23 results on '"Marina Alegre, María Luisa"'
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2. In vitro assessment of the bioavailability of bioactive non-extractable polyphenols obtained by pressurized liquid extraction combined with enzymatic-assisted extraction from sweet cherry (Prunus avium L.) pomace
- Author
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Domínguez Rodríguez, Gloria, Marina Alegre, María Luisa, Plaza del Moral, Merichel, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química
- Subjects
Bioavailability ,Plant Extracts ,Sweet cherry pomace ,Biological Availability ,Polyphenols ,General Medicine ,Química ,Prunus avium ,Antioxidants ,Analytical Chemistry ,Chemistry ,Phenols ,Pressurized liquid extraction ,Non-extractable polyphenols ,Chromatography, High Pressure Liquid ,Enzyme-assisted extraction ,Food Science - Abstract
In vitro digestion and absorption simulation processes of non-extractable polyphenols (NEPs) obtained by pressurized liquid extraction combined with enzymatic-assisted extraction with Promod enzyme (PLE-EAE) from the residue of conventional extraction of sweet cherry pomace were studied. In general, total phenolic and proanthocyanidin contents decreased in each phase of the digestion. However, the antioxidant capacity increased when the digestion process progressed. In addition, the highest total phenolic and proanthocyanidin contents and antioxidant capacity were obtained in the absorbed fraction. NEPs from PLE-EAE extract, digestive fractions, absorbed and unabsorbed fractions were analyzed by ultra-high-performance liquid chromatography coupled to electrospray ionization quadrupole Exactive-Orbitrap mass spectrometry (UHPLC-ESI-Q-Orbitrap-MS). Fifteen NEPs were identified in the intestinal fraction and five in the absorbed fraction after the digestion process. Results obtained in this study define for the first time the bioavailability of antioxidant NEPs obtained from sweet cherry pomace.
- Published
- 2022
3. Magnetic nanoparticles coated with carboxylate-terminated carbosilane dendrons as a reusable and green approach to extract/purify proteins
- Author
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Prados Nieto, Isabel María, Sánchez-Nieves Fernández, Javier, Mata de la Mata, Francisco Javier de la, Marina Alegre, María Luisa, García López, María Concepción, Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Orgánica y Química Inorgánica
- Subjects
Dendrimers ,Protein ,Solid Phase Extraction ,Proteins ,Extraction ,Química ,Silanes ,Biochemistry ,Analytical Chemistry ,Magnetics ,ProteinSustainability ,Chemistry ,Sustainability ,Carbosilane dendron magnetic nanoparticles ,Animals ,Humans ,Magnetite Nanoparticles ,Purification ,Research Paper - Abstract
Extraction/purification of proteins, at both analytical and industrial levels, is a limiting step that usually requires the use of organic solvents and involves tedious work and a high cost. This work proposes a more sustainable alternative based on the use of magnetic nanoparticles (MNPs) coated with carboxylate-terminated carbosilane dendrons. MNPs coated with first- and second-generation carbosilane dendrons and bare MNPs were employed for the extraction of proteins with different molecular weights and charges. Interaction of proteins with MNPs significantly varied with the pH, the protein, and the dendron generation (different sizes and number of charges in the periphery). Optimal dendron:protein molar ratios and suitable conditions for disrupting interactions after protein extraction were also researched. Second-generation dendron-coated MNPs showed 100% retention capability for all proteins when using acidic conditions. They were reused without losing magnetism or interaction capacity after a disruption of protein-dendron interactions with 0.2% SDS at 100 °C for 10 min. The capacity of dendron-coated MNPs was successfully applied to the recovery/purification of proteins from two food by-products, olive seeds and cheese whey. Graphical abstract Supplementary Information The online version contains supplementary material available at 10.1007/s00216-021-03794-7.
- Published
- 2021
4. Nuclear magnetic resonance to study the interacions acting in the enantiomeric separation of homocysteine by capillary electrophoresis with a dual system of γ-cyclodextrin and (R)-N,N,N-trimethyl-2-aminobutanol-bis(trifluoromethanesulfon)imidate
- Author
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Marina Alegre, María Luisa, Castro Puyana, María, Greño Ocariz, Maider, Salgado Serrano, Antonio, Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Orgánica y Química Inorgánica
- Subjects
Capillary electrophoresis ,Chemistry ,homocysteine ,Química ,NMR ,chiral ionic liquids - Abstract
doi: 10.1002/elps.201800483., The enantiomeric separation of FMOC-homocysteine by CE was investigated using γ-CD and the chiral ionic liquid (R)-N,N,N-trimethyl-2-aminobutanol- bis(trifluoromethane-sulfon)imidate (EtCholNTf2) as chiral selectors in a 50 mM borate buffer at pH 9.0. The separation of the enantiomers was achieved in 5 min with a resolution value of 0.9 when using 10 mM γ-CD. However, the enantiomeric separation did not take place when the ionic liquid was employed as sole the chiral selector. Thus, the combination of both selectors was studied, obtaining higher Rs values for FMOC-homocysteine and a reversal in the enantiomer migration order in comparison with the use of γ-CD alone in the separation buffer. Then, NMR experiments were carried out in order to explain the experimental results obtained. The NMR analyses showed the formation of an inclusion complex, being the hydrophobic group of FMOC-homocysteine inserted into the γ-CD cavity. Interactions between EtCholNTf2 and γ-CD were also observed, suggesting that the ionic liquid would also enter the cavity of the γ-CD.
