Search

[ES] Las dolencias de rodilla por el envejecimiento de la población y el descenso de la población activa en vista a 30 años, hace necesario optimizar las terapias y el tiempo dedicado a cada paciente. La robótica hace posible conseguir este objetivo junto con el desarrollo de un modelo que sea capaz de monitorizar las fuerzas y los ejercicios de rehabilitación que tiene que hacer el paciente, adaptándolos a cada caso en particular. Antes de usarlo en pacientes reales, es necesario probar y validar su eficacia para asegurar la seguridad, efectividad y funcionamiento. Mediante la comparación experimental del modelo con la electromiografía, es posible registrar la activación muscular y compararla con el modelo musculoesquelético. Los resultados de la experiencia servirán de precedente para mejorar los puntos débiles y comprobar el funcionamiento del modelo y, perfeccionándolo, proceder a la validación para el uso con pacientes reales, [EN] Knee ailments due to the ageing of the population and the decrease in the active population over the next 30 years, make it necessary to optimise therapies and the time dedicated to each patient. Robotics makes it possible to achieve this goal together with the development of a model that is able to monitor the forces and rehabilitation exercises that the patient has to do, adapting them to each particular case. Before using it on real patients, it is necessary to test and validate its efficacy to ensure safety, effectiveness and performance. By experimentally comparing the model with electromyography, muscular activation can be recorded and compared with the musculoskeletal model. The results of the experience will serve as a precedent to improve the weak points and check the performance of the model and, by refining it, proceed to validation for use with real patients, [CA] Les molèsties de genoll per l'envelliment de la població i el descens de la població activa en vista a 30 anys, fa necessari optimitzar les teràpies i el temps dedicat a cadascun dels pacients. La robòtica fa possible aconseguir aquest objectiu junt amb el desenvolupament d'un model que siga capaç de monitorar les forces i els exercicis de rehabilitació que ha de fer el pacient, adaptant-los a cada cas en particular. Abans d'usar-lo en pacients reals, és necessari provar i validar la seua eficàcia per a assegurar la seguretat, efectivitat i funcionament. Mitjançant la comparació experimental de model amb l'electromiografia, és possible registrar l'activació muscular i comparar-la amb el model muscul·lesquelètic. Els resultats de l'experiència serviran de precedent per a millorar els punts dèbils i comprovar el funcionament del model i, perfeccionant-lo, precedir a la validació per a l'ús en pacients reals

Background: The popliteus muscle attaches posteriorly to the joint capsule of the knee. Although it is an important rotational stabiliser and has been implicated in vari-ous knee pathologies, research on its treatment with dry needling is scarce.Objective: To determine if a needle accurately and safely penetrates the popliteus muscle during the clinical application of dry needling.Methods: A cadaveric descriptive study was conducted. Needling insertion of the popliteus muscle was conducted in 11 cryopreserved cadavers with a 50- mm needle. The needle was inserted at upper third of the posterior part of the tibia closest to the knee towards the popliteus. The needle was advanced into the muscle based upon clinician judgement. Cross-sectional anatomical dissections were photographed and analysed by photometry. Safety of the intervention was assessed by calculating the distance from the tip of the needle to the proximate neurovascular structures.Results: Accurate needle penetration of the popliteus muscle was observed in 10 out of 11 (91%) of the cadavers (mean needle penetration: 25.7 ± 6.7mm, 95% CI 21.3- 30.3 mm). The distances from the tip of the needle were 17±6mm (95% CI 13-21 mm) to the tibial nerve and 15 ± 0.7mm (95% CI 10-20 mm) to the popliteus vascular bundle.Conclusion: The results from this cadaveric study support the notion that needling of the popliteus can be accurately and safely conducted by an experienced clini-cian. Future studies investigating the clinical effectiveness of these interventions are needed.

