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Este artículo se encuentra disponible en la siguiente URL: https://www.thieme-connect.com/products/ejournals/pdf/10.1055/s-0041-1740526.pdf Isolated vertebral mestastases can be successfully treated by surgical removal of the affected vertebral body and stabilization with alloplastic material. The bone union between the upper and lower vertebra is expected, yet a relatively high rate of a nonunion has been reported. In case of infection, bone consolidation is altered, and removal of alloplastic material is recommended, which decreases spinal stability and is a devastating complication. This case report of delayed infection and exposure of posterior hardware after thoracic vertebrectomy without an interbody osseous union, authors present a successful treatment with vascularized rib flaps through an anterior approach followed by hardware removal.

El objetivo de este trabajo fue la segmentación y visualización de los bordes en el cáncer de mama por medio de aprendizaje profundo, comparando distintos métodos de segmentación con su respectiva visualización. La importancia de esta segmentación radica en disminuir la incidencia de enfermedades residuales, causadas por bordes no diseccionados debido a la falta de información de las imágenes durante la planeación quirúrgica. Para la realización de este trabajo de segmentación, se utilizó una base de datos que contenía imágenes de MRI de 64 pacientes, de las cuales se tomaron en cuenta 22 pacientes aleatorias. Estas imágenes se convirtieron de formato, se normalizaron y se realizó la visualización 3D de las mismas utilizando Matlab. Posteriormente se escogió y se implementó el modelo U-NET de segmentación, evaluando su rendimiento según los distintos parámetros. Además, estos resultados se compararon con métodos clásicos de segmentación. La metodología obtuvo un resultado para el modelo U-NET de 78% para la media de intersección de unión y un 100% en precisión para la segmentación, mostrando mejora respecto a los métodos clásicos. Con la metodología implementada fue posible realizar la visualización 3D y 2D de tumores de cáncer de mama con su respectiva segmentación en imágenes de resonancia magnética The objective of this work was edge segmentation and visualization in breast cancer using deep learning techniques. The importance of this segmentation lies in reducing the incidence of residual disease caused by undissected edges due to a lack of image information during surgical planning. There were compared several segmentation methods with their respective visualization. In order to perform this segmentation work, a database containing MRI images of 64 patients was used, from which 22 random patients were taken into account. These images were converted, normalized and 3D visualized using Matlab. Subsequently, the U-NET segmentation model was selected and implemented, evaluating its performance according to the different parameters. In addition, these results were compared with classical segmentation methods. The methodology obtained a result for the U-NET model of 78% for the mean intersection junctional mean and 100% accuracy for segmentation, showing improvement concerning classical methods. With the implemented methodology, it is possible to perform 3D and 2D visualization of breast cancer tumors with their respective segmentation in magnetic resonance images Proyecto de grado (Ingeniero Biomédico)-- Universidad Autónoma de Occidente, 2023 Pregrado Ingeniero(a) Biomédico(a)

FAPEMIG - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais O câncer de mama tornou-se o mais incidente no mundo em 2020, sendo o Brasil o país da América do Sul com maior número de casos de câncer de mama entre as mulheres. A radioterapia é uma forma de tratamento para este tipo de câncer e pode ser aplicada antes e após a mastectomia e a reconstrução da mama, em que é implantada a prótese de silicone substituindo o tecido mamário retirado. A ferramenta de simulação Monte Carlo (MCNP 6.2), utilizada juntamente com um objeto simulador antropomórfico feminino (FASH3), foi empregada para quantificar as doses absorvidas em órgãos e tecidos da paciente. O levantamento das doses absorvidas foi feito para avaliar o efeito do implante de silicone mamário na distribuição de dose, quando submetidos a um tratamento radioterápico com feixe de 6 MV e aplicando-se uma dose de 50,4 Gy. A validação do feixe foi feita comparando-se dados experimentais e os simulados computacionalmente por meio dos parâmetros porcentagem de dose profunda e perfis de dose off-axis. Os resultados mostraram uma boa correlação entre os valores experimentais e simulados, com diferenças percentuais de 5% para as curvas de porcentagem de dose profunda e 3% para a região central (-5 a 5 cm) das curvas de perfis de dose off-axis, mostrando que a ferramenta MCNP 6.2 é apta e eficaz para o cálculo da dose absorvida dos órgãos e tecidos do objeto simulador FASH3. A vesícula biliar e a superfície óssea foram os órgãos que mais sofreram com a contribuição da radiação espalhada pela prótese de silicone, aumentando os valores de doses absorvidas em 1,36% e 1,29%, respectivamente, quando comparados com o tecido mamário normal. A razão para os maiores valores de dose nestes órgãos, deve-se ao fato que eles estão posicionados próximos ao alvo das incidências dos feixes durante o tratamento. Os resultados dos valores de doses absorvidas obtidos mostraram que a distribuição de dose não sofreu uma alteração significativa na presença do implante de silicone, somente pequenos aumentos na dose absorvida em órgãos próximos à área de irradiação da mama foram observados para a configuração estudada neste trabalho. Breast cancer became the most incident in the world in 2020, with Brazil being the South American country with the highest number of breast cancer cases among women. Radiotherapy is a form of treatment for this type of cancer and may be applied before and after mastectomy and breast reconstruction, in which a silicone prothesis is implanted to replace the removed breast tissue. The Monte Carlo simulation tool (MCNP 6.2), used together with a female anthropomorphic phantom (FASH3), was used to quantify the absorbed doses in the patient's organs and tissues. The survey of absorbed doses was carried out to evaluate the effect of the breast silicone implant on dose distribution, when submitted to radiotherapy treatment with the 6 MV beam and applying a dose of 50.4 Gy. The beam validation was performed by comparing experimental data and those simulated computationally through percentage depth dose and off-axis dose profiles parameters. The results showed a good correlation between the experimental and simulated values, with percentage differences of 5% for the percentage depth dose curves and 3% for the central region (-5 to 5 cm) of the off-axis dose profile curves, showing that the MCNP 6.2 tool is suitable and effective for calculating the absorbed dose of the organs and tissues of the FASH3 phantom. The gallbladder and bone surface were the organs that suffered the highest contribution of scattered radiation by the silicone prosthesis, increasing the absorbed dose values by 1.36% and 1.29%, respectively, when compared to normal breast tissue. The reason for the highest dose values in these organs is due to the fact that they are positioned close to the target beam incidence during treatment. The results of the absorbed dose values obtained showed that the dose distribution did not undergo a significant change in the presence of the silicone implant, only a low increase in the absorbed dose in organs close to the area of breast irradiation were observed for the configuration studied in this work. Dissertação (Mestrado)

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico O câncer de mama possui a maior incidência e mortalidade na população feminina em todo o mundo. A detecção precoce e precisa do câncer de mama é uma parte crítica da estratégia para reduzir a mortalidade associada a esta doença tão comum. A mamografia é a técnica mais usada para a detecção precoce do câncer de mama, porém, possui várias limitações. Várias imagens são necessárias e existe uma forte dependência do médico ou técnico operador. Existe ainda uma forte dependência de um médico qualificado para identificar tumores nas imagens de raio-X. Além disso, a exposição ao raio-X ao longo da vida pode também induzir o aparecimento de tumores. Nesse projeto, propõe-se o desenvolvimento de técnicas baseadas na aplicação do método de impedância térmica e na detecção de inclusões baseada no uso de correlações de temperaturas superficiais da pele da mama para detectar a origem da fonte de calor (metabolismo anormal de um câncer). A ideia principal deste trabalho é usar o método da inteligência artificial, aprendizado profundo, técnica relacionada ao reconhecimento de características especificas em imagens para detecção de fontes de calor metabólica. Alem da técnica proposta não ser invasiva ou causar dor à paciente, ela deve permitir o acesso a pessoas com deficiência ou baixa mobilidade, possuir baixo custo e usar tecnologias nacionais. A baixa sensibilidade aos tumores pequenos e profundos, normalmente existente em análises de temperaturas superficiais usando imagens térmicas é contornada com o uso do conceito de impedância térmica e técnicas de inteligência artificial, como o uso de aprendizado profundo (Deep learning). Apresentam-se nesse trabalho uma breve fundamentação teórica sobre redes neurais convolucionais, otimizadores, funções de ativação e os hiperparâmetros que devem ser ajustados na rede neural. Descrevem-se o desenvolvimento do modelo térmico, e a criação do banco de dados a partir de sua solução bem como a escolha dos parâmetros detectáveis em imagens termográficas, as bibliotecas de deep learning, o treinamento da rede com uso de redes neurais convolucionais, e a análise dos hiperparâmetors usados no modelo para convergência dos problemas direto e inverso. Discute-se ainda a necessidade do conhecimento prévio das características tumorais que podem ser estimadas via redes neurais convolucionais e a influência da variação do tamanho do tumor comparando os sinais de temperatura e da impedância térmica. Obteve-se resultados numéricos da estimativa da localização de tumores em simulações numéricas com uso de imagens termográficas obtidas de dados simulados em um modelo cartesiano e em um modelo de mama anatômica. O desenvolvimento de uma técnica que possibilite a identificação da localização e tamanho de tumores na mama a partir de informações de temperatura e fluxo de calor superficiais é uma ferramenta inédita e promissora na detecção precoce do câncer de mama. Breast cancer has the highest incidence and mortality in the female population worldwide. Early and accurate detection of breast cancer is a critical part of the strategy to reduce the mortality associated with this prevalent disease. Mammography is the most used technique for the early detection of breast cancer. However, it has several limitations. Several images are needed, and there is a strong dependence on the operator. There is still a firm reliance on a qualified physician to identify tumors on X-ray images. In addition, lifetime exposure to X-rays can also induce tumors. In this project, we propose the development of techniques based on applying the thermal impedance method and on detecting inclusions based on the use of correlations of surface temperatures of the skin of the breast to detect the origin of the heat source (abnormal metabolism of cancer). The main idea of this work is to use the artificial intelligence method, deep learning, a technique related to the recognition of specific features in images to detect sources of metabolic heat. In addition to the proposed approach not being invasive or causing pain to the patient, it must allow access to people with disabilities or low mobility, have low cost and use national technologies. The low sensitivity to tiny and deep tumors, typically found in the analysis of surface temperatures using thermal imaging, is circumvented by utilizing the concept of thermal impedance and artificial intelligence techniques, such as deep learning. It has been shown a brief theoretical foundation on convolutional neural networks, optimizers, activation functions, and the hyperparameters that must be adjusted in the neural network. The development of the thermal model and the creation of the database from its solution are described, as well as the choice of parameters detectable in thermographic images, deep learning libraries, network training using convolutional neural networks, and the analysis of the hyperparameters used in the model for the convergence of the forward and inverse problems. We also discuss the need for prior knowledge of tumor characteristics that can be estimated via convolutional neural networks and the influence of tumor size variation by comparing the temperature and thermal impedance signals. The numerical results of estimating the location of tumors in numerical simulations using thermographic images obtained from simulated data in a Cartesian model and an anatomical breast model are shown. The development of a technique that makes it possible to identify the location and size of breast tumors from information on temperature and surface heat flux is an unprecedented and promising tool in the early detection of breast cancer. Tese (Doutorado) 2024-09-01

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A fosfolipase A2 (PLA2) é uma importante família de enzimas relacionadas com várias funções biológicas. As PLA2s secretadas (sPLA2s) são encontradas em secreções de vertebrados e invertebrados, como a peçonha de serpentes, sendo o tipo mais estudado devido a sua potencial aplicação biotecnológica, uma vez que a expressão de PLA2 está aumentada em doenças inflamatórias e alguns cânceres. Nosso objetivo foi selecionar peptídeos miméticos ao inibidor de PLA2 através da tecnologia de Phage Display (PhD) para avaliação de seus efeitos potenciais antitumorais e anti-inflamatórios. Peptídeos miméticos do inibidor de PLA2 foram selecionados usando BpPLA2-TXI, uma PLA2 isolada de Bothrops pauloensis e γCdcPL, um inibidor de PLA2 isolado de Crotallus durissus collilineatus que foi usado na etapa de eluição competitiva. Selecionamos 2 peptídeos, C2PD e PepSeq9 (que foi modificado por bioinformática). O peptídeo C2PD testado em PBMC modulou negativamente as respostas de IL-6 e IL-1β e positivamente IL-10, além de reduzir a atividade fosfolipásica. O peptídeo PepSeq9 mostrou ser ligante da PLA2 e apresentou toxicidade significativa em MDA-MB-231, uma linhagem celular de câncer de mama triplo negativo, além de revelar um efeito não citotóxico em células Vero, uma linhagem celular de rim de macaco. Sugerimos que os peptídeos C2PD e PepSeq9 podem ter um papel potencial no tratamento de doenças inflamatórias e tumorais, respectivamente. Phospholipase A2 (PLA2) is an important family of enzymes implicated in various biological functions. The secreted PLA2s (sPLA2s) are found in vertebrate and invertebrate secretions, such as snake venom, which is the most studied type due to its potential biotechnological application, since PLA2 expression is increased in inflammatory diseases and some cancers. Our aim was to select PLA2 inhibitor mimetic peptides through Phage Display (PhD) with antitumor and anti-inflammatory actions. Mimetic peptides to PLA2 inhibitor were selected using BpPLA2-TXI, a PLA2 isolated from Bothrops pauloensis and γCdcPL, a PLA2 inhibitor isolated from Crotallus durissus collilineatus which was used as a competitor during elution step. We have selected 2 peptides, C2PD and PepSeq9 (which was modificated through bioinformatics). The C2PD peptide tested in PBMC significantly down-modulated IL-6 and IL-1β and up-regulated IL-10 responses, besides reduced PLA2 activity. The PepSeq9 peptide seems to be a PLA2 ligand and it was cytotoxic to MDA-MB-231, a triple-negative breast cancer cell line, besides revealing a non-cytotoxic effect in Vero cells, a monkey kidney cell line. We suggest that C2PD and PepSeq9 peptides may have a potential role in inflammatory and tumoral diseases treatments, respectively. Tese (Doutorado) 2024-08-17