- Published
- 2019
5. Cationic amine-bridge periodic mesoporous organosilica materials for off-line solid-phase extraction of phenoxy acid herbicides from water samples prior to their simultaneous enantiomeric determination by capillary electrophoresis
- Author
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Valimaña Traverso, Jesús Manuel, Morante Zarcero, Sonia, Pérez Quintanilla, Damián, García González, María Ángeles, Sierra Alonso, Isabel, Marina Alegre, María Luisa, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química
- Subjects
Capillary electrophoresis ,Solid-phase extraction ,Chemistry ,Periodic mesoporous organosilica ,Cationic amine-bridged ligands ,Química ,Simultaneous enantioseparation ,Chiral phenoxy acid herbicides - Published
- 2018
6. Effect of the combined use of gamma-cyclodextrin and a chiral ionic liquid on the enantiomeric separation of homocysteine by capillary electrophoresis
- Author
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Greño Ocariz, Maider, Marina Alegre, María Luisa, Castro Puyana, María, Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Orgánica y Química Inorgánica
- Subjects
Capillary electrophoresis ,Chemistry ,cyclodextrins ,enantioseparation ,homocysteine ,Química ,chiral ionic liquids - Abstract
doi: 10.1016/j.chroma.2018.07.023., The enantioseparation of the non-protein amino acid homocysteine by CE was investigated in this article using seven neutral cyclodextrins and five chiral ionic liquids as chiral selectors. Using a previous derivatization step with FMOC and the subsequent separation under neutral conditions, homocysteine enantiomers were only separated when gamma-CD or (R)-N,N,N-trimethyl-2-aminobutanol-bis(trifluoromethane-sulfon)imidate (EtCholNTf2) were employed as sole chiral selectors in the separation buffer. On the one hand, gamma-CD gave rise to the enantiomeric separation in 10 min with a resolution value of 1.9, whereas EtCholNTf2 let to obtain a resolution value of 1.4 in more than 50 min. Then, the evaluation of the combined use of both selectors was also carried out, resulting in a considerable increase in the Rs. The best enantioseparation for homocysteine was obtained when 10 mM EtCholNTf2 was added to 50 mM phosphate buffer (pH 7.0) containing 2 mM gamma-CD. In an attempt to discriminate specific chiral cation effect from the salt effect, the influence of adding LiNTf2 to the separation medium was also evaluated, resulting in lower resolution values for homocysteine when compared to those achieved with the addition of EtCholNTf2, indicating a synergistic effect between EtCholNTf2 and gamma-CD. Interestingly, the enantiomer migration order changed depending on the chiral selector used. When EtCholNTf2 or gamma-CD were used as sole chiral selectors, D-enantiomer was the first-migrating enantiomer. However, an inversion in the migration order was observed when both selectors were employed in a dual system being the L- enantiomer the first-migrating one.
- Published
- 2018
7. Isolation and characterization of peptides with antihypertensive activity in foodstuffs
- Author
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Puchalska , Patrycja Anna, García López, M. Concepción, Marina Alegre, María Luisa, and Univresidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química
- Subjects
enzyme ,Chemistry ,bioactivity ,chromatography ,Química ,protein ,peptide ,ACE - Abstract
Hypertension is one of the main causes of cardiovascular diseases. Synthetic drugs inhibiting ACE activity present high effectiveness in the treatment of hypertension but cause undesirable side effects. Unlike these synthetic drugs, antihypertensive peptides do not show any adverse effect. These peptides are naturally present in some foods and since hypertension is closely related to modern diet habits, the interest for this kind of foods is increasing. Different methods for the purification, isolation, and characterization of antihypertensive peptides in foods have been developed. Nevertheless, there is no revision work summarizing and comparing these strategies. In this review, in vivo and in vitro pathways to obtain antihypertensive peptides have been summarized. The ACE mechanism and the methodologies developed to assay the ACE inhibitory activity have also been described. Moreover, a comprehensive overview on the isolation, purification, and identification techniques focusing on the discovery of new antihypertensive peptides with high activity has been included. Finally, it is worthy to highlight that the quantitation of antihypertensive peptides in foods is a new trend since genotype and processing conditions could affect their presence. Analytical methodologies using mass spectrometry constitute an interesting option for this purpose.
- Published
- 2015
8. Sensitive chiral analysis by CE: An update. Review
- Author
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Sánchez Hernández, Laura, Crego Navazo, Antonio Luis, Marina Alegre, María Luisa, García Ruiz, Carmen, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Detection sensitivity ,Ciencia ,CIENCIA ,Science ,In-capillary preconcentration ,Chemistry, analytic and technical ,Química analítica e industrial ,SCIENCE ,Chiral analysis - Abstract
A general view of the different strategies used in the last years to enhance the detection sensitivity in chiral analysis by CE is provided in this article. With this purpose and in order to update the previous review by García-Ruiz et al., the articles appeared on this subject from January 2005 to March 2007 are considered. Three were the main strategies employed to increase the detection sensitivity in chiral analysis by CE: (i) the use of off-line sample treatment techniques, (ii) the employment of in-capillary preconcentration techniques based on electrophoretic principles, and (iii) the use of alternative detection systems to the widely employed on-column UV–Vis absorption detection. Combinations of two or three of the above-mentioned strategies gave rise to adequate concentration detection limits up to 10-10 M enabling enantiomer analysis in a variety of real samples including complex biological matrices.
- Published
- 2008
9. Characterization and differentiation of diverse transgenic and nontransgenic soybean varieties from CE protein profiles. Research article
- Author
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García Ruiz, Carmen, García López, María Concepción, Cifuentes Gallego, Alejandro, Marina Alegre, María Luisa, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Ciencia ,Pigmented soybean ,Transgenic soybean ,Science ,CIENCIA ,fungi ,Chemistry, analytic and technical ,food and beverages ,Química analítica e industrial ,SCIENCE ,Protein profiles - Abstract
Nowadays, soybeans are commercialized in a wide variety of colors and tones. Moreover, some pigmented seeds are being commercialized as soybeans while, on other occasions, these seeds are labeled as mung beans, azuki beans or soybean frijoles generating confusion on their identity. In this work, CE has been applied for the first time for the characterization and differentiation of different pigmented beans commercialized as soybeans. Other seeds commercialized as azuki, mung green soybeans or soybean frijoles were also analyzed. Borate buffer (at pH 8.5) containing 20% v/v ACN was used as the separation media and solution containing ACN/water (75:25 v/v) with 0.3% v/v acetic acid was used to solubilize the proteins from the samples. A 50 cm bare fused-silica capillary was employed for obtaining adequate separations in about 12 min. The CE protein pattern observed for yellow soybeans was different from that corresponding to green and red soybeans. The seeds commercialized as black soybean presented electropherograms identical or similar to those yielded by the yellow seeds with the exception of the sample labeled as black soybeans frijoles that presented a totally different pattern. In addition, CE protein profiles obtained for azuki and mung green soybeans were very similar to those corresponding to red soybeans and green soybeans, respectively. Finally, the CE method was also applied to differentiate transgenic and nontransgenic soybean varieties. Discriminant analysis, using several protein peak areas as variable, was used to successfully classify these samples.
