Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária RESUMO - A hepatite crónica em cão é um processo de etiologia variada, podendo considerar-se que muitos aspetos são ainda mal conhecidos. Uma vez que o sucesso da resposta à terapêutica depende da causa, é da maior relevância estudar a fundo a sua etiologia. Uma grande parte dos casos de hepatite crónica é considerada de origem idiopática. No entanto, muitos casos surgem devido a altas concentrações de cobre hepático. O cobre é um mineral essencial, com funções importantes no metabolismo, incluindo na cadeia transportadora de eletrões. Contudo, o seu excesso pode provocar lesões nas células maioritariamente oxidativas, que podem levar a, ou agravar, processos inflamatórios como a hepatite crónica, com eventual evolução para a cirrose. Existem métodos de diagnóstico que permitem saber se a concentração de cobre no fígado é excessiva. Estes métodos são invasivos e podem ser dispendiosos, pelo que raramente são realizados, mesmo quando é efetuada biópsia hepática. Os objetivos deste trabalho foram utilizar a técnica de identificação do cobre em amostras de biópsias hepáticas como ferramenta de diagnóstico; avaliar a importância da presença de cobre nos hepatócitos, correlacioná-la com a existência de doença hepática crónica e contribuir para o estudo da importância do cobre na doença hepática. A metodologia utilizada foi baseada num estudo retrospetivo de casos de hepatite crónica e cirrose, entre 2013 e 2018, com recurso aos arquivos do Laboratório de Anatomia Patológica da Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade de Lisboa e do Laboratório VetPat, em Lisboa. Os casos selecionados foram sujeitos a coloração específica para o cobre com a rodanina, tendo-lhes sido aplicada uma classificação semiquantitativa para a intensidade e distribuição do cobre. Do total de dezanove casos selecionados, foram observadas células positivas para o cobre em treze, de entre os quais se considerou que seis teriam concentrações de cobre consideradas altas (um caso de cirrose e cinco de hepatite crónica). Um destes casos apresentava um padrão centrolobular sugestivo de acumulação primária de cobre. Concluiu-se, assim, que a coloração da rodanina é específica para o cobre, permitindo detetar este metal nas células hepáticas. De facto, foram identificados vários casos positivos à rodanina, apesar de a concentração do metal não ter sido confirmada por métodos quantitativos, o que permitiria validar a classificação semiquantitativa utilizada. A acumulação de cobre nos hepatócitos assumiu os níveis mais elevados nos casos avançados de hepatite crónica, não tendo sido possível determinar o padrão de distribuição na sua quase generalidade. Os estadios avançados de lesão hepática poderão ter contribuído para a redução dos níveis de cobre pela destruição de grande número de hepatócitos, como sucede em casos de cirrose, o que contribui para a dificuldade em reconhecer os padrões de distribuição deste metal. ABSTRACT - Chronic hepatitis in dogs is a process with diverse etiology and it can be considered that many aspects of this pathology are still poorly understood. Since the cause of the disease influences the response to the therapy, it is of the utmost importance to study its etiology. A high percentage of chronic hepatitis cases are considered to be of idiopathic origin. However, several of these cases may be caused, or may involve, high copper concentration in the liver. Copper is an essential nutrient with significant roles in the metabolism, including in the electron transport chain. Nevertheless, copper excess can cause cell lesion, mostly due to oxidative damage, which can lead to, or aggravate, inflammatory processes such as chronic hepatitis, eventually leading to cirrhosis. Diagnosis of excessive hepatic copper is possible, although methods to determine this are invasive and may be expensive, which may explain why they are rarely done. Even when a liver biopsy is collected, specific detection of copper is rarely requested. The goals of this study were to use copper identification techniques in liver biopsies as a diagnostic tool, to assess the importance of copper presence in hepatocytes, to establish a correlation between copper levels and the presence of chronic hepatic disease, therefore contributing to the study of the importance of copper in hepatic pathology. The methodology was based in a retrospective study of cases of chronic hepatitis and cirrhosis, diagnosed between 2013 and 2018, retrieved from the archives of the Laboratório de Anatomia Patológica of Faculty of Veterinary Medicine Faculty, University of Lisbon and from VetPat Laboratory, in Lisbon. Specific copper staining, with rhodanine, was used in the samples selected to which a semiquantitative classification for copper intensity and distribution was applied. From a total of nineteen selected cases, thirteen had copper positive cells, and among these, six were considered to have high copper levels (one case of cirrhosis and five of chronic hepatitis). One of these cases had a centrilobular pattern of copper distribution, suggestive of primary copper accumulation. In conclusion, rhodanine staining is copper specific, allowing for the detection of copper in hepatic cells; several positive cases were identified through this staining technique, although copper concentration was not quantitatively validated. Copper levels were highest in advanced cases of chronic hepatitis. With one exception, the pattern of copper distribution was not possible to determine. Advanced stages of the disease may have contributed to the destruction of a large number of hepatocytes, as it happens in cirrhosis, turning impossible the recognition of copper distribution patterns. N/A