils in the intestinal mucosa and submucosa blood vessels (leukocyte stasis) was observed. Eosinophils were the predominant cells in the mucosa and submucosa in all horses, independent of dietetic overload, with infiltration grade from mild to moderate. Lymphocyte infiltration was also observed in all horses, but with lower intensity when compared to eosinophils. Congestion, edema and dilatation of lymphatic vessels were the main circulatory alterations observed, with more intensity in the submucosa. Higher immunoreactivity to the anti-myeloperoxidase antibodies was observed in the mucosa and submucosa of horses 36 hours after overload. Horses submitted to dietetic starch overload showed intestinal inflammatory response with prevalence of eosinophils, leukocyte stasis and circulatory alterations, varying from discreet to moderate.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-10-29Bitstream added on 2014-06-13T18:29:59Z : No. of bitstreams: 1 martins_ab_me_arafcf.pdf: 992180 bytes, checksum: 3281d39ebadb109f527844b299d91644 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Níveis séricos elevados de mieloperoxidase (MPO) estão associados com disfunção endotelial e risco aumentado de acidente cárdio-vascular. Há muito tempo se sabe que o hábito do tabagismo é um fator de risco para doenças cardiovasculares.Uma vez que o infarto do miocárdio está associado também com leucocitose neutrofílica, e fumantes apresentam neutrofilia, nós hipotetizamos que o nível sérico de MPO em fumantes também poderia estar elevado. O estudo incluiu quarenta adultos voluntários e saudáveis. O grupo controle foi composto por vinte indivíduos não tabagistas e o grupo de estudo por vinte indivíduos tabagistas. Hemograma, Interleucina 8 (CXIL8) sérica e MPO sérica foram determinados. Encontramos contagens de neutrófilos e monócitos aumentados (p

Os efeitos benéficos do agonista kappa opioide U-50,488 na prevenção da progressão da doença periodontal (DP) em ratos já foi descrito na literatura, embora seus mecanismos ainda não tenham sido totalmente esclarecidos. O presente estudo avaliou a expressão dasseguintes citocinas: fator de necrose tumoral alfa (TNF-), interleucina 6 (IL-6), interleucina 8 (IL-8) e interleucina 10 (IL-10) em tecidos periondontais de ratos com DP induzida e tratados com o U-50,488. Adicionalmente, correlacionou-se os efeitos do agonista kappa opioide com a atividade da enzima mieloperoxidase (MPO) um marcador de neutrófilos ativados e com a presença de osteoclastos nos tecidosperiodontais. Ratos machos da linhagem Holtzman foram divididos em quatro grupos: naïve (N), ligadura (L), salina (S) e kappa (K). A DP foi induzida por meio da colocação de um fio de sutura estéril (ligadura) em volta do segundo molar superior esquerdo, exceto nos animais do grupo N. Os animais do grupo L não receberam qualquer tratamento farmacológico após a colocação da ligadura e os dos grupos S e K foram tratados, respectivamente, com a administração local de solução salina e do agonista kappa opioide U-50,488. Após cinco e 11 dias de indução da doença, os animais passaram pela eutanásia e as amostras dos tecidos periodontais foram coletadas para análises histológica e morfométrica, avaliação da produção de TNF-, IL-6, IL-8, IL-10 e MPO. A DP experimental caracterizou-se pela formação de infiltrado inflamatório, reabsorção da crista óssea alveolar e aumento no número de osteoclastos no periodonto de ratos com ligadura.Verificou-se também, por intermédio do Teste de Elisa, uma concentração maior nos níveis de TNF-, IL-6, IL-8 e MPO nos tecidos periodontais destes animais. A administração do agonista kappa opioide diminuiu a perda óssea e o número de osteoclastos sem alterar o número de células do inflamatório e a atividade de MPO. O U-50,488 reduziu os níveis de IL-6 e aumentou os de IL-10 de maneira significativa, mas não alterou a produção de TNF- e de IL-8. Tais resultados sugerem que a administração local do agonista kappa opioide U-50,488 modula as respostas inflamatória e imune na DP experimental em ratos ao diminuir a expressão de IL-6 e aumentar a de IL-10. Beneficial effects of the kappa opioid agonist U-50,488 in preventing periodontal disease (PD) progression in rats were already described, but the mechanisms by which it ocurred were unknwon. The present study evaluated the expression of TNF-, IL-6, IL-8 and IL-10 in periodontal tissues of rats with ligature-induced PD, treated with U-50,488. It