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金沢大学医薬保健研究域薬学系, 漢方生薬 「威霊仙」 はキンポウゲ科のセンニンソウ属植物の地下部に由来する。 近年の生薬市場には多数の原植物に由来する威霊仙が見られるが， 日・中の薬局方では原植物を Clematis hexapetala, C. mandshurica および C. chinensisの 3 種であると規定している。 現在日本， 中国及び韓国市場の威霊仙の原植物を明らかにする目的で， 東アジアに産するセンニンソウ属植物のうち関連する 9 分類群について， 分子生物学的に ITS 領域を検討した。 その結果， ITS 全領域の塩基配列を検討することにより， 9 分類群を区別することができた。 以上の結果から， 現在市場で入手した11サンプルの威霊仙を分子遺伝学的に同定することができた。 すなわち， 日本市場品は 4 サンプルのうち 3 つは C. mandshurica で， 1 つは C. chinensis であった。 中国市場品 4 サンプルのうち 2 つは C. mandshurica で， 他の 2 つは C. brachyura であった。 韓国産 3 サンプルのうち 2 つは C. mandshurica で， 他の 1 つは C. terniflora var. robusta であった。, Clematidis Radix (Wei Ling Xian in Chinese and Ireisen in Japanese) is a crude drug used in traditional Chinese medicine and is derived from the underground parts of Clematis plants, which belong to the family Ranunculaceae. The Clematidis Radix sold in modern markets is derived from a variety of botanical origins, whereas the Chinese and Japanese pharmacopoeias state that Clematidis Radix should be produced from Clematis hexapetala, C. mandshurica, or C. chinensis. To clarify the botanical origin of this crude drug, 9 closely related taxa of the genus Clematis growing in East Asia were subjected to molecular biological studies of their internal transcribed spacer (ITS) regions. We found that the ITS region nucleotide sequences of the 9 taxa had diverged. As a result, the 9 taxa could be successfully differentiated by comparing their whole ITS region sequences. Based on this result, 11 Clematidis Radix samples obtained from modern Japanese, Chinese, and Korean markets were genetically identified as follows: Of the samples from Japanese markets, 3 out of 4 were categorized as C. mandshurica, and one as C. chinensis. Among the samples from Chinese markets, 2 out of 4 were identified as C. mandshurica, and the other two as C. brachyura. Meanwhile, of the 3 samples from Korean markets, two were identified as C. mandshurica, and the other as C. terniflora var. robusta. © 2013, Medical and Pharmaceutical Society for WAKAN-YAKU. All rights reserved.

金沢大学医薬保健研究域薬学系, 日本薬局方ではアカネ科 Uncaria sinensis Havil., U. rhynchophylla Miq. 及び U. macrophylla Wall. の鉤を釣藤鉤として規定している。 釣藤鉤には異なる薬効を示すインドール及びオキシインドールアルカロイドが含まれているが， これらの組成は原植物の違いにより特徴的に異なるとされる。 しかし， Uncaria 属植物のアルカロイド組成に影響を与える要因については報告されていない。 本研究では， 広域で採集した Uncaria 属植物の種を DNA 塩基配列により正確に同定した後に， アルカロイド （rhynchophylline, geissoschizine methyl ether 及び hirsutine） 含量を HPLC 法により測定した。 その結果， 降水量が低い地域に生育する U. rhynchophyllaの鉤及び茎にアルカロイド含量が高い傾向が認められた。 また， 同一種であっても， 栽培品と野生品のアルカロイド組成は異なり， 市場品 「釣藤鉤」 には rhynchophylline 優位のタイプと geissoschizine methyl ether と hirsutine 優位のタイプの 2 種が確認された。 加えて， 釣藤鉤の原植物を正確に同定するために， DNA 塩基配列解析及び PCR-RFLP 法を用いた分子系統学的手法を確立した。, The Japanese Pharmacopoeia states that the crude drug Chotoko is composed of the hooks of Uncaria rhynchophylla Miq., U. sinensis Havil., and U. macrophylla Wall., all of which belong to the Rubiaceae family. It has been reported that the indole and oxindole type alkaloids contained in Chotoko have different pharmacological effects, and Chotoko products derived from different species are composed of different alkaloids. However, there are no reports about the factors affecting the chemical compositions of Uncaria plants. In this study, we analyzed the alkaloid contents (the rhynchophylline, geissoschizine methyl ether, and hirsutine contents) of Uncaria samples collected from a broad range of sites by HPLC after identifying their species by DNA sequence analysis. As a result, we found that the hooks and small stems of U. rhynchophylla grown in habitats with lower annual precipitation levels tended to display higher alkaloid contents. We also found that the alkaloid compositions of cultivated Uncaria plants were different from those of wild plants, even those belonging to the same species, and crude Chotoko products displayed two types of alkaloid profile, the rhynchophylline-rich type and the geissoschizine methyl ether and hirsutine-rich type. Moreover, in order to accurately identify the botanical origin of Chotoko, we established a method involving molecular genetics techniques; i.e., DNA sequence analysis and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). © 2012, Medical and Pharmaceutical Society for WAKAN-YAKU. All rights reserved.