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Los insecticidas piretroides presentan una alta gama de usos. Ciflutrin, un piretroide de Tipo II, es ampliamente utilizado en agricultura, en el control de plagas, para la salud humana y animal, siendo su principal órgano diana el sistema nervioso, específicamente las proteínas canales de voltaje de sodio. A pesar de ser considerados por causar baja toxicidad, estudios recientes han demostrado su efecto neurotóxico en mamíferos pequeños. Es por esos motivos, que este estudio tuvo como objetivos evaluar la distribución del piretroide ciflutrin sobre tres regiones cerebrales de ratas (hipocampo, cuerpo estriado e hipotálamo), y su efecto a dosis oral de 1, 5, 10 y 20 mg/kg p.c. por 6 días, sobre la expresión de genes relacionados a inflamación (NFκB, TNF-α e IL-6) y apoptosis (Bax, Bcl2, Casp-3), y sobre el estatus oxidativo en las mismas regiones cerebrales. Se pudo determinar que ciflutrin se distribuye ampliamente en las tres regiones estudiadas, siendo la mayor Cmax en hipotálamo, luego en cuerpo estriado e hipocampo. También en hipotálamo se encuentra la mayor razón AUCtejido/AUCplasma tras dosis oral de ciflutrin. Luego de administrar ciflutrin está fue eliminada (semivida de eliminación) de tejido nervioso en un rango entre 15-24 h. Asimismo, en hipocampo ciflutrin a dosis oral de 5, 10 y 20 mg/kg p.c. produjo un aumento significativo sobre la expresión de Bax y Casp-3, también hubo un incremento de NFκB sólo a dosis de 20 mg/kg; mientras que, a las dosis de 10 y 20 mg/kg pc se produjo un aumento deTNFα e IL6. En cuerpo estriado se produjo un aumento significativo sobre la expresión de Bax, Casp-3 e IL6. En Hipotálamo, ciflutrin sólo produjo un aumento significativo en genes relacionados a inflamación. Respecto de la actividad de las enzimas superóxido dismutasa (SOD) y glutatión reductasa (GR), se observó disminución de sus actividades a la dosis más alta de ciflutrin en hipocampo y cuerpo estriado. Nuestros resultados indican que ciflutrin produjo efectos citotóxicos sobre el sistema nervioso central de ratas que pueden contribuir al espectro general de neurotoxicidad causada por este piretroide, y que deben ser considerados como factores que contribuyen a la presentación de enfermedades neurodegenerativas.

La Escherichia coli puede causar diarreas y producir la muerte en crías y alpacas de temprana edad. Por ello, el presente estudio tuvo como objetivo evaluar una vacuna recombinante en un modelo murino contra Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC). Para ello, se detectaron genéticamente los patotipos y tipos fimbriales de E coli, en aislados de alpacas con cuadros entéricos y fatales, obteniendo 42/226 (18.58%) aislados patogénicos, de los cuales el (24/42) 57% poseen el tipo fimbrial F17, cuya subunidad de la adhesión fue insertada y expresada en BL21 (pET-9a). Luego, se evaluó la inmunogenicidad de F17 y el vector en células mononucleares periféricas de sangre (PBMC) de alpaca, la cual estimuló la producción de citoquinas de Th1/Th2, predominantemente IFN-γ e IL-4. Posterior a ello, se inmunizó ratones BALB/c por vía oral con BL21-F17+, se recolectó sangre y heces para la medición de anticuerpos IgG e IgA, respectivamente, a los 14, 28 y 42 días, obteniendo niveles serológicos significativamente mayores de IgG total (DO:1.115); control (

Señala que la tuberculosis (TB) es una de las enfermedades más importantes en salud pública en el mundo y en el Perú tiene una notable importancia por el número de casos de TB registrados y el incremento de casos drogorresistentes en los últimos años. Se realizó el análisis genómico comparativo de tres genomas de Mycobacterium tuberculosis que mostraban características fenotípicas de sensibilidad a drogas (INS-SEN), multidrogorresistente (INS-MDR) y extremadamente resistente (INSXDR). Se determinó que los aislados de INS-MDR y de INS-XDR difieren en 6.1% SNPs, mientras que el análisis comparativo del genoma del aislado INS-SEN con la cepa INS-MDR y la cepa INS-SEN con INS-XDR difieren en 50.2% y 50.3% respectivamente. Las variaciones en el genoma de M. tuberculosis en los aislados INS-SEN, INS-MDR y INS-XDR con más frecuencia pertenecen a la familia de genes Q (biosíntesis, catabolismo y transporte de metabolitos secundarios) y genes L (recombinación, replicación y reparación del ADN). Se concluye que el aislado sensible y drogorresistentes que incluye MDR y XDR no se encuentran relacionados estrechamente. Tesis