alsocorrelated the effects of such agonist with myeloperoxidase activity and the presence of osteoclasts in periodontal tissues. Male Holtzman rats weighing 250-300g were divided into four groups: (1) Naïve, (2) Ligature, (3) Ligature + Saline and 4) Ligature + Kappa agonist. Experimental PD was induced by placing a sterile silk ligature around the 2nd leftupper molar. Animals from groups 3 and 4 were locally administered with either saline or U-50,488, respectively, from the 3rd to the 5th day following ligation. After 5 or 11 days of ligature, animals were euthanized and periodontal tissue samples were collected for histological and morphometric analysis, for evalution of TNF-, IL-6, IL-8, IL-10 andMPO. Ligature placement induced a significant alveolar bone loss, inflammatory infiltrate, number of osteoclasts, MPO activy, IL-6, IL-8 and TNF- expression in periodontal tissues. U-50,488 decreased bone loss and the number of osteoclasts in periodontal tissues, although it did not alter histological inflammatory infiltrate and MPO activity. Furthemore,U-50,488 significantly reduced IL-6 and increased IL-10 levels, but it did not affect TNF- and IL-8. Lowering the levels of IL-6 and increasing IL-10 are important mechanisms by which U-50,488 decreases alveolar bone loss in ligature-induced periodontal disease.Keywords: alveolar bone loss, opioids, IL-6, IL-1

Made available in DSpace on 2013-08-12T18:59:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:07:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T14:17:42Z No. of bitstreams: 1 WOS000267750700012.pdf: 583804 bytes, checksum: 754ff9c143ebaed31b1af1cda70d163e (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T14:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WOS000267750700012.pdf: 583804 bytes, checksum: 754ff9c143ebaed31b1af1cda70d163e (MD5) Previous issue date: 2009-01-01 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Reactive oxygen species (ROS) and free radical species have been implicated in initiating or accompanying many diseases in living organisms; there is thus, a continual need for antioxidants molecules to inactivate ROS/free radicals. Many studies of plants crude extracts have demonstrated free-radical scavenging and antioxidant action. Salacia species have long been used, in several countries, as traditional medicines against certain diseases and for their anti-inflammatory properties. In this Study, Salacia campestris Walp (Hippocrateaceae) root bark ethanol extract (ScEtOH) was assessed for its ability to scavenge free radicals and reactive oxygen species; the results were expressed as percentage inhibition of the active species. ScEtOH was efficient against studied species: DPPH radical (obtained inhibition = 30%), ABTS(center dot+) (IC(50) = 1.8 +/- 0.8 mu g/mL), HOCI (IC(50) = 1.7 +/- 0.1 mu g/mL), O2(center dot-) (obtained inhibition = 32%), and NO(center dot) (obtained inhibition = 18%). Peroxidase activity inhibition was evaluated through the guaiacol oxidation reaction catalyzed by hemin, HRP and. myeloperoxidase (MPO); data showed that ScEtOH at 10 mu g/mL led to 54 and 51% of inhibition, respectively, for the hemin and HRP systems. In the MPO system, ScEtOH promoted a 50% inhibition at 8.9 mu g/mL, whereas quercetin, a powerful MPO inhibitor, inhibited this system at 1.35 mu g/mL. Parana State Univ Ponta Grossa, Univ Lab Clin Anal, Toxicol & Clin Anal Dept, Maringa, Parana, Brazil MidWest Parana State Univ, Dept Pharm, Maringa, Parana, Brazil UNESP, Dept Bioquim & Tecnol Quim, Inst Quim, BR-4800900 Araraquara, SP, Brazil UNESP, Clin Anal Dept, Sch Pharmaceut Sci, BR-4800900 Araraquara, SP, Brazil UNESP, Dept Organ Chem, Inst Chem, BR-4800900 Araraquara, SP, Brazil UNESP, Dept Bioquim & Tecnol Quim, Inst Quim, BR-4800900 Araraquara, SP, Brazil UNESP, Clin Anal Dept, Sch Pharmaceut Sci, BR-4800900 Araraquara, SP, Brazil UNESP, Dept Organ Chem, Inst Chem, BR-4800900 Araraquara, SP, Brazil

