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A deep comprehension of the vaginal ecosystem may hold promise for unraveling the pathophysiology of pregnancy and may provide novel biomarkers to identify subjects at risk of maternal-fetal complications. In this prospective study, we assessed the characteristics of the vaginal environment in a cohort of pregnant women throughout their different gestational ages and puerperium. Both the vaginal bacterial composition and the vaginal metabolic profiles were analyzed. A total of 63 Caucasian women with a successful pregnancy and 9 subjects who had a first trimester miscarriage were enrolled. For the study, obstetric examinations were scheduled along the three trimester phases (9-13, 20-24, 32-34 gestation weeks) and puerperium (40-55 days after delivery). Two vaginal swabs were collected at each time point, to assess the vaginal microbiome profiling (by Nugent score and 16S rRNA gene sequencing) and the vaginal metabolic composition (1H-NMR spectroscopy). During pregnancy, the vaginal microbiome underwent marked changes, with a significant decrease in overall diversity, and increased stability. Over time, we found a significant increase of Lactobacillus and a decrease of several genera related to bacterial vaginosis (BV), such as Prevotella, Atopobium and Sneathia. It is worth noting that the levels of Bifidobacterium spp. tended to decrease at the end of pregnancy. At the puerperium, a significantly lower content of Lactobacillus and higher levels of Gardnerella, Prevotella, Atopobium, and Streptococcus were observed. Women receiving an intrapartum antibiotic prophylaxis for Group B Streptococcus (GBS) were characterized by a vaginal abundance of Prevotella compared to untreated women. Analysis of bacterial relative abundances highlighted an increased abundance of Fusobacterium in women suffering a first trimester abortion, at all taxonomic levels. Lactobacillus abundance was strongly correlated with higher levels of lactate, sarcosine, and many amino acids (i.e., isoleucine, leucine, phenylalanine, valine, threonine, tryptophan). Conversely, BV-associated genera, such as Gardnerella, Atopobium, and Sneathia, were related to amines (e.g., putrescine, methylamine), formate, acetate, alcohols, and short-chain fatty-acids (i.e., butyrate, propionate).

Neisseria gonorrhoeae (GC) is the agent of one of the most common bacterial sexually transmitted infections worldwide. The possible development of 'untreatable' infections points out the need for antibiotic-sparing methods to reduce the number of gonococcal infections. In this context, fatty acids are interesting candidates as next-generation antibacterial agents. The aim of this study was to investigate the bactericidal effects of selected fatty acids on GC viability, as well as to observe their biological effects by means of transmission electron microscopy. The cytotoxicity of these compounds on human cervical cells (HeLa), chosen as a model of genital mucosa, was assessed as well. Lauric, myristic, and palmitic acid displayed high killing activity against GC in concentrations ranging between 100 μM and 25 μM, whereas the antimicrobial effect of oleic and butyric acids was present in concentrations between 1 mM and 0.25 mM. Modifications induced by fatty acids on the GC cell included the disorganization of the cytoplasmic structure, the distortion of pili/fimbriae, and the separation of the inner and outer membrane layers. For concentrations active against GC, fatty acids were not toxic for cervical cells. Our data can help in promoting innovative antibiotic-free compounds for the treatment of GC infections.