- Published
- 2007
10. Enantioselective separation of azole compounds by EKC. Reversal of migration order of enantiomers with CD concentration: research article
- Author
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Castro Puyana, María, Crego Navazo, Antonio Luis, Marina Alegre, María Luisa, García Ruiz, Carmen, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Ciencia ,EKC ,Science ,CIENCIA ,Chemistry, analytic and technical ,Química analítica e industrial ,Azole compounds ,SCIENCE ,Apparent binding constants ,Enantioseparation - Abstract
The enantioselective separation of a group of six weak base azole compounds was achieved in this work using EKC with three neutral beta-CDs as chiral selectors. The native beta-CD and two other beta-CD derivatives with different types and positions of the substituents on the CD rim ((2-hydroxy)propyl-beta-CD (HP-beta-CD) and heptakis-2,3,6-tri-O-methyl-beta-CD (TM-beta-CD)) were employed. Apparent binding constants for each pair compound-CD were determined in order to study analyte-CD interactions. The best enantiomeric resolutions for miconazole, econazole, and sulconazole were observed with HP-beta-CD whereas for the separation of the enantiomers of ketoconazole, terconazole, and bifonazole, TM-beta-CD was the best chiral selector. The enantioseparations obtained were discussed on the basis of the structure of the compounds taking into account that inclusion into the hydrophobic CD cavity occurred through the phenyl ring closer to the azole group. In addition, a change in the migration order for the enantiomers of two of the compounds studied (ketoconazole and terconazole) with the concentration of HP-beta-CD was observed for the first time., The authors thank the Ministerio de Ciencia y Tecnología and the Ministerio de Educación y Ciencia (Spain) for research projects BQU2003-03638 and CTQ2006-03849/BQU, respectively. Authors also thank Johnson & Johnson (Beerse, Belgium) for the kind gift of terconazole racemate and pure 2R,4S-enantiomer of the ketoconazole. Carmen García-Ruiz thanks the Ministerio de Ciencia y Tecnología (Spain) for the Ramón y Cajal program (RYC-2003-001). María CastroPuyana thanks the University of Alcalá for her predoctoral grant
- Published
- 2007
11. Sensitive chiral analysis by capillary electrophoresis. Review
- Author
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García Ruiz, Carmen, Marina Alegre, María Luisa, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Ciencia ,Detection sensitivity ,Offline and online sample treatment techniques ,Isotachophoresis ,Stacking ,Science ,CIENCIA ,Chemistry, analytic and technical ,Química analítica e industrial ,SCIENCE ,Sensitive chiral analysis - Abstract
In this review, an updated view of the different strategies used up to now to enhance the sensitivity of detection in chiral analysis by CE will be provided to the readers. With this aim, it will include a brief description of the fundamentals and most of the recent applications performed in sensitive chiral analysis by CE using offline and online sample treatment techniques (SPE, liquid-liquid extraction, microdialysis, etc.), on-column preconcentration techniques based on electrophoretic principles (ITP, stacking, and sweeping), and alternative detection systems (spectroscopic, spectrometric, and electrochemical) to the widely used UV-Vis absorption detection.
- Published
- 2006
12. Development of a capillary electrophoresis method for the determination of soybean proteins in soybean-rice gluten-free dietary products. Research Article
- Author
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García Ruiz, Carmen, García González, María Ángeles, García López, María Concepción, Marina Alegre, María Luisa, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Capillary electrophoresis ,Ciencia ,CIENCIA ,Science ,Chemistry, analytic and technical ,Bakery products ,food and beverages ,Gluten-free dietary products ,Química analítica e industrial ,SCIENCE ,Rice ,Soybean proteins - Abstract
CE has been applied for the first time to the simultaneous separation of soybean and rice proteins. Treated and untreated capillaries with different effective lengths as well as separation media at different pHs were tested. For that purpose, samples and standard solutions were prepared in 25:75 ACN–water media containing 0.3% v/v acetic acid. The use of an untreated capillary of 50 cm effective length together with an 80 mM borate buffer (pH 8.5) modified with 20% v/v ACN and UV detection at 254 nm were the conditions working the best. These conditions enabled the determination of soybean proteins in gluten-free dietary commercial products elaborated with soybean protein and/or soybean flour and rice flour using the standard additions calibration method. The method was linear up to 26 mg/mL of soybean proteins, the precision (expressed as RSD) was always better than 6%, and recoveries obtained for soybean proteins when spiking commercial products were very close to 100%, The authors thank the Ministry of Science and Technology (Spain) for the research project BQU2002–01199 and F. J. Cabello-Murillo for technical assistance. C.G.-R. also thanks the Ministry of Science and Technology for the Ramón y Cajal program (RYC-2003–001).
- Published
- 2006
13. Enantiomeric separation of organophosphorus pesticides by capillary electrophoresis. Application to the determination of malathion in water samples after preconcentration by off-line solid-phase extraction
- Author
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García Ruiz, Carmen, Álvarez Llamas, Gloria, Puerta, Ángel, Blanco, Elisa, Sanz Medel, Alfredo, Marina Alegre, María Luisa, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Organophosphorus pesticides ,Capillary electrophoresis ,Ciencia ,Solid-phase extraction ,CIENCIA ,Science ,Chemistry, analytic and technical ,Malathion ,Enantiomeric separation ,Química analítica e industrial ,SCIENCE - Abstract
The separation of the enantiomers of a group of organophosphorus pesticides (OPs) has been investigated by electrokinetic chromatography (EKC) using different anionic cyclodextrins as chiral selectors. The use of a 25 mM Tris buffer (pH 7.0), 20 mM in CM-β-CD together with an applied voltage of 24 kV and a temperature of 25 °C enabled the individual enantiomeric separation of malathion and phenthoate each one into its two enantiomers, the partial separation of the enantiomers of phenamiphos and the separation of three of the four enantiomers of isomalathion. Since naled is very reactive in aqueous solutions, its enantiomeric separation achieved in about 8 min in 25 mM borate buffer at pH 9 with 10 mM CM-β-CD resulted in the observation of a broad peak due to degradation products. A preconcentration step by disk solid-phase extraction was studied and used together with the chiral EKC method developed for the enantiomeric separation of malathion in order to determine this pesticide in tap water samples spiked at the μg mL−1 level. Finally, the precision and recovery of the method was established., Authors thank the Ministry of Science and Technology (Spain) for the research project BQU2003-03638. C. García Ruiz also thanks this Ministry for the Ramón y Cajal program (RYC-2003-001)