Objetivos: 1) Identificar los aspectos fundamentales en el desarrollo histórico de la poliangeítis microscópica (PAM). 2) Establecer de manera detallada los principales aspectos en el conocimiento patológico, diagnóstico, manejo y pronóstico de la PAM. 3) Realizar un aporte al clínico en el conocimiento de las vasculitis, como parte de la orientación en los diagnósticos diferenciales. Material y métodos: revisión sistemática de la literatura desde 1900 a 2007 a través de Pubmed, Embase, Ovid, Sciencedirect, SpringerLink, Blackwell Synergy, MD Consult, ProQuest, Highwire, biblioteca y hemeroteca de la Universidad Nacional de Colombia. Resultados: se encontraron 544 artículos con relación a la PAM, de los cuales los seleccionamos en idiomas inglés y alemán con énfasis en revisiones históricas médicas, ensayos clínicos relevantes, estudios controlados, aleatorizados y revisiones en general. De igual forma se encontraron 5468 artículos con asociación a la poliarteritis nodosa (PAN), de los cuales incluimos únicamente los de relevancia histórica. Del total recolectado se incluyó información con interés para las principales asociaciones médicas y a consideración de los autores de esta revisión, quedando al final un conglomerado de 79 fuentes bibliográficas. Algunas de las descripciones iniciales no se incluyeron por información no clara y por lo tanto podrían generar confusión en cuanto a los objetivos inicialmente descritos. Conclusiones: la información obtenida permite aclarar que la PAM estuvo a la vista de muchos autores por bastante tiempo. Sólo con la pericia científica y los avances tecnológicos se logró establecer sus principales características y diferencias con la PAN. Los datos iniciales se centran en Europa sin embargo, en los últimos 10 años la literatura asiática aporta importante información de su fisiopatología e incluso variedades clínicas desconocidas en muchas partes del mundo. Esto permite generar nuevas fuentes de explicación a un gran número de patologías de etiología no establecida. Objectives: 1) Identification of the main aspects in the historical development of the microscopic polyangeitis (PAM). 2) Description of all the details related to the main aspects of pathology, diagnosis, management and prognosis of PAM. 3) To contribute with the clinician in the knowledge related to vasculitis as part of the orientation in the differential diagnosis. Material and methods: systematic review of the literature from 1900 to 2007 through Pubmed, Embase, Ovid, Science direct, SpringerLink, Blackwell Synergy, MD Consult, ProQuest, Highwire , library and journals of the National University of Colombia. Results: 544 articles related to PAM were found, of which we selected those in English and German with emphasis in medical historical reviews, relevant clinical trials, controlled randomized trials and revisions in general. Likewise 5468 articles associated to poliarteritis nodosa were found (PAN), of which we only included those of historical relevant. Information that could be interesting for the main medical associations was included. At the end a total of 79 bibliographic sources remained. Some of the initial descriptions were not included due to unclear information that could lead to confusions with regards to the objectives initially described. Conclusions: the information obtained helps in clarifying that the PAM had already been looked at by many authors and for a long time. Only with the scientific skills and the technological advances was it possible to establish its characteristics and differences with PAN. The initial data are centered in Europe, however, the Asian literature of the last 10 years contributes with important information about its physiopathology and even clinical varieties unknown in may parts of the world. This helps to explain many pathologies of non well established etiology.

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:22:30Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:28:18Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-34250335024.pdf: 143784 bytes, checksum: 110944d77675926718477c89f9df7de8 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:22:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-06-19 Nicotine, an oxidizing agent, is certainly one of the most widely used alkaloids in the world. It is, together with its main metabolite, cotinine, responsible for tobacco-dependence. The use of tobacco is closely associated with lung disease, morphological leukocyte modification and generation of oxidant species. The aim of this study was to look for a possible relationship between cotinine, oxidant species generation and oxidative processes. After studying the action of cotinine in some chemical oxidation models and on the enzymatic kinetics of peroxidases (myeloperoxidase and horseradish peroxidase), we concluded that cotinine does not act directly upon H 2O 2, HOCl, taurine chloramines, horseradish peroxidase or myeloperoxidase. UNESP - Sao Paulo State University Biochemistry and Technological Chemistry Department Chemistry Institute, Araraquara-SP UNESP - Sao Paulo State University Clinical Analysis Department School of Pharmaceutical Sciences, Araraquara-SP UNESP - Sao Paulo State University Biochemistry and Technological Chemistry Department Chemistry Institute, Araraquara-SP UNESP - Sao Paulo State University Clinical Analysis Department School of Pharmaceutical Sciences, Araraquara-SP