La Fibrosis Quística (FQ) es la enfermedad hereditaria autosómica recesiva grave más frecuente en la raza blanca. Es causada por la mutación de un gen localizado en el brazo largo del cromosoma 7, que codifica una proteína reguladora de la conductancia transmembrana de la FQ (RTFQ o CFTR por su acrónimo en inglés), cuya función es actuar como canal del ion cloruro en la superficie de las células epiteliales. Se han descrito más de 2000 mutaciones diferentes del gen CFTR hasta la fecha. La eficacia en el tratamiento de estos pacientes, aplicando protocolos estandarizados, ha conseguido mejorar su pronóstico y sus expectativas de vida. Sin embargo, uno de los problemas que presentan es la intolerancia al ejercicio, que condiciona su posible incorporación a una vida laboral y/o universitaria y determina en gran medida su calidad de vida. Son varios los mecanismos que han sido implicados como causas de esta disminución de su capacidad de esfuerzo, con evidencias de una alteración en la capacidad oxidativa del músculo esquelético de estos pacientes. La mayoría de los estudios realizados son en población infantil, lo que puede limitar los resultados, ya que en esa población se encuentran los genotipos más graves y el tiempo de evolución es muy limitado. La importancia de la realización de estudios en poblaciones de adultos estriba en poder disponer de tiempos mayores de evolución de la enfermedad y en la posibilidad de estudiar pacientes con genotipo formado por mutaciones más leves, que suelen acompañarse de un fenotipo pulmonar menos grave y por ello son diagnosticados en la edad adulta.Con el objetivo de mejorar los conocimientos sobre la causa de la disminución de la capacidad de esfuerzo en los pacientes con FQ, se diseñó un estudio prospectivo, observacional, transversal y comparativo, en el que se incluyeron 44 pacientes adultos afectos de FQ. Se hizo una evaluación funcional, histológica y del sistema oxidativo de su músculo esquelético, mediante la realización de ergometría respiratoria, electromiografía (EMG), examen neuromuscular y biopsia muscular. Los resultados obtenidos confirmaron la existencia de una disminución de la capacidad de esfuerzo en la mayoría de los pacientes adultos con FQ. En un elevado porcentaje de estos pacientes, independientemente del genotipo y de su función pulmonar, el patrón ergométrico que se observó fue compatible con una miopatía leve, a pesar de tener un examen neuromuscular y una EMG normales. Las biopsias musculares no revelaron hallazgos indicativos de una disfunción mitocondrial. No se objetivaron diferencias significativas ni en el tipo ni en el grado de las alteraciones del músculo esquelético en función del genotipo. En conclusión, nuestro estudio confirmó la intolerancia al ejercicio que presentan los pacientes con FQ, objetivándose un patrón ergométrico compatible con miopatía leve. Sin embargo, no se confirmó la existencia de una alteración de la capacidad oxidativa del músculo esquelético; tan solo, cambios histológicos leves e inespecíficos. Son necesarios más estudios a nivel celular para descartar la existencia de una disfunción mitocondrial en los pacientes con FQ., Cystic Fibrosis (CF) is the most common autosomal recessive hereditary disease in the white race. It is caused by the mutation of a gene located on the long arm of chromosome 7, which encodes a cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) protein whose function is to act as a chloride ion channel on the surface of epithelial cells. More than 2000 different mutations of the CFTR gene have been described to date. The efficacy in the treatment of these patients, applying standardized protocols, has managed to improve their prognosis and their life expectancy. However, one of the problems they present is the intolerance to exercise, which conditions their possible incorporation into a work and / or university life and determines their quality of life. Several mechanisms have been implicated as causes of this decrease in the exercise capacity, with evidence of an alteration in the oxidative capacity of the skeletal muscle of these patients. The majority of the studies carried out are in the infant population, which may limit the results since in this population the most serious genotypes are found and the evolution time is very limited. The importance of conducting studies in adult populations is to be able to have longer times of evolution of the disease and in the possibility of studying patients with genotype formed by milder mutations, which are usually accompanied by a less severe pulmonary phenotype.A prospective, observational, cross-sectional, and comparative study was designed with the aim of improving knowledge about the cause of decreased exercise capacity in patients with CF, including 44 adult patients with CF. A functional, histological and oxidative evaluation of his skeletal muscle was carried out by performing respiratory ergometry, electromyography (EMG), neuromuscular examination and muscular biopsy. The obtained results confirmed the existence of an exercise intolerance in the majority of the adult patients with CF. In a high percentage of these patients, irrespective of genotype and lung function, the ergometric pattern observed was consistent with mild myopathy, despite having normal neuromuscular examination and EMG. Muscle biopsies did not reveal findings indicative of mitochondrial dysfunction. There were no significant differences in the type or degree of skeletal muscle alterations as a function of genotype. In conclusion, our study confirmed exercise intolerance in CF patients, with an ergometric pattern compatible with mild myopathy. However, the existence of an alteration in the oxidative capacity of skeletal muscle was not confirmed; only mild and nonspecific histological changes were found. More studies are needed at the cellular level to rule out the existence of mitochondrial dysfunction in CF patients.