- Published
- 2005
14. Separation of chlorinated and brominated persistent organic pollutants by pyrenyl-silica liquid chromatography
- Author
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Gómara, Belén, García Ruiz, Carmen, Marina Alegre, María Luisa, González, María José, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Ciencia ,Science ,CIENCIA ,Química analítica e industrial ,SCIENCE ,Chemistry, analytic and industrial - Published
- 2005
15. Traceability Markers to the Botanical Origin in Olive Oils
- Author
-
Montealegre, Cristina, primary, Marina Alegre, María Luisa, additional, and García-Ruiz, Carmen, additional
- Published
- 2009
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16. Determinación enantiomérica de fármacos y agroquímicos por cromatografía electrocinética. Síntesis de nuevas organosílices mesoporosas para su preconcentración por extracción en fase sólida
- Author
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Valimaña Traverso, Jesús Manuel, Marina Alegre, María Luisa, García González, Ángeles, Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química, and Universidad de Alcalá. Programa de Doctorado en Química
- Subjects
Chemistry ,Química Analítica ,Química - Abstract
El impacto de la quiralidad en los campos farmacéutico y medioambiental es muy alto debido a la diferente actividad biológica y distinto comportamiento que los enantiómeros de un compuesto quiral pueden tener. En esta Tesis Doctoral se han desarrollado nuevas metodologías analíticas para la determinación enantiomérica de fármacos (colchicina (antiurémico), duloxetina (antidepresivo), terbutalina (broncodilatador), econazol (antifúngico), propranolol (antihipertensivo), verapamil (antihipertensivo), metoprolol (antihipertensivo, infarto agudo de miocardio) y betaxolol (antihipertensivo)) y agroquímicos (los herbicidas fenoxiácidos fenoprop, mecoprop, dichlorprop, 4-CPPA, 3-CPPA y 2-PPA) por Cromatografía Electrocinética, utilizando ciclodextrinas como selectores quirales, con el fin de aplicarlas al análisis de formulaciones farmacéuticas comercializadas como enantiómero puro (en el caso de colchicina), de muestras medioambientales (todos los fármacos (excepto colchicina) y todos los herbicidas fenoxiácidos) y de medios de cultivo empleados para la evaluación de la estabilidad y toxicidad de contaminantes emergentes (duloxetina y econazol) en condiciones abióticas y bióticas (en presencia de la planta acuática Spirodela polyrhiza y del microcrustáceo Daphnia magna). Con el fin de alcanzar la sensibilidad necesaria para poder llevar a cabo la determinación individual de los enantiómeros de fármacos considerados contaminantes emergentes y de agroquímicos en muestras medioambientales, se han sintetizado y caracterizado cinco organosílices mesoporosas periódicas novedosas (cuatro de ellas sintetizadas por primera vez en esta Tesis Doctoral), tres de ellas utilizando ligandos neutros y dos más basadas en el empleo de ligandos catiónicos, y se ha demostrado su potencial como sorbentes para la extracción y preconcentración de los fármacos y agroquímicos estudiados en muestras de agua por Extracción en Fase Sólida previa a su determinación enantiomérica por Cromatografía Electrocinética con límites de detección para los métodos desarrollados del orden de los µg/L y factores de preconcentración entre 400 y 1500.
- Published
- 2019
17. Innovative chiral and omics analytical strategies by micro-separative techniques and ion mobility spectrometry
- Author
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Pérez Miguez, Raquel, Marina Alegre, María Luisa, Castro Puyana, María, Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química, and Universidad de Alcalá. Programa de Doctorado en Química
- Subjects
Espectroscopia de masas ,Chemistry ,Péptidos ,Química ,Aminoácidos ,Análisis cromatográfico - Abstract
Los retos a los que se enfrenta la Química Analítica en la actualidad, hacen necesario el desarrollo de metodologías analíticas avanzadas de alta resolución, selectividad y sensibilidad, que permitan resolver los problemas planteados por la comunidad científica, la industria y la sociedad. Uno de los campos de mayor interés es el alimentario dado el reciente aumento de la preocupación de los consumidores por asegurar la calidad y seguridad de los alimentos y por mejorar su estilo de vida. Tres de los grandes retos planteados en el campo alimentario son la determinación de compuestos quirales, la búsqueda de marcadores de calidad y seguridad de los alimentos, y la identificación de compuestos bioactivos procedentes de alimentos o residuos de la industria alimentaria. El objetivo principal de esta Tesis Doctoral ha sido desarrollar metodologías analíticas quirales y ómicas de alta selectividad y sensibilidad, basadas en el empleo de Técnicas (Micro)-Separativas y de la Espectrometría de Movilidad Iónica, que permitan afrontar los tres retos mencionados. Los enantiómeros de compuestos quirales pueden interaccionar de forma distinta en el entorno quiral de los seres vivos dando lugar a distintas actividades biológicas. Por ello, la quiralidad tiene un enorme impacto socioeconómico en el campo alimentario, dada la relevancia que tiene la determinación de la composición enantiomérica de componentes de los alimentos en el control de su calidad y seguridad. En esta Tesis Doctoral se han desarrollado un conjunto de metodologías analíticas quirales basadas en las técnicas de Electroforesis Capilar y de Espectrometría de Movilidad Iónica. En el formato de la Electroforesis Capilar, en su modo de separación de Cromatografía Electrocinética, se ha llevado a cabo la separación enantiomérica de ocho aminoácidos no proteicos utilizando ciclodextrinas como selectores quirales y la determinación enantiomérica de citrulina en suplementos alimenticios, permitiendo controlar su contenido de L-citrulina, asegurar el cumplimiento de las normativas legales que prohíben la presencia de su impureza enantiomérica (D-citrulina) e investigar el efecto del almacenamiento de dichos suplementos. El empleo de cloroformiato de 1-(9-fluorenil) etilo (FLEC) como agente derivatizante quiral y de la Cromatografía Electrocinética Micelar con un tensioactivo volátil, permitió la separación enantiomérica rápida (
- Published
- 2019
18. New monolithic chiral stationary phases for enantioseparation using Nano-LC: preparation and applications
- Author
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Xu, Dongsheng, Marina Alegre, María Luisa, Jiang, Zhengjin, Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química, Universidad de Alcalá. Programa de Doctorado en Química, and Jiang, Z.