La salmonelosis es considerada la enfermedad más grave que afecta a los cobayos, causando altas tasas de mortalidad y morbilidad, principalmente por los serovares Typhimurium y Enteritidis. Para que se lleve a cabo la infección, debe existir la expresión de diversos grupos de genes que permitan a la bacteria adherirse, multiplicarse y sobrevivir a las defensas del hospedero. El objetivo del estudio fue caracterizar molecularmente aislados de Salmonella enterica provenientes del cepario del Laboratorio de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Se utilizaron 80 aislados, 70 obtenidos de cobayos infectados naturalmente y cinco de clínicamente sanos, procedentes de granjas de producción intensiva ubicadas en Lima y Junín, Perú. Se utilizó la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) múltiple para la detección de genes invA, prot6E y fliC, correspondientes al género Salmonella, serovar Enteritidis y Typhimurium, respectivamente. También se detectaron los genes de virulencia tolC, sitC, spiA, sopB, lpfC, sifA, spvB, pefA y sipB, necesarios para producir la enfermedad. Finalmente, se evaluó la variabilidad genética mediante la técnica de ERIC-PCR utilizando los primers ERIC1R y ERIC2. Para evaluar la diversidad de los aislados, se realizó el análisis de agrupamiento para generar un dendrograma usando el programa bioinformático NTSYSpc 2.10, empleando el método UPGMA basado en el coeficiente de similaridad de DICE. Se identificó la serovariedad Typhimurium y los nueve genes de virulencia en el 100% de los aislados. La evaluación de los perfiles electroforéticos obtenidos por la técnica de ERIC-PCR demostró patrones de bandas de ADN similares con una homogeneidad mayor al 90%, lo que sugiere una dispersión clonal de los aislados. La presencia de cepas de Salmonella Typhimurium con una amplia variedad de genes de virulencia constituye un riesgo potencial para la producción de cobayos y una fuente de contaminación alimentaria o por contacto al humano. Tesis

Evalúa la expresión relativa de las citoquinas involucradas en la respuesta inmune Th1 y Th2 en 21 cuyes (Cavia porcellus) inoculados experimentalmente con una cepa aislada de campo de Salmonella Typhimurium a una dosis de 102 UFC/ml vía intraperitoneal y 7 cuyes inoculados con la misma cepa inactivada (grupo control). Se utilizó animales destetados de 15-30 días de edad, sin importar sexo y clínicamente sanos, todos mantenidos en las mismas condiciones en el bioterio de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Se agruparon los cuyes en 4 pozas (A, B, C y D) y cada poza con 7 animales cada uno, además se colocaron 2 cuyes centinelas no inoculados. La toma de muestras de sangre y tejidos se realizó lo días 1, 3, 5, 7, 9, 15 y 30 postinoculación, siendo colectados 3 individuos del grupo tratamiento y 1 del grupo control. El aislamiento de los leucocitos sanguíneos se realizó por la técnica del gradiente de Ficoll y la extracción del ARN total de éstas células mediante el uso de Trizol. El ADNc fue sintetizado a partir de las muestras de ARN y luego se desarrolló la PCR en tiempo real con “primers” específicos para las citoquinas en estudio. La expresión relativa fue determinada por el método comparativo 2-ΔΔCt a fin de evaluar la expresión de los ARNm de las citoquinas analizadas con respecto al calibrador (cuy sano), usando como gen constitutivo de referencia al GAPDH. Las expresiones de los genes de todas las citoquinas mostraron un aumento con respecto a los calibradores y un incremento con mayor intensidad con respecto a las expresiones de los cuyes del grupo control; además, una cinética ascendente con respecto a los días post-inoculación, los primeros días hubo predominio de las expresiones del perfil Th1, posteriormente ambas aumentan con predominio final de las citoquinas de la respuesta inmune Th2. El análisis histopatológico y el aislamiento se realizó para confirmar la infección y los animales mostraron las lesiones características de salmonelosis, siendo el hígado el órgano afectado con mayor frecuencia. Perú. Ministerio de la Producción. Programa Nacional de Innovación para la Competitividad y Productividad (Innóvate Perú). Fondo para la Innovación, la Ciencia y la Tecnología (FINCyT) Tesis

Utiliza el enfoque Pan-Genómico de la vacunología reversa con el objetivo de obtener en E. coli un candidato vacunal recombinante representativo del pangenoma de Mannheimia haemolytica, que sea “prometedor” para brindar una protección heteróloga contra la pasteurelosis neumónica en alpacas, y poder así ser empleado en el desarrollo futuro de vacunas de tercera generación que ayuden a reducir y a controlar la enfermedad. Tesis

El documento digital no refiere un asesor Busca determinar el perfil inmunogénico Th1 y Th2 de una proteína de membrana externa P6-like recombinante de P. multocida aislada de casos neumónicos fatales en alpacas obtenida mediante tecnología recombinante, donde fue seleccionada la proteína in silico, clonada, expresada y purificada, para luego ser enfrentados con PBMC de alpaca en una concentración de 10ηg por cultivo. Estos cultivos fueron colocados a 38°C durante las 3, 6, 9, 12, 18, 24, 48 y 72 horas. Posteriormente se extrajeron el ARNm de cada cultivo y mediante la prueba de RT-PCR en Tiempo Real se observaron los niveles de expresión de citoquinas de perfil Th1 y Th2. Este estudio tiene como objetivo observar el perfil citocínico que estimula la P6-Like recombinante. Esta evaluación in vitro forma parte de la elaboración de una vacuna de última generación para la prevención de neumonías pasteurelósicas en crías de alpacas. Tesis