Introduzione. Le faringiti da Neisseria gonorrhoeae sono in aumento tra gli omosessuali maschi (MSM). Queste infezioni decorrono generalmente in maniera asintomatica e possono fungere da serbatoio per la diffusione di casi di gonorrea, dal momento che spesso sono asintomatiche e possono persistere nel tempo. Inoltre, per capire l’importanza di tali quadri, è importante sottolineare come a livello faringeo ci siano varie neisserie commensali, che possono trasferire geni di resistenza alle cefalosporine a N. gonorrhoeae. Lo scopo di questo studio è stato quello di valutare i profili della comunità batterica del microbioma faringeo in corso di infezione da gonorrea, in soggetti MSM. Materiali e metodi. Sono stati analizzati 70 tamponi faringei provenienti da pazienti afferenti all’ambulatorio MTS del Policlinico S. Orsola Malpighi di Bologna. Sulla base delle indagini molecolari ottenute mediante una Real-Time PCR (VERSANT® CT/GC 1.0 Assay, Siemens), attualmente utilizzata nella routine diagnostica della U.O. di Microbiologia, i pazienti sono stati divisi in due gruppi: soggetti non infetti (n=45) and pazienti con gonorrea faringea (n=25). Partendo dal DNA genomico estratto, sono state amplificate e sequenziate le regioni V3-V4 del gene 16S, per analizzare la composizione del microbioma faringeo (MiSeq Illumina). Per valutare la distribuzione e la bio-diversità dei microrganismi sono state eseguite valutazioni di α- e β-diversità. Le differenze di abbondanza tassonomica tra i gruppi in studio sono state analizzate mediante il Mann-Whitney t-test. Un p-values < 0.05 è stato considerato significativo. Lo studio ha ricevuto parere favorevole da parte del comitato etico del Policlinico (78/2017/U/Tess). Risultati. L’analisi di α-diversità non ha evidenziato differenze significative nei soggetti infetti. Seppure il microbioma faringeo di tutti i soggetti fosse dominato dalle famiglie Prevotellaceae, Veillonellaceae e Streptococcaceae, è stato possibile mettere in evidenza una differenza significativa nell’abbondanza relativa di batteri anaerobi, più elevata in soggetti con gonorrea. Il loro microbioma, infatti, era più ricco in batteri dei generi Treponema, Parvimonas, Peptococcus e della famiglia Prevotellaceae, con una contemporanea riduzione di generi aerobi come Pseudomonas and Escherichia. Conclusioni. Il nostro studio è il primo a far luce sulla composizione del microbioma faringeo in corso di gonorrea. I dati ottenuti, sebbene preliminari, possono contribuire a comprendere la patogenesi delle infezioni faringee da gonorrea e a sviluppare strategie innovative per limitare la loro diffusione.

Introduzione. Le infezioni faringee da Neisseria gonorrhoeae sono alquanto frequenti tra i soggetti omosessuali (MSM). Questo dato è di particolare rilevanza, dal momento che l’oro-faringe rappresenta un sito cruciale per l’emergenza di resistenze multiple in N. gonorrhoeae. Infatti, è stato riportato che la struttura a mosaico penA, osservata in alcuni isolati di gonococco e associata a una ridotta suscettibilità e resistenza alle cefalosporine a spettro esteso, è dovuta alla ricombinazione con geni penA, ritrovabili in ceppi di N. meningitidis o specie di Neisseria commensali dell’oro-faringe. Nel nostro lavoro abbiamo voluto investigare la prevalenza della struttura mosaico del gene penA nell’oro-faringe di MSM, negativi per infezioni faringee da gonorrea. Materiali e metodi. Da Gennaio 2016 a Giugno 2018, sono stati arruolati 351 pazienti afferenti l’ambulatorio MTS del policlinico S. Orsola-Malpighi di Bologna, che riportavano rapporti orali non protetti e negativi per N. gonorrhoeae a livello faringeo. I tamponi faringei sono stati analizzati tramite una multiplex Real-Time PCR (Versant CT / GC DNA 1.0 Assay, Siemens), che rileva, simultaneamente, la presenza del genoma di N. gonorrhoeae e C. trachomatis. A partire dal DNA estratto dei campioni negativi, è stata seguita una Real-Time PCR per la rilevazione del mosaico penA. Per confermare la presenza della struttura mosaico, gli amplificati sono stati sequenziati e gli elettroferogrammi ottenuti sono stati analizzati tramite BLAST (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi). Per valutare le differenze statisticamente significative è stato utilizzato il t-test per confrontare i dati quantitativi, mentre i dati categorici sono stati analizzati con il test Chi-quadro. Un valore di P

Additional file 1: Fig. S1. Effect of biosurfactant (BS) from L. crispatus BC1 on murine vaginal cytology, histology and microbiota. Photographs of (a) May Grunwald–Giemsa-stained vaginal smears and (b) Hematoxylin–Eosin-stained vaginal slides from BALB/c mice intravaginally (i.va.) inoculated with 20 µL of saline (control mice) or 20 µL of biosurfactant from L. crispatus BC1 (BS, 1.25 mg/mL) (BS-treated mice), for 7 or 14 days. Results are representative of two independent experiments. (c) Viable cells of lactic acid bacteria, enterococci, staphylococci and enterobacteria from murine vaginal washings (v.w.) of the two experimental groups (BS and control) at days 0, 7 and 14 post-BS inoculation. The data are plotted as the mean values of viable cell numbers (Log CFU/mL) ± standard error.

Supplemental material, STD889265 Supplemental material for Mosaic structure of the penA gene in the oropharynx of men who have sex with men negative for gonorrhoea by Antonella Marangoni, Giacomo Marziali, Melissa Salvo, Antonietta D’Antuono, Valeria Gaspari, Claudio Foschi and Maria Carla Re in International Journal of STD & AIDS