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-05Bitstream added on 2014-06-13T19:27:31Z : No. of bitstreams: 1 vellosa_jcr_me_arafcf.pdf: 1352402 bytes, checksum: 1fb4f8a94f0db92c39104b3590886eff (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Universidade Estadual Paulista (UNESP) A relevância da pesquisa de produtos naturais proporciona a descoberta de novos fármacos e o estudo de plantas que apresentem substâncias que possam agir sobre as diferentes espécies oxidantes geradas em nosso organismo torna-se de grande importância. No estudo da avaliação do potencial antioxidante das amostras deve-se considerar que: i) um composto deve ser testado em concentrações disponíveis in vivo e ii) ao avaliar os antioxidantes, deve-se utilizar pelo menos uma espécie relevante biologicamente. Deve-se perguntar como age o antioxidante, se ele age diretamente sobre a ERO ou ele inibe a sua geração e ainda, se ele age indiretamente regulando defesas antioxidantes endógenas. Foram avaliados extratos ou moléculas dos vegetais: Pterogyne nitens, Maytenus ilicifolia, Maytenus aquifolium, Salacia campestris, Piper gaudichaudianum, Piper crassinervium e Piper aduncum. A proposta deste trabalho é: i) avaliar a possibilidade de ação direta destas amostras sobre diferentes espécies reativas modelo e geradas em nosso organismo e ii) avaliar a inibição da mieloperoxidase, enzima envolvida em diferentes patologias. Observamos um grande potencial das plantas estudadas como fonte de compostos com ação antioxidante. Destacam-se as frações hidroalcoólicas e hexano-acetato da M. ilicifolia e M. aquifolium sobre o ânion superóxido. Além disso, identificou-se a existência de possíveis inibidores da MPO nos diferentes vegetais estudados, destacando-se quercetina (IC50=1,35mg/mL), 3-HexAcOEt (IC50=1,5mg/mL), 2-Hid (IC50=2,2mg/mL), 3-Hid (IC50=3,1mg/mL), S-3 (IC50=3,1mg/mL), 2-HexAcOEt (IC50=4,4mg/mL), 1C-BuOH (IC50=6,4mg/mL) e 4EtOH (IC50=8,9mg/mL). Por fim, caracterizou-se o tipo de inibição promovida pela S-3 (1,4-diidroxi-2-(3',7'-dimetil-1'-oxo-2'-E-6'-octadienil) benzeno) e pela quercetina como sendo do tipo mista. Phagocytes, mainly polimorphonuclear neutrophils leucocytes, yield superoxide radical (O2 -), expending NADPH. By this process, many reactive species, such as HOCl, HO, ONOO -, are generated. These oxidants are made to fight microorganisms, but they are involved in many pathologies. Reactive species and free radicals generation are equilibrated by antioxidants. The search of new medicines turns natural products research an important option for discovering molecules with different biological activities. Natural products research is relevant for discovering new medicines and molecules able to fight oxidant species. In evaluating the antioxidant potential of substances, it is important considerate: i) a compound should be tested at concentrations achievable in vivo and ii) in assaying putative antioxidants, one should use biologically relevant ROS. It is important to ask if it works directly over the oxidant or it works by regulating endogenous antioxidants defenses. In this work, Pterogyne nitens, Maytenus ilicifolia, Maytenus aquifolium, Salacia campestris, Piper gaudichaudianum, Piper crassinervium and Piper aduncum were studied. The purpose of this work is: i) evaluate direct action of samples over different reactive species and ii) evaluate myeloperoxidase inhibition, an important enzyme involved in different pathologies. We observed that different evaluated plants are efficient sources of antioxidants. Moreover, different samples were able to inhibit myeloperoxidase, detaching quercetin (IC50=1,35mg/mL), 3-HexAcOEt (IC50=1,5mg/mL), 2-Hid (IC50=2,2mg/mL), 3-Hid (IC50=3,1mg/mL), S-3 (IC50=3,1mg/mL), 2-HexAcOEt (IC50=4,4mg/mL), 1C-BuOH (IC50=6,4mg/mL) and 4EtOH (IC50=8,9mg/mL). Besides, quercetin and S-3 (1,4-dihydroxi-2-(3',7'-dimethyl- 1'-oxo-2'-E,6'-octadienyl) benzene) were characterized as mixed MPO inhibitors.