Pesquisa sem auxílio de agências de fomento O trabalho é fator significativo e de impacto na vida contemporânea. Fundamental na integração social, fonte de prazer e de realização pessoal e, paradoxalmente, pode se constituir também como fonte de adoecimento. Apesar dos avanços em seu tratamento, o câncer de mama (CM) é o tipo de câncer mais comum entre as mulheres e representa problema de saúde pública em países onde persistem altos índices de concentração de renda, baixa efetividade de políticas públicas voltadas à conscientização e prevenção na atenção primária para o diagnóstico precoce da doença. Verifica-se nova condição física/psicológica, que pode levar ao afastamento do trabalho e dificultar a vida financeira e social das mulheres que realizam o tratamento de CM. O objetivo desse estudo foi compreender as implicações do câncer de mama no labor e na vida das mulheres mastectomizadas (MM). Trata-se de um estudo descritivo, do tipo transversal e abordagem quantitativa. Participaram da pesquisa (N=96; 16%) das mulheres que realizaram cirurgia de mastectomia no Hospital de Clínicas da Empresa Brasileira de Serviço Hospitalar da Universidade Federal de Uberlândia - MG (HC/EBSERH/UFU), no período de 2013 a 2019. Aplicou-se um questionário contendo 20 questões de múltipla escolha e uma questão aberta, mediante uso da tecnologia Google forms, na modalidade on-line com apoio de contatos telefônicos. Utilizou-se analise descritiva. Traçou-se o seguinte perfil socioprofissional, demográfico e renda das MM: (n= 48; 50.00%) são casadas/união estável e (n= 48; 50.00%) são viúvas/solteiras/divorciadas/separadas; (n= 44; 45.80%) sexagenárias; (n= 52; 54.2%) brancas, salientando-se número reduzido (n=10: 10,42%) de pretas; (n= 86; 89.60%) são mães, com média de 1.67 filhos; destacou-se o ensino fundamental incompleto (n= 30; 31.25%) e ensino médio completo (n= 17; 17.71%); a renda mensal representa papel importante e implicações financeiras no contexto familiar, sendo que predominou (n= 67; 69.80_%) tem renda entre um a três salários mínimos e destacou-se (n= 20; 20,83%) sem renda; em contraponto ao quantitativo de aposentadas (n= 43; 44.79%); observou-se (n= 69; 71.89%) de MM que participam na vida econômica da família, sendo responsáveis pelo sustento/amparo da família ou dividem essa responsabilidade com outros membros. Verificou-se que (n= 73; 76%) das MM não desenvolvem trabalho remunerado, sendo que (n= 23; 24%) o fazem e se afastaram, em média entre 6 a 18 meses, das suas atividades laborais durante o tratamento do CM (N=52; 54.2%), realizou a mastectomia parcial, sendo frequente as complicações relacionadas ao pós-operatório de mama salientando-se na ordem decrescente: dor no ombro e dificuldade em elevar os braços (n = 46; 47,9%); formigamento nas mãos (n =44; 45.8%); alteração na libido (n =16; 16.7%); e linfedema (n =15; 15.6%). Ao compartilhar suas experiências, verificou-se o suporte psicológico, como fator recorrente e relevante para as MM, juntamente com as redes de apoio de amigos, família e religiosidade, reconhecidos como fundamentais. A totalidade das MM relatam satisfação e bons cuidados recebidos com o tratamento dos profissionais do HC/EBSERH/UFU. É imprescindível elaborar políticas de trabalho e sensibilização dos profissionais e gestores envolvidos, em busca do retorno saudável e bem-sucedido ao trabalho das MM. Promover cuidados de saúde abrangentes, que identifiquem as alterações emocionais, de autoimagem, sociais e de lazer, para além das limitações físicas e funcionais. Os aportes informativos, assistência financeira e adaptações/remanejamentos no local de trabalho e a implementação de modelos de prestação de cuidados com abordagens concentradas e interessadas na pessoa, em detrimento a doença, resultará em mulheres que consigam viver o sentido da vida com dignidade e salutar que lhes convier. Labor is a significant and impacting factor in contemporary life. It is fundamental in social integration, a reason for pleasure and personal fulfillment, and, paradoxically, can also be a source of illness. Despite advances in its treatment, breast cancer (BC) is the most common type of cancer among women and represents a public health problem in countries where high levels of income concentration, low effectiveness of public policies aimed at raising awareness and prevention in primary care for the early diagnosis of the disease. A new physical/psychological condition can lead to an absence from occupation and make the financial and social life of women who undergo BC treatment difficult. This study aimed to understand the implications of breast cancer in the occupation and life of women with mastectomy (MW). This is a descriptive cross-sectional study with a quantitative approach. Participated in the research (N=96; 16%) of women who underwent mastectomy surgery at the Clinical Hospital of Brazilian Hospital Office Service Company of the Federal University of Uberlandia- MG (HC/EBSERH/UFU), from 2013 to 2019. A questionnaire containing 20 multiple-choice questions and one discursive question was applied, using Google forms technology, in the online mode with the support of telephone contacts. Descriptive analysis was used. The social, professional, demographic and income profile of the MW was traced: (n= 48; 50.00%) are married/stable union and (n= 48; 50.00%) are widows/single/divorced/separated; (n=44; 45.80%) in their sixties; (n=52; 54.2%) white, highlighting a small number (n=10: 10.42%) of black women; (n=86; 89.60%) are mothers, with an average of 1.67 children; Incomplete elementary school (n=30; 31.25%) and complete high school (n=17; 17.71%) stood out; monthly income plays an important role and financial implications in the family context, with the predominant (n= 67; 69.80_%) having income between one to three minimum wages and standing out (n= 20; 20.83%) without income; in contrast to the number of retirees (n=43; 44.79%); it was observed (n= 69; 71.89%) of MW who participate in the economic life of the family, being responsible for the sustenance/support of the family or sharing this responsibility with other members. It was found that (n= 73; 76%) of the MW do not perform paid occupation, and (n= 23; 24%) do so and took an average of 6 to 18 months away from their occupation activities during treatment of the CM. (N=52; 54.2%) underwent partial mastectomy, with complications related to the postoperative period of the breast being frequent, highlighting in descending order: shoulder pain and difficulty in raising the arms (n = 46; 47.9%) ; tingling in the hands (n =44; 45.8%); change in libido (n =16; 16.7%); and lymphedema (n=15; 15.6%). When sharing their experiences, psychological support was verified as a recurring and relevant factor for MW, along with the support networks of friends, family, and religiosity, recognized as fundamental. All MW reported satisfaction and adequate care received with the treatment of professionals at HC/EBSERH/UFU. It is essential to develop care policies and sensitization the professionals and managers involved, in search of a healthy and successful return to the occupation of the MW. Promote comprehensive health care that identifies emotional, self-image, social, and leisure changes, in addition to physical and functional limitations. Information contributions, financial assistance and adaptations/relocations in the workplace, and the implementation of care delivery models with approaches focused and interested in the person, to the detriment of the disease, will result in women who are able to live the meaning of life with dignity and health. Dissertação (Mestrado) 2024-09-09

Globalmente, o câncer de mama é o câncer mais comum e a segunda principal causa de mortalidade e morbidade em mulheres. No Brasil, dados INCA mostram que esse câncer é o mais incidente no público feminino, além de ser a principal causa de morte por câncer neste gênero. Diversos fatores são responsáveis pela alta taxa de mortalidade do câncer de mama, onde a metástase para órgãos vitais é identificada como o principal dentre eles. Um crescente número de evidências tem associado o splicing alternativo disfuncional de genes e as atividades e/ou expressões alteradas de moléculas chaves deste processo a fenótipos metastáticos e carcinogênicos. Nesse sentido, as serine/arginine protein kinases (SRPKs), que atuam fosforilando fatores de splicing da família SR, têm sido encontradas superexpressas em diferentes tipos de câncer, incluindo o câncer de mama metastático. Neste estudo foi investigada a atividade biológica de um conjunto de novas moléculas derivadas de um inibidor de SRPKs (SRPIN340) sobre células de câncer de mama e de outros tumores cuja expressão de SRPKs já foi demonstrada. A substância MR48 foi identificada por apresentar atividade citotóxica nos ensaios de viabilidade e por apresentar efeitos antimetastáticos em linhagem de célula de câncer de mama metastático 4T1, este composto também prejudicou a atividade de SRPK1 intracelularmente. Adicionalmente, foi também realizado estudo piloto visando estabelecer um modelo murino de câncer de mama metastático baseado na inoculação da linhagem 4T1 em camundongos. Para tal, animais BALB/c fêmeas foram inoculadas com suspensões das células 4T1 em diferentes densidades na 4 ª glândula mamária. O curso da doença foi monitorado, no entanto, os animais não foram capazes de gerar tumores de forma satisfatória. Novos ensaios devem ser realizados visando otimizar o estabelecimento deste modelo de câncer de mama. Em suma, este trabalho identificou uma molécula promissora que deve ser melhor avaliada em futuros estudos in vitro e in vivo. Palavras-chave: Serine Arginine Protein kinases. Células murinas. Câncer de mama metastático. Globally, breast cancer is the most common cancer and the second leading cause of mortality and morbidity in women. In Brazil, INCA data show that this cancer is the most common among women, besides being the main cause of death by cancer in this gender. Several factors are responsible for the high mortality rate of breast cancer, where metastasis to vital organs is identified as the main one among them. A growing body of evidence has associated dysfunctional alternative gene splicing and altered activities and/or expressions of key molecules in this process with metastatic and carcinogenic phenotypes. In this regard, serine/arginine protein kinases (SRPKs), which act by phosphorylating SR family splicing factors, have been found to be overexpressed in different types of cancer, including metastatic breast cancer. In this study, the biological activity of a set of novel molecules derived from an inhibitor of SRPKs (SRPIN340) on breast cancer cells and other tumors whose expression of SRPKs has already been demonstrated was investigated. The substance MR48 was identified as showing cytotoxic activity in viability assays and antimetastatic effects in 4T1 metastatic breast cancer cell line, this compound also impaired SRPK1 activity intracellularly. In addition, a pilot study was also conducted to establish a murine model of metastatic breast cancer based on the inoculation of the 4T1 cell line in mice. For this purpose, female BALB/c animals were inoculated with suspensions of the 4T1 cells at different densities in the 4th mammary gland. The course of the disease was monitored, however, the animals were not able to generate tumors satisfactorily. New assays should be performed in order to optimize the establishment of this breast cancer model. In summary, this work identified a promising molecule that should be further evaluated in future in vitro and in vivo studies. Keywords: Serine Arginine Protein kinases. Murine cells. Breast câncer metastatic.

Pesquisa sem auxílio de agências de fomento Introdução: O subtipo luminal (ER e / ou PR-positivo, HER2-negativo) contabiliza aproximadamente 70% das pacientes com câncer de mama recém-diagnosticadas. Embora seja de melhor prognóstico, cerca de 30% delas desenvolvem recidiva tardia. Identificar essas pacientes é de interesse para tratá-las corretamente e melhorar a sobrevida. Métodos: Quinhentos e setenta e duas (572) pacientes com carcinoma ductal invasivo não metastático (I-III) da mama com um seguimento médio de 65,35 meses (3,67 – 247,40) foram incluídas, sendo 448 casos de câncer de mama luminal e 124 casos de câncer de mama triplo-negativo. Pontos de corte ótimos para Ki-67 e expressão semiquantiativa de receptores hormonais foram estabelecidos por análise de sobrevida para fatores contínuos. A regressão de Cox tempo-dependente com o método Stepwise Forward Wald foi realizada para discriminar fatores independentes de prognóstico com maior poder. Resultados: Observou-se que pacientes com tumores de grau histológico 1/2 com alta expressão de Ki-67 (>12%) e baixa expressão semiquantitativa de receptores hormonais (≤4+) se comportaram de maneira semelhante ao carcinoma ductal invasivo de mama de grau 3 e foram agrupadas. Tais pacientes têm uma sobrevida livre de metástases à distância [HaR ajustado: 0,520 (0,238 – 1,132), p=0,099] e sobrevida global [HaR ajustado: 0,761 (0,374 – 1,550), p=0,452] semelhantes às pacientes com câncer de mama triplo-negativo, incluindo terapias nos modelos. Em associação com o tamanho do tumor e metástases em linfonodos, esta classificação melhorou a classificação de risco padrão. Conclusão: O índice de proliferação pela expressão de Ki-67, além da expressão semiquantitativa de receptores hormonais, discrimina de forma eficiente pacientes com câncer de mama não metastático grau 2 e grau 1 com um bom prognóstico daquelas com pior prognóstico semelhante às pacientes com câncer de mama triplo-negativo. Background: The luminal subtype (ER and/or PR-positive, HER2-negative) account for approximately 70% of newly diagnosed breast cancer patients. Although is better prognosis, approximately 30% of them develop late relapse. Identfying those patients is of interest to treat them correctly and improve survival. Methods: Five hundred seventhy-two (572) non-metastatic (I-III) invasive ductal breast carcinoma patients with a median follow-up of 65.35 months (3.67 – 247.40) were enrolled, being 448 cases of luminal breast cancer and 124 cases of triple-negative breast cancer. Optimal cutoffs for Ki-67 and semiquantitative hormone receptor expression were established by survival analysis for continuous factors. Stepwise Forward Wald time-dependent Cox regression were performed to discriminate independent factors with increased prognosis power. Results: It was observed that patients with histological grade 1/2 tumors with high Ki-67 expression (>12%) and low semiquantitative hormone receptor expression (≤4+) behaved similarly to invasive ductal breast carcinoma grade 3 and were grouped. Such patients have distant metastasis-free survival [adjusted HaR: 0.520 (0.238 – 1.132), p=0.099] and overall survival [ajusted HaR: 0.761 (0.374 – 1.550), p=0.452] similar to triple-negative breast cancer, including therapy in the models. In association with tumor size and lymph node metastases, this classification improved the standard risk classification. Conclusion: The proliferation index by Ki-67 expression, in addition to the semiquantitative expression of hormone receptors, efficiently discriminates patients with grade 2 and grade 1 non-metastatic breast cancer with a good prognosis from those with a worse prognosis similar to triple-negative breast cancer. Tese (Doutorado)

A Anexina A1 (AnxA1) é uma proteína de 37 KDa que se liga a fosfolipídios de membrana de maneira cálcio-dependente, sendo responsável por regular a inflamação, a organização de membranas celulares e o tráfico vesicular. AnxA1 é expressa principalmente no citoplasma, onde apresenta uma atividade anti-inflamatória. Já no núcleo está envolvida em regular a transcrição e, portanto, o funcionamento gênico. AnxA1 também pode ser clivada proteolicamente gerando um fragmento de 33-KDa e liberando seu peptídeo clivado N-terminal, que é biologicamente ativo. Tanto o peptídeo quanto a proteína de comprimento total podem ser secretados para o meio extracelular, onde são capazes de ativar Receptores de Peptídeos Formilados (FPRs), desencadeando, assim uma sinalização autócrina. O eixo de sinalização autócrina AnxA1/FPR1 está envolvida nas propriedades pró-invasivas e pró-tumorais, principalmente de tumores em estágios mais avançados, como o câncer de mama triplo negativo (CMTN) e o câncer de próstata resistente à castração (CRPC). AnxA1 desempenha papéis relevantes na transformação maligna, ativando oncogenes e inativando genes supressores de tumor, induzindo a proliferação e invasão celulares e a formação de metástases. Por isso, investigar a via sinalização da AnxA1, bem com a interação com outras moléculas nos diversos tipos de tumores, se mostra imprescindível para elucidar as particularidades dessa proteína e, assim, desenvolver novas estratégias de diagnóstico e terapêuticas para as diferentes neoplasias malignas. Em tumores, a Anxa1 desempenha atividade pró-inflamatória, induzindo um microambiente tumoral (TME) favorável com a promoção do crescimento e circulação de células malignas. Portanto, no Capítulo I, revisamos o papel da AnxA1 no estabelecimento do microambiente tumoral, com foco nas atividades imunossupressora e imunomoduladora. Primeiramente, descrevemos como células cancerosas suprimem as atividades do sistema imunológico, favorecendo a malignidade e a disseminação do câncer. Em seguida, apresentamos as principais características do TME e que a presença de algumas células imunológicas em sua composição cria um ambiente altamente imunossupressor, o que favorece o crescimento e a progressão do tumor. Retratamos a estrutura e características da Anxa1, bem como os seus papeis na transformação maligna. Por fim, evidenciamos como a AnxA1 promove a supressão tumoral pela interação com o receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR), desencadeando um mecanismo de escape imunológico pelas células do câncer. No segundo capítulo, mostramos que a AnxA1 ativa uma sinalização autócrina em células CRPC por meio do FPR1. Além disso, no CRPC, observamos que a sinalização autócrina de AnxA1 promove a localização nuclear no EGFR. Já foi descrito previamente que, uma vez no núcleo, EGFR é associado à progressão do câncer de próstata para o fenótipo resistente à castração. Quando inibimos o FPR1 utilizando Ciclsoporina H, a localização nuclear do EGFR e sua sinalização a jusante nas linhagens CRPC foram bloqueadas. Sugerimos, então, que a inibição da sinalização autócrina de AnxA1 e, consequentemente, da localização nuclear de EGFR pode ser uma estratégia relevante para o tratamento de CRPC No último Capítulo, demonstramos uma interação entre as vias de sinalização de AnxA1/FPR1 e da Interleucina-6 (IL-6) e STAT3 (Fator de transcrição ativado por tirosinas quinases 3) no CMTN. Os nossos resultados mostraram que nas linhagens de CMTN, MDA-MB-231 e MDA-MB-157, a cascata de sinalização de IL-6 modula a ativação do eixo autócrino AnxA1/FPR1. Ao tratar camundongos fêmeas atímicas transplantadas com células MDA-MB-231 com Tocilizumabe, um anticorpo monoclonal humanizado que atua bloqueando os receptores de IL-6, observamos a redução do crescimento do tumor e a inibição da formação de metástases. Por último, mostramos que as vias IL-6 /STAT3 e AnxA1/FPR1 influenciam o TME, alterando a motilidade de fibroblastos. Sugerimos que a inibição de IL-6 pode ser usada como uma possível intervenção terapêutica e/ou uma nova terapia adjuvante para melhorar o resultado clínico de pacientes com CMTN ao bloquear a sinalização autócrina de AnxA1, retardando a progressão tumoral. Por fim, demostramos que a AnxA1 estimula um microambiente tumoral favorável o que leva o escape imunológico pelas células do câncer. E em tumores de próstata mais agressivos, como CRPC, a via de sinalização autócrina da AnxA1 e FPR1 promove a localização nuclear de EGFR, e que esta localização desempenha um papel importante na sobrevivência celular e agressividade das células CRPC. Já em tumores de mama triplo negativos a via de IL-6 mostrou-se um mecanismo compensatório da sinalização de do eixo AnxA1 e FPR1 e essas vias além de apresentarem um papel importante na agressividade do CMTN, também influenciam a TME, reduzindo a motilidade de fibroblastos. Portanto, este trabalho contribuiu de forma eficaz para a comunidade científica demostrando que o Anexina A1 desempenha diferentes papeis na progressão tumoral e que estudos mais aprofundados sobre essa molécula, e, em especial na via de sinalização autócrina AnxA1/FPR1, mostram se relevantes para uma maior compreensão dos tumores mais agressivos, bem como, possíveis estratégias terapêuticas. Anexin A1 (anxa1) is a 37 kDa protein that binds to calcium-dependent membrane phospholipids, being responsible for regulating inflammation, the organization of cell membranes and vesicular trafficking. Anxa1 is expressly expressed in cytoplasm, where it presents an anti-inflammatory activity. In the nucleus is involved in regulating transcription and therefore gene functioning. Anxa1 can also be cleaved proteelically generating a 33-kDa fragment and releasing its N-terminal cleaved peptide, which is biologically active. Both the peptide and the total length protein can be secreted to the extracellular medium, where they are able to activate formylated peptide receptors (FPRS), thus triggering an autocrine signaling. The autocrine signaling axis anxa1 / fpr1 is involved in pro-invasive and pro-tumor properties, mainly from tumors in more advanced stages, such as negative triple breast cancer (CMTN) and castration resistant prostate cancer (CRPC). Anxa1 plays relevant roles in malignant transformation, activating oncogenes and inactivating tumor suppressor genes, inducing cellular proliferation and invasion and formation of metastases. Therefore, investigate the signaling of ANXA1, as well as interaction with other molecules in the various types of tumors, is essential to elucidate the particularities of this protein and thus develop new diagnostic and therapeutic strategies for different malignant neoplasms. In tumors, ANXA1 performs pro-inflammatory activity, inducing a favorable tumor microenvironment (TME) with the promotion of growth and circulation of malignant cells. Therefore, in Chapter I, we reviewed the role of ANXA1 at the establishment of the tumor microenvironment, focusing on immunosuppressive and immunomodulating activities. First, we describe how cancer cells suppress the activities of the immune system, favoring the malignancy and the spread of cancer. Next, we present the main characteristics of the TME and that the presence of some immunological cells in its composition creates a highly immunosuppressive environment, which favors the growth and progression of the tumor. We portray the structure and characteristics of ANXA1 as well as their roles in malignant transformation. Finally, we evidenced as ANXA1 promotes tumor suppression by interaction with the receptor of the epidermal growth factor (EGFR), triggering an immune exhaust mechanism by cancer cells. In the second chapter, we show that ANXA1 activates autocrine signaling in CRPC cells through FPR1. In addition, in the CRPC, we observed that the autocrine signaling of ANXA1 promotes nuclear location in EGFR. It has already been previously described that, once in the nucleus, EGFR is associated with progression of prostate cancer for castration resistant phenotype. When inhibited the FPR1 using Cyclsoporin H, the nuclear location of the EGFR and its downstream signage in the CRPC strains were blocked. We suggest, then, that inhibition of the autocrine signaling of ANXA1 and, consequently, of the nuclear location of EGFR can be a relevant strategy for the treatment of CRPC In the last chapter, we demonstrate an interaction between the signage routes of ANXA1 / FPR1 and Interleukin-6 (IL-6) and Stat3 (transcription factor activated by tyrosine kinases 3) in the CMTN. Our results showed that in CMTN, MDA-MB-231 and MDA-MB-157 lineages, IL-6 signaling cascade modulates the autocrine axis activation anxa1 / fpr1. When treating sexic female mice transplanted with MDA-MB-231 cells with Tocilizumab, a humanized monoclonal antibody that operates by blocking IL-6 receptors, we observed the reduction of tumor growth and inhibition of metastases formation. Finally, we show that IL-6 / STAT3 and ANXA1 / FPR1 pathways influence TME, altering the motility of fibroblasts. We suggest that the inhibition of IL-6 can be used as a possible therapeutic intervention and / or a new adjuvant therapy to improve the clinical outcome of patients with CMTN by blocking the autocrine signaling of ANXA1, slowing tumor progression.Finally, we demonstrate that AnxA1 stimulates a favorable tumor microenvironment which leads to immune escape by cancer cells. And in more aggressive prostate tumors such as CRPC, the autocrine signaling pathway of AnxA1 and FPR1 promotes the nuclear localization of EGFR, and that this localization plays an important role in cell survival and aggressiveness of CRPC cells. In triple negative breast tumors, the IL-6 pathway was shown to be a compensatory mechanism for signaling the AnxA1 and FPR1 axis, and these pathways, in addition to playing an important role in the aggressiveness of the CMTN, also influence the TME, reducing the motility of fibroblasts. Therefore, this work effectively contributed to the scientific community demonstrating that Annexin A1 plays different roles in tumor progression and that further studies on this molecule, and especially on the AnxA1/FPR1 autocrine signaling pathway, are relevant for a greater understanding of the most aggressive tumors, as well as possible therapeutic strategies. Tese (Doutorado) 2023-11-04