Introducción: El envejecimiento es uno de los mayores retos de salud a los que nos enfrentamos. Fragilidad y sarcopenia son dos conceptos íntimamente relacionados con el envejecimiento y ampliar el conocimiento sobre ellos permitirá desarrollar estrategias específicas preventivas y terapéuticas para minimizar sus consecuencias a nivel sanitario, económico y social. Los objetivos principales de este estudio fueron determinar las características propias de marcha y equilibrio relacionadas con el estado de fragilidad y determinar las características musculares ecográficas y sonoelastográficas del músculo en individuos frágiles. Material y Método: Se diseñaron dos estudios complementarios observacionales transversales en ancianos robustos, prefrágiles y frágiles aplicando los criterios de fragilidad de Fried. Para el estudio de la marcha y equilibrio se incluyeron 62 individuos. Se analizaron los parámetros temporoespaciales de la marcha utilizando una plataforma de presiones incluida en una cinta sin fin. El equilibrio se valoró mediante posturografía, baropodometría y test clínicos. Para el estudio del músculo por ecografía y sonoelastografía se incluyeron 48 ancianos. Para la validación de la técnica ecográfica, se realizó un estudio de concordancia intra- e inter-observador en una población de 15 jóvenes. Resultados: Los ancianos frágiles presentan un aumento de la fase de apoyo (p, Introduction: Aging is nowadays one of the biggest challenges in terms of health. Frailty and sarcopenia are two concepts closely related to aging. Increasing knowledge about them, would allow us to develop specific preventive and therapeutic strategies to minimize the consequences on health, economics and social resources. The main objectives in this study were to determine the gait and balance characteristics related to the frailty state and to determine the sonographic and sonoelastographic features of the muscle in frail subjects. Methods: Two complementary observational studies were designed in robust, prefrail and frail elderly subjects following the Fried Frailty criteria. 62 subjects were included for the gait and balance study. The spatiotemporal parameters of gait were analyzed using posturography, baropodometry and clinical test. For the study of the muscle sonography and sonoelastography, 48 elderly subjects were selected. A study of intra- and inter-observer concordance was conducted in a sample of 15 young volunteers to validate the ultrasound technique. Results: Frail subjects show an increase of the stance phase (p < 0,05) and of the double support (p=0,004), a decreased swing phase (p

Les mitocòndries generen la major part de l’energia necessària per a la funció cel·lular mitjançant la respiració i la fosforilació oxidativa. Quan els mioblasts diferencien a miotubs, la biogènesi mitocondrial i l’activitat enzimàtica mitocondrial augmenta. A més, la regeneració muscular també està acompanyada d’un augment en l’activitat enzimàtica mitocondrial. I la dinàmica mitocondrial és essencial per mantenir les funcions bioenergètiques mitocondrials. Opa1 i la Mitofusina 1 (Mfn1) són dues proteïnes de fusió mitocondrial involucrades en la dinàmica mitocondrial. Els meus resultats mostren que la pèrdua de funció de Opa1 i Mfn1 redueix dràsticament la diferenciació miogènica en les cèl·lules C2C12. Per una banda, s'observa una gran disminució en l'expressió dels marcadors finals de la diferenciació com la Caveolina 3 o la cadena pesada de miosina (MHC). A més, hi ha una disminució prou marcada en l'expressió de la Miogenina, causada per una disminució en l'activitat de MyoD. En canvi, la pèrdua de funció de mitofusina 2 (Mfn2), una altra proteïna de fusió mitocondrial, no mostra aquests canvis durant el procés de diferenciació. La respiració mitocondrial es veu fortament afectada per deficiència en Opa1 o en Mfn1, de manera que es detecta, un major “leak”, una menor capacitat respiratòria màxima, i una augmentada producció mitocondrial de peròxid d'hidrogen. L'observació que els defectes en la miogènesi estan parcialment normalitzats mitjançant l’ús d’antioxidants en les cèl·lules amb silenciament de Opa1 o Mfn1, indica que la disfunció mitocondrial pot ser important en