Search

Polifenoliniai junginiai priklauso biologiškai aktyvių junginių grupei, kurie aptinkami augaluose. Šiuo metu šiems junginiams skiriamas didelis dėmesys dėl jiems būdingų antioksidantinių, antimikrobinių, antikancerogeninių, antiuždegiminių ir kt. savybių. Šių junginių gausu notrelinės (Lamiaceae) šeimos augaluose: pipirmėtėse (Mentha piperita L.) ir faseno katžolėse (Nepeta faassenii L.). Todėl šie augalai gali būti naudojami kaip funkcinis maistas bei kosmetikos pramonėje, pvz., eterinių aliejų gamybai ir t. t. Katžolėse ir pipirmėtėse gausu terpenų, polifenolinių rūgščių ir jų darinių, kurie turi teigiamą fiziologinį poveikį žmogaus organizmui. Šiuo tyrimu buvo siekiama nustatyti polifenolinių junginių ir antioksidacinio aktyvumo kitimą laike priklausomai nuo augalų džiovinimo būdo skirtingais metodais paruoštuose pipirmėčių ir faseno katžolių ekstraktuose. Bendras polifenolinių junginių kiekis ir antioksidacinis aktyvumas nustatytas DPPH● radikalų surišimo metodu. Tyrimu nustatyta, kad bendrajam polifenolinių junginių kiekiui pipirmėtėse ir faseno katžolėse įtakos turi ekstrakcijos metodas ir ekstrakcijai naudojamas tirpiklis, tačiau jų kiekis nepriklauso nuo džiovinimo būdo. Tiriant tirpiklio įtaką džiovintų karščiu pipirmėčių ir faseno katžolių ekstraktams, nustatyta, kad bendras polifenolinių junginių kiekis išekstrahuojamas mažesnis naudojant vandenį nei etanolį, o džiovintose šalčiu – pokytis nereikšmingas. Taikant skirtingus ekstrakcijos metodus, stebima, kad ekstrahuojant ultragarsu išekstrahuojama daugiau polifenolinių junginių nei mechaniniu būdu: džiovintose karščiu faseno katžolėse – 1,2 karto, džiovintose karščiu pipirmėtėse – 1,03 karto, džiovintose šalčiu faseno katžolėse ir pipirmėtėse – 1,1 karto vandeniniuose ekstraktuose. Panaši tendencija stebima ekstrakcijai naudojant etanolį. Atlikus tyrimą, po 8 mėn. nustatyta, kad bendrasis polifenolinių junginių kiekis sumažėjo nepriklausomai nuo džiovinimo būdo. Džiovintose karščiu pipirmėtėse ir faseno katžolėse antioksidacinis aktyvumas yra didesnis (etanoliniuose ekstraktuose), o džiovintose šalčiu – reikšmingo pokyčio nėra lyginant etanolinius ir vandeninius ekstraktus. Taip pat, nustatyta, kad po 8 mėn. antioksidacinis aktyvumas sumažėjo kaip ir bendras polifenolinių junginių kiekis.

Laccases are important and valuable enzymes with a great potential for biotechnological applications. In this study, two novel laccases, LacHU1 and LacHU2, from Alternaria sp. HU have been purified and characterized. The molecular mass of each isoenzyme was ~66 kDa. LacHU1 laccases was yellow and had no typical blue oxidase spectra and LacHU2 had a blue color and characteristic absorption spectra. The catalytic efficiency of LacHU1 for most substrates was higher than that of LacHU2 laccase. Both isoenzymes effectively oxidize flavonoids. Alternaria sp. laccases were successfully immobilized on magnetic nanoparticles. The thermostability of immobilized laccases increased and optimal pH shifted to more alkaline compared to the free laccases. Potential applications of laccases from Alternaria sp. HU are in the oxidation of flavonoids in cotton or in water treatment processes.

Typical laccases have four copper atoms, which form three different copper centers, of which the T1 copper is responsible for the blue color of the enzyme and gives it a characteristic absorbance around 610 nm. Several laccases have unusual spectral properties and are referred to as yellow or white laccases. Only two yellow laccases from the Ascomycota phylum have been described previously, and only one amino acid sequence of those enzymes is available. A yellow laccase Bcl1 from Botrytis cinerea strain 241 has been identified, purified and characterized in this work. The enzyme appears to be a dimer with a molecular mass of 186 kDa. The gene encoding the Bcl1 protein has been cloned, and the sequence analysis shows that the yellow laccase Bcl1 is phylogenetically distinct from other known yellow laccases. In addition, a comparison of amino acid sequences, and 3D modeling shows that the Bcl1 laccase lacks a conservative tyrosine, which is responsible for absorption quenching at 610 nm in another yellow asco-laccase from Sclerotinia sclerotiorum. High thermostability, high salt tolerance, broad substrate specificity, and the ability to decolorize dyes without the mediators suggest that the Bcl1 laccase is a potential enzyme for various industrial applications.