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Wild cat species are often in a vulnerable or endangered situation around the globe. One of the questions on which the researchers’ efforts have focused is on aspects of reproduction with specimens in captivity, or on collecting genetic materials from wild animals for their multiplication in captivity. The objective of this review was compilation, ordering and synthesis of scientific information about biotechnologies in wild cats. This review was carried out compiling information published online on the subject for a period of 18 months; the information was synthesized and grouped into subtopics. Among the topics to highlight focus in the male parent approach allows for greater dispersal of genetic material compared to the female parent. During the application of technologies that assist reproduction, the collection, analysis and cryopreservation of semen is carried out, as well as the measurement of physical characteristics of the animals correlated with reproductive aspects. The main findings indicate that the investigation of methodologies such as seminal harvest by urethral catheterization, the development of cryopreservation protocols, and computer-assisted analysis of spermatic behavior are emerging biotechnologies, which allow expanding knowledge about the reproduction of felids. However, it should be considered for future research that the processes must be adapted for in situ work. In conclusion, the generation of information on these reproductive biotechnologies is a fundamental aspect for supporting sparse populations, to avoid the removal of specimens from their natural habitat, or the reintegration into it Las especies de felinos silvestres se encuentran en situación vulnerable o de peligro de extinción alrededor del globo, de ahí los esfuerzos de los investigadores en aspectos de reproducción con especímenes en cautiverio o bien colecta de material genético de animales silvestres para su multiplicación en cautiverio. El objetivo de esta investigación bibliográfica, es la compilación, ordenamiento y sistematización de la información científica pertinente al tema de biotecnologías reproductivas en felinos silvestres. La presente revisión se realizó compilando información publicada on line sobre el tema por un periodo de 18 meses, esta se sintetizó y agrupó en subtemas. Dentro de los tópicos a destacar se encuentra el enfoque del progenitor macho, lo cual permite una mayor dispersión del material genético comparado con la hembra, dentro de las tecnologías en reproducción se encuentran la colecta, análisis y criopreservación del semen, así como la medición de características físicas de los animales, correlacionadas con aspectos reproductivos. Los principales hallazgos indican que la investigación de metodologías como: colecta seminal por cateterización uretral, el desarrollo de protocolos de crio preservación y análisis mediado por computadora del comportamiento espermático; son las biotecnologías emergentes que permiten ampliar conocimiento sobre la reproducción de los felinos. No obstante, se debe considerar para investigaciones futuras que los procesos deben adaptarse para el trabajo in situ. En conclusión, la generación de información de biotecnologías reproductivas es un aspecto fundamental para el apoyo a poblaciones escasas para evitar la eliminación de especímenes de su hábitat natural o bien reinserción en el mismo

Introduction: The production of butterflies is an important socioeconomic activity and has become an option to generate income for rural microenterprises. Objective: To see how farming affects the body size of Heliconius butteflies in Costa Rican farms. Methods: We measured adults and pupae of Heliconius cydno, H. erato, H. hecale and H. melpomene in 10 butterfly farms, in the Huetar Atlantic Region of Costa Rica. Results: In some farms, adult Heliconius erato and H. hecale are heavier (p≤ 0.05), and have a longer abdomen and larger forewings. The weight did not differ among farms, and the sex ratio is close to 0,5. Conclusion: All farms sampled produce butterflies of fit for commercialization. Introducción: La producción de mariposas es una actividad socioeconómica importante y se ha convertido en una opción para generar ingresos en las microempresas rurales. Objetivo: Observar como los zoocriaderos afectan el tamaño corporal de mariposas Heliconius, producidas en zoocriaderos de Costa Rica. Métodos: Medimos adultos y pupas de Heliconius cydno, H. erato, H. hecale y H. melpomene de 10 zoocriaderos de mariposas, ubicados en el la zona Huetar Atlántica de Costa Rica. Resultados: En algunos zoocriaderos las mariposas adultas de Heliconius erato y H. hecale son significativamente más pesadas (p ≤ 0,05), poseen un abdomen más largo y el ala anterior más grande. El peso no difiere entre zoocriaderos, las relaciones de sexos son cercanas a 0,5. Conclusiones: Todos los zoocriaderos muestreados producen mariposas con calidad para su comercialización.