O câncer de mama (CM) é um importante problema de saúde mundial e é o principal responsável pelas mortes em decorrência do câncer em mulheres. As mortes são, em sua maioria, consequência de metástases à distância e a forma mais efetiva de evitá-las é a detecção do CM em estadiamentos iniciais. O teste padrão ouro para a triagem do câncer de mama é a mamografia e apresenta importantes limitações como restrição ao seu uso em uma faixa etária específica e a constituição física das mamas. Além disso, apresenta altas taxas de resultados falso positivos principalmente por falhar em diferenciar doenças benignas de malignas, ocasionando biópsias teciduais desnecessárias. A biópsia é a única ferramenta capaz de confirmar o diagnóstico de câncer de mama, mas tem a desvantagem de ser altamente invasiva. Diante desse cenário, é de suma importância o desenvolvimento de novas ferramentas ou plataformas que auxiliem na redução de biópsias e outros procedimentos desnecessários. Nesta tese, serão apresentados três capítulos. No capítulo I será abordada uma revisão da literatura sobre o tema da tese. Será descrita a anatomopatologia mamária, os biomarcadores e técnicas mais relevantes que podem solucionar o problema exposto acima. O objetivo é apresentar os conceitos e estudos necessários para a compreensão dos demais capítulos. No capítulo II será abordado um método, painel e kit desenvolvido visando detectar células tumorais circulantes no sangue periférico para diagnóstico do câncer de mama e monitoramento da terapia (Patente 1). Essa patente foi depositada sob o número BR1020200263951 em 22/12/2020 e em 20/12/2021 foi solicitado o PCT da mesma sob o número PCT/BR2021/050561. Encontra-se em fase de validação do protocolo desenvolvido, otimização e estudo prospectivo para confirmação dos parâmetros do monitoramento do tratamento. No capítulo III será apresentado o método desenvolvido de uso de algoritmos de aprendizado de máquina na análise de dados de espectroscopia do infravermelho médio com objetivo de triagem da população feminina pela saliva (Patente 2). Essa patente foi depositada sob o número BR1020210260386 em 22/12/2021 no INPI. Encontra-se em fase de validação do modelo com aumento do número amostral. Logo após o Capítulo III, será apresentada a conclusão da tese e as perspectivas. Breast cancer (BC) is an important global health problem and is the main cause of cancer-related deaths in women. Most deaths are a consequence of distant metastases and the most effective way to avoid them is the detection of BC in the early stages. The gold standard test for breast cancer screening is mammography and it has important limitations such as restriction of its use in a specific age group and the physical constitution of the breasts. In addition, it has high rates of false-positive results, mainly because it fails to differentiate between benign and malignant diseases, causing unnecessary tissue biopsies. A biopsy is the only tool able to confirm the diagnosis of breast cancer, but it has the disadvantage of being highly invasive. Given this scenario, it is extremely important to develop new tools or platforms to help reduce biopsies and other unnecessary procedures. In this thesis, three chapters will be presented. In chapter I, a review of the literature on the theme of the thesis will be addressed. Breast anatomy pathology, the most relevant biomarkers, and techniques that can solve the problem exposed above will be described. The objective is to present the concepts and studies necessary to understand the other chapters. In chapter II, a method, panel, and kit developed to detect circulating tumor cells in peripheral blood for breast cancer diagnosis and therapy monitoring (Patent 1) will be discussed. This patent was filed under the number BR1020200263951 on 12/22/2020 and on 12/20/2021 the PCT of the same was requested under the number PCT/BR2021/050561. It is in the phase of validation of the protocol developed, optimization and prospective study to confirm the parameters of treatment monitoring chapter III, the developed method of using machine learning algorithms in the analysis of mid-infrared spectroscopy data to screen the female population by saliva (Patent 2) will be presented. This patent was deposited under the number BR1020210260386 on 12/22/2021 at the INPI. The model is currently being validated with an increase in the sample size. Soon after Chapter III, the conclusion of the thesis and perspectives will be presented. Tese (Doutorado) 2024-01-31

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Os ajustes do sistema circulatório durante mudanças devido à exposição ao meio externo (calor / frio) ou atividades físicas mostram o quanto nosso organismo pode se adaptar à necessidade de aumentar (ou reduzir) a produção de energia interna. Esses ajustes ocorrem principalmente devido a variação da perfusão sanguínea. Por exemplo, uma vez que o corpo é afetado por uma condição de aquecimento, ele tende a reduzir a geração interna de calor. Ou é exatamente o oposto quando exposto ao resfriamento. Além disso, o impacto da perfusão sanguínea devido a uma mudança nas condições externas da superfície (aquecimento ou resfriamento) ocorre de forma ainda mais intensa em regiões com maior perfusão, como as células tumorais, cuja vascularização é mais significativa do que em tecidos saudáveis. Essa diferença de comportamento pode, neste caso, ser a chave para identificar a localização de um tumor. Em outras palavras, propõe-se aqui, como método de identificação de tumor, observar a resposta transitória à temperatura superficial de uma mama exposta a uma condição de aquecimento modulado. Uma comparação desta resposta com uma mama saudável permite uma estimativa da localização do tumor. O conceito utilizado para esta estimativa é determinar o tempo que a inclusão leva para provocar alteração no perfil de temperatura superficial, considerando, neste caso, a maior perfusão da região lesionada quando comparada a uma região equivalente, porém saudável. Este tempo, definido aqui como o tempo para atingir o contraste térmico máximo entre mamas saudáveis e não saudáveis, é obtido parametricamente considerando várias condições de localização do tumor em um modelo unidimensional em coordenadas cartesianas e um modelo bidimensional em coordenadas cilíndricas. Propõe-se a utilização de simulações numéricas por meio do software COMSOL Multiphysics e de soluções analíticas para representação do comportamento térmico dos modelos estudados, e verificação da correlação proposta em uma modelagem experimental utilizando uma amostra de silicone. A técnica estimou com sucesso inclusões (tumores) com espessura (ou diâmetro) de 5 mm a 20 mm de profundidade, em modelos 1D e 2D, com erro de estimativa inferiores a 1 mm. The adjustments of the circulatory system during changes due to exposure to the external environment (heat/cold) or physical activities show how much our organism can adapt to the need to produce (or reduce) energy originating from its metabolism. These adjustments go through for the variation of blood perfusion. For example, once the body is affected by its perfusion, it tends to increase the effect of reducing the internal heat generation produced by its metabolism. The behavior is precisely the opposite when exposed of cooling. Also, the impact of blood perfusion due to a change in external conditions of the surface (heating or cooling) occurs in an even more intense way in regions with higher perfusion, such as tumor cells, whose vascularization is more significant than those in healthy tissues. This different behavior may, in this case, be a key to identifying the location of the tumor. In other words, proposes here, as a tumor identification method, to observe the transient response to the surface temperature of a breast exposed to a modulated heating condition. A comparison of this response with a heath breast allows an estimate of the tumor's location. The concept used for this estimate is to determine the time that the inclusion takes to cause a change in the surface temperature profile, considering, in this case, the greater perfusion of the tumor when compared to an equivalent healthy region. This time, defined here as the time to reach the maximum thermal contrast between healthy and non-healthy breasts, is obtained parametrically considering various conditions of tumor location in a one-dimensional model in cartesian coordinates and a two-dimensional model in cylindrical coordinates. It is proposed to use numerical simulations using the COMSOL Multiphysics software and analytical solutions to represent the thermal behavior of the models studied, and verify the proposed correlation in an experimental modeling using a silicone sample.The technique successfully estimated inclusions (tumors) with a thickness (diameter) of 5 mm to 20 mm in depth, in 1D and 2D models, with an estimation error of less than 1 mm. Dissertação (Mestrado)

Orientadora: Prof.ª Dra. Daniela Fiori Gradia Coorientadora: Prof.ª Dra. Jaqueline Carvalho de Oliveira Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa : Curitiba, 23/06/2022 Inclui referências Resumo: Câncer é o termo dado para descrever um conjunto de mais de 100 patologias, as quais possuem em comum a capacidade de crescer descontroladamente e invadir tecidos adjacentes. Os hallmarks do câncer, propostos por Hanahan & Weinberg consistem em um grupo de características importantes para progressão e manutenção da doença. Dentre eles, o hallmark da angiogênese é relevante principalmente para a metástase e nutrição do tumor, provendo oxigênio e nutrientes para que ele cresça e possa invadir outros tecidos. O fator de transcrição PBX1 possui diversas funções associadas à biologia do desenvolvimento, e nos últimos anos, as pesquisas o associaram a diversos hallmarks do câncer, incluindo o processo de angiogênese. Este trabalho buscou explorar correlações da expressão diferencial de PBX1 e com genes envolvidos na via de angiogênese e impactos funcionais do silenciamento do mesmo no contexto de linhagens de câncer de mama. Ainda, para fins de melhor compreensão do papel de PBX1 em pan-cancer, análises em bancos de dados públicos foram investigadas. Através de análise de transcriptoma de amostras de pacientes com câncer de mama, disponíveis em bancos de dados públicos, observou-se uma maior expressão de PBX1 nos subtipos luminais em comparação com os demais. Esta diferença está relacionada com o aumento na expressão em amostras positivas para os receptores hormonais de estrogênio e progesterona em relação às que não os expressam. No entanto, análises de sobrevida, não indicam que a expressão aumentada ou diminuída deste gene seja um marcador prognóstico. Ao se avaliar o impacto do silenciamento de PBX1 em genes envolvidos na via de angiogênese na linhagem celular de câncer de mama MCF7 foi possível obter um silenciamento de aproximadamente 40% da expressão deste gene, 48 horas após a transfecção. O silenciamento não provocou um impacto na viabilidade ou proliferação celular, porém houve diminuição significativa (p

Este artículo se encuentra disponible en la siguiente URL: https://downloads.hindawi.com/journals/ijd/2022/1876275.pdf Introduction. Breast cancer is the world’s most prevalent malignancy, with an increasing incidence and a predisposition for postpubertal females from all cultural and ethnic backgrounds. More recently, oral Fusobacterium nucleatum species have been observed in cancerous human breast tissue, drawing attention to the role of microbes in cancer pathogenesis. Objectives. Investigating oral Fusobacterium nucleatum species as potential biomarkers for female-speci2c breast cancer. Methods. A systematic search in )e Central Register of Controlled Trials, EMBASE, EBSCO, NCBI, and MEDLINE databases was undertaken from the 1st January, 1983–31st March, 2022. Articles included were in English and based on women between the ages of 18–96 years with con2rmed gingivitis/periodontal disease and breast cancer diagnoses from registered specialists. Authors extracted data independently, and a meta-analysis of risk estimations measuring associations between oral Fusobacterium nucleatum species and female-speci2c breast cancer was elucidated via calculated relative risks and 95% con2dence intervals. Results. AXIS tool analysis revealed 78.70% of articles with a positive correlation between oral Fusobacterium nucleatum and female-speci2c breast cancer. )e risk of breast cancer development increased with signi2cant levels of oral Fusobacterium nucleatum due to gingivitis/ periodontitis (relative risk � 1.78, 95% con2dence interval � 1.63–1.91). Low-moderate statistical heterogeneity was found (I2 � 41.39%; P � 0.02), and the importance of periodontal status on breast cancer pathogenesis was determined (relative risk � 1.24, 95% con2dence interval � 1.01–1.30). Conclusions. Oral Fusobacterium nucleatum species are a risk factor for breast cancer development, thus elevating their biomarker potentiality.

Orientador: Prof. Dr. Iglenir João Cavalli Coorientadoras: Profª. Drª. Enilze Maria de Souza Fonseca Ribeiro e Drª. Talita Helen Bombardelli Gomig Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa : Curitiba, 18/03/2022 Inclui referências Resumo: O câncer de mama é uma doença com altos índices de incidência, mortalidade e impactos sociais e econômicos. Os tumores mamários são classificados em subtipos, visando direcionar o tratamento e predizer o prognóstico dos pacientes, porém, a classificação atual, baseada em quatro marcadores imunoistoquímicos, não é suficiente para uma classificação satisfatória destes tumores. Além disso, as características biológicas que geram as diferenças entre tumores não são completamente conhecidas. Neste sentido, as tecnologias proteômicas e interatômicas têm grande relevância, tanto na investigação das diferenças biológicas entre subtipos através da identificação de proteínas diferencialmente expressas, as quais influenciam vias e processos relacionados com as diferenças clínicas e biológicas dos subtipos, quanto na identificação de marcadores proteicos que possam complementar e otimizar a classificação e discriminação entre subtipos. Neste estudo, mais especificamente no capítulo 1, métodos proteômicos baseados em espectrometria de massas LC-MS/MS livre de marcação foram utilizados para obtenção e comparação do proteoma total de tumores mamários de diferentes subtipos (luminal A, Luminal B, HER2+ enriquecido e triplo negativo) e, através da aplicação de análises computacionais de enriquecimento funcional e de predição de interatoma, a relevância biológica de proteínas diferencialmente expressas foi evidenciada. Além disso, a tecnologia de machine learning baseada em supported vector machines foi aplicada para a obtenção de painéis proteicos com potencial para servirem como painéis de discriminação e de classificação de tumores mamários em subtipos. Proteínas diferencialmente expressas (DEPs) puderam ser identificadas entre todos os subtipos, identificando oncogenes e supressores de tumor que possuem padrões de expressão que variam segundo a subdivisão entre subtipos. Através das análises de enriquecimento, os contextos biológicos nos quais se incluem estas DEPs puderam ser explorados, sendo identificados processos e vias biológicas que possuem níveis de atuação e ativação/inativação que diferem segundo o subtipo do tumor, incluindo alterações, por exemplo, nas vias de endocitose mediada por clatrinas, metabolismo de glucose e carboidratos, citoproteção por HMOX1 e regulação da estabilidade e atividade de PTEN. Os painéis proteicos aqui propostos obtiveram bom desempenho, alcançando taxas de falso-positivos sempre menores que 10%, e sensibilidade e especificidade sempre maiores que 75%. O capítulo 2 desta dissertação, por sua vez, traz análises sobre as proteínas ribossomais (RPs) no contexto do câncer de mama, trazendo novas informações acerca do padrão de expressão proteômico e transcriptômico das RPs, bem como de seu potencial para predição de prognóstico e do o panorama funcional e mutacional das RPs no câncer de mama. Abstract: Breast cancer is a disease with high rates of incidence, mortality, and social and economic impacts. The mammary tumors can be classified into subtypes, aiming to manage patient treatment and predict patient prognostics, however, the actual classification method, based in four immunohistochemical markers, is not sufficient to a satisfactory classification of the tumors. Furthermore, the biological characteristics involved in the differences between subtypes are not fully known. In this context, proteomic and interatomic technologies have great relevance both in the investigation of the biological differences between subtypes through the identification of differentially expressed proteins, which influence biological pathways and processes related to clinical and biological differences among the subtypes, and in the identification of proteic biomarkers that can be used to complement and optimize the classification and discrimination between subtypes. In this study, more specifically in chapter 1, label free mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS) based proteomics was applied to obtain and compare total proteomes of breast tumors of different subtypes and, through application of computational enrichment analysis and interatomic predictions, the biological relevance of the differentially expressed proteins (DEPs) was investigated. Further, machine learning-based technologies were applied to obtain proteic panels with the potential to discriminate and classify breast tumors in subtypes. We found DEPs in thecomparisons of all subtypes, identifying oncogenes and tumor suppressor genes with expression patterns that vary accordingly with the subtype classification. Through the enrichment analysis, the biological context in with the DEPs take part was explored, being that processes and pathways that shows differential behavior among the subtypes were found, including, for example, clathrinmediated endocytosis, glucose and carbohydrates metabolism, HMOX1 mediated cytoprotection and PTEN stability and activity regulation. The proteic panels proposed achieved great performances, both in the cross-validation and in the independent cohort validation, reaching rates of false-positives under 10%, and sensibility and specificity over 75%. The chapter 2, in turn, describes the analysis about the ribosomal proteins (RPs) in breast cancer, contributing with new data about the RPs proteomic and transcriptomic expression pattern, as well about its potential as prognostic markers and mutational and functional landscape in breast cancer.

Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2021. Financiadora de Estudos e Projetos (FINEP); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq); Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAP/DF) e Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). O câncer é uma das doenças que mais matam no mundo, desenvolvimento e aprimoramento dos tratamentos utilizados nas terapias contra o câncer são extremamente relevantes para uma melhor qualidade de vida dos pacientes. Tendo em vista os atuais problemas na administração de fármacos como a baixa solubilidade e os efeitos adversos, foi analisada a atividade de uma nanopartícula lipídica sólida contendo docetaxel (NLS-DTX), um fármaco já usado nas terapias convencionais, em uma linhagem (MDA-MB-231) de um dos tipos de câncer de mama mais agressivos e que possuem os piores prognósticos, o câncer de mama triplo negativo. Os testes de viabilidade indicaram que a NLS-DTX tem uma maior dependência quanto a dose do tratamento quando comparada ao fármaco livre o que indica uma liberação mais controlada do fármaco. As análises de microscopia eletrônica de transmissão (MET), confocal e microscopia de luz indicaram que após o tratamento as células entram em catástrofe mitótica, característica de fármacos antimitóticos que levam as células geralmente a morte ou a senescência. As células tratadas tanto com DTX como com NLS-DTX apresentaram significativa inibição na mobilidade e proliferação, características que são muito relevantes no desenvolvimento e progressão do tumor. A NLS-DTX aumentou significativamente a apoptose em células tumorais e também apresentou uma maior fragmentação nuclear (sub-G1) quando comparadas ao controle o que demonstrou seu grande potencial como nanocarreador ao manter e aprimorar a ação do fármaco na linhagem MDA-MB-231. Cancer is one of the most killing diseases in the world, development and improvement of treatments used in cancer therapies are extremely relevant for a better quality of life for patients. In view of the current problems in drug administration such as low solubility and adverse effects, the activity of a solid lipid nanoparticle containing docetaxel (NLS-DTX), a drug already used in conventional therapies, in a cell line (MDA- MB-231) of one of the most aggressive types of breast cancer with the worst prognosis, triple negative breast cancer. Viability tests indicated that NLS-DTX has a greater dependence on the treatment dose when compared to the free drug, which indicates a more controlled release of the drug. Transmission electron microscopy (TEM), confocal and light microscopy analyzes indicated that after treatment the cells enter into a mitotic catastrophe, characteristic of antimitotic drugs that usually lead to death or senescence. Cells treated with both DTX and NLS-DTX showed significant inhibition of mobility and proliferation, characteristics that are very relevant in tumor development and progression. NLS-DTX significantly increased apoptosis in tumor cells and also showed greater nuclear fragmentation (sub-G1) when compared to the control, which demonstrated its great potential as a nanocarrier by maintaining and improving the drug's action in MDA-MB-231 cell line.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Vários estudos têm demonstrado que extratos, proteínas e o próprio Trypanossoma cruzi tem ação na redução de tumores em modelos animais e em cultura de células. A proteína recombinante P21 de T. cruzi desempenha diferentes atividades biológicas como atividade quimiotática para células do sistema imunológico, inibe a angiogênese e modula negativamente a replicação do parasito. Além disso foi observado que esta proteína se liga ao receptor de quimiocina CXCR4. Assim esse estudo teve como objetivo avaliar o impacto da rP21 e da infecção por T. cruzi em células de câncer de mama triplo-negativo e células epiteliais não tumorais. Inicialmente realizamos o ensaio de viabilidade e foi visto que o tratamento com rP21 e a infecção por T. cruzi até o tempo de 72 horas, não apresentou uma viabilidade menor que 50%. Após o ensaio de viabilidade verificamos a taxa de invasão, multiplicação e eclosão de parasita no sobrenadante. A linhagem celular de mama normal, MCF-10A é suscetível à infecção por T. cruzi, sendo capaz de fornecer um ambiente propício para a replicação e diferenciação do parasita e a liberação de formas infectantes viáveis. A célula de mama triplo-negativo MDA-MB-231 também apresenta uma suscetibilidade a infecção pelo parasita. Após o tratamento com rP21 e a infecção por T. cruzi, notou-se a diminuição na migração de ambos os grupos tratados. Além disso observamos que a proteína rP21 após a marcação no tempo de 3 horas encontra-se localizada no núcleo da célula o que pode estar relacionada com o receptor CXCR4. Nossos resultados mostram que a expressão de CXCR4 na célula MDA-MB-231 diminui ao longo do tempo, porém apresenta uma curva de crescimento e queda na fluorescência nos tempos observados sugerindo uma translocação do receptor CXCR4 ao longo do tempo. Nas células MCF-10A a fluorescência ao longo dos tempos não apresentou diferença significativa. Quando observamos a interação da infecção do T. cruzi com o receptor CXCR4 vimos que ocorre uma interação entre eles nas células MDA-MB-231 e MCF-10A sugerindo uma relação entre a migração/invasão e proliferação dessas células. Em conclusão rP21 e outras moléculas do T. cruzi podem ser alvos potenciais para a descoberta para drogas contra o tumor. Several studies have shown that extracts, proteins and Trypanosoma cruzi itself have an action in reducing tumors in animal models and in cell cultures. The recombinant protein P21 from T. cruzi performs different biological activities such as chemotactic activity for immune system cells, inhibits angiogenesis and negatively modulates the replication of the parasite. Furthermore, it was observed that this protein binds to the CXCR4 chemokine receptor. Thus, this study aimed to evaluate the impact of rP21 and T. cruzi infection on triple-negative breast cancer cells and non-tumor epithelial cells. Initially, we performed the viability test and it was seen that the treatment with rP21 and the infection by T. cruzi up to 72 hours, did not present a viability lower than 50%. After the viability test, we verified the rate of invasion, multiplication and hatching of the parasite in the supernatant. The normal breast cell line, MCF-10A, is susceptible to infection by T. cruzi, being able to provide a favorable environment for the replication and differentiation of the parasite and the release of viable infective forms. The triple-negative MDA-MB-231 breast cell is also susceptible to parasite infection. After treatment with rP21 and T. cruzi infection, a decrease in migration of both treated groups was noted. After treatment with rP21 and infection by T. cruzi, a decrease in migration of both treated groups was noted. Furthermore, we observed that the rP21 protein after 3 hours labeling is located in the cell nucleus, which may be related to the CXCR4 receptor. Our results show that the expression of CXCR4 in the MDA-MB-231 cell decreases over time, but it presents a growth curve and a decrease in fluorescence at the observed times, suggesting a translocation of the CXCR4 receptor over time. In MCF-10A cells, fluorescence over time did not show any significant difference. When we observed the interaction of T. cruzi infection with the CXCR4 receptor, we saw that there is an interaction between them in MDA-MB-231 and MCF-10A cells, suggesting a relationship between migration/invasion and proliferation of these cells. In conclusion, rP21 and other T. cruzi molecules may be potential targets for the discovery anti-tumor drugs. Dissertação (Mestrado)

Triple-negative breast cancer (TNBC) constitutes a very aggressive type of breast cancer with few options of cytotoxic chemotherapy available for them. A chemotherapy regimen comprising of doxorubicin hydrochloride and cyclophosphamide, followed by paclitaxel, known as AC-T, is approved for usage as an adjuvant treatment for this type of breast cancer. In this study we aimed to elucidate the role of KIF11 in TNBC progression throughout its inhibition by two synthetic small molecules containing the DHPM core (dihydropyrimidin-2(1H)-ones or -thiones), with the hypothesis that these inhibitors could be an interesting option of antimitotic drug used alone or as adjuvant therapy in association with AC. For this purpose, we evaluated the efficacy of DHPMs used as monotherapy or in combination with doxorubicin and cyclophosphamide, in Balbc-nude mice bearing breast cancer induced by MDA-MB-231, having AC-T as positive control. Our data provide extensive evidence to demonstrate that KIF11 inhibitors showed pronounced antitumor activity, acting in key points of tumorigenesis and cancer progression in in vivo xenograft model of triple negative breast cancer, like down-regulation of KIF11 and ALDH1-A1. Moreover, they didn’t show the classic peripheral neuropathy characterized by impaired mobility, as it is common with paclitaxel use. These results suggest that the use of a MAP inhibitor in breast cancer regimen treatment could be a promising strategy to keep antitumoral activity reducing the side effects.

UFU - Universidade Federal de Uberlândia O câncer de mama é a uma das principais causas de morte por câncer entre as mulheres e a mamografia é o exame mais sensível para a detecção precoce, podendo reduzir a mortalidade. Entretanto, a mamografia apresenta limitações especialmente em mamas densas ou espessas, em que a identificação de nódulos ou microclacificações pode ser obscurecida pelos tecidos mamários. Recentemente, a técnica de mamografia contrastada vêm apresentando grande potencial como técnica de imagem complementar à mamografia de rastreamento, para a identificação de alterações. Nessa técnica, utiliza-se um agente de contraste à base de iodo, por via intravenosa, permitindo que o agente de contraste administrado circule pelos vasos sanguíneos da mama, causando o realce de possíveis nódulos malignos. Na mamografia contrastada de dupla energia, são adquiridas imagens com feixes de radiação de baixa e alta energia, e as duas imagens são então subtraídas, fornecendo o realce do agente de contraste em relação ao tecido mamário. A qualidade da imagem mamográfica depende, dentre outros fatores, do desempenho do receptor de imagem quanto à relação à resolução espacial, e a função de transferência de modulação (MTF), que quantifica a redução no contraste no domínio das frequências espaciais, é considerada a função mais adequada para avaliar a resolução espacial do sistema de imagem. O objetivo deste trabalho é estudar os diferentes tipos de receptores (a-Se e CsI) com a finalidade de determinar como diferentes fatores de aquisição podem influenciar na qualidade da imagem. Esse estudo foi feito a partir da obtenção das curvas de MTF x , adquiridas por meio das simulações utilizando o código Monte Carlo PENELOPE. Foram analisados o desempenho de receptores de conversão direta (a-Se) e indireta (CsI), considerando os feixes de baixa e alta energia empregados em mamografia contrastada. Os resultados mostraram que para o a-Se, as curvas de MTF x apresentam melhora com o aumento do potencial do tubo, ao passo que para o CsI há uma redução na MTF x , especialmente para feixes com energias acima da borda de absorção da camada K do receptor. O aumento na espessura dos receptores provoca uma redução na MTF x , devido ao aumento da probabilidade de ocorrer interações múltiplas, e de reabsorção pelo próprio receptor da radiação característica produzida. Não foi observado resultado significativo de influência da atenuação do feixe pela mama nas curvas de MTF x . Para as curvas de MTF pré-amostragem, observou-se que os efeitos geométricos referentes às dimensões da superfície dos elementos detectores são a principal causa de limitação da resolução espacial da imagem, com menor influência das interações da radiação. Os resultados obtidos neste trabalho foram comparados com resultados experimentais da literatura, apresentando boa concordância, indicando a viabilidade do uso dos métodos computacionais para simulação do transporte da radiação no receptor para o estudo do desempenho do sistema de imagem em mamografia contrastada. Breast cancer is one of the main cause of cancer death among women, and mammography exams are the only imaging technique that has shown to reduce such mortality. However, mammography has limitations, especially in dense or thick breasts, in which the identification of nodules or microcalcifications may be obscured by breast tissue. Recently, the contrast-enhanced mammography technique has shown a great potential as a complementary imaging technique to identify alterations in screening mammography. In this technique, an iodine-based contrast agent is administred intravenously, allowing the administered contrast agent to circulate throughout the breast blood vessels, highlighting possible malignant nodules. In dual-energy contrast-enhanced mammography, images are acquired with low- and high-energy radiation beams, and the two images are then subtracted, providing an increase in the contrast agent in relation to the breast tissue. The quality of the mammography image depends, among other factors, on the performance of the image receptor with respect to spatial resolution and on the modulation transfer function (MTF), which quantifies the reduction in contrast at the spatial frequency domain, is considered the most appropriate function to evaluate the spatial resolution of the imaging system. The objective of this work is to study the different types of image receptors (a- Se and CsI) in order to evaluate how different acquisition factors can influence image quality. This study was done by obtaining the MTF x curves, acquired through simulations using the Monte Carlo code PENELOPE. The performance of direct conversion (a-Se) receivers and indirect conversion (CsI) receptors were analyzed considering low and high energy beams employed in contrast mammography. Results showed that, with the increase of the tube potential, the MTF x curves improve for a-Se, while for CsI there was a reduction in MTF x , especially for beams with energies above the absorption K-edge of the receptor. The increase of receptor thickness causes a reduction in MTF x , due to the increased probability of multiple interactions occurrence and of the reabsorption of produced characteristic radiation by the receptor. It was not observed significant results for the influence of beam attenuation by the breast on the MTF x curves. For the pre-sampling MTF curves, it was observed that geometric effects due to the dimensions of the surface of the detector elements are the main cause of limitation of the image’s spatial resolution, with less influence of the radiation interactions. The results obtained in the present study were compared with experimental data from the literature, showing good agreement, indicating the feasibility of using computational methods for simulating the radiation transport in the receptor for the study of the imaging systems performance in contrasted-enhanced mammography technique. Dissertação (Mestrado)

