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Abstract Beyond its clinical diversity and severity, acute myeloid leukemia (AML) is known for its complex molecular background and for rewiring biological processes to aid disease onset and maintenance. FLT3 mutations are among the most recurring molecular entities that cooperatively drive AML, and their inhibition is a critical molecularly oriented therapeutic strategy. Despite being a promising avenue, it still faces challenges such as intrinsic and acquired drug resistance, which led us to investigate whether and how autophagy and inflammasome interact and whether this interaction could be leveraged to enhance FLT3 inhibition as a therapeutic strategy. We observed a strong and positive correlation between the expression of key genes associated with autophagy and the inflammasome. Gene set enrichment analysis of the FLT3-ITD samples and their ex vivo response to five different FLT3 inhibitors revealed a common molecular signature compatible with autophagy and inflammasome activation across all poor responders. Inflammasome activation was also shown to strongly increase the likelihood of a poor ex vivo response to the FLT3 inhibitors quizartinib and sorafenib. These findings reveal a distinct molecular pattern within FLT3-ITD AML samples that underscores the necessity for further exploration into how approaching these supportive parallel yet altered pathways could improve therapeutic strategies.

Myeloid neoplasms result from molecular alterations in hematopoietic stem cells, with acute myeloid leukemia (AML) being one of the most aggressive and with a poor prognosis. Hematopoietic cell kinase (HCK) is a proto-oncogene that encodes a protein-tyrosine kinase of the Scr family, and it is highly expressed in AML. The present study investigated HCK expression in normal hematopoietic cells across myeloid differentiation stages and myeloid neoplasm patients. Within the AML cohort, we explored the impact of HCK expression on clinical outcomes and its correlation with clinical, genetic, and laboratory characteristics. Furthermore, we evaluated the association between HCK expression and the response to antineoplastic agents using ex vivo assay data from AML patients. HCK expression is higher in differentiated subpopulations of myeloid cells. High HCK expression was observed in patients with chronic myelomonocytic leukemia, chronic myeloid leukemia, and AML. In patients with AML, high levels of HCK negatively impacted overall and disease-free survival. High HCK expression was also associated with worse molecular risk groups and white blood cell count; however, it was not an independent prognostic factor. In functional genomic analyses, high HCK expression was associated with several biological and molecular processes relevant to leukemogenesis. HCK expression was also associated with sensitivity and resistance to several drugs currently used in the clinic. In conclusion, our analysis confirmed the differential expression of HCK in myeloid neoplasms and its potential association with unfavorable molecular risks in AML. We also provide new insights into HCK biological functions, prognosis, and response to antineoplastic agents.

The monolayer (two-dimensional or 2D) cell culture, while widely used, lacks fidelity in replicating vital cell interactions seen in vivo, leading to a shift toward three-dimensional (3D) models. Although monolayers offer simplicity and cost-effectiveness, spheroids mimic cellular environments better. This is due to its nutrient gradients, which influence drug penetration and provide a more accurate reflection of clinical scenarios than monolayers. Consequently, 3D models are crucial in drug development, especially for anti-cancer therapeutics, enabling the screening of cell cycle inhibitors and combination therapies vital for heterogeneous tumor populations. Inhibiting processes like migration and invasion often require drugs targeting the cytoskeleton, which can exhibit dual functionality with cell cycle inhibitors. Therapeutic approaches with promising anti-cancer potential often exhibit reduced efficacy in 3D cell culture compared to their performance in monolayer settings, primarily due to the heightened complexity inherent in this system. In the face of this scenario, this review aims to survey existing knowledge on compounds utilized in both 2D and 3D cell cultures, assessing their responses across different culture types and discerning the implications for drug screening, particularly those impacting the cell cycle and cytoskeletal dynamics.

IntroductionThis study investigated the impact of creep-feeding supplementation on the genome methylation of the Longissimus thoracis (LT) muscle in crossbred beef cattle (Bos taurus × Bos indicus).MethodsThe experiment involved 48 uncastrated F1 Angus-Nellore males (half-siblings), which were divided into two groups: NCF – no creep-feeding (n = 24) and CF – creep-feeding (n = 24). After weaning at 210 days, all animals were feedlot finished for 180 days under identical conditions. LT muscle biopsies were collected at weaning for genomic DNA methylation analysis by reduced representation bisulfite sequencing (RRBS).Results and discussionThe groups differed significantly (CF > NCF: p < 0.05) to weaning weight (243.57±5.70 vs. 228.92±5.07kg), backfat thickness (12.96±0.86 vs. 10.61±0.42mm), LT muscle marbling score (366.11±12.39 vs. 321.50±13.65), and LT intramuscular fat content (5.80±0.23 vs. 4.95±0.20%). The weights at the beginning of the experiment and at slaughter (390 days) did not differ significantly. Mean methylation levels were higher in CF with 0.18% more CpG, 0.04% CHG, and 0.03% CHH. We identified 974 regions with differential methylation (DMRs: > 25% and q < 0.05), which overlapped with 241 differentially methylated genes (DMGs). Among these genes, 108 were hypermethylated and 133 were hypomethylated in CF group. Notably, 39 of these DMGs were previously identified as differentially expressed genes (DEGs: log2 fold change [0.5]) in the same animal groups. Over-representation analysis highlighted epigenetic regulations related to muscle growth, PPAR signaling, adipogenesis, insulin response, and lipid metabolism. Key DMGs/DEGs included: ACAA1, SORBS1, SMAD3, TRIM63, PRKCA, DNMT3A, RUNX1, NRG3, and SLC2A8. These epigenetic changes improved the performance of supplemented animals up to weaning and enhanced meat quality traits, particularly higher intramuscular fat. The results provided insights into the intricate interplay between nutrition, epigenetics, gene expression and phenotypes in beef cattle production.