algunes de les alteracions detectades durant la miogènesi. A més, la deficiència de Opa1 o Mfn1 en múscul esquelètic, provoca un alentiment en la regeneració muscular de ratolins i la repressió total de Opa1 en el múscul esquelètic de ratolí condueix a una miopatia, una reducció en el creixement del múscul i una disminuïda longevitat. En resum, les nostres dades indiquen que Opa1 i Mfn1 regulen miogènesi i que la pèrdua de funció de Opa1 o Mfn1 provoca estrès oxidatiu, que podria ser clau reduint la diferenciació muscular. En resum, he demostrat que Opa1 i Mfn1 regulen la diferenciació de les cèl·lules musculars en cultiu i la regeneració muscular en ratolins. Així mateix, aquestes proteïnes podrien participar en la formació normal del múscul esquelètic., Mitochondria generate most of the energy necessary for cellular function via respiration and oxidative phosphorylation (OXPHOS). When myoblasts differentiate into myotubes, mitochondrial biogenesis is increased. Likewise, muscle regeneration is also accompanied by an increased mitochondrial biogenesis. Mitochondrial dynamics is essential for the maintenance of mitochondrial bioenergetic functions. Optic atrophy 1 (Opa1) and Mitofusin 1 (Mfn1) are two mitochondrial fusion proteins involved in mitochondrial dynamics. Here I show that Opa1 and Mfn1 loss of function impairs myogenic differentiation in C2C12 cells. On the one hand, we detect a reduced expression of late differentiation markers as Caveolin 3 or MHC. In addition, a reduced expression of Myogenin and reduced activity of MyoD is documented. In contrast, Mitofusin 2 (Mfn2) loss of function, another mitochondrial fusion protein, does not show these changes during the differentiation process. We find that mitochondrial respiration is heavily impaired, showing a higher leak, a lower ETS capacity, and increased mitochondrial hydrogen peroxide levels in living Opa1 and Mfn1 knocked-down C2C12 myoblasts. The observation that defects in myogenic differentiation are partly normalized by antioxidants in Opa1 or Mfn1 silenced cells indicates that mitochondrial dysfunction may be relevant in some of the alterations we detected during myogenesis. In addition, upon Opa1 or Mfn1 silencing, muscle regeneration is disrupted in adult mice and Opa1 depletion in skeletal muscle leads to a myopatic condition, reduced growth and reduced lifespan. In summary, our data indicate that Opa1 and Mfn1 regulate myogenesis and that Opa1 or Mfn1 loss-of-function causes oxidative stress, which may be key for dysregulation of muscle differentiation. As conclusion, we propose Opa1 and Mfn1 as potential regulators of muscle cell differentiation, muscle regeneration and muscle formation.

Aquest és un estudi personal altament subjectiu sobre la recerca duta a terme durant els darrers cinquanta anys que documenta els fenòmens i els mecanismes de la plasticitat del teixit muscular esquelètic. Enfocaré el treball des d’una perspectiva històrica i seguiré alguns dels fils que han despertat la meva curiositat i han guiat la meva recerca al llarg de la meva carrera investigadora. Aquest estudi no és ni exhaustiu ni equilibrat. Representa els meus interessos personals i alguns descobriments crucials que han marcat els meus objectius d’investigació. He tingut la sort de dur a terme aquest estudi amb col·laboradors molt creatius que han estat els que han dut a terme la major part d’aquesta investigació. També he tingut la sort de comptar amb dos tutors excepcionals, E. R. Weibel i C. R. Taylor, el quals m’han donat suport durant tot el procés guiant-me i donant-me consells i, inicialment, facilitant-me l’ajuda econòmica necessària. Han fomentat un enfocament global i m’han ensenyat a combinar la recerca funcional i estructural per tal d’assolir una visió integral del rendiment del sistema. Quan les eines moleculars apropiades van passar a estar disponibles a finals dels noranta, aquestes van ajudar a descobrir els mecanismes subjacents de la plasticitat estructural i funcional del múscul prèviament descrita. La idea que el teixit muscular esquelètic actiu és determinant per al benestar físic i per a la salut continuarà impulsant la recerca mecanicista de la plasticitat muscular en el futur.