Orientador: Maria Salete Costa Gurgel Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: O objetivo deste estudo foi descrever o padrão linfocintilográfico e avaliar as compensações linfáticas do membro superior no pós-operatório de câncer de mama com dissecção axilar. Sujeitos e métodos: Foram inicialmente analisadas 37 pacientes que realizaram a linfocintilografia pré-operatória, sendo que 32 delas realizaram também o estudo no membro contralateral. Através de critérios para homogeinezação da amostra, 23 pacientes tiveram seus estudos pré-operatórios comparados com a linfocintilografia realizada com 60 dias de pós-operatório. O protocolo de exame consistiu na realização de imagens estáticas de cada membro superior em semiflexão e do tórax, após 10 minutos, 1 e 2 horas da injeção subcutânea de 1 mCi (37 MBq) de dextran-99mTc no dorso da mão. Foram feitas análises comparativas da captação hepática do radiofármaco, do grau de captação dos linfonodos axilares (a ¿ acentuada, b ¿ moderada, c ¿ discreta e d - ausente) e da velocidade de aparecimento destes (I ¿ aos 10 minutos, II ¿ à 1 hora, III ¿ às 2 horas e IV ¿ não visíveis) antes e após a cirurgia. Resultados: Das pacientes analisadas no pré-operatório, apenas quatro apresentaram o padrão considerado normal (Ia) no estudo do membro ipsilateral e seis no contralateral, enquanto três apresentaram total comprometimento (IVd) no membro ipsilateral e duas no contralateral. Entre o grupo com 23 pacientes, duas foram classificadas como Ia no pós-operatório, que foi considerada a categoria ideal e três pacientes apresentaram classificação IVd. Comparando os padrões de drenagem no pré e pós-operatório foram encontradas pacientes com piora, pacientes que não apresentaram modificação e pacientes com melhora. Todas as pacientes apresentaram manutenção ou aumento da captação hepática após o tratamento cirúrgico. Conclusão: Este estudo encontrou alterações relevantes nas linfocintilografias pré e pós-operatórias, demonstrando a existência de diferenças funcionais do sistema linfático do membro superior. Alterações no padrão de drenagem linfática já podem ser percebidas com 60 dias de pós-operatório, assim como o indício de presença de anastomose linfo-venosa Abstract: The aim of this study was to describe lymphoscintigraphic pattern and evaluate upper limb lymphatic compensation following breast cancer surgey with axillary dissection. Subjects and methods: From September 2006 to June 2007, 37 patients who had performed preoperative lymphoscintigraphy were initially analyzed in the Division of Gynecologic Oncology and Breast Pathology of the Women¿s Integral Healthcare Center at the Universidade Estadual de Campinas. Thirtytwo of these patients also performed contralateral limb study. Using criteria for sample homogenization, preoperative studies of 23 patients were compared to lymphoscintigraphy performed within 60 days of surgical treatment. The examination protocol consisted in performing static imaging of each upper limb in semi-flexion and thoracic imaging, after 10 minutes, and 1 and 2 hours after subcutaneous injection of 1 mCi (37 MBq) of Tc-99m-dextran into the dorsum of the hand. Comparative analyses of hepatic radiopharmaceutical uptake, velocity of axillary lymph node visualization (I ¿ visible at 10 minutes, II ¿ visible at 1 hour, III ¿ visible at 2 hours and IV ¿ not visible) and degree of nodal uptake (a ¿ marked, b ¿ moderate, c ¿ mild and d - absent) before and after surgery were made. Results: Of the patients analyzed preoperatively, only four (11%) had an optimal pattern (Ia) in the ipsilateral limb study and six (19%) had an optimal pattern in the contralateral limb study, while total lymphatic compromise (IVd) was observed in three (8%) patients in the ipsilateral limb and two (6%) patients in the contralateral limb. Among the group with 23 patients, two (9%) were classified postoperatively as Ia, which was considered the optimal category and three patients (13%) were classified as IVd. Comparing preoperative and postoperative drainage, 11 (48%) patients worsened, 5 (22%) patients showed no modification and 7 (30%) patients improved. All maintained or increased hepatic uptake after sugical treatment. Conclusion: This study encountered relevant changes in preoperative and postoperative lymphoscintigraphy evaluations, demonstrating the existence of functional differences in the upper limb lymphatic system. Alterations in lymphatic drainage patterns can already be perceived within 60 days of surgery, as well as signs of lymphovenous shunts Doutorado Ciências Biomédicas Doutor em Tocoginecologia

Orientador: Cesar Cabello dos Santos Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: OBJETIVOS: Avaliar a associação entre a preservação do nervo intercostobraquial e a sensibilidade dolorosa do braço, tempo de cirurgia, número de linfonodos dissecados e complicações perioperatórias em pacientes submetidas à linfadenectomia axilar por carcinoma de mama. SUJEITOS E MÉTODO: Foi realizado um estudo de intervenção, randomizado, controlado e duplo-cego com 85 pacientes atendidas no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM) da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), no período entre janeiro de 1999 e julho de 2000. As pacientes foram divididas em dois grupos, conforme a preservação ou não do nervo intercostobraquial. A factibilidade da técnica de preservação do nervo foi avaliada e correlacionamos a sensibilidade dolorosa subjetiva e objetiva na face medial e súpero-posterior do braço, o tempo de cirurgia, número de linfonodos dissecados e complicações cirúrgicas com a preservação ou não do nervo ICB. As avaliações pós-operatórias foram realizadas com dois dias, quarenta dias e após três meses. Para análise estatística foram utilizados os testes: t - Student, exato de Fisher e coeficiente de correlação de kappa. RESULTADOS: A factibilidade da técnica cirúrgica foi de 100% e a preservação do nervo intercostobraquial associou-se a uma diminuição significativa nas alterações de sensibilidade dolorosa subjetiva e objetiva na face medial e súpero-posterior do braço, independentemente do período pós-operatório analisado, em comparação com as pacientes que tiveram o nervo ICB seccionado. Não houve diferença significativa no tempo de cirurgia e no número de linfonodos dissecados entre os dois grupos avaliados. Observamos maior sangramento nas pacientes submetidas à mastectomia radical com reconstrução plástica imediata e que preservaram o nervo ICB em comparação àquelas em que o nervo foi seccionado. CONCLUSÃO: A preservação do nervo intercostobraquial é uma técnica possível de ser realizada, que levou à diminuição das alterações de sensibilidade dolorosa no braço homolateral à cirurgia, sem interferir no tempo cirúrgico e no número de linfonodos dissecados, apesar de estar associada ao sangramento aumentado nas pacientes submetidas à reconstrução mamária imediata Abstract: OBJECTIVES: Evaluate the association between the preservation of the intercostobrachial nerve and the alterations of painful sensibility in the patient's arm submitted to the axillary node clearance for breast cancer, number of dissected lymph nodes and in the time of surgery. PATIENTS AND METHODS: A randomized, controlled and double-blind study was developed with 85 patients assisted in Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM) of Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), in the period from January 1999 to July 2000. The patientes were divided in 2 groups according to the preservation or not of the intercostobrachial nerve. The success of the surgical technique, the painful sensibility (sensory deficits and sensory symptons) in the posteromedial part of the upper arm, the surgical time, the number of dissected lymph nodes and the surgical complications were appraised. The post-operative evaluations were made in 2 days, 40 days and after 3 months. The t-Student test, Fisher's exact teste and kappa's coefficient of correlation were applied for statistical analysis. RESULTS: The success of the technique was 100% and the preservation of the intercostobrachial nerve was associated to a significant decrease in the alterations of painful sensibility of the upper arm in all the evaluations. There was not significant difference in the number of dissected lymph nodes and in the time of surgery. With relation to the complications, the preservation of the nerve was associated to increased bleeding just when the patients were also submitted to the immediate mammary reconstruction. CONCLUSIONS: The preservation of the intercostobrachial nerve is a feasible technique, decrease the sensory symptoms and deficits in the upper arm homolateral to the surgery, without interfering with the surgical time and the number of lymph nodes dissected, in spite of being associated to increased bleeding in patientes submmited to the immediate mammary reconstruction Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientadores: Aarão Mendes Pinto Neto, Cesar Cabello dos Santos Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Objetivos - Comparar a prevalência de sintomas climatéricos, a proporção de mulheres com atividade sexual e a qualidade de vida (QV) em mulheres com e sem câncer de mama e identificar os fatores associados à QV em mulheres com câncer de mama. Sujeitos e Métodos: Realizou-se um estudo de corte transversal em mulheres com idade entre 45 e 65 anos, não usuárias de terapia hormonal ou tamoxifeno nos últimos seis meses. As participantes foram selecionadas nos Ambulatórios de Oncologia Mamária e de Menopausa do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas. Foram incluídas 97 mulheres com câncer de mama e 85 sem câncer de mama. As características sociodemográficas, clínicas e a prevalência de sintomas climatéricos foram descritas em cada grupo. A QV foi avaliada através do questionário Medical Outcomes Study 36-item Short-Form Health Survey (SF-36). Para comparar as características sociodemográficas e clínicas entre os grupos foram utilizados os testes t de Student e exato de Fisher. Modelos de regressão logística múltipla e de regressão linear foram aplicados com controle de potenciais variáveis confundidoras. A seguir, o modelo generalizado linear permitiu identificar os possíveis fatores associados à QV de mulheres com câncer de mama. Resultados: A média de idade das mulheres com câncer de mama foi de 53,2±6,2 anos e daquelas sem câncer foi de 57,8±4,9 anos (p

Orientadores: Laura Sterian Ward, Andre Almeida Schenka Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Objetivo: Avaliar a relação da angiogênese em carcinomas invasivos iniciais da mama com fatores clínico-patológicos indicativos de recorrência. Casuística e Métodos: Em 92 casos de pacientes com neoplasia maligna invasiva e inicial da mama e submetidas à pesquisa de comprometimento do linfonodo-sentinela (LS) pesquisou-se a imunoexpressão de VEGF-A, CD34 e D2-40 nos cortes dos tecidos tumorais previamente fixados e incluídos em parafina. Esta expressão foi analisada em relação ao estado do LS e às características clínico-patológicas, incluindo a classificação atual de risco para recidiva. Resultados: Não houve associação entre a imunoexpressão do VEGF-A e a avaliação da angiogênese com o estado do LS, nem tampouco com as demais características clínico-patológicas, incluindo grupos de risco para recidivas. Apenas o tamanho do tumor primário e a idade da paciente foram indicadores de acometimento linfonodal. O coeficiente linear de Spearman não indicou correlação da imunoexpressão dos marcadores entre si. A deteccção de linfáticos pela imunocoloração com anti-D2-40 possibilitou a alteração da classificação de risco em quatro pacientes. Conclusões: Não houve associação entre microdensidade de vasos sanguíneos (CD34) e linfáticos (D-2-40) ou da imunoexpressão de VEGF-A, com variáveis clínico-patológicas clássicas indicativas de maior recidiva, nos carcinomas analisados nesse estudo. Porém, a imunocoloração com anti-D2-40 aprimorou a determinação de invasão linfática, considerada fator de maior risco de recidiva em neoplasias malignas da mama com LS negativo Abstract: Objective: To evaluate the relationship between early breast cancer angiogenesis and clinicopathological factors indicative of recurrence. Methods: Immunoexpression of VEGF-A, CD34 and D-2-40 was assessed in formalin-fixed, paraffin-embedded sections of primary breast cancer specimens from 92 patients submitted to sentinel lymph node (SN) investigation. The expression of these markers was confronted to SN status, clinicopathological features and the current risk groups classification. Results: No association between the immunoexpression of the three markers and SN status, clinicopathological features or risk assessment was detected. Only tumor's size and patient¿s age were predictors of SN status. There was no correlation among the three markers by the Spearman¿s linear correlation coefficient. The use of D2-40 as a marker of lymphatic vessels improved vascular invasion detection, changing the current risk groups classification in four patients. Conclusions: There was no association between tumoral microvascular (MVD) and lymphatic density (LVD), or immunoexpression of VEGF-A, with classical clinicopathological variables of tumour recurrence in this study. However, immunostaining for D2-40 proved to be useful in improving assessment of vascular invasion, an adverse feature in early breast cancer without node involvement Doutorado Clínica Médica Doutor em Clínica Médica

The aim of this study was to evaluate the efficacy of Power Doppler (PD), by quantifying the Vascular Density (Vascularity Index - VI), as a new predictor clinical tool of pathologic response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer, in order to guide the clinician on the effectiveness of chemotherapy as well as the choice of surgical technique by the surgeon. METHOD: For this prospective observational study, 20 patients were recruited with a histological diagnosis of infiltrating breast carcinoma and an indication for neoadjuvant chemotherapy. The tumor vascular density and largest tumor diameter before treatment, after 2 or 3 cycles of chemotherapy and at the end of treatment were evaluated by ultrasound Power Doppler. These findings were compared, and the association with the pathologic response was analyzed. Fisher s exact test, Wilcoxon-Mann-Whitney test, Spearman s correlation coefficient and Pearson s coefficient were used. The sensitivity, specificity and positive and negative predictive values for the histological response were also calculated. P values < 0.05 were considered statistically significant. RESULTS: VI showed a sensitivity of 88.88%, specificity of 100%, positive predictive value of 100% and negative predictive value of 91.66% for the pathologic response, as well as being strongly associated with it. The variation of VI, in terms of either an increase or decrease after 2 or 3 cycles of chemotherapy, significantly predicted the final histological response. CONCLUSION: By quantifying of the VI, PD showed a strong correlation with and predictive power for the histological response to neoadjuvant chemotherapy. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia do Power Doppler (PD), por meio da quantificação da Densidade Vascular (Índice de Vascularidade - IV), como um novo instrumento clínico preditor de resposta patológica à quimioterapia neoadjuvante no câncer de mama. MÉTODO: para este estudo observacional prospectivo recrutou-se 20 pacientes com diagnóstico histológico de carcinoma mamário infiltrante e indicação de quimioterapia neoadjuvante. Foram avaliados a densidade vascular do tumor pelo IV e o maior diâmetro tumoral, antes, após 2 ou 3 ciclos de quimioterapia e após o final deste tratamento. Estes achados foram comparados e se avaliou a associação com a resposta patológica, bem como a concordância interobservador. Foram utilizados o teste exato de Fisher, o teste de Wilcoxon-Mann-Whitney, coeficiente de correlação de Spearman e coeficiente de Pearson. Sensibilidade, especifidade, valores preditivos negativos e positivos para resposta histológica também foram calculados. Valores de p < 0,05 foram considerados estatisticamente significantes. RESULTADOS: o IV mostrou sensibilidade de 88,88%, especificidade de 100%, valor preditivo positivo de 100% e negativo de 91,66% para resposta patológica, bem como, fortemente, associou-se com esta. O variação do IV, tanto aumento quanto diminuição, após 2 ou 3 ciclos de quimioterapia, predisse significativamente a resposta histológica final. CONCLUSÃO: o PD, pela quantificação do IV, evidenciou forte correlação e poder preditivo de resposta histológica à quimioterapia neoadjuvante. Mestre em Ciências da Saúde

Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: No Brasil, o câncer de mama é o maior causador de mortes entre as mulheres. O histórico familiar constitui o fator de risco mais importante na determinação do câncer de mama familiar. Estima-se que cerca de 5 a 10% dos tumores de mama sejam hereditários. Vários genes são relacionados como responsáveis pelo câncer de mama familiar, dentre estes deve-se citar o gene ATM, que codifica uma proteína do tipo quinase de ponto de checagem que harmoniza o reconhecimento de alterações no DNA oriundas de radiação ionizante. Vários estudos demonstram a associação entre a mutação S707P do gene ATM e câncer de mama. O objetivo deste estudo é verificar a presença da mutação S707P no gene ATM em uma amostra de pacientes portadores de Câncer de mama e relacioná-la com a apresentação clínica da doença e o grau histológico. Para isso, esse estudo utilizou a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase seguida por digestão enzimática. Foram analisados 221 indivíduos para a mutação S707P, sendo 50 indivíduos com câncer e com histórico, 49 indivíduos com câncer sem histórico e 122 indivíduos do grupo controle. Somente dois indivíduos apresentaram a mutação S707P, sendo ambos em heterozigose do grupo controle (0,01). Esse é o primeiro estudo no Brasil que procura associação de mutações no gene ATM, em especial a mutação S707P com o câncer de mama hereditário e esporádico. Nenhuma associação foi encontrada entre a mutação S707P do gene ATM e o câncer de mama, tanto em mulheres com histórico familiar quanto em portadoras de câncer de mama esporádico Abstract: Introduction In Brazil, breast cancer is the most responsible for death in women. Familiar history is the most important risk factor to establish familiar breast cancer because about 5 to 10 % of breast tumors have a genetic etiology. Many genes are involved in familial breast cancer responsible, like ATM. The ATM gene encodes a checkpoint kinase protein which recognizes DNA damage by ionizing radiation. Epidemiological evidence suggests that ATM heterozygotes, representing 0.5-1% of the general population, have a 5 to 8-fold increased risk of developing breast cancer. However, direct molecular analysis of ATM in selected breast cancer patients outside AT families has led to conflicting results. The aim of this study was to verify in a sample of 99 breast cancer carriers, the S707P missense alteration in ATM gene comparing with a control group of 122 individuals. Methods Polimerase chain reaction was performed followed by RFLP to identify S707P mutation. Results We found two heterozygotes for S707P mutation in control group only. No homozygotes were detected. The comparation with histologic degree was not possible. The allelic frequency in control group were 0,01% and genotype frequency of 0,016 or 1,6 %. This is the first study in Brazilian patients with breast cancer and ATM mutations. Ours results show that breast cancer is not associated with S707P mutation of ATM gene in this population. Conclusion Any link between S707P and breast cancer was observed, even in familial and non familial history breast cancer carriers. Our study is limited by its small number of mutations, therefore, new studies with more mutations are necessary Mestrado Mestre em Farmacologia

Orientador : Ian S. Fentiman Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: O tratamento do carcinoma mamário estádios I e II com conservação da mama, já é tido como sendo tão seguro e confiável quanto a mastectomia. Entretanto são esperadas taxas de recidiva local da patologia entre 5 e 22% após 5 anos de seguimento, tornando-se assim, de capital importância o estudo dessas recorrências. (...continua) Abstract: There is now enough evidence with regards to the safety and reliability of breast conserving therapy for early breast cancer. However, it is expected that between 5 and 22% of the patients, will develop local relapse after a 5-year follow up, thus it is of great importance to study these radiation failures. (...continue) Mestrado Mestre em Ciências Médicas

Orientador : Ronaldo Aloise Pilli Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica Mestrado