Objetivo: O gene de fusão BCR::ABL1 (Ph+) ocorre em cerca de 25% dos casos de leucemia linfoblástica aguda (LLA) em adultos. Esse subtipo molecular estava associado a desfechos clínicos ruins antes dos inibidores de tirosina quinase (TKIs). Os TKIs melhoraram significativamente a sobrevida global (SG), a sobrevida livre de eventos (SLE) e as taxas de remissão completa (RC). Adicionar o TKI dasatinibe à quimioterapia aumentou as taxas de resposta molecular completa (RMC) e reduziu as taxas de recaída comparado à quimioterapia isolada. Em 2016, a OMS reconheceu uma nova entidade diagnóstica provisória chamada LLA “semelhante ao Filadélfia” (Ph-like) ou “BCR::ABL1-like”. Esse subtipo de LLA-B, embora com uma assinatura gênica semelhante à LLA Ph+, não possui a proteína de fusão BCR::ABL1. Pacientes com esse subtipo têm desfechos clínicos ruins e mostram rearranjos, mutações e variações no número de cópias de genes relacionados a quinases ou receptores de citocinas, ativando vias JAK2/STAT, ABL1 e RAS. Ensaios clínicos testaram TKIs direcionados a JAK ou ABL na LLA Ph-like, mas um tratamento padrão ainda não foi estabelecido. Identificar pacientes com LLA Ph-like é desafiador e requer metodologias que avaliem a expressão gênica de forma abrangente. Chiaretti et al. (J Haematol. 2018;181(5):642-652) propuseram uma ferramenta de triagem baseada na expressão de 10 genes e um modelo estatístico para identificar pacientes com LLA Ph-like. Material e métodos: Investigamos a expressão de genes relacionados ao Ph-like em amostras de doadores sadios (n = 12) e pacientes adultos com LLA-B (n = 83; Ph+ n = 33 e Ph- n = 50) por PCR quantitativo e sua associação com características clínicas, laboratoriais e desfechos de sobrevivência. Utilizamos o modelo estatístico de Chiaretti et al. para calcular as pontuações. A dicotomização foi feita usando curva ROC, com métricas como área sob a curva (AUC) e índice de Youden, e comparações entre grupos foram realizadas com o teste de Mann-Whitney, teste exato de Fisher ou qui-quadrado, conforme apropriado. As análises de sobrevivência foram conduzidas pelo método Kaplan-Meier e análise de regressão de Cox, com p < 0,05 considerado significativo. Resultados: A expressão gênica de CD97, CD99, CRLF2, IFITM1, IFITM2, NUDT4, SEMA6A, SOCS2 e TP53INP1 foi maior em pacientes com LLA-B comparado a doadores sadios (p < 0,05). A pontuação de 10 genes foi maior em pacientes com LLA-B Ph+ do que em LLA-B Ph- (p < 0,0001). O status Ph+ ou Ph- não previu o prognóstico dos pacientes com LLA-B, mas pontuações de 10 genes mais altas foram associadas a uma sobrevida global reduzida. Em pacientes com LLA-B Ph-, pontuações altas também foram associadas a taxas de sobrevida global mais baixas (p = 0,04). Entre os genes relacionados ao Ph-like, apenas a alta expressão de IGJ foi associada a piores desfechos clínicos. Pontuações mais altas foram associadas a níveis mais baixos de LDH (p < 0,05). No subgrupo LLA-B Ph-, pontuações mais altas correlacionaram-se com menos blastos na medula óssea e níveis mais baixos de LDH (p < 0,05). A pontuação de 10 genes foi um fator prognóstico independente na análise multivariada de regressão de Cox. Discussão e conclusão: A expressão diferencial dos genes avaliados merece investigação adicional devido a suas possíveis implicações para a biologia da doença e alvos terapêuticos. A pontuação baseada em genes Ph-like pode ser uma ferramenta valiosa para a estratificação de risco em cenários de recursos limitados. Apoiado por FAPESP, CAPES, CNPq.

Introdução: A leucemia mieloide aguda (LMA) é uma neoplasia hematológica maligna heterogênea causada pelo acúmulo de mutações e alterações moleculares nas células-tronco hematopoiéticas e é responsável pelo maior número de mortes anuais por leucemias. O tratamento de pacientes com LMA permanece substancialmente inalterado há mais de 30 anos. Recentemente, o paradigma do tratamento da LMA vem sendo superado com o aparecimento de terapias alvo seletivas. Neste contexto, o venetoclax tem ganhado destaque e é um forte candidato a se tornar terapia de primeira linha a médio prazo. O venetoclax (inicialmente denominado ABT-199) é um inibidor seletivo de BCL2 e tem apresentado resultados promissores em grupos de pacientes com LMA desfavoráveis ou idosos. As proteínas da família BCL2 são fundamentais para a apoptose e desempenham um papel importante na patogênese da LMA. Os mecanismos envolvidos na resistência intrínseca ao venetoclax são conhecidos na LMA, mas a aquisição de resistência ainda é um ponto a ser explorado e de interesse clínico. Objetivos: Induzir resistência nas células leucêmicas mais sensíveis ao venetoclax, assim como caracterizar os efeitos moleculares e biomoleculares da resistência farmacológica, com venetoclax. Material e métodos: As linhagens celulares leucêmicas de U-937, NB4, Kasumi-1, MOLM-13, MV4-11 e THP-1, foram utilizadas. A viabilidade e resistência celular foi avaliada por ensaio de MTT, a clonogenicidade pelo ensaio de formação de colônias, a apoptose, dano mitocondrial e ciclo celular por citometria de fluxo, o perfil metabólico foi analisado por Seahorse XF96 e as vias de sinalização por Western blotting. Os testes de Spearman, Mann-Whitney ou ANOVA foram utilizados conforme apropriado. Valores de p < 0.05 foram considerados significativos. Resultados: O tratamento com venetoclax reduziu de forma dependente de tempo e de concentração a viabilidade celular de todos os modelos avaliados. As células MOLM-13-VR e MV4-11-VR expostas a concentrações crescentes de venetoclax apresentaram resistência 200 vezes em comparação com as células parentais (p < 0.05). Foi observado menores taxas de dano mitocondrial e apoptose nas células resistentes após exposição ao fármaco (p < 0.05), como também a formação de colônias e ciclo celular se manteve estável, quando comparadas as células parentais (p < 0.05). No cenário molecular, a expressão de proteínas relacionadas a marcadores de apoptose (clivagem de PARP1), dano em DNA (γH2AX) é menor nas células de LMA resistentes, após exposição ao venetoclax. Discussão e conclusão: O desenvolvimento das células resistentes ao venetoclax, MV4-11-VR e MOLM-13-VR, foi efetivo através da exposição intermitente e escalonada ao fármaco. A resistência farmacológica ao venetoclax apresentou que a expressão de proteínas relacionados ao dano de DNA e apoptose está reduzido nas células resistentes . Apoio: FAPESP, CNPq e CAPES.

