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Orientador: Maro Ran-Ir Sondahl Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Tecidos de 36 cultivares de Phaseolus vulgatis L. foram cultivados in vitro, visando desenvolvimento metodológico para o controle da diferenciação, a fim de permitir a aplicação das técnicas de cultura de célula de tecidos no melhoramento destas espécies. A cultua in vitro de tecidos de Phaseolus vulgaris cv. Moruna foi estabelecida na presença dos sais inorgânicos cv. MS cuplementados com KIN e 2,4-D (1 ¿ 50 'mu¿M) A especificidade de resposta à indução de calos e raízes variou conforme a origem de explante (hipocólito, cotilédone embrião, folha primária ou trifoliolada). Nesta interação, a difernciação de raízes foi inibida em concentrações superiores a 5 'mu¿M de 2,4 ¿ D. Explantes foliares forma os mais favoráveis à indução de calos. Folhas primárias de 'Moruna¿ serviram como fonte de explante par testar diferentes interações de citocinina (KIN, 6 ¿ BA e 2ip = 0 ¿ 75 'mu¿M) e auxina (2,4 ¿D = 0 ¿ 50¿mu¿M; NAA = 0 ¿ 75¿mu¿M; IAA = 0 ¿ 100¿mu¿M)). A interação KIN/2,4 ¿D foi a mais efetiva para a proliferação de calos. Nesta interação não ocorreu diferenciação de raízes e obteve-se calos de cor creme e friáveis. O crescimento comparativo de calos de quatro cultivares de P. vulgaris permitiu uma caracterização genotípica . Calos de folhas trifolioladas, na interação de KIN/2,4 ¿ D, apresentaram melhor especificidade de crescimento em comparação com a utilização de folhas primárias na interação 6-BA/2,4-D ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: Tissues of 36 cultivars of Phaseolus vulgaris L. wee established in vitro aiming toward the development of a protocol for plant differentiation from bean tissues in order to apply the in vitro techniques for the improvement of this species. Callus cultures of Phaseolus vulgaris cv. Moruna were established in the presence of MS medium supplemented with KIN and 2,4-D (1-50 uM). Callus prolifaration differed according with the source of explant (hypocotil, comtyledone, embryo, primary leaf or trifoliolate leaf). Root differentiatiosn was inhibited at levels of 2,4 ¿ D 5¿mu¿M or higher, in the presence of KIN. Leaf cultures were more favorable to callus induction that other sources of explants. Primary leaves of ¿Moruna¿ were inoculated to test different interaction of cytokinin (KIN, 6 ¿ BA and 2ip = 0 ¿ 75¿mu¿M) versus auxin (2,4 ¿ D = 0 ¿ 50¿mu¿M; NAA = 0 ¿ 75¿mu¿M; IAA = 0 ¿ 100 'mu¿M). The interaction of KIN/2,4 ¿ D was the most effective for callus proliferation. In the presence of these growt regulators creamish friable callus developed with the absence of roots. A genotypic characterization among four ¿ cultivars of P. vulgaris were obtained based on callus induction from trifoliolate in the pesence of KIN/2,4 ¿ D. These conditions were superior to discriminate in contrast to callus induction from primary leaves in the presence of 6 ¿ BA /2,4 ¿ D ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations Mestrado Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Anibal Eugenio Vercesi Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Mitocôndrias acop1adas isoladas de folhas brancas de repolho (Brassica oleracea L. varo capitata) apresentaram-se incapazes e captar 'Ca POT. 2+¿ quando energizadas por respiração, em contraste com mitocôndrias isoladas de coleoptiles ou raízes de milho (Zea mays L.) que apresentaram a habilidade de captar 'Ca POT. 2+¿ do meio, embora com uma atividade muito menor do que mitocôndrias de fígado de rato. A curva de velocidade inicial de captação de 'Ca POT. 2+¿ ou ejeção de H+ por mitocôndria de coleoptiles de milho em função da concentração de 'Ca POT. 2+¿ mostrou ser sigmoidal e sugeriu uma estequiometria de 2H+/'Ca POT. 2+¿ como ocorrem em mitocôndrias animais. Na presença de baixas concentrações de 'Ca POT. 2+¿ livre no meio de incubação as mitocôndrias de coleoptiles ou raízes de milho foram capazes de captar o íon atingindo uma concentração de ¿steady state" na faixa de 2 'mu¿M e de manter este equilíbrio por vários minutos. Perturbação deste equilíbrio pela adição de 'Ca POT. 2+¿ ou EGTA foi seguida pela captação ou liberação de 'Ca POT. 2+¿, respectivamente, até que o equilíbrio fosse novamente atingido com a concentração livre de 'Ca POT. 2+¿ extramitocondria1 original. A concentração de 'Ca POT. 2+¿ extramitocondrial na qual o "steady state" era atingido mostrou ser dependente do conteúdo de 'Ca POT. 2+¿ intramitocondrial e da presença de 'Mg POT. 2+¿ no meio de reação. Os resultados indicam que mitocôndrias de coleoptiles ou raízes de milho, assim como mitocôndrias animais, têm a habilidade de tamponar o 'Ca POT. 2+¿ externo e talvez estejam envolvidas na manutenção a homeostase do 'Ca POT. 2+¿ na célula Abstract: Coupled mitochondria isolated from the white leaves of cabbage (Brassica oleracea L. var. capitata) were inactivein respiration-coupled 'Ca POT. 2+¿ accumulation, in contrast to mitochondria isolated from etiolated corn (Zea mays L.) which showed the ability to take up 'Ca POT. 2+¿ from the medium, although with a much lower activity than liver mitochondria. Abstract: The rate of 'Ca POT. 2+¿ uptake or H+ ejection by corn mitochondria plotted versus 'Ca POT. 2+¿ concetration showed a sigmoidal curve and the H+/'Ca POT. 2+¿ ratio was very close to 2.0 as occurs in animal mitochondria. The addition of corn coleoptile or root mitochondria to a medium containing a low free 'Ca POT. 2+¿ concentration resulted in 'Ca POT. 2+¿ uptake with a decrease in free 'Ca POT. 2+¿ concentration until a steady state of about 2.0 'mu¿M was reached and maintained constant for several minutes. Perturbation of this steady state by the addition of 'Ca POT. 2+¿ or EGTA was followed by 'Ca POT. 2+¿ uptake or release, respectively, until the steady state was attained at the original extramitochondrial free 'Ca POT. 2+¿ concentratlon. The steay state free 'Ca POT. 2+¿ concentration was dependent of the intramitochondrial 'Ca POT. 2+¿ content and external 'Mg POT. 2+¿.These results indicate that corn but not cabbage mitochondria, as some animal mitochondria, have the ability to buffer external 'Ca POT. 2+¿ and may be involved in the maintenance of 'Ca POT. 2+¿ homeostasis in the cell Doutorado Doutor em Ciências Biológicas