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SPIRIT checklist. (DOC 122 kb)

p. 559-563 Submitted by Santiago Fabio (fabio.ssantiago@hotmail.com) on 2013-06-12T17:45:26Z No. of bitstreams: 1 222222.pdf: 223649 bytes, checksum: 1af035c56530a8393d09b4d0dc3c8338 (MD5) Made available in DSpace on 2013-06-12T17:45:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 222222.pdf: 223649 bytes, checksum: 1af035c56530a8393d09b4d0dc3c8338 (MD5) Previous issue date: 2013 Six phenolic compounds were separated and determined by capillary zone electrophoresis in red wine from Brazil’s region Vale do Sa˜o Francisco with total analysis time of 12 min. The limit of detections varied from 1.59 to 2.24 mg L-1. The relative standard deviations (for n = 6) varied from 0.28 to 3.50 %. The red wine samples analyzed were bought in the local market and the phenolic compound recoveries were in the range of 98–101 %. The concentrations of gallic acid in the samples of wines varied from 16.0 to 42.0 mg L-1, caffeic acid (3.16–5.18 mg L-1), syringic acid (5.73–13.0 mg L-1), kaempferol (2.32–4.33 mg L-1), quercetin (1.68–4.03 mg L-1), myricetin (7.52–25.1 mg L-1). The concentrations found agree with data reported in the literature. Salvador

Made available in DSpace on 2022-04-29T07:12:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-27 Dibucaine (DBC), used mainly in topical formulations, is one of the most potent long-acting local anesthetics, but is also one of the more toxic. Recently, solid lipid nanoparticles and nanostructured lipid carriers have been attracting attention as promising drug delivery carriers. This study develops and validates an analytical HPLC method for quantifying the local anesthetic DBC associated to lipidic structures. Average sizes, polydispersion, surface charge and DBC encapsulation efficiency were analyzed. The DBC quantification was performed by using C18-reversed-phase column, a mobile phase with acetonitrile: triethylamine phosphate buffer and UV detection. The results show that the analytical methodology is accurate, reproducible and robust; the method was linear in the concentration range 1.5-30 μg/mL with a high correlation coefficient (r = 0.999).The nanoparticles presented mean diameters around 200 nm and high encapsulation efficiency for DBC (over 70% for SLN and NLC samples). This methodology can be useful for quantifying DBC in different nanostructured carriers. Department of Biochemistry State University of Campinas (UNICAMP), Rua Monteiro Lobato, no 255, 13083-862, Campinas, SP Institute of Chemistry University of São Paulo, 05513-970, São Paulo, SP Universidade de São Paulo, SP Department of Environmental Engineering São Paulo State University (UNESP), Avenida Três de Março 511, CEP 18087-180, Sorocaba, SP Department of Environmental Engineering São Paulo State University (UNESP), Avenida Três de Março 511, CEP 18087-180, Sorocaba, SP

Orientador: Marco Aurélio Zezzi Arruda Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química Resumo: Este trabalho baseou-se no estudo comparativo entre sementes de soja transgênica (T) e não-transgênica (NT) no que diz respeito a suas proteínas e metabólitos em diferentes gerações da planta, pois acredita-se que o gene inserido possa alterar seu perfil em nível molecular, uma vez que seu genoma foi alterado. Para tal avaliação, foi necessário o plantio das sementes de soja em casa de vegetação sob as mesmas condições até a obtenção da terceira geração. Além disso, foram realizadas diversas extrações das proteínas das sementes de soja para posterior separação por eletroforese. Os géis de eletroforese obtidos mostram um perfil bastante semelhante, mostrando que a separação foi adequada, e que existem proteínas diferentes e também diferenciais entre as mesmas. A quantificação relativa das proteínas foi realizada por meio da técnica de 2-D DIGE, revelando um total de 89 proteínas diferenciais com critério de seleção que partiu de p