Objectives: The TP53 gene encodes the tumor suppressor protein p53, which is crucial in cancer biology. Mutations in TP53 occur in 10 to 20% of AML cases and are associated with an unfavorable prognosis and high refractoriness to chemotherapy. The compound APR-246, which reactivates the mutated form of p53, shows potential in restoring its tumor-suppressive functions. However, different mutations in the TP53 gene can influence the response to treatment, highlighting the need for specific studies. This work aims to investigate the impact of TP53 mutations in AML patients, including clinical-laboratory characteristics, therapeutic response, and clinical outcome, as well as analyze changes in protein structure and interaction with APR-246 modulated by the mutation. Materials and methods: Initially, two cohorts were evaluated for mutations associated with the AML phenotype: the first cohort from the Beat AML study (942 samples from 805 AML patients; only samples collected at diagnosis will be included; Nature 562:526–531, 2018 and Cancer Cell 40:850-864, 2022). The second cohort comes from The Cancer Genome Atlas (TCGA) consortium (200 samples from 200 AML patients at diagnosis; N Engl J Med 368:2059-2074, 2013). We are analyzing the mutations identified in the 64 samples with TP53 gene alterations. Results: In total, we identified 59 distinct mutations, including: 35 missense, 10 frameshift, 6 stop codon, and 8 splice. Among these mutations, R248Q stands out as it was identified in six samples, being the most frequent missense mutation in our cohort. Discussion: This mutation is considered a hotspot and is functionally classified as dominant negative; according to predictors, it is classified as pathogenic and probably damaging. Although a structural damage predictor does not indicate that the mutation leads to structural alteration, the literature suggests that this alteration leads to conformational modifications of the protein that impair its functionality. Conclusion: Therefore, understanding this mutation and its relevance not only in the specific phenotype but also in other neoplasms is important for evaluating how the protein containing this mutation interacts with the drug APR-246. For this, both in silico and in vitro experiments will be conducted. In the in vitro field, we will assess the effects of APR-246 on specific TP53 mutations regarding proliferation, apoptosis, autophagy, and cell cycle progression in the presence of clinically used chemotherapeutic agents in AML experimental models. In the in silico realm, molecular docking assays followed by molecular dynamics simulations are underway. Both experiments will help understand the effect of the mutation on the interaction with the compound as well as the effect of the mutation on the dynamic system. It is expected that, due to the compound's mechanism of action, it will prevent conformational changes to avoid the detrimental phenotype.

Objetivos: A autofagia foi recentemente postulada como um potencial mecanismo que contribui para o desenvolvimento de resistência aos inibidores de FLT3 (FLT3i) em leucemia mieloide aguda (LMA). A cloroquina é um medicamento seguro e de baixo custo e um dos seus efeitos é a inibição da autofagia. Aqui, investigamos o potencial efeito anti-neoplásico da cloroquina (CQ) associada aos FLT3i em modelos de LMA FLT3-ITD. Métodos/Resultados: Em modelos de LMA FLT3-ITD (células MOLM13 e MV411), o tratamento com FLT3i (PKC412 e AC220) aumentou significativamente o fluxo autofágico induzindo a formação de organelas vesiculares ácidas, conforme quantificado por citometria de fluxo e confirmado por microscopia de fluorescência, por meio do marcador de autofagia laranja de acridina. Observamos uma redução nos reguladores negativos da autofagia, evidenciada pela inibição da fosforilação em AKT (pSer473), mTOR (pSer2448) e seu alvo a jusante p70S6K (pThr421/Ser424), bem como uma redução em p-ULK1 (pSer757). O tratamento com FLT3i resultou na conversão de LC3B-I em LC3B-II, seguido pela degradação de LC3B-II e p62, indicando indução de autofagia. A combinação de FLT3i com CQ (10 μM) reduziu significativamente a viabilidade e sobrevivência celular. Para investigar se a CQ induziu a morte celular por meio de potenciais efeitos off target e não devido ao bloqueio da autofagia, realizamos um silenciamento induzido por shRNA (KD) do mediador de autofagia ATG5 em células FLT3-ITD. O tratamento com FLT3i em células MOLM13 ATG5-KD reduziu significativamente o IC50 para o PKC412 (ATG5-KD:17nM vs controle:31nM) e aumentou a indução de apoptose. Para investigar se a inibição da autofagia seria uma opção para células resistentes a FLT3i, geramos células MV411 resistentes a AC220 (MV411 QR). Células MV411 QR exibiram um nível basal mais alto de autofagia em comparação com células MV411 convencionais, indicado pelo aumento da formação de organelas vesiculares ácidas e níveis reduzidos de proteína de LC3B e p62. O tratamento com CQ reduziu efetivamente o IC50 para o AC220 (monoterapia:7,68nM vs combinação:5,3nM) e aumentou a morte celular, sugerindo seu uso para mediar a resistência ao FLT3i na LMA. Molecularmente, a análise proteica revelou aumento no efeito do AC220 quando associado com CQ em células MV411 QR, evidenciado pelo aumento de Caspase3 e pela redução de pSTAT5 e pP70S6K. Amostras de células primárias de LMA tratadas ex vivo mostraram que a combinação de FLT3i com CQ reduziu a proliferação e sobrevivência em células FLT3-ITD. Por fim, realizamos um estudo in vivo em modelo murino de xenoenxerto (células MOLM13, n = 5 por grupo). Os animais foram tratados com veículo, PKC412 (6 mg/Kg/dia), CQ (20 mg/Kg/dia) e combinação até o óbito. O tratamento combinado aumentou a sobrevida global e preservou a hematopoese saudável. Discussão/Conclusão: O tratamento com FLT3i desencadeia fluxo de autofagia, restringindo a atividade inibitória da droga. A eficácia antileucêmica do FLT3i pode ser potencializada pela inibição da autofagia com CQ, superando a resistência farmacológica. Apesar da CQ apresentar tolerância clínica favorável, é essencial considerar a heterogeneidade do paciente. Avaliar o perfil autofágico na LMA pode contribuir significativamente para estratégias de tratamento personalizadas.

Objetivo: Na leucemia mieloide aguda (LMA), as mutações no gene TP53 são menos comuns em comparação com outros tipos de câncer (10 - 20%), mas, quando presentes, estão frequentemente associadas a um prognóstico muito ruim. Recentemente, Lee et al. (Blood Cancer Journal 14:80, 2024) relataram uma assinatura genética baseada em 25 genes de pacientes com LMA tipo selvagem para TP53 que se assemelha à assinatura gênica de TP53 mutado (TP53 mutant-like). Notavelmente, pacientes com LMA TP53 mutant-like também exibem um prognóstico ruim. No presente estudo, utilizando a coorte de pacientes com LMA do TCGA (The Cancer Genome Atlas), foram investigados os impactos individuais dos 25 genes associados ao tipo TP53 mutante, e foi identificado um escore de 8 genes capaz de definir grupos de risco mais precisamente do que o risco citogenético e molecular. Materiais e métodos: Foram incluídos pacientes com LMA não-M3 que receberam terapia potencialmente curativa, tinham status TP53 tipo selvagem e dados de RNA-seq da coorte do TCGA (n = 113). A dicotomização da expressão dos genes de interesse foi realizada usando análise de curva ROC e o índice C. A sobrevivência global foi estimada usando o teste log-rank, comparações entre variáveis contínuas foram feitas usando o teste de Mann-Whitney, e comparações entre variáveis categóricas foram feitas usando o teste exato de Fisher e o teste qui-quadrado. A análise diferencial de expressão gênica foi realizada usando o método limma-voom, e processos biológicos foram determinados por Gene Ontology. Um valor de p < 0,05 e/ou FDR < 0,25 foram considerados estatisticamente significativos. Resultados: Em pacientes com LMA, 8 dos 25 genes associados ao TP53 mutant-like impactaram a sobrevivência global (SNX14, PEAR1, NUDT13, TPRN, UGCG, ACAD10, THBD e ESYT1, todos p < 0,05). Usando os valores da razão de risco proporcional para cada gene, foi criado um escore prognóstico (8-gene TP53 mutant-like). Usando o tercil como ponto de corte, foram definidos três grupos: baixo (sobrevida mediana não atingida), intermediário (19 meses) e alto risco (11,3 meses) (p < 0,0001). Entre as associações clínico-laboratoriais, a predominância de grupos de risco molecular e citogenético favoráveis e desfavoráveis nos grupos intermediário e alto risco do escore 8-gene TP53 mutant-like foram observada (todos p < 0,05). Análises de genômica funcional associaram o alto escore 8-gene TP53 mutant-like com morte celular autofágica, regulação positiva de vias de sinalização e resposta a estímulos. Em contraste, o baixo escore foi associado à regulação do metabolismo de RNA, metabolismo e regulação do ciclo celular (todos FDR < 0,25). Discussão e conclusão: Este estudo amplia as observações iniciais da relevância clínica da assinatura genética TP53 mutant-like em pacientes com LMA e TP53 tipo selvagem, destacando a importância de uma estratificação de risco mais precisa. O escore de 8 genes identificado demonstra potencial para melhorar a previsão dos resultados clínicos na LMA, superando as limitações dos métodos de estratificação atuais. Além disso, os insights sobre os processos biológicos associados a diferentes escores abrem novas avenidas para pesquisa e desenvolvimento de terapias específicas voltadas para melhorar o prognóstico desses pacientes. Apoiado por FAPESP, CNPq e CAPES.