Orientador: Silvia Maria Santiago Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: o objetivo deste estudo foi conhecer a população de mulheres submetidas a tratamento para o câncer de mama, usuárias do serviço de fisioterapia do setor de Oncologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul no período compreendido entre janeiro de 1998 e dezembro de 2001. Foram estudadas variáveis sócio-demográficas e clínicas e o papel desempenhado pelo serviço de fisioterapia no cuidado da mulher submetida à cirurgia de mama. Para tanto, realizou-se um estudo descritivo do tipo transversal, que avaliou informações contidas nos prontuários médicos e fichas de avaliação fisioterapêutica de todas as 160 pacientes tratadas no serviço e incluídas no estudo. Os dados foram submetidos à análise estatística, com intervalo de confiança de 95% e significância de 5%. O estudo demonstrou que a população investigada apresentou, em média, 52,3 anos de idade; é em sua maioria de cor branca, casada, católica e com baixo grau de escolaridade. Os tumores de mama foram detectados pela própria paciente em 78,8% dos casos, estando os mesmos em estádio II e III (86,1%), sendo o tratamento cirúrgico radical realizado em 68,8% das mulheres estudadas. Em relação à Fisioterapia, as pacientes foram encaminhadas tardiamente para tratamento de complicações físico-funcionais já instaladas. As complicações mais encontradas foram a limitação da amplitude de movimento do ombro (61,9%), dor (32,5%), e linfedema (29,4%). Foram avaliados possíveis fatores de risco para o desenvolvimento do câncer de mama, onde a idade e a história familiar foram similares a outros estudos. O estudo possibilitou a identificação de problemas dentro do serviço estudado, como o encaminhamento tardio das pacientes para a reabilitação fisioterapêutica e a dificuldade de acesso de todas as mulheres operadas da mama ao programa de reabilitação. Aponta, também, para a precariedade de programas de rastreamento e detecção precoce do câncer de mama nos outros níveis de atenção. A partir dos resultados deste trabalho será possível a implementação de medidas que visem a melhoria da qualidade da assistência às mulheres com câncer de mama no Hospital Universitário, bem como no Estado de Mato Grosso do Sul Abstract: The objective of this study was to get to know the women population that were submited to breast cancer treatments, users of the oncologic physiotherapeutical service at Hospital Universitário da Universidade Federal do Mato Grosso do Sul ( Matot Grosso do Sul' s Federal University Hospital ) during the period of January 1998 to December 2001. Clinic and social demographic variables were studied and the fulfilled role by the physiotherapy service at women care after breast surgery submission. Thus, a descriptive sectional type study was realized, in which contained information of medical records and physiotherapeutical assesment files of ali 160 patients treated at the service and included in the study. The data was submited to estatistic analysis with the trust interval of 95% and 5% of significance. The study showed that the investigated population presented, average of , 52.3 years of age, most had white skin, married, catholic, and with low levels of education. The breast tumors were detected by the patients in 78,8 % of the cases, at Il and III stage (86,1%), being the radical surgical treatement realized in 68,8% of the studed women. In relation to the Physiotherapy, the patientes were lately lead to treatment for the physical-functional complications already installed. The most found complication was the limited shoulder movement amplitude (61,9%), pain (32,5%), and Iymphedema (29,4). Possible risk factors for the development of breast cancer were evaluated, where the age and the family history were similar to other studies. The study made possible the identifications of problems within the studied service, as well the patients late leading to Physiotherapy Rehabilitation and the dificulty of access to ali breast operated women to the rehabilitation program. It points to, also, the program screening and early detection precaurousness of breast cancer in other levels of atention. From the results of this study it will be possible the implantation of measures that view the improvement of women with breast cancer assistance quality at the University Hospital, as well on the estate of Mato Grosso do Sul Mestrado Saúde Coletiva Mestre em Saúde Coletiva

Orientador: Solange Bento Farah Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Mestrado Genética Humana

Orientadores: Cesar Cabello dos Santos, Luiz Carlos Teixeira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: OBJETIVO: Comparar força e trofismo do músculo peitoral maior e amplitude de movimento do membro superior, homolaterais à mastectomia à Patey em mulheres com carcinoma de mama submetidas à preservação ou não do nervo peitoral medial. SUJEITOS E MÉTODOS: Foi realizado um ensaio clínico aleatorizado, duplo-cego, com 30 mulheres portadoras de câncer de mama submetidas à mastectomia à Patey entre julho de 2002 e maio de 2003 no Setor de Oncologia do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas. As mulheres foram alocadas aleatoriamente a um dos dois grupos de abordagem cirúrgica: com e sem preservação do nervo peitoral medial. Foram realizadas avaliação fisioterápica prévia à cirurgia e reavaliações periódicas no 15º e 43º dias após a cirurgia, com atenção para a medida da amplitude de movimento do membro superior homolateral, trofismo e força do músculo peitoral maior. Todas as participantes foram acompanhadas semanalmente no Ambulatório de Fisioterapia, onde foram submetidas à mesma reabilitação física através de cinesioterapia em grupo. Os dados foram registrados e comparados através da análise estatística, onde foram utilizados os testes exato de Fisher, t de Student, Wilcoxon além das análises de variância de Friedman e Anova. RESULTADOS: A técnica de preservação do nervo peitoral medial foi factível em 75% dos casos. No grupo de preservação do nervo peitoral medial, 81% das mulheres não apresentaram perda de força do músculo peitoral maior aos 43 dias de pós-operatório, enquanto apenas 31% do grupo de secção do nervo peitoral medial apresentaram este mesmo comportamento. Estas diferenças foram significativas (p

Orientador: Maria Salete Costa-Gurgel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Objetivos: Avaliar a qualidade de vida, inclusive sexual, de mulheres tratadas por câncer de mama de acordo com o tipo e tempo de cirurgia a que foram submetidas, e sua associação com características socioeconômicas e demográficas. Sujeitos e métodos: Realizou-se um estudo de corte transversal em 110 mulheres tratadas há, pelo menos, um ano por câncer de mama, selecionadas no Ambulatório de Oncologia Mamária do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas. A qualidade de vida foi avaliada através do questionário WHOQOL- bref e as questões específicas sobre sexualidade foram avaliadas por questionário específico, no qual se utilizou o Alpha de Cronbach para verificar validade e concordância das respostas e a técnica de análise fatorial com critério de autovalor e rotação máxima de variância, resultando em dois fatores: intrínseco (como a mulher se vê sexualmente) e extrínseco ou atratividade (como a mulher acredita que os outros a vêem sexualmente). O coeficiente Alpha de Cronbach para os novos fatores foi de 0,72. As variáveis sociodemográficas foram avaliadas nos domínios do questionário da OMS e nos domínios de sexualidade através do teste de Kruskal-Wallis, seguido de Mann-Whitney e pela correlação de Spearman. Resultados: Idade, escolaridade, tipo de cirurgia e tempo desde a cirurgia não influenciaram a qualidade de vida nos domínios físico, meio ambiente, psicológico e relações sociais. Mulheres com relacionamento marital estável tiveram escores maiores nos domínios psíquico (p= 0,04) e relações sociais (p= 0,02). Maior nível socioeconômico influenciou a qualidade de vida nos domínios físico (p= 0,01) e meio ambiente (p=0,002). Em relação à sexualidade, houve influência da idade no fator extrínseco. Mulheres com relacionamento marital estável tiveram escores maiores em ambos os domínios de sexualidade. Maior escolaridade influenciou positivamente o fator intrínseco. Mulheres submetidas à quadrantectomia ou à mastectomia com reconstrução imediata apresentaram melhores escores em relação ao fator extrínseco, quando comparadas às mastectomizadas sem reconstrução. Conclusões: Melhor nível socioeconômico e de escolaridade, relação marital estável e cirurgia com conservação mamária estão associados a melhores taxas de qualidade de vida, inclusive a sexual Abstract: Goals: To evaluate quality of life and sexuality of women with breast cancer according to the type of surgery to which they had been submitted and sociodemographic characteristics. Methods: A cross-sectional study was carried out in 110 women treated at least one year previously for breast cancer. Quality of life was evaluated using the World Health Organization¿s abbreviated Quality of Life questionnaire. Sexuality was evaluated using a specific questionnaire in which, Cronbach¿s alpha was used to check validity and concordance, and factorial analysis technique was used with self-value criteria and maximum rotation of variance, resulting in two factors: intrinsic (how the woman sees herself sexually) and extrinsic (how the woman believes others see her sexually). Cronbach¿s alpha coefficient for the new factors was 0.72. Sociodemographic variables were evaluated according to the domains of the World Health Organization questionnaire and the sexuality domains using the Kruskal-Wallis test followed by the Mann-Whitney test and Spearman¿s correlation. Results: Age, education level, type of surgery and time since surgery had no influence on quality of life in the physical, environment, psychological or social relationship domains. Women with stable marital relationships obtained higher scores in the psychological (p=0.04) and social relationship (p=0.02) domains. Higher socioeconomic level influenced quality of life in the physical (p=0.01) and environment (p=0.002) domains. With respect to sexuality, age affected the extrinsic factor. Women with a stable marital relationship had higher scores in both sexuality domains. Higher education level had a positive effect on the intrinsic factor. Women submitted to quadrantectomy or mastectomy followed immediately by reconstruction had higher scores in the extrinsic factor when compared to mastectomized women who had not had reconstruction. Conclusion: Higher socioeconomic and education levels, stable marital relationship and conservative breast surgery were associated with improved quality of life, including sexuality Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Emilio Francisco Marussi Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Introdução: a avaliação clínica tem baixo desempenho na previsão do envolvimento linfonodal em mulheres com câncer da mama. Assim, a dissecção axilar é necessária para o estadiamento patológico. A ultra-sonografia tem sensibilidade superior à mamografia e ao exame físico na avaliação linfonodal axilar. Objetivos: Avaliar o desempenho de diversas características ultra-sonográficas morfológicas (12) e Doppler (7) na detecção de metástases linfonodais em mulheres com câncer de mama. Métodos: Foram incluídas 181 axilas, de 179 mulheres, entre janeiro e dezembro de 2004. Os exames ultra-sonográficos foram realizados com transdutor linear em tempo real (TOSHIBA- Power Vision-6000 - modelo SSA-370A). Para o estudo de parâmetros morfológicos foram utilizadas freqüências entre 7,5 e 12 megahertz (Mhz). Para os parâmetros Doppler foi utilizada a freqüência de 5Mhz. Subseqüentemente, as pacientes foram submetidas à axilectomia dos níveis I, II e III (158) ou à técnica do linfonodo sentinela (23). Para a análise dos dados utilizaram-se estatística descritiva e árvore de decisão. Resultados: Ao exame ultra-sonográfico foi identificado pelo menos um linfonodo axilar em 173 (96%) exames. O exame histológico detectou metástase linfonodal em 87 mulheres (48%). As melhores sensibilidades dos critérios morfológicos foram encontradas com o volume do linfonodo (62%), diâmetro antero-posterior (62%) e local do centro ecogênico (56%). Embora a especificidade da invasão da gordura adjacente (100%), regularidade das margens (92%) e da ecotextura do parênquima (99%) tenham sido elevadas, a sensibilidade destes parâmetros foi muito baixa. Nenhum critério do Doppler alcançou 50% de sensibilidade. A árvore de decisão selecionou a localização do centro ecogênico, ecotextura do parênquima e regularidade das margens como melhor associação de parâmetros. Conclusão: O desempenho da ultra-sonografia na detecção de metástases nos linfonodos axilares foi desapontador na detecção de metástases linfonodais axilares em mulheres com câncer de mama Abstract: Introduction: The clinical evaluation is not accurate to predict the lymph node involvement in woman with breast cancer. Therefore, the axillary dissection is necessary to the pathological stagement. The ultrasonography is more sensitive than palpation and mammography in the detection of metastatic lymph nodes. Objective: To evaluate the role of ultrasonographic features, morphologic (12) and Doppler (7), in the detection of lymph node metastases in breast cancer patients. Methods: 181 axillas from 179 women were included. The ultrasonographic examinations were performed with real-time linear probe (TOSHIBA- Power Vision-6000 - model SSA-370A). Morphologic parameters were studied with a frequency of 7.5-12 Mega-hertz (Mhz). To Doppler parameters, a frequency of 5Mhz was used. Subsequently, the women were submitted to axillary dissection of levels I, II and III (158) or to the sentinel lymph node technique (23). Descriptive statistics and tecision tree were used to analyze the data. Results: At least one lymph node was detected in 173 (96%) by ultasonographic exams. Histologic examination detected lymph node metastases in 87 women (48%). The best sensitivity among the morphologic features were found with the volume (62%), the antero-posterior diameter (62%) and fatty hilum placement (56%). Beside the specificity of the extra capsular invasion (100%), border regularity (92%) and cortex echogenicity (99%) were high, the sensitivity of these features were to low. None of the Doppler features reached 50% of sensitivity. The decision tree test selected the ultrasonographic features: fatty hilum placement, border regularity and cortex echogenicity as the best parameters association. Conclusion: The role of axillary ultrasonography in the detection of axillary lymph node metastases in woman with breast cancer was disappointing Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientadores: Luiz Carlos Teixeira, Marcelo Alvarenga Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Objetivo: Avaliar a expressão imunoistoquímica da P-glicoproteína e sua correlação com a resposta à quimioterapia com esquemas contendo antraciclina em mulheres portadoras de carcinoma de mama estádio III. Sujeitos e Métodos: Estudo de coorte retrospectivo, em que foram analisados 88 prontuários de pacientes matriculadas no período de Junho de 1996 a novembro de 2003 no Ambulatório de Oncologia Clinica do CAISM-Unicamp, e portadoras de carcinoma ductal infiltrativo localmente avançado, que receberam quimioterapia neo-adjuvante com esquemas contendo antraciclina, excluindo as portadoras de carcinoma inflamatório. O tumor foi biopsiado antes do tratamento (core biopsy ou incisional) e submetido a exame imunoistoquímico pelo sistema envision peroxidase, utilizando-se anticorpos monoclonais anti-P-glicoproteína (P-gp), C494 (Signet) trans-menbrana e C219 (Signet) intra-citoplásmatico. Considerou-se positivo coloração citoplasmática ou trans-membrana em 10% ou mais das células. O controle externo positivo usado foi tecido normal de rim humano. A resposta clínica foi avaliada antes da cirurgia, após no mínimo dois ciclos de quimioterapia e os dados correlacionados com a expressão da p-glicoproteína. Empregou-se o teste exato de Fisher ou qui-quadrado para avaliar as possíveis associações. Resultados: A freqüência da positividade da P-glicoproteína na amostra foi de 23,86%. A resposta clínica objetiva à quimioterapia foi semelhante nos casos com e sem expressão da p-glicoproteína, considerando o tumor primário (57,1% vs 58,2%), axila (67,8% vs 78,8%) e resposta total (57,2% vs 65,7 %, p = 0,851). Conclusão: Não encontramos relação entre a expressão da P-glicoproteína e a resposta clínica à quimioterapia neo-adjuvante, sugerindo que este marcador não deve ser considerado como fator preditivo de resposta à quimioterapia com antraciclina Abstract: Objective: Evaluate the immunohistochemical expression of P-glycoprotein and its correlation to the response to chemotherapy with schemes containing antraciclin in women who are carriers of stage III breast carcinoma. Subjects and Methods: In the study of retrospective cohort, 88 files of patients who are carriers of locally advanced infiltrative ductal carcinoma were analyzed, and received neoadjuvant chemotherapy containing antraciclin, excluding the inflammatory cases, from June 1996 to November 2003, in the Oncology Clinic of CAISM-Unicamp. The tumor was biopsized before treatment (core biopsy or incisional biopsy) and subjected to the immunohistochemical exam by using the envision peroxidase system and utilizing anti-P-glycoprotein monoclonal antibodies (P-gp), C494 (Signet) trans-menbrane and C219 (Signet) intra-cytoplasmatic. The cytoplasmatic coloring or trans-membrane was considered positive in a rate of 10% or more of the cells. The external positive control which was used was human kidney normal tissue. Clinical response was evaluated before surgery, after a minimum of two cycles of chemotherapy and the data was correlated to the expression of P-glycoprotein. The exact Fisher test or Qui-square test was used to evaluate any possible associations. Results: The frequency of the positivity of P-glycoprotein in the samples was 23.86%. The objective clinical response to chemotherapy was similar in the cases with and without the expression of P-glycoprotein, considering the primary tumor (57.1% vs 58.2%), arm pit (67.8% vs 78.8%) and total response (57.2% vs 65.7%, p = 0.851). Conclusion: The relation between the expression of P-glycoprotein and the clinical response to to neoadjuvant chemotherapy was not found, what suggests that this marker should not be considered as a response predictive factor to chemotherapy with anthracyclin Mestrado Ciências Biomédicas Mestre em Tocoginecologia