Orientadores: Alessandra Sussulini, Marcos Nogueira Eberlin Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química Resumo: As substâncias psicoativas, também conhecidas como psicodélicas ou alucinógenas, têm sido estudadas como potenciais terapêuticos no tratamento do uso abusivo de álcool e outras drogas desde os anos 1950. Nos anos 1970, devido ao seu uso recreativo abusivo, estas substâncias foram consideradas também drogas de abuso e as pesquisas nesta área foram abandonadas. Somente nos anos 1990, os estudos com substâncias psicodélicas foram retomados. Existem relatos de sucesso do uso de psicodélicos no tratamento de ansiedade e depressão. Neste contexto, o estudo de substâncias psicodélicas naturais tem recebido um importante destaque, principalmente substâncias de uso tradicional. Um crescente número de estudos indica um grande potencial de uso terapêutico da ayahuasca, uma bebida com propriedades psicoativas preparada a partir da decocção de plantas amazônicas e utilizada, de forma legalizada, nas cerimônias religiosas de grupos sincréticos em todo o Brasil, EUA e Europa. Os principais interesses do uso da bebida estão nos tratamentos de adições em geral (álcool, tabaco e drogas ilícitas como cocaína e heroína), além do seu uso no tratamento de pacientes que apresentam depressão e ansiedade. O uso da ayahuasca como medicamento natural ou fitoterápico está diretamente ligado à ação de seus ativos e sua ligação com a eficiência terapêutica da bebida. Informações sobre a variação dos ativos nos extratos são importantes para auxiliar na produção de um produto padronizado. Neste trabalho, foram realizadas análises de quantificação dos quatro principais princípios ativos da ayahuasca (N,N-dimetiltriptamina, tetraidroarmina, harmina e harmalina) em amostras reais utilizadas em contexto ritual em grupos ayahuasqueiros do Estado de São Paulo e em amostras coletadas na Europa, utilizadas por grupos tradicionais e não tradicionais. Para tanto, um método utilizando cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas sequencial (UHPLC-MS/MS) foi desenvolvido e validado para sua aplicação em amostras de ayahuasca. A partir do método validado, foram analisadas 38 amostras diferentes de ayahuasca provenientes do Estado de São Paulo e 40 amostras de ayahuasca coletadas na Europa e provenientes de países como Estônia e Itália. Além da quantificação dos ativos, foi realizada a avaliação dos perfis das amostras por meio de análises por UHPLC-MS/MS com foco na análise de fingerprinting. Nas amostras coletadas na Europa, além da avaliação dos perfis, foi realizada também uma investigação a fim de confirmar a presença de possíveis contaminantes, tanto sintéticos como naturais, prática comum em alguns grupos ayahuasqueiros não tradicionais, principalmente fora do Brasil. Por meio de análises por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS), espectrometria de massas de alta resolução simples e sequencial (HRMS e HR-MS/MS), foi possível detectar a presença de substâncias sintéticas e naturais em parte das amostras da Europa. Por fim, foi realizado o acompanhamento do preparo real da ayahuasca em duas ocasiões distintas e a cinética de extração, por meio da quantificação dos ativos, foi realizada. Após a análise dos resultados, foram levantados pontos importantes que poderão, no futuro, auxiliar no desenvolvimento de um produto padronizado, otimizando seu preparo e reduzindo os custos de produção, tornando ainda mais viável seu uso terapêutico Abstract: Psychoactive substances, also known as psychedelic or hallucinogenic, have been studied as potentials therapeutics for the treatment of abusive use of alcohol and other drugs since the 1950s. In the 1970s, due to their excessive recreational use, these substances were also considered drugs of abuse and research in this area has been abandoned. It was only in the 1990s that studies with psychedelic substances were recommenced. There have been reports of successful use of psychedelics in the treatment of anxiety and depression. In this context, the study of natural psychedelic substances has received an important emphasis, mainly substances of traditional use, due to its proven safety. A growing number of studies indicate a great potential for therapeutic use of ayahuasca, a psychoactive beverage prepared from the decoction of plants and legally used in religious ceremonies of syncretic groups throughout Brazil, United States and Europe. The main interests in the use of this drink are in treatments of additions in general (alcohol, tobacco and illicit drugs like cocaine and heroin), besides its use in the treatment of patients who present depression and anxiety. The use of ayahuasca as a natural or phytotherapeutic drug is directly linked to the action of its active principles and its connection with the therapeutic efficacy of the beverage. Information on active principles in extracts is important to assist the production of a standardized product. In this work, quantification analyses of the four main ayahuasca actives (N,N-Dimethyltryptamine, Tetrahydroharmine, Harmine and Harmaline) were performed in real samples used in ritual context in groups in Brazil (São Paulo) and in samples collected in Europe, used by traditional and non-traditional groups. For this purpose, a method using ultra high performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/ MS) was developed and validated for its application in extract samples. Using a validated method, 38 different samples of ayahuasca from São Paulo and 40 samples of ayahuasca collected in Europe and countries like Estonia and Italy were analyzed. In addition to the quantification of the actives, the chemical profiles of the samples were evaluated by LC-MS analyses focusing on fingerprinting. In the samples collected in Europe, in addition to the profile evaluation, an investigation was also carried out in order to confirm the presence of possible contaminants, both synthetic and natural, common practice in some non-traditional ayahuasca groups, mainly outside Brazil. Using liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS), simple and sequential high resolution mass spectrometry (HRMS and HR-MS/MS), it was possible to detect the presence of synthetic and natural substances in some of the samples from Europe. Finally, the preparation of ayahuasca was monitored on two different occasions, and the extraction kinetics, through the quantification of the actives, was performed. Analyzing the results, important points were raised that could in the future assist in the development of a standardized product, optimizing its preparation and reducing production costs, making its therapeutic use even more feasible Doutorado Química Orgânica Doutora em Ciências