- Subjects
Chemistry ,Análisis Cromatográfico ,Química ,Aminoácidos - Abstract
Las separaciones quirales constituyen un tema de gran interés en la actualidad debido a su alto impacto en diferentes campos como el farmacéutico, agroquímico o alimentario, entre otros. Por ello, el desarrollo de nuevas fases estacionarias quirales que permitan obtener tiempos de análisis reducidos y altas eficacias, y trabajar en distintos modos de separación, presenta un gran interés. Las columnas monolíticas han atraído un interés creciente en los últimos años debido al amplio intervalo de pH en el que pueden trabajar, las bajas presiones que se obtienen a altos flujos, la alta eficacia y sensibilidad que proporcionan, el bajo consumo de disolventes y su fácil acoplamiento a Espectrometría de Masas. Las columnas monolíticas quirales pueden dividirse en tres categorías de acuerdo a los materiales en los que se basan: columnas monolíticas basadas en sílice, columnas monolíticas basadas en polímeros y columnas monolíticas híbridas orgánico-sílices. Aunque existen muchas posibilidades para llevar a cabo con éxito una separación quiral, las técnicas de micro-separación juegan un papel crucial. Entre las distintas estrategias miniaturizadas para llevar a cabo separaciones quirales, el empleo de columnas quirales en nano-cromatografía de liquidos (nano-LC) o electrocromatografía capilar (CEC) ha atraído mucho interés. En comparación con HPLC convencional, nano-LC no solo puede disminuir considerablemente el consumo de disolventes, muestras y residuos, sino que permite también obtener mayores eficacias de separación, buena resolución y tiempos de análisis más cortos. El objetivo de esta Tesis Doctoral ha sido el desarrollo de columnas monolíticas quirales, su evaluación y su aplicación en nano-LC. Para ello, se han empleado tres selectores quirales como la vancomicina, teicoplanina y O-[2-(metacriloiloxi)-etilcarbamoil]-10,11-dihidroquinidina (MQD) para la preparación de las columnas monolíticas. Con el fin de reducir el tiempo asociado a la fabricación de columnas monolíticas basadas en polímeros orgánicos funcionalizados con vancomicina y reducir la complejidad de su preparación, en esta Tesis Doctoral se ha desarrollado una aproximación de co-polimerización basada en un solo paso. Con este fin, el derivado 2-isocianatoetil metacrilato (ICNEML) de vancomicina (ICNEML-vancomicina) se sintetizó y a continuación se co-polimerizó con el agente entrecruzante y el iniciador en un sistema porogénico binario para preparar la columna monolítica polimérica funcionalizada con vancomicina (poli(ICNEML-vancomicina-co-EDMA)). Las condiciones de polimerización se optimizaron sistemáticamente para obtener permeabilidad, eficacia de columna y resolución enantiomérica satisfactorias. La capacidad de enantioresolución de la columna monolítica optimizada se evaluó analizando una serie de fármacos quirales en los modos de fase polar orgánica y fase reversa. Asimismo, se seleccionaron las condiciones más adecuadas para llevar a cabo las separaciones enantioméricas incluyendo el tipo y concentración del disolvente orgánico, la concentración de la disolución reguladora y pH de la fase móvil, siguiendo un cuidadoso proceso de optimización. En esta Tesis Doctoral también se ha preparado una columna monolítica híbrida orgánico-sílice funcionalizada con teicoplanina mezclando el monómero de copolimerización teicoplanina-2-isocianatoetil metacrilato (Tei-ICNEML) y el iniciador en la disolución de hidrólisis de tetrametil ortosilicato (TMOS) and 3-(trimetoxisilil)-propilmetacrilato (γ-MAPS). Las condiciones de preparación y separación se optimizaron de forma sistemática y la columna monolítica óptima se aplicó a la separación enantiomérica de compuestos quirales en los modos de fase polar orgánica (POM) y de fase inversa (RPM). Con el fin de preparar una columna monolítica híbrida orgánico-sílice funcionalizada con quinidina, en esta Tesis Doctoral se seleccionaron derivados de quinidina (MQD) como selectores quirales para la preparación de dichas columnas mediante una estrategia fácil de un solo paso. Se evaluó el efecto de la composición de la fase móvil en la columna monolítica híbrida MQD-sílice optimizada en los modos de fase polar orgánica y fase reversa y se llevó a cabo la separación enantiomérica de un total de 52 aminoácidos proteicos y no proteicos N-derivatizados en los dos modos de separación. Asimismo, la columna monolítica híbrida MQD-sílice desarrollada se aplicó a la separación de aminoácidos proteicos y no proteicos por nano-LC. Con el fin de obtener una capacidad de enantioresolución satisfactoria, se investigaron distintos agentes derivatizantes y se optimizaron las condiciones cromatográficas. Se analizaron 27 aminoácidos, 19 proteicos y 8 no proteicos utilizando FMOC como agente derivatizante, se evaluaron las características analíticas del método desarrollado y se aplicó a la determinación de dos L-aminoácidos en suplementos dietéticos.