O inibidor de JAK1/2 aprovado pela FDA, Ruxolitinibe (Ruxo), é utilizado para tratar pacientes com neoplasias mieloproliferativas (NMP), oferecendo boa tolerabilidade e redução dos sintomas constitucionais. No entanto, o efeito do Ruxo na erradicação da célula iniciadora da leucemia é limitado. O estudo clínico TAMARIM mostrou que a monoterapia com tamoxifeno (Tam) reduziu a carga do alelo mutante em 13% dos pacientes. Aqui, exploramos se a combinação Ruxo+Tam poderia proporcionar um controle superior da doença em modelos pré-clínicos de NMP. In vitro, a terapia combinada de Ruxo (1-10 μM) e Tam (0,3-3 μM) por 72 horas exibiu forte efeito sinérgico (ZIP score = 24,4) na linhagem celular HEL. O tratamento com Ruxo ou Tam isoladamente reduziu o potencial da membrana mitocondrial (PMM) e as taxas de consumo de oxigênio em células HEL. Esses efeitos foram significativamente aprimorados com a combinação de Ruxo e Tam, sugerindo uma modulação do metabolismo mitocondrial como um mecanismo comum de ambos os fármacos. Para amostras primárias de NMP, realizamos triagem de fármacos ex vivo em 20 amostras de medula óssea (MO). A monoterapia com Ruxo (0,3-1 μM) não induziu apoptose de forma significativa, contudo a monoterapia com Tam ou em combinação com Ruxo induziu apoptose e reduziu o PMM em blastos (CD34+). A análise funcional da respiração confirmou diminuição do metabolismo mitocondrial tanto na monoterapia com Tam quanto na combinação Ruxo+Tam em amostras de NMP tratadas ex vivo. A análise por citometria de fluxo identificou uma população de blastos de NMP expressando CD36 associada à resistência à monoterapia com Tam. Essa resistência, contudo, pôde ser superada com a combinação com Ruxo. Para explorar os efeitos da terapia Ruxo+Tam in vivo, transplantamos 5 × 106 células da MO de um modelo murino de NMP JAK2 V617F (CD45.2) em camundongos B6 PepBoy irradiados letalmente (CD45.1). Quatro semanas após o transplante os camundongos foram randomizados em 4 grupos: veículo, Tam (75 mg/kg, intraperitoneal, 1 vez ao dia), Ruxo (120 mg/kg, oral, 2 vezes ao dia) e combinação Ruxo+Tam. Os camundongos foram tratados diariamente por 8 semanas e amostras de sangue periférico foram coletadas quinzenalmente para monitorar quimerismo, frequências de células imunes e contagens hematológicas. A análise de quimerismo mostrou uma redução significativa nas células CD45.2 a partir da semana 6 apenas no grupo Ruxo+Tam. A análise das células imunes no grupo Ruxo+Tam revelou uma redução na fração de células mieloides, o que foi associado à diminuição do PMM, sugerindo a modulação do metabolismo mitocondrial nestas células. Além disso, a terapia combinada resultou em uma diminuição significativa nas células CD36+ na semana 2. A análise hematológica indicou uma forte redução nos níveis de leucócitos, plaquetas e hematócrito a partir da semana 2 no grupo Ruxo+Tam, indicando um maior controle da doença. Em resumo, nossos dados apoiam a justificativa para usar a terapia combinada de Ruxo+Tam no tratamento de NMP. Demonstramos que ambos os fármacos atuam modulando o metabolismo mitocondrial, um efeito que é aprimorado quando usados em combinação, superando a resistência observada com as monoterapias. Além disso, Tam é um fármaco de baixo custo e sua incorporação na prática clínica poderia ser viável e benéfica em países de baixa e média renda. Esses achados apoiam a realização de novos estudos clínicos para explorar a eficácia dessa terapia combinada para pacientes com NMP.

Este artigo explora a evolução do modelo pedagógico napolitano, concentrando-se nos trabalhos de Fedele Fenaroli (versões de 1775 e 1847) e João Sépe (lançado em 1942). Destaca como o livro “Regole musicali per i principianti di cembalo”, lançado por Fenaroli, testemunhou mudanças no pensamento musical ao longo do século XIX e possuía semelhanças com os exercícios de harmonia e contraponto, no “Tratado de Harmonia” de João Sépe, amplamente utilizado em escolas de música no Brasil. Para tanto, em um primeiro momento, comparamos o formato da escrita dos exercícios e discutimos o modelo de ensino por meio dos baixos instrucionais. Posteriormente, apresentamos um modelo comparativo dos quatro ensinamentos musicais fundamentais dos cadernos de partimento: Regra da Oitava, Cadências, Suspensões e Movimentos de Baixo. Ademais, apresentamos uma breve discussão sobre as formas de modulações que encontramos nos autores. Por fim, demonstramos como a realização harmônica, transmitida através dos baixos, ganha destaque, evidenciando a força do acorde como unidade harmônica em relação às passagens contrapontísticas.