Resumen La valoración subjetiva de la calidad seminal ha dado paso al uso de las técnicas objetivas de valoración por medio de la tecnología CASA (computer-assisted semen analysis). Se pueden aplicar una serie de pruebas cinéticas, morfométricas, morfológicas o de integridad del ADN para caracterizar y entender la biología reproductiva del espermatozoide. En los últimos años, se ha dado un cambio significativo de paradigma conceptual respecto de qué es un eyaculado. Cabe decir que, hasta tiempos recientes, se consideró que una población representativa (miles de millones) de espermatozoides estaba formada por células "equivalentes" con un objetivo común: ser el que finalmente pudiese fecundar el ovocito. La comprobación de que el conjunto de espermatozoides se agrupa en subpoblaciones bien definidas de acuerdo con sus características cinéticas y/o morfométricas, ha abierto el camino hacia una visión más cooperativa. Además, se ha visto que la distribución subpoblacional es diferente entre individuos, lo que parece indicar diferentes estrategias que se pueden entender dentro de otro paradigma: el de la competencia espermática entre diferentes eyaculados. A pesar de que aún no se conoce el papel de las diferentes subpoblaciones, se deben continuar los trabajos en esa dirección. En esta revisión, se caracterizó la evaluación de la fertilidad con la tecnología CASA y se examinaron los principales métodos multivariados en la evaluación de subpoblaciones de espermatozoides analizados mediante un sistema CASA. Abstract: In recent years, there has been a substantive change in the conceptual paradigm regarding what an ejaculate is. Until recently, it was considered that a representative population (billions) of sperm was made up of "equivalent" cells with a common goal: to be the one that could finally fertilize the oocyte. New data suggesting that a set of spermatozoa is grouped in distinct subpopulations, according to their kinematic and morphometric characteristics, has opened the way towards a more cooperative vision. In addition, recently, it has been established that the subpopulation distribution is different among males, which seems to indicate that there are different strategies that can be understood within another paradigm: sperm competition between different ejaculates. These heterogeneous subpopulations of spermatozoa in the ejaculate, that show kinematics and morphometric patterns, has been widely known for a while, but the biological meaning of these different sperm subpopulations is still not clear. For this reason, the subjective evaluation of seminal quality is being displaced by objective assessment techniques using CASA technology (computer-assisted semen analysis). Also, the application of principal components (PC) and clustering methods to reveal subpopulations of spermatozoa are complementary tools used to characterize raw semen and processed cell suspensions. Despite the advances in such powerful tools, researchers are not well versed on such techniques and its advantages. For instance, PC analysis is a multivariate statistical method that reduces the number of variables used in subsequent calculations for describing the data. By integrating the original data into new complex mathematical variables, homogenous subpopulations of spermatozoa can define clearly. Furthermore, kinematic, morphometric, morphological or DNA integrity tests can be also applied to characterize and understand the reproductive biology of the spermatozoon. Although the role of the different subpopulations of spermatozoa remains unknown, the work should continue by implementing novel technologies and coordinated tools. In this review, we characterize the fertility evaluation with CASA technology and examine the main multivariate methods in the assessment of sperm subpopulations analyzed by CASA systems.