- Published
- 2019
19. Analytical strategies for the characterization, identification, and quantification of peptides and proteins of interest in the prevention and understanding of hypertension
- Author
-
Puchalska, Patrycja Anna, Marina Alegre, María Luisa, García López, María Concepción, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química
- Subjects
Péptidos-Análisis-Tesis doctorales ,Chemistry ,Química analítica-Tesis doctorales ,Medicina ,Cromatografía-Tesis doctorales ,Medicine ,Química ,Proteínas-Análisis-Tesis doctorales ,Hipertensión-Tratamiento-Tesis doctorales ,Sistema cardiovascular-Enfermedades-Aspectos moleculares-Tesis doctorales ,Espectrometría de masas-Tesis doctorales - Abstract
Premio Extraordinario de Doctorado de la UAH en el año académico 2013-2014, La hipertensión constituye un serio problema de salud y está considerada como una de las causas de las enfermedades cardiovasculares y renales. A pesar de la prevalencia de la hipertensión, la mitad de las personas afectadas desconocen que la padecen. Además, los estudios realizados acerca de las causas más importantes de muerte en el mundo predicen un aumento de la contribución de las enfermedades cardiovasculares. Debido a que los síntomas de la hipertensión pueden permanecer inadvertidos y raramente se ponen de manifiesto, la prevención y tratamiento de la hipertensión se consideran de gran importancia en la sociedad moderna. El tratamiento de la hipertensión ha disminuido la incidencia de accidentes cardiovasculares. Sin embargo, aunque la utilización de fármacos sintéticos ha sido decisiva en este descenso, estos fármacos poseen habitualmente efectos secundarios. Una alternativa interesante a estos fármacos la constituyen algunos péptidos que se encuentran de forma natural en determinados alimentos. De hecho, una estrategia básica para mejorar la salud cardiovascular es modificar la dieta y el estilo de vida ya que la dieta es uno de los factores que más influencia tienen en la salud humana. Entre los compuestos bioactivos que se encuentran en los alimentos, los péptidos bioactivos están recibiendo una gran atención en los últimos años. En particular, los péptidos antihipertensivos y antioxidantes son los más estudiados y han demostrado su efecto positivo sobre la salud cardiovascular. En efecto, los péptidos antihipertensivos pueden inhibir la actividad de la ACE y disminuir la presión arterial. Por su parte, los péptidos antioxidantes previenen el estrés oxidativo que puede iniciar y promover la aparición de la hipertensión. Los péptidos bioactivos pueden ser ingredientes naturales de los alimentos o bien originarse a partir de proteínas alimentarias de las que forman parte ya sea por procedimientos in vivo o in vitro. La digestión gastrointestinal constituye en sí misma un procedimiento in vivo mientras que el procedimiento in vitro implica la hidrólisis de las proteínas por la acción de enzimas o microorganismos adicionados a los alimentos. En el caso de productos procesados, los péptidos bioactivos se liberan a partir de las proteínas durante el procesado del alimento (queso, yogurt, kéfir, etc.). Hasta la fecha, la investigación relacionada con péptidos antihipertensivos y antioxidantes se ha centrado principalmente en alimentos de origen animal como la leche, los productos lácteos y la carne. Sin embargo, los péptidos bioactivos de origen vegetal, aunque menos estudiados, a menudo poseen actividades más altas. El maíz y la soja, son ejemplos de fuentes de péptidos bioactivos de elevada actividad. Las fórmulas infantiles de soja (SBIFs) constituyen una alternativa muy interesante a la leche y los productos lácteos para niños con intolerancia o alergia a algunos constituyentes de la leche, con problemas de alimentación o pertenecientes a familias vegetarianas. Sin embargo, en comparación con la leche y los productos lácteos, las SBIFs han sido poco investigadas en lo que al contenido de péptidos bioactivos se refiere. Estas fórmulas infantiles se elaboran a partir de aislados de proteína de soja que contienen alrededor de un 90% de proteínas. Durante su preparación, se someten a calor intenso o a hidrólisis proteica. Así, las SBIFs pueden contener de forma natural péptidos potencialmente bioactivos con efectos beneficiosos sobre la salud a parte de sus beneficios nutricionales. En este trabajo, las SBIFs se han elegido como una fuente potencial de péptidos bioactivos. Se han propuesto cuatro métodos diferentes para extraer péptidos de las SBIFs. En este trabajo, se ha desarrollado una metodología analítica para la determinación simultánea de los péptidos LRP, LSP y LQP de las [alfa]-zeínas presentes en granos de maíz. Adicionalmente, se desarrolló una metodología analítica por HPLC-Q-ToF-MS para la determinación de los tres péptidos mencionados en maíz. Con fines a llevar a cabo la determinación del péptido VLIVP en habas de soja, en este trabajo se desarrolló también una metodología analítica utilizando HPLC capilar acoplada a un sistema de espectrometría de masas de trampa de iones (HPLC capilar-IT-MS). Finalmente, en este trabajo se ha desarrollado un método SRM (selected reaction monitoring) utilizando detección por espectrometría de masas de triple cuadrupolo (QqQ) para evaluar el contenido de las isoformas de las proteínas kinasas PKA, PKG y CaMKII en distintos tejidos de rata. A modo de resumen, en este trabajo se ha investigado por primera vez la presencia de péptidos bioactivos nativos presentes en SBIFs. Estos estudios han permitido obtener una visión amplia del potencial de los péptidos bioactivos presentes en estos alimentos para bebés y al mismo tiempo observar grandes diferencias entre ellos contribuyendo a incrementar el conocimiento del valor nutricional real de estos alimentos así como de sus efectos fisiológicos y biológicos. Por otra parte, también se han desarrollado metodologías analíticas para la determinación de péptidos inhibidores de la ACE altamente potentes en cultivos de maíz y soja. Estos métodos se han caracterizado y se han aplicado al análisis de diferentes variedades de estos cultivos. Los resultados obtenidos tienen un importante potencial en el campo de la ciencia de los alimentos íntimamente relacionada con el área de la biomedicina. Finalmente, otro aspecto investigado en este trabajo ha sido la determinación de isoformas de proteínas de alto interés cardiovascular en diferentes tejidos de rata. Aunque se desarrolló un método SRM apropiado, la complejidad de la muestra no permitió la cuantificación fiable de las isoformas de PKA, PKG y CaMKII por lo que son necesarios más estudios para superar esta dificultad. Una vez superada, esta estrategia podría tener un impacto enorme en la investigación de los mecanismos moleculares que intervienen en el sistema cardiovascular.