We describe the use of bismuth(III) triflate as an efficient and environmentally friendly catalyst for the Nazarov reaction of aryl vinyl ketones, leading to the synthesis of 3-aryl-2-ethoxycarbonyl-1-indanones and 3-aryl-1-indanones. By changing the temperature and reaction time, it was possible to modulate the reactivity, allowing the synthesis of two distinct product classes (3-aryl-2-ethoxycarbonyl-1-indanones and 3-aryl-1-indanones) in good to excellent yield. The reaction did not require additives and was insensitive to both air and moisture. Preliminary biological evaluation of some indanones showed a promising profile against some human cancer line cells.

Se no século XVIII a ritmopeia foi amplamente discutida por teóricos e estetas, o século XX reaviva esse interesse em lançar luz sobre o parâmetro rítmico, frequentemente negligenciado no período intermediário. Tanto as discussões do passado quanto as contemporâneas buscam esclarecer os conceitos e as complexas interações sonoras que compõem o aspecto musical do ritmo. Este artigo visa realizar uma revisão bibliográfica e mapear a linha teórica que conduz a uma compreensão mais objetiva e clara dos parâmetros fundamentais que definem a natureza do ritmo, investigando sua relação com a métrica, a hipermétrica e os fenômenos sonoros. Para tanto, adotaremos o modelo teórico-analítico proposto por Danuta Mirka, que reconstrói a genealogia das teorias sobre ritmopeia do século XVIII e incorpora as contribuições dos musicólogos contemporâneos. A problemática será abordada a partir de um estudo de caso específico de José Maurício Nunes Garcia, estabelecendo uma conexão entre as diferentes teorias para elucidar os princípios fundamentais que regem a conceituação do ritmo. Um ponto central que perpassa todo o percurso teórico é a ideia de hierarquia como organizadora do processo estético e cognitivo. Assim, este artigo demonstra esse processo como um elemento crucial para a compreensão do ritmo e sua relação com a dimensão métrica.

The use of high-grain diets in feedlots is associated with the development of acidosis and ruminitis, which can lead to the occurrence of liver abscesses (LAs). However, the effect of LA on carcass traits is not well known. This study assessed the effects of LA on the performance and carcass traits of beef cattle. Nine peer-reviewed publications with forty-seven treatment means were included in the data set. The effects of the LA were evaluated by examining the weighted mean difference (WMD) between LA (animal with LA) and control treatment (animal without LA). Heterogeneity was explored by meta-regression, followed by a subgroup analysis of the scores and percentages of liver abscess and concentrate level in the feedlot diet. Animals affected by LA showed a reduction in dry matter intake (−1.03%) and feed efficiency (−1.82%). Animals with an LA score of “A” (one or two small abscesses) exhibited a decrease in carcass weight (WMD = 3.41 kg; p = 0.034) and ribeye area (WMD = −1.37 cm2; p = 0.019). When assessing the impact of LA on carcass traits, the most reliable finding indicates a 1.21% reduction in the ribeye area, with no adverse effects observed on subcutaneous fat thickness or the marbling score in the carcass.

IntroductionAcute Myeloid Leukemia (AML) is one of the most aggressive hematological neoplasms, emphasizing the critical need for early detection and strategic treatment planning. The association between prompt intervention and enhanced patient survival rates underscores the pivotal role of therapy decisions. To determine the treatment protocol, specialists heavily rely on prognostic predictions that consider the response to treatment and clinical outcomes. The existing risk classification system categorizes patients into favorable, intermediate, and adverse groups, forming the basis for personalized therapeutic choices. However, accurately assessing the intermediate-risk group poses significant challenges, potentially resulting in treatment delays and deterioration of patient conditions.MethodsThis study introduces a decision support system leveraging cutting-edge machine learning techniques to address these issues. The system automatically recommends tailored oncology therapy protocols based on outcome predictions.ResultsThe proposed approach achieved a high performance close to 0.9 in F1-Score and AUC. The model generated with gene expression data exhibited superior performance.DiscussionOur system can effectively support specialists in making well-informed decisions regarding the most suitable and safe therapy for individual patients. The proposed decision support system has the potential to not only streamline treatment initiation but also contribute to prolonged survival and improved quality of life for individuals diagnosed with AML. This marks a significant stride toward optimizing therapeutic interventions and patient outcomes.

Abstract We report a series of 1,3-diphenylureido hydroxamate HDAC inhibitors evaluated against sensitive and drug-resistant P. falciparum strains. Compounds 8a–d show potent antiplasmodial activity, indicating that a phenyl spacer allows improved potency relative to cinnamyl and di-hydrocinnamyl linkers. In vitro, mechanistic studies demonstrated target activity for PfHDAC1 on a recombinant level, which agreed with cell quantification of the acetylated histone levels. Compounds 6c, 7c, and 8c, identified as the most active in phenotypic assays and PfHDAC1 enzymatic inhibition. Compound 8c stands out as a remarkable inhibitor, displaying an impressive 85% inhibition of PfHDAC1, with an IC50 value of 0.74 µM in the phenotypic screening on Pf3D7 and 0.8 µM against multidrug-resistant PfDd2 parasites. Despite its potent inhibition of PfHDAC1, 8c remains the least active on human HDAC1, displaying remarkable selectivity. In silico studies suggest that the phenyl linker has an ideal length in the series for permitting effective interactions of the hydroxamate with PfHDAC1 and that this compound series could bind as well as in HsHDAC1. Taken together, these results highlight the potential of diphenylurea hydroxamates as a privileged scaffold for the generation of potent antimalarial HDAC inhibitors with improved selectivity over human HDACs.

Isolated from the marine bacteria Serinicoccus sp., seriniquinone (SQ1) has been characterized by its selective activity in melanoma cell lines marked by its modulation of human dermcidin and induction of autophagy and apoptosis. While an active lead, the lack of solubility of SQ1 in both organic and aqueous media has complicated its preclinical evaluation. In response, our team turned its effort to explore analogues with the goal of returning synthetically accessible materials with comparable selectivity and activity. The analogue SQ2 showed improved solubility and reached a 30-40-fold greater selectivity for melanoma cells. Here, we report a detailed comparison of the activity of SQ1 and SQ2 in SK-MEL-28 and SK-MEL-147 cell lines, carrying the top melanoma-associated mutations, BRAFV600E and NRASQ61R, respectively. These studies provide a definitive report on the activity, viability, clonogenicity, dermcidin expression, autophagy, and apoptosis induction following exposure to SQ1 or SQ2. Overall, these studies showed that SQ1 and SQ2 demonstrated comparable activity and modulation of dermcidin expression. These studies are further supported through the evaluation of a panel of basal expression of key-genes related to autophagy and apoptosis, providing further insight into the role of these mutations. To explore this rather as a survival or death mechanism, autophagy inhibition sensibilized BRAF mutants to SQ1 and SQ2, whereas the opposite happened to NRAS mutants. These data suggest that the seriniquinones remain active, independently of the melanoma mutation, and suggest the future combination of their application with inhibitors of autophagy to treat BRAF-mutated tumors.