RESUMEN Introducción: La administración de un fármaco agonista de un alfa- 2-adrenérgicos asociado con la técnica del cateterismo uretral, es un método de desarrollo reciente en la recolección seminal en felinos, ofreciendo las ventajas sobre la recolecta por electroeyaculación y la recolecta epididimaria. La técnica se ha probado en Panthera onca y felinos de pequeño porte. Objetivos: Realizar la recolección seminal en felinos neotropicales utilizando la técnica de cateterización uretral. Determinar los parámetros testiculares y seminales de muestras recolectadas por la técnica de cateterización uretral. Metodología: En este estudio se utilizó un individuo por especie de Panthera onca, Puma yagouaroundi yLeopardus wedii localizados en el parque Zoobotánico Getúlio Vargas, Salvador, Bahia, Brasil. El semen fue recolectado por medio del cateterismo uretral y se utilizaron los farmácos: clorhidrato de medetomidina (0.1 mg /kg) y ketamina (5.0 mg /kg). Durante el desarrollo del procedimiento, se realizó la recolecta de los datos biométricos corporales y testiculares, así como la ultrasonografía de los testículos. Mediante microscopia óptica, en las muestras seminales se determinó: el vigor espermático, motilidad total, motilidad progresiva, la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática y la morfología espermática. Las muestras se sometieron al proceso de congelación - descongelación utilizando tres diferentes crioprotectores. Las muestras descongeladas fueron evaluadas por microscopía convencional, análisis seminal computarizado y citometría de flujo. Resultados: En este estudio fue realizado con éxito la técnica de recolección seminal en las tres especies, siendo el primer estudio que informa de los parámetros seminales deP. yagouaroundiy el primero que reporta la recolección seminal uretral en L. wiedii. Los datos presentados describen de forma pionera la morfocinética espermática de las especies incluidas. No hubo diferencias (P > 0.05) en la calidad seminal evaluando por grupo de crioprotector, ni diferencias en la integridad de las membranas pré e post-congelamento. Fue posible solamente la comparación con otras técnicas de recolección seminal o con resultados de calidad seminal obtenidos de muestras de gato doméstico. Conclusión: La cateterización uretral asociada al fármaco alfa- 2-adrenérgicos es una técnica eficiente para la recolección seminal en felinos neotropicales. El establecimiento de una potencial asociación de las características físicas del animal y la calidad seminal, es información de suma importancia en la aplicabilidad para la elección de reproductores en los programas de reproducción asistida. Abstract Introduction: The urethral catheterization associated with the application of alfa- 2 adrenergic agonist drug is a recent development and application technique for the collection of feline semen, with advantages over electro-ejaculation harvesting and epididymal harvesting. Objetives: Seminal collection in neotropical felines using the urethral catheterization technique. Determine the testicular and seminal parameters of samples collected by the urethral cataterization technique. Methods: The technique has been tested on Panthera onca and others small cats. In this study, individuals of Panthera onca, Puma yagouaroundi and Leopardus wiedii were used in captivity at Getulio Vargas Zoobotanical Park, Salvador, Bahia, Brazil. Medetomidine hydrochloride (0.1 mg/kg) and ketamine (5.0 mg/kg) were used as sedatives, the semen was collected by urethral catheterization. In the process were checked the testicular biometry was performed with percutaner and ultrasonography technique. The fresh samples were evaluated for conventional microscopy in the parameters of volume, sperm vigor, total motility, progressive motility, structural and functional integrity of the plasmatic membrane and sperm morphology. The samples were subjected to a freeze - thaw process using three different extenders. The thawed samples were tested using conventional microscopy, automated system analysis and flow cytometry. Results: In this study, the urethral harvest technique was successfully used in the three species. In the literature used don’t have report about seminal parameters in P. yagouaroundi and urethral seminal collection in L. wiedii. The data presented describe the spermatic morphocinetics of the included species in a pioneer study. There were no differences (P > 0.05) in the seminal quality evaluating the extender, nor differences in the integrity of pre and post-freeze membranes of the samples. Conclusion: The urethral catheterization associated with the application of alfa- 2 adrenergic agonist drug it’s an efficient technique for semen collection in neotropical cats. The establishment of a potential association of physical characteristics with seminal quality is extremely important information on the applicability of reproductive traits in assisted reproduction programs.

The sperm concentration analysis in boar ejaculates is a quality measure in farms dedicated to the selling seminal doses and artificial insemination. The aim of this study was to determine differences in accuracy between assessment methods of sperm concentration. A total of 174 ejaculates from Duroc and Pietrain boars were analyzed. The animals belonging at the Agricultural Production Program (PPA) of the School of Agronomy at the Technological Institute of Costa Rica. The sperm concentration was estimated by 3 methods: sperm-densitometer (ED), spectrophotometer (EF) and computer assisted semen analysis (casa). The lower concentration (p