- Published
- 2014
20. SEPARACIÓN ENANTIOMÉRICA Y/O DETERMINACIÓN DE COMPUESTOS DE INTERÉS MEDIOAMBIENTAL POR METODOLOGÍAS ANALÍTICAS ELECTROFORÉTICAS Y CROMATOGRÁFICAS INNOVADORAS
- Author
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Pérez Fernández, Virginia, Marina Alegre, María Luisa, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica, Química Física e Ingeniería Química
- Subjects
GC ,Contaminantes ,Chemistry ,Electroforesis ,Química analítica ,Química ,chira analysis ,HPLC ,Environmental pollutants ,CE ,Cromatografía - Abstract
García González, María Ángeles, codir., Hoy en día existen un gran número de compuestos orgánicos tanto naturales como sintéticos que se emplean con diversos fines y en cantidades realmente grandes. Este es el caso de los compuestos empleados y generados en la producción y conservación de alimentos, procesos industriales de todo tipo, fármacos de uso humano y veterinario, productos de higiene y cuidado personal, etc. Todos estos compuestos, sin embargo, no son del todo inocuos y además pueden llegar al medioambiente con relativa facilidad modificando la composición natural de las aguas, los suelos, el aire e incluso los alimentos, lo que los convierte en contaminantes químicos ambientales. Durante años la atención se ha centrado sobre aquellos contaminantes químicos más conocidos y regulados, sin embargo, hoy en día existen multitud de contaminantes ambientales que han sido considerados recientemente como tal y a los que se denomina contaminantes químicos emergentes. Estos compuestos no han sido muy estudiados y no existe una legislación clara para controlar su uso y sus residuos, a pesar del riesgo potencial que se les ha atribuido. Dentro de este grupo podemos encontrar drogas de abuso y fármacos, productos de cuidado personal, hormonas, tensioactivos, plastificantes, etc. Por otro lado muchos de los contaminantes químicos que se conocen hoy en día son quirales y este hecho tiene implicaciones cruciales desde el punto de vista biológico, toxicológico y medioambiental. A pesar de que los enantiómeros de un compuestos quiral poseen las mismas propiedades físico-químicas, su comportamiento en un entorno quiral, como es el caso de los procesos bioquímicos, puede ser completamente diferente para cada uno de los enantiómeros. Así puede que los enantiómeros de un compuesto reaccionen de distinta forma, tenga diferente actividad (pudiendo ser uno inactivo o incluso tóxico o antagonista, como en el caso de los fármacos) o se degraden de forma distinta permaneciendo uno de ellos mucho más tiempo en el medioambiente. Por todos estos motivos la quiralidad de los contaminantes químicos no puede ser subestimada y es necesario desarrollar nuevas metodologías analíticas que sean capaces de distinguir entre los enantiómeros de un compuesto y determinarlos de manera individual. Por todo lo expuesto el objetivo principal de este trabajo ha sido desarrollar nuevas metodologías analíticas empleando técnicas de separación electroforéticas y cromatográficas para la determinación de contaminantes químicos en muestras medioambientales, alimentarias, en productos cosméticos y en formulaciones comerciales con el fin de proponer estrategias rápidas, sensibles y de bajo coste económico y medioambiental que constituyan herramientas valiosas para la determinación de dichos contaminantes. Debido a que muchos de los contaminantes químicos de mayor interés son quirales, una parte del trabajo se ha centrado en el desarrollo de metodologías de análisis estereoselectivas con el fin de hacer posible la determinación individual de los estereoisómeros de estos compuestos, información muy valiosa por permitir el control de productos agroquímicos comerciales etiquetados como enantioméricamente puros, la evaluación de la toxicidad real de las muestras medioambientales o la investigación de los procesos metabólicos que afectan de distinta forma a los estereoisómeros de un compuesto determinado. Los trabajos concretos desarrollados incluyen diversas metodologías analíticas empleando las principales técnicas separativas como son la cromatografía de gases (GC), la cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) y la electroforesis capilar (CE). Como se ha dicho el trabajo presentado se puede dividir en dos grandes grupos. En el primero de ellos se presentan metodologías innovadoras en el campo de las separaciones quirales para la separación y determinación enantiomérica de pesticidas y bifenilos policlorados (PCBs) y sus metabolitos metilsulfonados (MeSO2-PCBs) empleando distintos modos de CE y nano-LC para los pesticidas y GC en dos dimensiones para los PCBs y MeSO2-PCBs. La segunda parte del trabajo se centra en el desarrollo de metodologías no quirales para la separación y determinación de ftalatos parentales por CE y fármacos tireostáticos y hormonas esteroideas por HPLC. En conclusión se puede decir que el trabajo de investigación presentado constituye un conjunto de nuevas metodologías analíticas completamente innovadoras que resuelven de manera satisfactoria diversos problemas relacionados con la determinación de contaminantes químicos en formulaciones agroquímicas comerciales y muestras alimenticias, cosméticas y medioambientales, una problemática cada vez más evidente.
- Published
- 2014
21. Desarrollo y validación de metodologías analíticas para la determinación de proteínas de soja en productos cárnicos por cromatografía líquida de perfusión
- Author
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Castro Rubio, Florentina, Marina Alegre, María Luisa, García López, María Concepción, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Ciencia ,Cromatografía líquida de alta resolución ,CIENCIA ,Science ,Análisis de Carne ,Química analítica e industrial ,Chemistry analytic and industrial ,Química analítica - Abstract
Debido a la ausencia de métodos analíticos fiables, en este trabajo, se han desarrollado y validado nuevas metodologías analíticas para la determinación de proteínas de soja en productos cárnicos crudos y procesados utilizando HPLC con fases estacionarias perfusivas. Las metodologías desarrolladas consistían en el desgrasado de las muestra con acetona, solubilización de las proteínas de soja en un medio salino a pH básico y análisis de las proteínas extraídas por Cromatografía Líquida de Alta Eficacia en Fase Inversa (RP-HPLC) de perfusión con detección UV y elución en gradiente. También se han optimizado las etapas de extracción y separación. Las mejores condiciones que permitían la extracción de las proteínas de soja utilizaban una disolución reguladora Tris-HCl a un pH 8.0 (que en algunos casos podía contener un modificador) con agitación ultrasónica y centrifugación obteniendo un sobrenadante que era directamente inyectado en el sistema cromatográfico. El método de RP-HPLC de perfusion elegido consistía en un gradiente lineal y binario en tres etapas: 5-25 % B en 0.8 min, 25-42 % B en 0.8 min, 42-50 % B en 0.6 min, y finalmente 50-5 % B en 0.5 min para equilibrar la columna en las condiciones iniciales entre inyecciones, siendo la fase móvil A y B, 0.05 % (v/v) de ácido trifluoroacético en agua y 0.05 % (v/v) de ácido trifluoroacético en acetonitrilo, respectivamente. Se empleó una columna de perfusion en fase inverse (50 x 4.6 mm d.i.) empaquetada con partículas de 10 ?m de diámetro de poliestireno-divinilbenzeno, un flujo de fase móvil de 3 mL/min, una temperatura durante la separación de 50 ºC y detección UV a 280 nm. En estas condiciones, la separación cromatográfica de los extractos proteicos se obtuvo en menos de 3 min. El método desarrollado permitió la selección de un pico ?marcador? para la determinación