O presente estudo teve por objetivo analisar a distribuição espaço-temporal dos focos de calor no interior e entorno da Estação Ecológica Rio Ronuro, localizada no Estado de Mato Grosso, entre os anos de 1998 e 2019 e também estudar a influência da revogação da resolução CONAMA 13/1990 na área. Para tal trabalho, foi realizado o levantamento dos dados de cada ano através de dados disponibilizados no Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais (INPE), pela plataforma MapBiomas e através do Instituto Nacional de Meteorologia (INMET). Para quantificação dos dados foram utilizados programas de edição de planilhas eletrônicas e para o fornecimento e o tratamento de imagens, o software Qgis. Dentre os resultados, existe a possibilidade da liberação da queima controlada ter influenciado no aparecimento de focos de calor nos meses de outubro e junho, bem como a redução da precipitação para o período entre os anos de 2008 a 2019. Houve o aumento do número de focos entre os meses de março a agosto (período de seca). Esse aumento também esteve presente quando se tratou das classes de uso e cobertura do solo, em que apresentou para as classes de lavouras temporárias e de soja os maiores números de focos de calor presentes por hectare. Com relação a alteração na legislação, o número de focos de calor não demonstrou um aumento significativo, porém não deixa de ser uma ameaça para a ESEC, visto que existem muitos focos próximos da unidade de conservação. Dentro deste contexto, observou-se que na área deveria ocorrer um monitoramento mais complexo, dado que essa unidade atua em regime de proteção integral, havendo uma legislação específica para ampará-la. Neste sentido, o bom entendimento da ocorrência de focos de calor e suas características permite a criação de um banco de dados com o intuito de quantificar os o número de focos de calor na área, além da identificação e ação contra possíveis incêndios florestais. Deste modo, essas informações podem auxiliar no embasamento da criação de um plano de manejo da área, contemplando a prevenção dos incêndios na ESEC.

Introdução: O panarício herpético (PH) é uma infecção cutânea de acometimento periungueal causada pelo vírus herpes simples (HSV) tipo 1 e 2. As apresentações clínicas das infecções por HSV se correlacionam com o status imunológico do paciente. Assim, em imunossuprimidos, como naqueles com AIDS, a clínica pode assumir aspecto atípico e crônico em vez da forma clássica marcada por vesículas. Relato de caso: Paciente do sexo feminino, 40 anos, com o diagnóstico de infecção pelo HIV há 16 anos, sem adesão à terapia antirretroviral, foi internada na enfermaria de Infectologia do Hospital de Base para manejo de síndrome demencial e lesões cutâneas difusas. Na ocasião, apresentava carga viral de HIV de 9.717 cópias/ml e contagem de linfócitos T-CD4 de 26 células/mm³. Ao exame físico, apresentava lesão ulcerada em 2° quirodáctilo esquerdo, não dolorosa. A lesão foi submetida à biópsia e encaminhada para análise histopatológica e para cultura de bactérias, fungos e micobactérias tuberculosas e não-tuberculosas. A paciente evoluiu com lesão vegetante no local, tendo sido realizado tratamento empírico para infecção de etiologia bacteriana e fúngica, sem resposta terapêutica. Ao longo da internação, a paciente evoluiu com coleção organizada e com progressão da úlcera de forma rapidamente erosiva e deformante, inicialmente no 2° quirodáctilo esquerdo e, em seguida, apresentou acometimento idêntico do 3° quirodáctilo ipsilateral. As culturas de fragmento de pele foram todas negativas. Após várias tentativas terapêuticas sem sucesso, obteve-se o resultado do histopatológico, que apontou para infecção por Herpes simplex, com a seguinte descrição: dermatite ulcerada com atipias citológicas compatíveis com HSV. Somado às lesões digitais, a paciente também apresentava extensa úlcera em região interglútea, cuja análise histopatológica identificou o mesmo aspecto morfológico da lesão dos dígitos. Diante dos resultados, a paciente realizou tratamento com aciclovir por 14 dias e obteve resolução completa das lesões e regeneração do tecido adjacente em cerca de 3 meses após o término do antiviral. Comentários: Esse caso é permeado de várias características não usuais do PH. A apresentação em mais de um quirodáctilo, indolor, vegetante e rapidamente ulcerativa das lesões, levando à importante perda tecidual, denota o caráter atípico do PH em pacientes imunossuprimidos. Dessa forma, urge sempre considerar apresentações inabituais das infecções de pele nos pacientes com AIDS.

Introdução: A infecção pela bactéria B. henselae, conhecida como Doença da Arranhadura do Gato, pode levar a sintomas com amplo espectro de gravidade e manifestações clínicas, tipicamente se apresentando com um quadro autolimitado e benigno, iniciado por lesão cutânea no local da inoculação, que se desenvolve em média de 3 a 10 dias após a infecção. Cerca de 2 semanas após o inóculo, costuma surgir quadro de linfonodomegalia próxima à lesão cutânea. No entanto, cerca de 5 a 10% dos casos podem manifestar-se por envolvimento ocular, tornando o olho o segundo local mais comum de afecção pela doença. Quando envolve o sistema nervoso central, a doença pode afetar os pares cranianos, acarretando uma neurorretinite unilateral. Descrição do caso: Paciente do sexo feminino, 17 anos, internada no Hospital de Base do Distrito Federal devido à febre com duração de dois dias, cefaleia intensa em região frontotemporal esquerda, dor à mobilização ocular e redução da acuidade visual. Somado a isso, apresentou hematomas espontâneos pelo corpo, esquecimentos frequentes, parestesia e edema em membro superior esquerdo. Quanto à epidemiologia, residia em área rural, tendo contato com cavalos, cães e gatos não vacinados. Um dos gatos faleceu um mês antes do início do quadro por causa indeterminada. Ao exame físico, apresentava força muscular normal em dimídio direito e grau 4 em dimídio esquerdo, sinal de Hoffman e Tromner positivos bilateralmente. A fundoscopia demonstrou papiledema bilateral, mais severo e com estrela macular no olho esquerdo. No exame abdominal, possuía dor à palpação e baço palpável. Durante a internação, a tomografia de abdome confirmou a esplenomegalia. Na investigação diagnóstica, foi submetida à punção lombar, com líquor sem alterações. Também foi realizada sorologia para Bartonella henselae com IgG +1:400 e IgM negativo. Diante desse resultado, foi iniciado tratamento para bartonelose ocular com rifampicina, doxiciclina e prednisona e a paciente apresentou melhora expressiva da acuidade visual e dos sintomas neurológicos. Comentários: A apresentação ocular bilateral e o acometimento do sistema nervoso central em uma paciente previamente imunocompetente sustentam a característica incomum do caso, tipicamente marcado apenas por linfadenopatia e sintomas leves, autolimitados, em pacientes dessa natureza. Portanto, é fundamental manter a suspeição clínica e as medidas de prevenção adequadas, mesmo dentro da população geral.