Resumen El objetivo de este estudio fue evaluar la presencia de polimorfismos de nucleótido simple (SNP´s) en genes de µ-calpaína (CAPN-1) y calpastatina (CAST) asociados a atributos de terneza en carne bovina y relacionar la presencia de estos genes con las diferencias esperadas de progenie (DEP´s) para características de crecimiento. Se recolectaron muestras de sangre (n = 82) de machos reproductores Brahman de registro, pertenecientes a 7 haciendas, ubicadas en 4 regiones geográficas de Costa Rica. Todos los individuos se encontraban incluidos en el programa de mejoramiento genético de bovinos de carne, dirigido por la Corporación Ganadera (CORFOGA). Las muestras de sangre fueron analizadas en el laboratorio de biotecnología molecular del Instituto Tecnológico de Costa Rica, Sede San Carlos. Se analizó la presencia de los SNP´s CAPN316, CAPN4751 (gen CAPN-1) y CAST2959 (gen CAST). Se estimaron las frecuencias alélicas en CAPN316 para C (0,006), G (0,994) y genotipos CC (0,000), CG (0,013) y GG (0,987). El marcador CAPN4751 presentó frecuencias alélicas para C (0,165), T (0,835), así como frecuencias genotípicas de CC (0,025), CT (0,279) y TT (0,696). El polimorfismo de nucleótido simple CAST2959 presentó frecuencias alélicas para A (0,667), G (0,333), y genotípicas para AA (0,432), AG (0,469) y GG (0,099). Se observó una baja frecuencia del alelo favorable C del gen CAPN316, sin embargo, se observó una distribución de frecuencias alélicas más equilibrada en CAPN4751 y CAST2959. En el análisis de asociación entre SNP´s favorables y DEP´s, se encontraron asociaciones muy débiles o incluso ausencia de correlación. Abstract The objective of this study was to evaluate the presence of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in μ-calpaine (CAPN-1) and calpastatina (CAST) genes associated with beef tenderness, and related to the presence of these genes with the expected progeny differences (EPDs) for growth characteristics. The blood samples (n= 82) were collected from Brahman male’s bulls registered belonging to 7 farms, located at 4 geographic regions of Costa Rica. All males were included in the breeding program for beef cattle, managed by Corporación Ganadera (CORFOGA). The blood samples were analyzed at the molecular biotechnology laboratory of Technological Institute of Costa Rica, San Carlos Headquarters. The presence of SNPs CAPN316, CAPN4751 (CAPN-1 gene) and CAST2959 (CAST gene) were analyzed. The allele frequencies in CAPN316 were estimated for C (0.006), G (0.994) and for genotypes CC (0.000), CG (0.013) and GG (0.987). The genetic marker CAPN4751 showed allele frequencies for C (0.165), T (0.835), as well as genotype frequencies of CC (0.025), CT (0.279) and TT (0.666). The single-nucleotide polymorphisms CAST2959 showed allele frequencies for A (0.667), G (0.333), and genotypic for AA (0.432), AG (0.469) and GG (0.099). A low frequency in CAPN316 of favorable C allele was determined, however, a more equilibrated frequency in CAPN4751 and CATS2959 was observed. In the association analysis between favorable SNPs and EPDs, a weak association was found, or even lack of correlation.

The assessment of the semen quality is an essential tool to improve the reproductive indexes in swine farms. The motility is the most important parameter that used in the sperm quality evaluation because it is associated with the energy of the spermatozoon. The aim of this research was to determine the influence of breed composition on reproductive variables of sperm quality, kinetics and semen motility in boars. During 2016, 240 ejaculates were collected from 63 boars with a mean age of 24.4±10.9 months. Six racial groups were identified: Duroc (D), Yorkshire (Y), Landrace (L), F1 Pietrain*Duroc (PD) and two genetic lines (LA and LB). The breeds with the highest ejaculate volume presented a higher total number of spermatozoa (P

The present study was to evaluate the effect of catheter types, cervical artificial insemination (CAI) or intracervical (IC) and post-CAI or intrauterine (IU), on first calving and multiparous sows on production and reproduction variables. There was an effect (P < 0,05) of catheter type (IU or CI) over the weaned piglets (11,61 ± 0,29 and 10,85 ± 0,33, respectively) and the weaning litter weight (78, 28 ± 2.47 and 68,80 ± 2,85, respectively), in both the sows inseminated with intrauterine catheter presented higher values than the ones inseminated with intracervical catheter. In addition, an effect (P < 0,05) of calving order (multiparous or first calving) was found on piglets born alive, stillborn piglets (2,26 ± 0,32 and 1,45 ± 0,52, respectively), total of born piglets (14,34 ± 0,43 and 12,54 ± 0,68, respectively), litter weight at birth (16,11 ± 0,39 and 13,95 ± 0,62, respectively), and weaning weight (76,40 ± 2,01 and 70,68 ± 3,20, respectively). The multiparous sows showed higher values than first calving ones. There was no effect (P > 0,05) of interaction catheter type-calving order on the variables analyzed. Se evaluó el efecto de dos tipos de sonda (IC, intracervical, e IU, intrauterina) sobre variables de producción y reproducción en cerdas de primer parto y multíparas. Hubo un efecto (P < 0,05) del tipo de sonda (IU o IC) sobre los lechones destetados (11,61 ± 0,29 y 10,85 ± 0,33, respectivamente) y el peso de la camada al destete (78,28 ± 2,47 y 68,80 ± 2,85, respectivamente). Las hembras inseminadas con la sonda intrauterina presentaron valores mayores que las inseminadas con la sonda intracervical. Además, se encontró un efecto (P < 0,05) del orden de parto (multípara o de primer parto) sobre los lechones nacidos vivos, los lechones nacidos muertos (2,26 ± 0.32 y 1,45 ± 0,52, respectivamente), los lechones nacidos en total (14,34 ± 0,43 y 12,54 ± 0,68, respectivamente), el peso de la camada al nacer (16,11 ± 0,39 y 13,95 ± 0,62, respectivamente) y al destete (76,40 ± 2,01 y 70,68 ± 3,20, respectivamente). Las hembras multíparas presentaron valores mayores con respecto a las de primer parto. No hubo efecto (P > 0,05) de interacción tipo catéter-orden de parto sobre las variables analizadas.