Caracteriza molecularmente 24 aislados de P. multocida provenientes de alpacas con neumonía, identificados por pruebas bioquímicas y mediante la prueba de PCR a travez de la amplificando del gen kmt1 presente solo en esta especie. Posteriormente se realizó la tipificación capsular mediante la técnica de PCR múltiple obteniéndose que todos los aislados pertenecen al tipo capsular A. La tipificación en base al antígeno LPS, el cual permite la clasificación de P. multocida en 16 serovares agrupados en 8 genotipos, resultó en que los aislados de este estudio pertenecieron al genotipo LPS L6, correspondiente a los serovares 10, 11, 12 y 15. Además, se analizó la presencia de 4 genes codificantes de factores de virulencia (toxA, tbpA, pfhA y hgbB), detectándose en todos los aislados los genes toxA (100%) y tbpA (100%). Para evaluar la diversidad entre los aislados, se emplearon las técnicas BOX-PCR y ERIC-PCR, los cuales fueron analizados por el programa NTSYSpc 2.10 para el desarrollo de los dendogramas mostrando baja diversad entre los aislados de alpaca, corroborado por el agrupamiento de 23/24 aislados en un único cluster. Tesis

Describe el aislamiento y caracterización molecular de un nuevo flavivirus únicamente de mosquito, aislado de Culex (Melanoconion) occossa colectados en 2009 de un área urbana de Iquitos, Perú, ubicada en la cuenca del Amazonas, en la región noreste del Perú. La evidencia del Flavivirus es detectada mediante ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI) en sobrenadante de cultivo celular de las células infectadas C6/36 usando anticuerpos policlonales grupo de Flavivirus y confirmada por RT-PCR. En comparación por pares de las secuencias de la región ENV, la más alta de nucleótidos (47,4%) y de aminoácidos (39,8%) la identidad se observa en el virus Nounané (NOUV). En comparación por pares de la región NS5, la identidad de nucleótidos más alta se observa en el virus Spondweni (65,9%), el virus de Iguape (IGUV; 65,7%) y el virus de Kedougou (65,6%); sin embargo, en el nivel de aminoácidos, la más alta identidad en pares de bases se observa en IGUV (69,8%), virus Naranjal (69,6%) y el virus Bussuquara (69,3%). El análisis filogenético utilizando ENV parcial y secuencias de aminoácidos NS5 revela que este Flavivirus forma un clado con NOUV. Para investigar la gama de huéspedes del nuevo Flavivirus, se inoculan una variedad de células de mamíferos (Vero 76, Vero E6, BHK, LLCMK y MDCK) con el tercer pasaje del aislamiento C6/36 y monitorea el efecto citopático (EC). No se detecta EC, y todas las líneas de células de mamífero son negativas para el antígeno Flavivirus por IFI y ARN Flavivirus por RT-PCR luego de catorce días de incubación. Propone que este Flavivirus genéticamente diferente sea llamado Nanay Virus (NANV), debido a la zona de Iquitos, Perú, donde fue detectado por primera vez. Tesis

La enterotoxemia, causada por el Clostridium perfringens, es la enfermedad infecciosa más importante que afecta a las alpacas, debido a que ocasiona elevadas tasas de mortalidad neonatal de hasta 70%. Recientes estudios han sugerido la participación de la Cp-PLC (C. perfringens fosfolipasa C) como factor de virulencia responsable del cuadro enterotoxemico en alpacas y otras especies domesticas. El presente estudio evaluó las características toxigénicas de la Cp-PLC y de sobrenadantes de diferentes aislados de C. perfringens obtenidos de casos de enterotoxemia en alpacas relacionándolos con sus niveles de producción de Cp-PLC. El protocolo de purificación de Cp-PLC mostró ser exitoso, mostrando su comportamiento como una enterotoxina incapaz de generar lesiones entéricas. Asimismo, los aislados de C. perfringens analizados evidenciaron distintas características toxigénicas independientes de la presencia de Cp-PLC. Al parecer, la Cp-PLC no seria un factor esencial del C. perfringens en la producción de lesiones entéricas en casos de enterotoxemias en alpacas. Palabras Claves: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenico --- Enterotoxemia caused by Clostridium perfringens, causes a mortality neonatal rate up to 70%, this is why it is considered as the most important infections disease. Recent studies has suggested that Cp-PLC (Clostridium perfringens phospholipase C) is a main virulence factor responsible of the enterotoxemic lesions found in alpacas and other domestic animals. This study evaluated the toxigenic characteristics of Cp-PLC and of supercultures of C. perfringens isolates from enterotoxemia in alpacas associated with their levels of Cp-PLC production. The Cp-PLC purification protocol used was successful, showing that Cp-PLC as an enterotoxin enteric unable to cause injury. Similarly, C. perfringens isolates analyzed showed different toxigenic characteristics independently of the Cp-PLC production. Apparently, Cp-PLC does not be a essential factor from C. perfringens in the production of enteric lesions in cases of enterotoxemia in alpacas. Key Word: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenic. Tesis