Objetivo: O mieloma múltiplo (MM) é uma neoplasia hematológica caracterizada pela proliferação clonal de plasmócitos malignos que causam hipercalcemia, anemia, lesões osteolíticas, insuficiência renal, imunossupressão e apresenta altas taxas de recaída. O IGF1 induz proliferação e efeitos antiapoptóticos através da via PI3K/AKT e MAPK, mesmo em modelos de MM independentes de IL6, indicando que o eixo IGF1R/IRS1 desempenha um papel importante no desenvolvimento e progressão da doença. NT157 é um composto sintético que leva à inibição a longo prazo da sinalização IGF1R-IRS1/2. No presente estudo, nós avaliamos os níveis de expressão dos genes envolvidos no eixo IGF1/IGF1R/IRS1-2 em uma coorte de MM, assim como caracterizamos os efeitos da inibição farmacológica desta via, com NT157, em modelos celulares da doença. Material e métodos: Os dados de expressão de IGF1, IGF1R, IRS1 e IRS2 foram derivados de banco de dados AmaZonia! 2008. Análise do escore de dependência gênica foram gerados para 20 linhagens celulares distintas de MM pelo DepMap e obtidos do banco de dados MyeloDB. As linhagens celulares de MM, MM1.S, MM1.R, U266 e RPMI 8226, foram utilizadas. A viabilidade celular foi avaliada por ensaio de MTT, a clonogenicidade pelo ensaio de formação de colônias, a apoptose por citometria de fluxo e anexina V/PI e as vias de sinalização por Western blotting. Os testes de Spearman, Mann-Whitney ou ANOVA foram utilizados conforme apropriado. Valores de p < 0.05 foram considerados significativos. Resultados: Os níveis de RNAm de IGF1 e IRS1 foram aumentados nos pacientes com MM, enquanto os níveis de IGF1R e IRS2 foram reduzidos (p < 0.05). Foi observada uma correlação positiva entre os níveis de IGF1R e IRS2 (r = 0.38, p = 0.03). A fosforilação de IGF1R foi observada nas células MM1.S e MM1.R, sendo a expressão do receptor observada também nas células RPMI 8226. A expressão de IRS1 foi observada em todas as linhagens celulares. A expressão de IRS2 foi observada nas células MM1.S, MM1.R e RPMI 8226. O escore de dependência foi 0.032 para IGF1, -0.519 para o IGF1R, -0.503 para o IRS1 e -0.455 para o IRS2. O tratamento com NT157 reduziu de forma dependente de tempo e de concentração a viabilidade celular de todos os modelos avaliados. Foram observadas também redução dependente de concentração da formação de colônias e indução de apoptose nas células de MM (p < 0.05). No cenário molecular, o NT157 induziu marcadores de apoptose (clivagem de PARP1), dano em DNA (γH2AX) e estresse celular (p-ERK1/2) e reduziu proteínas associas à síntese proteína (p-RPS6) em células MM1.S e U266. Em células MM1.S foi observada uma redução da fosforilação de IGF1R, STAT3 e STAT5. Os níveis de IRS1 foram reduzidos em células U266. Discussão e conclusão: A eixo de sinalização IGF1/IGF1R/IRS é diferencialmente ativado em células de MM, sendo que a análise de dependência gênica sugere que a presença do receptor e das proteínas adaptadoras intracelulares são mais importantes que o IGF1 autócrino, provavelmente que esse pode ser obtidos de fontes parácrina. A inibição farmacológica do IGF1R/IRS1 apresentou efeitos antineoplásicos marcantes em modelos celulares de MM. A análise molecular, sugere uma maior complexidade da ação do NT157 frente ao repertório de alvos expressos em cada modelo celular e merece futuras investigações. Apoio: FAPESP, CNPq e CAPES.

Objetivos: As neoplasias mieloides são resultantes de alterações moleculares na célula-tronco hematopoiética, sendo a leucemia mieloide aguda (LMA) a mais agressiva e com piores desfechos clínicos. O HCK é um proto-oncogene que codifica uma proteína tirosina-quinase da família Scr, predominantemente expressa em células hematopoiéticas e que possui inibidor farmacológico seletivo. Nos últimos anos houve grandes avanços no entendimento da complexidade molecular das leucemias agudas que tem se traduzido em novas terapias-alvo dirigidas. Desta forma, o objetivo do estudo foi caracterizar a expressão do HCK na mielopoiese normal e maligna, bem como seu impacto sob os desfechos de sobrevida, características clínicas e funções biológicas em pacientes com LMA. Materiais e métodos: Os dados de expressão de HCK em diferentes populações de células hematopoiéticas foram obtidos do estudo GSE24759. Células NB4 e HL-60 foram induzidas a diferenciar com ATRA e a expressão de HCK foi avaliada por PCRq. Os níveis de transcritos de HCK em amostras obtidas de doadores saudáveis e pacientes com neoplasia mieloide (SMD, LMMC, LMC e LMA) foram derivados do banco de dados AmaZonia! 2008. A expressão gênica, dados genéticos e clínicos do estudo LMA TCGA foram obtidos do cBioPortal. Os dados relacionados com tratamentos ex vivo em células de pacientes e linhagens celulares de LMA foram obtidos dos estudos Beat AML e Lee et al. Análises de correlação, associação e comparação entre grupos foram realizados por testes de Spearman, Fisher e Mann-Whitney. A análise de enriquecimento gênico foi realizada por GSEA. Os testes de Log-rank e regressão de Cox foram usados para estimativas de sobrevida. FDR < 0,25 e p valor < 0,05 foram considerados significativos. Resultados: A expressão de HCK é maior nas subpopulações diferenciadas de células mieloides e a indução de diferenciação celular aumenta a expressão de HCK em células NB4 e HL-60 (p < 0,05). A alta expressão de HCK foi observada em pacientes com LMMC, LMC e LMA (p < 0,05). Em pacientes com LMA, os altos níveis de HCK impactou negativamente a sobrevida global e livre de doença (HR > 1; p < 0,05). A alta expressão de HCK foi associada com grupos de piores riscos moleculares e contagem de leucócitos, mas não foi um fator independente de prognóstico. Nas análises de genômica funcional, a alta expressão de HCK foi associada com diversos processos biológicos e moleculares, dos quais destacamos: vias de sinalização PI3K/AKT/mTOR, IL-6/JAK2/STAT3, KRAS, IL2/STAT5 e NOTCH, ROS, hipóxia e resposta inflamatória. Em ensaios ex vivo com amostras de pacientes com LMA e linhagens celulares, destacamos que o HCK esteve associado com sensibilidade e resistência a diversos fármacos de uso clínico, entre eles a azacitidina. Discussão e conclusão: Os dados obtidos demonstram que pacientes com LMA com alta expressão de HCK apresentam um prognóstico desfavorável. A expressão diferencial de HCK está associada a diversas vias de sinalização amplamente relacionadas à leucemogênese, com papel central no crescimento, proliferação e sobrevivência. Nossos dados sugerem que o HCK pode ser um marcador de prognóstico e confirma seu potencial como alvo molecular na LMA. Uma abordagem farmacológica direcionada a essa proteína poderia oferecer uma perspectiva para o desenvolvimento de tratamentos mais eficazes.