As leucemias são um grupo de doenças cuja manifestação em comum é a proliferação maligna de células hematopoiéticas na medula óssea; o clone leucêmico usualmente substitui a população celular normal da medula óssea. O presente trabalho teve como objetivos: 1) padronizar a reação citoquímica da mieloperoxidase, auxiliando no diagnóstico exato das leucemias agudas, acelerando assim o tratamento e encaminhamento médico; 2) padronizar a leitura dos esfregaços com leucocitose e desvio à esquerda, com relação à observação de eosinófilos, basófilos, eritroblastos, promielócitos e mielócitos, para o diagnóstico diferencial de LMC; 3) análise da incidência de Leucemia Mielóide Aguda e Crônica nos pacientes do Laboratório da Santa Casa de Misericórdia de Araraquara – SP. Foram analisadas amostras de sangue de 54 pacientes da Santa Casa de Misericórdia de Araraquara-SP, cujo hemograma se apresentou alterado (presença de blastos ou número elevado de leucócitos com células imaturas). Para as amostras que apresentaram blastos em número aumentado, realizouse a reação citoquímica da mieloperoxidase. Para as amostras com leucocitose os critérios hematológicos avaliados foram: presença de eosinófilos, basófilos, mielócitos, eritroblastos, e trombocitose. Dos 46 casos de leucocitose avaliados, identificamos que 59 % das amostras tratavam-se de reação leucemóide e 41 % de LMC. A padronização da reação da mieloperoxidase foi possível, mediante a análise de 8 casos com suspeita de Leucemia Aguda, dentre os quais 6 apresentaram positividade para a reação. Após a realização do trabalho chegamos a conclusão de que é importante realizar um hemograma mais consciencioso no caso de leucocitose, avaliando sempre os critérios discutidos no trabalho. A padronização da reação citoquímica da mieloperoxidase nos casos suspeitos de leucemia aguda mostrou-se muito fácil podendo ser utilizada em qualquer laboratório de rotina, o que auxiliaria no diagnóstico diferencial de leucemias agudas mielóides e linfóides, aumentando assim a chance de sobrevida do paciente.

OBJETIVOS: os objetivos deste estudo foram avaliar a celularidade e os mediadores inflamatórios no lavado nasal (LN) e a extensão de comprometimento da mucosa dos seios paranasais, em atópicos assintomáticos para sinusite. MÉTODOS: foram estudados 48 atópicos com rinite alérgica (RA), 33/48 com asma; 13 crianças não atópicas constituíram o grupo controle. Foram excluídos os casos com sinusite aguda, crônica ou recorrente. A extensão de lesão da mucosa paranasal, avaliada por tomografia computadorizada (TC) coronal dos seios da face (SF), foi graduada por escore padronizado (0-30). Escore maior ou igual a 12 indicava comprometimento extenso da mucosa dos SF. O LN foi obtido para quantificar a celularidade total e diferencial. Uma alíquota do sobrenadante foi usada para dosagem de mediadores inflamatórios: Interleucina-8 (IL-8), Mieloperoxidase (MPO), Proteína catiônica eosinofílica (ECP). A albumina foi usada como marcador de permeabilidade vascular. Estas determinações foram realizadas em amostras do fluido nasal (FN) de todos os atópicos e em 6/13 dos casos-controle. Foram realizados nos 3 grupos hemograma e espirometria. RESULTADOS: o comprometimento da mucosa paranasal foi extenso em 7/33 (21%) dos asmáticos (Grupo I), 2/15 (13%) dos pacientes com RA (Grupo II). No grupo controle (Grupo III) o maior escore de TC foi 7. A contagem total de células e de eosinófilos/ml e a concentração de albumina do FN foram maiores entre asmáticos com escore de TC acima de 12. O nível de IL-8, o número de neutrófilos e de células epiteliais/ml no FN foram semelhantes nos 3 grupos. Os atópicos (n=48) apresentaram uma correlação positiva entre escore de TC, eosinofilia periférica, número de eosinófilos/ml e concentração de ECP no FN. Houve uma associação entre o número de neutrófilos e concentrações de IL-8 e MPO e entre IL-8 e eosinófilos. CONCLUSÕES: em asmáticos assintomáticos para sinusite, o comprometimento extenso da mucosa paranasal está associado à eosinofilia periférica e do lavado nasal e à ativação celular. A infiltração e a ativação de neutrófilos não estavam relacionadas com a maior extensão de lesão da mucosa paranasal. OBJECTIVE: The aims of this study were to evaluate inflammatory cells, the profile of inflammatory mediators in nasal lavage (NL), and the involvement of the paranasal mucosa in atopic infants with no symptoms of sinusitis. METHODS: 48 atopic patients with allergic rhinitis (AR), and 33/48 patients with asthma were studied; the