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a fatal degenerative disorder of locomotor and respiratory muscles, in which myofibers are progressively replaced by non-muscular fibrotic tissue. Here, we show that fibrin/ogen accumulates in dystrophic muscles of DMD patients and of the mdx mouse model of DMD. Genetic loss or pharmacological depletion of fibrin/ogen in mdx mice attenuated muscular dystrophy progression and improved locomotor capacity. More importantly, fibrin/ogen depletion reduced fibrosis in mdx mouse diaphragm. Our data indicate that fibrin/ogen, through induction of IL-1 Ò, drives the synthesis of TGF Ò by mdx macrophages, which in turn, induces collagen production in mdx fibroblasts. Fibrin/ogen-produced TGF Ò further amplifies collagen accumulation through recruitment and activation of pro-fibrotic alternatively activated macrophages. Fibrin/ogen also stimulated collagen synthesis directly in mdx fibroblasts, via Ñv Ò3 integrin engagement. In addition, when analyzing a group of 39 DMD patients, fibrin/ogen accumulation in locomotor muscles was found associated with fibrosis and disease severity. These data unveil a novel role of fibrin/ogen in muscular dystrophy and, importantly, in the replacement of muscle by fibrotic tissue.

La adiponectina es una adipoquina sintetizada exclusivamente en tejido adiposo y cuyos mecanismos de actuación no se conocen todavía con exactitud. Niveles plasmáticos bajos de adiponectina se han correlacionado con la obesidad y con la resistencia a insulina y la hiperinsulinemia, incluso en individuos no obesos. La adiponectina promueve la sensibilidad a insulina y protege de la obesidad y, por tanto, se ha sugerido que podría ser utilizada para mejorar la sensibilidad a insulina en pacientes diabéticos y obesos. El incremento de la oxidación de lípidos en músculo esquelético mediado por la adiponectina se ha considerado como uno de los principales factores que conduce a la mejora en la señalización y la sensibilidad a insulina a nivel sistémico. Estos datos sugerían que la expresión constitutiva de adiponectina en músculo esquelético y sus efectos en este tejido podrían proteger de la resistencia a insulina y la obesidad inducida por una dieta alta en lípidos.En la primera parte del presente estudio, se analizaron los efectos de la expresión de adiponectina en músculo esquelético en la sensibilidad a insulina y la obesidad. Con este fin, se generaron ratones transgénicos que expresaban adiponectina localmente en músculo esquelético. Estos animales se alimentaron con una dieta alta en lípidos. De la misma manera, se expresó adiponectina en músculo esquelético en ratones mediante la utilización de vectores virales. Posteriormente, estos animales también se alimentaron con dieta alta en lípidos para valorar el efecto de la expresión de adiponectina en la sensibilidad a insulina y la obesidad. La adiponectina producida en músculo con ambos métodos no era secretada a circulación, ejerciendo sus efectos exclusivamente en este tejido y no en otros tejidos periféricos como el hígado.Se observó que la adiponectina actuaba a nivel local en el músculo esquelético aumentando la sensibilidad a insulina en condiciones estándar de alimentación a la vez que inducía una mayor predisposición a oxidar ácidos grasos en este tejido. Sin embargo, este efecto de la adiponectina exclusivamente en músculo esquelético no era suficiente para contrarrestar la resistencia a insulina y la obesidad inducidas por la dieta alta en lípidos probablemente a que no ejercía efectos sensibilizadores a la insulina a nivel hepático. La segunda parte del presente estudio se centró en analizar los efectos de la expresión de adiponectina en músculo en un modelo de resistencia primaria a la insulina. En este caso, la resistencia a insulina no era debida a la lipotoxicidad inducida por la ingesta de dieta alta en lípidos sino a un defecto en la señalización de insulina. Para ello, se utilizaron animales genosuprimidos para el gen del Sustrato del Receptor de la Insulina-1 (IRS-1-/-). En primer lugar, los animales IRS-1-/- presentan resistencia severa a insulina y alteración en la tolerancia a la glucosa pero no presentan obesidad. En segundo lugar, este modelo no presenta resistencia a la insulina en hígado, ya que IRS-2 compensa funcionalmente en este tejido la falta de IRS-1. Además, la utilización de este modelo permitió estudiar si los efectos de la adiponectina como sensibilizador de la insulina tenían lugar independientemente de la presencia de IRS-1, el principal sustrato del receptor de la insulina en músculo esquelético. Tras la electrotransferencia del gen de la adiponectina en músculo esquelético