de proteínas de soja en productos cárnicos. Además, se comprobó que esta metodología era específica, precisa, exacta, robusta, y sensible siendo posible la detección y cuantificación de adiciones de ~ 0.08 % (m/m) y ~ 0.3 % (m/m), respectivamente, de proteínas de soja en productos cárnicos. La validación de las metodologías desarrolladas se realizó tanto para productos cárnicos crudos como procesados con diferente composición (elaborados con carnes de cerdo, pavo, pollo y ternera o mezclas de ellos) mostrando, además, que la presencia de proteínas lácteas en los productos cárnicos no interfería en la medida de las proteínas de soja. La cuantificación de las proteínas de soja en productos cárnicos procesados con calor comerciales y con diferente composición (elaborados con carnes de diferentes especies que podrían contener proteínas lácteas) se realizó utilizando un aislado de proteína de soja como patrón de proteínas de soja. Los resultados obtenidos mostraron que los contenidos en proteínas de soja determinados en productos cárnicos comerciales estaban dentro del límite establecido por la legislación española (3% de proteínas de soja referido a producto cárnico inicial). Con el objetivo de caracterizar los picos cromatográficos obtenidos con las metodologías desarrolladas para las proteínas de soja, se acopló la RP-HPLC de perfusión a un espectrómetro de masas para analizar, por primera vez, las proteínas de soja intactas en diferentes tipos de cultivos de soja. Las separaciones se realizaron en una columna de fase inversa de perfusión (100 x 2.1 mm d.i.) a un flujo de 0.5 mL/min, una temperatura de 60 ºC, y elución con un gradiente de 5 a 14 % B en 12 min, 14-16% B en 1 min, 16-20% B en 2 min, 20-28% B en 1 min, 28-40% en 8 min, 40-45% B en 2 min, y 45-95% B en 0.5 min. Las fases móviles A y B consistían en un 0.05% (v/v) de ácido trifluoroacético en agua y 0.05% (v/v) de ácido trifluoroacético en acetonitrilo, respectivamente. Se ha utilizado un procedimiento por pasos para optimizar los parámetros del espectrómetro de masas de trampa de iones con electronebulización que permitiera la detección más sensible. Se ha investigado la influencia que el potencial del capilar, el potencial de octapolo, el potencial de octapolo delta, el potencial a la salida del capilar y el potencial del skim tenían sobre la señal. Se ha elegido un potencial de capilar de 3 kV ya que permitía observar la mayor señal no observando ninguna mejora significativa al utilizar potenciales mayores. El potencial de octapolo seleccionado para la detección sensible de las proteínas de soja fue 4 V y el potencial de octapolo delta que mejores resultados mostraba fue 0.5 V. El menor potencial probado a la salida del capilar (50 V) fue el que resultó dar las respuestas más altas. Con respecto al potencial del skim, las respuestas más elevadas se observaron para valores intermedios seleccionando 45 kV. El análisis por RP-HPLC-ESI-MS de perfusión de los cultivos de soja mostró que el pico cromatográfico obtenido para los cultivos de soja al tiempo de retención del pico seleccionado como ?marcador? de las proteínas de soja en productos cánticos correspondía a las proteínas 11S de la soja. Además, de este trabajo se derivó una interesante aplicación. Se han investigado las similitudes y diferencias entre las habas de soja amarillas (las más habituales) y otras habas con diferente pigmentación (verde, rojo y negro) comercializadas como soja utilizando el método de RP-HPLC-ESI-MS de perfusión desarrollado. Además, también se han analizados habas rojas comercializadas como azuki idénticas a las habas rojas frecuentemente comercializadas como soja roja y fracciones proteicas (globulinas 11S y 7S) obtenidas por un procedimiento de fraccionamiento. Las habas con la misma coloración presentaban los mismos TIC, independientemente de que se hubieran adquirido como soja o no (azuki). Además, las habas amarillas presentaban un TIC muy diferente del observado para otras habas estudiadas (rojas, verdes o negras) con la excepción de un haba de soja negra. De hecho, algunos picos de las habas de soja amarilla fueron asignados a algunas proteínas características de la soja mientras que esta asignación no fue posible para las habas con otra coloración. El fraccionamiento de las principales proteínas de soja (globulinas 7S y 11S) se realizó para todas las habas estudiadas y su análisis por RP-HPLC-ESI-MS de perfusión permitió confirmar las diferencias encontradas entre las habas de soja amarillas y las habas con otra pigmentación. Una aplicación de interés derivada de este trabajo fue la diferenciación de soja de otros cultivos similares (azuki or mungbean). Finalmente, debido a las dificultades relacionadas en la caracterización del pico ?marcador? de las proteínas de soja en productos cárnicos mediante la utilización del método RP-HPLC-ESI-MS de perfusión propuesto, se desarrolló un nuevo método de cromatografía líquida multidimensional acoplada a espectrometría de masas en tándem. El aislamiento de los picos de interés a partir de extractos de aislado de proteína de soja (SPI) y de los productos cárnicos elaborados con SPI se realizó por RP-HPLC de perfusión. Tras la digestión enzimática con tripsina, las fracciones recogidas fueron analizadas por nanocromatografía de líquidos de alta eficacia- espectrometría de masas en tándem. Los resultados obtenidos permitieron la identificación de las proteínas de soja contenidas en el pico marcador que permitían la detección de adulteraciones de productos cárnicos con estas proteínas vegetales. Se identificaron diferentes subunidades de la glicinina A en el pico que permitía la discriminación entre productos cárnicos con y sin proteínas de soja. Entre estas, la subunidad A4 de la variedad G4 de la glicinina se encontró en todas las muestras. Consecuentemente, esta proteína (subunidad) puede ser utilizada como diana en nuevas tecnologías analíticas para la identificación de la adición de proteínas de soja a productos cárnicos.
- Published
- 2008
22. Nuevas contribuciones de la cromatografía electrocinética con detección UV y de espectrometría de masas en el campo de las separaciones quirales
- Author
-
Castro Puyana, María, Marina Alegre, María Luisa, Crego Navazo, Antonio Luis, and Universidad de Alcalá. Departamento de Química Analítica e Ingeniería Química
- Subjects
Ciencia ,CIENCIA ,Quiralidad ,Química analítica e industrial ,Química analítica ,Espectrometría de masas ,Chemistry, analytic and industrial ,Cromatografía - Abstract
Premio Extraordinario de Doctorado 2010
- Published
- 2007
23. Traceability markers to the botanical origin in olive oils.
- Author
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Montealegre C, Marina Alegre ML, and García-Ruiz C
- Subjects
- Genetic Markers, Geography, Olea genetics, Olive Oil, Quality Control, Biomarkers analysis, Olea chemistry, Plant Oils analysis
- Abstract
This review provides an overview of traceability studies performed to date (April 2009) for olive oils. Special emphasis has been made on the botanical origin because high-quality monovarietal olive oils have been recently introduced on the markets and their quality control requires the development of new and powerful analytical tools as well as new regulations to avoid fraud to consumers. Several parameters with discriminant power have been used for olive oil traceability according to the olive variety used in the production of the oil. They have been considered as traceability markers to the botanical origin and classified, in this work, as compositional and genetical markers.
- Published
- 2010
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