A pancreatina é um produto biotecnológico que contém um complexo enzimático obtido do pâncreas suíno, constituído principalmente pela amilase, lipase e protease. A literatura ainda apresenta poucos dados relacionados à estabilidade da pancreatina em formulações. Desta forma, foram realizados experimentos relativos à estabilidade usando o medicamento comercial Creon 10.000 e também o padrão de pancreatina puro e suas misturas binárias empregando 6 excipientes na proporção de 1:1 (m/m). Para isso, as amostras foram armazenadas durante 1, 3 e 6 meses em câmara de estabilidade a 40 ± 1°C e 75 ± 5% de umidade relativa e a 40 ± 1ºC na ausência de umidade. Foram realizados ainda testes de estresse em 5 condições (alta temperatura, pH ácido, pH básico, luz ultravioleta e oxidação forçada) para avaliar o efeito destes fatores na atividade das 3 enzimas que compõe o complexo. O resultado da atividade da α-amilase (%) nas amostras secas armazenadas por 1 mês, mostrou que a sacarose e o manitol foram os que apresentaram menor interação com a enzima sendo observado uma atividade de 78,6 ± 0,9 e 68,2 ± 0,6, respectivamente. Já a atividade da protease (%) nas amostras armazenadas nas mesmas condições descritas anteriormente, mostrou que a celulose foi o excipiente de menor interação com a enzima (atividade de 11,0 ± 0,5). Em relação à lipase (%), o estearato de magnésio foi o excipiente de menor interação com esta enzima apresentando uma atividade de 66,0 ± 0,8. Por outro lado, a umidade apresentou-se como um fator de forte influência na perda de atividade da α-amilase e protease, porém a atividade da lipase não foi significativamente afetada (88,8 ± 0,9% na mistura com sacarose). O estudo no biofármaco Creon 10.000, mostrou uma diminuição significativa da atividade da α-amilase (68%), lipase (77%) e protease (58%) nas amostras em pó armazenadas por 3 meses à 40ºC e 0% de umidade relativa. Nos resultados dos testes de estresse foi observado que o pH 9,0 e a luz UV não provocaram alterações significativas na atividade da α-amilase. Por outro lado, a lipase sofreu perdas consideráveis de atividade (inferiores a 32%) em todas as condições avaliadas. Os dados mostraram que características dos excipientes e condições de armazenamento afetam a estabilidade da enzima e, consequentemente, sua atividade. Todas as amostras geradas neste trabalho foram analisadas empregando-se espectrofotometria UV/Vis, que é uma técnica recomendada pelo ICH para avaliação de estabilidade de biofármacos. Pancreatin is a biotechnological product containing an enzyme complex obtained from porcine pancreas, constituted mainly by amylase, lipase and protease that are used for digestive treatment. In literature, a few data related to pancreatin stability in pharmaceutical formulations is available. Thus, experiments were performed concerning the stability of the commercial product "Creon 10,000”, standard pancreatin and its binary mixtures with 6 excipients in the proportion of 1:1 (w/w). In order to accomplish these goals, the samples were subjected to storage during 1, 3 and 6 months using stability camera under two different conditions: at 40 ± 1°C and 75 ± 5% relative humidity and 40 ± 1°C in absence of moisture. Stress testing on 5 conditions (high temperature, acidic pH, alkaline pH, ultraviolet light and forced oxidation) was also performed. In these cases, the consequences in all three enzymes activity were evaluated. α-Amylase activity in samples stored for 1 month in absence of moisture has showed that saccharose and mannitol are the excipients that interact in lower levels with this enzyme (activity of 78.6 ± 0.9% and 68. 2 ± 0.6%, respectively). The protease activity in same condition described previously, has showed cellulose as the excipient that presents minor interaction with this enzyme (activity of 11.0 ± 0.5% was found). Regarding to lipase activity, the magnesium stearate exhibited inferior interaction with this enzyme, once it preserved 66.0 ± 0.8% of activity level. Humidity showed itself as a strong influencing factor in the reduction of α-amylase and protease activities; however, the lipase activity was not significantly affected (88.8 ± 0.9% in the mixture with saccharose). The enzymatic stability study of the biopharmaceutical Creon 10.000 as powdered samples, after 3 months of storage at 40° and 0% relative humidity showed a significant decrease in activity for α-amylase (68%), lipase (77%) and protease (58%). Through the stress testing, it could be observed that pH 9.0 and UV light did not induce great alterations in the α-amylase activities. On the other hand, the lipase suffered considerable activity decrease under all conditions evaluated (less than 32%). The results reveal that the excipients characteristics as well as the storage conditions affect the enzymes stability and consequently their activities. In these works, all samples generated were analysed employing spectrophotometry UV/Vis, which is recommended by the ICH for stability studies of biopharmaceuticals products.