Orientadores : Cesar Cabello dos Santos, Aarão Mendes Pinto Neto Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Objetivo: Correlacionar o risco para câncer de mama segundo os modelos de GAIL, CLAUS e da própria impressão de mulheres com história familiar de primeiro grau para câncer mamário. Além disso, avaliar o interesse dos médicos em detectar as mulheres de risco, bem como a posição destas mulheres sobre o uso de TRH, a realização da auto-palpação e da mamografia. Sujeitos e métodos: Foi realizado um estudo de corte transversal, no qual se estudou 105 mulheres parentes de primeiro grau de pacientes já acompanhadas no Ambulatório de Patologia Mamária do Caism Unicamp com diagnóstico de câncer mamário. As mulheres admitidas foram entrevistadas por meio de um questionário com informações sobre a sua própria impressão de risco para o câncer mamário, assim como dados referentes ao uso de TRH, realização de mamografia e atenção médica ao risco. A partir do mesmo, foram colhidos dados necessários para os cálculos dos valores de GAIL e CLAUS. Para estudar a associação de variáveis categóricas com o risco GAIL, utilizou-se o teste exato de Fisher e para estudar a associação com o risco presumido, o teste Qui-quadrado com correção de Yates. Para avaliar a correlação entre os valores de GAIL e CLAUS utilizou-se o coeficiente de correlação de Spearman. Resultados: Doze por cento das mulheres foram classificadas como de alto risco para desenvolvimento de câncer de mama, de acordo com GAIL. Não observamos correlação de risco entre os valores de GAIL e CLAUS (r=0,03), nem com o risco presumido pelas mulheres: 86% que se imaginavam de alto risco, têm, segundo GAIL, um risco moderado, e, 20% das que se imaginavam de baixo risco têm, segundo GAIL, um risco alto (p=0,58). Sessenta e dois por cento das mulheres de alto risco, de acordo com GAIL, não se sentem seguras em relação à TRH. Oitenta por cento das mulheres de alto risco, 73% das de risco moderado e 73% das de risco baixo segundo o risco presumido, fazem auto-palpação. Oitenta e cinco por cento da mulheres de alto risco, segundo GAIL, haviam sido submetidas a mamografia prévia, e 50% das mulheres de risco moderado não haviam realizado mamografia prévia (p=0,03). O estudo de GAIL mostra que 23% das mulheres de alto risco e 53% das de risco moderado, referiram nunca terem sido questionadas sobre seus antecedentes familiares pelos médicos.Conclusões: Cerca de 12% das mulheres foram consideradas de alto risco segundo GAIL. Os valores de risco baseados nos modelos de GAIL, CLAUS e o presumido pelas mulheres não se correlacionaram. As mulheres não se sentem seguras com o uso de TRH. Fazem auto-palpação rotineira e metade delas já foram submetidas à amografia. Cinquenta por cento dessas mulheres referiram que nunca haviam sido questionadas sobre seus antecedentes familiares pelos médicos Abstract: Objective: To correlate the breast cancer risk according to the GAIL and CLAUS models and the own impression of women with first-degree relatives to this illness. In addition to evaluate the medical interest in detecting the high-risk women to breast cancer, to evaluate the opinion of these women about hormone replacement therapy, the self-breast examination and if they have been undergone to mammograms. Subjects and methods: It was done a cross sectional study to evaluate relatives of women with breast cancer diagnosis and already followed in the Caism-Unicamp at the breast unit. The researcher interviewed the admitted women and data used in the GAIL and CLAUS models were collected. Questions about their own impression of the risk about breast cancer, their opinion about HRT, mammograms and medical aid about investigating their risks. To study the relations among categorical variables and GAIL model data the Fisher exact test was used, and to evaluate the relations among the imaginary risk the qui-square test with Yates correction was used. To correlate the risk models it was used the Spearman correlating index. Results: Twelve per cent of the women are high risk to developing breast cancer according to the GAIL model. No correlations among the GAIL and CLAUS models were observed (r=0.03) neither the own impression: 86% that thought being in high risk were according to GAIL model in moderate risk, and 20% that thought in low risk were in high risk, according to GAIL model (p=0,58). Sixty two per cent of the high risk group, according to GAIL model agree that HRT is unsafe. Eight five per cent of the high risk group had done mammograms and 50% of the moderate risk group, both according to GAIL model, had never done mammograms before (p=0.03). Twenty three per cent of the high risk group and 53% of the moderate group, according to GAIL model, were never asked about their family history in breast cancer matters. Conclusions: About twelve per cent of the women were considered high risk according to GAIL model. The risk values based on the GAIL and CLAUS models and the imaginary risk were not correlated. The women were not safe about using HRT, they did the self-breast examination e half of them have done mammograms. Half of this population refered that have never been asked by their family breast cancer history by a physician before Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Neury Jose Botega Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: O interesse em realizar este estudo está ligado à assistência psicológica a mulheres com câncer de mama no âmbito institucional e, em especial, à prática com Grupos de Apoio Psicológico. O objetivo deste trabalho é apresentar a expenencla desenvolvida no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM-UNICAMP); analisa-Ia nos seus aspectos dinâmicos e compreender o estado psicológico das pacientes. Para tanto, quatro sessões de 1 :45h de duração de um Grupo de Apoio Psicológico, formado por sete mulheres, foram registrados (gravados), desde a seleção das pacientes, até a última sessão. Antes do início, foram realizadas entrevistas individuais, com cada paciente, para obter informações específicas e avaliar a indicação para o grupo. A análise dos dados foi feita à luz da teoria psicanalítica, através de discussões com o orientador e de supervisões com um psicoterapeuta de grupo. As pacientes apresentaram, durante as sessões, uma grande diversidade de queixas associadas ao tratamento médico para o câncer de mama, evidenciando-se os sentimentos de rejeição e desconfiança. Porém, em sua base identificou-se fantasias inconscientes comuns, predominando as de castração. Expor-se (fisica e .emocionalmente) significava correr riscos e representava uma ameaça de mais perdas. A abordagem psicológica grupal, com tempo limitado, proporcionou uma experiência de aproximação desses sentimentos, atenuando-os, e pareceu preparar a paciente no caso de necessitar um atendimento mais longo Abstract: This work investigated the provision of psychological assistance for women with breast cancer. The aims of this study were: 1. to examine the experience of the Psychological Support Group established in the Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM), UNICAMP, Campinas, Brasil; and, 2. to analyse the dynamic aspects of one of these groups, as welI as the psychological state of the patients involved. The Psychological Support Group consisted of seven women who underwent four weekly sessions of one hour and forty-five minute each. The sessions were recorded on tape and alI details pertaining to patient were registered. InitialIy, each patient was interviewed in order to obtain background information and to evaluate their adequacy for indusion in the group. The data derived from the interview and from the group therapy sessions were analysed using a psychoanalytical approach. The data analysis was carried out under the supervision of an experienced group therapist. During the sessions, the patients complained considerably and demonstrated' feelings of rejection and suspicion. Several ordinary, unconscious fantasies were identified, the basis of which was a generalized fear of castration. The need to expose oneself (physicalIy and emotionalIy) was viewed as being fulI of risks and as a threat to further losses. This group psychological approach, which was characterized by a reduced number of sessions, resulted in a dose experience of the above feelings that allowed some of them to be dealt wií.h. The sessions also appeared to prepare the patients for longer-term psychological assistance Mestrado Mestre em Saúde Mental

Orientador: Luiz Carlos Teixeira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A quimioterapia adjuvante aumenta as sobrevidas livre de doença e total das mulheres com câncer de mama e linfonodos positivos, principalmente daquelas na pré-menopausa. É de se esperar que também possa ter um impacto significativo na história natural de pacientes sem envolvimento linfonodal. Com o objetivo de avaliar o impacto da quimioterapia adjuvante na evolução do carcinoma da mama estádios I e II sem metástase linfonodal, foram analisados os prontuários de 334 pacientes portadoras da doença T1No e T2No, tratadas ou não com quimioterapia sistêmica adjuvante entre fevereiro de 1980 a dezembro de 1988, com seguimento clínico até dezembro de 1993. Os resultados mostraram que este procedimento não aumentou significativamente as sobrevidas livre de doença e total, considerando-se a amostra global. Entretanto, houve um beneficio do tratamento para as pacientes na fase pré-menopausa, portadoras de tumores estádio II - T2No, grau histológico III, grau nuclear 1 e sem o receptor nuclear de estrógeno. A quimioterapia adjuvante para as pacientes com tumores estádios I e II sem metástase linfonodal não deve ser indicada indiscriminadamente, devendo ser preconizada apenas quando a análise dos fatores prognósticos tiver as categorias acima descritas Abstract: Adjuvant chemotherapy prolongs disease-free survival and overall survival in women with node-positive breast cancer, specially those in the premenopause. Adjuvant chemothewrapy is expected to have a significant impact on the natural history of patients with node-negative breast cancer. With the purpose of evaluating the impact of adjuvant chemotherapy in the evolution of node-negative breast cancer stage I and II, we analysed the medical record of 334 patients with disease T1No and T2No treated or non treated with systemic adjuvant chemotherapy, from february 1980 to december 1988, with follow up until december 1993. The results showed that this procedure didn't increase significantly the disease-free survival and overall survival in all patients. However, we can state that chemotherapy adjuvant was beneficial in patients who were in premenopause, with tumors stage II-T2No, histological grade III, nuclear grade I and without estrogen nuclear receptor. The use of adjuvant chemotherapy for patients with histologically negative axillmy lymph nodes stage I and II shouldn't be indiscriminately recommended, being indicated only when the analysis presents the categories of the prognostic factors above related. Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientadores: Sophie Françoise M. Derchain, Ellon Elizabeth Hardy Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: O objetivo deste trabalho foi identificar fatores associados à não adesão das mulheres com câncer ginecológico ou mamário à conduta terapêutica proposta, avaliando, conjuntamente, as causas de tratamento incompleto, por progressão da doença, toxicidade à terapia e abandono pela paciente; em seguida, considerando apenas o abandono. É um estudo de coorte retrospectivo realizado com os dados de 213 mulheres, atendidas como caso novo, no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas (CAISM/UNICAMP), em 1990. A avaliação estatística foi realizada por meio dos testes do Qui-Quadrado, com nível de significância de 5%; risco relativo e risco relativo ponderado, Mantel Haenszel, com seu correspondente intervalo de confiança de 95%. Com o objetivo de estudar a influência de algumas variáveis, foi utilizada a análise de regressão logística. Das 213 pacientes incluídas, 26% não concluíram o tratamento e mais da metade destas, por abandono. Mulheres com mais de 64 anos apresentaram um risco duas vezes maior de não completar o tratamento que aquelas com menos de 55 anos. Esse risco foi três vezes maior entre as pacientes com câncer de mama. O risco de não concluir o tratamento aumentou progressivamente com o estádio da doença. Tanto a quimioterapia quanto a radioterapia estiveram associadas a não-adesão por progressão, toxicidade ou abandono; porém, a associação foi maior entre as usuárias de quimioterapia. Das cirurgias propostas, menos de 10% não foram realizadas. O abandono, como causa de não-adesão, esteve associado com idade acima de 64 anos, estádio avançado da doença, câncer de mama e quimioterapia. Pode-se inferir, neste estudo, que a não-adesão ao tratamento prescrito também ocorre entre mulheres com câncer e, que o aconselhamento, educação e motivação das pacientes e seus familiares desde o diagnóstico, possibilitariam o aumento da proporção de mulheres que completariam o tratamento Abstract: The objective of this study was to identify factors associated to adherence with treatment among women with gynaecological or breast cancer. 213 women were included in this retrospective clinical study. All patients were attended at Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM), Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) in 1990 and had been diagnosed as having some form of gynaecological malignancy or breast cancer. The statistical analysis was done by Chi-square and Mantel Haenszel pondered relative risk. A logistic regression model was developed to predict nonadherence based on baseline variables. About 26% of women were nonadherent and 50% of them abandoned the treatment. The risk of nonadherence was twice more in women aged 64 years or more, and this risk was three times more in patients with breast cancer. The risk of nonadherence increased gradually with the stage disease. There was association of nonadherence to chemotherapy and radiotherapy, however, this association increased among women on chemotherapy. Less than 10% of surgeries were not done. The treatment abandonment was associated to women aged 64 years or more, advanced stage disease, breast cancer and chemotherapy. The study showed that women with cancer nonadhere to therapeutic regimens like patients with a non malignant disease. The study also suggested strategies for enhancing patient adherence to medical recommendantions, such as education and motivation Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Aarão Mendes Pinto Neto Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Para estudar a capacidade da mamografia na detecção do câncer de mama inicial em mulheres com idade entre 35 e 49 anos, foram avaliados 3.576 dados de pacientes que haviam sido submetidas ao exame mamográfico. Estas pacientes tiveram consultas no Ambulatório de casos novos do "Guy's Hospital" de Londres de 1985 a 1990, por apresentarem sintomas mamários diversos. Foram calculados valores de: sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivo e negativo e acurácia da mamografia para a população geral e para grupos particulares quanto a certas variáveis. Concluímos que a mamografia apresentou uma alta capacidade de detecção do câncer inicial de mama em mulheres com idade entre 35 e 49 anos. O exame apresentou alta acurácia na maioria dos grupos avaliados e, dentre as pacientes com nódulos dominantes, foi instrumento do exame clínico para aumentar a capacidade de detecção do câncer. Além do mais, a mamografia mostrou-se de fundamental importância dentre as pacientes sem nódulo dominante à palpação, sendo responsável por 80% dos casos de diagnóstico dos carcinomas neste subgrupo Abstract: Three thousand, five hundred e and seventy-six patients aged 35 to 49 years old medical notes was reviwed to evaluate the capacity of the mammography to make diagnosis of breast cancer in the early stages. This women had attended to the New Patients Clinics in the Breast Unit of the Guy's Hospital of London refered with breast complains from 1985 to 1990. It was éalculeted sensitivity, especificity, positive and negatives preditive values and acuracy of general population and particular groups. The results showed that mammography presented high capacity to detect early breast cancer in symptomatic patients aged 35 to 49 years old. The exam presented high acuracy in the most evaluated groups. In patients with clinical finding of dominant lump, mammography improved the clinical dianosis. Furthmore,mammography was of the capital importance to make diagnosis of cancer in patients I without a dominat with 80% of the cases diagnosis in this grou Mestrado Tocoginecologia Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Miriam Hatsue Honda Federico Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A 1,25-dihidroxivitamina D3, o metabólito ativo da vitamina D3, parece influir não só na homeostase do cálcio, mas também em vários processos celulares tais como, o controle da proliferação e diferenciação celulares. Sua ação na transcrição gênica ocorre através de interação com um receptor específico nuclear, o Receptor de Vitamina D (VDR). VDR está presente na maioria das linhagens de carcinoma mamário e em 80% dos cânceres de mama humanos. Comparando células HC11, derivada da glândula mamária normal de camundongo, com a linhagem HC11 transformada com alelo ativado de Ha-ras (HCll-ras), Escaleira e Brentani (1999) já haviam demonstrado inibição de crescimento induzido pelo tratamento com vitamina D na linhagem HCll, mas não na HC1 \-ras. Como a HC11 apresenta alto conteúdo de VDR ao contrário da HC11 -ras, interrogamos se essa seria a causa da falha da HC1 \-ras em responder a vitamina D. Para responder a essa pergunta, inicialmente, amplificamos por PCR a região do cDNA codificadora para VDR, a partir do RNA total da HC11 e iniciadores específicos. Com esse cDNA de VDR inserido no vetor de expressão pOP13 geramos 16 clones de HCll- ras transfectados com VDR, apresentando variado conteúdo de VDR. Desses clones, o clone I caracterizou-se como apresentando alta expressão de VDR, tanto por aumento do seu RNA mensageiro medido por ensaio de Northern como por aumento da proteína de VDR, determinada pelo uso de anticorpo monoclonal anti-VDR e analisada por citometria de fluxo (64,9% + 8,2% de positividade); os outros clones apresentaram expressão semelhante à HCII- ras (HC1 \-ras = 35,93% ± 15,10%; clone 7= 29,28% ± 10,62%; clone 13= 31,11% ± 27.2%), sendo a expressão da linhagem HC11= 85,5% ± 14%. O clone 1 respondeu com inibição de proliferação, como demonstrado pelo aumento do tempo de duplicação da população, medido pela contagem de células em cultura expostas a ação da Vitamina D 10 nM durante 3 dias (controle 17,28h ± l,98h vs. VD: 28,48h + 7,02h; p- 0,056) quando comparado a HCll-ra* (controle: 18,24h vs VD: 19,92h), Além disso, observamos um acúmulo de células na fase GO/Gl do ciclo celular, após o tratamento com vitamina D (controle: 79,54% ± 1,30% vs VD: 91.01% ± 2,66%, p < 0,005), como demonstrado pelo método de quantificação de conteúdo de DNA pela incorporação de Iodeto de Propídio e analise por citometria de fluxo. Note-se que esses parâmetros foram semelhantes a aqueles apresentados pela linhagem HC11 parental na presença de Vitamina D (controle: 55,9% vs VD: 82,0%). Os clones 7 e 13 com baixo conteúdo de VDR, apresentaram comportamento proliferativo semelhante ao da HC 11-ras. Nossos dados sugerem que, no modelo de progressão tumoral proporcionado pela linhagem HC11 e HC11-ras, o escape do controle de VDR determine uma vantagem proliferativa para a linhagem HCll-ras. O aumento de VDR, por si, restaurou no clone 1, um comportamento mais próximo da normalidade, o que leva a supor que os controles de proliferação normal sejam possíveis de serem recuperados em cânceres já estabelecidos. Uma diminuição de VDR em carcinoma mamário humano tem sido correlacionado com pior sobrevida sugerindo que as manipulações das vias de controle de VDR possam beneficiar estes pacientes Abstract: tamin D3, through its active metabolite la,25-dihydroxyvitamin D3 (1,25- (OH)2 D3), is a powerful regulator of calcium homeostasis and is involved in the regulation of cell growth and differentiation in a large variety of cells. Its action is mediated primarily through binding to a member of the nuclear hormone receptor superfamily, the vitamin D receptor (VDR). Most breast cancer cells lines express VDR and breast carcinoma patients presenting with VDR positive tumors appear to be associated with longer disease free survival as compared to patients with negative tumours HC-11 cells, a mammary epithelial lineage established from midpregnant BALB/c mice, but not HC11 transformed with Haras showed a strong growth inhibition with higher percentage of cells arrested in G0/G1 phase of cell cycle when exposed to vitamin D3. In this work we asked whether the low VDR content would be the underlying cause of the lack of response of the HCll-ras cells to Vitamin D treatment. In order to study the effect of VDR overexpression in HC 11 -ras cell growth, we first obtained the mouse VDR cDNA using total HC11 RNA as the template for PCR. Using this VDR cDNA cloned into the Not-1 site of the pOP13 expression vetor, we generated 16 VDR-transfected HCll-ras clones expressing variable amount of VDR. Clone 1 presented with high VDR mRNA content, as determined by Northern blotting and high VDR protein, as measured by using biotilated anti-VDR MoAb and flow cytometry (64% ± 8,2% VDR positive cells). Clones 7 and 13 presented VDR content similar to HCll-ras (HCll-ras = 35,93% ± 15,10%; clone 7= 29,28% ± 10,62%; clone 13= 31,11% ± 27.2%) and lower than HC11 (85,5% ± 14% VDR positive cells). Clone 1 was growth inhibited, when treated with Vitamin D 10 nM during 72 hours, as showed by Cell Doubling Time (CT: 17,28h ± l,98h vs. VD: 28,48h ± 7,02h, p = 0,056) when compared to HCll-ras (CT: 18,24h vs VD: 19,92h). In addition, clone 1 increased G0/G1 phase fraction, determined by flow cytometry, when exposed to Vitamin D (CT: 79,54% ± 1,3 vs VD: 91.01% ± 2,66; p < 0,005). In keeping with these data, Clones 7 and 13 presenting with lower VDR content, were not growth inhibited as expected . Our data suggest that, in HC11 tumor progression model, the lack of susceptibility of HCll-ras to growth inhibition induced by Vitamin D treatment might be reputed to its low VDR content. Furthermore, the effect of VDR replacemente in clone 1, restoring HC11 susceptibility to Vitamin D treatment, suggests VDR might be a possible therapeutic target in breast cancer Mestrado Farmacologia Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Maria Salete Costa Gurgel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Introdução: As deleções dos genes GSTM1 e GSTT1 têm sido associadas ao aumento do risco de várias neoplasias, porém não há consenso sobre suas influências no câncer de mama. Objetivo: Avaliar a ocorrência das deleções homozigóticas dos GSTM1 e GSTT1 em mulheres com câncer de mama esporádico (CME) ¿ casos - e em mulheres sem câncer ¿ controles - e comparar as características clínicas e biológicas dos CME entre mulheres portadoras e não-portadoras das referidas deleções. Casuística e Método: Foram avaliados 177 casos e 169 controles, com determinação das freqüências das referidas deleções pelo PCR. Estas foram correlacionadas às características clínicas e biológicas através do cálculo de odds ratio com seus respectivos intervalos de confiança de 95%. Resultados: Dos casos e controles, respectivamente, 46% e 45% não apresentaram qualquer deleção, 37% e 35% apenas do GSTM1, 11% e 10% apenas do GSTT1, 6% e 9% apresentaram ambos os genes deletados. Observou-se freqüência menor da deleção do GSTM1 em mulheres pardas (p=0,1128), OR=0,48 (0,24 ¿ 0,98). O risco foi menor de ocorrência de tumores grau nuclear 3 em pacientes com deleção do GSTT1 (p=0,04), OR=0,37 (0,15 - 0,90). A deleção homozigótica de pelo menos um dos genes associou-se com mulheres que não amamentaram (p=0,0202), OR=0,41 (0,19 ¿ 0,88), e com a ausência de expressão dos receptores hormonais (p=0,0300), ORadj=2,25 (1,03 ¿ 4,90). Já a deleção de ambos os genes associou-se ao aumento de risco da ocorrência de tipos histológicos diferentes do carcinoma ductal invasivo clássico (p=0,0571), ORadj=12,09 (1,03 ¿ 142,03). Conclusões: mulheres com CME e antecedente de miscigenação com etnia negra tiveram menor freqüência da deleção do GSTM1, enquanto os tumores com grau de diferenciação nuclear mais favorável relacionaram-se à deleção do GSTT1. Já as pacientes com pelo menos um dos genes deletados apresentaram maior risco de tumores que não expressam receptores hormonais, e a deleção combinada de ambos os genes associou-se ao aumento de risco para tipo histológico não ductal clássico Abstract: Introduction: The GSTM1 and GSTT1 gene deletions have been associated with an increased risk of various neoplasms, although there is a lack of consensus about their influence on breast cancer. Objective: To evaluate the occurrence of homozygous deletions of the GSTM1 and GSTT1 genes in women with sporadic breast cancer (SBC) ¿ cases ¿ and in women without cancer ¿ controls ¿ and compare the clinical and biological characteristics of SBC among women with and without the referred deletions. Case Study and Method: The study evaluated 177 cases and 169 controls, determining the frequency of the abovementioned deletions by PCR. These were correlated with the clinical and biological characteristics by calculating the odds ratios and their 95% confidence intervals. Results: Of the cases and controls, 46% and 45% did not present any deletion, 37% and 35% had only GSTM1 deletion, 11% and 10% had only GSTT1 deletion, 6% and 9% had both genes deleted, respectively. A lower frequency of GSTM1 deletion was observed in mulatto women (p=0.1128), OR=0.48 (0.24 ¿ 0.98). The risk of occurring nuclear grade 3 tumors was lower in patients with GSTT1 deletion (p=0.04), OR=0.37 (0.15 ¿ 0.90). Homozygous deletion of at least one gene was associated with women who had not breastfed (p=0.0202), OR=0.41 (0.19 ¿ 0.88), and with absence of hormone receptor expression (p=0.0300), ORadj=2.25 (1.03 ¿ 4.90). The deletion of both genes was associated with an increased risk of occurring histologic types different from classic invasive ductal carcinoma (p=0.0571), ORadj=12.09 (1.03 ¿ 142.03). Conclusions: women with SBC and a history of miscegination with the black race had a lower frequency of GSTM1 deletion, while tumors with a more favorable degree of nuclear differentiation were related to GSTT1 deletion. Patients with at least one gene deleted had a higher risk for tumors that did not express hormone receptors, and the combined deletion of both genes was associtated with a greater risk for the non-classic ductal histologic type Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Orientadores: Jesse de Paula Neves Jorge, Jose Guilherme Cecatti Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: As doenças da mama, principalmente o câncer, são freqüentes em nosso meio e por esse motivo deve-se realizar o diagnóstico diferencial dos nódulos mamários, utilizando métodos simples e de baixo custo. O teste tríplice, composto do exame clínico, mamografia e punção aspirativa por agulha fina conjuntamente, parece preencher esses requisitos. Assim realizou-se um estudo prospectivo do diagnóstico diferencial de nódulos mamários palpáveis em 102 mulheres a partir dos 30 anos de idade, com análise da sensibilidade, especificidade e valores preditivos do teste tríplice e dos exames isolados (exame clínico, mamografia e punção aspirativa por agulha fina). Em todas as situações o padrão-ouro foi o exame anatomopatológico. O teste tríplice apresentou sensibilidade de 90% e especificidade de 100%. Entre os testes isolados, o exame clínico teve sensibilidade de 93% e especificidade de 94%, a mamografia 96% e 69% e a punção aspirativa por agulha fina de 97% e 87%, respectivamente, com o melhor desempenho. Na avaliação da combinação de dois testes, a melhor foi o exame clínico mais a punção, com sensibilidade de 100% e especificidade de 87%. Os resultados sugerem a necessidade de sistematização de condutas terapêuticas em doenças malignas e benignas Abstract: Breast diseases, mainly breast cancer, are frequent. For this reason, differential diagnosis of breast nodes should be made using simple and low cost methods. The triple test, which is an association of a physical examination, a mammography and a fine needle aspiration biopsy, jointly seems to fill these requirements. A prospective study on differential diagnosis of palpable breast nodes, in 102 women aged 30 years and above, was performed. There was an estimation of sensitivity, specificity and predictive values for the triple test, and for each isolated test (physical examination, mammography and fine needle aspiration biopsy). In all cases, the histologic examination of the lesions was the gold standard. Sensitivity of the triple test was 90% and specificity was 100%. Among isolated tests, the sensitivity for physical examination was 93%, and the specificity was 94%, mammography was 96% and 69%, and fine needle aspiration biopsy was 97% and 87%, respectively; being that the last presented the best performance. When evaluating combinations of two specific tests, the best combination was a physical examination plus a fine needle aspiration biopsy, which the sensitivity was 100%, and the specificity was 87%. These results suggested the need for systematic standard treatment for benign and malign palpable breast nodes Mestrado Tocoginecologia Mestre em Tocoginecologia