Computer-assisted semen analysis (CASA) is used in animal reproduction with the objective of evaluating spermquality, quickly and reliably. Currently, artificial insemination centers must have reliable and objective systems thatensure the reliability of reproductive data. The aim of this paper was to review computer-assisted semen analysisin livestock species. The use of CASA systems replace routine quality analyzes that introduce biases and leads to different inaccuracy degrees. In addition, if intrinsic limitations of microscopy or sperm with different motilitypatterns are considered, it is most likely that considerable variability will be introduced which will have an impact on the objectivity of the estimation. At first, this type of technology was inaccessible, but they are currently used routinelyin most research laboratories for the evaluation of sperm samples of different species of zootechnical interest..Computerized techniques are able to issue reports with a high number of characteristics, to minimize the subjectivefactor of routine semen analysis, and to ensure a better correlation with the fertilizing capacity of spermatozoa by the relationship between sperm motility and functional competence. The use of CASA systems together with multivariatestatistical analysis have demonstrated the existence of kinetic and morphometric subpopulations in ejaculates ofdifferent species, eliminating the idea that ejaculates are homogeneous, formed by a single sperm population with normal distribution. Los sistemas computadorizados de análisis seminal (CASA, en inglés), se utilizan en reproducción animal conel propósito de valorar de forma rápida y fiable la calidad espermática. Actualmente, en los centros de inseminación artificial se debe disponer de sistemas fiables y objetivos que garanticen una confiabilidad de datos reproductivos.El objetivo fue realizar una revisión acerca de los sistemas de análisis seminal asistidos por computadora, enespecies ganaderas. El uso de sistemas CASA sustituye los análisis rutinarios que introducen sesgos y que conllevaa obtener distintos grados de imprecisión. Además, si se consideran las limitaciones intrínsecas de microscopíao espermatozoides con diferentes patrones de movilidad, lo más probable es que se introduzca una variabilidad considerable que repercute en la objetividad de la estimación. En un principio, este tipo de tecnologías eran pocoaccesibles, pero actualmente se utilizan en la mayoría de laboratorios para la evaluación de muestras espermáticas en distintas especies de interés zootécnico. Las técnicas computadorizadas son capaces de emitir informes con un número elevado de características, minimizar el factor subjetivo de los análisis rutinarios de semen y garantizar una mejor correlación con la capacidad fecundante de los espermatozoides, por medio de las relaciones entre la motilidad espermática y su competencia funcional. El uso de sistemas CASA junto con el análisis estadístico multivariante, han demostrado la existencia de subpoblaciones tanto cinéticas como morfométricas en eyaculados de diferentesespecies, desterrando la idea de que los eyaculados son homogéneos, formados por una única población espermáticacon distribución normal.

Proyecto de Investigación (Código: 215107 VIE) Instituto Tecnológico de Costa Rica. Vicerrectoría de Investigación y Extensión (VIE), 2018 La producción de mariposas es una actividad socioeconómica importante, la cual requiere apoyo gubernamental, académico y profesional para mejorar sus procesos. Este estudio es el comienzo de un grupo de investigaciones dirigidas a optimizar los agroecosistemas productivos de mariposas a nivel nacional, para la mejora de la calidad de los productos que los agricultores ofrecen al mercado internacional. Se incluyeron 10 zoocriaderos de mariposas. En este estudio se realizó análisis de suelo en cada zoocriadero de mariposas y un análisis foliar para cuatro especies de plantas de la familia Passifloracea. Se realizó una biometría a cuatro especies de mariposas adultas y a las pupas. Mediante un instrumento de preguntas y respuestas, se analizó la situación socioeconómica de los productores apoyados con visitas de campo. La edad promedio de los productores es de 42 años, 80% han completado la educación primaria, el mismo porcentaje tiene seguridad social. Las áreas de producción en promedio miden 821 m2, producen un promedio 450 pupas por semana. Se encontró diferencias significativas en los tamaños de adultos y pupas entre los productores. Las condiciones del suelo son ácidas, no tienen sistemas de drenaje y riego ni un programa de fertilización, no se determinó deficiencias nutricionales en las plantas hospederas. Las estructuras de los zoocriaderos están hechas de postes de madera, con estructuras de alambre y cubiertas con mallas de nylon (sarán) de segundo uso y existe una deficiencia en la capacitación para mantener registros de sus sistemas de producción.