de ratones IRS-1-/- se observó que la expresión de adiponectina mejoraba la sensibilidad a insulina. Ello era debido a una normalización en el músculo del metabolismo de la glucosa y no a un aumento en la oxidación de ácidos grasos en estos animales., Adiponectin is an adipoquine produced exclusively in adipose tissue whose mechanisms of action are not well described. Low serum levels of adiponectin are correlated with obesity, and with insulin resistance and hiperinsulinemia even in non-obese subjects. Adiponectin induces insulin sensitivity and protects from obesity. For these reasons, it has been suggested that adiponectin could be used to improve insulin sensitivity in diabetic and obese patients. The increase in lipid oxidation in skeletal muscle mediated by adiponectin has been postulated as one of the most important factors that lead to the general amelioration of insulin signalling and insulin sensitivity. These facts suggested that constitutive expression of adiponectin in skeletal muscle and its effects in this tissue could protect from insulin resistance and high-fat diet induced obesity.In the first part of the present study, the effects of adiponectin expression in skeletal muscle on insulin sensitivity and obesity were analyzed. To this end, transgenic mice expressing adiponectin in skeletal muscle were generated. These mice were fed with high-fat diet. Also, viral vectors were used to express adiponectin in skeletal muscle of mice. After, to evaluate the effect of adiponectin expression on insulin sensitivity and obesity, these mice were also fed with high-fat diet. The adiponectin produced in muscle with both methods was not secreted to circulation, exerting its effects exclusively in this tissue and not in other peripheral tissues as the liver.An increase in insulin sensitivity in parallel with a greater susceptibility to oxidize fatty acid in skeletal muscle was observed due to local adiponectin action in skeletal muscle of mice fed with standard diet. However, this effect of adiponectin exclusively in skeletal muscle was not enough to counteract the insulin resistance and the obesity induced by a high-fat diet, probably due to the lack of insulin sensitizing effects in liver. The second part of the present study was focused in the analysis of the effects of adiponectin expression in skeletal muscle in a model of primary insulin resistance. The model used was Insulin Receptor Substrate-1 knock-out mice (IRS-1-/-). In these animals, the insulin resistance is not due to the lipotoxicity induced by the high-fat diet but to a defect in insulin signaling. In first place, these mice show severe insulin resistance and impaired tolerance to glucose but are not obese. Second, this model does not show insulin resistance in liver since IRS-2 compensates functionally the absence of IRS-1. In addition, this model allowed to study whether adiponectin insulin sensitizing effects take place independently of IRS-1, the main substrate of insulin receptor in skeletal muscle.After the electrotransference of adiponectin gene in skeletal muscle from IRS-1-/- an amelioration in insulin sensitivity was observed. This was due to a normalization in muscle of glucose metabolism and not to an increase in lipid oxidation in these mice.

S'ha abordat l'estudi genètico-molecular d'una extensa família espanyola afectada per una nova forma de distròfia muscular de maluc (Limb-girdle muscle dystrophy, LGMD) amb herència autosòmica dominant. Un cop definida la clínica de forma detallada s'han comparat les seves característiques amb les de les altres 5 formes autosòmiques dominants prèviament conegudes. Si bé ja alguns dels trets clínics eren diferencials, mitjançant l'anàlisi de lligament a 3 punts (2 marcadors-malaltia) de marcadors polimòrfics lligats a aquestes formes (regions 1q11-q21, 3p25, 5q31, 6q23 i 7q), s'han pogut excloure com a responsables de la malaltia en la família estudiada. Un cop establert que ens trobàvem davant d'una nova forma genèticament diferenciada, s'ha procedit a fer una anàlisi de lligament completa a 2 punts (marcador-malaltia), tot analitzant un ampli grup de marcadors polimòrfics dispersos pels 22 cromosomes autosòmics, comprovant manual i estadísticament la seva segregació respecte el fenotip clínic. Inicialment s'han utilitzat microsatèl.lits marcats amb fluorescència i pel fine mapping s'han utilitzat microsatèl.lits adicionals marcats radiactivament, havent-se inclós en aquesta darrera part fins a 55 d'individus del pedigrí, 27 afectes i 28 sans. Com a resultat, s'ha pogut trobar el locus de la malaltia al braç llarg del cromosoma 7, concretament a la regió 7q31-q32. Mitjançant l'estudi de marcadors