Durante a última década, análises genômicas utilizando "microarrays" têm revolucionado o campo da pesquisa do câncer de mama (CM). Há inúmeras evidências científicas que asseguram a utilidade clínica do ensaio de 21 genes (Oncotype DX) e do ensaio de 70 genes (MammaPrint) em pacientes com CM, predizendo a recorrência dessa neoplasia e a magnitude do benefício da quimioterapia. No entanto, atualmente, não existe uma ferramenta genética capaz de predizer a quimiossensibilidade à quimioterapia neoadjuvante (QTNA) no tratamento do CM. O presente estudo avaliou o valor preditivo da expressão de genes relacionados ao reparo de DNA no cenário de QTNA. Foram analisadas 98 pacientes com CM submetidas a QTNA, sendo selecionadas 95 amostras de biópsias percutâneas pré-QTNA e 32 amostras de tumor residual pós-QTNA de espécimes cirúrgicas, fixadas em formalina e incluídas em parafina, utilizando a técnica da reação em cadeia da polimerase quantitativa por transcrição reversa em tempo real (RT-qPCR). Foram avaliados 11 genes: BRCA1, PALB2, RAD51C, BRCA2, ATM, FANCA, MSH2, XPA, ERCC1, PARP1 e SMN1 e utilizados 3 genes de referência: ACTB, GAPDH e GUSB. Das 98 pacientes, 33 (33,7%) alcançaram resposta patológica completa (RPC). A expressão de 2 genes avaliados em biópsias pré-QTNA (PALB2 e ERCC1) foi menor em pacientes com RPC quando comparadas a pacientes sem RPC (p=0,005 e p=0,009, respectivamente). Não houve correlação entre o subtipo molecular e expressão de genes de reparo do DNA. Os genes BRCA2 (p=0,009), ATM (p=0,004), FANCA (p=0,001), e PARP1 (p=0,011) apresentaram uma expressão mais baixa nas amostras de tumor residual pós-QTNA (n=32) quando comparadas com amostras de biópsia pré-NACT (n=98). Como conclusão, a expressão de 2 genes avaliados em biópsias pré-QTNA (PALB2 e ERCC1) foi menor em pacientes com RPC e a expressão de 4 genes (BRCA2, ATM, FANCA and PARP1) foi menor nas amostras de tumor residual pós-QTNA quando comparadas com amostras de biópsia pré-NACT. O perfil genético ou assinatura da expressão de genes de reparo poderia ser uma ferramenta útil na predição de quimiossensibilidade no cenário neoadjuvante, permitindo selecionar melhor as pacientes que teriam benefício com a QTNA. Além disso, estas alterações no sistema de reparo do DNA podem ser consideradas alvos terapêuticos no tratamento do CM. [resumo fornecido pelo autor] Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES Genome-wide analysis using microarrays has revolutionized the field of breast cancer (BC) research. A substantial body of evidence supports the clinical utilityof the 21-gene assay (Oncotype DX) and 70-gene assay (MammaPrint) to predict BC recurrence and the magnitude of chemotherapy benefit. However, there is currently no genetic tool able to predict chemosensitivity and chemoresistance to neoadjuvant chemotherapy (NACT) during BC treatment. In this study, we explored the predictive value of DNA repair gene expression in the neoadjuvant setting. We selected 98 patients with BC treated with NACT. We assessed DNA repair expression in 98 formalin-fixed, paraffin-embedded core biopsy fragments used at diagnosis and in 32 formalin-fixed, paraffin-embedded post-NACT residual tumors using quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction. The following genes were selected: BRCA1, PALB2, RAD51C, BRCA2, ATM, FANCA, MSH2, XPA, ERCC1, PARP1, and SNM1. Of 98 patients, 33 (33.7%) achieved pathologic complete response (pCR). The DNA expression of 2 genes assessed in pre-NACT biopsies (PALB2 and ERCC1) was lower in pCR than in non-pCR patients (p=0.005 and p=0.009, respectively). There was no correlation between molecular subtype and expression of DNA repair genes. The genes BRCA2 (p=0.009), ATM (p=0.004), FANCA (p=0.001), and PARP1 (p=0.011) showed a lower expression in post-NACT residual tumor samples (n=32) than in pre-NACT biopsy samples (n=98). As conclusions, the expression of 2 genes (PALB2 and ERCC1) was lower in pCR patients and the expression of 4 genes (BRCA2, ATM, FANCA and PARP1) was lower in post-NACT residual tumor samples than in pre-NACT biopsy samples. The use of recently developed multiparameter gene-expression assays, based on the expression of genes involved in different DNA repair pathways, should be further explored in future studies, as they may facilitate the selection of patients most likely to benefit from NACT. In addition, these alterations in DNA repair could be considered suitable targets for cancer therapy. [resumo fornecido pelo autor]

Orientador: Henrique Benedito Brenelli Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Doutorado

Orientadores: Luiz Carlos Teixeira, Maria Salete Costa Gurgel Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Doutorado

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O câncer de mama é o câncer mais frequentemente diagnosticado em mulheres e ocupa o segundo lugar entre as causas de morte por câncer. É uma doença heterogênea e sua patogênese ainda permanece obscura na maioria dos casos. Este trabalho avaliou a relação de quatro tipos específicos de quimiocinas com características clínico patológicas de pacientes portadoras de câncer de mama do Hospital de Clínica de Uberlândia. Na metodologia empregada, para a quantificação das quimiocinas no soro das pacientes, realizou-se a quantificação pela técnica de LegendPlex, um ensaio imuno-enzimático baseado em beads de captura que são adquiridas através de um Kit de ensaio, e as demais etapas do processo foram realizadas com auxílio de um citômetro de fluxo e os softwares LegendPlex e o IBM SPSS Statistics 22 para análises de dados. Os resultados demonstraram que os parâmetros clínicos subtipo molecular de câncer de mama, presença de receptor de estrógeno, presença de receptor de progesterona, presença de receptor HER2, menopausa e estadiamento clínico não influenciam na concentração das quimiocinas. Foi possível observar que as quimiocinas possuem uma correlação positiva entre elas e que existe associação entre a concentração de MIG com a presença de mutação da proteína p53. Nas análises de sobrevida, observou-se que, a alta concentração da quimiocina MIP-3alfa estava associada com maior sobrevida das pacientes em estadiamento inicial, e que altas concentrações da quimiocina MIP-1alfa estava presente no grupo de pacientes com tumores grau 3 que sobreviveram menos. Além disso, MIP 1alfa estava associado com maior sobrevida livre de recorrência de pacientes com invasão linfovascular. Além disso, pacientes com altas concentrações de MIG tiveram maior sobrevida livre de recorrência. Ademais, as pacientes não responsivas ao receptor de estrógeno, tiveram redução da sobrevida global quando possuíam altas concentrações de MCP-1 e MIG, o mesmo aconteceu com as pacientes com subtipo triplo-negativo com altas concentrações de MCP-1. Com base nesses achados, as dosagens sorológicas de MIP-1alfa, MCP-1, MIG e MIP-3alfa não demonstram diferença entre os grupos estudados. No entanto, MIP-3alfa, MIP-1alfa e MIG possuem associação com sobrevida e sobrevida livre de recorrência no grupo de pacientes estudados. Breast cancer is the most frequently diagnosed cancer in women and ranks second among the causes of death from cancer. It is a heterogeneous disease, and its pathogenesis remains unclear in most cases. This work evaluated the relationship of four specific types of chemokines with clinical pathological characteristics of patients with breast cancer at the Hospital de Clínica de Uberlândia. The quantification of chemokines in the patients' serum was performed using the LegendPlex technique, an immunoenzymatic assay based on capture beads that are acquired through an assay kit, and the other steps of the process were performed with the aid of a flow cytometer with LegendPlex and IBM SPSS Statistics 22 software for data analysis. The results demonstrated that the clinical parameters of the molecular subtype of breast cancer, presence of estrogen receptors, presence of progesterone receptors, presence of HER2 receptors, menopause, and clinical staging did not influence the concentration of chemokines. It was possible to observe that chemokines have a positive correlation between them, and that there is an association between MIG concentration and the presence of p53 protein mutation. In the survival analyses, it was observed that the high concentration of the chemokine MIP-3alpha was associated with greater survival of patients in the initial stage, and that high concentrations of the chemokine MIP-1alpha were present in the group of patients with grade 3 tumors who survived less. Furthermore, MIP-1alpha was associated with greater recurrence-free survival of patients with lymphovascular invasion, and patients with high concentrations of MIG had a longer recurrence-free survival. Furthermore, patients unresponsive to the estrogen receptor had a reduction in overall survival when they had high concentrations of MCP-1 and MIG, and the same happened in patients with triple negative subtype with high concentrations of MCP-1. Based on these findings, the serological dosages of MIP-1alpha, MCP-1, MIG and MIP-3alpha did not present any difference between the studied groups. However, MIP-3alpha, MIP-1alpha and MIG are associated with survival and recurrence-free survival in the group of patients studied. Dissertação (Mestrado)