control group consisted of 13 nonatopic children. Those individuals with acute, chronic or recurrent sinusitis were excluded. The involvement of the paranasal mucosa was assessed by coronal computed tomography (CT) and graded by a standard protocol (0-30). A CT score greater than or equal to 12 indicated extensive involvement. Nasal lavage was used to quantify total and differential nasal cell counts. An aliquot of the supernatant was used for determining inflammatory mediators: interleukin-8 (IL-8), myeloperoxidase (MPO), and eosinophil cationic protein (ECP). Albumin was used as a marker for increased vascular permeability. These measurements were performed on all of the atopic patients and in 6/13 patients in the control group. The three groups were submitted to spirometry and complete blood cell count. RESULTS: Extensive involvement of the paranasal mucosa was observed in 7/33 (21%) of asthmatic patients (Group I) and 2/15 (13%) of those with allergic rhinitis (Group II). The highest CT score in the control group (Group III) was 7. Total cell and eosinophil count/ml and albumin concentration in nasal fluid were higher in asthmatic patients whose CT score was greater than 12. Interleukin-8 concentration, number of neutrophils and epithelial cells/ml in nasal fluid were similar in the three groups. A positive correlation between CT score, peripheral blood eosinophilia, number of eosinophils/ml and eosinophil cationic protein concentration was found in the nasal fluid of atopic children (n=48). There was an association between number of neutrophils and titers of interleukin-8 and myeloperoxidase, and between interleukin-8 and eosinophil count. CONCLUSIONS: In asthmatic patients with no symptoms of sinusitis, the extensive involvement of the paranasal mucosa is associated with blood and nasal lavage eosinophilia and cellular activation. Neutrophil infiltration and activation were not related to increased involvement of the paranasal mucosa.

Este estudo teve como objetivo avaliar a infiltração de leucócitos e a imunorreatividade antimieloperoxidase em granulócitos da mucosa e submucosa do intestino grosso de equinos submetidos à sobrecarga dietética com amido. Oito equinos adultos foram distribuídos aleatoriamente em três tratamentos: Tratamento I (Controle) (n = 2), equinos eutanasiados sem sobrecarga com amido; Tratamento II (n = 3) e III (n = 3), equinos submetidos à sobrecarga com amido, com infusão gástrica de 17,6 g de amido/kg de peso vivo e eutanasiados após 24 e 36 horas, respectivamente. Observou-se apenas afluxo de neutrófilos (leucocitoestase) nos vasos sanguíneos da mucosa e submucosa intestinal. Eosinófilos foram as células predominantes na mucosa e submucosa em todos os equinos, independente da sobrecarga dietética, com grau de infiltração de leve a moderada. Infiltração por linfócitos também foi observado em todos os equinos, porém com menor intensidade quando comparado aos eosinófilos. Congestão, edema e dilatação de vasos linfáticos foram as principais alterações circulatórias observadas, com maior intensidade na submucosa. Maior imunorreatividade para anticorpos antimieloperoxidase foi observado na mucosa e submucosa dos equinos 36 horas após a sobrecarga. Equinos submetidos à sobrecarga dietética com amido apresentam resposta inflamatória intestinal com predominância de eosinófilos, leucocitoestase e alterações circulatórias variando de discreta a moderada.

Sucralfate enemas present good results in the treatment of colitis, however the mechanism of action of the drug is not yet fully clarified. Objective: To evaluate the anti-inflammatory and antioxidant effects of sucralfate enemas in diversion colitis model. Method: Thirty-six Wistar rats underwent intestinal bypass by end colostomy in the descending colon and distal mucous fistula. The animals were divided into 3 experimental groups according to the daily dose of enemas received containing 0.9% SF, sucralfate enemas or sucralfate enemas 1 g/kg/day or 2 g/kg/day. Each group was divided into two subgroups according to euthanasia to be performed 2–4 weeks after derivation. The tissue grade of inflammation was assessed histologically, and neutrophil infiltration by the tissue expression of myeloperoxidase (MPO) identified by immunohistochemistry and quantified by computerized morphometry. Oxidative stress was measured by tissue levels of malondialdehyde (MDA). To compare the results the Student's t test variance was used, and also the variance by ANOVA test, establishing a level of significance of 5% (p