adicionals i considerant la valuosa informació del 4 individus recombinants trobats en diferents parts del pedigrí, s'ha pogut establir una regió candidata d'unes 3,7 megabases, entre els marcadors D7S680 i D7S2544, dins els mapes del consorci humà i en la qual s'han identificat una sèrie de gens candidats i de expressed sequence tags (EST). El continu avenç en el projecte Genoma Humà ha suposat un gran ajut a l'hora de situar i escollir marcadors i gens dins el cromosoma 7.S'ha estudiat a fons un dels gens candidats, la Filamina C, proteïna que lliga actina. S'ha pogut excloure la Filamina C com a gen responsable de la nostra nova forma de LGMD després de no trobar-se cap mutació present en tots els individus afectes en co-segregació amb la malaltia ni cap alteració en el nivell d'expressió a nivell de mARN (àcid ribonucleic missatger).Podem concloure que ens trobem davant una nova forma d'LGMD autosòmica dominant genèticament diferenciada que caldria anomenar LGMD1F, segons la nomenclatura de l'OMIM (On-line Mendelian Inheritance in Man database)., It has been performed the genetic and molecular analysis of a large Spanish family affected by a new limb-girdle muscle dystrophy form (LGMD) with an autosomal dominant inheritance trait. Once described the clinical features of the disease we compared them with the 5 other autosomal dominant LGMD previously described. Aditionally to some clinical specific and differential traits, 3-point linkage analysis (2 markers and disease) with linked markers to this forms (regions 1q11-q21, 3p25, 5q31, 6q23 and 7q) excluded them as responsible for the disease in our pedigree. Once stablished that we had a new genetically distinguished form, we performed a genomic wide 2-point linkage analysis (marker-disease), by the use of many polymorphic markers spread all over the 22 autosomal chromosomes, checking manually and statistically its segregation with respect to the clinical phenotype. We first performed the analysis with fluorescently labeled markers and then, for the fine mapping, we used aditional 32P labeled markers, including in this part up to 55 members of the pedigree, being 27 of them affected and 28 unaffected. As a result, we could find the locus of the disease in the long arm of chromosome 7, specifically to region 7q31-q32. By the use of aditional markers and analysing the 4 informative recombinant individuals found in different parts of the pedigree it was possible to stablish a candidate region that spans 3.7 megabases, between markers D7S680 and D7S2544, following the available human physical and genetic maps. We have identified some candidate genes and expressed sequence tags (EST) in this interval. The continuous improvement in the Human Genome Project has become a great help at the time of placing and choosing markers and genes in Chromosome 7. One of the candidate genes, Filamin C, an actin-binding protein, has been extensively studied. We were able to exclude Filamin C as the gene responsible for the disease in our LGMD pedigree after the analysis of the whole coding sequence and not finding any pathological mutation in all affected individuals co-segregating with the disease and after checking the expression levels at the mRNA level in affected individuals in comparison with unaffected individuals, not being significatively different. We can conclude that this is a new autosomal dominant LGMD form, genetically distinguished that we could name LGMD1F, following the OMIM nomenclature (On-line Mendelian Inheritance in Man Database).

Resultats anteriors mostraven que rates amb obesitat nutricional ("dieta de cafeteria") tenien un perfil metabòlic d'estalvi de nitrogen, mentre que pel model d'obesitat genètica (Zucker (fa/fa)) es suggeria un malbaratament de nitrogen. Es mostra una reducció en la taxa de recanvi d'alanina per l'animal sencer en el model d'obesitat nutricional, i un increment en el model d'obesitat genètica. La fracció anabòlica de la taxa és la responsable d'aquestes alteracions, suggerint perturbacions en el metabolisme de proteïnes. S'estudiaren músculs individuals, escollits per a assolir un rang ampli de perfils fibril•lars. L'obesitat genètica causa una reducció del contingut en proteïna, principalment en els músculs lents i oxidatius, la qual cosa correlaciona amb un increment en l'activitat µ-calpaïna, congruent amb una taxa de degradació de proteïnes incrementada Per contra, a l'obesitat nutricional, s'observa un increment en el contingut de proteïnes, fonamentalment en els músculs ràpids i glicolítics que no es va poder associar a variacions en l'activitat del sistema calpaïna, congruent amb una taxa de síntesi de proteïnes incrementada