A palma forrageira é uma das plantas mais cultivadas no semiárido brasileiro. Apesar de sua alta capacidade de adaptação em áreas com escassez de chuvas é vulnerável a doenças e pragas, sendo a mais importante à cochonilha-do-carmim (Dactylopius opuntiae Cockerell) que destrói os palmais no semiárido nordestino, tornando-se o principal impasse no cultivo da palma. Em razão disto, esta pesquisa teve como objetivo avaliar o desempenho das espécies de palma forrageira Opuntia sp., Opuntia stricta, Nopalea cochenillifera, consideradas resistentes à referida praga, implantadas de maneira convencional comparando-as ao sistema de cultivo sobre o solo em período de déficit hídrico. O experimento foi conduzido no município de Jaçanã, Rio Grande do Norte. Foi adotado delineamento experimental em blocos casualizados, em esquema fatorial com seis tratamentos cognominados de cultivo convencional e sistema de cultivo sobre o solo com as três espécies com duração de 12 meses. Os resultados mostraram que o desempenho dos sistemas de cultivo das variedades com recorte temporal no período de estiagem foi semelhante em ambos os sistemas de cultivo, em relação às variáveis: emissão e fixação de raízes, emissão de novos cladódios. Os dois sistemas de cultivo proporcionam desempenho semelhante em relação ao cultivo das variedades investigadas.

Recent advances have been made in understanding molecular markers involved in cancer malignancy, resulting in better tumor staging and identifying new potential therapeutic targets. Ezrin (EZR), a member of the ezrin, radixin, moesin (ERM) protein family, is essential for linking the actin cytoskeleton to the cell membrane and participates in the signal transduction of key signaling pathways such as Rho GTPases and PI3K/AKT/mTOR. Clinical and preclinical studies in a wide variety of solid and hematological tumors indicate that (i) EZR is highly expressed and predicts an unfavorable clinical outcome, and (ii) EZR inhibition reduces proliferation, migration, and invasion in experimental models. The development of pharmacological inhibitors for EZR (or the signaling mediated by it) has opened a new round of investigation, but studies are still limited. The scope of the present review is to survey studies on the expression and clinical impact of EZR in cancer, as well as studies that perform interventions on the function of this gene/protein in cancer cells, providing proof-of-concept of its antineoplastic potential.

Abstract Background Brazil has been dramatically hit by the SARS-CoV-2 pandemic and is a world leader in COVID-19 morbidity and mortality. Additionally, the largest country of Latin America has been a continuous source of SARS-CoV-2 variants and shows extraordinary variability of the pandemic strains probably related to the country´s outstanding position as a Latin American economical and transportation hub. Not all regions of the country show sufficient infrastructure for SARS-CoV-2 diagnosis and genotyping which can negatively impact the pandemic response. Methods Due to this reason and to disburden the diagnostic system of the inner São Paulo State, the Butantan Institute established the Mobile Laboratory (in Portuguese: LabMovel) for SARS-CoV-2 testing which started a trip of the most important “hotspots” of the most populous Brazilian region. The LabMovel initiated in two important cities of the State: Aparecida do Norte (an important religious center) and the Baixada Santista region which incorporates the port of Santos, the busiest in Latin America. The LabMovel was fully equipped with an automatized system for SARS-CoV-2 diagnosis and sequencing/genotyping. It also integrated the laboratory systems for patient records and results divulgation including in the Federal Brazilian Healthcare System. Results Currently,16,678 samples were tested, among them 1,217 from Aparecida and 4,564 from Baixada Santista. We tracked the delta introductio in the tested regions with its high diversification. The established mobile SARS-CoV-2 laboratory had a major impact on the Public Health System of the included cities including timely delivery of the results to the healthcare agents and the Federal Healthcare system, evaluation of the vaccination status of the positive individuals in the background of exponential vaccination process in Brazil and scientific and technological divulgation of the fieldwork to the most vulnerable populations. Conclusions The SARS-CoV-2 pandemic has demonstrated worldwide the importance of science to fight against this viral agent and the LabMovel shows that it is possible to integrate researchers, clinicians, healthcare workers and patients to take rapid actions that can in fact mitigate this and other epidemiological situations.

Abstract The treatment of acute leukemia is challenging because of the genetic heterogeneity between and within patients. Leukemic stem cells (LSCs) are relatively drug-resistant and frequently relapse. Their plasticity and capacity to adapt to extracellular stress, in which mitochondrial metabolism and autophagy play important roles, further complicates treatment. Genetic models of phosphatidylinositol-5-phosphate 4-kinase type 2 protein (PIP4K2s) inhibition have demonstrated the relevance of these enzymes in mitochondrial homeostasis and autophagic flux. Here, we uncovered the cellular and molecular effects of THZ-P1-2, a pan-inhibitor of PIP4K2s, in acute leukemia cells. THZ-P1-2 reduced cell viability and induced DNA damage, apoptosis, loss of mitochondrial membrane potential, and the accumulation of acidic vesicular organelles. Protein expression analysis revealed that THZ-P1-2 impaired autophagic flux. In addition, THZ-P1-2 induced cell differentiation and showed synergistic effects with venetoclax. In primary leukemia cells, LC-MS/MS-based proteome analysis revealed that sensitivity to THZ-P1-2 is associated with mitochondrial metabolism, cell cycle, cell-of-origin (hematopoietic stem cell and myeloid progenitor), and the TP53 pathway. The minimal effects of THZ-P1-2 observed in healthy CD34+ cells suggest a favorable therapeutic window. Our study provides insights into the pharmacological inhibition of PIP4K2s targeting mitochondrial homeostasis and autophagy, shedding light on a new class of drugs for acute leukemia.

Abstract Combination therapies or multi-targeted drugs have been pointed out as an option to prevent the emergence of resistant clones, which could make long-term treatment more effective and translate into better clinical outcomes for cancer patients. The NT157 compound is a synthetic tyrphostin that leads to long-term inhibition of IGF1R/IRS1-2-, STAT3- and AXL-mediated signaling pathways. Given the importance of these signaling pathways for the development and progression of lung cancer, this disease becomes an interesting model for generating preclinical evidence on the cellular and molecular mechanisms underlying the antineoplastic activity of NT157. In lung cancer cells, exposure to NT157 decreased, in a dose-dependent manner, cell viability, clonogenicity, cell cycle progression and migration, and induced apoptosis (p